全 文 :书!"#$%&
,2016,36(7):1308-1314
犃犮狋犪犅狅狋.犅狅狉犲犪犾.犗犮犮犻犱犲狀狋.犛犻狀.
!"#$:10004025(2016)07130807 犱狅犻:10.7606/j.issn.10004025.2016.07.1308
%&(
:20160415;)*&%+(:20160607
,-./
:
()*+%,-
(31500205);!.+/0%1234,-(14zx7153);!.+/0%56789:;<=(14zx1104);>?
@A$B
0123
:
O P(1994-),Q,RST+A,UVWX#$YZA$%34。Email:ranarang_april@163.com
[\]^:_`a,12,bc,UVWX#$YZA$%34。Email:kateryan@163.com
犖狋犕犜犘1,456789:;<
犣狀=>?@ABCD
! ",#$%1,2,&(1,)*+1,2,,-.1,/011,2
(1!.+/0% Ad+%FIJ%e,>?fg621010;2!.+/0% hi$Fjklmnopqrs,>?fg
621010)
E F:t34uEqvwxyzPCR(qRTPCR)/{,|}~-1(MTP1),(犖狋犕犜犘1)R}~
BzZnSO4 Y;DE,犖狋犕犜犘1,#$
pBI12135S∶∶MTP1¡¢£A¤}~,¥¦§¨犖狋犕犜犘1,¡,}~#©,ª
Bz
ZnSO4 ,«¬犖狋犕犜犘1,|}~Zn®H¯°。±²³:犖狋犕犜犘1,R}~K´µ
:¶H
,
UVR·F¸K
;犖狋犕犜犘1,¨Zn2+¹,R400μmol/LZnSO4 º,z
¨»¼
,
½|¾3.81¿;3©¡,}~#©K犖狋犕犜犘1,zYÀ½£A¤10.42、7.61Á11.84
¿
,
F£A¤ÂÃ
,
#©|Zn®HÄÅÆÇ。34±²½È³犖狋犕犜犘1,R}~ ÉZn2+¡
ÊJKA$%ËÌÍÎoVÏÐ
。
GHI
:
}~
;
-1;Ñ;H
JKLM$
:Q785;Q786 !NOPQ:A
犗狏犲狉犲狓狆狉犲狊狊犻狅狀狅犳犖狋犕犜犘1犌犲狀犲犳狉狅犿犖犻犮狅狋犻犪狀犪狋犪犫犪犮狌犿
犐犿狆狉狅狏犲犱犣犻狀犮犜狅犾犲狉犪狀犮犲狅犳犜狅犫犪犮犮狅
RANQiao1,WUChanjuan1,2,GAOYongfeng1,TANGYunlai1,2,
HUANGCaizhi1,LIUJikai1,2
(1SchoolofLifeScienceandEngineering,SouthwestUniversityofScienceandTechnology,Mianyang,Sichuan621010,China;
2FundamentalScienceonNuclearWastesandEnvironmentalSafetyLaboratory,SouthwestUniversityofScienceandTechnolo
gy,Mianyang,Sichuan621010,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Inthisstudy,therelativeexpressionof犖狋犕犜犘1wasdeterminedbyquantitativerealtimePCR
(qRTPCR).Theresultsshowedthat犖狋犕犜犘1genewashighlyexpressedinflowersandleaves.After
treatmentof400μmol/LZnSO4for48h,theexpressionof犖狋犕犜犘1increasedtothemaximum,which
was3.81foldsofthecontrol.PlantexpressionvectorpBI12135S∶∶MTP1wasconstructed,andthere
combinantplasmidwasintroducedinto犖犻犮狅狋犻犪狀犪狋犪犫犪犮狌犿L.cvNC89bymeansof犃犵狉狅犫犪犮狋犲狉犻狌犿狋狌犿犲
犳犪犮犻犲狀狊mediatedtransformation.TheqRTPCRrevealedadistinctincreaseofendogenous犖狋犕犜犘1ex
pressionlevelintheoverexpressingtransgeniclines,whichwere10.42,7.61and11.84foldsofthatof
wildplants,respectively.Seedsofwildtypeandtransgenicplantsweretreatedwithdifferentconcentra
tionsofZnSO4.Theresultsshowedthatoverexpressionof犖狋犕犜犘1conferredenhancedzinctolerance.
Theseresultsprovideanimportantbasistoiluminatethefunctionof犖狋犕犜犘1geneinZn2+transportin
tobacco.
犓犲狔狑狅狉犱狊:犖犻犮狅狋犻犪狀犪狋犪犫犪犮狌犿;metaltoleranceprotein1;zinc;tolerance
ZnÒ#$ÓÔÕzÖ×ØÙÚÛ,Ò#$Ü
ÝÉ300ÞßàF2000Þá¡âZã=
Z
,
F#$A6Ùäå
、
æçèHÁAéêëìí
Âî
。
ïÜÝÉZn2+zðñòó|#$ôA
õö]E
,
Ã÷
,
óøù#$æúû¢]E
,
üý
þÿz!"
,¸
#Ùÿz$%&
,
W()#$Bæ
çèHÁx*+,
[14]。
½-.Zn2+&o-/
Zõö]E
,
A$ ¢0Û1g/Z234
Z
(cationdiffusionfacilitator,CDF)(5
½ 6æ¡Ê77
[5]。
,8|9Ü
、
:Ü
Á:hA$K;<äHCDF=>+,
¢ÁËÌY±²
,
?@CDF(5Y½A$:
¶ 3 á 0 :ZnCDF、Fe/ZnCDF Á
MnCDF[67]。
#$CDF(5=>BC½-(met
altoleranceprotein,MTP),ÌD ] E 8 Zn2+、
Fe2+、Co2+ &-/Z¡Ê,EY½ 7 áF
[89]。
R±G!
,
H1F MTPR6æI
Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、ⅥKÿ
,
STU½F¡Ê:
¶HÂî
,
VÌ]½ÜÝBÉ Zn2+ WXYZ
[
[1012]。MTP18H1F,UV]E8Zn2+¡
Ê
,
»\R].^
(犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪)KTê
µ
,犃狋犕犜犘1,UVR_`¸aK,Rb
cZndYef Δ狕狉犮1犮狅狋1K¶C犃狋犕犜犘1
ógef bcµ0|zZn2+H[13]。
Nh
,
Þß#$犕犜犘1,iTjk。Rl+m
n#$opqr
(犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪)Kst
Zn2+º,犕狋犕犜犘1,RuKz$%,R
vKz"¼
,
R¸Kw<³Äf¢
[14]。
Ro
-Ox#$y.z{
(犛犲犱狌犿犪犾犳狉犲犱犻犻)F|}~
(犜犺犾犪狊狆犻犮犪犲狉狌犾犲狊犮犲狀狊)KBY/0犕犜犘1,,
34êµ犕犜犘1,R2ßOx#$KRÞ
á
,
MTP1R#$o-
Áõ
JKoV]E
[15]。
W
(犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪)犗狊
犕犜犘1,Òêµ犕犜犘1,,t,8
WH5 !,UVR=¸ÁvK¼
,
Sz¨o-÷ Zn2+、Cd2+、
Cu2+ÁFe2+¹[1617]。
}~
(犖犻犮狅狋犻犪狀犪狋犪犫犪犮狌犿)ÒÛßoV
]$
,
jk¢
,
|SkÌ
,
:ÀÒ|o-H34i=½34?
>îp
。Shingu&W}~Kjk¨ 犖狋
犕犜犘1,,t,¶CÌD ¡bcZn
dYef Δ狕狉犮1|ZnH,ªêµ NtMTP1
y8bc¢£æ!
,
¤±² Nt
MTP1ÌDZn2+ ¥/R¢£K¦-§õ
H
[18]。
ïÒ
,
¤±²¨© 犖狋犕犜犘1,R
bcKËÌ
,
SR}~ ÉA$%Ë̪*«
¬
。
T34ÛY犖狋犕犜犘1,m
n
,
vG®犖狋犕犜犘1, ªS¡
¢¨£A¤}~#©K
,
[º¯qrY犖狋
犕犜犘1¡,#©|Zn®Ì,
½34}~|o-Zn2+¡ÊÁY°±²ÍÎ
oV³ÁqrÏÐ
。
1 ´µÁ¶
1.1 RS
η#$´µ½}~
‘NC89’,qrs¸±ß
#
。
0¹©DH5α、uº(犃犵狉狅犫犪犮狋犲
狉犻狌犿狋狌犿犲犳犪犮犻犲狀狊)EHA105 Á # $
pBI121»¼Tqrs½。
1.2 T U
1.2.1 V犚犖犃WXY犮犇犖犃Z[ ¾¾Trizol·
¿
(InvitrogenÀÁ)³ÃÍÄ}~Å RNA,E
PrimeScriptTM RTreagentKitwithgDNAEraser
Æ¡â·¿Ç
(TakaraÀÁ)ơ⧨cD
NA,È8-20℃ÉʽËE。
1.2.2 ;<犖狋犕犜犘1,4B\]67^_ DE
qRTPCR¶Y}~ 犖狋犕犜犘1,(GenBank
ÌâAB20124)R
[ÍKWX,
}~ 犖狋犚犔2(ribosomicproteinL2,GenBankÌ
âZ14081)]½ÉÎ,,ÏÐø$ NtRL2rtF
(5′GTAAGGGAGCGGGTTCAGTCT3′) Á
NtRL2rtR(5′AACGGAGCACCCCTACCTG3′);
NtMTP1rtF(5′TCGAGGTTGTTGGTGGTATTAAA
3′)Á NtMTP1rtR(5′CGATTCTGAAAAACCCAT
AGGAC3′)。uE RealMasterMix(SYBR Green
90317¯ O P,&:犖狋犕犜犘1,|ÆÇ}~Zn®H34
I)·¿Ç({uA¢+/("Ñ)<ÒÀÁ),RBio
RadÀÁ CFX96RealTimeSystem qRT
PCR2Æ。JÓ½:95℃ÔfH3min,95℃fH
10s,60℃ÕÖ30s,40á×j,65℃ØÙ5s,*º
ÚÛ0.5℃"Ü95℃,61á×j。ÝÐuE
2-ΔΔCtÐÞ。
1.2.3 ;<犖狋犕犜犘1,4`犣狀=>aBbc6
7 E1/2HoaglandÖ×¢[19]ß×£A¤}~_
à30dº,¦Ä6áâã,0FÛä_à¡åY
Àÿ0、50、100、200Á400μmol/LZnSO4 æ
1/2HoaglandÖ×¢K,48hºÄ_àòç,
¢èéêºÈ8-80℃ëËE。ÍÄ_àòç
ÅRNA,ơ⧨HÛìcDNA,DEqRT
PCRY犖狋犕犜犘1,Â|z。
1.2.4 ;<犖狋犕犜犘1,4de567fgBhi
uÐ 犖狋犕犜犘1,Óí,DEPrimerv5.0î
ï
,
ÏÐðn PCR ø$ NtMTP1F1(5′ATTT
GATGATTTGGGTCGG3′)Á NtMTP1R1(5′
TGAAACAGATACTGGA ACCG3′),K<
犡犫犪IÁ犛犪犮Iñàíp:¶Hø$ NtMTP1
F2 (5′TCTAGAATGGAGACGCAGAACCTGG
3′)Á NtMTP1R2(5′GAGCTCTTACTCTCTTTC
TATTTGAATGG3′)。£A¤}~cDNA½m
òPCR2Æ,§¨犖狋犕犜犘1,aó,ÆZJ
Ó½94℃ fH15s,55℃ÕÖ15s,72℃ØÙ10
s,30á×j,72℃tYØÙ5min。PCRô$F
狆犈犃犛犢Blunt ("Ñmn-A$ÀÁ)ôõ,¡
¢0¹DH5αºÍÄoBö,÷ø0,+
/ùú<ÒÀÁ¬Ó
。
¬Óûüº
,
E 犡犫犪IÁ
犛犪犮I(ThermoÀÁ)vñàí¬Óûü 犖狋
犕犜犘1,aóÁ#$ pBI121, 犖狋
犕犜犘1,ýå¨CaMV35Sþ8Zºÿ,gH
jk÷ø0,+/ùú<ÒÀÁ¬Ó
。
oB
öEê!
[20]
¡å¨ EHA105Y"Ü
ÝK
。
1.2.5 ;
。
Eÿ<pBI12135S∶∶MTP1oBö
EHA105$£A¤}~¸a,º¸
aÈ8 MS[22]+3%%&+0.8%ú+200μmol/
L()*+,Eß×,!,8(24±1)℃、-.ï
ß×2dº¡/¨ÿ50mg/L0Q123Ù(ka
namycinsulfate,Kan)Á 500 mg/L 45678
(ceftriaxonesodium,Cef) MS+3.0%%&+0.
8%ú+3.0mg/L6BA+0.2mg/LNAAY¢
ß×,!
,
Ú7~15d9:1;ß×,,8!<.ï
¥¦ß×1~2á=。>Y¢ß×,!?@
601.5cmABCv,íÄFC¡/Üÿ50
mg/LKan1/2MS+3.0%%&+0.5%ú
Auß×,!Auß×Á¥¦
,
DÄçè
KanH#©[23]。Eu+꺡/ÜFK,RG
sÉ
(24±1)℃、x¾16h/d.ïß×。
1.2.6 ;<犖狋犕犜犘1,4567dnBopqr
8犣狀=>?@ABst ξ_`a&Hy¡,
gH#©¶
[24],
|3ÙIQ¡/àⅡ(ne
omycinphosphotransferaseⅡ,犖犘犜Ⅱ),aó
2Æ
。
º
,
ÍÄ¥¦¨¡,gH#©
RNA,Æ¡âA=cDNA,DEJyzPCR«¬£
A¤Á¡,#©犖狋犕犜犘1,z,W¥
¦§¨RRNAWX¡,}~#©,
Ûß륦§¨ 犖狋犕犜犘1,K*
#©
。
¦Ä3á犖狋犕犜犘1,K*Z©+F
£A¤}~©+Zn®。4á©+
ßZE15% NaClOLõº,YÀMß8ÿ<
½0、200、500、1000Á2000μmol/LZnSO4 1/2
MSN ß×,!OPß×,EßZQêº,RS_
àA6êëTU
,
RH45{¬y_àu6。
1.2.7 uevwxYyzvTU !qr»
3;VWA$%o¡,ÚáòTÿ3©!
#©
,
ÏÈ3;/{o¡qRTPCR。Zn®
HYK
,
YÀ¬yÚá10©!
_àu6,ÐY
。
DEDPSv7.05îï
XÙ·r,ÐYÁLSDÞoÃY«r
NZ¶J
,
uEExcel2013îï][。
2 ±²FY
2.1 ;<犖狋犕犜犘1,4B\]67^_
YÀÍÄ£A¤}~u
、
v
、¸ 、
·ÁßZÅ
RNA,ơ⧨HÛìcDNA,DEqRTPCR«
¬犖狋犕犜犘1,R}~
KTU。
±²
(
[1)Ä,犖狋犕犜犘1,UVR}~·F
¸K
,
YÀ½uK16.81Á7.26¿,Ru、v
ÁßZKz\%
。
¤±²³
,
}~ 犖狋
犕犜犘1,;<:¶:]。
2.2 犣狀2+{bc犖狋犕犜犘1,4`;
DEqRTPCR| 犖狋犕犜犘1,zY
。
±²÷[2^,FE0μmol/LZnSO4
0131 ! " # $ % & 36_
|¾}~ÂÃ
,犖狋犕犜犘1,zR50
μmol/LZnSO4 }~K`³Äf¢,>
¨100μmol/Lº,Szab"¼,RE
400μmol/LZnSO4 }~K¨»¼,½|¾
3.81¿。¤Ýг,}~犖狋犕犜犘1,
¨Zn2+¹。
2.3 ;<犖狋犕犜犘1,4567dnB|}
gE¸#¡¢£A¤}~
,
ED
[1 }~犖狋犕犜犘1,R
K
Fig.1 Expressionprofileof犖狋犕犜犘1gene
indifferenttissuesoftobacco
0cdcäeNÄÅHZ¶
(犘<0.01,LSD«r)
[2 }~犖狋犕犜犘1,|ZnSO4 °Z
Differentlettersrefertosignificantdifferencesamong
thetreatments(犘<0.01,LSDtest)
Fig.2 Expressionanalysisof犖狋犕犜犘1genein
responsetoZnSO4treatment
§16©ß#©,ÍÄD§ß#©DNA
½mò
,NPTIIF/R½ø$PCRrfgH#
©
,
Ô¯2Æ6Z½857bp。±²³([3),£
A¤}~«Ì2Æ0.K
,
H#©ÌD2Æ0
Ô¯0F.K
,
E«¬012©H#©,gHg
½75%。º,DEJyzPCR|H#©K犖狋
犕犜犘1,WXhHy,¥¦0犖狋
犕犜犘1,z»¼3©#©,YÀ½OE6、
OE9ÁOE10。DEqRTPCR|犖狋犕犜犘1,
R£A¤Á¡,#©KTUyzY
。
±²Ä
(
[4,A),犖狋犕犜犘1,R3©¡,
#©KzÄż8£A¤#©
,
YÀ½£
A¤10.42、7.61Á11.84¿。|犖狋犕犜犘1,
#©¤RS
,
êµRû¸A6TU
,
¡,#©F£A¤ÂÃ
,
ªw<µ0³ÄZ
¶
(
[4,B)。
2.4 ;<犖狋犕犜犘1,4567dn8犣狀=>B
?@AL~
ijKzo-ó|#$uA6ôAk
7]E
,
l
,
#$u6m¸]½Æn#$|o-
HÛáoVop
。
£A¤Á3á 犖狋
犕犜犘1,K* ©+ßZqº,YÀÈ
8ÿ<
BzZnSO4 1/2MSß×,!A
6
,
RS_àA6TU
。
±²Ä
(
[5),A6R
ÿ<0μmol/LZnSO4 1/2MSß×,!£A
¤Á¡,#©w<³ÄZ¶
;
R200μmol/LZn
SO4 ,£A¤}~uA6µ0rYk7,
#©u+ÂãA¤V60s3cm;R
500Á1000μmol/LZnSO4 ,t*£A¤Á
#©A6u¨ÛyJk7
,
ï
#©u+ª*ãA¤6
;
R2000μmol/L
ZnSO4 ,£A¤Á¡,}~#©ui
Ì
û¸A6
,
uA6¨vok7
。
¼lVw
,
ß×,KZnSO4 "¼,£A¤Á¡,}~
M.DL2000;1~16.¡,#©;WT1、WT2.£A¤#©
[3 ¡,#©犖犜犘犜犐犐,PCR«¬
M.DL2000;1~16.Transgenicplants;WT1andWT2.Wildtype
Fig.3 PCRanalysisfor犖犘犜犐犐geneintransgenicplants
11317¯ O P,&:犖狋犕犜犘1,|ÆÇ}~Zn®H34
_àA6u¨ÛyJk7
,
ïR200、500
Á1000μmol/LZnSO4 ,犖狋犕犜犘1,
#©_àubxuãA¤}~_à6
,
³犖狋犕犜犘1,ÆÇ}~|Zn
®H
。
A.¡,#©犖狋犕犜犘1qRTPCR«¬;B.犖狋犕犜犘1,#©¤;WT.£A¤#©;OE6、OE9、OE10.
¡,}~©+
;
[4 犖狋犕犜犘1,#©Hy¤
A.qRTPCRanalysisfor犖狋犕犜犘1relativeexpressionlevelintransgenicplants;B.Thephenotypeof犖狋犕犜犘1geneoverexpression
lines;WT.Wildtype;OE6,OE9andOE10.Transgenicplants;Thesameasbelow
Fig.4 Identificationandthephenotypeof犖狋犕犜犘1geneoverexpressionlines
A~E.
ZnSO4:A.0μmol/L;B.200μmol/L;C.500μmol/L;D.1000μmol/L;E.2000μmol/L;py½2cm;
F.£A¤F¡,#©u6yzY,
Fcdcä¡,©+F£A¤RÛRÄÅHZ¶(犘<0.05,LSD«r)
[5
ZnSO4 45dº£A¤F¡,#©u6ÃY
A~E.ThetreatmentofdifferentconcentrationsofZnSO4:A.0μmol/L;B.200μmol/L;C.500μmol/L;D.1000μmol/L;
E.2000μmol/L;Bar=2cm;F.Quantitativeanalysisoftherootlengthofwildtypeandtransgenicplants.Differentlettersreferto
significantdifferencesbetweentransgenichomozygouslinesandwildtypeunderthesametreatment(犘<0.05,LSDtest)
Fig.5 Comparsionoftherootlengthof45dayoldwildtypeandtransgenicplantsunderthetreatmentofdifferent
concentrationsofZnSO4
2131 ! " # $ % & 36_
3 z ³
#$MTPUVËÌÒÝBKZn2+
&o-/Z¡å¢£&ÜÝ[KI{¥/|
^0Ý}Wͼ#$|o-H
。
N
h
,
iW].^&Þá$ßKjk§¨犕犜犘1
C,
,
ª|¤,ËÌa~å34
,
ï|
}~犖狋犕犜犘1,34Ò8bc É,|
SR}~ ÉA$%ËÌ34«w&
。
T
·r| 犖狋犕犜犘1,:HS|}~Zn
®H¯°34
。
ZnÒ#$ÓÔÕzÖ×ØÙ,SR·、v、¸
Kÿz\¼
,
VÌF#$A6Aé|Ö×-
/ZÔ<î
[25]。
34Ä
,
].^犃狋犕犜犘1
,Áqr 犕狋犕犜犘1,UVR_`¸K
[1314],
W犗狊犕犜犘1,UVR=¸Áv
K
[16]。
T34K
,qRTPCR ±²Ä 犖狋
犕犜犘1,UVR}~·F¸Kðñ,Ru、
vÁßZKz\%
。
¤±²³
:
Û¶ÿ
,
犕犜犘1,R#$
!r¡âWX¼8
r
,
ïÒSReá$ß
Kmn
<^Z¶
;
Û¶ÿ
,
B犕犜犘1,ͼ#
$|o-HUVÒ[
!ÜÝI
{¢¥/Á}¦qµ
,
V̪
¨|o-
/Z
。
h?34³
,Zn2+ÌDYÀͼ
qr犕狋犕犜犘1ÁW犗狊犕犜犘1,RvÁ¸K
WX
[14,16],
T34K}~ 犖狋犕犜犘1,
zZnSO4 "¼"¼,F!<±³
ÂÛä
,
³犖狋犕犜犘1,ÌDÎF}~#© É
Zn2+Z。
Shingu&34³,犖狋犕犜犘1,¶C
ÌD ¡bcZndYef Δ狕狉犮1|Zn
H
[18],
T34犖狋犕犜犘1,R}~K,±
²ÄF£A¤ÂÃ
,
¡,}~#©µ0|Zn
®HÄÅÆÇ
,
©NtMTP1RÍ
¼#$|o-ZnHoV]E。!±
²½ºuE,IJ¶¦Í¼}~o-
®ÌÁGâÍÎoV,
。
!N
:
[1] BARKERAV,PILBEAMDJ.HandbookofPlantNutrition
[M].BocaRaton.TaylorandFrancis:CRCPress,2007:
411413.
[2] PILONSMITSEA H,QUINNCF,TAPKEN W,犲狋犪犾.
Physiologicalfunctionsofbeneficalelements[J].犆狌狉狉犲狀狋犗
狆犻狀犻狅狀犻狀犘犾犪狀狋犅犻狅犾狅犵狔,2009,12:267274.
[3] PRASADAS.Discoveryofhumanzincdeficiency:50years
later[J].犑狅狌狉狀犪犾狅犳犜狉犪犮犲犈犾犲犿犲狀狋狊犻狀犕犲犱犻犮犻狀犲犪狀犱犅犻狅犾狅
犵狔,2012,26:6669.
[4] ,ß,F,&.`|CdÁZn®A
°ZOx]E
[J].~+%,2012,29(6):876882.
CAIZ,MAOPC,TIANXX,犲狋犪犾.Physiologicalresponses
andaccumulationof犅狉狅犿狌狊犻狀犲狉犿犻狊toCdandZnstress[J].
犘狉犪狋犪犮狌犾狋狌狉犪犾犛犮犻犲狀犮犲,2012,29(6):876882.
[5] MONTANINIB,BLAUDEZD,JEANDROZS,犲狋犪犾.Phylo
geneticandfunctionanalysisofthecationdiffusionfacilitator
(CDF)family:improvedsignatureandpredictionofsubstrate
specificity[J].犅犕犆犌犲狀狅犿犻犮狊,2007,8(2):107.
[6] , £.#$|o-ÑH734~[J].!
"#$%&
,2013,30(3):633644.
GONGH M,SHENY.Researchprogressinmechanismsof
planttolerancetozinc[J].犃犮狋犪犅狅狋犪狀犻犮犪犅狅狉犲犪犾犻犗犮犮犻犱犲狀狋犪犾犻犪
犛犻狀犻犮犪,2013,30(3):633644.
[7] GUSTINJL,ZANISMJ,SALTDE.Structureandevolu
tionoftheplantcationdiffusionfacilitatorfamilyofiontrans
porters[J].犅犕犆犈狏狅犾狌狋犻狅狀犪狉狔犅犻狅犾狅犵狔,2011,11(2):76.
[8] RICACHENEVSKYFK,MENGUERPK,SPEROTTOR
A,犲狋犪犾.Rolesofplantmetaltoleranceproteins(MTP)in
metalstorageandpotentialuseinbioforticationstrategies[J].
犉狉狅狀狋犻犲狉狊犻狀犘犾犪狀狋犛犮犻犲狀犮犲,2012,4(7):144.
[9] , ,¡zl.Ñ¡Ê,34~[J].!"
#$%&
,2005,25(10):21392144.
WUTC,FANGB,WANGJA.Researchadvancesaboutthe
genesofzinctransportingproteins[J].犃犮狋犪犅狅狋犪狀犻犮犪犅狅狉犲犪犾犻
犗犮犮犻犱犲狀狋犪犾犻犪犛犻狀犻犮犪,2005,25(10):21392144.
[10] KAWACHIM,KOBAEY,MIMURAT,犲狋犪犾.Deletionof
ahistidinerichloopofAtMTP1,avacuolarZn(2+)/H(+)an
tiporterof犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪,stimulatethetransportac
tivity[J].犜犺犲犑狅狌狉狀犪犾狅犳犅犻狅犾狅犵犻犮犪犾犆犺犲犿犻狊狋狉狔,2008,283
(13):83748383.
[11] PODARD,SCHERERJ,NOORDALLYZ,犲狋犪犾.Metalse
lectivitydeterminantsinafamilyoftransitionmetaltrans
porters[J].犜犺犲犑狅狌狉狀犪犾狅犳犅犻狅犾狅犵犻犮犪犾犆犺犲犿犻狊狋狉狔,2012,
31317¯ O P,&:犖狋犕犜犘1,|ÆÇ}~Zn®H34
287(5):31853196.
[12] CHAOY,FUD.Kineticstudyoftheantiportmechanismof
an犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻zinctransporter,ZitB[J].犜犺犲犑狅狌狉狀犪犾
狅犳犅犻狅犾狅犵犻犮犪犾犆犺犲犿犻狊狋狉狔,2004,279(13):1204312050.
[13] BLOSST,CLEMENSS,NIESDH.Characterizationofthe
ZAT1pzinctransporterfrom犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊狋犺犪犾犻犪狀犪inmicro
bialmodelorganismsandreconstitutedproteoliposomes[J].
犘犾犪狀狋犪,2002,214(5):783791.
[14] CHENM,SHENX,LID,犲狋犪犾.Identificationandcharac
terizationofMtMTP1,aZntransporterofCDFfamily,in
the犕犲犱犻犮犪犵狅狋狉狌狀犮犪狋狌犾犪[J].犘犾犪狀狋犘犺狔狊犻狅犾狅犵狔犪狀犱犅犻狅
犮犺犲犿犻狊狋狉狔,2009,47(11/12):10891094.
[15] GUSTINJL,LOUREIROME,KIMD,犲狋犪犾.MTP1de
pendentZnsequestrationintoshootvacuolessuggestsdual
rolesinZntoleranceandaccumulationinZnhyperaccumulat
ingplants[J].犜犺犲犘犾犪狀狋犑狅狌狉狀犪犾,2009,57(6):1116
1127.
[16] LANHX,WANGZF,WANGQH,犲狋犪犾.Characteriza
tionofavacuolarzinctransporterOZT1inrice(犗狉狔狕犪狊犪狋犻狏犪
犔.)[J].犕狅犾犲犮狌犾犪狉犅犻狅犾狅犵狔犚犲狆狅狉狋狊,2012,40(2):1201
1210.
[17] ¡¢.W-/Z¡Ê ,犗狊犕犜犘1jkFËÌ
Y
[D]..Ñ:.Ñ0%,2005.
[18] SHINGUY,KUDOT,OHSATOS,犲狋犪犾.Characterizationof
genesencodingmetaltoleranceproteinsisolatedfrom犖犻犮狅狋犻犪狀犪
犵犾犪狌犮犪and犖犻犮狅狋犻犪狀犪狋犪犫犪犮狌犿[J].犅犻狅犮犺犲犿犻犮犪犾犪狀犱犅犻狅狆犺狔狊犻犮犪犾
犚犲狊犲犪狉犮犺犆狅犿犿狌狀犻犮犪狋犻狅狀狊,2005,331(2):675680.
[19] HOAGLANDDR,ARNONDI.Thewaterculturemethod
forgrowingplantswithoutsoil[J].犌犪犾犻犳狅犿犻犪犃犵狉犻犮狌犾狋狉狌犪犾
犈狓狆犲狉犻犿犲狀狋犛狋犪狋犻狅狀犆犻狉狌犾犪狉,1950,347:357359.
[20] RHODESCA,PIERCEDA,METLLERIJ.Geneticaly
transformed maizeplantsfrom protoplasts[J].犛犮犻犲狀犮犲,
1988,240:204207.
[21] HORSEHRB,FRYJE,HOFFMANNNI,犲狋犪犾.Asimple
andgeneralmethodfortransferringgenesintoplants[J].
犛犮犻犲狀犮犲,1985,227:12291231.
[22] MURASHIGET,SKOOGF.Arevisedmediumforrapid
growthandbioassayswithtobaccotissueculture[J].犘犺狔狊犻狅
犾狅犵犻犪犘犾犪狀狋犪狉狌犿,1962,15(3):473497.
[23] ¡ £,¤A,¥<¦,&.uº犇32,¡¢
}~.ï34
[J].!"#$%&,2009,29(6):1104
1110.
WANGF,XINGXS,MAYZ,犲狋犪犾.Studyonthecondi
tionsoftransferring 犇32geneintotobacco mediatedby
犃犵狉狅犫犪犮狋犲狉犻狌犿狋狌犿犲犳犪犮犻犲狀狊[J].犃犮狋犪犅狅狋犪狀犻犮犪犅狅狉犲犪犾犻犗犮犮犻
犱犲狀狋犪犾犻犪犛犻狀犻犮犪,2009,29(6):11041110
[24] _`a,¼§¨,©ª«,&.¬犎犘1Á犎犘2,RNAE
® G®¡¢
[J].ZEFjkA$%&,
2009,15(5):591595.
LIUJK,GAO YF,NIU XL,犲狋犪犾.Constructionand
transformationofCoRNAivectoroftomato犎犘1and犎犘2
genes[J].犆犺犻狀犲狊犲犑狅狌狉狀犪犾狅犳犃狆狆犾犻犲犱犪狀犱犈狀狏犻狉狅狀犿犲狀狋犪犾
犅犻狅犾狅犵狔,2009,15(5):591595.
[25] ¯ °,-`Ê.#$|Ñ
ʱðñAFYZ7
7
[J].#$Ö×F²µ%&,2009,15(1):225235.
WANGH,JINJY.Thephysiologicalandmolecularmecha
nismsofzincuptake,transport,andhyperaccumulationin
plants:areview[J].犘犾犪狀狋犖狌狋狉犻狋犻狅狀犪狀犱犉犲狉狋犻犾犻狕犲狉犛犮犻犲狀犮犲,
2009,15(1):225235.
(
!"
:
#$%
)
4131 ! " # $ % & 36_