全 文 ：书西北植物学报!
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文章编号$
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收稿日期$
!"#*(#"(!"
&修改稿收到日期$
!"#*(#!(#*
基金项目$安徽省教育厅重点项目"
12!"#)3"*,
#&安徽科技学院自然科学项目"
456!"#%%,)
#&安徽科技学院第十二批大学生创新基金
作者简介$胡能兵"
#7"&
#!男!博士!副教授!主要从事园艺植物组织培养及育种工作
8(9:.;
$
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?
@.0
?!
#!$+AB9
高温胁迫对不同热敏型辣椒同工酶
及
$%&
甲基化的影响
胡能兵!隋益虎!舒英杰!何克勤
"安徽科技学院 农学院!安徽凤阳
!%%#""
#
摘
!
要$分别以耐热型晚熟紫色辣椒(
,"%$
)和热敏型早熟绿色辣椒(
7"*"
)为材料!研究了
)"C
高温胁迫对其
DEF
同工酶以及
FG3
甲基化表达的影响结果显示$"
#
#在
DEF
同工酶表达方面!未经高温胁迫的辣椒(
,"%$
)比其它
处理多出
#
条带!而同工酶活性在
!
种辣椒中呈现不同的变化趋势"
!
#随着高温胁迫时间延长!辣椒(
,"%$
)
FG3
无甲基化和全甲基化比率增加!半甲基化和总甲基化比率降低!而辣椒(
7"*"
)只有高温处理
,H
"
I
,
#的甲基化水
平变化与之类似!但半甲基化和全甲基化比率的绝对值远低于辣椒(
,"%$
)"
%
#高温处理
,H
的
FG3
甲基化模式
中!辣椒(
,"%$
)去甲基化
6
型条带比率较高!辣椒(
7"*"
)以超甲基化
J
型条带为主实验表明!高温胁迫下紫色辣
椒(
,"%$
)的
DEF
同工酶活性恢复!半甲基化水平大幅下降和全甲基化水平快速上升以及去甲基化等变化可能与
其耐高温胁迫特性相关
关键词$辣椒&高温胁迫&
DEF
同工酶&
FG3
甲基化&去甲基化
中图分类号$
K7)*+,
文献标志码$
3
(()*+"(,)-+.+/)00"120")13
4
5)-1!$%&6)+7
4
8-+#"1
"($#(()/)1+,)-+90)10#+#:);)
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U
;:T.B0
&
<
UX
B9>T<
U
;:T.B0
!!
高温是植物生长发育过程中最常见的环境胁迫
因子之一!严重影响植物正常生长*产量以及品质
等+#,特别是随着全球性温室效应的持续加剧!严
重高温逆境给全球种植业带来挑战+!,以中国为
例!夏秋之际的高温会严重影响全国绝大部分地区
的蔬菜生产和供应!导致蔬菜产量急剧下降!价格不
断攀升
茄科植物是中国的主要蔬菜作物!尤以辣椒最
受喜爱辣椒原产南美洲地区!是一种喜温怕热的
蔬菜+%,辣椒生长的适宜温度为
!"
"
%"C
!超过
%!C
就会发生高温胁迫+),邹学校研究表明!在
)"
C
高温处理下!辣椒的发芽率*发芽势*发芽指数以
及生长速率均有所下降!但品种间存在差异!表现为
热敏品种降幅更大+*,&
D:
?
:9:/
等研究表明!耐热品
种在不同温度处理下!其株高*根长*茎粗等降幅小
于热敏品种+$,&此外!热胁迫主要导致辣椒(三落)
"落叶*落花*落果#而影响产量!超过
%"C
高温会使
辣椒座果率降至
#"]
"
!"]
+
*
,

目前!研究者已对辣椒的耐热性开展了相关的
应用及基础研究+)!,(#",此外!安徽科技学院辣椒课
题组以当地的紫色辣椒为材料!在育种方面做了有
益的工作!即紫色辣椒自交或作为母本用于杂交的
座果率要极显著高于绿色品种+##,结合本课题组
以及前人在紫色辣椒的研究成果!说明紫色辣椒具
有耐高温强光的特性!明确其在抗性和品质育种方
面的巨大潜能+#!(#%,然而!迄今为止尚未有从分子
水平探索紫色辣椒耐高温的机制
本实验以耐热型晚熟紫色辣椒(
,"%$
)和热敏型
早熟绿色辣椒(
7"*"
)为材料!以
)"C
为高温胁迫条
件!在该条件下分别对上述不同热敏型辣椒进行不
同时间的处理!通过比较(
,"%$
)和(
7"*"
)在同工酶*
甲基化水平和模式的变化!明确紫色辣椒适应高温
胁迫的生理生化机理!为后续克隆与高温胁迫相关
的序列片段*进而发掘耐高温胁迫的关键基因奠定
基础
#
!
材料和方法
@+@
!
供试材料
耐热型晚熟紫色辣椒(
,"%$
)和热敏型早熟绿色
辣椒(
7"*"
)分别由安徽科技学院辣椒课题组多年选
育*纯化而成其中!紫色辣椒(
,"%$
)开花结果期叶
片*茎秆呈浓紫色!果实在整个生育期会经历紫*绿
相间
(
紫色
(
紫*红相间*红色等
)
个过程!具体见相
关文献+#!,
@+A
!
高温胁迫处理
!"#)
年
##
月初在温室内播种育苗!待辣椒长
至
$
叶
#
心期!将幼苗移至育苗基质中炼苗
#"H
左
右置于恒温培养箱中!每天
)"C
处理
%<
!分别于
处理第
"
*
#
*
%
**
,
天取整株叶片!取样时间为处理
后
!<
!每个样品随机取
%
株!分别标记为
61
*
I
#
*
I
%
*
I
*
*
I
,
一部分叶片用于
DEF
同工酶提取!其
余叶片则置于
&!"C
条件下保存!用于后续
FG3
提取
@BC
!
;D$
同工酶检测
按照叶片重量
^
提取缓冲液体积"
+"$*9B;
%
_IS./(
柠檬酸!
X
L+!
#
#`^ !
的比率在冰浴条件
下研磨!
#""""S
%
9.0
转速
)C
离心
*9.0
!置于
&!"C
条件下保存备用浓缩胶和分离胶浓度分
别为
)]
和
,]

DEF
电泳时间为
!+*<
!电泳完毕
后!采用联苯胺法进行染色+#),
@+E
!
甲基敏感扩增多态性"
aN3D
#分析
FG3
提取采用改良
6I3J
法+,提取的
FG3
分别经过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计法检测!
各处理
FG3
调整为一致浓度后用于后续试验
aN3D
试验步骤等参照
5>
U
0:(_b
X
>Z
等+#*,方法!主
要包括酶切*连接*预扩增和选择性扩增等
)
个步
骤
aN3D
的接头和引物序列见表
#
!所用双酶切
组合为
!"#5
#
%
$
%
&
$
"
(
%
#
#!其中选择性扩增
表
@
!
接头和引物序列
I:@;>#
!
N>
Q
=>0A>BR:H:
X
TBS/:0H
X
S.9>S/
接头%引物
3H:
X
TBS
%
X
S.9>S
序列
N>
Q
=>0A>
!"#5
#
"
8
#"
*c
"
%c
#
$
%
&
$
)(
%
#
"
La
#"
*c
"
%c
#
接头
3H:
X
TBS
6I6dI3d36Id6dI366
33IIddI36d63dI6
d3I63Id3dI66Id6I
6d3d63dd36I63Id3
预扩增引物
DS>(:9
X
;.R.A:T.B0
X
S.9>S
d36Id6dI36633II63
"
8"
#
3I63Id3dI66Id6I6ddI
"
L"
#
选择性扩增引物
N>;>AT.V>:9
X
;.R.A:T.B0
X
S.9>S
d36Id6dI36633II6363
"
8#
#
d36Id6dI36633II6336
"
8!
#
d36Id6dI36633II633d
"
8%
#
d36Id6dI36633II636I
"
8)
#
d36Id6dI36633II636d
"
8*
#
d36Id6dI36633II6366
"
8$
#
3I63Id3dI66Id6I6ddI33
"
L#
#
3I63Id3dI66Id6I6ddI36
"
L!
#
3I63Id3dI66Id6I6ddI66
"
L%
#
3I63Id3dI66Id6I6ddII6
"
L)
#
!%#
西
!
北
!
植
!
物
!
学
!
报
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
%$
卷
为
8#
"
8$
与
L#
"
L)
共
!)
个引物随机组合采
用银染法染色+#$,
@+F
!
数据统计
对双酶切后的条带数量和条带的类型进行统计
与分析其中!
#
个酶切识别位点即为
#
条带!条带
的有无分别用
#
和
"
来表示
!
!
结果与分析
AB@
!
高温胁迫对
A
种辣椒
;D$
同工酶表达的影响
DEF
同工酶是一族能够利用
L
!
E
!
氧化供氢
体的酶!在高等植物中广泛存在!而高温胁迫会引起
同工酶类型和活性的变化!且该变化会随着种质的
不同而有所差异本试验所有处理中!耐热型种质
(
,"%$
)的
61
表达了最多的

个谱带!在电场作用
下其迁移率
5R
值分别是
"+"*
*
"+!
*
"+)*
*
"+*7
*
"+$%
*
"+$,
*
"+,"
*
"+,)
!依次标记为
:
*
@
*
A
*
H
*
>
*
R
*
?
*
<
"图
#
#!其它处理均缺失
#
条
>
带!表现为种质类
型和处理时间的不同引起的
DEF
同工酶类型上的
差异&在活性较强的共有谱带
H
*
R
*
?
*
<
上!随着高温
胁迫时间的延长!耐热型种质(
,"%$
)的
DEF
活性经
历先下降"
#H
#*后迅速恢复"
%H
#并逐渐稳定"
*H
*
,
H
#的过程!活性最强出现在
61
!最弱为
I
#
处理&与
耐热型种质(
,"%$
)表现不同的是!热敏型种质
(
7"*"
)
DEF
同工酶活性初期先迅速升高"
#H
#!后
显著下降"
%H
*
H
#并逐渐恢复"
,H
#!活性最强出现
在
I
#
处理!最弱为
I
*
处理总体而言!在
!
种不
同热敏性辣椒材料中!未经高温处理时"
H
#!耐热
型种质(
,"%$
)的
DEF
同工酶活性要显著高于热敏
61
*
I
#
*
I
%
*
I
*
*
I
,
分别为
)"C
处理"
%<
%
H
#
"
*
#
*
%
**
,H
&下同
图
#
!
高温胁迫后(
,"%$
)和(
7"*"
)
DEF
同工酶表达
61
!
I
#
!
I
%
!
I
*
!
I
,
/T:0HRBSTS>:T9>0T/TS>:T>H=0H>S)"C
"
%<
%
H
#
RBS"
!
#
!
%
!
*
!
,H
!
S>/
X
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U
&
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W.
?
+#
!
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X
S>//.B0
BR
X
>
XX
>S
(
,"%$
)
:0H
(
7"*"
)
性种质(
7"*"
)!胁迫初期"
#H
#在
!
份种质呈现相反
的变化趋势!处理的中后期"
%
"
,H
#种质(
,"%$
)的
DEF
同工酶活性趋于稳定!而种质(
7"*"
)的
DEF
同工酶活性仍呈现剧烈变化"
I
*
处理#
ABA
!
辣椒叶片
$%&
质量检测
#"
个处理的辣椒叶片
FG3
用
"+]
的琼脂糖检
测其浓度和质量!其电泳结果见图
!
提取的
FG3
呈单一条带!无降解现象&进一步用紫外分光光度计
检测表明提取的
FG3
纯度较高!将上述处理的
FG3
浓度统一调整到
!"0
?
%
%
_
用于后续实验
A+C
!
高温胁迫对
A
种辣椒甲基化水平的影响
本实验中!运用同裂酶
$
%
&
$
*
(
%
#
与
!"#5
#
的组合对不同处理进行双酶切!尽管同裂酶
$
%
&
$
和
(
%
#
都能够识别并切割基因组中的
66dd
序列!但对于该序列位点出现的胞嘧啶甲基化!两者
的反应不同!会产生
%
种不同甲基化类型$类型
O
的
两种酶切组合
!"#5
#
($
%
&
$
和
!"#5
#
((
%
#
都
有条带!为无甲基化位点&类型
$
的
!"#5
#
($
%
&
$
有带而
!"#5
#
((
%
#
无条带!表明在该位点单链
外甲基化!为半甲基化位点&类型
&
的
!"#5
#
($
%
&
$
无带而
!"#5
#
((
%
#
有带!表明在该位点双链
内甲基化!为全甲基化位点"图
%
#
为比较高温胁迫下耐热型辣椒(
,"%$
)和热敏型
辣椒(
7"*"
)全基因组
FG3
甲基化水平的变化!实
验共利用
!)
个引物组合对上述不同处理的
FG3
样品进行了
aN3D
分析由结果"表
!
#可知!辣椒
(
,"%$
)各处理扩增的总条带数为
!7)
"
)"!
!甲基化
条带总数为
#$
"
!#%
!总甲基化条带比率为
)]
"
$%+%]
&其中的半甲基化条带比率为
#7+]
"
*"+$]
!全甲基化条带比率为
#!+$]
"
%$+*]
&辣
椒(
7"*"
)各处理扩增的总条带数为
!7"
"
))#
!甲基
化条带总数是
#$*
"
!*!
!总甲基化条带比率为
*%+*]
"
$"+!]
&其中的半甲基化条带比率为
!!+%]
"
!$+]
!全甲基化条带比率为
!,+]
"
%)+]

进一步比较不同处理与
61
的
FG3
甲基化水
平的差异可知!在辣椒(
,"%$
)中!各处理无甲基化*
全甲基化比率都高于
61
!但半甲基化和总甲基化
图
!
!
FG3
质量电泳图片
W.
?
+!
!
FG3>;>ATSB
X
/./9:
X
%%#
#
期
!!!!!!!!!!
胡能兵!等$高温胁迫对不同热敏型辣椒同工酶及
FG3
甲基化的影响
比率要低&在辣椒(
7"*"
)中!只有
I
,
处理与(
,"%$
)
各处理表现类似的变化规律!但其绝对值!尤其是半
甲基化和全甲基化比率的数值要远低于辣椒
(
,"%$
)!而辣椒(
7"*"
)其它处理的变化则不尽相同
该结果表明!随着热锻炼时间的延长"
,H
#!热敏型
辣椒(
7"*"
)对高温胁迫有了一定的忍受能力!但其
耐受性仍然远低于耐热型辣椒(
,"%$
)
L
和
a
分别表示由引物组合
!"#5
#
($
%
&
$
和
!"#5
#
((
%
#
切割的位点!其中!类型
#
是无甲基化位点!类型
$
为
半甲基化位点!类型
&
是全甲基化位点
图
%
!
引物
8!L!
在辣椒(
,"%$
)中检测的不同组合甲基化类型
_>TT>SL:0Ha.0H.A:T>HT<>>0Z
U
9>/.T>/T<:TY>S>A=TY.T<
!"#5
#
($
%
&
$
:0H!"#5
#
((
%
#
!
:0HT
UX
>
#
!
$
!
&
Y>S>/.T>/
Y.T<0B0(9>T<
U
;:T.B0
!
<:;R9>T<
U
;:T.B0:0HR=;(9>T<
U
;:T.B0
!
S>/
X
>AT.V>;
U
W.
?
+%
!
a>T<
U
;:T.B0
X
:TT>S0/T<:TY>S>H>T>AT>H@
U
T<>
X
S.9>SAB9@.0:T.B08!L!.0
X
>
XX
>S
(
,"%$
)
A+E
!
高温胁迫对
A
种辣椒甲基化模式的影响
根据高温胁迫辣椒基因组所导致的甲基化状
态!以
61
和
I
,
进行对比!在
!
种辣椒中共发现
%
大类
#%
种带型
3
类为单态性条带!即
I
,
与
61
的甲基化位点相同!表明高温胁迫并未引起不同处
理间甲基化状态的改变其中!
3#
*
3!
*
3%
依次为
无甲基化类型*半甲基化类型和全甲基化类型
J
类为超甲基化类型!即与
61
相比!高温胁迫处理
I
,
会引起甲基化水平增加!增加的类型又细分为
J#
*
J!
*
J%
*
J)
*
J*
等
*
类&
6
类为去甲基化类型!表
明高温胁迫处理
I
,
会诱导甲基化水平的降低!降
低的类型又细分为
6#
*
6!
*
6%
*
6)
*
6*
等
*
类
为检测高温胁迫下辣椒(
,"%$
)和辣椒(
7"*"
)的
全基因组
FG3
甲基化模式的变化!利用
!)
个引物
组合对对照和
I
,
处理的样品进行了
aN3D
分析和
比较!结果见表
%
和图
)
在辣椒(
,"%$
)的总条带为
)"
时!
3
*
J
*
6
型条带的数目分别为
#$)
*
$!
和
!*)
条!
3
*
J
*
6
型条带比率分别为
%)+!]
*
#%]
和
*!+]
&在辣椒(
7"*"
)的总条带为
*%7
时!
3
*
J
*
6
型
条带的数目分别为
!$*
*
#,,
和
7,
条!
3
*
J
*
6
型条
带比率分别为
)7+!]
*
%!+]
和
#]

上述不同类型条带中!除了
3
型条带为对照和
I
,
无差异性条带外!
J
型*
6
型均为与高温胁迫相关
的
FG3
甲基化多态性带型比较辣椒(
,"%$
)和辣椒
(
7"*"
)在细分类型的不同可知!辣椒(
,"%$
)以
6
型条
带居多!表明是以去甲基化为主&而辣椒(
7"*"
)以
J
型条带居多!表明是以超甲基化为主上述结论表
明!在高温胁迫条件下!
FG3
去甲基化而不是超甲基
化可能是紫色辣椒耐高温胁迫的原因之一
表
A
!
A
种辣椒不同处理的
$%&
甲基化水平
I:@;>!
!
FG39>T<
U
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条带类型
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UX
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,"%$
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甲基化条带总数
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扩增条带总数
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无甲基化比率
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半甲基化比率
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处理的甲基化状态比较
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条带类别
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类型
I
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带型
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UX
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I
,
L
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a
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甲基化模式
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X
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61
I
,
位点数目
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不同类型总条带数"比率#
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单态性条带
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超甲基化条带
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UX
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UX
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9
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66dd
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注$
6+
无甲基化的胞嘧啶&
96+
有甲基化的胞嘧啶&
6+
甲基化不明确的胞嘧啶
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$
6+6
U
TB/.0>Y.TT<
U
;:T.B0
&
96+6
U
TB/.0>Y.T<9>T<
U
;:T.B0
&
6+6
U
TB/.0>Y.T<.0H>R.0.T>9>T<
U
;:T.B0+
图
)
!
用引物
8*L)
检测辣椒(
7"*"
)的
61
与
I
,
的甲基化状态
W.
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)
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X
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%
!
讨
!
论
在中国中东部以及沿海地区!每年的
$
"

月份
会有连续多天超过
%%C
以上的高温天气+#,,此时
正值非设施辣椒的开花结果期!辣椒在高温胁迫条
件下会发生一系列的生长障碍!进而导致其(三落)
现象严重*出现大面积的衰老和死亡因此!亟需育
种研究者在筛选耐高温胁迫的辣椒种质的同时!从
不同角度分析辣椒耐高温胁迫的机理!以快速发掘
抗性种质并予以改良和应用
目前!有关辣椒应对高温胁迫的生理报道中!姚
元干认为辣椒耐热性与电解质外渗率和
aF3
含量
呈负相关!与
DEF
*
NEF
活性以及
DSB
含量呈正相
关+#,&马宝鹏得出-
NEF
*
DEF
活性以及
DSB
和
aF3
含量可作为辣椒耐热鉴定的辅助生理指标!
且耐热品系的
NEF
和
DEF
活性均显著高于热敏品
系.的结论+7,&而何铁光的研究与之有所差异!其研
究表明!随着处理时间的延长!
NEF
和
DEF
活性均
表现先下降后上升趋势!其中热敏材料下降幅度高
于耐热材料!上升幅度则相反+#",本研究中!未经
高温处理时"
H
#!耐热型种质(
,"%$
)的
DEF
同工
酶活性要显著高于热敏性种质(
7"*"
)!随着高温胁
迫时间的延长!辣椒(
,"%$
)的
DEF
同工酶活性经历
先下降"
#H
#*后迅速恢复"
%H
#并逐渐稳定"
*H
*
,
*%#
#
期
!!!!!!!!!!
胡能兵!等$高温胁迫对不同热敏型辣椒同工酶及
FG3
甲基化的影响
H#的过程!而热敏型种质(
7"*"
)则在胁迫初期"
#H
#
和后期"
,H
#表现较高的同工酶活性但总体上!耐
热种质的
DEF
活性要高于热敏种质!且具有较强的
DEF
活性恢复能力因此!综合前人的研究成果以
及本研究的结论!以一段时间内"如本例中的
,H
#辣
椒
DEF
平均活性的强弱作为判断耐热和热敏的指
标!可能更具有客观性
研究表明!植物核基因组中位于
6d
*
6Ld
和
6LL
序列"
L
代表
3
或
I
或
6
碱基#中的胞嘧啶
碱基存在甲基化现象!在植物正常生长*细胞分化*
基因组印记和染色质失活等过程发挥着重要的作
用+#7(!%,目前!高效液相色谱法"
LD_6
#*亚硫酸氢
盐法和甲基敏感扩增多态性"
aN3D
#技术是
%
种最
常见的检测基因组甲基化的方法!其中以
aN3D
技
术多态性高*引物设计简单*通用性强而得以广泛运
用本试验的
!)
个引物组合除了
8)L)
外!其余
!%
个组合都扩增出条带!而该引物在棉花*石斛等
多种作物中都得以成功运用+!)(!$,本试验中!
!
种
辣椒的基因组
66dd
位点的甲基化比率变化范围
为
*"]
"
$%+%]
!其中!以耐热型辣椒(
,"%$
)比热
敏型辣椒(
7"*"
)变化幅度要宽!该变化是否存在一
定的规律性!目前尚无定论+!,,
此外!植物生长发育过程中会遭遇诸多生物以
及非生物胁迫!而基因组胞嘧啶甲基化的变化是植
物应付各种不同类型胁迫的防御机制+!,
FG3
甲
基化的产生是
FG3
甲基化酶和去甲基化酶共同作
用的结果!高水平的甲基化使基因保持抑制!低水平
甲基化则可以增强基因的表达!这可能是由于通过
移除诸多不合理位点的甲基化!重新选择
FG3
位
点安置甲基化!从而激活特定基因以应答逆境胁
迫+!7(%",盐胁迫条件下!油菜*棉花中耐盐品系的甲
基化位点数多于敏感品系!但去甲基化位点数大于
敏感品系+%#(%!,&在水稻中的研究表明!基因的去甲基
化不是随机发生的+%%,&温度胁迫中!陈芳等以小麦
种子和幼苗为材料进行超低温保存!该材料经低温
处理后发生了不同程度的甲基化变化!但去甲基化
变化是主要趋势+%),&高贵珍等以油菜种子进行的热
胁迫实验表明!耐热品种的去甲基化条带数多于不
耐热品种!但甲基化条带数则相反!推测
FG3
去甲
基化可能与植物对热胁迫的适应起到积极作用+%*,&
生物胁迫中!
_>
等研究得出缺失
%
个
FG3
去甲基
化酶
SHH
的拟南芥突变体
\I6B;("
易受尖孢镰刀
菌"
*+(&,-+.#/
0
(
%
#,+.
#的感染!在鉴定的
%)
个
基因中有
!,7
个活性发生了下调!比率达到
"+!]
!
揭示植物
FG3
去甲基化与抗性之间的积极关
系+%$,&病毒侵染会使烟草
FG3
甲基化水平显著升
高!但与抗病性相关的亮氨酸重复序列区域却发生
了低甲基化+%,,本试验比较了耐热型辣椒(
,"%$
)
和热敏型辣椒(
7"*"
)在
)"C
高温胁迫下的甲基化
水平变化其中!辣椒(
,"%$
)中各处理的无甲基化*
全甲基化比率升高!而半甲基化和总甲基化比率降
低&在辣椒(
7"*"
)中只有
I
,
处理与(
,"%$
)各处理
表现类似的变化规律!但其绝对值!尤其是半甲基化
和全甲基化的数值要远低于辣椒(
,"%$
)该结果表
明!随着热锻炼时间的延长"
,H
#!热敏型辣椒
(
7"*"
)对高温胁迫有了一定的忍受能力!但其耐受
性仍然远低于耐热型辣椒(
,"%$
)该结论与徐小万
等研究结果中关于-高温胁迫
)H
后耐高温辣椒总
甲基化率和全甲基化率有所下降*热敏辣椒总甲基
化率和全甲基化率有所上升.存在差异+%,其差异
的原因除了所用材料的不同外!本实验结论是基于
材料
,H
的连续处理结果!且所用引物也更多在
甲基化模式变化上!辣椒(
,"%$
)以
6
型条带居多!
表明是以去甲基化为主&而辣椒(
7"*"
)以
J
型条带
居多!是以超甲基化为主该结论与前人诸多的研
究结论较为一致!即去甲基化可能积极参与紫色辣
椒耐高温胁迫
综上所述!本研究探讨了
)"C
高温胁迫对耐热
型晚熟紫色辣椒(
,"%$
)和热敏型早熟绿色辣椒
(
7"*"
)的
DEF
同工酶以及
FG3
甲基化表达的影
响结果表明!同工酶类型和活性在不同种质以及
不同处理阶段存在差异!未经高温胁迫的耐热型辣
椒(
,"%$
)比其它处理多了
#
条
5R
值为
"+$%
的
>
带!而在胁迫条件下其
DEF
同工酶恢复能力要显著
高于热敏型辣椒(
7"*"
)&随着高温胁迫时间的延长!
辣椒(
,"%$
)的无甲基化和全甲基化比率增加!半甲
基化和总甲基化比率降低!而辣椒(
7"*"
)只有
I
,
处理的甲基化水平变化与之类似!但半甲基化和全
甲基化的绝对值要远低于辣椒(
,"%$
)&甲基化模式
分析表明辣椒(
,"%$
)去甲基化
6
型条带比率较高!
而辣椒(
7"*"
)则以超甲基化
J
型条带为主上述
结论中!
DEF
同工酶活性的恢复!半甲基化水平的
大幅下降和全甲基化水平的快速上升以及去甲基化
可能与紫色辣椒耐高温胁迫相关
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参考文献!
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徐小万!雷建军!李
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颖!等
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基于数学模型的辣椒芽期耐高温
多湿性综合评价方法+
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中国农业科技导报!
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高亮之!金之庆
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全球气候变化和中国的农业+
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江苏农业学
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紫色辣椒再生体系的建立及种质亲缘关系分析+
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辣椒耐热性鉴定体系的建立及高温胁迫下花药基因表
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辣椒幼苗对高温胁迫的生长生理响应
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紫色辣椒色素性状观察及其叶片
色素提取体系优化+
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