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作 者 ：王清 王蒂 黄俊生 郭安平

期 刊 ：西北植物学报 2003年 10期

关键词：马铃薯；PPO基因克隆；反义基因表达载体构建；

Keywords:potatoes, polyphenol oxidase gene clone, anti-sense expression vector construction,

摘 要 ：从甘农薯1号马铃薯试管苗叶片中提取总DNA，根据Genebank报道的马铃薯多酚氧化酶基因(PPT32)序列，设计合成了带有BamHⅠ、SacⅠ特定酶切位点的2对特异引物，通过PCR获得l840bP和476bP的扩增产物。测序结果表明，l840bp的扩增产物与Oenebank中发表的序列一致，476bp的扩增产物正是欲扩增的马铃薯多酚氧化酶基因的同源片段。将2个扩增产物反向连接到表达载体PC3中，通过双酶切鉴定后，按直接导入法实现反义基因表达载体质粒向农杆菌EHA105的导人；并经PCR鉴定证明，此质粒已整合到农杆菌Ti上。

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