全 文 ：杧果炭疽菌拮抗细菌的筛选鉴定及其防病效果
潘朝勃员袁 圆 摇 李其利员 摇 莫贱友员鄢摇 郭堂勋员 摇 黄穗萍员 摇 韦继光圆
渊员援广西农业科学院植物保护研究所袁 广西作物病虫害生物学重点实验室袁
南宁 缘猿园园园苑曰 圆援广西大学农学院袁南宁 缘猿园园园源冤
摘要院 为寻找对杧果炭疽菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 有效的生防菌株袁从瓜叶白粉病病斑上分
离得到 员园源 株细菌袁通过平板对峙培养筛选出 员远 株拮抗细菌袁分别测定其在 愿 种不同培养基中的
抑菌活性袁筛选出有较强抑菌作用的 怨粤尧圆远粤和 源晕菌株进行室内尧果园防病试验袁并对具有较好防
治作用的 怨粤尧圆远粤菌株进行了鉴定遥 结果显示袁拮抗菌 怨粤尧圆远粤 和 源晕 分别在南瓜汁尧红薯汁和马
铃薯汁培养基上的抑菌活性最高袁对杧果炭疽菌菌丝生长抑制率分别为愿愿 援 愿猿豫 尧愿苑 援 愿猿豫和
愿缘援 愿苑豫 曰室内 怨粤尧圆远粤和 源晕菌株菌液处理离体果实袁圆源 澡 后接种炭疽菌分生孢子液袁对杧果炭疽
病的防治效果均达 员园园豫 袁与咪鲜胺对照组相同曰在果园 怨粤 和 圆远粤 的防病效果分别为 怨愿援 源豫和
怨园援 缘豫 袁显著高于对照组的防效 苑愿援 愿豫 袁而 源晕 的防效只有 缘愿援 圆豫 遥 根据形态尧生理生化特征及
员远杂 则阅晕粤 序列分析结果袁将菌株 怨粤和 圆远粤鉴定为枯草芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽遥 研究表明袁菌株
怨粤和 圆远粤具有较好的生防利用价值遥
关键词院 杧果炭疽菌曰 拮抗细菌曰 筛选曰 防病效果
杂糟则藻藻灶蚤灶早袁 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬
葬早葬蚤灶泽贼 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 燥灶 皂葬灶早燥
孕葬灶 在澡葬燥遭燥员袁 圆 摇 蕴蚤 匝蚤造蚤员 摇 酝燥 允蚤葬灶赠燥怎员鄢摇 郧怎燥 栽葬灶早曾怎灶员 摇 匀怎葬灶早 杂怎蚤责蚤灶早员 摇 宰藻蚤 允蚤早怎葬灶早圆
渊员援 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 孕造葬灶贼 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 郧怎葬灶早曾蚤 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 郧怎葬灶早曾蚤 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 月蚤燥造燥早赠 枣燥则
悦则燥责 阅蚤泽藻葬泽藻泽 葬灶凿 陨灶泽藻糟贼 孕藻泽贼泽袁 晕葬灶灶蚤灶早 缘猿园园园苑袁 郧怎葬灶早曾蚤 在澡怎葬灶早 粤怎贼燥灶燥皂燥怎泽 砸藻早蚤燥灶袁 悦澡蚤灶葬曰 圆援 悦燥造造藻早藻 燥枣
粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 郧怎葬灶早曾蚤 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶灶蚤灶早 缘猿园园园源袁 郧怎葬灶早曾蚤 在澡怎葬灶早 粤怎贼燥灶燥皂燥怎泽 砸藻早蚤燥灶袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 泽藻藻噪 皂燥则藻 藻枣枣藻糟贼蚤增藻 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬袁 员园源 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂
贼澡藻 泽责燥贼泽 燥枣 责燥憎凿藻则赠 皂蚤造凿藻憎 燥灶 贼澡藻 造藻葬增藻泽 燥枣 糟怎糟怎则遭蚤贼袁 员远 泽贼则葬蚤灶泽 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 憎藻则藻 泽糟则藻藻灶藻凿
燥怎贼 遭赠 糟燥灶枣则燥灶贼葬贼蚤燥灶 孕阅粤 责造葬贼藻泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 憎藻则藻 贼藻泽贼藻凿 蚤灶 藻蚤早澡贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟怎造贼怎则藻 皂藻凿蚤葬援
栽澡藻 泽贼则葬蚤灶泽 怨粤袁 圆远粤 葬灶凿 源晕 憎蚤贼澡 遭藻贼贼藻则 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎藻则藻 泽藻造藻糟贼藻凿 枣燥则 凿蚤泽藻葬泽藻 糟燥灶贼则燥造 贼藻泽贼袁 葬灶凿 怨粤袁
圆远粤 泽贼则葬蚤灶泽 憎蚤贼澡 遭藻贼贼藻则 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠 憎藻则藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 怨粤袁 圆远粤 葬灶凿 源晕 泽贼则葬蚤灶泽
糟怎造贼怎则藻凿 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠 蚤灶 责怎皂责噪蚤灶袁 泽憎藻藻贼 责燥贼葬贼燥 葬灶凿 责燥贼葬贼燥 皂藻凿蚤葬 澡葬凿 贼澡藻 遭藻泽贼 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠袁 憎蚤贼澡 贼澡藻
蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻泽 燥枣 愿愿援 愿猿豫 袁 愿苑援 愿猿豫 葬灶凿 愿缘援 愿苑豫 袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠袁 葬早葬蚤灶泽贼 皂赠糟藻造蚤葬造 早则燥憎贼澡 燥枣 悦援 早造燥藻燥泽责燥鄄
则蚤燥蚤凿藻泽援 阅藻贼葬糟澡藻凿 皂葬灶早燥 枣则怎蚤贼泽 憎藻则藻 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 泽怎泽责藻灶泽蚤燥灶 燥枣 怨粤袁 圆远粤 葬灶凿 源晕 葬贼 圆源 澡 遭藻枣燥则藻 蚤灶燥糟怎鄄
造葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 泽怎泽责藻灶泽蚤燥灶 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽袁 葬灶凿 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠 憎藻则藻 遭燥贼澡 员园园豫 袁 憎蚤贼澡 贼澡藻 泽葬皂藻 则藻泽怎造贼
枣则燥皂 贼澡藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼 憎蚤贼澡 责则燥糟澡造燥则葬扎 渊耘宰冤援 栽澡藻 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟蚤藻泽 燥枣 怨粤 葬灶凿 圆远粤 憎藻则藻 怨愿援 源豫 葬灶凿
怨园援 缘豫 袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠袁 燥灶 枣则怎蚤贼泽 蚤灶 枣蚤藻造凿袁 憎澡蚤糟澡 憎藻则藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡燥泽藻 燥枣 贼澡藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼 憎蚤贼澡
责则燥糟澡造燥则葬扎 渊耘宰冤袁 遭怎贼 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠 燥枣 源晕 贼则藻葬贼皂藻灶贼 憎葬泽 缘愿援 圆豫 援 栽澡藻 泽贼则葬蚤灶泽 燥枣 怨粤 葬灶凿 圆远粤 憎藻则藻
基金项目院 国家现代农业产业技术体系广西创新团队渊桂农业发咱圆园员员暂猿猿号冤袁广西自然科学基金渊圆园员猿郧载晕杂云月粤园员怨园苑缘冤
作者简介院 潘朝勃袁男袁员怨愿员年生袁硕士研究生袁研究方向为植物病害及其防治袁 耘鄄皂葬蚤造院 责澡葬燥赃员愿岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡藻则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 皂燥躁蚤葬灶赠燥怎岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员猿 原 园缘 原 园怨
第 源园 卷摇 第 远 期
圆园员猿 年摇 员圆 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 远
阅藻糟援 摇 圆园员猿
摇 摇 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽 遭葬泽藻凿 燥灶 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造袁 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿
责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 员远杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 怨粤 葬灶凿 圆远粤 泽贼则葬蚤灶泽 澡葬增藻 遭藻贼贼藻则
遭蚤燥鄄糟燥灶贼则燥造 增葬造怎藻援
运藻赠 憎燥则凿泽院 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽曰 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤怎皂曰 泽糟则藻藻灶蚤灶早曰 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠
摇 摇 杧果是热带水果袁其特殊风味和营养价值深受
人们的喜爱遥 由胶孢炭疽菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥鄄
则蚤燥蚤凿藻泽引起的杧果炭疽病是杧果种植期和采后的重
要病害袁在世界各杧果产区均有发生咱员暂 遥 该病菌以
分生孢子侵染植物的叶梢尧花穗和果实袁 引起枯梢尧
叶斑尧落叶和落花落果等咱圆暂 袁并且具有潜伏侵染特性袁
在贮运期可引起果实腐烂袁病果率一般为 猿园豫 耀
缘园豫 袁严重时可达 员园园豫 咱猿 原 源暂 遥 目前该病多采用多
菌灵尧咪鲜胺等化学药剂防治袁但长期使用化学农药
会使病原菌产生抗药性袁引起农药残留尧环境污染和
食品安全问题咱缘 原 远暂 遥 生物防治具有高效尧环保等优
点咱苑暂 袁是植物病害防治的发展趋势遥 杨敬辉等咱愿暂研
究显示袁芽胞杆菌尧假单胞菌和伯克氏菌等拮抗细菌
对草莓黄萎病的防治效果显著曰黎起秦等咱怨暂利用枯
草芽胞杆菌防治番茄青枯病获得较好的防治效果遥
高效拮抗菌的筛选是生物防治研究和应用的基
础咱员园暂 袁因此袁分离筛选自然界存在的生防菌具有重
要的实践意义遥 近年来袁利用生防菌活体及其具有
抑菌活性的代谢产物防治杧果炭疽病已成为研究热
点袁国外已用生防制剂代替常用药剂进行防治咱员员暂 袁
国内这方面的研究相对较少袁虽已从土壤和植物根
叶咱员圆暂 尧空气咱员猿暂 尧海洋咱员源暂等处分离到具有一定抑菌效
果的菌株袁但是菌株资源仍较匮乏遥 前人多在健康
的植株上分离筛选拮抗菌袁而从非杧果炭疽病的植
株病斑处分离筛选拮抗菌尚未见报道遥 本试验对从
瓜类白粉病病叶病斑处分离到的菌株进行抑菌筛选
及防病效果测试袁旨在寻找具有实际应用价值的菌
株袁为杧果炭疽病的生物防治研究与应用扩充生防
资源遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试杧果院金穗杧袁采自广西大学农学院教学科
研基地遥
供试病原菌院杧果炭疽菌 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽袁为
本实验室分离保存遥
固体培养基院孕阅粤咱员缘暂 遥 基础培养基院葡萄糖 员园
早尧蛋白胨 员园 早尧酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园援 员 早尧云藻杂韵源窑苑匀圆韵
园援 员 早尧运匀圆孕韵源 园援 员 早遥 员 耀 愿 号液体培养基为分别向
基础培养基加 圆园园 早 马铃薯煮水滤汁尧圆园园 早 香蕉煮
水滤汁尧圆园园 早 南瓜煮水滤汁尧圆园园 早 红薯煮水滤汁尧
圆园 早可溶性淀粉煮汁尧圆园 早玉米粉煮汁尧愿 早牛肉浸膏
煮汁和蒸馏水袁并分别定容至 员 园园园 皂蕴遥
杀菌剂院源缘园 早 辕 蕴 咪鲜胺渊责则燥糟澡造燥则葬扎冤 耘宰袁江苏
辉丰农化股份有限公司遥
培养箱院 杂孕载鄄圆缘园月鄄郧型光照培养箱袁上海博讯
实业有限公司医疗设备厂遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 拮抗细菌的分离和筛选
分离院随机从南宁市坛洛镇和吴圩镇的瓜田上
采摘瓜类白粉病新鲜病叶遥 用经灭菌的毛笔在白粉
病病斑上轻扫袁扫落物落于 孕阅粤 培养基平板上袁置
于培养箱中 圆远 益自然光照培养遥 培养期间定期观
察袁挑取外观形态颜色差异明显的细菌菌落进行纯
化袁作为待测菌株保存备用遥
初筛院采用平板对峙法遥 在 孕阅粤 平板中央接种
缘皂皂杧果炭疽菌菌饼袁在离菌饼中心 圆缘皂皂处袁源 个
方向分别接分离纯化得到的各待测细菌袁重复 猿 次袁
置于培养箱中 圆远 益下光照培养遥 至菌株对面的炭
疽菌菌落出现受抑线时袁在细菌菌落与炭疽菌菌饼
连线方向上测量细菌菌落边与杧果炭疽菌菌落受抑
线之间的空白区距离袁求平均数袁选取具有拮抗作用
的菌株进行复筛遥
复筛院采用菌丝生长速率法遥 将初筛获得的拮
抗菌株在 孕阅粤上培养 源愿 耀 苑圆 澡袁取各菌一接种环的
菌苔分别接入 员园园 皂蕴 员 号培养液中培养 圆源 澡 作种
子液袁再分别吸取 圆园 滋蕴种子液注入新培养液中袁各
培养液定量 圆园 皂蕴袁瓶容量为 员缘园 皂蕴袁置于摇床 圆愿
益尧员愿园 则 辕 皂蚤灶条件下培养 员圆园 澡遥 取培养液于 员圆 园园园
则 辕 皂蚤灶离心 缘 皂蚤灶袁再取上清液袁经 园援 圆圆 滋皂滤膜过滤
获得上清滤液袁置 源 益保存备用遥 吸取各上清滤液
与 孕阅粤培养基渊温度为 源缘 益冤混合制成含 愿豫上清
滤液的平板袁于平板中央接种 缘 皂皂 杧果炭疽菌菌
饼袁置于培养箱中 圆远 益下进行光照培养袁重复 猿 次袁
以无菌水为对照遥 待对照的杧果炭疽菌长满平板
时袁用十字交叉法测量各处理的菌落直径袁计算生长
速度抑制率袁选取抑菌作用较强的菌株进行下一步
愿员缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
试验遥 生长速度抑制率渊豫 冤 越 咱渊空白对照菌落直
径 原菌饼直径冤 原 渊处理菌落直径 原菌饼直径冤暂 辕
渊空白对照菌落直径 原菌饼直径冤 伊员园园遥
员援 圆援 圆 不同培养基对拮抗细菌抑菌活性的影响
选取复筛中抑菌作用较强的菌株袁分别接种于
员 耀 愿 号液体培养基中袁于 圆愿 益尧员愿园 则 辕 皂蚤灶条件下振
荡培养 员圆园 澡袁测定各菌株上清滤液对杧果炭疽菌的
抑菌率渊方法与复筛相同冤遥
员援 圆援 猿 拮抗菌株对杧果炭疽病的防效
室内离体果实防效院采集外观无病尧大小相近的
嫩果袁用自来水冲洗后自然晾干袁置于塑料篮内袁在
果实向上一面中央处用记号笔画一直径约 猿 皂皂 的
圆圈标记袁作为菌液处理及接种的位置遥 菌液处理
方法院用灭菌棉签沾菌液袁涂在圆圈处袁以可见明显
液层为宜遥 接种方式院先涂抹菌液袁圆源 澡 后袁用移液
器在标记圆圈内滴 缘 滋蕴浓度约为 缘援 园 伊 员园缘个孢子 辕
皂蕴的杧果炭疽菌分生孢子液袁用源缘园 早 辕 蕴咪鲜胺
员 园园园 倍液处理作为药剂对照袁以无菌水作空白对
照袁每处理 缘 个果袁源 次重复袁处理完毕后用塑料袋
渊内部均匀喷湿冤套住塑料篮袁置于人工气候箱 砸匀
怨缘豫 尧圆远 益条件下培养袁第 缘 天观察记录发病情况袁
并计算防病效果遥 发病率渊豫 冤 越发病果数 辕处理果
总数 伊 员园园袁防病效果渊豫 冤 越 渊空白对照组发病率 原
处理组发病率冤 辕空白对照组发病率 伊 员园园遥
果园果实上的防效院在树冠各方向随机选取表
面无病斑果实袁用清水擦洗袁待干备用遥 处理方法院
先分别涂抹各菌株菌液袁 圆源 澡后袁喷病原菌孢子液袁
处理完毕袁用塑料袋套果袁同样以 源缘园 早 辕 蕴 咪鲜胺 员
园园园 倍液作药剂对照袁无菌水作空白对照袁每处理 缘
个果袁猿 次重复袁于第 苑 天调查记录发病情况袁计算
防病效果遥 发病程度分级标准院园 级院无病曰员 级院病
斑面积占果实面积的 缘豫以下曰猿 级院远豫 耀 员缘豫 曰缘
级院员远豫 耀 圆缘豫 曰苑 级院圆远豫 耀 缘园豫 曰怨 级院缘园豫 以
上咱员远暂 遥 病情指数 越 移 咱渊各级病果数 伊对应级代
表值冤 辕 渊调查总果数 伊最高级代表值冤暂 伊 员园园曰防
治效果渊豫 冤 越 渊空白对照病情指数 原 处理病情指
数冤 辕空白对照病情指数 伊员园园遥
员援 圆援 源 拮抗细菌的鉴定
菌体形态和生理生化指标测定参照叶常见细菌
系统鉴定手册曳 咱员苑暂 遥 总 阅晕粤 提取方法及 员远杂 则阅晕粤
扩增参照王瑞霞等咱员愿暂方法遥 员远杂 则阅晕粤通用引物 云院
缘忆鄄粤郧粤郧栽栽栽郧粤栽悦悦栽郧郧悦栽悦粤郧鄄猿忆袁砸院缘忆鄄粤悦郧郧悦栽粤鄄
悦悦栽栽郧栽栽粤悦郧粤悦栽鄄猿忆遥 孕悦砸产物经 员豫琼脂糖凝胶
电泳检测后送生工生物工程渊上海冤股份有限公司
进行 孕悦砸产物回收纯化及克隆测序遥 测得序列在
晕悦月陨上进行 月蕴粤杂栽 同源性比对袁取同源性相近的
属下的模式种菌株序列经 悦造怎泽贼葬造载 进行多序列比对
后袁在 酝耘郧粤 源援 园 中用邻接法渊灶藻蚤早澡遭燥则鄄躁燥蚤灶蚤灶早袁晕允冤
构建系统发育进化树遥
员援 猿 数据分析
通过 阅孕杂 增 苑援 园缘 数据处理系统进行方差分析袁
采用 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法对相关数据进行差异显
著性分析遥
圆 结果与分析
圆援 员 拮抗细菌的筛选
初筛院经分离纯化从瓜叶白粉病病斑上获得
员园源 株细菌袁通过平板对峙法筛选获得 员远 株拮抗细
菌袁在对峙平板上袁拮抗细菌与杧果炭疽菌菌落间
形成明显的拮抗带 遥拮抗带宽大于愿 皂皂的有 远
株袁分别为圆怨晕尧员源载尧员允运尧缘杂尧圆苑晕尧圆杂袁其中圆怨晕达
员员援 圆 皂皂遥
复筛院对初筛出的 员远 株拮抗细菌的菌液上清滤
液的抑菌活性进行复筛袁获得对杧果炭疽菌生长速
度抑制率 苑园豫以上的菌株 远 株袁即 圆远粤尧源晕尧怨粤尧缘杂尧
圆 怨 晕 尧缘 杂 袁其中前猿株抑制率分别为愿 远 援 愿 苑 豫 尧
愿缘援 愿苑豫 尧愿缘援 苑员豫 遥 选取 圆远粤尧源晕和 怨粤 菌株进行下
一步测试遥
圆援 圆 拮抗菌株在不同培养基中的抑菌活性
圆远粤尧源晕尧怨粤 菌株分别在 愿 种培养基上振荡培
养 袁获得的离心上清滤液抑菌活性差异显著渊孕 约
园援 园缘冤袁其中 怨粤 用 猿 号液体培养基培养的抑菌活性
最强袁对杧果炭疽菌菌丝生长的抑制率为 愿愿援 愿猿豫 袁
圆远粤 用 源 号液体培养基培养的抑菌活性最强袁对杧
果炭疽菌菌丝生长的抑制率为 愿苑援 愿猿豫 袁源晕 用 员 号
液体培养基培养的抑菌活性最强袁对杧果炭疽菌菌
丝生长的抑制率为 愿缘援 愿苑豫 渊表 员冤遥 因此袁选取用 猿
号尧源 号和 员 号培养基的培养液进行下一步防病效
果测试遥
圆援 猿 拮抗菌株对杧果炭疽病的防病效果
室内离体果实院接种杧果炭疽菌分生孢子后第
缘 天袁分别用各菌株培养液与 源缘园 早 辕 蕴 咪鲜胺 员 园园园
倍液处理果实的发病率均为 园袁无菌水空白对照组
的果实发病率为 员园园豫 遥
果园果实院接种杧果炭疽菌分生孢子后第 苑 天袁
无菌水对照组病情指数为怨源援 员袁 而怨粤尧 圆远粤和 源晕
怨员缘远 期 潘朝勃等院杧果炭疽菌拮抗细菌的筛选鉴定及其防病效果
表 员 拮抗菌株对杧果炭疽病菌的抑菌效果
栽葬遭造藻 员 陨灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶泽 葬早葬蚤灶泽贼 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 豫
培养基
悦怎造贼怎则藻
皂藻凿蚤怎皂
拮抗菌株
粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶
怨粤 圆远粤 源晕
培养基
悦怎造贼怎则藻
皂藻凿蚤怎皂
拮抗菌株
粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶
怨粤 圆远粤 源晕
员 愿缘援 苑员 依 园援 园苑 遭 愿远援 远愿 依 园援 圆苑 遭 愿缘援 愿苑 依 园援 圆苑 葬 缘 苑猿援 园园 依 园援 缘园 凿 苑缘援 园园 依 园援 缘愿 糟 源缘援 猿猿 依 园援 源源 枣
圆 苑缘援 缘园 依 园援 圆怨 糟 源缘援 远苑 依 园援 员苑 枣 缘员援 员苑 依 园援 源源 藻 远 圆远援 愿猿 依 园援 缘怨 枣 圆愿援 缘园 依 园援 缘园 早 源源援 员苑 依 园援 员苑 早
猿 愿愿援 愿猿 依 园援 员苑 葬 远愿援 缘园 依 园援 缘园 藻 缘缘援 远苑 依 园援 员苑 凿 苑 苑猿援 猿猿 依 园援 员苑 凿 远苑援 远苑 依 园援 员苑 藻 缘苑援 缘园 依 园援 圆怨 糟
源 远愿援 员苑 依 园援 员苑 藻 愿苑援 愿猿 依 园援 员苑 葬 远缘援 猿猿 依 园援 员苑 遭 愿 苑员援 远苑 依 园援 员苑 凿 苑猿援 远苑 依 园援 猿猿 凿 猿源援 员苑 依 园援 猿猿 澡
摇 摇 表中数据为平均数 依标准误遥 同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 员院马铃薯培养
基曰圆院香蕉培养基曰猿院南瓜培养基曰源院红薯培养基曰缘院可溶性淀粉培养基曰远院玉米粉培养基曰苑院牛肉浸膏培养基曰愿院基础培养基遥 阅葬贼葬 葬则藻
皂藻葬灶 依 杂耘援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援 员院 孕燥贼葬鄄
贼燥曰 圆院 遭葬灶葬灶葬曰 猿院 责怎皂责噪蚤灶曰 源院 泽憎藻藻贼 责燥贼葬贼燥曰 缘院 泽燥造怎遭造藻曰 远院 糟燥则灶 枣造燥怎则曰 苑院 遭藻藻枣 藻曾贼则葬糟贼曰 愿院 遭葬泽葬造 糟怎造贼怎则藻 皂藻凿蚤怎皂援
菌株的病情指数分别为 员援 缘尧愿援 怨 和 猿怨援 猿遥 怨粤尧圆远粤
菌株对杧果炭疽病的防治效果分别是怨愿 援 源豫和
怨园援 缘豫 袁两者均显著高于 源缘园 早 辕 蕴 咪鲜胺 员 园园园 倍液
的防效渊孕 约 园援 园缘冤曰而 源晕 菌株的防效为 缘愿援 圆豫 袁显
著低于 怨粤和 圆远粤的防效袁并比 源缘园 早 辕 蕴咪鲜胺的防
效低约 圆园豫 渊表 圆冤遥
表 圆 拮抗菌株对果园果实炭疽病的防病效果
栽葬遭造藻 圆 悦燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶泽 贼燥 贼澡藻 皂葬灶早燥 枣则怎蚤贼 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 蚤灶 燥则糟澡葬则凿泽
处理摇
栽则藻葬贼皂藻灶贼摇
病情指数
阅蚤泽藻葬泽藻 蚤灶凿藻曾
防病效果渊豫冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠
处理摇
栽则藻葬贼皂藻灶贼摇
病情指数
阅蚤泽藻葬泽藻 蚤灶凿藻曾
防病效果渊豫冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣蚤糟葬糟赠
怨粤 员援 缘 依 园援 苑 葬 怨愿援 源 依 园援 愿 葬 源缘园 早 辕 蕴咪鲜胺 耘宰 圆园援 园 依 圆援 远 糟 苑愿援 愿 依 圆援 猿 糟
圆远粤 愿援 怨 依 园援 员 遭 怨园援 缘 依 园援 源 遭 孕则燥糟澡造燥则葬扎
源晕 猿怨援 猿 依 员援 缘 凿 缘愿援 圆 依 员援 圆 凿 无菌水 悦运 怨源援 员 依 猿援 怨 藻 要
摇 摇 表中数据为平均数 依 标准误遥同列数据后不同字母表示经阅怎灶糟葬灶氏新复极差法检验在孕 约 园 援 园缘水平差异显著遥阅葬贼葬 葬则藻
皂藻葬灶 依 杂耘援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 灶藻憎 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼援
圆援 源 拮抗细菌的鉴定
圆援 源援 员 形态与生理生化特征
怨粤与 圆远粤在 孕阅粤平板上形成的菌落为白色略
呈土黄尧不透明尧无褶皱袁怨粤 形状多为游走放射状袁
圆远粤形状近圆形袁略隆起遥 两者菌体均为短杆状袁有
周生鞭毛渊图 员冤袁产芽胞袁中生或近端生袁近球形遥
初培养物革兰氏染色尧接触酶试验及游动性试验呈
阳性袁苯丙氨酸酶试验尧酪氨酸酶试验及反硝酸还原
试验呈阴性袁灾鄄孕试验迅速显红色袁在分别含淀粉和
卵黄脂的平板上培养均出现透明圈袁在 员园豫 晕葬悦造
培养基中能生长袁温度逸缘园 益或臆缘 益不能生长袁能
还原硝酸盐袁甲基红呈黄色袁不能分解纤维素与吐温
愿园袁不能氧化乙醇袁阅 原葡萄糖尧蕴 原阿拉伯糖尧阅 原木
糖尧阅 原甘露醇发酵产酸不产气遥 以上形态尧生理生
化特征与叶常见细菌系统鉴定手册曳 咱员苑暂和叶伯杰细
菌鉴定手册曳 咱员怨暂中的枯草芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽
描述相符袁初步将 怨粤 与 圆远粤 菌株鉴定为枯草芽胞
杆菌 月援 泽怎遭贼蚤造蚤泽遥
圆援 源援 圆 员远杂 则阅晕粤 序列分析与系统进化树构建
经生工生物工程渊上海冤股份有限公司测序得
到 怨粤及 圆远粤菌株的 员远杂 则阅晕粤 序列长度均为 员 源苑猿
遭责袁提交 郧藻灶月葬灶噪 获得登录号分别为 运悦员怨远圆远员 和
运悦圆怨缘源员缘遥 根据 月蕴粤杂栽比对结果袁取同源性相近的
芽胞杆菌属下的模式种菌株袁构建系统发育进化树遥
怨粤和 圆远粤 菌株与 粤允圆苑远猿缘员尧耘哉员猿愿源远苑尧粤云园苑源怨苑园 聚
类在一起袁最大序列相似度达 怨怨豫 渊图 圆冤遥
综合形态尧生理生化特征及 员远杂 则阅晕粤 序列分
析结果袁将拮抗细菌 怨粤 和 圆远粤 菌株鉴定为枯草芽
胞杆菌 月援 泽怎遭贼蚤造蚤泽遥
猿 讨论
目前袁杧果炭疽菌的拮抗细菌主要从土壤和健
康的植物体上分离筛选袁如柳凤等咱圆园暂从红树体内分
离的内生细菌解淀粉芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬鄄
糟蚤藻灶泽袁运藻枣蚤葬造藻憎 驭 粤赠葬造藻憎咱圆员暂从杧果植株上筛选到的
缺陷短波单胞菌月则藻增怎灶凿蚤皂燥灶葬泽 凿蚤皂蚤灶怎贼葬和嗜麦芽
园圆缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
图 员 拮抗菌 怨粤和 圆远粤在透射电镜下的菌体形态
云蚤早援 员 陨皂葬早藻泽 燥枣 贼则葬灶泽皂蚤泽泽蚤燥灶 藻造藻糟贼则燥灶 皂蚤糟则燥泽糟燥责赠 燥枣 怨粤 葬灶凿 圆远粤 泽贼则葬蚤灶泽
图 圆 拮抗菌 怨粤和 圆远粤系统发育进化树
云蚤早援 圆 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 月葬糟蚤造造怎泽 泽贼则葬蚤灶泽
寡养单胞菌 杂贼藻灶燥贼则燥责澡燥皂燥灶葬泽 皂葬造贼燥责澡蚤造蚤葬 对杧果炭
疽菌 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 表现出较好的抑菌作用遥 植
株病斑处与植株健康的体表和体内相比袁前者是一
个独特复杂的生境袁微生物之间关系复杂且存在激
烈的竞争袁在病斑处的微生物需具更强的生存力和
竞争力袁所以病斑处的拮抗微生物较健康部位的更
具有利用价值遥 本试验以瓜叶白粉病病斑为拮抗细
菌分离材料袁成功分离筛选到 圆 株具有较好抑菌作
用和防病效果的拮抗菌株 怨粤和 圆远粤遥 刘邮洲等咱圆圆暂
报道枯草芽胞杆菌 泽枣远圆愿 发酵液对梨炭疽菌菌丝生
长的平板抑制率为 怨员援 源缘豫 袁防病效果为 愿猿援 苑源豫 曰
贾凤安等咱圆猿暂报道枯草芽胞杆菌 云悦允圆 对甜瓜枯萎
病尧白粉病和霜霉病的防效分别为 愿愿援 缘豫尧怨猿援 远豫和
愿圆援 远豫曰黄庶识等咱圆源暂从土壤中筛选到枯草芽胞杆菌
韵晕鄄远对荔枝离体鲜果炭疽病的防效为 愿员援 圆圆豫遥 本
试验筛选和鉴定的枯草芽胞杆菌 怨粤和 圆远粤菌株对
杧果离体果实和果园果实炭疽病有较好的防病效
果袁说明这两个菌株具有一定的应用潜质遥
用于枯草芽胞杆菌培养的常用发酵培养基有营
养肉汤培养基渊晕月冤 咱圆缘暂 尧马铃薯葡萄糖肉汤培养基
渊孕阅月冤 咱圆远暂 尧胰蛋白胨酵母培养基渊蕴月冤咱圆苑暂 尧蛋白胨
酵母膏葡萄糖培养基 渊 再孕郧冤咱圆愿暂 尧金氏培养基
渊运酝月冤咱圆怨暂 尧玉米粉培养基渊悦酝月冤咱猿园暂等袁这些培养
基所用的碳氮源的成分主要是马铃薯尧牛肉浸膏尧酵
母浸膏尧蛋白胨尧淀粉尧甘油尧玉米粉等遥 本试验结果
表明袁以南瓜和红薯作为主要成分的培养基培养 怨粤
和 圆远粤菌株袁获得的培养液抑菌活性比用其它培养
基培养获得的培养液抑菌活性高袁说明这两种培养
员圆缘远 期 潘朝勃等院杧果炭疽菌拮抗细菌的筛选鉴定及其防病效果
基更适用于培养 怨粤和 圆远粤菌株产生抑菌物质遥 有
关 怨粤尧圆远粤菌株的抑菌物质和防病机制等还有待进
一步研究遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 灾蚤增藻噪葬灶葬灶贼澡葬灶 砸袁 砸葬增蚤 酝袁 杂葬则葬增葬灶葬噪怎皂葬则 阅袁 藻贼 葬造援 酝蚤糟则燥遭蚤葬鄄
造造赠 蚤灶凿怎糟藻凿 凿藻枣藻灶泽藻 则藻造葬贼藻凿 责则燥贼藻蚤灶泽 葬早葬蚤灶泽贼 责燥泽贼澡葬则增藻泽贼 葬灶鄄
贼澡则葬糟灶燥泽藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 蚤灶 皂葬灶早燥援 悦则燥责 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 圆园园源袁 圆猿院
员园远员 原 员园远苑
咱圆暂 黄思良袁霍秀娟袁韦刚援 芒果炭疽病菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥鄄
则蚤燥蚤凿藻泽的生物学特性援 西南农业学报袁 员怨怨怨袁员圆渊圆冤院愿猿 原 愿怨
咱猿暂 张鲁斌袁常金梅袁詹儒林援 芒果炭疽病拮抗菌的筛选及防治
效果研究援 热带农业科学袁圆园员园袁猿园渊缘冤院 员圆 原 员源
咱源暂 杨胜远袁陈桂光袁肖功年袁等援 芒果主要病原菌拮抗微生物的
分离筛选援 植物保护袁圆园园源袁猿园渊猿冤院 缘缘 原 缘愿
咱缘暂 詹儒林袁李伟袁郑服丛援 芒果炭疽病菌对多菌灵的抗药性援
植物保护学报袁圆园园缘袁猿圆渊员冤院苑员 原 苑远
咱远暂 张胡焕袁谢艺贤袁蒲金基袁等援 常用杀菌剂及其混剂对芒果炭
疽病菌的毒力测定援 农药袁圆园员园袁源怨渊员冤院远源 原 远缘
咱苑暂 夏伟袁张红袁颜艳伟袁等援 棘孢木霉 蕴源 对立枯丝核菌的拮抗
机制援 植物保护学报袁圆园员园袁猿苑渊缘冤院源苑苑 原 源苑愿
咱愿暂 杨敬辉袁朱桂梅袁陈宏州袁等援 草莓根围拮抗细菌的多样性分
析及其田间应用援 中国生物防治袁圆园园怨袁圆缘渊增 员冤院缘圆 原 缘苑
咱怨暂 黎起秦袁罗宽袁林纬袁等援 内生菌 月源苑的定殖能力及其对番茄
青枯病的防治作用援 植物保护学报袁圆园园远袁猿猿渊源冤院猿远猿 原 猿远愿
咱员园暂 张慧袁杨兴明袁冉炜袁等援 土传棉花黄萎病拮抗菌的筛选及
其生物效应援土壤学报袁圆园园愿袁源缘渊远冤院 员园怨缘 原 员员园员
咱员员暂 郧燥增藻灶凿藻则 灾袁 运燥则泽贼藻灶 蕴援 耘增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 枣燥则皂怎造葬贼蚤燥灶泽 燥枣
月葬糟蚤造造怎泽 造蚤糟澡藻灶蚤枣燥则皂蚤泽 蚤灶 皂葬灶早燥 责葬糟噪 澡燥怎泽藻 贼则蚤葬造泽援 月蚤燥造燥早蚤糟葬造
悦燥灶贼则燥造袁 圆园园远袁 猿苑院 圆猿苑 原 圆源圆
咱员圆暂 张荣意袁谭志琼袁简日明援 芒果炭疽病菌生防细菌的筛选尧
鉴定及生防潜能的初步研究援 热带作物学报袁员怨怨愿袁员怨渊猿冤院
圆员 原 圆苑
咱员猿暂 黄思良袁赵艳珠袁黄连江援 空气中拮抗芒果炭疽病菌的微生
物类群初步调查援 广西农业科学袁员怨怨怨渊猿冤院员圆员 原 员圆圆
咱员源暂 柳凤袁何红袁詹儒林袁等援 拮抗芒果炭疽病菌的红树内生细
菌筛选及 粤蚤蕴猿 菌株抗菌物质研究援 中国生物防治袁圆园员园袁
圆远渊猿冤院圆怨猿 原 圆怨怨
咱员缘暂 方中达援 植病研究方法渊猿 版冤援 北京院中国农业出版社袁
员怨怨愿
咱员远暂 柳凤袁詹儒林袁何衍彪袁等援 抑菌物质肉桂醛防治杧果炭疽
病机制研究援 果树学报袁圆园员员袁圆愿渊源冤院 远缘员 原 远缘远
咱员苑暂 东秀珠袁蔡妙英援常见细菌系统鉴定手册援 北京院科学出版
社袁圆园园员
咱员愿暂 王瑞霞袁贺运春袁赵廷昌袁等援 马铃薯环腐病生防菌株 孕员 的
鉴定尧防病效果及促生作用研究援 植物病理学报袁圆园员园袁源园
渊员冤院远远 原 苑猿
咱员怨暂 布坎南 砸 耘袁吉本斯 晕 耘援 伯杰细菌鉴定手册渊愿 版冤援 北
京院科学出版社袁员怨愿源
咱圆园暂柳凤袁欧雄常袁何红袁等 援 红树内生细菌粤皂杂圆菌株对芒
果炭疽病菌的抑制作用 援 植物保护学报袁圆园员园袁猿苑渊缘冤 院
源缘猿 原 源缘愿
咱圆员暂 运藻枣蚤葬造藻憎 再袁 粤赠葬造藻憎 粤援 孕燥泽贼澡葬则增藻泽贼 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟燥灶贼则燥造 燥枣 葬灶鄄
贼澡则葬糟灶燥泽藻 渊悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽冤 燥灶 皂葬灶早燥 渊酝葬灶早蚤枣鄄
藻则葬 蚤灶凿蚤糟葬冤援 孕燥泽贼澡葬则增藻泽贼 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园愿袁 缘园
渊员冤院 愿 原 员员
咱圆圆暂 刘邮洲袁陈志谊袁刘永锋袁等援 枯草芽胞杆菌 泽枣远圆愿对梨炭疽
病的控制作用援 植物保护学报袁圆园员圆袁 猿怨渊远冤院源怨圆 原 源怨远
咱圆猿暂贾凤安袁陈亮袁陈立袁等 援 大棚甜瓜三种主要真菌病害拮
抗细菌的筛选与鉴定 援 植物保护学报袁圆园员园 袁猿苑 渊 远 冤 院
缘园缘 原 缘员园
咱圆源暂 黄庶识袁黄曦袁张荣灿袁等援 枯草芽胞杆菌对离体荔枝果实
霜疫霉病尧炭疽病的防治效果援 植物保护学报袁圆园员员袁猿愿
渊猿冤院圆源苑 原 圆缘圆
咱圆缘暂 易龙袁肖崇刚袁马冠华援 防治烟草根黑腐病拮抗芽孢菌株的
筛选援 植物病理学报袁圆园员员袁源员渊猿冤院猿猿猿 原 猿猿远
咱圆远暂 蕴蚤葬灶 蕴 蕴袁 载蚤藻 蕴 再袁 宰怎 在 允袁 藻贼 葬造援 粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 月葬鄄
糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽 杂月员 葬灶凿 蚤贼泽 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 燥灶 贼燥皂葬贼燥 遭葬糟贼藻则蚤葬造
憎蚤造贼援 粤糟贼葬 孕澡赠贼燥责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 圆园员员袁 源员渊圆冤院 圆员怨 原 圆圆源
咱圆苑暂 钱常娣袁李宝庆袁郭庆港袁等援 枯草芽孢杆菌菌株 月粤月鄄员 表
面活性素的分离纯化及性质分析援 植物病理学报袁圆园员员袁源员
渊圆冤院员怨远 原 圆园圆
咱圆愿暂 李德全袁陈志谊袁聂亚锋援 生防菌 月泽鄄怨员远 及高效突变菌株
抗菌物质及其对水稻抗性诱导作用的研究援 植物病理学
报袁 圆园园愿袁猿愿渊圆冤院员怨圆 原 员怨愿
咱圆怨暂刘静袁王军袁姚建铭袁等 援 枯草芽孢杆菌允粤抗菌物特性的
研究及抗菌肽的分离纯化 援 微生物学报袁圆园园源袁源源渊源冤 院
缘员员 原 缘员源
咱猿园暂 张璐袁 齐希猛袁刘婷婷袁等援 一株拮抗芒果炭疽菌海洋细菌
的鉴定和发酵培养基优化援 广东海洋大学学报袁圆园员员袁猿员
渊源冤院苑缘 原 愿园
渊责任编辑院吴竟一冤
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