免费文献传递   相关文献

Determination of Schisandrin B in fruits of Schisandra chinensis with high performance liquid chromagraphy(HPLC)

高效液相色谱法测定五味子乙素含量



全 文 :第 25卷 第 3期             植   物   研   究 2005年 7月Vol.25 No.3            BULLETINOFBOTANICALRESEARCH July,  2005
第一作者简介:裴毅(1971—),男 ,讲师 ,主要从事天然药物化学和药用植物学研究工作。
收稿日期:2004-10-18
高效液相色谱法测定五味子乙素含量
裴 毅 聂江力
(天津农学院园艺系 , 天津 300384)
摘 要 采用高效液相色谱法 ,测定了五味子果实中五味子乙素的含量 ,检测波长为 254nm,标准
曲线线性关系 R2为0.990 7,相对标准偏差为 0.48%,平均加样回收率为 99.14%。结果表明 , 此
方法准确度较高 ,为五味子生药及成品药中五味子乙素含量测定提供了一种切实可行的方法。
关键词 五味子;高效液相色谱法;五味子乙素
DeterminationofSchisandrinBinfruitsofSchisandrachinensis
withhighperformanceliquidchromagraphy(HPLC)
PEIYi NIEJiang-Li
(TianjinAgriculturalcolegeHorticulture, Tianjin 300384)
Abstract ContentofschisandrinBinfruitsofSchisandrachinensiswasdeterminedwithHPLC, thede-
tectivewavelengthwas254 nm, theR2 ofstandardcurvewas0.990 7 andtherelativestandarddevia-
tionwas0.48%withtheaveragerecoveryof99.14%.Theresultshowedthattherateofveracityofthis
methodwashighandthisprovidedthedeterminationofschisandrinBofpharmacognosticandfinished
productsafeasiblemethod.
Keywords Schisandrachinensis;HPLC;schisandrinB
北 五 味 子 (Schisandra chinesis(Turcz.)
bail.),别名五味子 、味子 、药葡萄 、山花椒 ,为木兰
科五味子属多年生落叶木质藤本植物的果实。五
味子始载于 《神农本草经 》具有保肝 、降酶 、保护中
枢神经系统 、抗艾滋病毒 、抗癌等多种药理活性。
随着五味子资源的过度开发 ,五味子资源受到前所
未有的破坏 。如何有效利用有限的五味子资源成
了亟待解决的问题 。本文采用高效液相色谱法
(HPLC)测定了五味子中五味子乙素的含量 ,为合
理开发利用五味子资源提供了质量评价手段 [ 1 ~ 5] 。
1 仪器与材料
1.1 实验仪器
Jasco高效液相色谱仪 ,日本 Jasco公司生产;
AB104型电子天平 ,瑞士生产;恒温水浴锅 ,河北黄
骅生产;HIQ silC18色谱柱 (4.6mm×25cm,
5μm), KYATECHCorporation。
1.2 实验试剂与材料
1.2.1 实验试剂
甲醇(色谱纯)山东禹王实业有限公司 禹城化
工厂生产;四氢呋喃(色谱纯)天津市科密欧科技
有限公司生产;甲醇(分析纯)沈阳市东兴试剂厂
生产;超纯水 ,自制。
1.2.2 实验材料
五味子乙素标准品 ,购于中国药品生物制品检
定所 。五味子购于小兴安岭地区(伊春桃山林业
局)。
2 实验部分
2.1 标准曲线
2.1.1 标准品溶液的制备
精密称取五味子乙素标准品 20 mg, 甲醇溶解
定容于 100mL容量瓶中 ,摇匀 ,使之成为浓度为
0.2mg·mL-1的五味子乙素标准品溶液 , 备
用 [ 6 ~ 10] 。
精密吸取五味子乙素标准溶液 4.0, 5.0, 6.0,
7.0, 8.0 , 9.0 mL分别置于 10 mL容量瓶中 ,加甲醇
定容 。
2.1.2 检测条件
在检测波长为254nm,流动相为甲醇—四氢呋
喃—水(70:4:26),进样量 10 μL,流速 1 mL/min条
件下 ,进行检测 [ 11 ~ 15] ,结果见表 1。
表 1 五味子乙素标准品峰面积值
Table1 PeaksareaofstandardschizandrinB
样品号
No.
浓度(mg· mL-1)
Concentration
峰面积值 Peaksarea
1 2 3
平均值
Average
1 0.08 1 110 646 1 112 057 1 079 852 1 100 852
2 0.10 1 535 205 1 526 026 1 570 463 1 543 898
3 0.12 1 844 152 1 787 906 1 828 698 1 820 252
4 0.14 2 022 526 2 013 796 2 079 852 2 038 725
5 0.16 2 230 191 2 376 272 2 262 871 2 289 778
6 0.18 2 632 118 2 685 897 2 794 301 2 704 105
表 2 加样回收率试验结果
Table2 Resultofrecoveryrateexperiment
样品号
No.
样品中五味子
乙素含量
SchisandrinBof
sample(mg)
五味子乙素加入量
Quantityof
schisandrin
B(mg)
测定量
Quantityof
determination
(mg)
回收率
Recovery(%)
平均回收率
Average
recovery(%)
相对标准偏差
Relativestandard
deviation(%)
1 0.201 5 0.20 0.395 5 96.9
2 0.201 5 0.20 0.399 9 99.2
3 0.201 5 0.40 0.609 8 102.1 99.14 3.82
4 0.201 5 0.40 0.577 9 94.1
5 0.201 5 0.40 0.615 2 103.4
以五味子乙素浓度(mg/mL)为横坐标 X,峰面
积值为纵坐标 Y,进行线性回归 ,得五味子乙素浓
度 —峰面积线性回归方程:Y=1E+07X-
4 290.5,相关系数:R2 =0.990 7 。在该条件下五
味子乙素的线性范围为0.08 ~ 0.18mg/mL。
2.2 重现性试验
在以上 HPLC条件下 ,进样分析五味子乙素标
准品溶液 ,重复分析 5次 ,相对标准偏差为0.48%。
相对标准偏差小 、实验结果重复性较好 ,表明用
HPLC方法分析五味子乙素的定量分析方法准确
可靠。
2.3 样品含量测定
2.3.1 样品的制备
五味子干燥 、粉碎(40 -60目),精密称取 1 g
左右 ,用甲醇以液固比 1:15的比例 ,超声波提取
30 min,提取 3次 ,过滤 ,合并滤液 ,定容于 50 mL容
量瓶中。
2.3.2 样品的测定
在检测波长为254nm,流动相为甲醇—四氢呋
喃—水(70:4:26),进样量 10μL,流速 1mL/min条
件下 ,进行检测 ,测得五味子乙素峰面积值 ,由线性
回归方程计算出五味子中五味子乙素的含量 。
2.4 加样回收率试验
分别精密量取已知五味子乙素浓度的 1.0 mL
提取液 5份 ,分别加入一定量的五味子乙素标准
品 ,按样品含量测定项下的方法进行计算五味子乙
素含量 ,根据回收率公式计算出加样回收率 ,结果
见表 2。
表 2结果表明 ,以五味子乙素标准品为对照
品 ,五味子乙素加样回收率为 99.14%,相对标准偏
差为3.82%,回收率较高 ,偏差较小 ,所以本方法准
确度较高。
374       植  物  研  究                  25卷
3 结语
本文采用高效液相色谱法测定了五味子中五
味子乙素的含量 ,研究结果表明 HPLC法测定五味
子乙素的方法可靠。
参 考 文 献
1.刘玉壶 , 罗献瑞 , 吴容芬.中国植物志.北京:科学出版
社 , 1996, 30(1):82
2.杨晓玲 , 李爱民.五味子研究概况.时珍国医国药 , 1999,
4(10):300 ~ 301
3.周以良.黑龙江树木志.哈尔滨:黑龙江科学技术出版
社 , 1986.238
4.赵敏 , 宋起平 , 何亚庆.北五味子生态特性与栽培技术.
东北林业大学学报 , 2001, 29(3):76 ~ 79
5.聂江力 , 丛沛桐 , 祖元刚 , 等.用人工智能计算技术估测
东北地区北五味子果实资源量.植物研究 , 2003, 23(2):
245~ 251
6.宋万志.五味子科植物的木脂素成分及生物活性与国内
资源.天然产物研究与开发 , 1991, 3(1):68 ~ 80
7.童玉懿 , 黎莲娘.北五味子种子有效成分的含量测定.中
草药通迅 , 1977, 10:8 ~ 11
8.马艳.人工栽培北五味子与野生北五味子的质量对比实
验.中国中药杂志 , 1997, 22(6):336 ~ 337
9.陈道峰 , 翁强.南五味子属药用植物的木脂素含量.中草
药 , 1994, 25(5):197
10.王卫峰 , 金惠敏 , 丁腈.比色法测定南五味子中总木脂
素的含量.西北药学杂志 , 1999, 14(5):197
11.徐礼燊 ,沙世炎 , 等编著.中草药有效成分分析法.北
京:人民卫生出版社 , 1984, 83
12.芦金清 , 何则华.五味子提取工艺的研究.中成药 ,
1998, 20(12):1 ~ 2
13.王卫峰 ,冯改利 , 严志.北五味子中五味子醇甲的 HPLC
法测定.西北药学杂志 , 1999, 14(6):252
14.于超 ,王宇 , 付善全 ,等.高效液相色谱测定五味子及其
制剂中五味子醇甲的含量.基层中药杂志 , 2001, 15(2):
13
15.KuoYH, KuoLY, ChenCF.FournewC19 homoligans,
scharisanrinsA, B, andDandcytotoxicschiarianrinC, from
Schizandraarisanensis.JOrgChem, 1997, 62(10):3242 ~
3245
欢迎订阅 《植物研究 》
  《植物研究》创刊于 1959年 ,由东北林业大学植物研究所主办 ,科学出版社出版 ,国内外公开
发行的植物学综合性学术期刊 。现已成为植物科学研究发表论文的主要学术性刊物之一 ,为中国
自然科学核心期刊;中国科学院文献情报中心 《中国科学引文数据库 》(CSCI)的来源期刊;《中国
学术期刊光盘版 》源期刊 ,并加入了《中国期刊网》和《万方数据库网》。 《植物研究》所发表的新分类
群 ,已被英国皇家植物园出版的《邱园索引》(Indexkewensis)收录 ,在植物学界享有很高声誉 。
  主要刊载的内容:以植物分类学的新物种 、新现象 、新规律为主;同时包括植物的群落生态学 、
生殖生态学 、生理生态学 、分子生态学的基础研究和应用研究等原始性论文和具有创新性论文 。
  主要读者对象:从事植物学研究的科研人员以及相关方面的工作者。
  国内统一刊号:CN23-1480/S,国际标准刊号:ISSN1000-1042 ,国际标准 A4大 16开本 ,铜
版纸 ,季刊 ,每期 128页 。
  定  价:RMB12.00元 ,全年 RMB48.00元 。
  邮发代号:国内邮发代号 14-77。全国各地邮局(所)均可订阅 。错过订期者可直接向本刊
编辑部邮购(加收邮资:平寄 2.00元 /本 ,挂号寄 4.00元 /本),并注明订阅年份 、期
数 、册数。
  国外邮发代号:Q562。
  欢迎广大读者踊跃订阅 ,也欢迎国内外的同行 、专家 、教授 、学者投稿 ,开展学术讨论 ,促进学
术交流 。
  通讯地址:哈尔滨东北林业大学《植物研究》编辑部 ,邮编 150040。
  电 话:0451-82190611     传 真:0451-82102082
  E - mail:duanxihua828@163.com  联 系 人:段喜华
3753期 裴毅等:高效液相色谱法测定五味子乙素含量