全 文 ：犇犗犐：１０．１１６８６／犮狔狓犫２０１５２１４ 犺狋狋狆：／／犮狔狓犫．犾狕狌．犲犱狌．犮狀
鲍根生，李春杰．青藏高原高寒草地优势禾草－紫花针茅内生真菌分离和鉴定．草业学报，２０１６，２５（３）：３２４２．
ＢＡＯＧｅｎＳｈｅｎｇ，ＬＩＣｈｕｎＪｉｅ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｉｎｆｅｃｔｉｎｇ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪，ａｄｏｍｉｎａｎｔｇｒａｓｓｉｎｍｅａｄｏｗｓｏｆｔｈｅＱｉｎｇｈａｉ－
ＴｉｂｅｔＰｌａｔｅａｕ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１６，２５（３）：３２４２．
青藏高原高寒草地优势禾草－紫花针茅
内生真菌分离和鉴定
鲍根生１，２，李春杰１
（１．草地农业生态系统国家重点实验室，兰州大学草地农业科技学院，甘肃 兰州７３００２０；２．青海大学畜牧兽医科学院，青海 西宁８１００１６）
摘要：紫花针茅作为青藏高原高寒草原群落中主要优势禾草之一，关于该植物所感染禾草内生真菌的形态和分类
研究尚未见报道。本研究采用分离培养获取不同样点的紫花针茅内生真菌菌落，利用特异性引物克隆紫花针茅内
生真菌序列，并与 Ｇｅｎｂａｎｋ中下载的序列共同构建系统进化树。结果表明，青海省紫花针茅样品带菌率高达
１００％，而其他区域样品均不带菌。分离的内生真菌菌落从菌落形态、生长速度及分生孢子形态等特征均与
犈狆犻犮犺犾狅ё属内生真菌的形态特征相似。系统进化关系表明，它们分别与北美洲竖针茅体内无性态内生真菌
犈狆犻犮犺犾狅ё犮犺犻狊狅狊犪、醉马草内生真菌犈狆犻犮犺犾狅ё犻狀犲犫狉犻犪狀狊及甘肃内生真菌犈狆犻犮犺犾狅ё犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊具有较近的亲缘关系，
进一步说明紫花针茅所感染内生真菌与宿主间未体现出严格的宿主特异性。
关键词：青藏高原；紫花针茅；内生真菌；系统发育；宿主 　　
犐狊狅犾犪狋犻狅狀犪狀犱犻犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳犲狀犱狅狆犺狔狋犲狊犻狀犳犲犮狋犻狀犵犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪，犪犱狅犿犻狀犪狀狋
犵狉犪狊狊犻狀犿犲犪犱狅狑狊狅犳狋犺犲犙犻狀犵犺犪犻－犜犻犫犲狋犘犾犪狋犲犪狌
ＢＡＯＧｅｎＳｈｅｎｇ１，２，ＬＩＣｈｕｎＪｉｅ１
１．犛狋犪狋犲犓犲狔犔犪犫狅狉犪狋狅狉狔狅犳犌狉犪狊狊犾犪狀犱犃犵狉狅犲犮狅狊狔狊狋犲犿狊，犆狅犾犾犲犵犲狅犳犘犪狊狋狅狉犪犾犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犲犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅犵狔，犔犪狀狕犺狅狌犝狀犻
狏犲狉狊犻狋狔，犔犪狀狕犺狅狌７３００２０，犆犺犻狀犪；２．犃犮犪犱犲犿狔狅犳犃狀犻犿犪犾犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犞犲狋犲狉犻狀犪狉狔犕犲犱犻犮犻狀犲，犙犻狀犵犺犪犻犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犡犻狀犻狀犵８１００１６，犆犺犻狀犪
犃犫狊狋狉犪犮狋：犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪ｉｓａｄｏｍｉｎａｎｔｇｒａｓｓｓｐｅｃｉｅｓｉｎａｌｐｉｎｅｇｒａｓｓｌａｎｄｏｆｔｈｅＱｉｎｇｈａｉ－ＴｉｂｅｔＰｌａｔｅａｕ．
Ｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｉｓｓｐｅｃｉｅｓｔｏｄａｔｅｈａｓｆｏｃｕｓｅｄｏｎｄｅｆｉｎｉｎｇｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｃｏｍｍｕｎｉｔｙｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ
ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｔｒａｉｔｓａｎｄｇｒａｓｓｌａｎｄｃｏｍｍｕｎｉｔｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｆｕｎｇｉｆｒｏｍ犛．狆狌狉狆狌狉犲犪ｈａｓｓｅｌｄｏｍｂｅｅｎａｔｔｅｍｐｔｅｄ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｗａｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍ犛．狆狌狉狆狌狉犲犪ｂｙ
ｌｅａｆｓｕｒｆａｃｅｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄａｘｅｎｉｃｃｕｌｔｕｒｅ，ａｎｄｈｙｐｈａｅ，ｃｏｌｏｎｙｐｈｙｓｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ａｎｄｃｏｎｉｄｉａｌｍｏｒｐｈｏｌｏ
ｇｙｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓｗｅｒｅｃｌｏｎｅｄｂｙ狋狌犫犅，狋犲犳犃，ａｎｄ犪犮狋犌ｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓ，ａｎｄ
ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓｗｅｒｅｄｏｗｎｌｏａｄｅｄｆｒｏｍＧｅｎｂａｎｋｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｈｏｍｏｌｏｇｙ．Ａｍａｘｉｍｕｍｌｉｋｅ
ｌｉｈｏｏｄｍｅｔｈｏｄｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔａｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅ．Ｉｔｗａｓｆｏｕｎｄｔｈａｔｅｎｄｏｐｈｙｔｅｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅｉｎ犛．狆狌狉
狆狌狉犲犪ｗａｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｈｉｇｈｉｎＱｉｎｇｈａｉｐｒｏｖｉｎｃｅ，ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｏｔｈｅｒｓｉｔｅｓ．Ｃｏｌｏｎｙｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，
ｇｒｏｗｔｈｓｐｅｅｄａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｃｏｎｉｄｉａｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｃａｌｔｏｔｈｏｓｅｏｆ犈狆犻犮犺犾狅ёｓｐｐ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆ狋狌犫犅ａｎｄ狋犲犳犃
ｐｈｙｌｏｇｅｎｙｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｆｏｕｒｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍ 犛．狆狌狉狆狌狉犲犪 ｗｅｒｅｍｏｓｔｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏ
３２－４２
２０１６年３月
　　　草　业　学　报　　　
　　　ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ　　　
第２５卷　第３期
Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．３
收稿日期：２０１５０４２３；改回日期：２０１５０７１７
基金项目：国家９７３计划课题（２０１４ＣＢ１３８７０２），国家自然科学基金项目（３１３７２３６６），教育部创新团队发展计划项目（ＩＲＴ１３０１９）和公益性行业
（农业）科研专项经费项目（２０１２０３０４１）资助。
作者简介：鲍根生（１９８０），男，青海乐都人，助理研究员，在读博士。Ｅｍａｉｌ：ｂａｏｇｅｎｓｈｅｎｇ２００８＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
通信作者Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．Ｅｍａｉｌ：ｃｈｕｎｊｉｅ＠ｌｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
犈狆犻犮犺犾狅ё犮犺犻狊狅狊犪ｆｒｏｍＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａｎ犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿犲犿犻狀犲狀狊ａｎｄｆｏｒｍｅｄｔｗｏｄｉｓｔｉｎｃｔｂｒａｎｃｈｅｓ．Ｆｏｕｒｏｔｈｅｒｅｎ
ｄｏｐｈｙｔｅｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍ犛．狆狌狉狆狌狉犲犪ｗｅｒｅｍｏｓｔｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏ犈狆犻犮犺犾狅ё犻狀犱犫狉犻犪狀狊ａｎｄ犈狆犻犮犺犾狅ё犵犪狀
狊狌犲狀狊犻狊，ｗｈｉｃｈｉｎｆｅｃｔ犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿犻狀犲犫狉犻犪狀狊ａｎｄｔｈｅｓｅｓｔｒａｉｎｓｆｏｒｍｅｄａｎｏｔｈｅｒｄｉｓｔｉｎｃｔｂｒａｎｃｈ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ａ
ｎａｌｙｓｉｓｏｆ犪犮狋犌ｐｈｙｌｏｇｅｎｙｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｆｏｕｒｃｌａｒｉｆｙｆｕｒｔｈｅｒｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍ犛．狆狌狉狆狌狉犲犪ｗｅｒｅ
ａｌｓｏｍｏｓｔｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏ犈狆犻犮犺犾狅ё犮犺犻狊狅狊犪ｆｒｏｍ ＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａｎ犃．犲犿犻狀犲狀狊ａｎｄｆｏｒｍｅｄａｎｏｔｈｅｒｄｉｓｔｉｎｃｔ
ｂｒａｎｃｈ．Ｏｔｈｅｒｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｗｅｒｅｍｏｓｔｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏ犈狆犻犮犺犾狅ё犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊ｆｒｏｍＣｈｉｎａ（Ｘｉｎ
ｊｉａｎｇ）ａｎｄｆｏｒｍｅｄａｎｏｔｈｅｒｄｉｓｔｉｎｃｔｂｒａｎｃｈ．Ｏｕｒｒｅｓｕｌｔｓｓｕｇｇｅｓｔｔｈａｔｔｈｅｈｏｓｔｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｍｉｇｈｔｎｏｔｏｃｃｕｒｉｎｅｎ
ｄｏｐｈｙｔｅｓｉｎｆｅｃｔｉｎｇ犛．狆狌狉狆狌狉犲犪ａｎｄ犛．狆狌狉狆狌狉犲犪ａｐｐｅａｒｓｔｏｂｅｉｎｆｅｃｔｅｄｂｙｖａｒｉｏｕｓ犈狆犻犮犺犾狅ёｓｐｅｃｉｅｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：Ｑｉｎｇｈａｉ－ＴｉｂｅｔＰｌａｔｅａｕ；犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪；犈狆犻犮犺犾狅ё；ｐｈｙｌｏｇｅｎｙ；ｈｏｓｔ
紫花针茅（犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪）隶属禾本科针茅属［１］，多年生草本，系寒旱生植物，粗蛋白含量高，粗纤维少，营
养价值比较高［２３］。主要分布在海拔１９００～５１５０ｍ的高原地带，是青藏高原、帕米尔高原和中亚高山地带的特
有植物［４５］。紫花针茅草原是青藏高原地区高寒草地中分布面积较广、最具有代表性的草地类型，其面积占高寒
草原类草地总面积的３０．９２％［６７］；其建群种紫花针茅具有耐寒、耐旱、耐践踏和抗风沙等特性［８１０］。
目前有关紫花针茅研究主要集中在基因多样性、群落分类、生理生态和草原群落等方面［３，５６，９，１１１６］。然而，有
关紫花针茅感染的微生物及与微生物间互作研究较少，李振东等［１７］分离紫花针茅体内内生细菌，发现内生细菌
具有较强的抑菌活性。南志标和李春杰［１８］研究发现，紫花针茅带菌高达６７％；同时，笔者在青海高原禾草内生真
菌带菌率检测研究发现，紫花针茅带菌率高达１００％（数据未发表）。
麦角菌科的内生真菌与冷季型禾草在长期进化过程中形成了互惠共生关系［１９２３］。内生真菌不仅能提高宿主
对逆境的适应性［２４２９］，同时合成的次生代谢物能提高草食家畜和昆虫的拒食性［３０３４］；而宿主为内生真菌提供生
活的场所和生长所需的营养物质［２０，３５３６］。Ｌｅｕｃｈｔｍａｎｎ等［３７］将犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿 属内生真菌归类到犈狆犻犮犺犾狅ё属，
总计４３种禾草内生真菌。目前，分子系统发育分析已广泛应用于禾草内生真菌分类和系统进化研究中，其中保
守区的编码蛋白（狋狌犫犅）、转录延长因子（狋犲犳犃）和肌动蛋白（犪犮狋犌）基因序列被用来区分不同宿主体内内生真菌的
分类［３８３９］。本研究利用形态学和分子标记的方法，通过菌落和分生孢子形态比较，构建系统发育树，对紫花针茅
内生真菌进行归类并进行分子鉴定，为今后紫花针茅在高寒逆境条件下适应性和利用内生真菌抗逆性育种提供
新思路。
１　材料与方法
１．１　供试材料
紫花针茅植物样品主要在青藏高原地区天然高寒草地上采集，于２０１２年至２０１４年８－９月在牧草成熟季
节，在西藏阿里地区、青海省、四川省西北部和甘肃省南部采集紫花针茅单株样品２２份。采集区域介于北纬
３０°１４′５４．０″－３７°１９′５０．２″，东经７９°５５′４７″－１０２°３２′４２″，草地类型主要以高寒草原为主（表１）。每个采样点间隔
１０ｍ，随机采集１０～２０株紫花针茅单株地上部分放入信封，编号后带回实验室。
１．２　内生真菌分离和培养
每个单株挑选５粒种子，参照李春杰等［３９］的方法进行种皮和糊粉层内生真菌检测，具体方法参照Ｉａｎｎｏｎｅ
等［４０］的方法。选取带菌种子进行表面消毒，具体方法为：先用７０％酒精消毒１ｍｉｎ，然后用１％次氯酸钠消毒３～
５ｍｉｎ，用无菌水冲洗３～５次，用灭菌滤纸吸干种子表面残留的液体，随后将种子摆放到马铃薯葡萄糖琼脂
（ＰＤＡ）培养基上，在２５℃黑暗条件下培养１月。在种子表面形成菌落后，在边缘挑取少许菌丝在ＰＤＡ培养基上
进行培养，待产孢后挑取单个孢子在２５℃黑暗条件下进行纯培养，每周测量菌落直径，４周后进行分生孢子和分
生孢子梗形态观察和大小测量。
１．３　ＤＮＡ分离、扩增和纯化
参照高效真菌ＤＮＡ提取试剂盒（ＯＭＥＧＡ公司）提取ＤＮＡ方法，用单孢培养菌落的１０～５０ ｍｇ新鲜的紫
３３第２５卷第３期 草业学报２０１６年
花针茅内生真菌菌丝提取内生真菌全基因组，分别用
狋狌犫犅（５′ＧＡＧＡＡＡＡＴＧＣＧＴＧＡＧＡＴＴＧＴ，３′ＧＴＴＴ
ＣＧＴＣＣＧＡＧＴＴＣＴＣＧＡＣ），狋犲犳犃（５′ＧＧＧＴＡＡＧＧＡＣ
ＧＡＡＡＡＧＡＣＴＣＡ，３′ＣＧＧＣＡＧＣＧＡＴＡＡＴＣＡＧＧＡ
ＴＡＧ）和犪犮狋犌（５′ＧＡＡＧＴＴＧＣＴＧＣＣＣＴＣＧＴＴＡＴＣ，
３′ＡＡＣＣＡＣＣＧＡＴＣＣＡＧＡＣＡＧＡＧＴ）３对引物对内
生真菌基因组进行聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增。ＰＣＲ
选用２５μＬ体系，包括５ｎｇＤＮＡ模板、１．０ＵＴａｑ
ＤＮＡ聚合酶、１×ＰＣＲ缓冲液、１．５ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２、
０．２ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰ（ｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＴＴＰ）和
１μｍｏｌ／Ｌ上、下游引物。ＰＣＲ循环参数设定为：９４℃
预变性５ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，５０℃退火１ｍｉｎ，３５个循
环，最后，７２℃延展１０ｍｉｎ，并在４℃保持。将ＰＣＲ扩
增产物在１．５％琼脂糖凝胶上进行电泳，回收片段连
接于ｐＧＥＭ?ＴＥａｓｙ载体（Ｐｒｏｍｅｇａ生物公司）并转
入大肠杆菌ＤＨ５α。每个样本挑选５个阳性克隆，并
送交兰州励合生物技术公司进行测序。所测序列提交
表１　紫花针茅分离内生真菌编号和美国生物技术信息
中心（犖犆犅犐）基因库中狋狌犫犅、狋犲犳犃和犪犮狋犌 序列登录号
犜犪犫犾犲１　犈狀犱狅狆犺狔狋犲犻狊狅犾犪狋犲狊犳狉狅犿犛．狆狌狉狆狌狉犲犪犪狀犱
犌犲狀犅犪狀犽犪犮犮犲狊狊犻狅狀狀狌犿犫犲狉狊狅犳狋犺犲犻狉
狋狌犫犅，狋犲犳犃犪狀犱犪犮狋犌狊犲狇狌犲狀犮犲狊
分离内生真菌
编号Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ
ｎｕｍｂｅｒ
ＮＣＢＩ基因库登录号
ＧｅｎＢａｎｋａｃｃｅｓｓｉｏｎｎｕｍｂｅｒｉｎＮＣＢＩ
狋狌犫犅 狋犲犳犃 犪犮狋犌
Ｓｐ２ ＫＰ８７７３２３ ＫＰ８７７３１５ ＫＰ８７７３３１
Ｓｐ１９ ＫＰ８７７３２４ ＫＰ８７７３１６ ＫＰ８７７３３２
Ｓｐ２５ ＫＰ８７７３２５ ＫＰ８７７３１７ ＫＰ８７７３３３
Ｓｐ２７ ＫＰ８７７３２６ ＫＰ８７７３１８ ＫＰ８７７３３４
Ｓｐ４１ ＫＰ８７７３２７ ＫＰ８７７３１９ ＫＰ８７７３３５
Ｓｐ４９ ＫＰ８７７３２８ ＫＰ８７７３２０ ＫＰ８７７３３６
Ｓｐ５１ ＫＰ８７７３２９ ＫＰ８７７３２１ ＫＰ８７７３３７
Ｓｐ５４ ＫＰ８７７３３０ ＫＰ８７７３２２ ＫＰ８７７３３８
至ＧｅｎＢａｎｋ数据库，狋狌犫犅序列登录号为ＫＰ８７７３２３～ＫＰ８７７３３０，狋犲犳犃序列登录号为ＫＰ８７７３１５～ＫＰ８７７３２２，犪犮狋犌
序列登录号为ＫＰ８７７３３１～ＫＰ８７７３３８（表１）。
１．４　序列比对及系统发育分析
用紫花针茅内生真菌狋狌犫犅、狋犲犳犃和犪犮狋犌 测序序列在ＮＣＢＩ基因数据库中Ｂｌａｓｔ程序搜索直系同源序列，挑
选禾草内生真菌相关的狋狌犫犅、狋犲犳犃和犪犮狋犌 序列（表２）。由于ＮＣＢＩ提交的不同内生真菌不同标记序列长度存在
差异，根据Ｃｒａｖｅｎ等［３８］和Ｇｅｎｔｉｌｅ等［４１］提出狋狌犫犅、狋犲犳犃和犪犮狋犌 序列差异主要体现在内含子区域差异的观点，所
以所用序列去除外显子而保存内含子进行系统发育分析［３７，４０］。用ＣｌｕｓｔａｌＸ进行比对，比对结果中有歧义的位
点进行人工优化。比对结果采用ＰＡＵＰ４．０ｂ１０软件中最大简约法（ｍａｘｉｍｕｎｐａｒｓｉｍｏｎｙ，ＭＰ）构建系统发育
树。空白位点作为缺失信息处理，同时，每个位点状态不排序且权重相等。采用启发式搜索获取最大简约树，用
Ｂｏｏｔｓｔｒａｐ自展法１０００次重复，并将自展值大于５０值标记到进化树分枝上。
２　结果与分析
２．１　紫花针茅内生真菌分离和形态特征
２０１２－２０１４年分别从青藏高原地区２２个样点采集紫花针茅植物样品，其中青海省１１个样点采集紫花针茅
带菌率高达１００％，而西藏阿里、日喀则、那曲地区９个样点紫花针茅不带菌，四川省和甘肃省２个样点紫花针茅
亦不带菌（表２）。青海省紫花针茅分布样点共分离获得８个菌株，分离菌株的菌落形态相似。在２５℃黑暗培养
条件下，ＰＤＡ培养基上生长缓慢，平均生长速率为１１～１５ｍｍ／周；菌落正面白色棉质，质地致密，气生菌丝发达，
菌落中央隆起，边缘整齐（图１Ｂ）；反面从中央到边缘由暗褐色变成黄色（图１Ｃ）。分生孢子单生于分生孢子梗顶
端，光滑、透明、无隔，舟形或肾形，（３．２～７．３）μｍ×（２．６～３．３）μｍ（图１Ｅ）；分生孢子梗基部单生或基部生成两
个分枝，长８．４～２８．０μｍ，基部宽１．５～２．９μｍ，顶端宽０．６～１．１μｍ（图１Ｄ～Ｅ）。以上特征均符合犈狆犻犮犺犾狅ё属
内生真菌的形态特征。
２．２　系统发育分析
将紫花针茅分离的８个菌株（ｓｔｐｕ２、ｓｔｐｕ１９、ｓｔｐｕ２５、ｓｔｐｕ２７、ｓｔｐｕ４１、ｓｔｐｕ４９、ｓｔｐｕ５１、ｓｔｐｕ５４）的总ＤＮＡ为模
板，利用狋狌犫犅、狋犲犳犃和犪犮狋犌３个管家基因为引物分别扩增目的片段基因，各个引物只扩增到一个目的片段，未发
现其他拷贝。通过ＮＣＢＩ比对后，分别抽取５４，５２，５３条禾草内生真菌狋狌犫犅、狋犲犳犃和犪犮狋犌 序列；构建狋狌犫犅系统
４３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１６） Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．３
表２　紫花针茅采集样点及内生真菌带菌率检测
犜犪犫犾犲２　犐狀犳狅狉犿犪狋犻狅狀狅犳犮狅犾犲犮狋犻狀犵狊犻狋犲狊犪狀犱狉犲狊狌犾狋狊狅犳犻狀犳犲犮狋犻狅狀狅犮犮狌狉狉犲狀犮犲犳狅狉犛．狆狌狉狆狌狉犲犪
编号
Ｎｕｍｂｅｒ
采集地点
Ｓｉｔｅｓ
年份
Ｙｅａｒｓ
位置坐标Ｌｏｃａｔｉｏｎｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｓ
纬度
Ｌａｔｉｔｕｄｅ
经度
Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ
海拔
Ｅｌｅｖａｔｉｏｎ
（ｍ）
带菌率
Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ（％）
１ 青海省兴海县河卡镇ＨｅｋａＴｏｗｎ，ＸｉｎｇｈａｉＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３５°５５′１５．７″ １００°０２′２８．５″ ３２３１ １００
２ 青海省共和县尕海滩ＧａｈａｉＢｅａｃｈ，ＧｏｎｇｈｅＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３６°５１′０７．２″ １００°４５′２３．３″ ３２２７ １００
３ 青海省共和县石乃亥乡ＳｈｉｎａｉｈａｉＴｏｗｎ，ＧｏｎｇｈｅＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３７°０２′０３．１″ ９９°３４′４５．１″ ３２３０ １００
４ 青海省贵南县过马营镇ＧｕｏｍａｙｉｎｇＴｏｗｎ，ＧｕｉｎａｎＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３５°４７′２２．４″ １０１°１７′４２．７″ ３３２３ １００
５ 青海省贵南县黄沙头ＨｕａｎｇｓｈａｔｏｕＴｏｗｎ，ＧｕｉｎａｎＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３５°３２′１２．７″ １０１°０５′４１．４″ ３３６９ １００
６ 青海省同德县同德牧场ＴｏｎｇｄｅＰａｓｔｕｒｅ，ＴｏｎｇｄｅＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３５°１４′４５．９″ １００°４３′２５．６″ ３３０２ １００
７ 青海省同德县宁秀乡ＮｉｎｇｘｉｕＴｏｗｎ，ＴｏｎｇｄｅＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３５°１６′１９．４″ １００°５１′０１．８″ ３３３１ １００
８ 青海省刚察县泉吉乡ＱｕａｎｊｉＴｏｗｎ，ＧａｎｇｃｈａＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３７°１２′２７．８″ ９９°４９′０８．８″ ３２３１ １００
９ 青海省刚察县潘保村ＰａｎｂａｏＶｉｌａｇｅ，ＧａｎｇｃｈａＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１２ ３７°１９′５０．２″ １００°０９′２４．３″ ３３３８ １００
１０ 青海省玉树州称多县上庄村ＳｈａｎｇｚｈｕａｎｇＶｉｌａｇｅ，ＣｈｅｎｄｕｏＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉＰｒｏｖｉｎｃｅ２０１２ ３３°２１′３２．９″ ９７°０８′２８．８″ ３９２４ １００
１１ 青海省玉树州称多县通天河沿岸ＢａｎｋｏｆＴｏｎｇｔｉａｎＲｉｖｅｒ，ＣｈｅｎｄｕｏＣｏｕｎｔｙｏｆＱｉｎｇｈａｉ
Ｐｒｏｖｉｎｃｅ
２０１２ ３３°１９′０６．５″ ９７°００′０９．３″ ３６０７ １００
１２ 西藏阿里地区噶尔县狮泉河镇ＳｈｉｑｕａｎｈｅＴｏｗｎ，ＧａｅｒＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３２°３９′４７．５″ ７９°５５′４７．２″ ４６８２ ０
１３ 西藏阿里地区扎达县ＺｈａｄａＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３１°３１′４３．３″ ７９°５８′４２．８″ ４５８４ ０
１４ 西藏阿里地区噶尔县门土乡 ＭｅｎｔｕＴｏｗｎ，ＧａｅｒＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３１°１０′５７．７″ ８０°４７′２２．１″ ４４９５ ０
１５ 西藏阿里地区普兰县ＰｕｌａｎＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３０°４２′５７．１″ ８１°２１′３９．４″ ４６３９ ０
１６ 西藏日喀则地区仲巴县ＺｈｏｎｇｂａＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３０°１４′５４．５″ ８２°５８′３１．７″ ４６５１ ０
１７ 西藏阿里地区措勤县ＣｕｏｑｉｎＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３１°０３′０６．８″ ８５°０５′４２．２″ ４７９４ ０
１８ 西藏阿里地区尼玛县ＮｉｍａＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３２°００′０５．７″ ８６°５０′５４．５″ ４５３８ ０
１９ 西藏那曲地区班戈县ＢａｎｇｅＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３１°３６′５８．４″ ８９°３２′１４．１″ ４６３６ ０
２０ 西藏那曲地区那曲县ＮａｑｕＣｏｕｎｔｙｏｆＴｉｂｅｔＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１４ ３０°５０′５２．１″ ９０°３７′１５．６″ ４６９０ ０
２１ 四川省红原县ＨｏｎｇｙｕａｎＣｏｕｎｔｙｏｆＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３２°４７′５６．４″ １０２°３２′４２．１″ ３４００ ０
２２ 甘肃省甘南州夏河县ＸｉａｈｅＣｏｕｎｔｙｏｆＧａｎｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅ ２０１３ ３３°２２′２０．７″ ９７°００′５７．１″ ３６９０ ０
发育树的序列比对后长度为５２２ｂｐ，其中包含１５６
图１　紫花针茅内生真菌菌丝、犘犇犃菌落形态、
分生孢子梗和分生孢子结构
　犉犻犵．１　犘犺狅狋狅犵狉犪狆犺狊狅犳犺狔狆犺犪犲，犮狅犾狅狀狔犪狀犱犮狅狀犻犱犻犪犾犿狅狉狆犺狅犾狅犵狔
犻狊狅犾犪狋犲犱犲狀犱狅狆犺狔狋犲狊犳狉狅犿犛．狆狌狉狆狌狉犲犪
　　　Ａ：种皮内内生菌丝形态；Ｂ～Ｃ：菌落正反面形态；Ｄ～Ｅ：分生孢子和分
生孢子梗形态；菌落大小标尺长度为１０ｍｍ，分生孢子和分生孢子梗大小
标尺长度为２０μｍ。Ａ：Ｆｕｎｇａｌｈｙｐｈａｅｗｉｔｈｉｎｓｅｅｄｃｏａｔ；Ｂ－Ｃ：Ｍｏｒｐｈｏｌ
ｏｇｙｏｆｕｐｐｅｒａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｏｆｃｏｌｏｎｙ；Ｄ－Ｅ：Ｓｉｚｅａｎｄｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｅｓｏｆｃｏｎｉｄ
ｉａｌ；Ｓｃａｌｅｂａｒｆｏｒｃｏｌｏｎｙｐｉｃｔｕｒｅｓｉｓ１０ｍｍ，ａｎｄｆｏｒｃｏｎｉｄｉａｐｉｃｔｕｒｅｓ，２０μｍ．
个保守位点、２９７个变异位点和１９２个简约位点；构
建狋犲犳犃系统发育树的序列比对后长度为４９５ｂｐ，包
含１６６个保守位点、３２５个变异位点和１６６个简约
位点；构建犪犮狋犌 系统发育树的序列比对后长度为
５１２ｂｐ，包含２９２个保守位点、３３５个变异位点和
２０４个简约位点。
狋狌犫犅序列构建的系统发育树显示，紫花针茅分
离的８个菌株与犈狆犻犮犺犾狅ё犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊和犈．犮犺犻狊狅狊犪
非常接近（图２ａ）。其中，ｓｔｐｕ２、ｓｔｐｕ１９、ｓｔｐｕ２７和
ｓｔｐｕ４１与分离于北美洲的竖针茅（犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿
犲犿犻狀犲狀狊）体内无性态内生真菌 犈．犮犺犻狊狅狊犪 聚到
一起，自展值分别高达１００％和８４％，形成两个明
显亚枝；而ｓｔｐｕ２５、ｓｔｐｕ４９、ｓｔｐｕ５１和ｓｔｐｕ５４与分
离于我国醉马草（犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿犻狀犲犫狉犻犪狀狊）内生真菌
５３第２５卷第３期 草业学报２０１６年
图２　紫花针茅狊狋狆狌内生真菌系统进化最大简约树
犉犻犵．２　犘犺狔犾狅犵犲狀犲狋犻犮狋狉犲犲狊狅犳犈狆犻犮犺犾狅ё狊狆．犫犪狊犲犱狅狀犿犪狓犻犿狌犿狆犪狉狊犻犿狅狀狔（犕犘）犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狊犲狇狌犲狀犮犲狊犳狉狅犿犻狀狋狉狅狀狆狅狉狋犻狅狀狊
　（ａ）狋狌犫犅：树长５２２ｅａｃｈｏｆ５２２ｓｔｅｐｓ，一致性指数Ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙｉｎｄｅｘ（ＣＩ）＝０．７６０５；保留指数Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎｉｎｄｅｘ（ＲＩ）＝０．８９５７；复定一致性指数
Ｒｅｓｃａｌｅｄｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙｉｎｄｅｘ（ＲＣ）＝０．６８１２；（ｂ）狋犲犳犃：树长＝４９５ｅａｃｈｏｆ４９５ｓｔｅｐｓ，ＣＩ＝０．８２０，ＲＩ＝０．９２６，ＲＣ＝０．７５９；（ｃ）犪犮狋犌：树长＝５１２ｅａｃｈｏｆ
５１２ｓｔｅｐｓ，ＣＩ＝０．８８３，ＲＩ＝０．９３５，ＲＣ＝０．８２５。将犆犾犪狏犻犮犲狆狊狆狌狉狆狌狉犲犪（ＡＦ２７６５０６、ＡＦ２７６５０８和ＡＦ２７６５０９）作为外群；进化树上只显示自展值大于
５０％的节点值。Ｔｈｅ犆犾犪狏犻犮犲狆狊狆狌狉狆狌狉犲犪（ＡＦ２７６５０６，ＡＦ２７６５０８，ＡＦ２７６５０９）ｗａｓｄｅｓｉｇｎａｔｅｄａｓｔｈｅｏｕｔｇｒｏｕｐｆｏｒｒｏｏｔｉｎｇｔｒｅｅｓ．Ｎｕｍｂｅｒｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
ｗｉｔｈｂｒａｎｃｈｅｓｗｅｒｅｂｏｏｔｓｔｒａｐｓｕｐｐｏｒｔｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｓ（≥５０％）ａｓｓｅｓｓｅｄｗｉｔｈ１０００ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．
６３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１６） Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．３
续图２　紫花针茅狊狋狆狌内生真菌系统进化最大简约树
犆狅狀狋犻狀狌犲犱犉犻犵．２　犘犺狔犾狅犵犲狀犲狋犻犮狋狉犲犲狊狅犳犈狆犻犮犺犾狅ё狊狆．犫犪狊犲犱狅狀犿犪狓犻犿狌犿狆犪狉狊犻犿狅狀狔
（犕犘）犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狊犲狇狌犲狀犮犲狊犳狉狅犿犻狀狋狉狅狀狆狅狉狋犻狅狀狊
７３第２５卷第３期 草业学报２０１６年
续图２　紫花针茅狊狋狆狌内生真菌系统进化最大简约树
犆狅狀狋犻狀狌犲犱犉犻犵．２　犘犺狔犾狅犵犲狀犲狋犻犮狋狉犲犲狊狅犳犈狆犻犮犺犾狅ё狊狆．犫犪狊犲犱狅狀犿犪狓犻犿狌犿狆犪狉狊犻犿狅狀狔
（犕犘）犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狊犲狇狌犲狀犮犲狊犳狉狅犿犻狀狋狉狅狀狆狅狉狋犻狅狀狊
８３ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１６） Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．３
犈．犻狀犲犫狉犻犪狀狊聚到一起，同时还与北美洲的毛边臭草（犕犲犾犻犮犪犮犻犾犻犪狋犪）感染的犈．犵狌犲狉犻狀犻犻、内蒙古羽茅（犃犮犺
狀犪狋犺犲狉狌犿狊犻犫犻狉犻犮狌犿）感染的犈．狊犻犫犻狉犻犮狌犿和醉马草（犃．犻狀犲犫狉犻犪狀狊）感染的犈．犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊共同形成一个分支，自
展值达到６４％。
狋犲犳犃序列构建的系统发育树拓扑结构与狋狌犫犅 相似（图２ｂ），其中，ｓｐ２、ｓｐ１９与竖针茅感染的犈．犮犺犻狊狅狊犪、北
美洲的类雀麦（犅狉狅犿狌狊狉犪犿狅狊狌狊）和直立雀麦（犅狉狅犿狌狊犲狉犲犮狋狌狊）感染的犈．犫狉狅犿犻犮狅犾犪、硬直黑麦草（犔狅犾犻狌犿狉犻犵犻
犱狌犿）感染的犈．狅犮犮狌犾狋犪狀狊、短颖草（犅狉犪犮犺狔犲犾狔狋狉狌犿犲狉犲狋狌犿）感染的犈．犫狉犪犮犺狔犲犾狔狋狉犻聚到一支；而ｓｐ２７、ｓｐ４１与竖
针茅感染的犈．犮犺犻狊狅狊犪和草地早熟禾（犘狅犪狆狉犪狋犲狀狊犻狊）感染的犈．狋狔狆犺犻狀犪单独形成另外一个亚枝。其他４个菌
株与醉马草感染的犈．犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊单独形成一支，自展值高达８６％。
与狋狌犫犅和狋犲犳犃 系统发育树不同，紫花针茅犪犮狋犌拓扑结构只形成两个明显分支（图２ｃ），其中ｓｔｐｕ２、ｓｔｐｕ１９、
ｓｔｐｕ２７、ｓｔｐｕ４１与竖针茅感染的犈．犮犺犻狊狅狊犪形成单一分支，自展值高达９１％；而其他４个菌株与醉马草感染的
犈．犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊形成另外一个分支，自展值达到７８％。
３　讨论
针茅族隶属禾本科早熟禾亚科，目前全球约有６００种，主要分布在亚欧大陆、美洲和澳大利亚等地，成为温性
草原群落中的主要建群禾草之一［４２］。近年来，随着学者们对禾草内生真菌共生体研究的日益关注，通过内生真
菌检测和分离技术，先后从北美洲的竖针茅和睡眠草（犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿狉狅犫狌狊狋狌犿）中分别分离到犈狆犻犮犺犾狅ё犮犺犻狊狅狊犪和
犈．犳狌狀犽犻犻［４３４４］，中国醉马草中分离到犈．犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊和犈．犻狀犲犫狉犻犪狀狊［４５４６］，中国内蒙古地区羽茅中分离到犈．
狊犻犲犵犲犾犻犻［４７４８］，总共５种犈狆犻犮犺犾狅ё属内生真菌。这些内生真菌在菌落生长速度和分生孢子形态上均表现出差异。
例如，菌落生长速度以竖针茅分离的内生真菌最慢，而臭草（犕犲犾犻犮犪狉犪犮犲犿狅狊犪）和睡眠草内生真菌菌落生长速度
最快，羽茅、紫花针茅和醉马草菌落生长速度居中；睡眠草内生真菌的分生孢子最大，而羽茅内生真菌孢子较小；
睡眠草和羽茅内生真菌分生孢子梗最长，而醉马草内生真菌孢子梗最短［４３４５，４９］。可见，不同类型内生真菌菌落生
长特性主要取决于不同内生真菌的基因型和营养条件差异［４９５０］。同时，由于睡眠草感染的内生真菌是犈．狋狔狆犺
犻狀犪和犈．犳犲狊狋狌犮犪犲杂交而来，基因组明显大于两个亲本，同时许多杂交形成的内生真菌在外部形态上也明显表现
出比亲本菌落生长较快、分生孢子和分生孢子梗较大较长等特点［４１，４４，５１］。
Ｍｏｏｎ等［４４］研究发现，北美洲竖针茅感染的内生真菌犈．犮犺犻狊狅狊犪是由北美洲犈．犪犿犪狉犻犾犾犪狀狊、亚欧大陆的
犈．犫狉狅犿犻犮狅犾犪和犈．狋狔狆犺犻狀犪３种有性态内生真菌杂交形成，而睡眠草感染的内生真菌犈．犳狌狀犽犻犻是由北美洲
犈．犲犾狔犿犻和犈．犳犲狊狋狌犮犪犲杂交形成。本研究中，紫花针茅所感染的内生真菌用狋狌犫犅和狋犲犳犃 两种管家基因扩增序
列与针茅族和其他犈狆犻犮犺犾狅ё属内生真菌序列构建系统发育树，发现ｓｐ２、ｓｐ１９和ｓｐ２７、ｓｐ４１分别与竖针茅分离内
生真菌扩增所得不同拷贝基因序列形成明显两个分支，且与竖针茅杂交亲本犈．狋狔狆犺犻狀犪和犈．犫狉狅犿犻犮狅犾犪形成
较好的拓扑结构；而其他４个菌株所得序列与醉马草分离的犈．犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊组成另外一个分支（图２ｂ，ｃ）。可见，
紫花针茅感染的内生真菌与宿主间未呈现严格特异性，表明紫花针茅可能成为不同内生真菌的宿主潜力较高。
这一现象在其他冷季型禾草分离不同类型内生真菌的研究结果中也得到证实，例如，Ｍｏｏｎ等［５２］从南美洲刺猬草
（犈犮犺犻狀狅狆狅犵狅狀狅狏犪狋狌狊）体内分离出两种犈狆犻犮犺犾狅ё内生真菌，其中从新西兰和澳大利亚分离出无性态（犖犲狅狋狔
狆犺狅犱犻狌犿）内生真菌，而从澳大利亚分离的内生真菌是由犈．犳犲狊狋狌犮犪犲和犈．狋狔狆犺犻狀犪杂交而成的有性态内生真菌
（犈狆犻犮犺犾狅ё）。同时，中国西部分布的醉马草感染的内生真菌也存在差异，虽然两种内生真菌均是无性态内生真
菌，但在菌落、分生孢子形态和基因组组成等方面存在明显差异［４５４６］；Ｚｈａｎｇ等［５３］研究也发现内蒙古草地主要优
势禾草———羽茅同时感染犈．狊犻犫犻狉犻犮狌犿和犈．犵犪狀狊狌犲狀狊犲两种内生真菌。另外，同一种犈狆犻犮犺犾狅ё属内生真菌可能
感染不同寄主的观点也从侧面证实上述的观点。例如，Ｃｒａｖｅｎ等［３８］针对犈．狋狔狆犺犻狀犪内生真菌和宿主范围进行
分析，发现能从早熟禾亚科的黑麦草属（犔狅犾犻狌犿）、早熟禾属（犘狅犪）、梯牧草属（犘犺犾犲狌犿）、短柄草属（犅狉犪犮犺狔狆狅犱犻
狌犿）、黄花茅属（犃狀狋犺狅狓犪狀狋犺狌犿）、鸭茅属（犇犪犮狋狔犾犻狊）和偃麦草属（犈犾狔狋狉犻犵犻犪）的１０余种植物中分离到这种内生真
菌；然而，相对于大多数有性态禾草内生真菌与宿主之间还是保持高度的特异性。主要原因可能：１）紫花针茅内
生真菌基因组保持较高的变异位点，可能导致紫花针茅内生真菌存在较高的基因多样性。根据Ｚｈａｎｇ等［５３］研究
９３第２５卷第３期 草业学报２０１６年
结果，羽茅中分离的犈．犵犪狀狊狌犲狀狊犻狊较犈．狊犻犫犻狉犻犮狌犿具有更高的基因多样性，同时发现约１３％内生真菌存在杂合
体，揭示不同羽茅内生真菌种群间可能存在杂交现象。本研究中紫花针茅在狋狌犫犅和狋犲犳犃 引物扩增时，出现３个
不同分支，由于未开展基因多样性等有关的研究，所以关于其是否杂交而来还有待进一步证实；２）内生真菌和宿
主进化时间可能存在差异，即在宿主分化之前，内生真菌已经完成分化，最终造成同一宿主可能感染不同内生真
菌［５２］，Ｈａｍａｓｈａ等［５４］研究表明青藏高原和约旦地区的紫花针茅个体基因组间存在较大差异，这与其他欧洲大陆
针茅族物种保持相对较低的基因个体差异不一致［５５］；同时，Ｂｉｅｎｉｅｋ和Ｐｏｋｏｒｎｙ［５６］根据针茅属植物颖果和花粉化
石资料推算，针茅族地理起源的中心位于欧洲中部，并以欧洲中部为原点向周边大陆迁移，可以从侧面证实紫花
针茅能与北美地区的竖针茅感染同种类型的内生真菌。３）一般无性态内生真菌是由不同的有性态内生真菌杂交
形成而来［４１，４４，５３，５７５８］，根据Ｚｈａｎｇ等［５３］对中国内蒙古地区羽茅感染内生真菌多样性分析，虽然羽茅中部分内生真
菌存在杂交的潜力，但基因漂流被严重阻碍，主要以无性态内生真菌存在。本研究紫花针茅扩增时条带单一，可
能与基因流严格抑制有关。
值得注意的是在构建犪犮狋犌系统发育树时，ｓｐ２、ｓｐ１９、ｓｐ２７和ｓｐ４１与竖针茅单拷贝犪犮狋犌序列很好的组成一
枝，而且与犈．犫狉狅犿犻犮狅犾犪形成了较好的亲缘关系。而这与在狋犲犳犃和狋狌犫犅 中形成明显的两个分支形成差异（图
２），原因可能是引物扩增的位点出现分化，导致形成假阴性扩增，这一研究结果与 Ｍｏｏｎ［４４］对针茅族和臭草族内
生真菌起源研究中得到的结论一致。
犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊：
［１］　ＬｉｕＳＷ．ＦｌｏｒａｏｆＱｉｎｇｈａｉ［Ｍ］．Ｘｉｎｉｎｇ：ＱｉｎｇｈａｉＰｅｏｐｌｅＰｒｅｓｓ，１９９９．
［２］　ＳｈｉＹ，ＭａＹＬ，ＭａＷ Ｈ，犲狋犪犾．ＬａｒｇｅｓｃａｌｅｐａｔｔｅｒｎｓｏｆｆｏｒａｇｅｙｉｅｌｄａｎｄｑｕａｌｉｔｙａｃｒｏｓｓＣｈｉｎｅｓｅｇｒａｓｓｌａｎｄｓ．ＣｈｉｎｅｓｅＳｃｉｅｎｃｅ
Ｂｕｌｅｔｉｎ，２０１３，５８（１０）：１１８７１１９９．
［３］　ＬｉｕＷＳ，ＤｏｎｇＭ，ＳｏｎｇＺＰ，犲狋犪犾．Ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｐａｔｔｅｒｎｏｆ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｈｉｎｔｅｒｌａｎｄｏｆＱｉｎｇｈａｉ－Ｔｉ
ｂｅｔＰｌａｔｅａｕ．ＡｎｎａｌｓｏｆＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｌｏｇｙ，２００９，１５４（１）：５７６５．
［４］　Ｑｐｉｓｔ．ＶｅｇｅｔａｔｉｏｎｏｆＴｉｂｅｔ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＳｃｉｅｎｃｅＰｒｅｓｓ，１９８８
［５］　ＹａｎｇＹＱ，ＬｉＸ，ＫｏｎｇＸＸ，犲狋犪犾．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅａｎａｌｙｓｉｓｒｅｖｅａｌｓｄｉｖｅｒｓｉｆｉｅｄａｄａｐｔａｔｉｏｎｏｆ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪ａｌｏｎｇａｄｒｏｕｇｈｔ
ｇｒａｄｉｅｎｔｏｎｔｈｅＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ＆ＩｎｔｅｇｒａｔｉｖｅＧｅｎｏｍｉｃｓ，２０１４，１５（３）：２９５３０７．
［６］　ＤｕａｎＭＪ，ＧａｏＱＺ，ＷａｎＹＦ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｇｒａｚｉｎｇｏｎｃｏｍｍｕｎｉｔｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｓｐｅｃｉｅｓｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪
ａｌｐｉｎｅｇｒａｓｓｌａｎｄｉｎＮｏｒｔｈＴｉｂｅｔ．ＡｃｔａＥｃｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，２０１０，３０（１４）：３８９２３９００．
［７］　ＭｉｌｅｒＤＪ．ＴｈｅＴｉｂｅｔａｎＳｔｅｐｐｅ．ＧｒａｓｓｌａｎｄｓｏｆｔｈｅＷｏｒｌｄ［Ｍ］．Ｒｏｍｅ：ＵＮＦｏｏｄａｎｄＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，２００５．
［８］　ＨｕＭＹ，ＺｈａｎｇＬ，ＬｕｏＴＸ，犲狋犪犾．Ｖａｒｉａｔｉｏｎｓｉｎｌｅａｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｔｒａｉｔｓｏｆ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪ａｌｏｎｇａｒａｉｎｆａｌｇｒａｄｉｅｎｔｉｎＸｉｚａｎｇ，
Ｃｈｉｎａ．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＥｃｏｌｏｇｙ，２０１２，３６（２）：１３６１４３．
［９］　ＹｕｅＰＰ，ＬｕＸＦ，ＹｅＲＲ，犲狋犪犾．Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪ｓｔｅｐｐｅｉｎｔｈｅＮｏｒｔｈｅａｓｔｅｒｎＱｉｎｇｈａｉＸｉｚａｎｇＰｌａｔｅａｕ（Ｃｈｉｎａ）．
ＲｕｓｓｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ，２０１１，４２（１）：５０５６．
［１０］　ＬｉＸＪ，ＺｈａｎｇＸＺ，ＷｕＪＳ，犲狋犪犾．ＲｏｏｔｂｉｏｍａｓｓｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｉｎａｌｐｉｎｅｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓｏｆｔｈｅｎｏｒｔｈｅｒｎＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕ．Ｅｎｖｉｒｏｎ
ｍｅｎｔａｌＥａｒｔｈＳｃｉｅｎｃｅｓ，２０１１，６４（７）：１９１１１９１９．
［１１］　ＹａｎｇＳＨ，ＬｉＸ，ＹａｎｇＹＱ，犲狋犪犾．Ｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｓｅｅｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｆｏｒ犛狋犻狆犪ｓｐｅｃｉｅｓ
ｏｎｔｈｅＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕ．Ｂｏｔａｎｙ，２０１４，９２（１２）：８９５９００．
［１２］　ＳｕｎＪ，ＰｅｎｇＭ，ＣｈｅｎＧＣ，犲狋犪犾．Ｓｔｕｄｙｏｎｃｏｍｍｕｎｉｔｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｃｏｍｍｕｎｉｔｙｄｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎ犛狋犻狆犪ｓｔｅｐｐｅｏｆＱｉｎｇｈａｉ
Ｌａｋｅｒｅｇｉｏｎ．ＡｃｔａＢｏｔａｎｉｃａＢｏｒｅａｌｉＯｃｃｉｄｅｎｔａｌｉａＳｉｎｉｃａ，２００３，２３（１１）：１９６３１９６８．
［１３］　ＨａｎＹＪ，ＣｈｅｎＧＣ，ＺｈｏｕＧＹ，犲狋犪犾．Ｓｔｕｄｙｏｎｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｔｈｅａｌｐｉｎｅｓｔｅｐｐｅｓｐｌａｎｔｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｔｏｇｒａｚｉｎｇ
ｓｔｒｅｓｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＧｒａｄｕａｔｅＳｃｈｏｏｌｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００６，２３（１）：１１８１２４．
［１４］　ＷａｎｇＷ，ＬｉａｎｇＣＺ，ＬｉｕＺＬ，犲狋犪犾．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｐｌａｎｔｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｂｅｈａｖｉｏｒｄｕｒｉｎｇｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｔｏｒｉｎｇｓｕｃｃｅｓｓｉｏｎ
ｉｎｓｔｅｐｐｅｃｏｍｍｕｎｉｔｙ．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＥｃｏｌｏｇｙ，２０００，２４（３）：２６８２７４．
［１５］　ＺｈｕＪＴ，ＪｉａｎｇＬ，ＺｈａｎｇＹＪ，犲狋犪犾．Ｂｅｌｏｗｇｒｏｕｎｄｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎｄｒｉｖｅｓｔｈｅｓｅｌｆｔｈｉｎｎｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｏｆ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
ｉｎｎｏｒｔｈｅｒｎＴｉｂｅｔ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＶｅｇｅｔａｔｉｏｎＳｃｉｅｎｃｅ，２０１５，２６（１）：１６６１７４．
［１６］　ＹｕｅＰＰ，ＰｅｎｇＭ．Ｏｎｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪ｓｔｅｐｐｅｉｎＱｉｎｇｈａｉＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＹｕｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉ
ｔｙ，２０１４，２４（４）：１６．
［１７］　ＬｉＺＤ，ＣｈｅｎＸＲ，ＬｉＰ．Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｆｒｏｍ犛狋犻狆犪狆狌狉狆狌狉犲犪．ＧｒａｓｓｌａｎｄａｎｄＴｕｒｆ，
２０１１，３１（１）：８１２．
０４ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１６） Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．３
［１８］　ＮａｎＺＢ，ＬｉＣＪ．Ｒｏｌｅｓｏｆｔｈｅｇｒａｓｓ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｉｎｐａｓｔｏｒａｌａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍｓ．ＡｃｔａＥｃｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，２００４，
２４（３）：６０５６１６．
［１９］　ＳａｉｋｋｏｎｅｎＫ，ＦａｅｔｈＳＨ，ＨｅｌａｎｄｅｒＭ，犲狋犪犾．Ｆｕｎｇａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ：ａｃｏｎｔｉｎｕｕｍｏｆｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｗｉｔｈｈｏｓｔｐｌａｎｔｓ．ＡｎｎｕａｌＲｅ
ｖｉｅｗｏｆＥｃｏｌｏｇｙａｎｄＳｙｓｔｅｍａｔｉｃｓ，１９９８，２９：３１９３４３．
［２０］　ＣｌａｙＫ，ＳｃｈａｒｄｌＣＬ．Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｏｒｉｇｉｎｓａｎｄｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｙｍｂｉｏｓｉｓｗｉｔｈｇｒａｓｓｅｓ．ＴｈｅＡｍｅｒｉｃａｎ
Ｎａｔｕｒａｌｉｓｔ，２００２，１６０（Ｓ４）：Ｓ９９Ｓ１２７．
［２１］　ＲｏｄｒｉｇｕｅｚＲ，ＷｈｉｔｅＪｒＪ，ＡｒｎｏｌｄＡ，犲狋犪犾．Ｆｕｎｇａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ：ｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｒｏｌｅｓ．ＮｅｗＰｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ，２００９，
１８２（２）：３１４３３０．
［２２］　ＳｃｈａｒｄｌＣＬ．ＴｈｅＥｐｉｃｈｌｏａｅ，ｓｙｍｂｉｏｎｔｓｏｆｔｈｅｇｒａｓｓｓｕｂｆａｍｉｌｙＰｏｉｄｅａｅ．ＡｎｎａｌｓｏｆｔｈｅＭｉｓｓｏｕｒｉＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｒｄｅｎ，２０１０，
９７（４）：６４６６６５．
［２３］　ＪｉｎＷＪ，ＬｉＣＪ，ＷａｎｇＺＦ．Ｒｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｓｏｎｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｇｒａｓｓ犈狆犻犮犺犾狅ёｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１５，
２４（１）：１６８１７５．
［２４］　ＫａｎｅＫＨ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｎｄｒｏｕｇｈｔｓｔｒｅｓｓｔｏｌｅｒａｎｃｅｏｆ犔狅犾犻狌犿狆犲狉犲狀狀犲ａｃｃｅｓｓｉｏｎｓｆｒｏｍｔｈｅＭｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａｎ
ｒｅｇｉｏｎ．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢｏｔａｎｙ，２０１１，７１（３）：３３７３４４．
［２５］　ＭａｌｉｎｏｗｓｋｉＤＰ，ＢｅｌｅｓｋｙＤＰ．Ａｄａｐｔａｔｉｏｎｓｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｅｉｎｆｅｃｔｅｄｃｏｏｌｓｅａｓｏｎｇｒａｓｓｅｓｔｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｓｔｒｅｓｓｅｓ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ
ｏｆｄｒｏｕｇｈｔａｎｄｍｉｎｅｒａｌｓｔｒｅｓｓｔｏｌｅｒａｎｃｅ．ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，２０００，４０（４）：９２３９４０．
［２６］　ＯｂｅｒｈｏｆｅｒＭ，ＧüｓｅｗｅｌＳ，ＬｅｕｃｈｔｍａｎｎＡ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｎａｔｕｒａｌｈｙｂｒｉｄａｎｄｎｏｎｈｙｂｒｉｄ犈狆犻犮犺犾狅ёｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｏｎｔｈｅｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆ
犎狅狉犱犲犾狔犿狌狊犲狌狉狅狆犪犲狌狊ｔｏｄｒｏｕｇｈｔｓｔｒｅｓｓ．ＮｅｗＰｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ，２０１４，２０１（１）：２４２２５３．
［２７］　ＳｏｎｇＭＬ，ＬｉＸＺ，ＳａｉｋｋｏｎｅｎＫ，犲狋犪犾．Ａｎａｓｅｘｕａｌ犈狆犻犮犺犾狅ёｅｎｄｏｐｈｙｔｅｅｎｈａｎｃｅｓｗａｔｅｒｌｏｇｇｉｎｇｔｏｌｅｒａｎｃｅｏｆ犎狅狉犱犲狌犿犫狉犲
狏犻狊狌犫狌犾犪狋狌犿．ＦｕｎｇａｌＥｃｏｌｏｇｙ，２０１５，１３：４４５２．
［２８］　ＳｏｎｇＭＬ，ＣｈａｉＱ，ＬｉＸＺ，犲狋犪犾．Ａｎａｓｅｘｕａｌ犈狆犻犮犺犾狅ёｅｎｄｏｐｈｙｔｅｍｏｄｉｆｉｅｓｔｈｅｎｕｔｒｉｅｎｔｓｔｏｉｃｈｉｏｍｅｔｒｙｏｆｗｉｌｄｂａｒｌｅｙ（犎狅狉
犱犲狌犿犫狉犲狏犻狊狌犫狌犾犪狋狌犿）ｕｎｄｅｒｓａｌｔｓｔｒｅｓｓ．ＰｌａｎｔａｎｄＳｏｉｌ，２０１４，３８７（１）：１１３．
［２９］　ＨａｌＳＬ，ＭｃｃｕｌｅｙＲＬ，ＢａｒｎｅｙＲＪ，犲狋犪犾．Ｄｏｅｓｆｕｎｇａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｍｐｒｏｖｅｔａｌｆｅｓｃｕｅ’ｓｇｒｏｗｔｈｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｆｉｒｅａｎｄ
ｗａｔｅｒｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ．ＰｌｏＳＯｎｅ，２０１４，９（１）：ｅ８６９０４．
［３０］　ＯｍａｃｉｎｉＭ，ＣｈａｎｅｔｏｎＥＪ，ＧｈｅｒｓａＣＭ，犲狋犪犾．Ｓｙｍｂｉｏｔｉｃｆｕｎｇａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｃｏｎｔｒｏｌｉｎｓｅｃｔｈｏｓｔｐａｒａｓｉｔｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗｅｂｓ．
Ｎａｔｕｒｅ，２００１，４０９：７８８１．
［３１］　ＮａｎｃｅＡ Ｍ．ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿 Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ，ＢｅｌｏｗｇｒｏｕｎｄＩｎｓｅｃｔＨｅｒｂｉｖｏｒｙａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ
ＳｔｒｅｓｓｏｎＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆＴａｌＦｅｓｃｕｅａｎｄＫｅｎｔｕｃｋｙＢｌｕｅｇｒａｓｓ［Ｄ］．Ｉｎｄｉａｎａ：ＰｕｒｄｕｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１１．
［３２］　ＺｈａｎｇＸＸ，ＬｉＣＪ，ＮａｎＺＢ，犲狋犪犾．犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｓ犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿犻狀犲犫狉犻犪狀狊（ｄｒｕｎｋｅｎｈｏｒｓｅｇｒａｓｓ）ｒｅｓｉｓｔ
ａｎｃｅｔｏｈｅｒｂｉｖｏｒｅｓａｎｄｓｅｅｄｐｒｅｄａｔｏｒｓ．ＷｅｅｄＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１２，５２（１）：７０７８．
［３３］　ＳｈｉｂａＴ，ＡｒａｋａｗａＡ，ＳｕｇａｗａｒａＫ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍｆｕｎｇａｌｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｉｎｇｒａｓｓ犈狆犻犮犺犾狅ёａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓｏｎｓｕｒｖｉｖａｌｏｆ
ｔｈｅｓｏｒｇｈｕｍｐｌａｎｔｂｕｇ（犛狋犲狀狅狋狌狊狉狌犫狉狅狏犻狋狋犪狋狌狊）．ＧｒａｓｓｌａｎｄＳｃｉｅｎｃｅ，２０１４，６１（１）：２４２７．
［３４］　ＡｌｄｅｒｍａｎＳＣ．Ｓｕｒｖｉｖａｌ，ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ａｎｄｇｒｏｗｔｈｏｆ犈狆犻犮犺犾狅ёｔｙｐｈｉｎａａｎｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｌｅａｆｗｏｕｎｄｓａｎｄｉｎｓｅｃｔｓｉｎｉｎｆｅｃｔｉｏｎ
ｏｆｏｒｃｈａｒｄｇｒａｓｓ．ＰｌａｎｔＤｉｓｅａｓｅ，２０１３，９７（３）：３２３３２８．
［３５］　ＤｏｂｒｉｎｄｔＬ，ＳｔｒｏｈＨＧ，ＩｓｓｅｌｓｔｅｉｎＪ，犲狋犪犾．Ｉｎｆｅｃｔｅｄｎｏｔｉｎｆｅｃｔｅｄ：ｆａｃｔｏｒｓｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｔｈｅａｂｕｎｄａｎｃｅｏｆｔｈｅｅｎｄｏｐｈｙｔｅ犖犲狅狋狔
狆犺狅犱犻狌犿犾狅犾犻犻ｉｎｍａｎａｇｅｄｇｒａｓｓｌａｎｄｓ．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓ＆Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，２０１３，１７５：５４５９．
［３６］　ＳａｉｋｋｏｎｅｎＫ，ＷｌｉＰ，ＨｅｌａｎｄｅｒＭ，犲狋犪犾．Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｅｐｌａｎｔｓｙｍｂｉｏｓｅｓ．ＴｒｅｎｄｓｉｎＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，２００４，９（６）：
２７５２８０．
［３７］　ＬｅｕｃｈｔｍａｎｎＡ，ＢａｃｏｎＣＷ，ＳｃｈａｒｄｌＣＬ，犲狋犪犾．Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒａｌｒｅａｌｉｇｎｍｅｎｔｏｆ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ｓｐｅｃｉｅｓｗｉｔｈｇｅｎｕｓ犈狆犻犮犺犾狅ё．
Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ，２０１４，１０６（２）：２０２２１５．
［３８］　ＣｒａｖｅｎＫ，ＨｓｉａｕＰ，ＬｅｕｃｈｔｍａｎｎＡ，犲狋犪犾．Ｍｕｌｔｉｇｅｎｅｐｈｙｌｏｇｅｎｙｏｆ犈狆犻犮犺犾狅ёｓｐｅｃｉｅｓ，ｆｕｎｇａｌｓｙｍｂｉｏｎｔｓｏｆｇｒａｓｓｅｓ．Ａｎｎａｌｓｏｆ
ｔｈｅＭｉｓｓｏｕｒｉＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｒｄｅｎ，２００１，８８（１）：１４３４．
［３９］　ＬｉＣＪ，ＮａｎＺＢ，ＬｉｕＹ，犲狋犪犾．Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｄｒｕｎｋｅｎｈｏｒｓｅｇｒａｓｓ（犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿犻狀犲犫狉犻犪狀狊）．Ｅｄｉｂｌｅ
ＦｕｎｇｉｏｆＣｈｉｎａ，２００８，２７：１６１９．
［４０］　ＩａｎｎｏｎｅＬＪ，ＣａｂｒａｌＤ，ＳｃｈａｒｄｌＣＬ，犲狋犪犾．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ，ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｄｉｓｔｉｎｇｕｉｓｈａ
ｎｅｗ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅｇｒａｓｓ犅狉狅犿狌狊犪狌犾犲狋犻犮狌狊ｆｒｏｍＳｏｕｔｈＡｍｅｒｉｃａ．Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ，２００９，１０１（３）：３４０
３５１．
［４１］　ＧｅｎｔｉｌｅＡ，ＲｏｓｓｉＭＳ，ＣａｂｒａｌＤ，犲狋犪犾．Ｏｒｉｇｉｎ，ｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ，ａｎｄｐｈｙｌｏｇｅｎｙｏｆ犈狆犻犮犺犾狅ёｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｏｆｎａｔｉｖｅＡｒｇｅｎｔｉｎｅｇｒａｓ
ｓｅｓ．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＥｖｏｌｕｔｉｏｎ，２００５，３５（１）：１９６２０８．
［４２］　ＨａｍａｓｈａＨＲ，ＶｏｎＨａｇｅｎＫＢ，ＲｓｅｒＭ．犛狋犻狆犪（Ｐｏａｃｅａｅ）ａｎｄａｌｉｅｓｉｎｔｈｅｏｌｄｗｏｒｌｄ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｓｒｅａｌｉｇｎｓｇｅ
ｎｕｓｃｉｒｃｕｍｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｎｄｇｉｖｅｓｅｖｉｄｅｎｃｅｏｎｔｈｅｏｒｉｇｉｎｏｆＡｍｅｒｉｃａｎａｎｄＡｕｓｔｒａｌｉａｎｌｉｎｅａｇｅｓ．ＰｌａｎｔＳｙｓｔｅｍａｔｉｃｓａｎｄＥｖｏｌｕｔｉｏｎ，
２０１２，２９８（２）：３５１３６７．
１４第２５卷第３期 草业学报２０１６年
［４３］　ＷｈｉｔｅＪｒＪ，ＭｏｒｇａｎＪＧ．ＥｎｄｏｐｈｙｔｅｈｏｓｔａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓｉｎｆｏｒａｇｅｇｒａｓｓｅｓＶＩＩ．犃犮狉犲犿狅狀犻狌犿犮犺犻狊狅狊狌犿，ａｎｅｗｓｐｅｃｉｅｓｉｓｏｌａｔｅｄ
ｆｒｏｍ犛狋犻狆犪犲犿犻狀犲狀狊ｉｎＴｅｘａｓ．Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ，１９８７，２８（１）：１７９１８９．
［４４］　ＭｏｏｎＣＤ，ＧｕｉｌａｕｍｉｎＪＪ，ＲａｖｅｌＣ，犲狋犪犾．Ｎｅｗ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｐｅｃｉｅｓｆｒｏｍｔｈｅｇｒａｓｓｔｒｉｂｅｓ犛狋犻狆犲犪犲ａｎｄ犕犲犾犻犮犲
犪犲．Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ，２００７，９９（６）：８９５９０５．
［４５］　ＬｉＣＪ，ＮａｎＺＢ，ＰａｕｌＶＨ，犲狋犪犾．Ａｎｅｗ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ｓｐｅｃｉｅｓｓｙｍｂｉｏｔｉｃｗｉｔｈｄｒｕｎｋｅｎｈｏｒｓｅｇｒａｓｓ（犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿犻狀犲
犫狉犻犪狀狊）ｉｎＣｈｉｎａ．Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ，２００４，９０（１）：１４１１４７．
［４６］　ＢｒｕｅｈｌＧＷ，ＫａｉｓｅｒＷＪ，ＫｌｅｉｎＲＥ．Ａｎｅｎｄｏｐｈｙｔｅｏｆ犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿犻狀犲犫狉犻犪狀狊，ａｎｉｎｔｏｘｉｃａｔｉｎｇｇｒａｓｓｏｆｎｏｒｔｈｗｅｓｔＣｈｉｎａ．
Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ，１９９４，８６（６）：７７３７７６．
［４７］　ＺｈａｎｇＸ，ＲｅｎＡＺ，ＷｅｉＹＫ，犲狋犪犾．Ｔａｘｏｎｏｍｙ，ｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｏｒｉｇｉｎｓｏｆｓｙｍｂｉｏｔｉｃｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｏｆ犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿狊犻犫犻狉犻犮狌犿ｉｎ
ｔｈｅＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａＳｔｅｐｐｅｏｆＣｈｉｎａ．ＦＥＭＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＬｅｔｔｅｒｓ，２００９，３０１（１）：１２２０．
［４８］　ＺｈｕＭＪ，ＲｅｎＡＺ，ＷｅｎＷ，犲狋犪犾．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｔａｘｏｎｏｍｙｏｆｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｆｒｏｍ犔犲狔犿狌狊犮犺犻狀犲狀狊犻狊ｉｎｔｈｅＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａ
ｓｔｅｐｐｅｏｆＣｈｉｎａ．ＦＥＭＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＬｅｔｔｅｒｓ，２０１３，３４０（２）：１３５１４５．
［４９］　ＬｉＣＪ，ＮａｎＺＢ，ＬｉＦ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿犵犪狀狊狌犲狀狊犲ｓｙｍｂｉｏｔｉｃｗｉｔｈ犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿
犻狀犲犫狉犻犪狀狊．ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２００８，１６３（４）：４３１４４０．
［５０］　ＬｕｋｉｔｏＹ．ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｉｎｔｏｔｈｅＲｏｌｅｏｆＰａｃＣｉｎ犈狆犻犮犺犾狅ё犳犲狊狋狌犮犪犲ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＳｙｍｂｉｏｓｉｓｗｉｔｈＰｅｒｅｎｎｉａｌＲｙｅｇｒａｓｓ［Ｄ］．
ＰａｌｍｅｒｓｔｏｎＮｏｒｔｈ：ＭａｓｓｅｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１４．
［５１］　ＦｊｅｌｈｅｉｍＳ，ＲｏｇｎｌｉＯＡ．ＧｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙｗｉｔｈｉｎａｎｄａｍｏｎｇＮｏｒｄｉｃ犕犲犪犱狅狑犳犲狊犮狌犲（Ｈｕｄｓ．）ｃｕｌｔｉｖａｒｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｏｎｔｈｅｂａ
ｓｉｓｏｆＡＦＬＰｍａｒｋｅｒｓ．ＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，２００５，４５（５）：２０８１２０８６．
［５２］　ＭｏｏｎＣＤ，ＭｉｌｅｓＣＯ，ＪｒｌｆｏｒｓＵ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｏｒｉｇｉｎｓｏｆｔｈｒｅｅｎｅｗ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｐｅｃｉｅｓｆｒｏｍｇｒａｓ
ｓｅｓｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓｔｏｔｈｅＳｏｕｔｈｅｒｎＨｅｍｉｓｐｈｅｒｅ．Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ，２００２，９４（４）：６９４７１１．
［５３］　ＺｈａｎｇＸ，ＲｅｎＡＺ，ＣｉＨＣ，犲狋犪犾．Ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆ犖犲狅狋狔狆犺狅犱犻狌犿ｓｐｅｃｉｅｓａｎｄｔｈｅｉｒｈｏｓｔ犃犮犺狀犪狋犺犲狉狌犿
狊犻犫犻狉犻犮狌犿ｉｎａｎａｔｕｒａｌｇｒａｓｓｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｙｓｔｅｍ．ＭｉｃｒｏｂｉａｌＥｃｏｌｏｇｙ，２０１０，５９（４）：７４４７５６．
［５４］　ＨａｍａｓｈａＨ，ＳｃｈｍｉｄｔＬＡ，ＤｕｒｋａＷ，犲狋犪犾．ＢｉｏｃｌｉｍａｔｉｃｒｅｇｉｏｎｓｉｎｆｌｕｅｎｃｅｇｅｎｅｔｉｃｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｆｏｕｒＪｏｒｄａｎｉａｎ犛狋犻狆犪ｓｐｅｃｉｅｓ．
ＰｌａｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，２０１３，１５（５）：８８２８９１．
［５５］　ＤｕｒｋａＷ，ＮｏｓｓｏｌＣ，ＷｅｌｋＥ，犲狋犪犾．ＥｘｔｒｅｍｅｇｅｎｅｔｉｃｄｅｐａｕｐｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｂｏｔｈｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓａｎｄｓｐｅｃｉｅｓｉｎＥｕｒ
ａｓｉａｎｆｅａｔｈｅｒｇｒａｓｓｅｓ（犛狋犻狆犪）．ＰｌａｎｔＳｙｓｔｅｍａｔｉｃｓａｎｄＥｖｏｌｕｔｉｏｎ，２０１３，２９９（１）：２５９２６９．
［５６］　ＢｉｅｎｉｅｋＡ，ＰｏｋｏｒｎＰ．Ａｎｅｗｆｉｎｄｏｆｍａｃｒｏｆｏｓｓｉｌｓｏｆｆｅａｔｈｅｒｇｒａｓｓ（犛狋犻狆犪）ｉｎａｎＥａｒｌｙＢｒｏｎｚｅＡｇｅｓｔｏｒａｇｅｐｉｔａｔＶｌｉｎěｖｅｓ，
ＣｚｅｃｈＲｅｐｕｂｌｉｃ：ｌｏｃａｌｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓａｎｄｐｏｓｓｉｂｌｅｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎｉｎａＣｅｎｔｒａｌＥｕｒｏｐｅａｎｃｏｎｔｅｘｔ．ＶｅｇｅｔａｔｉｏｎＨｉｓｔｏｒｙａｎｄＡｒｃｈａｅ
ｏｂｏｔａｎｙ，２００５，１４（４）：２９５３０２．
［５７］　ＣｈａｒｌｔｏｎＮＤ，ＣｒａｖｅｎＫＤ，ＡｆｋｈａｍｉＭＥ，犲狋犪犾．Ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎａｎｄｂｉｏａｃｔｉｖｅａｌｋａｌｏｉｄｖａｒｉａｔｉｏｎｉｎｃｒｅａｓｅｓｄｉｖｅｒｓｉ
ｔｙｉｎｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ犈狆犻犮犺犾狅ёｓｐｅｃｉｅｓｏｆ犅狉狅犿狌狊犾犪犲狏犻狆犲狊．ＦＥＭＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＥｃｏｌｏｇｙ，２０１４，９０（１）：２７６２８９．
［５８］　ＭｏｏｎＣＤ，ＳｃｏｔｔＢ，ＳｃｈａｒｄｌＣＬ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙｏｒｉｇｉｎｓｏｆ犈狆犻犮犺犾狅ёｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓｆｒｏｍａｎｎｕａｌｒｙｅｇｒａｓｓｅｓ．Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ，
２０００，９２（６）：１１０３１１１８．
参考文献：
［１］　刘尚武．青海植物志［Ｍ］．西宁：青海人民出版社，１９９９．
［６］　段敏杰，高清竹，万运帆，等．放牧对藏北紫花针茅高寒草原植物群落特征的影响．生态学报，２０１０，３０（１４）：３８９２３９００．
［８］　胡梦瑶，张林，罗天祥，等．西藏紫花针茅叶功能性状沿降水梯度的变化．植物生态学报，２０１２，３６（２）：１３６１４３．
［１２］　孙菁，彭敏，陈桂琛，等．青海湖区针茅草原植物群落特征及群落多样性研究．西北植物学报，２００３，２３（１１）：１９６３１９６８．
［１３］　韩友吉，陈桂琛，周国英，等．青海湖地区高寒草原植物个体特征对放牧的响应．中国科学院研究生院学报，２００６，２３（１）：
１１８１２４．
［１４］　王炜，梁存柱，刘钟龄，等．草原群落退化与恢复演替中的植物个体行为分析．植物生态学报，２０００，２４（３）：２６８２７４．
［１６］　岳鹏鹏，彭敏．青藏高原紫花针茅草原研究进展．榆林学院学报，２０１４，２４（４）：１６．
［１７］　李振东，陈秀蓉，李鹏．紫花针茅内生细菌的分离与鉴定．草原与草坪，２０１１，３１（１）：８１２．
［１８］　南志标，李春杰．禾草—内生真菌共生体在草地农业系统中的作用．生态学报，２００４，２４（３）：６０５６１６．
［２３］　金文进，李春杰，王正凤．禾草内生真菌的多样性及意义．草业学报，２０１５，２４（１）：１６８１７５．
［３９］　李春杰，南志标，刘勇，等．醉马草内生真菌检测方法的研究．中国食用菌，２００８，２７：１６１９．
２４ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ（２０１６） Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．３