全 文 ：植物病理学报
ＡＣＴＡ ＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡ ＳＩＮＩＣＡ　 ４４(１): ６５￣７３(２０１４)
收稿日期: ２０１３￣０７￣０８ꎻ 修回日期: ２０１３￣０９￣１７
基金项目: 国家自然科学基金项目 (３０９７２０１３)ꎻ 国家西甜瓜产业技术体系项目 (ＣＡＲＳ￣２６￣１８)
通讯作者: 张显ꎬ教授ꎬ从事蔬菜遗传育种与生物技术研究ꎻＴｅｌ: ０２９￣８７０９２００８ꎬ Ｅ￣ｍａｉｌ:ｚｈａｎｇｘｉａｎ０９８＠１２６.ｃｏｍ
共同第一作者: 刘长命ꎬ男ꎬ博士研究生ꎬ从事园艺植物抗性育种研究ꎻＥ￣ｍａｉｌ:ｌｉｕｊｉｅ２０６１＠１６３.ｃｏｍ
咸丰ꎬ男ꎬ农学博士ꎬ从事植物抗逆研究ꎻＥ￣ｍａｉｌ:ｋｅｖｉｎｘｆ＠１２６.ｃｏｍꎮ
野生甜瓜‘云甜￣９３０’与白粉病菌互作的基因表达特征
刘长命１ ＃ꎬ 咸 丰２ ＃ꎬ 田治国３ꎬ 杨瑞平１ꎬ 郑俊鶱１ꎬ 张 显１∗
( １西北农林科技大学园艺学院ꎬ杨凌 ７１２１００ꎻ ２内蒙古自治区农牧业科学院ꎬ呼和浩特 ０１００３１ꎻ ３常州大学艺术学院ꎬ常州 ２１３１６４)
摘要:利用 ｃＤＮＡ￣ＡＦＬＰ技术ꎬ对甜瓜抗白粉病品种‘云甜－９３０’在接种 Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ生理小种 ２Ｆ.后的基因表达谱进
行分析ꎮ ２５６对引物共产生 １８８个具良好多态性的转录本(ＴＤＦ)ꎬ其中 １０９ 个上调表达ꎬ７９ 个下调表达ꎮ 经过对差异片段
的回收、克隆、测序分析ꎬ最终得到 ６０ 个 ＥＳＴꎮ Ｂｌａｓｔｘ 比对和功能分类分析表明ꎬ参与物质合成与代谢的属第一大类ꎬ占
４８％ꎬ其他主要涉及物质运输(１２％)、防御系统(１２％)、转录调控(８％)、能量代谢(８％)、信号转导(４％)等ꎬ７条 ＥＳＴ(８％)
与未知功能蛋白同源性较高ꎮ 选取与代谢、抗病防御、信号转导及蛋白转运等相关的 ４ 个差异基因 ＴＤＦ１２(ＳＥＨ)、ＴＤＦ６７
(ＳＡＭＤＣ)、ＴＤＦ７６(ＣＤＰＫ)和 ＴＤＦ８２(ＰＤＲ８)进行 ｑＲＴ－ＰＣＲ验证ꎬ结果显示其表达模式符合 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ表达谱ꎬ同时表
明这些基因可能参与了甜瓜与白粉病菌的互作过程ꎮ
关键词:甜瓜ꎻ白粉病ꎻｃＤＮＡ－ＡＦＬＰꎻ抗性基因ꎻ表达分析
Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｃｈｉ￣
ｎｅｓｅ ｗｉｌｄ ｍｅｌｏｎ ‘ Ｙｕｎｔｉａｎ￣９３０’ ａｎｄ Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ 　 ＬＩＵ Ｃｈａｎｇ￣ｍｉｎｇ１ꎬ ＸＩＡＮ
Ｆｅｎｇ２ꎬ ＴＩＡＮ Ｚｈｉ￣ｇｕｏ３ꎬ ＹＡＮＧ Ｒｕｉ￣ｐｉｎｇ１ꎬ ＺＨＥＮＧ Ｊｕｎ￣ｘｉａｎ１ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｘｉａｎ１ 　 ( １Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅꎬ Ｎｏｒｔｈ￣
ｗｅｓｔ Ａ＆Ｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｙａｎｇｌｉｎｇ ７１２１００ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２ Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｕｌｉａ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ＆Ａｎｉｍａｌ Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ Ｈｕｈｅ￣
ｈａｏｔｅ ０１００３１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｒｔꎬ Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｃｈａｎｇｚｈｏｕ ２１３１６４ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: ｃＤＮＡ￣ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ(ｃＤＮＡ￣ＡＦＬＰ) ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｇｅｎｅ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｉｌｄ ｍｅｌｏｎ ‘Ｙｕｎｔｉａｎ￣９３０’ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ ｒａｃｅ ２Ｆ. Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １８８
ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ (ＴＤＦｓ) ｗｅｒｅ ｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｗｉｔｈ ２５６ ｐａｉｒｓ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒｓꎬ ｏｆ ｗｈｉｃｈ １０９ ｗｅｒｅ ｕｐ￣ｒｅｇｕｌａｔｅｄ
ｗｈｉｌｅ ７９ ｄｏｗｎ￣ｒｅｇｕｌａｔｅｄ. ６０ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｔａｇｓ (ＥＳＴｓ) ｗｅｒｅ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ａｆｔｅｒ ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ
ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ. Ｂｌａｓｔｘ ａｎａｌｙｓｅｓ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎｎｏｔａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｔｈｅｎ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｍｏｓｔ ｏｆ
ｔｈｅｍ ｗｅｒｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ(４８％)ꎬ ｏｔｈｅｒｓ ｗｅｒｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ(１２％)ꎬ
ｄｉｓｅａｓｅ / ｄｅｆｅｎｓｅ(１２％)ꎬ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ(８％)ꎬｅｎｅｒｇｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ (８％) ａｎｄ ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ(４％).
Ｓｅｖｅｎ ｏｔｈｅｒｓ ｄｉｄ ｎｏｔ ｓｈｏｗ ａｎｙ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｔｏ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｗｉｔｈ ｋｎｏｗｎ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ. Ｆｏｕｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｇｅｎｅｓ
ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍꎬ ｄｉｓｅａｓｅ￣ｄｅｆｅｎｓｅꎬ ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ ｗｅｒｅ ｃｈｏｓｅｎ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｑＲＴ￣ＰＣＲ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｕｌｌｙ ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ ｔｏ ｔｈｅｉｒ ｃＤＮＡ￣ＡＦＬＰ ｐｒｏｆｉｌｅｓ. Ｍｅａｎｗｈｉｌｅꎬ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ａｌｓｏ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ
ｔｈｅｓｅ ｇｅｎｅｓ ｍｉｇｈｔ ｐｌａｙ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｍｅｌｏｎ ａｎｄ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: ｍｕｓｋｍｅｌｏｎꎻ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗꎻ ｃＤＮＡ￣ＡＦＬＰꎻ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅꎻ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ
中图分类号: Ｓ４３６.５　 　 　 　 　 文献标识码: Ａ　 　 　 　 　 文章编号: ０４１２￣０９１４(２０１４)０１￣００６５￣０９
　 　 甜瓜是重要的瓜类作物ꎬ在世界范围内广泛栽
培ꎮ 在其生长发育过程中经常受到各种病害的侵
染ꎬ特别是白粉病己经成为我国露地和保护地栽培
的主要病害ꎮ 发病时植株光合作用减弱ꎬ叶片和茎
　
植物病理学报 ４４卷
蔓局部或全部干枯ꎬ果实不能正常成熟ꎬ严重影响
甜瓜的品质和产量[ １ ~ ３ ]ꎮ 采取常规杂交育种所获
得的抗性种质ꎬ其抗性经常由于白粉病生理小种的
演替而衰失ꎬ且抗性和优良品质往往不能兼得ꎮ 因
此挖掘或创造持久抗白粉病种质ꎬ并结合转基因育
种技术将是改善甜瓜抗病育种的一条有效途径ꎮ
　 　 甜瓜白粉病常见病原菌主要为瓜单囊壳白粉
菌(Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ)和二孢白粉菌(Ｇｏｌｏｖｉｎｏ￣
ｍｙｃｅｓ ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ) [４]ꎬ瓜单囊壳白粉菌的危害
性要大于二孢白粉菌ꎮ Ｐ. ｘａｎｔｈｉｉ 包含很多生理小
种ꎬ目前己发现 １１ 个ꎬ分别为生理小种 ０ꎬ１ꎬ２Ｕ.
Ｓ.ꎬ２Ｆ.ꎬ３ꎬ４ꎬ５ꎬＮ１ꎬＮ２ꎬＮ３ 和 Ｎ４[５]ꎮ 在我国杭州、
北京及海南等地鉴定出 Ｐ. ｘａｎｔｈｉｉ 的生理小种或
优势生理小种均为 ２Ｆ.[６~８]ꎮ 本课题组在前期研究
中发现[９]ꎬ陕西关中地区瓜类作物白粉病菌主要
是单囊壳生理小种 ２Ｆ.ꎬ没有发现其它生理小种ꎬ
这为有效防治陕西关中地区瓜类白粉病以及选育
抗白粉病新品种奠定了良好基础ꎮ
　 　 目前ꎬ已开展了有关甜瓜白粉病抗性基因的相
关研究[１０~１２]ꎬ有些基因已被定位[１３~１５]ꎮ Ｃｈｅｎｇ[１６]
研究发现ꎬ甜瓜 ＣｍＡＰＸ 和 ＣｍＭｌｏ２ 基因在甜瓜与
白粉病互作中发挥了重要作用ꎬ其中 ＣｍＭｌｏ２ 可能
参与了抗病机制的负调控过程ꎮ 另外ꎬ病菌生理小
种不同ꎬ瓜类对它的抗感反应也不同ꎬ如 ３ 个西班
牙甜瓜种质 Ａｍａｒｉｌｌｏ、Ｎｅｇｒｏ和 Ｎｌｏｓｃａｔｅｌ Ｇｒａｎｄｅ都抗
Ｐ. ｘａｎｔｈｉｉ生理小种 １ꎬ但对生理小种 ２Ｕ.Ｓ.感病[１７ꎬ１８]ꎬ
Ｅｄｉｓｔｏ ４７ 和 ＰＩ４１４７２３ 对Ｐ. ｘａｎｔｈｉｉ生理小种 ２Ｕ.Ｓ.感
病ꎬ而对生理小种 ２Ｆ.抗病[７]ꎮ 野生甜瓜 ‘云甜－９３０’
为本课题组特有的抗白粉病自交系ꎬＺｈａｎｇ等[１９]研究
发现ꎬ其对白粉病表现高抗至近免疫反应ꎮ 因此ꎬ本
文以‘云甜－９３０’为研究对象ꎬ利用 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ技术
分析野生甜瓜‘云甜－９３０’与白粉菌互作中的基因表
达差异ꎬ筛选抗病相关基因ꎬ为野生甜瓜白粉病抗性
的合理利用以及甜瓜白粉病的可持续控制提供理论
基础ꎬ并为开展甜瓜抗白粉病分子育种提供理论依
据ꎮ
１ 　 材料与方法
１.１ 　 试验材料及白粉病接种、取样
　 　 高抗白粉病材料野生甜瓜[Ｃｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ Ｌ.
ｓｓｐ.ａｇｒｅｓｔｉｓ(Ｎａｕｄ.)Ｇｒｅｂ] ‘云甜－９３０’由西北农林
科技大学园艺学院西甜瓜课题组提供ꎮ 白粉病菌
采自杨凌新天地温室甜瓜感病叶片ꎬ再经单菌落扩
繁得到ꎮ
　 　 将野生甜瓜材料‘云甜－９３０’和栽培甜瓜‘华
莱士’播种于装有灭菌基质的穴盘中ꎬ人工气候箱
中培养ꎮ 温度 ２８ ~ ３０℃ / ２０ ~ ２５℃ (昼 /夜)ꎬ光照
１６ ｈ / ８ ｈ(昼 /夜)ꎬ相对湿度 ７０％ ~ ８０％ꎮ 至 ４ ~ ５
片真叶时ꎬ用 １０６孢子.ｍＬ－１白粉病菌 Ｐ. ｘａｎｔｈｉｉ 生
理小种 ２Ｆ.喷雾接种ꎮ 参照栽培甜瓜‘华莱士’的
发病情况ꎬ在接菌前 ０ ｄꎬ接菌后 ２、４和 ８ ｄ分别取
野生甜瓜材料‘云甜－９３０’生长点下第 ２ 片叶ꎬ液
氮速冻ꎬ于－８０℃冰箱保存ꎬ用于 ＲＮＡ的提取ꎮ
１.２ 　 总 ＲＮＡ提取与 ｃＤＮＡ合成
　 　 用 Ｔｒｉｚｏｌ 试剂盒 (天根ꎬ北京)ꎬ分别提取白粉
病菌接种后 ０、２、４和 ８ ｄ 样品的总 ＲＮＡꎬ利用 ＢＤ
ＰｏｗｅｒＳｃｒｉｐｔ反转录酶(Ｃｌｏｎｔｅｃｈꎬ美国)合成第一链
ｃＤＮＡꎬＬＤ－ＰＣＲ(Ｃｌｏｎｔｅｃｈꎬ美国)合成双链 ｃＤＮＡꎬ
用 ＱＩＡｑｕｉｃｋ ＰＣＲ纯化试剂盒(ＱＩＡＧＥＮꎬ德国)纯
化双链 ｃＤＮＡꎮ 在总 ＲＮＡ、双链 ｃＤＮＡ 制备过程
中ꎬ用 １.０％琼脂糖凝胶电泳检测总 ＲＮＡ 完整性ꎬ
用核酸蛋白检测仪(Ｖ－５５０ꎬ ＪＡＳＣＯꎬ 日本)检测
浓度和纯度ꎬ双链 ｃＤＮＡ弥散应保证在 ３ ｋｂ以上ꎮ
１.３ 　 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ分析
　 　 参照 Ｂａｃｈｅｍ 等[ ２０ ]的方法ꎬ用 １６ 条 ＡｓｅⅠ接
头引物和 １６条 ＴａｑⅠ接头引物(表 １)随机组合进
行选择性扩增反应ꎬ产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳分
析ꎬ并拍照记录ꎮ
１.４ 　 差异转录本回收、克隆与测序分析
　 　 差异转录本 ( ｔｒａｎｓｃｒｉｂｅｄ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒａｇｍｅｎｔꎬ
ＴＤＦ)为接种白粉病后各时间点样品与 ０ ｄ 对照相
比表达增强或抑制的条带ꎮ 回收差异 ＴＤＦꎬ溶解
后二 次 ＰＣＲ (体 系、 程 序 同 选 扩 反 应 )ꎬ 用
ＢＩＯＴＥＫＥ纯化试剂盒(百泰克ꎬ北京)回收后ꎬ与
ｐＧＥＭ®－Ｔ Ｅａｓｙ Ｖｅｃｔｏｒ 载体 ( Ｐｒｏｍｅｇａꎬ美国)连
接、转化感受态细胞 ＤＨ５αꎬ筛选阳性克隆ꎬ利用
Ｍ１３ 正向和反向引物进行菌落 ＰＣＲ 检测ꎬ菌液送
上海生物工程技术有限公司测序ꎮ 将所得序列去
除载体、引物、接头序列ꎬ用 ＮＣＢＩ 的 Ｂｌａｓｔｎ 和
Ｂｌａｓｔｘ分析ꎬ获得相关基因信息ꎬ对差异基因进行
功能分类ꎮ
６６
　
　 １期 刘长命ꎬ等:野生甜瓜‘云甜￣９３０’与白粉病菌互作的基因表达特征
Ｔａｂｌｅ １　 Ｐｒｉｍｅｒｓ ａｎｄ ａｄａｐｔｅｒｓ ｏｆ ＡｓｅⅠａｎｄ ＴａｑⅠｕｓｅｄ ｉｎ ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
Ｎａｍｅ Ｊｏｉｎｔｓ ａｎｄ ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ＡｓｅⅠ Ｎａｍｅ Ｊｏｉｎｔｓ ａｎｄ ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ＴａｑⅠ
Ａ１ ５－ＧＣＧＴＡＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣ－３′( ｊｏｉｎｔ) Ｔ１ 　 ５－ＧＡＣＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣ－３( ｊｏｉｎｔ)
Ａ２ ５－ＴＡＧＧＴＡＣＧＣＡＧＴＣ－３′( ｊｏｉｎｔ) Ｔ２ 　 ５′－ＣＧＧＴＣＡＧＧＡＣＴＣＡＴ－３′( ｊｏｉｎｔ)
Ａ３ ５′－ＣＴＣＧＴＡＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴ－ ３′ Ｔ３ 　 ５′－ＧＡＣＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡ－３′
Ａ４ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＧＧ－３′ Ｔ４ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＧＧ－３′
Ａ５ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＧＡ－３′ Ｔ５ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＧＡ－３′
Ａ６ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＧＴ－３′ Ｔ６ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＧＴ－３′
Ａ７ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＧＣ－３′ Ｔ７ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＧＣ－３′
Ａ８ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＡＧ－３′ Ｔ８ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＡＧ－３′
Ａ９ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＡＡ－３′ Ｔ９ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＡＡ－３′
Ａ１０ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＡＴ－３′ Ｔ１０ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＡＴ－３′
Ａ１１ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＡＣ－３′ Ｔ１１ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＡＣ－３′
Ａ１２ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＴＧ－３′ Ｔ１２ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＴＧ－３′
Ａ１３ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＴＡ－３′ Ｔ１３ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＴＡ－３′
Ａ１４ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＴＴ－３′ Ｔ１４ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＴＴ－３′
Ａ１５ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＴＣ－３′ Ｔ１５ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＴＣ－３′
Ａ１６ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＣＧ－３′ Ｔ１６ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＣＧ－３′
Ａ１７ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＣＡ－３′ Ｔ１７ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＣＡ－３′
Ａ１８ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＣＴ－３′ Ｔ１８ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＣＴ－３′
Ａ１９ ５′－ＧＡＣＴＧＣＧＴＡＣＣＴＡＡＴＣＣ－３′ Ｔ１９ 　 ５′－ＧＡＴＧＡＧＴＣＣＴＧＡＣＣＧＡＣＣ－３′
　
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｐｒｉｍｅｒｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｑＲＴ－ＰＣＲ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ
ＴＤＦ Ｆｏｒｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ Ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｒｉｍｅｒ
ＴＤＦ１２ ＡＣＧＣＡＣＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＴ ＡＡＡＴＣＣＧＣＴＴＣＣＧＣＡＡＣＴ
ＴＤＦ６７ ＡＴＣＡＡＡＡＣＴＴＧＣＧＧＣＡＣＴＡＣ ＡＧＣＡＣＣＣＴＣＡＣＡＡＴＣＡＡＣＴＴＡＧ
ＴＤＦ７６ ＡＣＣＴＧＡＡＴＣＧＣＣＴＴＴＧＣＣＴＧ ＴＣＣＣＡＧＴＴＧＣＣＴＴＣＴＣＣＡＣＡ
ＴＤＦ８２ ＡＴＧＧＧＴＧＴＴＡＧＴＧＧＴＧＣＴＧＧＡＡＡＧ ＴＧＡＣＴＴＧＡＧＧＡＧＡＧＴＧＧＡＴＡＴＣＡＴＴＴＴＧ
Ａｃｔｉｎ ＴＧＣＣＣＡＧＡＡＧＴＴＣＴＡＴＴＣＣＡＧＣ ＣＡＴＡＧＴＴＧＡＡＣＣＡＣＣＡＣＴＧＡＧＧＡＣ
　
１.５ 　 差异片段的 ｑＲＴ－ＰＣＲ验证
　 　 为验证差异基因的 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ 表达谱ꎬ根
据功能注释及分类ꎬ选取与代谢、抗病防御、信号转
导及蛋白转运等相关的 ４ 个差异基因 ＴＤＦ１２
( ＳＥＨ )、 ＴＤＦ６７ ( ＳＡＭＤＣ )、 ＴＤＦ７６ ( ＣＤＰＫ ) 与
ＴＤＦ８２(ＰＤＲ８)进行 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 验证ꎮ 分别提取接
种后 ０、２、４和 ８ ｄ各时间点样品总 ＲＮＡꎬ以 ｏｌｉｇｏ￣
ｄ(Ｔ)１８为引物ꎬ用 ＴａＫａＲａ ＲＮＡ ＰＣＲ Ｋｉｔ(ＡＭＶ)
Ｖｅｒ. ３.０ 试剂盒合成 ｃＤＮＡ 第一链ꎮ 用 Ｐｒｉｍｅｒ５.０
软件设计 ｑＲＴ－ＰＣＲ 引物(表 ２)ꎬ由上海生工合成ꎮ
应用 Ｔｈｅｍａｌ Ｃｙｃｌｅｒ Ｄｉｃｅ® Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ Ｓｙｓｔｅｍ扩增仪ꎬ
以各时间点 ｃＤＮＡ 第一链为模板ꎬ进行 ＰＣＲ 扩增ꎮ
体系为 １０.０ μＬ ＳＹＢＲ® Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ ＴａｑＴＭ ＩＩ(２ｘ)ꎬ各
０.８ μＬ ＰＣＲ ｆｏｒｗａｒｄ / ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｒｉｍｅｒ(１０ ｍＭ)ꎬ ２.０ μＬ
ｃＤＮＡ 模板ꎬ补水至 ２０ μＬꎮ ＰＣＲ 程序采用两步法:
９５℃预变性 ３０ ｓꎬ１个循环ꎻ９５℃ ５ ｓ、６０℃ ３０ ｓꎬ４０个
循环ꎮ ＰＣＲ完成后ꎬ导出数据ꎬ进行分析ꎮ 目标基因
表达的相对表达量比较采用 ２－△△ＣＴ法ꎬ其中△△ＣＴ＝
(ＣＴꎬＴａｒｇｅｔ－ＣＴꎬＡｃｔｉｎ)Ｔｉｍｅｘ－(ＣＴꎬＴａｒｇｅｔ－ＣＴꎬＡｃｔｉｎ)Ｔｉｍｅ０ꎬＣＴꎬ Ｔａｒｇｅｔ
为目标基因的 Ｃｔ值ꎬＣＴꎬＡｃｔｉｎ为内参基因的 Ｃｔ值ꎬ
７６
　
植物病理学报 ４４卷
Ｔｉｍｅｘ为接菌后的时间点(接菌后的 ２ꎬ ４ 和 ８ ｄ)ꎬ
Ｔｉｍｅ０为接菌前的时间点ꎬ以甜瓜的 ａｃｔｉｎ 基因作
为内参基因ꎮ
２ 　 结果与分析
２.１　 植株发病情况
　 　 对照栽培甜瓜‘华莱士’接种叶片ꎬ第 ７ ｄ出现
白粉状病斑ꎬ第 ８ ｄ 病斑增多且很明显ꎮ 此后ꎬ病
情日益严重ꎬ多数叶片布满白粉ꎬ枯黄ꎬ植株最后枯
死ꎮ 而野生甜瓜‘云甜－９３０’在接种早期无可见病
斑ꎬ在接种后期(第 １３ ｄ)个别叶片隐约可见白色
粉斑(图 １Ａ)ꎬ但植株感病叶片少ꎬ仅出现在下层
老叶上ꎬ植株整体表现绿色(图 １)ꎮ
２.２ 　 总 ＲＮＡ提取
　 　 总 ＲＮＡ条带清晰完整ꎬＲＮＡ条带 ２８Ｓ亮度约为
１８Ｓ的 ２ 倍左右(图 ２)ꎬＯＤ２６０ / ＯＤ２８０为 １. ８ ~ ２. ０ꎬ
ＯＤ２６０ / ＯＤ２３０大于 ２.０ꎬ表明 ＲＮＡ完整性好ꎬ纯度高ꎮ
２.３ 　 抗病性相关差异 ＴＤＦ分离
　 　 利用不同引物组合对野生甜瓜叶片接种白粉
病菌前后 ４ 个时期的基因表达差异进行 ｃＤＮＡ－
ＡＦＬＰ分析ꎬ共得到差异片段１８８条ꎬ片段在８０ ~
Ｆｉｇ. １　 Ｄｉｓｅａｓｅ ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｉｎ ｔｅｓｔｅｄ ｍｅｌｏｎ ａｆｔｅｒ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ ｒａｃｅ ２Ｆ.
Ａꎬ Ｂ: Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｉｎ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ ‘Ｙｕｎｔｉａｎ－９３０’ ａｎｄ ‘Ｈｕａｌａｉｓｈｉ’ ａｔ ｅａｒｌｙ ｓｔａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬ ｔｈｅ ａｒｒｏｗ
ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈｅ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｄｉｓｅａｓｅ ｓｐｏｔꎻＣꎬ Ｄ: Ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｉｎ ｗｈｏｌｅ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ‘Ｙｕｎｔｉａｎ－９３０’ ａｎｄ
‘Ｈｕａｌａｉｓｈｉ’ ａｔ ｌａｔｅ ｓｔａｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.
Ｆｉｇ. ２　 Ａｇａｒｏｓｅ ｇｅｌ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ＲＮＡ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｓｅａｓｅｄ ｍｅｌｏｎ ｌｅａｖｅｓ
８６
　
　 １期 刘长命ꎬ等:野生甜瓜‘云甜￣９３０’与白粉病菌互作的基因表达特征
６００ ｂｐ之间ꎬ其中上调表达的有 １０９ 条ꎬ下调表达
的有 ７９ 条ꎬ经 ＰＡＧＥ 分离均产生良好的多态性
(图 ３)ꎮ 对部分差异片段进行回收、克隆、测序、去
除载体和接头序列后ꎬ最后得到 ６０ 条差异片段ꎮ
将所有序列分别提交到 ＧｅｎｅＢａｎｋ 比对分析ꎬ其中
部分 ＴＤＦ在 ＧｅｎＢａｎｋ有较好的同源性(表 ３)ꎮ
Ｆｉｇ. ３　 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ ｄｉｓｐｌａｙ ｏｆ ｓｏｍｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ
１ꎬ ２ꎬ ３ꎬ ４: Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ ０ꎬ ２ꎬ ４ ａｎｄ ８ ｄ ａｆｔｅｒ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ ｒａｃｅ ２Ｆ.ꎬ
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎻ Ｍ: Ｍａｒｋｅｒ ＤＬ２０００. Ａꎬ Ｂꎬ Ｃꎬ Ｄꎬ Ｅ: Ｐｒｉｍｅｒｓ Ａ７＋Ｔ９ꎬＡ７＋Ｔ１０ꎬＡ７＋Ｔ１１ꎬＡ７＋Ｔ１２ꎬ Ａ７＋Ｔ１３ꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.
Ｔａｂｌｅ ３　 ＢｌａｓｔＸ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｏｍｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ (ＴＤＦｓ)
ＴＤＦ ｎｕｍｂｅｒ Ｌｅｎｇｔｈ Ｔｈｅ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｓｅｑｕｅｎｃｅ (ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ.) Ｓｃｏｒｅ Ｉｄｅｎｔｉｔｙ Ｅ－ｖａｌｕｅ
ＴＤＦ１０ １６６
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ｗｏｕｎｄ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｆａｍｉｌｙ ｐｒｏｔｅｉｎ
(ＡＴ４Ｇ１０２７０) ｍＲＮＡꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ(ＮＭ＿１１７０９５.１)
７５.２ ３２％ １ｅ－１０
ＴＤＦ１２ １６１
Ｃｉｔｒｕｓ ｊａｍｂｈｉｒｉ ＲｌｅｍＥＨ ｍＲＮＡ ｆｏｒ ｓｏｌｕｂｌｅ
ｅｐｏｘｉｄｅ ｈｙｄｒｏｌａｓｅꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ(ＡＢ１０７５９３.１)
４４.６ ５７％ ０.１６
ＴＤＦ１３ １４０
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ＡＡＡ－ｔｙｐｅ ＡＴＰａｓｅ ｆａｍｉｌｙ ｐｒｏｔｅｉｎ
(ＡＴ３Ｇ１５１２０) ｍＲＮＡꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ(ＮＭ＿１１２３７５.２)
６０.８ ７３％ ２ｅ－０６
ＴＤＦ１５ １５２
Ｒｉｃｉｎｕｓ ｃｏｍｍｕｎｉｓ ｃａｌｃｉｕｍ ｌｉｐｉｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎꎬ
ｐｕｔａｔｉｖｅꎬ ｍＲＮＡ(ＸＭ＿００２５１０５１３.１)
６２.６ ４２％ ６ｅ－０７
ＴＤＦ１８ ２２４ Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｈｉｒｓｕｔｕｍ ＧＰＡＴ ｍＲＮＡꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ(ＨＭ２３６４９２.１) １３２ ６３％ ６ｅ－２８
ＴＤＦ２４ １２７
Ｐｉｓｔａｃｉａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｅｌｏｎｇａｓｅ (ＦＡＥ１)
ｍＲＮＡꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ(ＸＭ＿００２５２９３２０.１)
１０４ ７８％ １ｅ－１９
ＴＤＦ５２ ４７５ Ａ.ｔｈａｌｉａｎａ ｔｕｆＡ ｇｅｎｅ ｆｏｒ ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ Ｔｕ(Ｘ５２２５６.１) ３６９ ９３％ １ｅ－９８
ＴＤＦ６７ ５１３
Ｂｒａｓｓｉｃａ ｊｕｎｃｅａ Ｓ－ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ
ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ (ＳＡＭＤＣ４) ｍＲＮＡꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ ( ＡＹ５３６６４４.１)
７４０ ９４％ ０.０
ＴＤＦ６８ ２０８
Ｃｉｃｅｒ ａｒｉｅｔｉｎｕｍ ｍＲＮＡ ｆｏｒ ｐｅｃｔｉｎ ｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ (ｐｍｅ１ ｇｅｎｅ)
( ＡＪ６０９２７６.２)
８２.４ ５１％ ９ｅ－１３
ＴＤＦ７６ ２２０
Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ ｐｅｐｏ ｃａｌｃｉｕｍ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ
ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ＣＤＰＫ (ｃｐＣＰＫ１) ｍＲＮＡꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ(Ｕ９０２６２.１)
１８７ ８７％ ３ｅ－４４
ＴＤＦ８２ ２０７
Ｃｕｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ ｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎ
(ＰＤＲ８) ｍＲＮＡꎬ ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｃｄｓ(ＧＱ３７４２４３.１)
３１８ ８７％ ７ｅ－８４
　 Ｎｏｔｅ:Ｔｈｅ ＴＤＦＳ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｑＲＴ－ＰＣＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｗｅｒｅ ｍａｒｋｅｄ ｉｎ ｂｏｌｄ.
９６
　
植物病理学报 ４４卷
２.４ 　 序列功能分析
　 　 对同源性较好的 ＴＤＦ 进行同源分析表明ꎬ这
些同源基因的功能主要涉及物质合成与代谢、能量
代谢、物质运输、信号转导、转录调节和防御系统等
七类(图 ４)ꎮ 参与物质合成与代谢的(４８％)属第
一大类ꎻ其次依次是物质运输类与防御系统类各占
１２％ꎻ转录调控类、能量代谢类与未知功能类各占
８％ꎻ信号转导类相对较少ꎬ占 ４％ꎮ 参与信号转导、
蛋白运输以及抗病与防御类的多数差异基因ꎬ多表
现为上调表达ꎮ
Ｆｉｇ. ４　 Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃａｔｅｇｏｒｙ ｏｆ ｍｅｌｏｎ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｍｏｄｕｌａｔｅｄ ｂｙ
Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ ｒａｃｅ ２Ｆ. ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
Ｆｉｇ. ５　 Ｒｅａｌ￣ｔｉｍｅ ＲＴ￣ＰＣＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｆｏｕｒ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ
Ａꎬ Ｂꎬ Ｃꎬ Ｄ: ＴＤＦ１２ꎬ ＴＤＦ７６ꎬ ＴＤＦ８２ ａｎｄ ＴＤＦ６７ꎬ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｔｏ ＳＥＨꎬ ＣＤＰＫꎬ
ＰＤＲ８ ａｎｄ ＳＡＭＤＣꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.
０７
　
　 １期 刘长命ꎬ等:野生甜瓜‘云甜￣９３０’与白粉病菌互作的基因表达特征
２.５ 　 部分 ＴＤＦｓ ｑＲＴ－ＰＣＲ验证
　 　 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 分析结果显示ꎬ在接种白粉病早期
(接种后 ２ ｄ)ꎬＴＤＦ１２(编码 ＳＥＨ)、ＴＤＦ７６(编码
ＣＤＰＫ)、 ＴＤＦ８２ (编码 ＰＤＲ８ ) 与 ＴＤＦ６７ (编码
ＳＡＭＤＣ)分别上调至对照的 ３７、９６、４２ 和 １４８ 倍ꎬ
随后呈逐渐下降的趋势(图 ５)ꎮ 以上 ４ 个基因的
不同 ｑＲＴ－ＰＣＲ 表达模式符合其 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ 表
达谱特征ꎬ表明这些基因在与白粉病互作中发挥了
重要作用ꎮ
３ 　 讨论
　 　 本研究监测了中国野生甜瓜抗白粉病品种
‘云甜－９３０’在接种 ０、２、４和 ８ ｄ的基因表达动态ꎬ
获得了甜瓜抗白粉病相关的差异基因ꎬ包括 ＦｔｓＨ
金属蛋白酶、腺苷甲硫氨酸脱羧酶(ＳＡＭＤＣ)、钙
依赖钙调素不依赖蛋白激酶(ＣＤＰＫ)、水溶性环氧
化合物水解酶(ＳＨＥ)、ＡＢＣ 转运蛋白 ＰＤＲ８、谷氨
酸脱氢酶(ＧＤＨ)、果胶甲基酯酶 ｐｍｅ１、染色质重
塑蛋白、脂肪酸延长酶 ＦＡＥ１、Ｃｏｐｉａ 类型反转录转
座子、翻译延伸因子 ｔｕｆＡ 基因、凝集素受体蛋白激
酶(ＬｅｃＲＫ)、伤诱导蛋白等ꎮ 其中上调表达基因
的数量是下调表达的 １.４ 倍ꎮ 基因功能涉及到能
量代谢、信号转导、物质运输、转录调控、防御系统、
物质合成和代谢等ꎮ 其中防御类差异基因比例最
高ꎬ占到一半左右ꎬ这与 Ｃｏｒａｍ等[２１]的发现结果相
似ꎮ 此外ꎬ还检测到一些非生物胁迫相关基因(编
码低温胁迫、盐胁迫应答相关蛋白、伤诱导蛋白
等)ꎬ暗示植物对病原菌入侵与非生物环境胁迫存
在交叉适应ꎬ可能在抵御外界胁迫方面具有一些共
同机制ꎮ 值得关注的是ꎬ在互作早期表现转录水平
上调的基因中ꎬ包括了早期信号途径基因、钙结合
蛋白基因及细胞转化诱导因子等ꎮ 本文首次报道
ＳＡＭＤＣ基因在抗病野生甜瓜‘云甜－９３０’受 Ｐｏ￣
ｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ 诱导上调表达的特征ꎬ推测其可
能在甜瓜与白粉病互作中起非常重要的作用ꎮ 目
前正在用过量表达的方法对 ＳＡＭＤＣ 基因在拟南
芥中的功能进行系统分析(待发表)ꎮ
　 　 一般认为ꎬ植物在受到病原菌侵染时ꎬ会产生
病程相关蛋白ꎬ此类蛋白的产生是植物的一种抗病
表现ꎮ 本文通过对 ４ 个差异基因的 ｑＲＴ－ＰＣＲ 分
析ꎬ一方面验证了 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ 表达谱ꎬ同时也表
明各基因的表达水平、趋势在响应白粉病胁迫时期
存在差异ꎬ这些差异可能与白粉病抗性表达有一定
关系ꎮ 本研究发现ꎬ在接种白粉病菌后第二天ꎬ
ＳＨＥ、ＣＤＰＫ、ＰＤＲ 和 ＳＡＭＤＣ 的表达均呈迅速上
升趋势ꎬ其中 ＳＡＭＤＣ 上升最为显著ꎬ在接种后第
２天达到对照的 １４８ 倍ꎮ 在整个互作期间ꎬ４ 个基
因均表现为先上升后下降的趋势ꎬＣＤＰＫ 和 ＰＤＲ
在接种后期恢复至正常表达水平ꎬ和对照无显著差
异ꎬ而 ＳＨＥ和 ＳＡＭＤＣ 在接种后第 ８ 天仍较对照
分别上调 ９和 １８ 倍ꎮ ＳＥＨ 是关键的解毒、代谢和
信号调节酶[２２]ꎬ其功能与抗逆性有关ꎬ受逆境诱
导ꎮ 水稻在稻瘟病和细菌性条斑病菌处理后ꎬＳＥＨ
的表达均呈上调表达[２３ꎬ２４]ꎮ ＣＤＰＫ 可能在多个不
同信号转导途径中起着重要作用ꎬ是植物抗病反应
中的一个重要基因ꎬ在许多植病互作系统中均检测
到了 ＣＤＰＫ的表达差异ꎮ Ｌｉ[２５]利用 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ
技术在小麦早期防御白粉菌时期ꎬ得到一个小麦钙
依赖性蛋白激酶 ２(ＴａＣＤＰＫ２)序列ꎬ并指出 ＴａＣＤ￣
ＰＫ２是一般性真菌防御基因ꎮ ＰＤＲ８ 转运蛋白是
植物和真菌所特有的ꎬ能够把植物抗真菌双萜防御
化合物运输到叶片表面ꎬ避免外界异源物质的侵
害ꎬ还可以排除胁迫环境下细胞内积累的有毒代谢
物[２６ꎬ２７]ꎮ ＳＡＭＤＣ是植物多胺(ＰＡｓ)合成的一个
关键酶ꎮ ＰＡｓ不仅调控植物的生长发育ꎬ而且在生
物或非生物逆境胁迫响应中起着重要的作用ꎬ其可
能是植物与病原菌互作的分子信号物质ꎮ 研究发
现[２８ ~ ３０]ꎬ在植物与病原菌的非亲和互作中ꎬ积累
高浓度 ＰＡｓ复合物表现出抗真菌特性ꎮ
　 　 目前ꎬ在植物与白粉病的互作研究中ꎬ小麦、大
麦、拟南芥、番茄与葡萄的抗白粉病研究较为深入ꎬ
且发现和分离了一些抗白粉病基因及抗性相关基
因[ ３ １ ~ ３ ４ ]ꎬ而甜瓜的抗白粉病研究仅有少量报
道[ １０ ꎬ ３ ５ ]ꎮ ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ是一种分离差异表达基因
的有效方法ꎮ 本研究利用 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ 技术ꎬ对
具有白粉病抗性的野生甜瓜‘云甜－９３０’进行了接
种后的表达差异分析ꎬ得到一些白粉病响应 ＴＤＦｓꎬ
并利用 ｑＲＴ－ＰＣＲ 验证了其中 ４ 个候选基因在白
粉菌作用下的表达ꎬ其结果与 ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ 实验
结果完全一致ꎬ初步验证了 ４个基因在白粉病抗性
互作中发挥了重要作用ꎮ 但对其抗病机理及分子
机制的研究ꎬ还需通过基因全长克隆ꎬ亲和与非亲
和反应的表达差异情况ꎬ以及转基因技术加以验
证ꎮ
１７
　
植物病理学报 ４４卷
参考文献
[１] 　 Ｈａｒｗｏｏｄ Ｒ Ｒꎬ Ｍａｒｋａｒｉａｎ Ｄ. Ａ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｕｒｖｅｙ ｏｆ ｒｅ￣
ｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｉｎ ｍｕｓｋｍｅｌｏｎ [Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｈｅｒｅｄｉｔｙꎬ １９６８ｂꎬ ５９:２１３－２１７.
[２] 　 Ｈｏｓｏｙａ Ｋꎬ Ｎａｒｉｓａｗａ Ｋꎬ Ｐｉｔｒａｌ Ｍꎬ ｅｔ ａｌ. Ｒａｃｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉ￣
ｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ (Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ ｆｕｌｉｇｉｎｅａ) ｏｎ
ｍｅｌｏｎ (Ｃｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ) ｉｎ Ｊａｐａｎ [Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｂｒｅｅｄｉｎｇꎬ
１９９９ꎬ １１８:２５９－２６２.
[３] 　 Ｊａｒｖｉｓ Ｗ Ｒꎬ Ｓｌｉｎｇｓｂｙ Ｋ. Ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ
ｍｉｌｄｅｗ ｏｆ ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ ｃｕｃｕｍｂｅｒ ｂｙ ｗａｔｅｒ ｓｐｒａｙｓ ａｎｄ
Ａｍｐｅｌｏｍｙｃｅｓ ｑｕｉｓｑｕａｌｉｓ [ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｐｏｒｔｅｒꎬ
１９７７ꎬ ６１: ７２８－７３０.
[４] 　 Ｋｕｚｕｙａ Ｍꎬ Ｈｏｓｏｙａ Ｋꎬ Ｙａｓｈｉｒｏ Ｋꎬ ｅｔ ａｌ . Ｐｏｗｄｅｒｙ
ｍｉｌｄｅｗ ( Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ ｆｕｌｉｇｉｎｅａ) ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｍｅｌｏｎ
ｉｓ ｓｅｌｅｃｔａｂｌｅ ａｔ ｔｈｅ ｈａｐｌｏｉｄ ｌｅｖｅｌ [Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉ￣
ｍｅｎｔａｌ Ｂｏｔａｎｙꎬ ２００３ꎬ ５４(３８４):１０６９－１０７４.
[５] 　 Ｄａｖｉｓ Ａ Ｒꎬ Ｔｈｏｍａｓ Ｃ Ｅꎬ Ｌｅｖｉ Ａꎬ ｅｔ ａｌ. Ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ
ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｒａｃｅ １. Ｉｎ:Ｍａｙｎａｒｄ ＤＮ.
Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ[Ｍ] . Ａｌｅｘａｎｄｒｉａ (ＶＡꎬ ＵＳＡ): ＡＳＨＳ
Ｐｒｅｓｓꎬ ２００２ꎬ １９２－１９８.
[６] 　 Ｘｕ Ｚ ＨꎬＳｈｏｕ Ｗ ＬꎬＨｕａｎｇ Ｋ Ｍꎬ ｅｔ ａｌ. Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｏｆ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒａｃｅ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ａｎｄ ｉｔｓ
ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｌｏｎ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[ Ｊ] . Ａｃｔａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ Ｚｈｅｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ (浙江农业学
报)ꎬ １９９９ꎬ １１(５):２４５－２４８.
[７] 　 Ｗａｎｇ Ｊꎬ Ｇｏｎｇ Ｇ Ｙꎬ Ｇｕｏ Ｓ Ｇꎬ ｅｔ ａｌ. Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒａｃｅｓ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｏｎ ｃｕｃｕｒｂｉｔｓ ｉｎ
Ｂｅｉｊｉｎｇ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [ Ｊ] .Ｃｈｉｎａ Ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ (中国蔬
菜)ꎬ ２００６ꎬ (８):ｌ７－１９.
[８] 　 Ｂａｏ Ｈ Ｑꎬ Ｘｕ Ｙꎬ Ｄｕ Ｙ Ｃꎬ ｅｔ ａｌ. Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒａｃｅｓ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｏｎ ｃｕｃｕｒｂｉｔｓ ｉｎ
Ｓａｎｙａꎬ Ｈａｉｎａｎ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ) [ Ｊ ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｃｈａｎｇｊｉａｎｇ Ｖｅｇｅｔａｂｌｅｓ (长江蔬菜)ꎬ ２００８ꎬ ４９－５１.
[９] 　 Ｘｉａｎ Ｆ. Ｇｅｎｅｔｉｃ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓꎬ ｈｏｒｍｏｎａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ａｎｄ
ｃＤＮＡ－ＡＦＬＰ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ
ｉｎ ｗｉｌｄ ｍｅｌｏｎ [ ＳＰ. Ａｇｒｅｓｔｉｓ (ＮＡＵＤ.) Ｇｒｅｂ.] ( ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｄ] . Ｓｈａａｎｘｉ: Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ａ＆Ｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
(陕西: 西北农林科技大学)ꎬ ２０１２.
[１０] Ａｎａｇｎｏｓｔｏｕ Ｋꎬ Ｊａｈｎ Ｍꎬ Ｐｅｒｌ Ｔ Ｒ. Ｉｎｈｅｒｉｔａｎｃｅ ａｎｄ
ｌｉｎｋａｇｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｚｕｃｃｈｉｎｉ ｙｅｌｌｏｗ ｍｏｓａｉｃ
ｖｉｒｕｓꎬ Ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓꎬ Ｐａｐａｙａ ｒｉｎｇ ｓｐｏｔ
ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｉｎ ｍｅｌｏｎ [ Ｊ] . Ｅｕｐｈｙｔｉｃａꎬ
２０００ꎬ １１６: ２６５－２７０.
[１１] Ｍｏｈａｍｅｄ Ｙ Ｆ. Ｃａｕｓａｌ ａｇｅｎｔｓ ｏｆ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｏｆ
ｃｕｃｕｒｂｉｔｓ ｉｎ Ｓｕｄａｎ [Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅꎬ １９９５ꎬ ７９(６):
６３４－６３６.
[１２] Ｐｉｌｌｉｎｇ Ｊꎬ Ｗｉｌｌｍｉｔｚｅｒ Ｌꎬ Ｆｉｓａｈｎ Ｊ. Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ
Ｐｅｔｕｎｉａ ｉｎｆｌａｔａ ｐｅｃｔｉｎ ｍｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒａｓｅ ｉｎ Ｓｏｌａｎｕｍ
ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ Ｌ. ｅｎｈａｎｃｅｓ ｓｔｅｍ ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｏｄｉｆｉｅｓ
ｃａｔｉｏｎ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ [Ｊ] . Ｐｌａｎｔａꎬ ２０００ꎬ ２１０:３９１－３９９.
[１３] Ｐｅｒｃｈｅｐｉｅｄ Ｌꎬ Ｂａｒｄｉｎ Ｍꎬ Ｄｏｇｉｍｏｎｔ Ｃꎬ ｅｔ ａｌ. Ｒｅｌａｔｉｏｎ￣
ｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｏｃｉ ｃｏｎｆｅｒｒｉｎｇ ｄｏｗｎｙ ｍｉｌｄｅｗ ａｎｄ
ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｍｅｌｏｎ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｂｙ ｑｕａｎ￣
ｔｉｔａｔｉｖｅ ｔｒａｉｔ ｌｏｃｉ ｍａｐｐｉｎｇ [ Ｊ] . Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙꎬ ２００５ꎬ
９５(５):５５６－５６５.
[１４] Ｐéｒｉｎ Ｃꎬ Ｈａｇｅｎ Ｌꎬ Ｄｅ Ｃｏｎｔｏ Ｖꎬ ｅｔ ａｌ. Ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ
ｍａｐ ｏｆ Ｃｕｃｕｍｉｓ ｍｅｌｏ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｗｏ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｉｎｂｒｅｄ
ｌｉｎｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ [ Ｊ] . Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｇｅｎｅ￣
ｔｉｃｓꎬ ２００２ꎬ １０４(６): １０１７－１０３４.
[１５] Ｔｅｉｘｅｉｒａ Ａ Ｐ Ｍꎬ Ｂａｒｒｅｔｏ Ｆ Ａ ｄａ Ｓꎬ Ｃａｍａｒｇｏ Ｌ Ｅ Ａ.
Ａｎ ＡＦＬＰ ｍａｒｋｅｒ ｌｉｎｋｅｄ ｔｏ ｔｈｅ Ｐｍ－１ ｇｅｎｅ ｔｈａｔ ｃｏｎｆｅｒｓ
ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｘａｎｔｈｉｉ ｒａｃｅ １ ｉｎ Ｃｕｃｕｍｉｓ
ｍｅｌｏ [Ｊ] . Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙꎬ ２００８ꎬ ３１
(２): ５４７－５５０.
[１６] Ｃｈｅｎｇ Ｈ. Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ
ＡＰＸ ａｎｄ Ｍｌｏ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｍｕｓｋｍｅｌｏ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｄ] .
Ｓｈａｎｄｏｎｇ: Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ (山东:
山东农业大学)ꎬ ２００９.
[１７] ]Ｆｌｏｒｉｓ Ｅꎬ Ａｌｖａｒｅｚ Ｊ Ｍ. Ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｍｅｌｏｎ ｌｉｎｅｓ ｔｏ Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ ｆｕｌｉｇｉｎｅａ [ Ｊ] .
Ｅｕｐｈｙｔｉｃꎬ １９９５ꎬ ８１:１８１－１８６.
[１８] ＭｃＣｒｅｉｇｈｔ Ｊ Ｄ. Ｍｅｌｏｎ￣ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ
ｒｅｖｅａｌ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｍｅｌｏｎ ｃｕｌｔｉｇｅｎｓ ａｎｄ Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ
ｘａｎｔｈｉｉ ｒａｃｅｓ １ ａｎｄ ２ [ Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ ２００６ꎬ １３１:５９－６５.
[１９] Ｚｈａｎｇ Ｙꎬ Ｚｈａｎｇ Ｘꎬ Ｍａ Ｊ Ｘꎬ ｅｔ ａｌ. Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ
ｓｏｕｒｃｅ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｌｏｎ ｔｏ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ [Ａ] .Ｔｈｅ
１２ｔｈ ｎａｔｉｏｎａｌ ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ ＆ ｍｅｌｏｎ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ｒｅｓｅａｒｃｈ
ａｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｅｔｉｎｇꎬ ２００９ꎬ １６６.
[２０] Ｂａｃｈｅｍ Ｃ Ｗꎬ Ｏｏｍｅｎ Ｒ Ｊ Ｆꎬ Ｖｉｓｓｅｒ Ｒ Ｇ Ｆ. Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ
ｉｍａｇｉｎｇ ｗｉｔｈ ｃＤＮＡ￣ＡＦＬＰ: ａ ｓｔｅｐ￣ｂｙ￣ｓｔｅｐ ｐｒｏｔｒｃｏｌ
[ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｒｅｐｏｒｔｅｒꎬ １９９８ꎬ １６:
１５７－１７３.
２７
　
　 １期 刘长命ꎬ等:野生甜瓜‘云甜￣９３０’与白粉病菌互作的基因表达特征
[２１] Ｃｏｒａｍ Ｔ Ｅꎬ Ｓｅｔｔｌｅｓ Ｍꎬ Ｃｈｅｎ Ｘ Ｍ. Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅ
ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｈｉｇｈ￣ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｄｕｌｔ￣ｐｌａｎｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ ｂｙ Ｙｒ３９ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｗｈｅａｔ￣Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｓｔｒｉｉｆｏｒ￣
ｍｉｓ ｆ.ｓｐ. ｔｒｉｔｉｃｉ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ [Ｊ] . Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｌａｎｔ Ｐａｔｈｏ￣
ｌｏｇｙꎬ ２００８ꎬ ９:４７９－４９３.
[２２] Ｏｍｉｅｃｉｎｓｋｉ Ｃ Ｊꎬ Ｈａｓｓｅｔｔ Ｃꎬ Ｈｏｓａｇｒａｈａｒａ Ｖ. Ｅｐｏｘｉｄｅ
ｈｙｄｒｏｌａｓｅ－ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｎｄ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ [ Ｊ] .
Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ Ｌｅｔｔｅｒｓꎬ ２０００ꎬ １１２:３６５－３７０.
[２３] Ｊｉａ Ｘ Ｌꎬ Ｗａｎｇ Ｚ Ｚꎬ Ｗａｎｇ Ｐ. Ｄｙｎａｍｉｃｓ ｏｆ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ
ｄｅｆｅｎｓｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｉｎｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ
ｂｅｔｗｅｅｎ ｒｉｃｅ ａｎｄ Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ)
[Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ (植物病理学报)ꎬ
２００２ꎬ ３２( ３):２０６－２１３.
[２４] Ｌｉ Ｇ Ｘꎬ Ｃｈｅｎ Ｈ Ｒꎬ Ｗｕ Ｍ Ｓꎬ ｅｔ ａｌ. Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｎｄ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｄｅｆｅｎｓｅ ｇｅｎｅｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｒｉｃｅ ｗｉｔｈ ｏｖｅｒ
－ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｏｒ ＲＮＡｉ － ｓｉｌｅｎｃｅｄ ＯｓＢＴＦ３ ｇｅｎｅ ｕｐｏｎ
ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｊ] . Ａｃｔａ Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏ￣
ｌｏｇｉｃａ Ｓｉｎｉｃａ (植物病理学报)ꎬ ２０１２ꎬ ４２(２): １６９－
１７５.
[２５] Ｌｉ Ａ Ｌ. Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｅａｒ￣
ｌｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｗｈｅａｔ ｇｅｎｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ
( ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｒ] . Ｂｅｉｊｉｎｇ: ｔｈｅ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ(ＣＡＡＳ) (北京:中国农业科学
院)ꎬ２００５.
[２６] Ｋｏｂａｅ Ｙꎬ Ｓｅｋｉｎｏ Ｔꎬ Ｙｏｓｈｉｏｋａ Ｈꎬ ｅｔ ａｌ. Ｌｏｓｓ ｏｆ
ＡｔＰＤＲ８ꎬ ａ ｐｌａｓｍａ ｍｅｍｂｒａｎｅ ＡＢＣ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ ｏｆ
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａꎬ ｃａｕｓｅｓ ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ
ｕｐｏｎ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ [ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙꎬ
２００６ꎬ ４７(３): ３０９－３１８.
[２７] Ｓｔｅｉｎ Ｍꎬ Ｄｉｔｔｇｅｎ Ｊꎬ Ｓáｎｃｈｅｚ￣Ｒｏｄｒíｇｕｅｚ Ｃꎬ ｅｔ ａｌ.
Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ＰＥＮ３ / ＰＤＲ８ꎬ ａｎ ＡＴＰ ｂｉｎｄｉｎｇ ｃａｓｓｅｔｔｅ
ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒꎬ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ ｎｏｎ－ｈｏｓｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｉｎａｐ￣
ｐｒｏｐｒｉａｔｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ｔｈａｔ ｅｎｔｅｒ ｂｙ ｄｉｒｅｃｔ ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ
[Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌꎬ ２００６ꎬ １８: ７３１－７４６.
[２８] Ｍａｓａｔａｋｅ Ｋꎬ Ｃｈｉｋａｒａ Ｋꎬ Ｈｉｒｏｓｈｉ Ｆꎬ ｅｔ ａｌ. Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓ￣
ｓｉｏｎ ｏｆ Ｓ￣ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ (ＳＡＭＤＣ)
ｉｎ Ｘｅｎｏｐｕｓ ｅｍｂｒｙｏｓ ａｃｔｉｖａｔｅｓ ｍａｔｅｒｎａｌ ｐｒｏｇｒａｍ ｏｆ
ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｓ ａ " ｆａｉｌ￣ｓａｆｅ" ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｅａｒｌｙ ｅｍｂｒｙｏ￣
ｇｅｎｅｓｉｓ [Ｊ] . Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈꎬ ２００３ꎬ １３(３): １４７－１５８.
[２９] Ｚｅｎｇ Ｘ Ｑꎬ Ｗａｎｇ Ｃ Ｙꎬ Ｚｈａｎｇ Ｈꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎ ｕｐ￣ｒｅｇｕｌａｔｅｄ Ｓ￣ａｄｅｎｏｓｙｌｍｅｔｈｉ￣
ｏｎｉｎｅ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓ (ＳＡＭＤＣ) ｇｅｎｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｓｔｒｉｐｅ
ｒｕｓｔ ( Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ ｆ. ｓｐ. ｔｒｉｔｉｃｉ) ｉｎ ｗｈｅａｔ ( ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ) [Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒｉｔｉｃｅａｅ Ｃｒｏｐｓ(麦类作物学
报)ꎬ ２０１１ꎬ ３１(５):１１２－１２１.
[３０] Ｍａｒı′ａ Ｉꎬ Ｏｌｏｒｉｚꎬ Ｖı′ｃｔｏｒ Ｇꎬ ｅｔ ａｌ. Ｓｕｇａｒｃａｎｅ ｇｅｎｅｓ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｍｅｌａｎｏ￣
ｃｅｐｈａｌａ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ: ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ
[Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓꎬ ２０１２ꎬ ３１:９５５－９６９.
[３１] Ｌｉ Ｃ Ｗ. Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌꎬ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ａｎｄ ｍａｃｒｏｓｃｏｐｉｃ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ ｉｎｔｏ ｍｏｎｏｇｅｎｉｃ ａｎｄ ｐｏｌｙｇｅｎｉｃ ｉｎｔｅｒａｃ￣
ｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｏｍａｔｏ ａｎｄ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ [Ｄ] . Ｗａｇｅｎｉｎ￣
ｇｅｎ: Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ Ｕｉｎｖｅｒｓｉｔｙꎬ ２００５.
[３２] Ｌｉ Ｈ Ｅ. Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｗｏ
ＷＲＫＹ ｇｅｎｅｓ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ
ｆｒｏｍ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ￣ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｗｉｌｄ Ｖｉｔｉｓ
ｐｓｅｕｄｏｒｅｔｉｃｕｌａｔａ ‘Ｂａｉｈｅ￣３５￣１’ [Ｄ] . Ｓｈａａｎｘｉ: Ｎｏｒｔｈ￣
ｗｅｓｔ Ａ＆Ｆ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ (陕西:西北农林科技大学)ꎬ
２０１０.
[３３] Ｗｕ Ｙ Ｒꎬ Ｚｈａｏ Ｓ Ｙꎬ Ｘｉａ Ｇ Ｍ. Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｐｌａｎｔ－ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ( ｉｎ Ｃｈｉ￣
ｎｅｓｅ) [Ｊ] . Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ(中国生
物工程杂志)ꎬ ２００２ꎬ ２２(３): ５４－５７.
[３４] Ｃｏｗｌｅｙ Ｔꎬ Ｗａｌｔｅｍ Ｄ Ｒ. Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｉｎ
ｂａｒｌｅｙ ｒｅａｃｔｉｎｇ ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅｌｙ ｔｏ ｔｈｅ ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ
ｆｕｎｇｕｓ Ｂｌｕｍｅｒｉａ ｇｒａｍｉｎｉｓｆ ｓｐ. ｈｏｒｄｅｉ [ Ｊ] . Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ
ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔꎬ ２００２ꎬ ２５(３): ４６１－４６８.
[３５] Ｂｏｈｎ Ｇ Ｗꎬ Ｗｈｉｔａｋｅｒ Ｔ Ｗ. Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ｏｆ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ
ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｒａｃｅ ２ ｉｎ ｍｕｓｋｍｅｌｏｎ [ Ｊ] . Ｐｈｙｔｏｐａ￣
ｔｈｏｌｏｇｙꎬ １９６４ꎬ ５４: ５８７－５９１.
责任编辑:李晖
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