全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 29(4)：548—551 2009年 7月
高效液相色谱法测定马蹄香中马兜铃酸 A含量
赵 桦，江 海
(陕西理工学院 陕西省资源生物重点实验室 ，陕西 汉中 723000)
摘 要：用高效液相分析方法 ，测定了马蹄香植物体不同部位中马兜铃酸 A的含量。结果表明，马兜铃酸 A
主要存在于马蹄香的地下根及根茎部分，地上茎中含量极少，叶中不含马兜铃酸 A。在根及根茎 中马兜铃酸
A的含量为 0．165 ～0．198 ，茎中含量为 0．012 ～0．023％。与马兜铃科其他植物 比较 ，马蹄香植物体中
马兜铃酸 A的含量较高。
关键词：马蹄香 ；马兜铃酸 A；HPLC
中图分类号：Q946．8 文献标识码 ：A 文章编号：1000—3142(2009)04-0548-04
1— ● J● n ● J ■ l ● ● 1 ▲ ● pete舢 natl0n 0tanSt0l0CnlC aClcIA ln
Saruma henryi by HPLC
ZHAO Hua，JIANG Hai
(Shaanxi University of Technology，Bio-Resources Key Laboratory of Shaanxi Pro
．
vince，Hanzhong 723000，China)
Abstract：Content of aristolochic acid A from Saruma henryi has been determined by HPLC．The result indicated
that aristolochic acid A mainly exists in the root and the rhizome part of S．henryi．The stem had extremely few aris—
tolochic acid A and there are not aristolochic acid A in the leaf．The content of aristolochic acid A in root and rhizome
is 0．165 ～ O．198 ，and 0．012 ～ 0．023 in the stem．Comparing with other species of Aristololchiaceae，S．
henryi had the higher content of aristolochic acid A．
Key words：Saruma henryi；Aristolochic acid A；HPLC
马蹄香(Saruma henryi)为马兜铃科马蹄香属
植物，是我国特有单种属植物，广泛分布于陕西、四
川、贵州、湖北、江西河南、甘肃等省 (傅立国等，
2000)。马蹄香为多年生草本 ，其干燥的根及根茎在
民间药用，习称马蹄香、冰水丹、高脚细辛、马头细
辛。具有温中散寒，理气 止痛之功效 (江 苏新 医学
院，1986；谢宗万等 ，1996)。
马兜铃酸类化合物主要存在于马兜铃属与细辛
属植物中。早期研究发现马兜铃酸类化合物具有抗
肿瘤活性和增强机体白细胞的吞噬作用(何曙光等，
2006)。随着研究的深入，人们发现临床上大量和长
期服用含马兜铃酸的药物可引起肾衰，被称为“马兜
铃 酸 肾 病 ”(Aristolochis Acid Nephropathy，
AAN)。近年来 ，已有不少 因服用过量含马兜铃酸
A的药物而导致肾衰竭的病例，引起了国内外医学
界的广泛关注(王宁生，2001)。彭强等(2005)曾经
报道过在马蹄香植物体中含有马兜铃酸 A，但有关
马兜铃酸 A在马蹄香植物中的分布及含量变化至
今未见报道。本文采用高效液相色谱分析法，首次
测定了马蹄香植 物的不 同生长部位 ，即根及根茎、
茎、叶中马兜铃酸 A的含量，分析马蹄香植物不 同
生长部位中马兜铃酸 A含量的变化。通过实验研
究，为马蹄香的临床用药提供科学依据，以保证药效
最好而毒效最低。
收稿日期：2008—05—25 修回日期 ：2008—11-18
基金项目：陕西省教育厅专项基金(07JK214)[Supported by the Scientific Research Foundation of Education Department of Shaanxi Province(07JK214)]
作者简介：赵桦(1957一)，男，陕西汉中市人，教授，主要从事药用植物研究，(E-mail)zhaohuahz@shut．edu．cn。
4期 赵桦等 ：高效液相色谱法测定马蹄香中马兜铃酸 A含量 549
1 仪器与材料
Agilent 1100高效液相色谱仪，索氏提取器，
SL202N型电子天平 (上海 明桥精 密科学仪器有 限
公司)，FZ102微型植物粉碎机 (河北 黄骅市 中兴有
限责任公司)，PYX-DHS一35X40型隔水式 电热恒温
培养箱(上海跃进 医疗 器械厂)。马兜铃 酸 A 对照
品购 自中 国药 品生 物 制 品 检定 所 (批 号 110746-
200406)。乙腈为色谱纯 ，甲醇、乙醚等其他试剂 均
为分析纯 ，水为超纯水。
试验用马蹄香材料 于 2004、2005、2006年每年
6月 中旬 ，分别采集于陕西省留坝县和镇 巴县，晾干
备用。
2 实验方法
2．1色谱条件
色谱柱：Hypersil ODS(4．6 mm×100 mm，5
m)；流动相 ：乙腈一5 的冰 醋酸 (60：40)；流速 为
1．0 mL／min；柱温 ：3O℃ ；进样量 ：2O L；监测波长
315 nm。
2．2检测波长的确定
取马兜铃酸 A对照品储备液稀释浓度至0．020
mg／mL，在 200~400 nm 波长范围内扫描 。扫描结
果表明，在390 nm和 315 nm处有最大吸收峰。高
效液相色谱实验结果表明，在 315 nm处干扰弱，灵
敏度高 ，因此选择 315 nm 为检测波长 。
2．3溶液制备
2．3．1对照品溶液制备 精确称取马兜铃酸 A对照
品5 mg，于 25 mL的容量瓶中加甲醇溶解定容，得
200 gg／mL的储备液。
2．3．2供试品溶液的制备 精确称取经 6O℃干燥
的马蹄香植物不同部位(根及根茎、茎、叶)样品粉末
1．00 g，置 100 mL索氏提取器中，加人 100 mL甲
醇溶液在恒温水浴锅提取 5 h，再定容于 100 mL容
量瓶中。由于马蹄香茎 、叶中含有较多叶绿素 ，为了
排除干扰将它们的提取液萃取分离。将提取液回收
至干，再用 15 mL 0．5 NaOH溶液，使其完全溶
解，转至分液漏斗中，调至 pH10，用乙醚萃取 2次，
每次 l5 mL。萃取后的碱液，用 3．6 的硫酸溶液
调至 pH2，用乙醚萃取 4次，每次 l5 mL，合并萃取
液，水浴蒸干，用甲醇定容于 100 mL容量瓶中备用
(刘燕 等，1990；谭睿等，2005)。
3 实验结果
3．1方法学考察
3．1．1线性 关 系考察 分别吸取浓度为 20 t~g／mL
的马兜铃酸 A标准品溶液 5、1O、15、2O、25 L进入
高效液相色谱仪 中进行分析 。以进样量为横坐标 ，
以峰面积为纵坐标 ，绘制标准曲线，得标准曲线回归
方程为 y一28．804X～l_l2，相关系数 r一0．99958，
表明马兜铃酸 A 在 0．1～0．5 g范 围内进样量 和
峰面积值呈现 良好的线性关系。
3．1．2精 密度试验 精密 吸取质量浓度 为 20 g／
mL的马兜铃酸 A的对照品溶液 2O L，注入高效
液相色谱仪中分析，连续进样 5次，马兜铃酸 A峰
面积的RSD值为 1．55 。
3．1．3重现性试验 精密称取马蹄香根及根茎 同一
批号样品 5份，制备供试品溶液，进样 2O L测定，
测得马兜铃酸 A的 RSD值为 1．86 。
3．1．4稳定性试验 取马蹄香根及根茎同一供试品
溶液 ，于 0、2、4、6、8、10、12h进样 20 L测定 ，样 品
在 12 h内稳定。供试 液的峰面积的 RSD值为
1．58 。
3．1．5回收率试验 采用加样回收率法，精密吸取
质量浓度已知的马兜铃酸 A样品及马蹄香根及根
茎供试液，将其等体积混合，然后注入高效液相色谱
仪中分析，重复做 5次，进行回收率测定。结果显
示，平均回收率为 105 9／6，RSD值为 1．81 。
3．2样品含量测定
分别取马蹄香供试样溶液过滤，吸取 2O L注
人高效液相色谱仪分析。根及根茎分别取 3年材料
各 3批、茎和叶分别取 3年材料各 3批的样品进行
测定。结果表明，马兜铃酸 A主要分布于马蹄香植
物的根及根茎部位，地上部位茎中含量较低，而叶中
不含马兜铃酸 A。在根及根茎中马兜铃酸 A的平
均含量为0．184 ，茎中平均含量为 0．018 。检测
数据见 表 1，对 照 品 和供 试 品的 HPLC 图见 图 1
～ 4
4 讨论
通过实验得知，马兜铃酸 A主要存在于马蹄香
植物的根及根茎部位，平均含量为0．184 ，在地上
55O 广 西 植 物 29卷
表 1 马蹄香中马兜铃酸 A的测定结果
Table 1 Content of aristolochic
acid A in Saruma henryi
根及根茎 200401 19．051
根及根茎 200402 18．5l2
根及根茎 200403 18．852
根及根茎 200501 17．446
根及根茎 200502 16．432
根及根茎 200503 15．574
根及根茎 200601 19．950
根及根茎 200602 19．667
根及根茎 200603 19．730
墓 200401
茎 200402
茎 200403
茎 200501
茎 200502
茎 200503
茎 200601
茎 200602
茎 200603
叶 2004
叶 2005
叶 2006
2．156
2．4l9
2．317
1．853
1．685
1．795
1．158
1．143
1．155
0．191
0．185 0．188(2004年 根
及根茎)
0．189
0．175
0．164 0．165(2005年 根
及根茎)
0．156
0．199
0．198 0．198(2006年根
及根茎)
0．197 根 茎 及根茎 平均
值 ：0．184
0．O2Z
0．024 0．023(2004年茎)
0．023
0．O19
0．017 0．018(2005年茎)
0．018
0．012
0．O11 0．012(2006年茎)
0．012 茎平均值 ：0．O18
mAU
60
40
20
0
— 20
图 l 马兜铃酸 A对照品的 HPLC色谱图
Fig．1 HPLC chromatograms of aristolochic acid A
部位茎中含量较低，平均含量为 0．018 9，6，而在叶中
不含马兜铃酸 A。马兜铃酸在马兜铃科植物体内的
分布不尽相同，变化较大。在北马兜铃植物体中马
兜铃酸 A主要分布在的果实中(刘燕等，1990)，在
青木香中马兜铃酸 A主要分布在的地下根部分(李
琳等，2006)，在天仙藤中马兜铃酸 A主要分布在植
物的茎中(刘燕等 ，1990；李琳等 ，2006)。在细心属
的华细辛中马兜铃酸 A主要分布在根及根茎部位，
在地上部位茎中含量较低，而叶中完全不含马兜铃
酸 A(高钧等，2006；谢昭明等，2003；徐玫等，2005；
何曙光等 ，2007)。
mAU
50
40
20
O
一 20
mAU
60
40
2O
J
O
一 20
图 2 马蹄香根及根茎的 HPLC色谱图
Fig．2 HPLC chromatograms of the root
and rhizome of Saturna henryi
O 5 1 O 1 5 20
t／mi n
图 3 马蹄香茎的 HPLC色谱图
Fig．3 HPLC chromatograms of the
stem of Saruma henryi
mAU
60
40
20
O
一 20
t／mi n
图 4 马蹄香叶的HPLC色谱图
Fig．4 HPLC chromatograms of
the leaf of Saruma henryi
4期 赵桦等：高效液相色谱法测定马蹄香中马兜铃酸 A含量 55l
经高效液相测定分析 ，马兜铃酸 A 在马蹄香植
物根在根 中含量为 0．165 ～0．198 ，茎 中含量为
0．012％～0．023 。与文献(刘燕等 ，1990；李琳等 ，
2006；英锡相等，2003；高钧等，2006；何 曙光等，
2007)中记载的马兜铃科 的其它植物 中马兜铃酸 A
含量相比，马蹄香植物体中的马兜铃酸 A含量偏
高，见表 2。
表 2 部分中药材中马兜铃酸 A的含量
Table 2 Contents of aristolochic acid A in
some traditional Chinese medicine
名称 Name 含量
Content(％)
马蹄香 Radix Saruma henryi
马兜铃 Fructus Aristolochiae
青木香 Radix Aristolochiae
天仙藤 Herba Aristolochiae
关木通 Caulis Aristolochia manshuriensis
汉中防己Radix Aristolochiae heterophyla
广防己Radix Aristolochiae
细辛 Herba Asari
O．165～ 0．198
0．045～ O．518
0．0009～ 0．543
0．0026～ 0．4030
0．717～ 4．0106
0．503
0．0068～ 0．4690
0．0007～ 0．179
致谢 陕西理工学院生物科学与工程学院2006
届学生张萍、李勇参加了本研究的部分实验工作，在
此表示感谢 !
参考文献：
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