全 文 :书玉簪属植物花瓣中类黄酮化合物价值评价
刘妮娜1,2,李晓东1,张金政1,王亮生1,孙国峰1,林秦文1,徐彦军3
(1.中国科学院植物研究所,北京100093;2.中国科学院研究生院,北京100049;3.中国农业大学理学院,北京100094)
摘要:为拓宽玉簪属植物除园林方面的应用,本研究以玉簪属5个野生种和85个栽培品种的花瓣为材料,利用高
效液相色谱(HPLCDAD)技术,建立了定性定量分析玉簪花中类黄酮化合物的 HPLC方法,可作为玉簪花药材的
质量控制方法。同时结合质谱(MSn)技术,鉴定了玉簪花瓣中17种类黄酮化合物的化学结构,分别为:山奈酚3,
7二葡萄糖苷、山奈酚3葡萄糖7芸香糖苷、异鼠李素3,4二葡萄糖苷、山奈酚3奎尼酰葡萄糖苷、山奈酚3芥子
酰葡萄糖苷、山奈酚3抗坏血酰葡萄糖苷、山奈酚7新橙皮糖苷、山奈酚3,7二己糖苷、山奈酚3葡萄糖7鼠李糖
苷、木犀草素7新橙皮糖苷、槲皮素3葡萄糖苷、槲皮素3葡糖苷酸、槲皮素3刺槐二糖苷、山奈酚3葡萄糖苷、山
奈酚3葡糖苷酸、山奈酚3戊糖苷和山奈酚7葡萄糖苷。并比较了90种玉簪花中类黄酮化合物成分与含量的差
异性,筛选出类黄酮化合物含量较高的种类。
关键词:玉簪;类黄酮;高效液相色谱;电喷雾离子化-多级质谱
中图分类号:Q949.71+8.23 文献标识码:A 文章编号:10045759(2013)01023411
玉簪属(犎狅狊狋犪)植物为百合科(Liliaceae)重要的耐荫观叶地被植物,世界各地广泛栽培。该属野生资源主
要分布于东亚的温带与亚热带地区,包括中国的东部和南部、朝鲜、日本及俄罗斯的远东地区,包括43种、35变
种/变型。玉簪属植物18世纪传入欧洲,19世纪末传入美国,经过长期的栽培及杂交育种已选育出栽培品种超
过4000个,其中注册品种超过2000个[1,2]。该属植物除是重要的园林观赏植物外,亦具有悠久的药用历史,“玉
簪”之名始见于《本草纲目》[3],其全草、根、茎及花均可入药,具有清热解毒、散结消肿之功效,主要治疗乳痈、疮痈
溃疡、毒蛇咬伤[4];蒙古医学以花入药,治疗咽喉肿痛、音哑、肺热[5]。玉簪花的药用价值很大程度上与其含有的
类黄酮化合物有关,解红霞等[5]对玉簪(犎狅狊狋犪狆犾犪狀狋犪犵犻狀犲犪)花进行化学成分研究,95%乙醇渗滤液的乙酸乙酯
萃取部分得到山奈酚(kaempferol)、槲皮素(quercertin)、山奈酚3O芸香糖苷(kaempfeml3Orutinoside)、山
奈酚7OβD葡萄糖苷(kaempferol7OβDglucoside);石油醚萃取物中经硅胶柱色谱依次用石油醚—乙酸乙
酯梯度洗脱,得到化合物为正二十烷酸(eicosanoicacid)和棕榈酸α单甘油酯(hexadecanoicacid2,3dihyd
roxypropylester)[5,6]。2003年,钟国跃等[7]研究发现紫萼玉簪(犎.狏犲狀狋狉犻犮狅狊犪)对早期、中期炎症均有较强的抑
制作用。类黄酮化合物是广泛存在于自然界的一大类化合物,常以游离态或糖苷形式存在,具有多方面生物活
性,包括:抗癌、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌、抗病毒、抗氧化、抗衰老
以及抗辐射等[813]。
玉簪属植物种质资源非常丰富,遍布世界各地,从目前查阅到的国内外研究文献来看,人们更加重视玉簪属
植物根叶部位的成分研究,而对玉簪属植物花的药用价值研究还很有限,缺少进一步应用该属植物花朵的理论依
据。因此应该加大对该属植物花朵部位化学成分研究及活性成分筛选的力度,以发现该属植物的新用途,以更好
的造福人类。本研究拟对玉簪属5个野生种和85个栽培品种花瓣中类黄酮成分进行系统的分离鉴定,为进一步
丰富玉簪属植物资源的利用提供科学依据[14,15]。
1 材料与方法
1.1 植物材料及试剂
试 验材料为玉簪属5个野生种和85个栽培品种(表1)的盛花期花瓣,均于2010年6-10月,采自中国科
234-244
2013年2月
草 业 学 报
ACTAPRATACULTURAESINICA
第22卷 第1期
Vol.22,No.1
收稿日期:20120118;改回日期:20120405
基金项目:中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2EWB02,KSCX2EWB05)资助。
作者简介:刘妮娜(1987),女,山东潍坊人,在读硕士。Email:liunn007@163.com
通讯作者。Email:lixcds1234@ibcas.ac.cn;caohua@ibcas.ac.cn
表1 玉簪野生种、品种表
犜犪犫犾犲1 犎狅狊狋犪狊狆犲犮犻犲狊犪狀犱犮狌犾狋犻狏犪狉狊
序号Number 种或品种Speciesandcultivars 序号Number 种或品种Speciesandcultivars
1 玉簪‘金色光芒’犎狅狊狋犪‘GoldenSunburst’ 46 玉簪‘玛玛米尔’犎狅狊狋犪‘MamaMia’
2 玉簪‘金奖章’犎狅狊狋犪‘GoldenMedalion’ 47 高丛玉簪‘稚粉叶’犎狅狊狋犪‘FortuneiHyacinthina’
3 重瓣玉簪犎.狆犾犪狀狋犪犵犻狀犲犪var.狆犾犲狀狅 48 玉簪‘迟花’犎狅狊狋犪‘Tardiana’
4 玉簪‘一拉特’犎狅狊狋犪‘Elata’ 49 波动玉簪‘寒河江’犎.犳犾狌犮狋狌犪狀狊‘Sagae’
5 玉簪‘雪帽’犎狅狊狋犪‘SnowCap’ 50 玉簪‘蓝天’犎狅狊狋犪‘BlueSkies’
6 玉簪‘大富豪’犎狅狊狋犪‘BigDaddy’ 51 玉簪‘蒙特利尔’犎狅狊狋犪‘Montrealensis’
7 玉簪‘金边高丛’犎狅狊狋犪‘FortuneiAureomarginata’ 52 玉簪‘小黄金叶’犎狅狊狋犪‘GoldCadet’
8 玉簪‘宠物’犎狅狊狋犪‘LovePat’ 53 波叶玉簪‘银边’犎.狌狀犱狌犾犪狋犪‘Albomarginata’
9 玉簪‘金边托库达玛’犎狅狊狋犪‘TokudamaAureonebulosa’ 54 玉簪‘银心波叶’犎狅狊狋犪‘UndulataUnivittata’
10 小玉簪‘白花’犎.狊犻犲犫狅犾犱犻犻‘Alba’ 55 玉簪‘法兰西’犎狅狊狋犪‘Francee’
11 玉簪‘皱金边托库达玛’犎狅狊狋犪‘TokudamaFlavocircinalis’ 56 玉簪‘威勒摩尔’犎狅狊狋犪‘Vilmoriniana’
12 玉簪‘银边高丛’犎狅狊狋犪‘FortuneiAlbomarginata’ 57 玉簪‘精毯’(实生苗)犎狅狊狋犪‘GroundMaster’
13 山地玉簪犎.犿狅狀狋犪狀犪 58 ‘高丛’玉簪 犎狅狊狋犪‘Fortunei’
14 玉簪‘迈达斯之抚’犎狅狊狋犪‘MidasTouch’ 59 玉簪‘黄叶绿斑高丛’犎狅狊狋犪‘FortuneiAureamaculata’
15 玉簪‘蓝伞’犎狅狊狋犪‘BlueUmbrela’ 60 玉簪‘圣诞树’犎狅狊狋犪‘ChristmasTree’
16 玉簪‘金色水准’犎狅狊狋犪‘GoldStandard’ 61 玉簪‘船桨’犎狅狊狋犪‘SeaDrift’
17 玉簪‘太阳能’犎狅狊狋犪‘SunPower’ 62 玉簪‘杰尼特’犎狅狊狋犪‘Janet’
18 圆叶玉簪‘高雅’犎狅狊狋犪siebolaiana‘Elegans’ 63 玉簪‘喳喳湖边’犎狅狊狋犪‘LakesideChaCha’
19 玉簪‘彩旗’犎狅狊狋犪‘ColorGlory’ 64 玉簪‘柔红’犎狅狊狋犪‘MildredSeaver’
20 玉簪‘漂亮’犎狅狊狋犪‘Pizzazz’ 65 玉簪‘爱国者’犎狅狊狋犪‘Patriot’
21 玉簪‘金鹰’犎狅狊狋犪‘GoldEdger’ 66 玉簪‘绿标’犎狅狊狋犪‘GreenStandard’
22 玉簪‘皇家标准’犎狅狊狋犪‘RoyalStandard’ 67 玉簪‘金心高丛’犎狅狊狋犪‘FortuneiAlbopicta’
23 玉簪‘柠檬黄’犎狅狊狋犪‘LemonLime’ 68 玉簪‘奥克高丛’犎狅狊狋犪‘FortuneiAoki’
24 圆叶玉簪‘珍品’犎.狊犻犲犫狅犾犱犻犪狀犪‘GoldenCultivar’ 69 玉簪‘米牛塔’犎狅狊狋犪‘Minuta’
25 玉簪‘总和’犎狅狊狋犪‘SumandSubstance’ 70 玉簪‘蓝海德斯’犎狅狊狋犪‘HadspenBlue’
26 山地玉簪‘金边’犎.犿狅狀狋犪狀犪‘Aureomarginata’ 71 玉簪‘爱勒博克’犎狅狊狋犪‘Elerbroek’
27 玉簪‘蓝色天使’犎狅狊狋犪‘BlueAngle’ 72 玉簪‘叛逆’犎狅狊狋犪‘Reversed’
28 玉簪‘纳加木’犎狅狊狋犪‘Nakaimo’ 73 玉簪‘金头饰’犎狅狊狋犪‘GoldenTiara’
29 披针叶玉簪犎.犾犪狀犮犻犳狅犾犻犪 74 玉簪‘杂边白’犎狅狊狋犪‘ZagerWhiteEdge’
30 玉簪‘男孩’犎狅狊狋犪‘TalBoy’ 75 矮小玉簪犎.狏犲狀狌狊狋犪
31 玉簪‘波叶’犎狅狊狋犪‘Undulate’ 76 玉簪‘黄皱叶’犎狅狊狋犪‘Zounds’
32 玉簪‘甜心’犎狅狊狋犪‘CandyHeart’ 77 玉簪‘夏香’犎狅狊狋犪‘SummerFragrance’
33 圆叶玉簪‘大威廉’犎.狊犻犲犫狅犾犱犻犪狀犪‘FrancesWiliams’ 78 玉簪‘海登晚霞’犎狅狊狋犪‘HydonSunset’
34 玉簪‘蓝色韦奇伍德’犎狅狊狋犪‘BlueWedgwood’ 79 朝鲜玉簪犎.犾狅犵犻狆犲狊
35 玉簪‘蓝皱’犎狅狊狋犪‘TrueBlue’ 80 中国玉簪‘银边’犎.犮犪狋犺犪狔犪狀犪‘VeraVerde’
36 玉簪‘林荫迷’犎狅狊狋犪‘FanFaireShade’ 81 小玉簪‘船长’犎.狊犻犲犫狅犾犱犻犻‘Kabitan’
37 玉簪‘秋紫萼’犎狅狊狋犪‘UndulataErromena’ 82 紫萼‘金边’犎.狏犲狀狋狉犻犮犲狊犪‘Aureoruarginata’
38 玉簪‘壮丽’犎狅狊狋犪‘RegalSplendor’ 83 玉簪‘精毯’犎狅狊狋犪‘GroundMaster’
39 圆叶玉簪‘卷叶’犎.狊犻犲犫狅犱犻犪狀犪‘GrayCole’ 84 玉簪‘安弟奥奇’犎狅狊狋犪‘Antioch’
40 小玉簪‘银边’犎.狊犻犲犫狅犾犱犻犻‘Albomarginata’ 85 玉簪‘小明’犎狅狊狋犪‘LittleMing’
41 灰黑叶玉簪犎.狀犻犵狉犲狊犮犲狀狊 86 玉簪‘大师’犎狅狊狋犪‘GrandMaster’
42 玉簪‘蓝灰叶’犎狅狊狋犪‘KrossaRegal’ 87 玉簪‘皱波叶’犎狅狊狋犪‘Crispula’
43 玉簪‘圣诞前夜’犎狅狊狋犪‘NightBeforeChristmas’ 88 玉簪‘宽边’犎狅狊狋犪‘WideBrim’
44 玉簪‘绿法兰西’犎狅狊狋犪‘GreenFrancee’ 89 玉簪‘光叶’犎狅狊狋犪‘Spritzer’
45 玉簪‘金山’犎狅狊狋犪‘PiedmontGold’ 90 玉簪‘远大前程’犎狅狊狋犪‘GreatExpections’
532第22卷第1期 草业学报2013年
学院植物研究所植物园玉簪种质资源圃(39°48′N,116°28′E,海拔76m)。所有试验材料均采用相同的栽培措
施(包括相同的施肥、灌溉及病害防治等)。花瓣采集后置于-20℃冰箱保存,用于后续分析。
试剂:乙腈和甲醇(色谱纯)购于北京先明乐施科技发展有限公司。三氟乙酸(≥99%)购于德国 Merck公司
(Darmstadt,Germany)。甲醇(分析纯)和甲酸(分析纯)购自北京化工厂。HPLC级水由 MiliQ超纯水系统
(Milipore,Bilerica,MA,USA)制备。黄酮醇标准品:芦丁(纯度91.7%)、山奈酚3,7二葡萄糖苷购自中国药
品生物制品检定所,用于黄酮醇定性定量分析。
1.2 类黄酮化合物提取
每个处理称取2g花瓣材料,加液氮研磨成粉末,溶于5mL甲醇-甲酸(98∶2,V/V)的抽提溶剂,黑暗条件
下4℃浸提24h,期间每隔6h于旋转振荡器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司,江苏)振荡混匀1次。之后超
声振荡30min,离心(12000r/min,10min),收集上清液。滤渣分次加入3mL,2mL抽提液,进行第2、3次的
抽提,合并收集的上清液。0.22μm尼龙微孔滤膜过滤后保存在-20℃冰箱,用于 HPLCDAD或 HPLCMS
n
分析。每个处理重复3次。
1.3 类黄酮化合物定性、定量分析
采用Agilent1100LC/MSDTrapVL液质联用仪(HPLCESIMSn)进行类黄酮定性分析。色谱条件为:采
用TSKgelODS80TsQA(150mm×4.6mm,5μmi.d.,Tosoh,Tokyo,Japan)色谱柱;检测波长350nm;流
动相组成:A相0.1% 甲酸-水溶液;B相0.1%甲酸-乙腈溶液,洗脱程序:0min,5%B;10min,10%B;12
min,11.7%B;15min,12%B;35min,13.4%B;40min,20%B;55min,29%B;60min,5%B;流速0.8mL/min;
温度35℃,进样量10μL。质谱电离源采用电喷雾电离(ESI),分别在正离子和负离子模式下进行全扫描,扫描范
围:(m/z)100~1000u。正离子模式下质谱分析条件为:氮气作为干燥和喷雾气体,干燥温度350℃,氮气流速
6.0L/min,喷雾器压力:241.3kPa;毛细管电压:3500kV,毛细管出口电压:140V;八级射频电压振幅:150
Vpp;skim1电压:55.6V,skim2电压:6.0V;capexitoffset,84.4V。负离子模式下,参数设定值不同的为:毛
细管出口电压:-127.3V;skim1电压:-47.7V,skim2电压:-6.0V;capexitoffset,-79.6V。用LC/
MSDTrap软件(5.2版本)分析不同模式下的质谱数据。依据样品 HPLC分析的保留时间、洗脱顺序、紫外-可
见吸收光谱和质谱信息,通过与标准品以及参考文献[1214]比较得出类黄酮化合物的结构。
采用DionexHPLC系统进行类黄酮化合物定量分析。该系统包括P680泵、TCC100自动控温柱箱、PDA
100光电二极管阵列检测器。色谱条件与类黄酮化合物定性分析一致。利用标准品芦丁分别对黄酮/黄酮醇总
量(TF)进行半定量分析,重复3次,单位为每克新鲜花瓣中含有的毫克数。
1.4 统计分析
用SPSS16.0对数据进行聚类分析、主成分分析,并用SigmaPlot10.0对数据作盒须图。
2 结果与分析
2.1 标准曲线
以芦丁标准溶液绘制了标准曲线,并测定了方法的灵敏度。结果表明,在所检测的浓度范围内,响应值与浓
度高度线性相关,相关系数狉2>0.9993。LOD为0.229μg/mL;LOQ为0.764μg/mL(表2)。
表2 分析方法的线性检验(狔=犽狓+犿)及检测限、定量限
犜犪犫犾犲2 犔犻狀犲犪狉犻狋狔狅犳狉犲狊狆狅狀狊犲犳狅狉狉狌狋犻狀狌狊犻狀犵狋犺犲狊犲狆犪狉犪狋犲犿犲狋犺狅犱(犆犪犾犻犫狉犪狋犻狅狀犳犻狋狋犻狀犵:狔=犽狓+犿)犪狀犱犔犗犇,犔犗犙
标准品Standardtype 斜率Sloperate(犽)(mean±SD,狀=3)截距Intercept(m)(mean±SD,狀=3)狉2(狀=5)LOD(μg/mL)LOQ(μg/mL)
芦丁Rutin 0.4453±0.0006 -1.6414±0.0304 0.9993 0.229 0.764
回归方程狔=犽狓+犿,狔是峰面积,狓是样品浓度(μg/mL),狉2是方程相关系数;mean±SD表示均值±标准偏差;LOD是检测限,LOQ是定量限。
Intheregressionequation狔=犽狓+犿,狔ispeakarea,狓issampleconcentration(μg/mL),狉2equationcorrelationcoefficient;Standarddeviationis
abbreviatedasSD;LODisdetectionlimit,LOQislimitofquantitation.
632 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.1
2.2 玉簪属植物类黄酮化合物定性分析
表3列出了玉簪花中检测到的类黄酮化合物的紫外可见吸收光谱和质谱数据[1620]。其中,负离子模式下的
质谱数据为化合物的结构解析提供了更多信息[20]。共发现3种黄酮醇苷元和1种黄酮苷元,分别为:kaempferol
(1,2,4,5,6,7,8,9,13,14,15,16和17)、quercetin(11,12)、isorhamnetin(3)和luteolin(10)(表3、图1)。
表3 玉簪类黄酮组分的紫外—可见吸收光谱与质谱数据
犜犪犫犾犲3 犎犘犔犆犇犃犇犪狀犱犎犘犔犆犈犛犐犕犛狀犪狀犪犾狔狊犻狊犪狊狑犲犾犪狊狋犺犲狊狋狉狌犮狋狌狉犲犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狕犪狋犻狅狀犪狀犱狋犲狀狋犪狋犻狏犲
犻犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳犵犾狔犮狅狊犻犱犲狊狅犳犳犾犪狏狅狀犲,犳犾犪狏狅狀狅犾犻狀狆犲狋犪犾狊狅犳犎狅狊狋犪
色谱峰
Peaks
化合物推断结构
Identificationandtentative
identification
保留时间
Retention
time(min)
最大吸收
波长λmax
(nm)
负谱碎片离子
ESINIMS/MS2
(犿/狕)
正谱碎片离子
ESIPIMS/MS2
(犿/狕)
1
山奈酚3,7二葡萄糖苷Kaempferol3,
7diOglucoside
7.60
266.8
347.3
609[M- H]-,447[Y03- and
Y07-](100),285[Y0-](13)
611[M + H]+,449(88),287
[Y0+](100)
2
山奈酚3葡萄糖7芸香糖苷Kaempfer
ol3Oglucosyl7Orutinose
8.66
266.9
347.8
755[M-H]-,609(45),447(23),
285[Y0-](20)
757[M + H]+,611(32),449
(100),287[Y0+](79)
3
异鼠李素3,4二葡萄糖苷Isorhamne
tin3,4diOglucoside
11.00
254.0
354.0
639[M- H]-,477[Y03- and
Y07-](100),315[Y0-](4)
663[M + Na]+,479(81),317
[Y0+](100)
4
山奈酚3奎尼酰葡萄糖苷 Kaempferol
3Oquinoylglucoside
11.19
266.8
349.5
621[M-H]-,447(100),285
[Y0-H]-(18)
623[M+H]+,449 (56),287
[Y0+](100)
5
山奈酚3芥子酰葡萄糖苷 Kaempferol
3Osinapoylglucoside
12.67
266.5
346.5
653[M-H]-,447(18),285[Y0
-H]-(100)
677[M+H+Na]+,449(100),
287[Y0+](54)
6
山奈酚3抗坏血酰葡萄糖苷
Kaempferol3Oascorbicoylglucoside
14.29
266.4
346.5
605[M-H]-,447(100),285
[Y0-H]-(18)
607[M+H]+,449 (56),287
[Y0+](100)
7
山奈酚7新橙皮糖苷Kaempferol7O
neohesperidoside
17.30
266.3
346.7
593[M-H]-,285[Y0-H]-
(100)
595[M+H]+,287[Y0+](100)
8
山奈酚3,7二己糖苷 Kaempferol3,7
diOhexoside
18.30
266.6
346.8
609[M- H]-,447[Y03- and
Y07-](100),285[Y0-](10)
633[M+Na]+,449(18),287
[Y0+](100)
9
山奈酚3葡萄糖7鼠李糖苷
Kaempferol3Oglucosyl7Orhamnoside
19.54
266.5
346.9
593[M-H]-,447[Y07-](74),
431[Y03-](44)
595[M+H]+,449(32),433(18),
287[Y0+](100)
10
木犀草素7新橙皮糖苷Luteolin7O
neohesperidoside
20.63
266.6
348.0
593[M-H]-,447(23),285
[Y0-](2)
595[M+H]+,449(0.3),287
[Y0+](100)
11
槲皮素3葡萄糖苷 Quercetin3Oglu
coside
21.20
256.3
353.0
463[M-H]-,301[Y0-,M-
H-162]
465[M+H]+,303[Y0+,M+
H-162]
12
槲皮素 3葡萄糖酸苷 Quercetin3O
glucuronide
23.70
266.7
348.0
499[M+Na-2H]-,477[M-
H]-,301[Y0-,M-H-176]
501[M+Na]+,303[Y0+,M+
H-176]
13
山奈酚3刺槐二糖甙Kaempferol3O
robinobioside
24.73
266.6
348.1
593[M-H]-,447 [M-H-
146]-,285[Y0-,M-H-308]
617[M+Na]+,449[M+H-
146]+,287[Y0+,M+H-308]
14
山奈酚 3葡萄糖苷 Kaempferol3O
glucoside
28.01
346.3
265.1
447[M-H]-,284[Y0-H]-
471[M+Na]+,287[Y0+,M+
H-162]
15
山奈酚 3葡糖苷酸 Kaempferol3O
glucuronide
32.60
346.2
265.1
483[M+Na-2H]-,461[M-
H]-,285[Y0-,M-H-176]
485[M+Na]+,287[Y0+,M+
H-176]
16
山奈酚3戊糖苷 Kaempferol3Open
tose
33.71
344.0
265.0
417[M-H]-,284[Y0-H]-
441[M+Na]+,287[Y0+,M+
H-132]
17
山奈酚 7葡萄糖苷 Kaempferol7O
glucoside
42.90
266.0
358.0
447[M-H]-,285[Y0-](32) 471[M+Na]+,287[Y0+](100)
732第22卷第1期 草业学报2013年
图1 灰黑叶玉簪(左)和披针叶玉簪(右)黄酮类组成的犎犘犔犆图谱(检测波长:350狀犿)
犉犻犵.1 犇犃犇犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪犿狅犳犳犾犪狏狅狀狅犻犱狊狉犲犮狅狉犱犲犱犪狋350狀犿狅犳犎.狀犻犵狉犲狊犮犲狀狊(犾犲犳狋)犪狀犱犎.犾犪狀犮犻犳狅犾犻犪(狉犻犵犺狋)
色谱峰峰号与表3相同。PeaknumberswerethesameasTable3.
HPLCESIMSn分析结果表明,组分1通过与标准品的共洗脱和紫外吸收光谱的比较鉴定为山奈酚3,7二
葡萄糖苷(kaempferol3,7diOglucoside,Km3G7G)。组分2,3,8,9(图1)的质谱裂解行为与kaempferol3,7
diOglucoside相似,表明它们是黄酮醇3,7二糖苷。此类化合物在负离子模式下的碎片离子可以提供糖苷化
位置的可靠信息[20]。在黄酮醇糖苷的 MS2 质谱中,准分子离子[M-H]-失去3位的糖基产生的离子记为
Y03-,而失去7位糖基的记为Y07-。由于[M-H]-更容易失去7位上的糖基,Y07-的相对丰度通常比 Y03-
高[21]。根据以上原理,将组分2,3,9分别推定为山奈酚3葡萄糖7芸香糖苷(kaempferol3Oglucosyl7Oru
tinose),异鼠李素 3,4二葡萄糖苷(isorhamnetin3,4diOglucoside)[19]和山奈酚 3葡萄糖7鼠李糖苷
(kaempferol3Oglucosyl7Orhamnoside)。组分8的 MS2 质谱信息与1相同,且8的洗脱顺序在后,推测可
能是半乳糖参与了糖苷化,由于没有更多的证据,暂将8推定为山奈酚3,7二己糖苷(kaempferol3,7diOhex
oside)。
组分4,5和6的[M-H]-离子在MS2 分析中都有丢失碎片犿/狕174u,犿/狕206u,犿/狕158u的现象,推测这
3个化合物为黄酮醇的酰化葡萄糖苷。将组分4,5和6的紫外吸收光谱与标准品Km3G7G进行比较,推定4为
山奈酚3奎尼酰葡萄糖苷(kaempferol3Oquinoylglucoside)、5为山奈酚3芥子酰葡萄糖苷(kaempferol3O
sinapoylglucoside)、6为山奈酚3抗坏血酰葡萄糖苷(kaempferol3Oascorbicoylglucoside)。
10号峰的质谱数据显示是木犀草素的衍生物,MS2 质谱中只能观察到犿/狕447([M-H-146u]-),而没有
犿/狕431([M-H-162u]-),表明木犀草素是被一种双糖糖苷化的。根据碎片犿/狕449([M+H-146u]+)的相
对丰度大于犿/狕287([Y0+,M+H-(146+162)u]),判断双糖之间的糖苷键是1→2连接方式[20]。再比较10
号峰的紫外吸收光谱,最终将10号峰推定为木犀草素7新橙皮糖苷(luteolin7Oneohesperidoside)。同样,将
7号峰推定为山奈酚7新橙皮糖苷(kaempferol7Oneohesperidoside),13号峰被推定为山奈酚3刺槐二糖甙
(kaempferol3Orobinobioside)[22]。
组分11,正离子模式下检测到高丰度的苷元离子犿/狕303(Y0+),负离子模式下检测到相应的离子犿/狕301
(Y0-)。再结合它们在色谱柱中的洗脱顺序和紫外可见吸收光谱数据,组分11被推定为槲皮素衍生物。组分11
在(+)ESI-MS下的分子离子犿/狕465([M+H]+)和(-)ESI-MS下的去质子分子离子犿/狕463([M-
H]-)表明糖基为一个己糖分子。而负离子模式下相对高丰度的自由基苷元离子犿/狕300([Y0-H]-)说明糖
基化位置在3位上。组分11最终确定为槲皮素3葡萄糖苷 (quercetin3Oglucoside)[23]。根据紫外可见吸收
光谱,洗脱顺序,负离子模式下的分子离子犿/狕477([M-H]-),正离子模式下的分子离子犿/狕501([M+
Na]+),组分12被推定为槲皮素3葡萄糖酸苷(quercetin3Oglucuronide)[24]。
832 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.1
组分13鉴于紫外最大吸收波长265nm(BandII)[22],正离子模式下的苷元碎片离子犿/狕287(Y0+)以及负
离子模式下的苷元离子犿/狕285(Y0-)和自由基苷元离子犿/狕284([Y0-H]]-)。组分14和15在正离子模式
下检测到显著的加钠分子离子犿/狕471([M+Na]+),负离子模式下检测到去质子分子离子犿/狕447([M-
H]-),分子量正好是在山奈酚分子量的基础上加上一个己糖的分子量162u,由此确定组分14的结构为山奈酚
3葡萄糖苷(kaempferol3Oglucoside),组分15为山奈酚3葡糖苷酸(kaempferol3Oglucuronide)。
16号峰正离子模式下检测到显著的加钠分子离子犿/狕441([M+Na]+)和苷元离子犿/狕287(Y0+),负离子
模式下也检测到相应的分子离子犿/狕417([M-H]-)和自由基苷元离子犿/狕284([Y0-H]-),这些都是戊糖
苷化的山奈酚或木犀草素的特征质谱数据。同时该化合物在265nm,而不是255nm有最大吸收,即是山奈酚的
紫外特征吸收。但尚无法确实戊糖是木糖还是阿拉伯糖,因此组分16暂定为山奈酚3戊糖苷(kaempferol3O
pentose)。
在负离子模式下,当苷元的3位发生糖苷化时,[Y0-H]-的相对丰度大于Y0-;而7位发生糖苷化时则相
反,Y0-的相对丰度更高[20]。并且2种糖苷的紫外特征吸收波长不同,类黄酮7糖苷的特征吸收带I与3糖苷
相比发生红移[25]。根据 MS和UV光谱数据(表3),推定17号峰为山奈酚7葡萄糖苷(kaempferol7Ogluco
side)。
2.3 玉簪属植物类黄酮化合物定量分析
为了进一步筛选应用价值大的玉簪种质,首先依据类黄酮化合物成分对选定的玉簪种质进行聚类分析(图
2)。当选取5为聚类距离时,玉簪分为2类。通过比较2类玉簪种质的类黄酮组成,发现I类中kaempferol3,7
diOhexoside、kaempferol3Oglucuronide含量相对较高,II类中kaempferol3Oglucosyl7Orutinose含量
最高。进一步依据玉簪类黄酮化合物含量进行主成分分析,发现聚类分析中I类主要分布在组分8,15得分值高
的区域;II类主要分布在组分2得分值高的区域(图3)。分别对I、II类作盒须图(图4),可以更加清晰明了的看
出2类的区别。在以kaempferol3,7diOhexoside、kaempferol3Oglucuronide为主成分的I类中,山地玉簪
(犎.犿狅狀狋犪狀犪)为kaempferol3,7diOhexoside含量最高的品种,达到1.41mg/g。玉簪‘蒙特利尔’(犎狅狊狋犪
‘Montrealensis’)为kaempferol3Oglucuronide含量最高的品种,达到1.08mg/g。在II类当中,野生种披针
叶玉簪(犎.犾犪狀犮犻犳狅犾犻犪)为kaempferol3Oglucosyl7Orutinose含量最高的玉簪种质,达到2.11mg/g,同时披
针叶玉簪还是类黄酮总量最高的玉簪种质,达到2.94mg/g(表4)。
图2 玉簪聚类树形图
犉犻犵.2 犎犻犲狉犪狉犮犺犻犮犪犾犱犻犪犵狉犪犿狊犺狅狑犻狀犵狋犺犲犮犾犪狊狊犻犳犻犮犪狋犻狅狀
狉犲狊狌犾狋狊狌狊犻狀犵犮犾狌狊狋犲狉犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狋犺犲犳犾犪狏狅狀狅犻犱狊狆狉狅犳犻犾犲
图3 主成分因子得分图
犉犻犵.3 犘犆犃狊犮犪狋狋犲狉犱犻犪犵狉犪犿狅犳狊犪犿狆犾犲狊
犫犪狊犲犱狅狀犳犾犪狏狅狀狅犻犱狊狆狉狅犳犻犾犲
932第22卷第1期 草业学报2013年
图4 不同玉簪品种中类黄酮组成
犉犻犵.4 犉犾犪狏狅狀狅犻犱狊犮狅狀狊狋犻狋狌狋犻狅狀狊犳狉狅犿犱犻犳犳犲狉犲狀狋狊狆犲犮犻犲狊犪狀犱犮狌犾狋犻狏犪狉狊狅犳犎狅狊狋犪
P1~P17分别对应1~17号峰。1-17peaksseeTable3.
表4 玉簪花的类黄酮组成及定量分析
犜犪犫犾犲4 犉犾犪狏狅狀狅犻犱犮狅狀狊狋犻狋狌狋犻狅狀狊犪狀犱狉犲犾犪狋犻狏犲狇狌犪狀狋犻狋狔狅犳犳犾犪狏狅狀狅犻犱犻狀犎狅狊狋犪 mg/g
样品号
SampleNo.
峰1
P1
峰2
P2
峰3
P3
峰4
P4
峰5
P5
峰6
P6
峰7
P7
峰8
P8
峰9
P9
峰10
P10
峰11
P11
峰12
P12
峰13
P13
峰14
P14
峰15
P15
峰16
P16
峰17
P17
总类黄酮
TF
1 - 0.282 0.290 0.080 0.010 0.010 - 0.042 0.108 0.012 - 0.110 - 0.007 0.016 0.005 0.006 0.977
2 - 0.035 0.150 0.150 - 0.010 0.026 - - - - 0.010 - 0.007 0.019 0.003 0.004 0.413
3 - 0.301 0.140 0.040 0.010 0.010 - 0.070 0.052 0.017 - 0.025 - - 0.013 0.002 0.006 0.686
4 0.010 - - 0.030 0.010 0.010 - 0.004 - - - 0.019 0.027 0.004 - 0.005 - 0.119
5 - 0.102 - 0.070 0.190 0.040 0.017 0.017 0.005 0.012 0.010 0.012 0.010 0.089 0.029 0.003 0.010 0.616
6 - 0.005 - 0.010 - 0.010 0.005 0.022 0.013 0.012 - - 0.019 0.005 - 0.003 - 0.104
7 - 0.323 0.060 0.080 0.020 0.010 0.004 0.024 0.082 0.012 - - 0.020 - 0.010 0.005 - 0.649
8 - - 0.030 0.060 0.030 0.010 0.014 0.052 0.034 0.012 0.007 - 0.008 - 0.004 0.004 - 0.266
9 - 0.032 - 0.010 0.010 0.010 0.033 0.050 - - 0.108 0.111 0.128 0.022 0.018 0.855 0.003 1.392
10 - 0.018 - 0.020 0.010 0.120 0.139 0.117 0.119 0.039 0.043 0.039 0.114 0.846 0.006 0.002 - 1.633
11 - 0.308 0.340 0.080 - 0.010 - 0.028 0.106 0.012 - 0.128 0.009 - - 0.002 - 1.023
12 - 0.254 0.320 0.060 - 0.010 - 0.003 0.074 0.012 - 0.003 0.014 0.008 0.007 0.015 - 0.778
13 - 0.055 0.010 0.100 0.010 0.030 0.028 1.408 0.178 0.008 0.006 0.004 - - 0.059 0.002 0.002 1.900
14 0.020 0.085 0.010 0.020 - 0.030 0.010 0.025 0.016 0.015 0.005 0.159 0.004 0.024 0.063 0.004 - 0.491
15 - 0.076 0.380 0.010 0.020 0.010 0.026 0.016 0.013 0.063 0.014 0.005 0.072 - 0.071 - 0.006 0.782
16 0.300 0.424 0.020 0.060 - 0.010 0.015 - 0.104 0.028 0.002 - 0.089 0.009 - 0.008 - 1.068
17 0.010 0.045 0.030 0.060 - 0.030 0.013 0.114 0.116 0.015 0.004 - 0.011 0.072 0.071 0.002 - 0.593
18 0.190 0.485 0.020 0.150 - 0.010 0.003 0.053 0.003 0.029 0.010 - 0.002 - 0.028 0.006 - 0.988
19 0.010 0.136 0.030 0.600 - 0.030 - 0.003 0.508 - 0.004 0.026 0.048 0.063 0.010 0.065 - 1.533
20 0.010 0.174 0.010 0.080 - 0.010 - 0.024 0.020 0.006 0.003 0.007 - - 0.008 0.003 - 0.355
21 - 0.177 0.010 0.070 0.010 0.010 - 0.026 0.018 0.006 0.003 0.008 0.007 0.010 0.009 0.003 - 0.365
22 - 0.511 - 0.010 0.020 0.010 - 0.180 0.372 0.015 - 0.007 0.013 0.013 0.078 0.002 - 1.231
24 0.020 0.028 0.010 0.010 - 0.010 - 0.399 0.021 0.016 - - 0.036 0.012 0.023 0.002 0.002 0.589
25 - 0.021 0.270 0.100 - 0.030 - 0.067 0.005 1.865 0.088 - - 0.003 0.045 0.007 - 2.500
26 - 0.866 0.080 0.200 - 0.010 0.004 0.014 0.121 - 0.061 0.044 0.003 0.004 0.062 0.012 0.008 1.487
27 - 0.361 0.310 0.090 - 0.010 0.002 0.008 0.084 0.016 0.033 0.008 0.003 0.006 0.045 0.012 0.003 0.992
042 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.1
续表4 Continued
样品号
SampleNo.
峰1
P1
峰2
P2
峰3
P3
峰4
P4
峰5
P5
峰6
P6
峰7
P7
峰8
P8
峰9
P9
峰10
P10
峰11
P11
峰12
P12
峰13
P13
峰14
P14
峰15
P15
峰16
P16
峰17
P17
总类黄酮
TF
28 - 0.038 - 0.320 - 0.020 0.017 0.005 0.007 - 0.058 0.135 0.005 0.005 - 0.006 0.007 0.623
29 - 2.110 0.090 - 0.060 0.010 0.003 - - - 0.362 0.282 0.002 0.010 - 0.004 0.004 2.937
30 - 0.057 0.010 0.080 0.690 0.010 0.037 0.168 0.004 0.020 0.032 0.017 - 0.002 0.092 0.003 0.031 1.253
31 - 0.057 0.040 0.010 0.020 0.030 0.227 0.083 0.220 0.012 0.002 0.023 - 0.068 0.104 0.002 0.053 0.951
32 0.070 0.273 0.720 0.080 0.030 0.020 0.047 0.040 0.038 0.044 0.005 0.033 - 0.004 0.163 0.006 - 1.573
33 0.030 0.431 1.320 0.010 0.010 0.050 0.002 0.003 0.029 0.018 0.038 0.006 - - 0.024 0.004 0.002 1.977
34 - 0.004 0.010 1.410 0.040 0.010 0.002 - - - 0.290 0.342 - 0.020 0.037 0.003 0.005 2.173
35 - 0.075 0.010 0.600 - 0.020 - 0.104 0.891 0.012 0.284 0.017 0.008 0.015 0.016 0.004 0.004 2.059
36 0.020 0.434 0.100 0.140 - 0.010 0.005 0.011 0.099 0.012 0.018 0.018 - 0.011 0.015 0.014 0.002 0.908
37 - 0.120 0.010 0.050 - 0.020 0.019 0.008 0.120 0.013 0.015 0.011 0.007 0.009 0.003 0.004 - 0.408
38 0.020 0.166 0.010 0.100 - 0.020 0.016 0.016 0.023 0.012 0.003 - 0.011 - 0.020 0.005 - 0.421
39 - 0.059 - 0.010 - 0.010 - 0.058 0.003 0.009 0.339 0.098 0.030 0.002 0.090 0.012 - 0.721
40 0.040 0.039 0.010 0.360 - 0.010 0.007 0.003 0.012 - 0.091 - - - 0.020 - 0.009 0.601
41 - 0.269 - 0.060 0.020 0.010 0.028 0.037 0.021 0.012 0.003 0.039 0.004 0.016 0.068 0.003 0.005 0.595
42 - - - 0.010 0.350 0.120 0.006 - 0.009 - 0.038 0.032 0.003 0.016 0.124 0.006 0.010 0.723
43 - 0.103 0.010 0.010 0.020 0.010 0.090 0.131 0.037 0.163 0.110 0.080 0.006 0.054 0.967 0.004 0.002 1.796
44 - 0.012 0.010 0.040 - 0.020 0.021 0.532 0.047 0.016 0.004 - 0.020 - 0.053 0.004 - 0.778
45 - 0.301 - 0.010 0.130 0.030 0.018 0.209 0.032 0.013 0.004 - 0.011 0.002 0.349 - 0.002 1.110
47 - 0.061 - 0.100 - 0.020 0.027 0.040 - 0.601 0.385 0.089 0.026 - 0.086 0.014 - 1.451
48 - 0.050 0.020 0.100 0.070 0.020 0.005 0.210 0.002 0.034 0.005 0.201 0.042 0.032 0.032 0.013 0.003 0.840
49 - 0.155 0.020 0.050 0.050 0.010 0.040 0.037 0.041 0.018 0.002 0.028 0.036 0.015 0.051 0.005 0.004 0.561
50 - 0.121 0.010 0.050 0.010 0.030 0.029 - 0.008 0.011 - - - - 0.035 - - 0.303
53 - 0.063 0.010 0.070 0.010 0.130 0.026 0.318 0.025 0.031 0.038 - 0.005 - 0.041 - - 0.767
51 - 0.092 0.010 0.010 0.020 0.050 0.177 0.163 0.113 0.753 0.042 0.004 - - 1.080 0.014 0.005 2.534
52 - 0.076 0.230 0.020 0.010 0.030 0.030 0.219 0.005 0.012 0.303 0.120 0.035 - 0.313 0.015 0.003 1.421
54 - 0.004 - 0.100 - 0.190 0.014 - - 0.018 0.021 - - - 0.011 - - 0.358
55 - 0.033 - 0.010 - 0.010 0.013 0.326 0.171 0.097 0.026 0.010 - 0.323 0.295 0.005 - 1.319
56 - 0.002 0.010 0.010 0.010 0.020 0.023 - - - 0.024 - 0.007 0.008 0.024 - 0.006 0.144
57 - 0.054 0.020 0.070 - 0.020 0.030 0.279 0.010 0.048 - 0.012 - 0.009 0.048 - 0.004 0.603
58 - 0.218 0.010 0.040 - 0.010 0.037 0.045 0.034 0.015 0.002 0.004 0.004 - 0.070 - - 0.488
59 - 0.055 0.050 0.070 - 0.040 0.017 0.435 0.031 0.048 0.010 0.003 - - 0.022 0.003 - 0.781
60 - 0.048 0.030 0.070 0.010 0.130 0.046 0.139 0.025 0.041 0.002 0.002 0.018 0.007 0.120 - - 0.688
61 - - 0.040 0.030 0.040 0.020 0.107 0.120 0.038 0.018 0.034 - 0.039 0.086 0.780 0.004 0.002 1.358
62 0.010 - - 0.020 - 0.070 - 0.004 0.004 0.343 0.033 - 0.512 - 0.056 0.003 - 1.055
63 0.050 0.030 0.010 0.010 0.030 0.120 0.002 0.039 - 0.044 0.037 - 0.841 - 0.076 0.005 - 1.293
64 - 0.112 0.020 0.010 0.030 0.030 - 0.001 0.102 0.011 0.020 0.005 - 0.009 0.003 0.006 - 0.359
65 - - 0.010 0.040 0.020 0.020 0.002 - 0.004 0.042 - 0.010 0.007 - - - - 0.155
66 - 0.023 0.060 0.060 - 0.010 0.023 0.509 0.014 0.071 0.003 - 0.011 0.013 0.029 - - 0.825
67 0.010 0.130 0.010 0.040 0.010 0.020 0.034 0.030 0.026 0.013 0.003 - 0.002 - 0.048 0.002 - 0.379
68 - 0.098 0.010 0.030 0.040 0.020 0.028 0.025 0.031 0.060 0.008 - - - 0.034 0.003 - 0.388
70 0.070 0.075 0.030 0.050 0.040 0.050 - 0.200 0.017 0.135 0.002 0.003 - 0.010 0.188 0.013 - 0.883
142第22卷第1期 草业学报2013年
续表4 Continued
样品号
SampleNo.
峰1
P1
峰2
P2
峰3
P3
峰4
P4
峰5
P5
峰6
P6
峰7
P7
峰8
P8
峰9
P9
峰10
P10
峰11
P11
峰12
P12
峰13
P13
峰14
P14
峰15
P15
峰16
P16
峰17
P17
总类黄酮
TF
71 - - - 0.040 - 0.010 0.013 0.012 0.004 0.012 0.002 0.021 0.014 0.009 0.094 - - 0.231
72 - 0.183 0.020 0.060 0.010 0.020 0.025 - 0.023 0.013 - 0.017 0.014 0.008 0.044 - - 0.437
73 - 0.636 - 0.050 0.010 0.010 - 0.010 0.103 0.012 - 0.018 0.031 0.007 0.031 0.002 0.004 0.923
74 - 0.504 0.150 0.040 0.020 0.010 - 0.079 - 0.013 0.012 0.012 0.006 - 0.205 0.010 0.002 1.063
75 - - 0.120 0.070 - 0.050 0.058 0.144 0.008 0.006 - - - 0.007 - - - 0.462
76 - 0.063 - 0.060 - 0.010 0.026 0.002 0.079 - 0.013 0.017 - - 0.002 - - 0.272
77 - 0.057 0.010 0.060 0.040 0.060 0.064 0.253 0.004 0.008 0.266 0.077 0.028 - 0.227 0.009 - 1.163
78 - 0.013 0.030 0.040 0.320 0.030 0.024 0.296 0.019 0.061 0.003 0.014 - 0.009 0.063 0.009 0.004 0.934
79 - 1.314 0.010 0.010 - 0.010 - 0.047 1.031 0.029 0.004 0.004 0.016 0.019 0.045 0.015 0.008 2.563
80 - 0.035 0.060 - - 0.020 0.026 0.292 0.013 0.047 0.003 - - 0.003 0.060 - 0.003 0.563
81 - - 0.040 - 0.020 0.010 0.007 - - - - 0.018 - - - - - 0.094
82 - 0.059 0.010 - - 0.010 0.021 0.001 0.074 0.008 - - - 0.007 0.005 - - 0.196
83 - 0.008 - 0.010 0.010 0.100 0.162 0.175 0.039 0.018 0.021 - 0.017 - 0.642 - - 1.202
84 - 0.015 0.020 - 0.060 0.010 0.005 0.025 0.006 0.068 0.013 - - - - 0.003 - 0.226
85 - 0.011 - - - 0.030 0.033 0.099 - - - 0.043 - - 0.050 - - 0.267
86 - 0.270 0.120 0.040 0.010 0.010 - 0.005 - 0.012 - - 0.010 0.006 0.018 - - 0.501
87 - - - - - 0.090 - - - - - 0.125 0.010 - - - - 0.225
88 - 0.313 0.330 - - 0.010 - 0.008 0.106 0.012 - 0.128 - - 0.011 0.002 - 0.922
89 - - - 0.030 0.020 0.090 0.236 0.004 - - - 0.047 - - 0.334 - - 0.761
23 - 0.018 0.010 0.010 - 0.050 0.302 0.013 0.011 - 0.010 0.002 0.008 - - - - 0.433
46 - - - 0.010 - 0.030 - 1.033 0.158 - 0.005 0.002 - 0.015 - - - 1.253
69 - 0.020 0.010 0.040 - 0.010 0.014 0.082 0.014 - 0.002 0.003 - 0.007 - - - 0.202
90 0.050 0.020 0.010 0.040 0.120 0.002 0.039 0.000 0.044 0.037 0.000 0.461 0.000 0.076 0.005 0.000 0.000 0.904
色谱峰峰号与表3相同PeaksnumbersameasTable3;TF:类黄酮总量 Totalflavonesandflavonolscontents.
3 结论
目前,从植物中寻找具有各种生物活性的天然化合物备受人们关注。玉簪属植物不仅是重要的耐荫观叶地
被植物,由于其多个部位均可入药,在民间及蒙药中广泛应用于乳痈、咽喉肿痛、肺热等多种炎症的治疗。玉簪属
植物类黄酮化合物组成有其特殊性,但相关研究却一直没有引起人们的足够重视。到目前为止,仅见解红霞等[5]
对玉簪花的类黄酮成分的初步研究,得到山奈酚(kaempferol)、槲皮素(quercertin)、山奈酚3O芸香糖苷
(kaempfeml3Orutinoside)和山奈酚7OβD葡萄糖苷(kaempferol7OβDglucoside)。为丰富玉簪属植物
的开发利用,有必要利用高效液相色谱(HPLCDAD)技术,建立了定量分析玉簪花中类黄酮化合物的 HPLC方
法,可作为玉簪花药材的质量控制方法。同时结合质谱(MSn)技术,鉴定了玉簪花瓣中类黄酮化合物的化学结
构,并筛选出其富含类黄酮化合物的种质资源。
本研究以玉簪属5个野生种和85个栽培品种的花瓣为材料,利用高效液相色谱(HPLCDAD)结合质谱
(MSn)技术,鉴定了玉簪花瓣中17种类黄酮化合物的化学结构,分别为:山奈酚3,7二葡萄糖苷、山奈酚3葡萄
糖7芸香糖苷、异鼠李素3,4二葡萄糖苷、山奈酚3奎尼酰葡萄糖苷、山奈酚3芥子酰葡萄糖苷、山奈酚3抗坏
血酰葡萄糖苷、山奈酚7新橙皮糖苷、山奈酚3,7二己糖苷、山奈酚3葡萄糖7鼠李糖苷、木犀草素7新橙皮糖
苷、槲皮素3葡萄糖苷、槲皮素3葡糖苷酸、槲皮素3刺槐二糖苷、山奈酚3葡萄糖苷、山奈酚3葡糖苷酸、山奈
酚3戊糖苷和山奈酚7葡萄糖苷。并比较了90种玉簪花中类黄酮化合物成分与含量的差异性,筛选出类黄酮
242 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.1
化合物含量较高的种类:山地玉簪(犎.犿狅狀狋犪狀犪)为kaempferol3,7diOhexoside含量最高的品种;玉簪‘蒙特
利尔’(犎狅狊狋犪‘Montrealensis’)为kaempferol3Oglucuronide含量最高的品种;野生种披针叶玉簪(犎.犾犪狀犮犻
犳狅犾犻犪)为kaempferol3Oglucosyl7Orutinose含量最高的玉簪种质,同时也是类黄酮总量最高的玉簪种质。
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LIUNina1,2,LIXiaodong1,ZHANGJinzheng1,WANGLiangsheng1,SUNGuofeng1,
LINQinwen1,XUYanjun3
(1.InstituteofBotany,theChineseAcademyofSciences,Beijing100093,China;2.Graduate
UniversityoftheChineseAcademyofSciences,Beijing100049,China;3.Departmentof
AppliedChemistry,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100094,China)
犃犫狊狋狉犪犮狋:Theflavonoidcompositionoffive犎狅狊狋犪speciesand85犎狅狊狋犪cultivarswasinvestigatedbyHPLC
DADforthefirsttimetoexpandtheapplicationsof犎狅狊狋犪.Qualitativeandquantitativeanalysismethodsfor
totalflavonoidsinflowersof犎狅狊狋犪wereusedasabasisforthequalitycontrolof犎狅狊狋犪.Acombinationof
powerfultools(HPLCDADandHPLCMSn),wereusedtocharacterizeseventeenkindsofflavonoidincluding
kaempferol3,7diOglucoside,kaempferol3Oglucosyl7Orutinose,isorhamnetin3,4diOglucoside,
kaempferol3Oquinoylglucoside,kaempferol3Osinapoylglucoside,kaempferol3Oascorbicoylglucoside,
kaempferol7Oneohesperidoside,kaempferol3,7diOhexoside,kaempferol3Oglucosyl7Orhamnoside,
luteolin7Oneohesperidoside,quercetin3Oglucoside,quercetin3Oglucuronide,kaempferol3Orobinobio
side,kaempferol3Oglucoside,kaempferol3Oglucuronide,kaempferol3Opentose,andkaempferol7O
glucoside.Theflavonoidcontentsof90kindsof犎狅狊狋犪flowerswerecomparedandthehighvaluespecieswere
selected.
犓犲狔狑狅狉犱狊:犎狅狊狋犪;flavonoid;HPLCDAD;HPLCESIMSn
442 ACTAPRATACULTURAESINICA(2013) Vol.22,No.1