全 文 ：书犇犗犐：１０．１１６８６／犮狔狓犫２０１５０１０８ 犺狋狋狆：／／犮狔狓犫．犾狕狌．犲犱狌．犮狀
张宵娟，邓光华，喻苏琴，康文娟，顾红梅，邹娜．氮对千日红试管苗生长和开花诱导的影响．草业学报，２０１５，２４（１）：５６６３．
ＺｈａｎｇＸＪ，ＤｅｎｇＧＨ，ＹｕＳＱ，ＫａｎｇＷＪ，ＧｕＨＭ，ＺｏｕＮ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｎｉｔｒｏｇｅｎｏｎｇｒｏｗｔｈａｎｄｆｌｏｗｅｒｉｎｇｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｏｆ犌狅犿狆犺狉犲狀犪犵犾狅犫狅
狊犪．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１５，２４（１）：５６６３．
氮对千日红试管苗生长和开花诱导的影响
张宵娟，邓光华，喻苏琴，康文娟，顾红梅，邹娜
（江西农业大学园林与艺术学院，江西 南昌３３００４５）
摘要：本文以千日红组培苗为试验材料，研究培养基中氮形态及含量对千日红试管苗生长和开花诱导的影响。结
果表明，１）相对于铵态氮（ＮＨ４＋），硝态氮（ＮＯ３－）作为唯一氮源更有利于千日红试管苗生长和开花诱导，但千日
红在ＮＨ４＋和ＮＯ３－同时存在的培养基中表现最佳。２）在２０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋（ＮＯ３－）和５ｍｇ／ＬＰＰ３３３存在的条件
下，试管苗生长基本随着培养基中 ＮＯ３－（ＮＨ４＋）含量的增加而增加，并在含４０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－ ＋２０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＮＨ４＋（即ＭＳ培养基中氮含量）的培养基中株高达到最大值５．９１ｃｍ；而叶片数和开花率则随着培养基中ＮＨ４＋和
ＮＯ３－含量的增加呈现先增加后下降的趋势，并在２０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－ ＋５ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋培养基中达到最大值，分
别为１０．７片／株和３８．８９％。３）氮含量及形态配比结果表明，千日红试管苗开花率在培养基中氮总量为５
ｍｍｏｌ／Ｌ、ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１时达到最大值３９．９５％，而株高和叶片数在氮总量为３５ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＯ３－／ＮＨ４＋为
４／１时达到最大值８．５２ｃｍ和１３．３８片／株。千日红试管苗开花率与培养基中ＮＯ３－／ＮＨ４＋显著正相关，而与氮总
量及株高之间显著负相关。此外，培养基中氮含量及形态配比还显著影响无菌苗根系生长。
关键词：千日红；试管苗；氮（Ｎ）；生长；试管开花
犈犳犳犲犮狋狊狅犳狀犻狋狉狅犵犲狀狅狀犵狉狅狑狋犺犪狀犱犳犾狅狑犲狉犻狀犵狅犳狋犲狊狋狋狌犫犲狆犾犪狀狋犾犲狋狊狅犳犌狅犿狆犺狉犲狀犪
犵犾狅犫狅狊犪
ＺＨＡＮＧＸｉａｏｊｕａｎ，ＤＥＮＧＧｕａｎｇｈｕａ，ＹＵＳｕｑｉｎ，ＫＡＮＧＷｅｎｊｕａｎ，ＧＵＨｏｎｇｍｅｉ，ＺＯＵＮａ
犆狅犾犾犲犵犲狅犳犔犪狀犱狊犮犪狆犲犪狀犱犃狉狋，犑犻犪狀犵狓犻犃犵狉犻犮狌犾狋狌狉犪犾犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犖犪狀犮犺犪狀犵３３００４５，犆犺犻狀犪
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｎｉｔｒｏｇｅｎｆｏｒｍａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈａｎｄｆｌｏｗｅｒｉｎｇｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａ
ｎｔｌｅｔｓｏｆ犌狅犿狆犺狉犲狀犪犵犾狅犫狅狊犪ｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ：１）Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｍｍｏｎｉｕｍｎｉｔｒｏ
ｇｅｎ（ＮＨ４＋），ｎｉｔｒａｔｅｎｉｔｒｏｇｅｎ（ＮＯ３－）ａｓｔｈｅｓｏｌｅｎｉｔｒｏｇｅｎｓｏｕｒｃｅｗａｓｍｏｒｅｆａｖｏｒａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｐｒｏｍｏｔｉｏｎｏｆ
ｇｒｏｗｔｈａｎｄｆｌｏｗｅｒｉｎｇｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｆｆｅｃｔｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｗｉｔｈｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｂｏｔｈＮＨ４＋ａｎｄ
ＮＯ３－．２）Ｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆ２０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋（ＮＯ３－）ａｎｄ５ｍｇ／ＬＰＰ３３３，ｔｈｅｇｒｏｗｔｈｒａｔｅｗａｓｇｒａｄｕａｌｙｉｎ
ｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆＮＯ３－（ＮＨ４＋）ｌｅｖｅｌ，ａｎｄｔｈｅｐｌａｎｔｌｅｔｈｅｉｇｈｔｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｍａｘｉｍｕｍｏｆ５．９１ｃｍｗｉｔｈ
４０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－ ＋ ２０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋（ｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆＭＳｍｅｄｉｕｍ）ｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍ；ｗｈｅｒｅａｓｔｈｅｌｅａｆ
ｎｕｍｂｅｒａｎｄｆｌｏｗｅｒｉｎｇｒａｔｅｉｎｃｒｅａｓｅｄａｎｄｔｈｅｎｄｅｃｒｅａｓｅｄａｓｔｏｔａｌｎｉｔｒｏｇｅｎｌｅｖｅｌｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｉｒ
ｍａｘｉｍｕｍｏｆ１０．７ｐｅｒｓｅｅｄｌｉｎｇａｎｄ３８．８９％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｉｔｈ２０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－＋５ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋（ｎｉｔｒｏ
ｇｅｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆＭＳｍｅｄｉｕｍ）ｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍ．３）Ｗｉｔｈｒｅｓｐｅｃｔｔｏｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｎｉｔｒｏｇｅｎｏｎｐｌａｎｔｆｏｒｍ，ｔｈｅｍａｘｉ
第２４卷 第１期
Ｖｏｌ．２４，Ｎｏ．１
草 业 学 报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
２０１５年１月
Ｊａｎ，２０１５
收稿日期：２０１４０６１９；改回日期：２０１４０８２６
基金项目：江西省教育厅青年基金项目（ＧＪＪ１３２５３），国家自然科学基金项目（３１３００５２１）和高等学校博士学科点专项科研基金（２０１３３６０３１２０００１）
资助。
作者简介：张宵娟（１９９０），女，江西樟树人，在读硕士。Ｅｍａｉｌ：ａ９００８ｚ４４８４８１ｑ＠１２６．ｃｏｍ
通讯作者Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．Ｅｍａｉｌ：ｎｚｏｕｙｙ＠１２６．ｃｏｍ
ｍｕｍｆｌｏｗｅｒｉｎｇｒａｔｅｏｆ３９．９５％ｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｗｉｔｈａｔｏｔａｌｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ５ｍｍｏｌ／Ｌｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍａｎｄ
ｗｉｔｈｔｈｅｒａｔｉｏｏｆａｍｍｏｎｉｕｍｔｏｎｉｔｒａｔｅ４∶１；ｉｎｃｏｎｔｒａｓｔ，ｔｈｅｍａｘｉｍｕｍｐｌａｎｔｌｅｔｈｅｉｇｈｔｏｆ８．５２ｃｍａｎｄｌｅａｆ
ｎｕｍｂｅｒｏｆ１３．３８ｐｅｒｓｅｅｄｌｉｎｇｗａｓａｃｈｉｅｖｅｄｗｉｔｈａｔｏｔａｌｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ３５ｍｍｏｌ／Ｌｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍａｎｄ
ａ４∶１ｒａｔｉｏｏｆａｍｍｏｎｉｕｍｔｏｎｉｔｒａｔｅ．Ｔｈｅｆｌｏｗｅｒｉｎｇｒａｔｅｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅ
ｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｎｉｔｒａｔｅｎｉｔｒｏｇｅｎｔｏａｍｍｏｎｉｕｍｎｉｔｒｏｇｅｎ，ｂｕｔｎｅｇａｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｔｏｔａｌｎｉｔｒｏｇｅｎ
ｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｐｌａｎｔｈｅｉｇｈｔ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｔｈｅｒａｔｉｏｏｆｎｉｔｒａｔｅｎｉｔｒｏｇｅｎｔｏａｍｍｏｎｉｕｍｎｉｔｒｏ
ｇｅｎｉｎｍｅｄｉｕｍａｌｓｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄｔｈｅｒｏｏｔｇｒｏｗｔｈｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：犌狅犿狆犺狉犲狀犪犵犾狅犫狅狊犪；ｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓ；ｎｉｔｒｏｇｅｎ；ｇｒｏｗｔｈ；ｉｎｖｉｔｒｏｆｌｏｗｅｒｉｎｇ
千日红（犌狅犿狆犺狉犲狀犪犵犾狅犫狅狊犪）又名火球花、千年红等，是苋科千日红属一年生草本花卉，株高２０～６０ｃｍ，全
株密被细毛，叶对生。花色有深红、紫红、粉红或白色等，自然条件下３－４月播种，６－１１月开花。其花色艳丽具
光泽，且花开百日而不败，象征着天长地久、永恒的爱，因而深受人们喜爱。因植株低矮，花繁色浓，千日红不仅是
配置花坛、种植钵和花镜的好材料；同时又因其花期长，花色与花形经久不变，所以又是作鲜切花的良好材料；而
且，其花序及全草皆可入药，具有清肝、散结、止咳和定喘之效［１３］。近年来，从千日红提取天然食用色素和花色苷
受到人们普遍关注［４７］。此外，千日红还可作为花茶饮用。由此可见，千日红是天生的干燥花，同时也是风味绝佳
的花草茶，具有较高的观赏、药用和食用价值。试管开花是指通过组织培养的方法，使植物的开花过程在培养容
器中完成。由于试管开花可以不受季节限制地周年诱导，不仅可以达到快繁的目的，还缩短了开花时间，这对千
日红的生产和育种都具有重要意义［８］。此外，试管花具有一定的观赏价值，也可作为旅游商品进行开发。近年
来，关于组培苗试管开花的报道比较常见，而有关千日红试管开花的报道则较少［９］。
氮素作为植物生长所必须的大量营养元素之一，是花和花序发育所必需的，并在一定范围内氮素能增加花
量［１０］。而就氮营养对试管开花诱导而言，有报道认为减少 ＭＳ培养基中氮含量有利于促进花芽形成，高水平的
氮则抑制开花；在氮总量不变的情况下，试管苗成花率一般随着ＮＯ３－／ＮＨ４＋的增大而升高［１１１２］。作为一个整
体，植株的营养生长对花芽分化和整个试管花的观赏效果而言都具有重要作用，而前人在进行氮诱导试管开花过
程中对无菌苗生长的影响尚未关注。本实验室成员在千日红组织培养过程中发现改变 ＭＳ培养基中 ＮＨ４＋／
ＮＯ３－配比可诱导千日红无菌苗在试管内开花，并且在不同氮形态的培养基中植株生长存在明显差异［１３］。因此，
本文在前期研究的基础上，根据 ＭＳ培养基氮含量进一步深入研究不同氮水平及形态配比对千日红生长和试管
开花诱导的影响，以期为千日红生产中的花期调控，改善花卉品质和试管花卉生产提供一定的参考，并为进一步
深入研究氮对千日红试管开花诱导的生理机制奠定基础。
１ 材料与方法
１．１ 材料
千日红无菌试管苗。
１．２ 方法
当组培苗在生根培养基１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ＋３０ｇ／Ｌ蔗糖＋０．５ｇ／Ｌ活性炭中长到２ｃｍ以上时，取顶
端２ｃｍ（含４片叶）接种到各处理培养基（ＭＳ培养基大量元素中ＮＨ４ＮＯ３ 换为ＮＨ４Ｃｌ以提供单一的铵态氮，其
他组成成分不变，但ＫＮＯ３，ＮＨ４Ｃｌ需要单独配置分别装于不同的试剂瓶中）进行如下试验：
１．２．１ 不同ＮＨ４＋水平 不同浓度ＮＨ４＋（０，１，５，１０，２０和３０ｍｍｏｌ／Ｌ）由ＮＨ４Ｃｌ提供，各处理培养基另含
２０ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ３ 以提供ＮＯ３－。各处理培养基均添加５ｍｇ／Ｌ多效唑（ＰＰ３３３），以控制苗高生长。
１．２．２ 不同ＮＯ３－水平 不同浓度ＮＯ３－（０，５，１０，２０，４０和６０ｍｍｏｌ／Ｌ）由ＫＮＯ３ 提供，各处理培养基另含
２０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ以提供ＮＨ４＋。各处理培养基均添加５ｍｇ／ＬＰＰ３３３，以控制苗高生长。
１．２．３ 不同氮含量 不同浓度氮（０，５，１５，２５，３５和４５ｍｍｏｌ／Ｌ）分别由ＫＮＯ３ 和ＮＨ４Ｃｌ提供，使处理中各培
养基ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１。
７５第１期 张宵娟 等：氮对千日红试管苗生长和开花诱导的影响
１．２．４ 不同硝铵配比 不同 ＮＯ３－／ＮＨ４＋配比（０／５，１／４，２／３，３／２，４／１和５／０）分别由 ＫＮＯ３ 和 ＮＨ４Ｃｌ提
供，各培养基中总氮浓度均为２５ｍｍｏｌ／Ｌ。
１．３ 培养条件
培养室温度（２５±１）℃、光照时间１２ｈ／ｄ，光照强度为２０００ｌｘ。开花处理每培养基中添加７ｍｇ／Ｌ亚精胺。
如无特殊说明各培养基均添加琼脂６．５ｇ／Ｌ，蔗糖４０ｇ／Ｌ，ｐＨ５．８，１２１℃高压灭菌２０ｍｉｎ。
１．４ 数据分析
在接种之后的第６０天进行苗高和叶片数的测量并统计开花率。苗高用直尺测量，叶片数为植株由底端至顶
端的叶片总数，开花率＝开花无菌苗数／接种无菌苗总数×１００％。试验于２０１３年９月至２０１４年５月之间进行，
每处理分别接种２０～３０个外植体，各试验至少设２次重复。应用Ｅｘｃｅｌ２００７进行数据处理，数据的统计分析采
用ＳＰＳＳ１３．０，以犘＜０．０５为差异显著；采用ＬＳＤ法进行多重比较。
２ 结果与分析
图１ 氮水平对千日红试管苗生长的影响
犉犻犵．１ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳狀犻狋狉狅犵犲狀狅狀犵狉狅狑狋犺狅犳狋犲狊狋狋狌犫犲
狆犾犪狀狋犾犲狋狊狅犳犌．犵犾狅犫狅狊犪
Ａ：不同ＮＨ４＋（从左到右，０，１，５，１０，２０，３０ｍｍｏｌ／Ｌ）下千日红试管苗
的生长；Ｂ：不同ＮＯ３－（从左到右，０，５，１０，２０，４０，６０ｍｍｏｌ／Ｌ）下千日红试
管苗的生长；Ｃ：不同氮含量（从左到右，０，５，１５，２５，３５，４５ｍｍｏｌ／Ｌ）下千
日红试管苗的生长；Ｄ：不同 ＮＯ３－／ＮＨ４＋（从左到右，０／５，１／４，２／３，３／２，
４／１，５／０）下千日红试管苗的生长。标尺最大刻度为１５ｃｍ。Ａ：Ｌｅｖｅｌｓｏｆ
ＮＨ４＋（０，１，５，１０，２０，３０ｍｍｏｌ／Ｌｆｒｏｍｌｅｆｔｔｏｒｉｇｈｔ）ｗｉｔｈ２０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＮＯ３－ｏｎｇｒｏｗｔｈｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｏｆ犌．犵犾狅犫狅狊犪；Ｂ：ＬｅｖｅｌｓｏｆＮＯ３－
（０，５，１０，２０，４０，６０ｍｍｏｌ／Ｌｆｒｏｍｌｅｆｔｔｏｒｉｇｈｔ）ｗｉｔｈ２０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋
ｏｎｇｒｏｗｔｈｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｏｆ犌．犵犾狅犫狅狊犪；Ｃ：ＬｅｖｅｌｓｏｆＮ（０，５，１５，
２５，３５，４５ ｍｍｏｌ／Ｌｆｒｏｍｌｅｆｔｔｏｒｉｇｈｔ）ｗｉｔｈ ＮＯ３－／ＮＨ４＋ ＝４／１ｏｎ
ｇｒｏｗｔｈｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｏｆ犌．犵犾狅犫狅狊犪；Ｄ：ＬｅｖｅｌｓｏｆＮＯ３－／ＮＨ４＋
（０／５，１／４，２／３，３／２，４／１，５／０ｆｒｏｍｌｅｆｔｔｏｒｉｇｈｔ）ｗｉｔｈｔｏｔａｌＮｏｆ２５
ｍｍｏｌ／Ｌｏｎｇｒｏｗｔｈｏｆｔｅｓｔｔｕｂｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｏｆ犌．犵犾狅犫狅狊犪．Ｔｈｅｂｉｇｇｅｓｔｓｃａｌｅ
ｏｆｔｈｅｒｕｌｅｒｉｓ１５ｃｍ．
２．１ 不同ＮＨ４＋水平对千日红试管苗生长及开花
诱导的影响
试验过程中发现，在２０ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ３ 存在条
件下，随着培养基中ＮＨ４＋浓度增加，千日红试管苗
叶色逐渐变深，叶片面积也在逐渐增大。各处理培
养基中的试管苗都有生根，但根系数量及长度随着
培养基中ＮＨ４＋浓度的增加呈现先增加后减少的趋
势，在含５～１０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋的培养基中的试管
苗根系质量较为理想（图１Ａ）。
定量分析结果表明（表１），在有２０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＫＮＯ３ 和５ｍｇ／ＬＰＰ３３３存在的条件下，苗高随着培
养基中ＮＨ４＋浓度的增加呈缓慢增加的趋势，并且
在３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋ 培养基中达到最大值４．３３
ｃｍ，分别比０和１ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋中的无菌苗提高
４５．３０％和５２．４６％；从叶片数来看，随着 ＮＨ４＋浓
度的增加试管苗叶片数量呈现先增加后下降的趋
势，在含５ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋的培养基中达到最大值
１０．７０片／株，分别比０和３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋培养基
中的试管苗提高２８．４５％和３４．０９％。开花率也是
随着ＮＨ４＋浓度的增加呈先增加后下降的趋势，在
含５ ｍｍｏｌ／Ｌ ＮＨ４＋ 的 培 养 基 中 达 到 最 大 值
３８．８９％，分别比０和３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋培养基中
的试管苗提高５２．１５％和５９９．４６％。
方差分析结果表明，含３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋中的
试管苗高与０，１，５和１０ｍｍｏｌ／Ｌ之间的差异均达
到显著水平；当ＮＨ４＋在０～３０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内变化时，试管苗平均叶片数在不同处理间的差异均未达到显著水
平。５ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋中的试管苗开花率除了与３０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋之间的差异达到显著水平外，其他各处理间开
花率差异均不显著。
２．２ 不同ＮＯ３－水平对千日红试管苗生长及开花诱导的影响
由图１Ｂ可以看出，在无ＮＯ３－或低ＮＯ３－各处理培养基中的千日红试管苗黄褐色、叶片数量和面积较小，长
８５ 草 业 学 报 第２４卷
势很差，但随着培养基中 ＮＯ３－浓度增加而逐渐加深，叶片数量和面积也在不断增大，植株生长健壮。除了无
ＮＯ３－培养基上的试管苗基本没有根系或部分植株有少量粗短无侧根及根毛的黄褐色根系外，其他各培养基中
的植株根系为白色、质量较好且数量及长度均随着ＮＯ３－浓度的增加而逐渐增多。
定量分析结果表明（表２），在有２０ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ和５ｍｇ／ＬＰＰ３３３存在的条件下，株高基本随着培养基中
ＮＯ３－增加而逐渐增大，在４０和６０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中分别达到５．９１和５．７３ｃｍ，比无ＮＯ３－培养基中的试管苗
提高９５．０５％和８９．１１％；植株叶片数也是随着ＮＯ３－浓度的增加而逐渐增加，在６０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中达到最大
值９．５０片／株，分别比０和５ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中的试管苗增加８３．７５％和４２．４３％。在无ＮＯ３－培养基中，千日红
试管苗开花率达到１０．６５％，但在其他各处理间，随着ＮＯ３－的添加，开花率呈现先增加后下降的趋势，并且在２０
ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中达最大值１６．１１％，６０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中的试管苗开花率为０。
表１ 不同犖犎４＋对千日红试管苗生长及开花诱导的影响
犜犪犫犾犲１ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳犖犎４＋狅狀犵狉狅狑狋犺犪狀犱
犳犾狅狑犲狉犻狀犵狅犳狋犲狊狋狋狌犫犲狆犾犪狀狋犾犲狋狊狅犳犌．犵犾狅犫狅狊犪
ＮＨ４＋浓度
ＮＨ４＋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
（ｍｍｏｌ／Ｌ）
株高
Ｈｅｉｇｈｔ
（ｃｍ）
叶片数
Ｌｅａｆｎｕｍｂｅｒｓ
（片／株Ｓｈｅｅｔ／ｐｌａｎｔ）
开花率
Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ
ｒａｔｅ（％）
０ ２．９８±０．３２ｂ ８．３３±１．３４ａ ２５．５６±４．８４ａｂ
１ ２．８４±０．１０ｂ ８．５７±０．８３ａ ３２．４１±１３．６４ａｂ
５ ３．３６±０．３０ｂ １０．７０±０．１９ａ ３８．８９±１４．７０ａ
１０ ３．４７±０．１１ｂ １０．１７±０．３８ａ２０．００±１０．１８ａｂ
２０ ３．５７±０．１０ａｂ １０．４４±１．１２ａ １５．７４±５．６３ａｂ
３０ ４．３３±０．４６ａ ７．９８±０．９２ａ ５．５６±３．２１ｂ
表２ 不同犖犗３－对千日红试管苗生长及开花诱导的影响
犜犪犫犾犲２ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳犖犗３－狅狀犵狉狅狑狋犺犪狀犱
犳犾狅狑犲狉犻狀犵狅犳狋犲狊狋狋狌犫犲狆犾犪狀狋犾犲狋狊狅犳犌．犵犾狅犫狅狊犪
ＮＯ３－浓度
ＮＯ３－ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
（ｍｍｏｌ／Ｌ）
株高
Ｈｅｉｇｈｔ
（ｃｍ）
叶片数
Ｌｅａｆｎｕｍｂｅｒｓ
（片／株Ｓｈｅｅｔ／ｐｌａｎｔ）
开花率
Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ
ｒａｔｅ（％）
０ ３．０３±０．３０ｃ ５．１７±０．４０ｃ １０．６５±５．８０ａｂ
５ ３．６９±０．２７ｂｃ ６．６７±０．４２ｂ ５．００±２．５５ａｂ
１０ ４．６５±０．３３ａｂ ６．８３±０．４０ｂ ９．８４±１．９３ａｂ
２０ ４．７３±０．５３ａｂ ８．３３±０．６７ａ １６．１１±８．６２ａ
４０ ５．９１±０．６７ａ ９．２０±０．５８ａ ７．７８±４．８４ａｂ
６０ ５．７３±０．６８ａ ９．５０±０．２２ａ ０．００ｂ
注：同列数据后不同小写字母表示处理间差异显著（犘＜０．０５）。下同。
Ｎｏｔｅ：Ｖａｌｕｅｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｉｎｅａｃｈｃｏｌｕｍｎｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｔ犘＜０．０５ｌｅｖｅｌ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
方差分析结果表明，４０和６０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中的试管苗株高间差异不显著，但分别与０和５ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－
中的试管苗株高间的差异达到显著水平。当培养基中ＮＯ３－在２０～６０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内变化，试管苗平均叶片数
在不同处理之间的差异未达到显著水平，但与含０～１０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中的试管苗叶片数差异达到显著水平。
２０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－中的试管苗开花率与６０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－之间的差异达到显著水平，其他各处理间的差异均未
达到显著水平。
上述不同ＮＨ４＋和ＮＯ３－的试验结果表明，在２０ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ３ 和５ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ存在的条件下，千日
红试管苗开花率达到最大值３８．８９％，那么到底是氮含量为２５ｍｍｏｌ／Ｌ还是ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１更有利于促进
千日红试管苗开花呢？为此，我们又进一步设计了不同氮含量但 ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１的培养基（表３）以及２５
ｍｍｏｌ／Ｌ氮条件下不同ＮＯ３－／ＮＨ４＋的培养基（表４），以筛选千日红试管苗最佳试管开花培养基配方，以及探讨
不同氮总量及ＮＯ３－／ＮＨ４＋对千日红试管苗生长及开花诱导的影响。
２．３ 不同氮含量对千日红试管苗生长及开花诱导的影响
表３结果表明，保持培养基中ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１不变，试管苗开花率随着氮总量的增加呈现先增加后下降
的趋势，在氮总量为５ｍｍｏｌ／Ｌ条件下开花率最高，达３９．９５％，比无氮条件下千日红试管苗开花率提高
９９．７５％；而在４５ｍｍｏｌ／Ｌ氮条件下开花率为０。苗高和叶片数也是随着培养基中氮总量的增加而呈现先增加
后减少的趋势，在３５ｍｍｏｌ／Ｌ氮条件下达到最大值，分别为８．５２ｃｍ和１３．３８片／株，分别比无氮培养基中相应
指标提高３５３．１９％和２５９．３０％。
方差分析结果表明，５ｍｍｏｌ／Ｌ氮中的试管苗开花率与２５，３５及４５ｍｍｏｌ／Ｌ氮之间的差异达到显著水平，而
９５第１期 张宵娟 等：氮对千日红试管苗生长和开花诱导的影响
其他各处理间千日红试管苗开花率的差异未达到显著水平。３５ｍｍｏｌ／Ｌ氮培养基中的试管苗株高及叶片数显
著大于０～１５ｍｍｏｌ／Ｌ培养基中的试管苗，而与２５和４５ｍｍｏｌ／Ｌ氮培养基中的试管苗差异不显著。
由图１Ｃ可以看出，除了无氮培养基上的植株没有根系形成外，其他各培养基中的植株根系数量及长度均随
着氮浓度的增加而逐渐增多，并在３５ｍｍｏｌ／Ｌ总氮培养基中达到最大值。
表３ 不同氮含量对千日红试管苗生长及开花诱导的影响
犜犪犫犾犲３ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳狀犻狋狉狅犵犲狀狅狀犵狉狅狑狋犺犪狀犱
犳犾狅狑犲狉犻狀犵狅犳狋犲狊狋狋狌犫犲狆犾犪狀狋犾犲狋狊狅犳犌．犵犾狅犫狅狊犪
Ｎ总量
Ｔｏｔａｌｎｉｔｒｏｇｅｎ
（ｍｍｏｌ／Ｌ）
开花率
Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇｒａｔｅ
（％）
株高
Ｈｅｉｇｈｔ
（ｃｍ）
叶片数
Ｌｅａｆｎｕｍｂｅｒｓ
（片／株Ｓｈｅｅｔ／ｐｌａｎｔ）
０ ２０．００±１０．１８ａｂ １．８８±０．０５ｃ ５．１６±０．２６ｃ
５ ３９．９５±１２．５９ａ ３．０７±０．４７ｃ ６．８３±０．４２ｃ
１５ ２０．３７±６．６８ａｂ ６．４２±０．５４ｂ １０．９４±０．２７ｂ
２５ ５．５５±２．７８ｂ ７．２０±１．０７ａｂ １１．６１±０．４１ａｂ
３５ ２．７８±２．７８ｂ ８．５２±０．３２ａ １３．３８±１．２３ａ
４５ ０．００ｂ ７．９４±０．５１ａｂ １１．６３±０．６５ａｂ
表４ 不同硝铵配比对千日红试管苗生长及开花诱导的影响
犜犪犫犾犲４ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳狉犪狋犻狅狀狅犳犖犗３－狋狅犖犎４＋狅狀犵狉狅狑狋犺犪狀犱
犳犾狅狑犲狉犻狀犵狅犳狋犲狊狋狋狌犫犲狆犾犪狀狋犾犲狋狊狅犳犌．犵犾狅犫狅狊犪
ＮＯ３－／
ＮＨ４＋
开花率
Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇｒａｔｅ
（％）
株高
Ｈｅｉｇｈｔ
（ｃｍ）
叶片数
Ｌｅａｆｎｕｍｂｅｒｓ
（片／株Ｓｈｅｅｔ／ｐｌａｎｔ）
０／５ ０．００ｂ ３．５０±０．０４ｃ ４．０２±０．０２ｄ
１／４ １１．５１±２．６０ａｂ ４．５６±０．０４ｃ ６．４０±０．６５ｃ
２／３ １６．６７±９．６２ａｂ ７．１１±０．６２ａｂ ９．７８±０．３０ａｂ
３／２ ２２．２２±７．３５ａ ７．９４±０．２１ａｂ １１．６４±１．４４ａ
４／１ ４．４４±４．４４ｂ ８．３８±０．４２ａ １１．９２±０．０５ａ
５／０ ７．７８±４．８４ａｂ ６．９０±０．６６ｂ ９．０４±０．８２ｂ
２．４ 不同硝铵配比对千日红试管苗生长及开花诱导的影响
表４结果表明，在保持培养基中氮总量为２５ｍｍｏｌ／Ｌ不变条件下，随着培养基中ＮＯ３－／ＮＨ４＋的增加开花
率呈现先增加后下降的趋势，在ＮＯ３－／ＮＨ４＋为０／５培养基中的试管苗开花率为０，在比值为３／２中达到最大值
２２．２２％，比比值为５／０的提高１８５．６０％。千日红试管苗株高和叶片数也是随培养基中ＮＯ３－／ＮＨ４＋的增加呈
现先增加后减少的趋势，在比值为４／１时达到最大值８．３８ｃｍ和１１．９２片／株，分别比比值为０／５和５／０培养基
中的株高增加１３９．４３％和２１．４４％，叶片数增多１９６．５２％和３１．８６％。
方差分析结果表明，ＮＯ３－／ＮＨ４＋为３／２培养基中的试管苗开花率与比值为０／５和４／１间的差异达到显著
水平，而其他各配方间的差异不显著。ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１的培养基中的试管苗株高和叶片数分别与比值为
０／５，１／４和５／０间的差异达到显著水平，而与２／３和３／２间的差异未达到显著水平。
由图１Ｄ可以看出，除了 ＮＯ３－／ＮＨ４＋ 为０／５中的植株几乎没有根系形成及生长外，在氮总量保持２５
ｍｍｏｌ／Ｌ不变的情况下，千日红试管苗生长量和根系数量及长度基本随着培养基中ＮＯ３－比例的增加呈现先增
加后下降的趋势，并在培养基中ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１时达到最大值。
２．５ 千日红试管苗生长及开花相关性分析
对千日红试管苗开花率、株高、叶片数、氮总量及ＮＯ３－／ＮＨ４＋之间的相关关系进行分析，结果表明，千日红
试管苗开花率与培养基中氮总量极显著负相关，其回归方程为犢＝－０．３６７犡＋２５．０５４，犚２＝０．２８２，犘＜０．０１；与
株高之间显著负相关，其回归方程为犢＝－２．７０９犡＋２７．８５７，犚２＝０．２２５，犘＜０．０５；与培养基中ＮＯ３－／ＮＨ４＋显
著正相关，其回归方程为犢＝１．１７８犡＋１０．５４４，犚２＝０．２７３，犘＜０．０５；千日红试管苗株高与叶片数极显著正相
关，其回归方程为犢＝０．６１４犡－０．４１４，犚２＝０．５４４，犘＜０．０１。此外，千日红试管苗株高、叶片数与培养基Ｎ总量
之间相关性不显著，与硝铵比之间的相关关系也未达到显著水平；千日红试管苗开花率与叶片数间相关关系不显
著。
３ 讨论
３．１ 氮（Ｎ）对千日红试管苗生长的诱导
本文研究结果表明，在无氮培养基中，千日红试管苗生长受到严重影响，表现为：培养２个月，苗高生长几乎
０６ 草 业 学 报 第２４卷
为０、下部叶片缺绿变黄，并逐步向上发展、叶面积较少且每植株平均新萌叶片数不超过２片。随培养基中氮总
量的增加，千日红试管苗株高、叶片的大小和数量基本呈增加的趋势，植株生长旺盛且健壮，叶色也变得更加浓绿
（表１～３；图１Ａ～Ｃ）。说明氮素作为高等植物所必需的大量营养元素之一，对植物生长有重要影响［１４］。
ＮＯ３－和ＮＨ４＋作为植物可吸收利用的主要无机氮形态，由于不同植物对氮吸收利用能力不同，植物在长期
进化过程中形成了对不同氮形态的偏向选择性，即在ＮＯ３－（或ＮＨ４＋）占优势的氮营养环境中，植物吸收氮的能
力、生理反应、生长速度较好，表现出明显的喜硝性（或喜铵性）［１４１７］。本研究中在ＮＯ３－（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）作为唯一
氮源时，无菌苗株高、叶片数和根系等可正常生长（图１Ａ）；而在ＮＨ４＋（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）为唯一氮源的培养基中试管
苗生长受到严重影响，表现为根系粗短或没有根系形成、叶面积变小、叶片数量少且黄化、甚至植株干枯死亡等
（图１Ｂ）。因此较不同氮形态而言，千日红试管苗生长偏好于硝态氮。
在２０ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－（ＮＨ４＋）存在条件下，随着培养基中ＮＨ４＋（ＮＯ３－）量的增加，千日红试管苗株高、叶片
的面积和数量基本呈增加的趋势，植株生长旺盛且健壮，叶色也变得更加浓绿、叶片变得宽厚（表１～２；图１Ａ～
Ｂ）。因此，说明像大多数植物一样，混合氮源比单独的ＮＯ３－（ＮＨ４＋）更有利于千日红试管苗生长（图１）。硝铵
增效在多种作物上都有报道，可能由于不同氮形态具有不同的吸收基因，并且不同氮形态对氮素代谢酶活性、光
合特性、其他矿质元素吸收及植物呼吸作用的影响不同，从而使混合氮源具有更好的氮吸收和利用效率，积累更
多的干物质［１６１９］。本文研究结果表明，试管苗高度和叶片数生长的最适 ＮＯ３－／ＮＨ４＋ 为４／１；氮总量为３５
ｍｍｏｌ／Ｌ（表３和４）。
根系是植物吸收氮的主要器官，根系的大小和构型是确保植物获取充足氮的重要因素，在一定程度上反映其
吸收能力的强弱［２０］。同时，植物根系的生长、形态以及根系在介质中的分布又受氮供应的影响最为明显［１９，２１］。
千日红试管苗在不同氮培养基中，根系生长差异显著：表现为在无氮或铵作为唯一氮源时，几乎没有根系形成或
根系生长量很小，但随着氮总量的增加，并且在硝态氮／铵态氮达到一定的比例时达到最大值（图１Ｂ～Ｄ）。因
此，将来在植物组织培养过程中，特别是在生根培养阶段，可通过改变培养基中氮含量或ＮＯ３－／ＮＨ４＋来代替植
物生长调节物质进行生根诱导。目前组培生根诱导过程中，经常使用大量元素减量的１／２ＭＳ或１／４ＭＳ作为生
根诱导基本培养基，也可能与减少培养基中氮含量特别是过高的ＮＨ４＋浓度有关。
３．２ 氮（Ｎ）对千日红试管苗开花诱导的影响
相关性分析结果表明，试管苗开花率与培养基中氮含量呈极显著负相关（犢＝－０．３６７犡＋２５．０５４，犚２＝
０．２８２，犘＜０．０１）。推测一方面可能是由于过多的氮，造成植物营养生长过于旺盛，株高和叶片数徒长，影响了生
殖生长而影响开花；试验过程中发现，千日红试管苗虽然在高氮培养基（４０ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ３＋２０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＮＨ４Ｃｌ）中也有少量开花，但花朵较小，且色淡，观赏效果不佳。另一方面，在培养基蔗糖含量不变的情况下，增加
氮含量会降低培养基中的Ｃ／Ｎ。Ｋｌｅｂｓ［２２］通过大量的试验证明，植物体内的营养状况（糖类和含氮化合物含量）
可以影响植物的成花过程：当Ｃ占优势时，Ｃ／Ｎ增高，促进植株开花结实；当Ｎ占优势时，Ｃ／Ｎ降低，则促进营养
生长，人为调节植物的Ｃ／Ｎ，可以控制植物营养生长和生殖生长［２２２３］。第三，氮含量的增加还会改变培养基中
氮∶磷∶钾之间的比例，一般而言，氮的比例高有利于营养生长但对花芽诱导及分化不利。如Ｋｏｓｔｅｎｙｕｋ等［２４］
研究表明，减少 ＭＳ培养基中氮的含量（１／１０Ｎ），增加磷含量（５倍磷），可使兰花（犆狔犿犫犻犱犻狌犿狀犻狏犲狅犿犪狉
犵犻狀犪狋狌犿）在试管内开花。
在２０和２５ｍｍｏｌ／ＬＮＯ３－为唯一氮源的培养基中，千日红试管苗开花率分别为２５．５６％和７．７８％；而在２０
和２５ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４＋为唯一氮源的培养基中，千日红试管苗开花率分别为１０．６５％和０％（表１，２和４），说明就
不同氮形态而言，ＮＯ３－较ＮＨ４＋更有利于试管苗开花。相关性分析结果也表明，千日红试管苗开花率与培养基
中ＮＯ３－／ＮＨ４＋显著正相关。ＮＯ３－更有利于千日红试管开花，其原因之一可能是千日红作为铵敏感植物，培养
基中过高浓度的铵可能对植株造成毒害，长势差而影响正常生长和开花。另一个方面，推测Ｎ作为营养信号可
调控开花相关基因的表达，而不同形态的 Ｎ对开花相关基因的诱导表达能力不同。如在拟南芥（犃狉犪犫犻犱狅狆狊犻狊
狋犺犪犾犻犪狀犪）上的研究结果表明，开花相关基因ＣＯ和ＳＯＣ１在 ＮＯ３－处理条件下的表达量明显高于 ＮＨ４＋处理
１６第１期 张宵娟 等：氮对千日红试管苗生长和开花诱导的影响
的［２５］。此外，在墨兰（犆狔犿犫犻犱犻狌犿狊犻狀犲狀狊犲）上的研究结果也表明，生长后期施１～１０ｍｍｏｌ／Ｌ硝态氮，有利于花芽
分化［２６］。
千日红试管开花率随着培养基中另外一种氮形态的添加或ＮＯ３－／ＮＨ４＋的提高而增加，并在ＮＯ３－／ＮＨ４＋
为４／１（氮总量为５ｍｍｏｌ／Ｌ）时达到最大值３９．９５％。同科植物鸡冠花（犆犲犾狅狊犻犪犮狉犻狊狋犪狋犪）试管开花对不同氮形态
的响应结果也表明，ＮＯ３－／ＮＨ４＋高时有利于鸡冠花试管开花，并在 ＭＳ中ＮＯ３－／ＮＨ４＋为５０∶１０时，鸡冠花试
管开花率最高［２７］。说明混合氮源比单一的ＮＯ３－或ＮＨ４＋更有利于千日红等苋科植物试管苗开花诱导。
试验过程中发现，２０ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ３ 和５ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ在有 ＰＰ３３３存在的条件下，开花率最高可达
３８．８９％（表１）；而在没有ＰＰ３３３存在的条件下，相同的培养基（氮总量为２５ｍｍｏｌ／Ｌ，２０ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ３ 和５
ｍｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ）和生长环境，千日红试管苗开花率分别为５．５５％和４．４４％（表３和表４）。究其原因，除了可能
的试验误差，主要是在试验中没有再添加ＰＰ３３３。ＰＰ３３３对千日红试管苗开花率的促进作用，一方面可能是由于其
抑制了植株的营养生长，相关性分析结果也表明千日红试管苗开花率与植株生长高度呈负相关（犘＜０．０５）。如
在表１中千日红无菌苗平均株高仅３．３６ｃｍ，而后者平均株高分别为７．２０和８．３８ｃｍ，这个可以说明千日红试管
苗必须进行矮化处理。另一方面，可能是ＰＰ３３３作为植物生长延缓剂，在植物体内抑制内源激素ＧＡ的生物合成，
提高可溶性糖、淀粉、全氮含量，增加Ｃ／Ｎ，从而提高成花率［２８］。
在培养基中不含氮时，千日红试管苗生长受到严重影响，但开花率可达２０％，说明植物试管开花也可能与生
长胁迫诱导有关［２９］。有研究表明，光照会促进千日红叶片中乙烯的释放［３０］，而乙烯被证明是与生长素诱导的菠
萝（犃狀犪狀犪狊犮狅犿狅狊狌狊）外植体花芽形成有关［３１］。因此，千日红试管开花是否与生长过程中组培瓶内日益增加的乙
烯有关，以及与内外源激素的关系值得进一步深入研究。
４ 结论
相对于ＮＨ４＋，ＮＯ３－更有利于千日红试管苗生长、根系形成和试管开花诱导，培养基中过高的ＮＨ４＋作为
唯一氮源会导致千日红ＮＨ４＋中毒；混合氮源对千日红生长最有利。在两种氮源共同存在的条件下，随着培养基
中氮总量增加，千日红试管苗株高和叶片数呈现增加的趋势，并在ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１、Ｎ总量为３５ｍｍｏｌ／Ｌ时
达最大值，分别为８．５２ｃｍ和１３．３８片／株。而试管开花率基本随着培养基中氮总量及试管苗高的增加而下降，
在ＮＯ３－／ＮＨ４＋为４／１、Ｎ总量为５ｍｍｏｌ／Ｌ培养基中的试管开花率最高。用ＰＰ３３３对千日红试管苗进行矮化处
理可提高试管开花率。试管苗根系也随着培养基中氮总量及ＮＯ３－／ＮＨ４＋的变化而变化，并在氮含量较高且硝
态氮／铵态氮较大的培养基中生长较好。
犚犲犳犲狉犲狀犮犲：
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３６第１期 张宵娟 等：氮对千日红试管苗生长和开花诱导的影响