全 文 ：植物病理学报
ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ　 ４４(１): ８￣１６(２０１４)
收稿日期: ２０１３￣０１￣２５ꎻ 修回日期: ２０１３￣１０￣０７
基金项目: 河南省农业科学院院科技发展专项资金ꎻ “十二五”科技支撑计划重大项目(２０１２ＢＡＤ０４Ｂ０７)
通讯作者: 郝俊杰ꎬ副研究员ꎬ主要从事玉米病害研究ꎻ Ｔｅｌ: ０３７１￣６５７１７２０８ꎬ Ｅ￣ｍａｉｌ: ｈａｏｊｊｄｓ＠１６３.ｃｏｍ
邓士政ꎬ博士ꎬ主要从事农作物品种试验研究ꎻ Ｔｅｌ: ０３７１￣８６１５０５８５ꎬ Ｅ￣ｍａｉｌ: ｈｅｎａｎｃｏｒｎ＠１６３.ｃｏｍ
第一作者: 孙 静ꎬ女ꎬ河南开封人ꎬ助理研究员ꎬ主要从事玉米病害研究ꎻ Ｅ￣ｍａｉｌ: ｓｕｎｊｉｎｇｍｐｐ＠１２６.ｃｏｍꎮ
河南省玉米茎基部镰刀菌的形态和分子鉴定
孙 静１ꎬ 谢淑娜１ꎬ 刘佳中１ꎬ 刘京宝２ꎬ 郝俊杰１∗ꎬ 邓士政３∗
( １河南省农业科学院植物保护研究所 /农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室 /河南省农作物病虫害防治重点实验室ꎬ
郑州 ４５０００２ꎻ ２ 河南省农业科学院粮食作物研究所ꎬ 郑州 ４５０００２ꎻ ３ 河南省种子管理站ꎬ 郑州 ４５００４７)
摘要:为明确河南省玉米茎基部镰刀菌(Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｐ.)的种群组成及分布ꎬ２０１１ 和 ２０１２ 年ꎬ我们采集了河南省 １４ 个地市
４２个县(区)的玉米茎基腐病病样ꎬ分离得到 １６３个镰刀菌单孢菌株ꎮ 首先对菌株进行了形态学鉴定ꎬ在此基础上使用镰
刀菌种特异性引物进行了 ＰＣＲ检测ꎻ对于部分 ＰＣＲ检测未能确认的菌株进行了 Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ １￣α(ＴＥＦ￣１α)
基因片段测序及 ＢＬＡＳＴ分析ꎬ最终将 １６３个菌株鉴定到种ꎮ 结果表明在 １６３个菌株中ꎬ禾谷镰刀菌 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ为优势
种ꎬ占 ４４.２％(７２株)ꎬ其次为层出镰刀菌 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ和轮枝镰刀菌 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎬ分别占 ２８.８％(４７株)和 ２７􀆰 ０％(４４
株)ꎮ 豫西北的焦作(４７.６％)、洛阳(５０.０％)及豫中的许昌(４５.５％)均以 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 为主ꎬ豫东的商丘(４２.９％)、开封
(５７.１％)以 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 为主ꎬ豫北的安阳 (６６. ７％)、濮阳 (７１. ４％)、新乡 (６２. ５％)和豫南的南阳 (５７􀆰 １％)、驻马店
(４５.０％)以及中部的郑州(５７.１％)、漯河(６６.７％)则均以 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ为优势种ꎮ
关键词:镰刀菌ꎻ 玉米茎基部ꎻ 种特异性 ＰＣＲꎻ 分子鉴定
Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｂａｓａｌ ｓｔａｌｋｓ
ｏｆ ｍａｉｚｅ ｉｎ Ｈｅｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ 　 ＳＵＮ Ｊｉｎｇ１ꎬ ＸＩＥ Ｓｈｕ￣ｎａ１ꎬ ＬＩＵ Ｊｉａ￣ｚｈｏｎｇ１ꎬ ＬＩＵ Ｊｉｎｇ￣ｂａｏ２ꎬ ＨＡＯ
Ｊｕｎ￣ｊｉｅ１ꎬ ＤＥＮＧ Ｓｈｉ￣ｚｈｅｎｇ３ 　 ( １ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅꎬ Ｈｅｎａｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ / Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ
Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ｐｅｓｔ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｎ Ｃｒｏｐｓ ｉｎ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ Ｎｏｒｔｈ Ｃｈｉｎａꎬ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ / Ｈｅｎａｎ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ
Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｃｒｏｐ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ Ｉｎｓｅｃｔ Ｐｅｓｔｓꎬ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５０００２ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２ Ｃｅｒｅａｌ Ｃｒｏｐ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅꎬ Ｈｅｎａｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５０００２ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３ Ｈｅｎａｎ Ｓｅｅｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ Ｓｔａｔｉｏｎꎬ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５００４７ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｒｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆｕｎｇａｌ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ｏｆ ｍａｉｚｅ (Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ.) ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｃｅｒｅａｌｓ ｗｏｒｌｄ￣
ｗｉｄｅ. Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １６３ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｖｅｒｅｄ ｆｒｏｍ ｍａｉｚｅ ｂａｓａｌ ｓｔａｌｋｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ １４ ｄｉｓｔｒｉｃｔｓ (４２
ｃｏｕｎｔｉｅｓ) ｉｎ Ｈｅｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｉｎ ２０１１ ａｎｄ ２０１２ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｐ.
ｏｎ ｍａｉｚｅ ｓｔａｌｋ. Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｓ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｅｓ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＰＣＲ
ａｓｓａｙｓ. ＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ￣ｂａｓｅｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍｅ ｕｎｓｕｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｗａｓ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ ｅｌｏｎｇａ￣
ｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ １￣α (ＴＥＦ￣１α) ｇｅｎｅ ｒｅｇｉｏｎ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ ｗａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｐｒｅｖａｌｅｎｔ
ｓｐｅｃｉｅｓ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ４４.２％ (７２ ｏｆ １６３) ｏｆ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｅｓꎬ ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ ａｎｄ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｒ￣
ｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎬ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ２８.８％ (４７ ｏｆ １６３) ａｎｄ ２７.０％ (４４ ｏｆ １６３)ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｏｕｒ ｒｅｓｕｌｔｓ ａｌｓｏ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ
ｔｈａｔ Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ ｗａｓ ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ ｉｎ Ｊｉａｏｚｕｏ (４７.６％) ａｎｄ Ｌｕｏｙａｎｇ (５０.０％) ｉｎ ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｈｅｎａｎꎬ ａｓ
ｗｅｌｌ ａｓ Ｘｕｃｈａｎｇ (４５. ５％) ｉｎ ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｅｎａｎꎬ Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ ｄｏｍｉｎａｔｅｄ Ｓｈａｎｇｑｉｕ ( ４２. ９％) ａｎｄ Ｋａｉｆｅｎｇ
(５７.１％) ｉｎ ｅａｓｔ Ｈｅｎａｎꎬ ａｎｄ Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ ｗａｓ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｉｎ Ａｎｙａｎｇ (６６. ７％)ꎬ Ｐｕｙａｎｇ (７１. ４％) ａｎｄ
Ｘｉｎｘｉａｎｇ ( ６２􀆰 ５％) ｉｎ ｎｏｒｔｈ Ｈｅｎａｎꎬ Ｎａｎｙａｎｇ ( ５７. １％) ａｎｄ Ｚｈｕｍａｄｉａｎ ( ４５. ０％) ｉｎ ｓｏｕｔｈ Ｈｅｎａｎꎬ ａｎｄ
Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ (５７􀆰 １％) ａｎｄ Ｌｕｏｈｅ (６６.７％) ｉｎ ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｅｎａｎ.
　
　 １期 孙　 静ꎬ等:河南省玉米茎基部镰刀菌的形态和分子鉴定
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｅｃｉｅｓꎻ ｍａｉｚｅ ｂａｓａｌ ｓｔａｌｋｓꎻ ｓｐｅｃｉｅｓ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＰＣＲꎻ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
中图分类号: Ｓ４３２.１　 　 　 　 　 文献标识码: Ａ　 　 　 　 　 文章编号: ０４１２￣０９１４(２０１４)０１￣０００８￣０９
　 　 玉米是我国重要的粮食作物ꎬ在河南省的种植
面积达 ３７０ 余万公顷ꎮ 镰刀菌(Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｐ.)可
侵染玉米的根、茎和穗等组织ꎬ引起苗枯、根腐、茎
腐和穗腐等病害[１￣２]ꎮ 镰刀菌属内的多个种均可侵
染玉米引起茎基腐病[３]ꎮ 然而ꎬ由于地域环境、耕
作制度、气候条件等的不同或变化ꎬ不同国家或地
区玉米种植区的镰刀菌种群组成和分布存在差
异[４]ꎬ如北美、澳洲多以禾谷镰刀菌 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａ￣
ｒｕｍ和轮枝镰刀菌 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 为优势种[５~７]ꎻ
南美则以 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 和层出镰刀菌 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅ￣
ｒａｔｕｍ 为优势种[８]ꎻ我国玉米上报道的多以 Ｆ.
ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ为主[９~１２]ꎮ
将镰刀菌准确鉴定到种是相关病害研究的基
础ꎮ 然而ꎬ单纯依靠传统的形态学鉴定很难准确区
分镰刀菌属下各个种ꎬ即使对于非常专业的镰刀菌
分类学者来讲ꎬ有时也需要借助生物学和分子生物
学方法来区分这些疑难种类[１３]ꎮ 目前ꎬ根据
Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ １￣α(ＴＥＦ￣１α)基因序列
对镰刀菌进行种的分类鉴定已经成为常用手段ꎬ
Ｇｅｉｓｅｒ等[１４]建立了基于 ＴＥＦ￣１α 基因部分序列的
镰刀菌数据库ꎬ使得研究者可以方便地利用其基因
序列将菌株鉴定到种ꎻ而利用分子标记或单拷贝基
因设计种特异性引物ꎬ用以快速鉴定镰刀菌属中相
关种的方法也已经得到了广泛应用ꎬ如 Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ
等[１５]利用 ＲＡＰＤ技术寻找并设计出种特异性 ＰＣＲ
引物以鉴定小麦上的 Ｆ. ｃｕｌｍｏｒｕｍ 和 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａ￣
ｒｕｍꎬＭｕｌè等[１６]设计并使用 ３ 对种特异性 ＰＣＲ 引
物扩增来自欧洲和美国玉米上的镰刀菌ꎬ鉴定出
Ｆ. ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ、Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 和 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ ３
个种ꎬＲａｈｊｏｏ 等[１７]使用形态鉴定结合种特异性
ＰＣＲ扩增、ＤＮＡ序列分析的方法ꎬ鉴定出来自伊朗
玉米穗部相关镰刀菌的群体组成ꎬ说明形态和分子
鉴定的结合应用为镰刀菌的准确鉴定提供了保证ꎮ
本研究更广泛地采集河南省玉米茎基腐病样ꎬ
从茎基部分离得到镰刀菌菌株ꎬ在形态鉴定的基础
上ꎬ结合种特异性 ＰＣＲ扩增和 ＴＥＦ￣１α基因序列分
析等分子鉴定的方法ꎬ将菌株鉴定到种ꎬ以明确河
南省玉米茎基部镰刀菌的种群结构及分布ꎬ为相关
病害的综合治理提供依据ꎮ
１　 材料与方法
１.１　 病样采集及菌株分离
２０１１和 ２０１２ 年ꎬ在玉米茎基腐病发生高峰
期ꎬ对河南省主要玉米种植区内 １４ 个地级市下辖
的 ４２个县(区)的玉米进行采样ꎬ采集部位为典型
病株茎基部 １~２节ꎮ 为保证分离到所有可能相关
的病原物ꎬ同时选用 ＰＤＡ (马铃薯葡萄糖培养基)
和 ＣＭＡ(玉米琼脂培养基)２ 种培养基进行分离ꎮ
分离时先将病株茎秆表面用 ７０％酒精擦洗消毒并
掠过火焰ꎬ取病株髓部组织放入 ＰＤＡ 和 ＣＭＡ 平
板上ꎬ每皿 ５块ꎬ置 ２６℃ ~２８℃恒温箱内培养 １ ~ ３
ｄꎬ及时挑取并保存菌株[１８]ꎮ 观察所分离菌株的形
态ꎬ将初步认为是镰刀菌属的菌株进行单孢纯化并
保存备用ꎮ
１.２　 菌株的形态鉴定方法
将单孢菌株分别转入 ＰＤＡ 和 ＣＬＡ 培养基平
板ꎬ在 ２５℃黑暗条件下培养ꎬ５ ｄ 后观察菌落形态ꎬ
１５ ｄ后观察大、小型分生孢子、厚垣孢子和分生孢
子梗等形态特征ꎮ 综合以上观察的形态特征ꎬ参考
Ｇｅｒｌａｃｈ等[１９]和 Ｌｅｓｌｉｅ等[２０]的镰刀菌分类方法ꎬ将
分离菌株初步鉴定到种ꎮ
１.３　 ＤＮＡ提取
将活化的镰刀菌株转入 ＰＤＡ 平板ꎬ２５℃黑暗
条件下培养 ７ ｄ后ꎬ以灭菌牙签刮取菌丝 １ ｇ左右ꎬ
液氮研磨后使用酵母基因组 ＤＮＡ 小量提取试剂
盒(上海莱枫生物技术有限公司ꎬ产品目录号
ＤＫ６２１ ￣ ０２)提取菌株的基因组 ＤＮＡꎮ
１.４　 ＰＣＲ鉴定
分别使用 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ、Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 和
Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ的种特异性引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ、ＶＥＲ１ / ２
和 ＰＲＯ１ / ２(表 １)ꎬ对所有镰刀菌菌株进行 ＰＣＲ扩
增[１５~１７]ꎮ ＰＣＲ 反应体系为:Ｔａｑ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ
(ＢＩＯＴＥＫＥ公司ꎬ产品目录号 Ｃ２０００１)１２.５ μＬꎬ上
游引物(５ μｍｏｌ)和下游引物(５ μｍｏｌ)各 １ μＬꎬ模
板 ＤＮＡ(１０ ｎｇ)１ μＬꎬｄｄＨ２Ｏ ９.５ μＬꎬ总体积为 ２５
９
　
植物病理学报 ４４卷
μＬꎮ 引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ 的扩增程序为:９５℃ ５ ｍｉｎꎻ
９４℃ ５０ ｓꎬ６０℃ ５０ ｓꎬ７２℃ １ ｍｉｎꎬ３５个循环ꎻ７２℃ ７
ｍｉｎꎮ 引物 ＶＥＲ１ / ２、ＰＲＯ１ / ２ 的扩增程序为:９５℃
５ ｍｉｎꎻ９４℃ ５０ ｓꎬ５６℃ ５０ ｓꎬ７２℃ １ ｍｉｎꎬ３５个循环ꎻ
７２℃ ７ ｍｉｎꎮ 扩增产物使用 １.２％的琼脂糖凝胶电
泳检测ꎮ 引物均由北京六合华大基因科技股份有
限公司合成ꎮ
１.５　 ＤＮＡ测序
使用引物 ＥＦ１ / ＥＦ２ (表 １)扩增相关菌株的
ＴＥＦ￣１α基因片段[１４ꎬ １７ꎬ ２１]ꎮ ＰＣＲ反应体系同上ꎬ扩
增程序为:９５℃ ５ ｍｉｎꎻ９５℃ １ ｍｉｎꎬ５４℃ ４５ ｓꎬ７２℃
１ ｍｉｎꎬ３５个循环ꎻ７２℃ ７ ｍｉｎꎮ 扩增产物送至北京
六合华大基因科技股份有限公司测序ꎮ 所有产物
均双向测序ꎬ序列使用 ＳｅｑＭａｎ 软件拼接ꎬ并进行
人工校对ꎮ 处理后的序列在 ＮＣＢＩ数据库(ｈｔｔｐ: / /
ｂｌａｓｔ. ｎｃｂｉ. ｎｌｍ. ｎｉｈ. ｇｏｖ / ) 以及镰刀菌数据库[１４]
(ＦＵＳＡＲＩＵＭ￣ＩＤ ｖ. １. ０ ｄａｔａｂａｓｅ) ( ｈｔｔｐ: / / ｉｓｏｌａｔｅ.
ｆｕｓａｒｉｕｍｄｂ.ｏｒｇ)中进行 ＢＬＡＳＴ 分析ꎬ比较其同源
性ꎮ
２　 结果
２.１　 形态鉴定
对在河南省 ４２ 个县(区)采集到的 １２４ 株玉
米茎基腐病病株进行分离ꎬ根据分离物在培养基上
的菌落形态特征ꎬ初步确定了 １６３个镰刀菌菌株ꎮ
参考 Ｓｕｍｍｅｒｅｌｌ 等[２２]的镰刀菌鉴定程序ꎬ对
１６３个镰刀菌菌株进行了进一步的形态鉴定ꎮ 依
据 Ｇｅｒｌａｃｈ 等[１９]和 Ｌｅｓｌｉｅ 等[２０]的镰刀菌分类方
法ꎬ根据形态特征初步鉴定为 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ的菌
株有 ７２个ꎬ主要特征为 ＰＤＡ 上生长速度较快ꎬ气
生菌丝旺盛ꎬ棉絮状ꎬ白色至玫红色ꎬ老菌落中部有
时出现黄色气生菌丝区ꎬ菌丝体有分隔和分枝ꎻ
ＰＤＡ基质呈深洋红色或淡砖红色至赭色ꎬＰＤＡ 上
不产生分生孢子ꎻ在 ＣＬＡ上不产生小型分生孢子ꎻ
大型分生孢子镰刀形ꎬ向两端逐渐变细ꎬ具有明显
的足胞ꎬ孢子多数具有 ３~ ５ 个分隔ꎬ大型分生孢子
形成于分生孢子座ꎻ一般不产生厚垣孢子ꎬ但在菌
丝或分生孢子中间有时出现膨大细胞ꎮ
对于余下的 ９１ 个菌株ꎬ疑似为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌ￣
ｌｉｏｉｄｅｓ 或 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍꎮ 这 ２ 种菌在 ＰＤＡ 和
ＣＬＡ培养基上的形态极为相似ꎬＰＤＡ 上主要表现
为气生菌丝呈白色至粉色ꎬ较稀疏ꎬ产生小型分生
孢子ꎬＰＤＡ 基质多为橙红至紫红色ꎻ在 ＣＬＡ 上均
产生大型、小型分生孢子ꎬ不产生厚垣孢子ꎻ大型分
生孢子呈直而细长的镰刀形ꎬ顶细胞尖而弯曲ꎬ具
有明显足胞ꎬ孢子多数具有 ３~ ５ 个分隔ꎻ小型分生
孢子多为棒形、无分隔ꎮ
２.２　 ＰＣＲ扩增
使用种特异性引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ、 ＶＥＲ１ / ２ 和
ＰＲＯ１ / ２(表 １)分别对获得的 １６３ 个菌株进行了
ＰＣＲ扩增(图 １)ꎮ 形态鉴定为 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 的
７２个菌株ꎬ使用引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ 均能扩出预期大小
的单一目的条带ꎬ使用引物 ＶＥＲ１ / ２ 和 ＰＲＯ１ / ２ 则
没有扩增出任何条带ꎬ确认这 ７２ 个菌株为 Ｆ. ｇｒａ￣
ｍｉｎｅａｒｕｍꎮ 形态鉴定未能鉴定到种的 ９１ 个菌株
中ꎬ３５个菌株使用引物 ＶＥＲ１ / ２ 能够扩增出预期
大小的目的条带ꎬ且使用引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ、ＰＲＯ１ / ２
不能扩增出任何条带ꎬ确认为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎻ ２７
Ｔａｂｌｅ １　 ＰＣＲ ｐｒｉｍｅｒｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
Ｐｒｉｍｅｒ ｎａｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ (５′￣３′) Ｆｒａｇｍｅｎｔ ｓｉｚｅ (ｂｐ) Ｓｐｅｃｉｅｓ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ
ＰＲＯ１ ＣＴＴＴＣＣＧＣＣＡＡＧＴＴＴＣＴＴＣ ５８５ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ[１６]
ＰＲＯ２ ＴＧＴＣＡＧＴＡＡＣＴＣＧＡＣＧＴＴＧＴＴＧ
ＶＥＲ１ ＣＴＴＣＣＴＧＣＧＡＴＧＴＴＴＣＴＣＣ ５７８ Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ[１６]
ＶＥＲ２ ＡＡＴＴＧＧＣＣＡＴＴＧＧＴＡＴＴＡＴＡＴＡＴＣＴＡ
Ｆｇ１６Ｆ ＣＴＣＣＧＧＡＴＡＴＧＴＴＧＣＧＴＣＡＡ ４００－５００ Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ[１５]
Ｆｇ１６Ｒ ＧＧＴＡＧＧＴＡＴＣＣＧＡＣＡＴＧＧＣＡＡ
ＥＦ１ ＡＴＧＧＧＴＡＡＧＧＡ(Ａ / Ｇ)ＧＡＣＡＡＧＡＣ ~７００ Ａｌｌ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｅｃｉｅｓ[１４ꎬ２１]
ＥＦ２ ＧＧＡ(Ｇ / Ａ)ＧＴＡＣＣＡＧＴ(Ｇ / Ｃ)ＡＴＣＡＴＧＴＴ
０１
　
　 １期 孙　 静ꎬ等:河南省玉米茎基部镰刀菌的形态和分子鉴定
Ｆｉｇ. １　 ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｓｐｅｃｉｅｓ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒｓ
Ａ: Ｌａｎｅ １: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ１￣２(Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ)ꎻ Ｌａｎｅ ２: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ２￣１(Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ)ꎻ Ｌａｎｅ ３: Ｓｔｒａｉｎ ２￣３(Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ)ꎻ
Ｌａｎｅ ４: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ４￣１(Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ)ꎻ Ｌａｎｅ ５: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ２２￣２(Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ)ꎻ Ｌａｎｅ ６: Ｓｔａｉｎ Ｓ２７￣１(Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ) .
Ｂ: Ｌａｎｅ １: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ２０￣２(Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ)ꎻ Ｌａｎｅ ２: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ５￣２(Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ)ꎻ
Ｌａｎｅ ３: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ９９￣２(Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ)ꎻ Ｌａｎｅ ４: Ｓｔｒａｉｎ Ｓ４９￣１(Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ) . Ｍ: ＤＬ ２０００ ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ.
个菌株使用引物 ＰＲＯ１ / ２ 能够扩增出预期大小的
目的条带ꎬ且使用引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ、ＶＥＲ１ / ２ 不能扩
增出任何条带ꎬ确认为 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍꎮ 剩余的 ２９
个菌株中(表 ２)ꎬ２对种特异性引物均能扩增出目
的条带的菌株有 ２３ 个ꎻ３ 对种特异性引物均能扩
增出目的条带的菌株有 １ 个(Ｓ６５￣１)ꎻ３ 对种特异
性引物均不能扩增出任何条带的菌株有 ４个(Ｓ２１￣
２、 Ｓ９３￣２、 Ｓ１１５￣３、 Ｓ１３０￣１)ꎻ另外还有 １ 个菌株
(Ｓ９６￣３)使用引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ 扩增出 ２ 条大小相近
的条带ꎮ 上述 ２９个菌株均无法利用种特异性引物
鉴定到种ꎮ
２.３　 ＤＮＡ序列分析
对于无法使用种特异性引物鉴定到种的 ２９ 个
镰刀菌菌株ꎬ进行了 ＴＥＦ￣１α 基因序列分析ꎮ 分别
在 ＮＣＢＩ 数据库及镰刀菌数据库 ＦＵＳＡＲＩＵＭ￣
ＩＤ[１４]中对序列进行 ＢＬＡＳＴ 比对ꎬ结果表明 ２９ 个
菌株中的 ９个为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎬ２０个为 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅ￣
ｒａｔｕｍ(表 ２)ꎮ
２.４　 群体组成及分布
形态与分子鉴定的结果表明ꎬ分离到的 １６３ 个
镰刀菌菌株中(图 ２)ꎬ有 ７２个菌株为 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａ￣
ｒｕｍ(４４.２％)ꎬ ４７ 个为 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ(２８􀆰 ８％)ꎻ４４
个为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ(２７.０％)ꎬ说明 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａ￣
ｒｕｍ为河南省玉米茎基部的优势种ꎬ其次为 Ｆ. ｐｒｏ￣
ｌｉｆｅｒａｔｕｍ和 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎮ 就各地级市范围内
的菌株分布来看(表 ３)ꎬ豫西北的焦作(４７.６％)和
洛阳(５０. ０％)以及豫中的许昌市 ( ４５. ５％)均以
Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ为主ꎻ豫东的商丘(４２.９％)和开封
(５７. １％)以 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 为主ꎻ而豫北的安阳
(６６.７％)、濮阳(７１.４％)和新乡(６２.５％)及中部的
郑州(５７.１％)４ 个市ꎬ以及豫南的南阳(５７.１％)、驻
马店(４５.０％)及中部偏南的漯河(６６.７％)３ 个市ꎬ
则以 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 为优势种ꎮ 豫东周口市分离
到的 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 和 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 数量相等ꎬ
均占 ３６. ４％ꎻ在济源分离到 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 和
Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ各 １株ꎮ ３ 个种的菌株中以 Ｆ.ｇｒａ￣
ｍｉｎｅａｒｕｍ分布最广泛ꎬ在 １４ 个地市的 ３１ 个县
(区)均有分布ꎬ其次为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎬ在 １４个地
市的 ２８个县(区)均有分布ꎻ在濮阳市和济源市未
分离到 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ(图 ２)ꎬ可能与这两地的采
样量较少有关ꎮ
１１
　
植物病理学报 ４４卷
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２１
　
　 １期 孙　 静ꎬ等:河南省玉米茎基部镰刀菌的形态和分子鉴定
Ｆｉｇ. ２　 Ｍａｐ ｏｆ Ｈｅｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｓｈｏｗｉｎｇ ｄａｔａ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ
ｍａｉｚｅ ｓｔａｌｋｓ ｉｎ １４ ｄｉｓｔｒｉｃｔｓ (４２ ｃｏｕｎｔｉｅｓ) ｉｎ ２０１１ ａｎｄ ２０１２
Ｔｈｅ ｓｙｍｂｏｌｓ □ꎬ ○ ａｎｄ △ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍꎬ Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ ａｎｄ Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ａｒａｂｉｃ
ｎｕｍｂｅｒ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｙｍｂｏｌｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｃｏｕｎｔｉｅｓ.
　 　 此外ꎬ在采集到的 １２４个玉米病样中ꎬ有 ２２ 个
病样上同时分离到 ２ 种不同种菌株ꎬ其中 １２ 个病
样上同时分离到 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 和 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌ￣
ｌｉｏｉｄｅｓꎬ５ 个病样上同时分离到 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 和
Ｆ.ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍꎬ５ 个病样上同时分离到 Ｆ.ｐｒｏｌｉｆｅｒａ￣
ｔｕｍ和 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎮ
３　 讨论
对非分类学专业或初学者来说ꎬ单纯依靠形态
特征将镰刀菌菌株准确鉴定到种存在一定难
度[１３ꎬ ２０ꎬ ２２]ꎮ 近年来ꎬ利用特异性 ＰＣＲ、特征 ＤＮＡ
序列等分子技术辅助鉴定镰刀菌种的方法已经被
普遍应用[１７ꎬ ２３]ꎮ 本研究通过形态特征的观察ꎬ鉴
定出河南省玉米茎基部分离的 １６３ 个镰刀菌中 ７２
个为 Ｆ.ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍꎬ其余 ９１ 个疑似为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌ￣
ｌｉｏｉｄｅｓ 或 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍꎮ Ｇｅｒｌａｃｈ 等[１９] 和 Ｌｅｓｌｉｅ
等[２０]的镰刀菌分类方法指出ꎬＦ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ与 Ｆ.
ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ在形态上相似ꎬ二者的主要区别在于
Ｆ . ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 具 有 复 瓶 梗 的 产 孢 细 胞 ꎬ 而
３１
　
植物病理学报 ４４卷
Ｔａｂｌｅ ３　 Ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ｔｈｒｅｅ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｅｃｉｅｓ ｉｎ １４ ｄｉｓｔｒｉｃｔｓ ｉｎ Ｈｅｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ
Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ (％) Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ(％) Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ(％) Ｔｏｔａｌ ｎｕｍｂｅｒ
Ｘｕｃｈａｎｇ ２７.３ ４５.５ ２７.３ １１
Ｌｕｏｈｅ ６６.７ １１.１ ２２.２ ９
Ｚｈｕｍａｄｉａｎ ４５.０ ２５.０ ３０.０ ２０
Ｚｈｏｕｋｏｕ ３６.４ ２７.３ ３６.４ ２２
Ｓｈａｎｇｑｉｕ ３５.７ ２１.４ ４２.９ １４
Ｋａｉｆｅｎｇ １４.３ ２８.６ ５７.１ ７
Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ５７.１ １４.３ ２８.６ ７
Ａｎｙａｎｇ ６６.７ １６.７ １６.７ １２
Ｐｕｙａｎｇ ７１.４ ２８.６ ０.０ ７
Ｘｉｎｘｉａｎｇ ６２.５ ６.３ ３１.３ １６
Ｎａｎｙａｎｇ ５７.１ １４.３ ２８.６ ７
Ｊｉａｏｚｕｏ ２８.６ ４７.６ ２３.８ ２１
Ｌｕｏｙａｎｇ ２５.０ ５０.０ ２５.０ ８
Ｊｉｙｕａｎ ５０.０ ５０.０ ０.０ ２
Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ产孢细胞为单瓶梗ꎻＦ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ
的分生孢子链也较 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 短ꎮ 对非分类
学专业或初学者来说ꎬ区分这种差别存在一定难
度ꎮ 本研究在形态鉴定的基础上ꎬ进一步借助镰刀
菌种特异性 ＰＣＲ 扩增及 ＴＥＦ￣１α 基因序列比对的
分子鉴定方法对 １６３个菌株进行了鉴定ꎬ并和形态
鉴定进行了比较ꎬ结果表明 ７２ 个 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ
菌株的形态鉴定与分子鉴定结果一致ꎬ而其余 ９１
个菌株中 ４４个为 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓꎬ４７个为 Ｆ.ｐｒｏｌｉｆｅ￣
ｒａｔｕｍꎮ 本文分离的 ３ 种镰刀菌ꎬ除侵染玉米造成
玉米茎基腐病以外ꎬ其中 Ｆ.ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 还能造成
玉米穗腐病和根腐病[２４]ꎻＦ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 除引起上
述玉米病害外ꎬ还能引起玉米苗枯病[２４]ꎻＦ.ｐｒｏｌｉｆｅ￣
ｒａｔｕｍ也可引起玉米鞘腐病及穗腐病[２４ꎬ ２５]ꎮ
本文采用 ３ 对镰刀菌种特异性引物来鉴定分
离到的单孢菌株ꎬ这些引物已应用到多个研究
中[１５~１７]ꎮ ７２ 个形态鉴定为 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 的菌
株ꎬ使用引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ均能扩增出目的条带ꎬ引物
的扩增确认率达 １００％ꎻ此外ꎬ引物 Ｆｇ１６Ｆ / Ｒ 在 １１
个 Ｆ.ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 及 ３ 个 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 菌株中也
能扩增出预期大小的条带ꎬ在本研究中的扩增假阳
性率为 ８.６％ꎮ ４４ 个 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 中ꎬ使用引物
ＶＥＲ１ / ２能够扩增出目的条带的菌株有 ４３ 个ꎬ确
认率为 ９７.７％ꎻ此外ꎬ引物 ＶＥＲ１ / ２在 ７个 Ｆ.ｐｒｏｌｉｆｅ￣
ｒａｔｕｍ菌株中也能扩出目的条带ꎬ假阳性率为 ４.
３％ꎻ４７个 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 中ꎬ使用引物 ＰＲＯ１ / ２ 能
够扩增出目的条带的菌株有 ４３ 个ꎬ确认率为
９１􀆰 ５％ꎬ另外ꎬ引物 ＰＲＯ１ / ２在 ５个 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ
中也能够扩出目的条带ꎬ假阳性率为 ３􀆰 ０％ꎮ Ｒａｈ￣
ｊｏｏ等[１７]曾报道ꎬ引物 ＶＥＲ１ / ２ 对 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ
的扩增确认率为 ９８.５％ꎬ引物 ＰＲＯ１ / ２对 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅ￣
ｒａｔｕｍ的扩增确认率为 ８５.１％ꎬ这与本研究得出的
数据较接近ꎬ证明这 ３对引物在种特异性鉴定方面
还存在一定局限性ꎮ Ｆｕｓａｒｉｕｍ 属下各种在不同地
理条件下进化与传播的速度差异较大[２６ꎬ ２７]ꎬ而本
研究使用的 ３对 Ｆｕｓａｒｉｕｍ种特异性引物设计时依
据的是来自欧洲与美国的菌株[１５ꎬ １６]ꎬ这些菌株可
能与我国菌株的遗传背景差异较大ꎬ这可能是造成
种特异性 ＰＣＲ鉴定结果存在一定偏差的原因ꎮ 但
本文表明ꎬ以形态鉴定为基础ꎬ结合相关种特异性
ＰＣＲ鉴定及相关基因序列的分子鉴定能准确鉴定
目的菌株ꎮ
就种群结构而言ꎬ在本研究分离到的 １６３ 株菌
株中以 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 最多ꎬ占 ４４.２％ꎬ且分布最
广ꎬ其次为 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ(２８. ８％)和 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌ￣
ｌｉｏｉｄｅｓ(２７.０％)ꎬ这与 Ｙｕａｎ 等[１２]关于河南省玉米
茎基腐病的研究结果不太一致ꎬ可能与其单纯地依
据形态特征进行鉴定有关ꎮ 在 ２００４年以前的国内
４１
　
　 １期 孙　 静ꎬ等:河南省玉米茎基部镰刀菌的形态和分子鉴定
外相关报道中很少提到 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍꎬ多以
Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ和 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 为主[４~１１]ꎬ这可
能与串珠镰刀菌 Ｆ.ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ 种名的废弃有关ꎮ
Ｆ. ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ种名于 ２００３年被正式废弃ꎬ研究者
将 Ｆ. ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ 作为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 的异名处
理ꎬ然而 ２００３年之前的许多研究将 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ
和 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 均认定为 Ｆ. ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅꎬ且
Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ和 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ在形态特征上较
相似ꎬ在分子鉴定手段得到广泛应用之前ꎬ只依据
形态特征做出的鉴定可能并不完全可靠[１３]ꎮ
从国内外相关报道来看ꎬ玉米上镰刀菌的优势
种群在各个地区都不太一样ꎮ 例如美国的优势种
为 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ和 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ[５]ꎬ哥斯达黎
加为 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ[６]ꎬ澳大利亚东部以 Ｆ. ｇｒａ￣
ｍｉｎｅａｒｕｍ为主[７]ꎬ阿根廷则主要为 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ
和 Ｆ.ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ[８]ꎮ 我国东北地区玉米以 Ｆ.ｇｒａ￣
ｍｉｎｅａｒｕｍ和 Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 为主[９]ꎬ陕西关中地
区 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 占 优 势ꎬ Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 较
少[１０]ꎬ广西地区则以 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ为优势种[１１]ꎮ
从本研究的结果看来ꎬ虽然 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ为河南
省的优势种ꎬ但各采样地市相比ꎬ镰刀菌的种群结
构及分布也存在差别ꎬ豫西北以 Ｆ.ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ 为
主ꎬ豫东以 Ｆ. ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ 为主ꎬ豫南、豫北均以
Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ为主ꎬ豫中则以 Ｆ. ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ 或
Ｆ. ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｏｉｄｅｓ为主(表 ３)ꎮ
在本研究所采集的病样中ꎬ部分病样 (约
１７􀆰 ７％)上同时分离到 ２ 种不同种菌株ꎬ这可能意
味着 ２种不同种的菌株对寄主玉米进行了复合侵
染ꎬ但具体侵染过程及对相关病害的影响有待进一
步研究ꎮ
本研究初步明确了河南省主要玉米种植区内
来自玉米茎基部镰刀菌的种群结构及分布ꎬ对于研
究镰刀菌相关病害的流行规律及治理方法具有重
要意义ꎮ 进一步的研究将致力于分离菌株的致病
力及杀菌剂敏感性等方面ꎬ为相关病害的综合治理
提供依据ꎮ
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责任编辑:张宗英
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