全 文 ：林业科学研究摇 圆园员猿袁圆远渊缘冤院缘怨愿 远园圆云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员猿冤园缘鄄园缘怨愿鄄园缘
兰花炭疽病拮抗细菌 缘粤缘鄄猿菌株的
初步筛选和鉴定
曹晓璐员袁 刘慧娟圆袁 郭晓军圆袁 姚摇 娜员袁 李潞滨员鄢
渊员郾 中国林业科学研究院林业研究所袁林木遗传育种国家重点实验室袁北京 摇 员园园园怨员曰
圆郾 河北农业大学生命科学学院袁河北 保定摇 园苑员园园员冤
收稿日期院 圆园员员鄄园愿鄄员愿
基金项目院 国家林业局 怨源愿 项目渊圆园员员鄄源鄄苑员冤曰野十二五冶科技支撑计划中国特色花卉种业关键技术研究渊圆园员圆月粤阅园员月园苑冤
作者简介院 曹晓璐袁在读博士生援主要研究方向院园林植物与观赏园艺援 耘鄄皂葬蚤造院 澡藻造造燥糟葬燥曾蚤葬燥造怎岳 员圆远援 糟燥皂援
鄢通讯作者院博士袁研究员援主要研究方向院园林植物与观赏园艺援电话院 园员园 原 远圆愿愿愿远愿苑 耘鄄皂葬蚤造院 造蚤造怎遭蚤灶岳 员圆远援 糟燥皂援
摘要院从毛乌素沙地采集的 员园 份土样中共分离到细菌 猿圆园 株袁将分离到的细菌菌株与兰花炭疽病病原菌胶胞炭疽
菌进行生长对峙试验遥 初筛获得拮抗菌 缘苑 株遥 复筛后得到筛选自毛乌素沙地土壤生物结皮样品的 缘粤缘鄄猿 对病原
菌具有较高的抑菌活性遥 对其进行形态特征观察和生理生化试验及 员远杂 则阅晕粤 序列相似性分析袁结果表明院菌株
缘粤缘鄄猿 与 月葬糟蚤造造怎泽 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽标准菌株渊悦砸鄄缘园圆袁粤再远园猿远缘愿冤的 员远杂 则阅晕粤序列相似度达 员园园豫 袁最终将菌株 缘粤缘鄄猿 鉴定
为 月葬糟蚤造造怎泽 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽遥
关键词院兰花病害曰拮抗细菌曰筛选曰鉴定
中图分类号院杂苑员愿援 愿 文献标识码院粤
孕则藻造蚤皂蚤灶葬则赠 陨泽燥造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 月葬糟贼藻则蚤葬造
杂贼则葬蚤灶 缘粤缘鄄猿 粤早葬蚤灶泽贼 悦燥皂皂燥灶 韵则糟澡蚤凿 阅蚤泽藻葬泽藻泽
悦粤韵 载蚤葬燥鄄造怎员袁 蕴陨哉 匀怎蚤鄄躁怎葬灶圆袁 郧哉韵 载蚤葬燥鄄躁怎灶圆袁 再粤韵 晕葬员袁 蕴陨 蕴怎鄄遭蚤灶员
渊员郾 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 杂贼葬贼藻 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 栽则藻藻 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 月则藻藻凿蚤灶早袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园怨员袁 悦澡蚤灶葬曰
圆郾 悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 匀藻遭藻蚤袁 月葬燥凿蚤灶早摇 园苑员园园员袁 匀藻遭藻蚤袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 猿圆园 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 员园 泽燥蚤造 泽葬皂责造藻泽 糟燥造造藻糟贼藻凿 葬贼 酝怎 哉泽 泽葬灶凿赠 造葬灶凿 燥枣 悦澡蚤灶葬援 粤枣贼藻则 早则燥憎蚤灶早
糟燥灶枣则燥灶贼葬贼蚤燥灶 贼藻泽贼 贼燥 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻袁 缘苑 泽贼则葬蚤灶泽 憎藻则藻 泽糟则藻藻灶藻凿 责则藻造蚤皂蚤灶葬则蚤造赠援 栽澡藻 泽贼则葬蚤灶 缘粤缘鄄猿 泽糟则藻藻灶藻凿
枣则燥皂 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟则怎泽贼泽 燥枣 酝怎 哉泽 泽葬灶凿赠 造葬灶凿 憎蚤贼澡 葬 则葬贼澡藻则 澡蚤早澡藻则 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬早葬蚤灶泽贼 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻 憎葬泽 燥遭鄄
贼葬蚤灶藻凿 葬枣贼藻则 泽藻糟燥灶凿葬则赠 泽糟则藻藻灶蚤灶早援 栽澡藻 泽贼则葬蚤灶 缘粤缘鄄猿 憎葬泽 枣怎则贼澡藻则 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭赠 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 糟怎造贼怎则葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽鄄
贼蚤糟泽袁 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼泽 葬灶凿 员远杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽援 月葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 则藻泽怎造贼泽袁 贼澡藻 泽贼则葬蚤灶
憎葬泽 枣蚤灶葬造造赠 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 葬 月葬糟蚤造造怎泽 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽援 员远杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 泽贼则葬蚤灶 缘粤缘鄄猿 则藻增藻葬造藻凿 贼澡葬贼 蚤贼 澡葬凿
员园园豫 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠 贼燥 月援 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽 悦砸鄄缘园圆援
运藻赠 憎燥则凿泽院 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻曰葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬曰泽糟则藻藻灶蚤灶早曰蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
兰科渊韵则糟澡蚤凿葬糟藻葬藻冤植物中观赏价值高的园艺品
种众多袁分布广泛袁作为切花栽培或庭园布置均倍受
欢迎咱员暂 遥 随着盆栽兰花混摆和野生兰花的驯化与推
广袁其栽培过程中常受到各种病原菌的危害咱圆暂 遥 兰
花受到病原菌侵染后袁不仅会大大降低观赏价值袁严
重时会引起不开花甚至枯死袁造成巨大的经济损
失咱猿暂 遥 胶胞炭疽菌 渊 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥泽燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽
渊孕藻灶扎援 冤 孕藻灶扎援 驭 杂葬糟糟援 冤是引起兰花炭疽病害的主
要病原菌袁此病危害墨兰渊悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 泽蚤灶藻灶泽藻 宰蚤造凿冤尧
寒兰渊悦援 噪葬灶则葬灶 酝葬噪援 冤尧建兰渊悦援 藻灶泽蚤枣燥造蚤怎皂 渊蕴蚤灶灶援 冤
第 缘 期 曹晓璐等院兰花炭疽病拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株的初步筛选和鉴定
杂憎援 冤尧大花蕙兰 渊 悦援 枣造燥则蚤遭怎灶凿怎皂 蕴蚤灶凿造援 冤尧蝴蝶兰
渊孕澡葬造葬藻灶燥责泽蚤泽 葬责澡则燥凿蚤贼藻 砸糟澡遭援 枣援 冤等多种兰科观赏植
物袁且终年均可发生遥 相比于化学防治袁兰花病害的
生物防治因其具有无污染尧不易诱导抗药性尧防效持
久等特点袁越来越受到人们的欢迎袁成为植物病害防
治的重要方法咱源 原 缘暂 袁其中袁获得高效拮抗细菌是生物
防治的基础咱远暂 袁为获得防病害高效活性物质提供基
因和物质资源遥
近年来袁随着微生物在抗生素尧酶尧酶抑制剂尧多
糖等生物活性物质方面的大量开发与应用袁获得新
型微生物天然活性物质的难度越来越大袁于是人们
把目光开始转向具有更大开发前景的特殊生境微生
物咱苑暂 遥 土壤生物结皮是由藻类尧地衣尧苔藓类等和土
壤中微生物以及相关的其它生物体通过菌丝体尧假
根和分泌物等与土壤表层颗粒胶结形成的十分复杂
的复合体袁是干旱半干旱荒漠生态系统组成和地表
景观的重要特征袁其特殊的生态环境对寻找新型微
生物和新型活性物质有极大的潜力遥 本研究从毛乌
素沙地生物结皮土壤样品中分离获得了较高活性的
兰花炭疽病病害的拮抗细菌袁并鉴定为 月葬糟蚤造造怎泽
增藻造藻扎藻灶泽蚤泽袁旨在对后期兰花病害的生物防治应用提供
物质资源遥
员摇 材料和方法
员援 员摇 试验菌株和培养基
供试病原菌院胶胞炭疽菌袁由中国林科院林业研
究所实验室保存遥
拮抗菌筛选土壤样品取自内蒙古毛乌素沙地遥
晕粤尧晕月和 孕阅粤 培养基的配制方法详见叶微生
物学实验技术曳 咱愿暂 遥 生理生化鉴定培养基制备方法
及试剂种类见叶常见细菌系统鉴定手册曳 咱怨暂 遥 复筛
发酵培养基院蔗糖 缘园 早袁牛肉膏 缘园 早袁酝早杂韵源窑匀圆韵园援 缘 早袁酝早杂韵源窑苑匀圆韵 园援 圆 早袁蒸馏水 员 园园园 皂蕴袁责匀 值苑援 缘遥
员援 圆摇 菌株分离纯化与筛选
员援 圆援 员摇 细菌的分离纯化摇 土样中菌株的分离具体
方法参见叶微生物学实验技术曳 咱愿暂 遥 菌株编号培养
后置于 源 益冰箱保存备用袁同时采用平板划线法检
测每株菌的纯度遥
员援 圆援 圆摇 病原菌混菌平板的制备摇 向培养 员园 凿 左右
的病原菌斜面加 缘援 园 皂蕴无菌水袁用接种环轻轻刮取
斜面上的孢子袁摇匀袁形成孢子悬液曰再将孢子悬液
加入融化后冷却到 缘园 益左右的 孕阅粤 培养基中袁迅
速摇匀袁倒平板袁凝固待用遥
员援 圆援 猿摇 拮抗细菌的初筛和复筛摇 取制备好的病原
菌混菌平板袁用接种环从分离到的细菌斜面上挑取
少许菌体间隔划十字法在 孕阅粤平板上袁圆愿 益培养 猿
凿袁记录有抑菌圈的拮抗菌株编号遥
将初筛获得的拮抗细菌活化后接种于装有 缘园
皂蕴发酵培养基的 圆缘园 皂蕴 三角瓶中袁猿园 益尧员愿园 则窑
皂蚤灶 原员摇床振荡培养 源愿 澡遥 培养液离心渊员园 园园园 则窑
皂蚤灶 原员袁源 益冤袁上清液用 园援 圆 滋皂 微孔滤膜过滤遥 在
含病原菌的 孕阅粤平板渊含终浓度为 园援 圆缘 滋早窑皂蕴 原员
的链霉素冤上用直径 猿 皂皂 的打孔器选择合适的间
距打孔袁并取 愿园 滋蕴 已过滤除菌的拮抗菌株发酵液
注入小孔内遥 初筛所得的每株拮抗菌 猿 个平行袁静
置 猿园 皂蚤灶后袁于 圆愿 益恒温箱培养 猿 凿袁测量抑菌圈直
径并记录试验结果袁挑选出抑菌圈大且清晰的菌株
进行鉴定遥
员援 猿摇 拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 的鉴定
员援 猿援 员摇 形态鉴定及生理生化鉴定 摇 采用稀释涂平
板法将适当浓度的 缘粤缘鄄猿 菌株菌悬液涂布在 晕粤 平
板上袁静置 猿园 皂蚤灶袁猿苑 益倒置培养 圆源 澡袁观察菌落形
态特征袁并从斜面上挑取少量 缘粤缘鄄猿 菌体进行革兰
氏染色和芽孢染色袁染色方法参照叶常见细菌系统鉴
定手册曳袁显微镜下观察其菌体和芽孢形态遥
根据叶伯杰细菌鉴定手册曳及叶常见细菌鉴定手
册曳中相应属尧种鉴定有关的内容袁选取相应的生理
生化试验对菌株 缘粤缘鄄猿 进行鉴定咱怨 原 员园暂 遥
员援 猿援 圆摇 员远杂 则阅晕粤鉴定摇 采用 悦栽粤月 法咱员员暂提取细菌
的总 阅晕粤袁员豫琼脂糖电泳检测 阅晕粤 质量遥 引物为
通用引物咱员圆暂 袁正向引物为 圆苑云院缘爷鄄粤郧粤郧栽栽栽郧粤栽悦鄄
悦栽郧郧悦栽悦粤郧鄄猿爷袁反向引物为 员源怨缘砸院缘爷鄄悦栽粤悦郧郧悦鄄
栽粤悦悦栽栽郧栽栽粤悦郧粤鄄猿爷遥 分别位于 员远杂 则阅晕粤 的 愿
圆苑 和 员 源怨缘 员 缘员源 位的碱基片段渊以 耘泽糟澡藻则蚤糟澡蚤葬 糟燥鄄
造蚤的 员远杂 则阅晕粤碱基位置为准冤遥
孕悦砸反应体系院阅晕粤 渊苑园 灶早窑滋蕴 原员冤模板 圆 滋蕴袁
凿晕栽孕 酝蚤曾贼怎则藻 渊圆援 缘 皂皂燥造窑蕴 原员 冤 圆援 缘 滋蕴袁圆苑云 渊圆园
滋皂燥造窑蕴 原员 冤 员援 缘 滋蕴袁员源怨圆砸 渊圆园 滋皂燥造窑蕴 原员 冤 员援 缘
滋蕴袁员园 伊 耘曾栽葬择 月怎枣枣藻则 渊含 酝早圆 垣 冤 缘 滋蕴袁耘曾栽葬择阅晕粤
聚合酶 园援 圆 滋蕴袁补足 凿凿匀圆韵到 缘园 滋蕴遥孕悦砸条件院怨源 益预变性 猿 皂蚤灶曰然后 怨源 益变性 员
皂蚤灶袁缘缘 益退火 员 皂蚤灶袁苑圆 益延伸 猿 皂蚤灶袁共 猿园 个循
环曰最后 苑圆 益延伸 缘 皂蚤灶遥 孕悦砸 产物经试剂盒纯化
后袁送上海生工生物工程技术服务有限公司测序遥
将所测得的 员远杂 则阅晕粤 序列用 月蕴粤杂栽 软件与
怨怨缘
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
郧藻灶月葬灶噪数据库进行相似性分析袁并与 郧藻灶月葬灶噪 中
的相近序列在 悦造怎泽贼葬造 载 渊员援 愿冤程序包中进行多重序
列匹配排列渊酝怎造贼蚤责造藻 葬造蚤早灶皂藻灶贼泽冤分析袁最后形成一
个多重序列匹配排列阵袁用 晕藻蚤早澡遭燥则鄄允燥蚤灶蚤灶早 法构建
系统发育树咱员猿暂 遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 拮抗细菌的分离筛选
从样品中共分离纯化得到 猿圆园 个菌株遥 将分离
到的细菌菌株与胶胞炭疽菌进行生长对峙试验袁得
到拮抗菌 缘苑 株遥 对活性较高的 员圆 株拮抗菌进行复
筛袁结果见表 员袁其中袁缘粤缘鄄猿 对病原菌的抑菌圈直径
最大袁达到 圆圆 皂皂遥
表 员摇 员圆 株拮抗菌抑菌圈直径的大小
菌株 抑菌圈直径 辕 糟皂 菌株 胶胞炭疽菌圈直径 辕 糟皂
缘粤缘鄄猿 圆援 圆员 依 园援 园圆 载粤猿鄄员猿 员援 圆员 依 园援 园员
粤圆鄄员苑 员援 苑猿 依 园援 园源 载粤猿鄄员源 圆援 园猿 依 园援 园缘
耘粤员鄄员愿 圆援 员圆 依 园援 园远 粤缘鄄员圆 园援 愿圆 依 园援 园圆
粤圆鄄员怨 员援 远缘 依 园援 园员 粤缘鄄员苑 员援 源猿 依 园援 园缘
载粤圆鄄远 圆援 园园 依 园援 园源 粤缘鄄缘 员援 愿圆 依 园援 园远
载粤圆鄄怨 园援 怨员 依 园援 园猿 粤缘鄄源 园援 怨圆 依 园援 园员
圆援 圆摇 拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株的鉴定
圆援 圆援 员摇 菌落及菌体形态摇 由图 员 可见院菌株 缘粤缘鄄猿
在 晕粤平板上 猿苑 益培养 圆源 澡后的菌落形态近圆形袁
白色不透明袁边缘不整齐且粘稠湿润袁表面光滑袁不
产生色素遥 挑取单菌落染色后在显微镜下观察
缘粤缘鄄猿 菌体呈长杆状袁菌体革兰氏染色阳性袁染色均
匀袁大小为渊园援 苑 园援 愿冤滋皂 伊 渊圆援 园 圆援 缘冤滋皂袁芽孢
呈椭圆形渊图 圆冤遥
圆援 圆援 圆摇 生理生化试验结果摇 拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株
的生理生化特性见表 圆遥 将 缘粤缘鄄猿 菌株的生理生化
特性与叶常见细菌系统鉴定手册曳中相应的属尧种进
行对照袁生理生化试验表明院此菌株与芽孢杆菌的相
同率最高袁因此袁初步鉴定属于芽孢杆菌属遥
圆援 圆援 猿摇 员远杂 则阅晕粤 全序列分析摇 将拮抗菌株 缘粤缘鄄猿
的 员远杂 则阅晕粤 序列与 郧藻灶藻月葬灶噪 中已注册的 员远杂 则阅鄄
晕粤序列用 月造葬泽贼程序进行序列相似性比较分析遥 取
数据库中与菌株 缘粤缘鄄猿 相似性较高的 怨 株标准菌株
及 员 株外源菌株构建系统发育树袁结果见表 猿 和图
员遥 缘粤缘鄄猿 与枯草芽孢菌属的 远 种菌相似度都大于
怨怨豫 袁但是与 月葬糟蚤造造怎泽 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽相似度达到 员园园豫 遥
综合以上拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株的形态特征和生
理生化特性鉴定的结果袁对照叶伯杰氏细菌鉴定手
图 员摇 菌株 缘粤缘鄄猿 的菌落形态
图 圆摇 菌株 缘粤缘鄄猿 的芽孢形态
表 圆摇 拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株的生理生化特征
试验 试验结果 试验 试验结果
厌氧试验 垣 运动性试验 垣
柠檬酸盐试验 垣 硝酸盐还原试验 垣
淀粉水解试验 垣 责匀 缘援 苑 营养肉汤试验 垣
吲哚试验 垣 明胶液化试验 垣
阅鄄葡萄糖产酸试验 垣 纤维素酶试验 原
过氧化氢产气试验 垣 卵磷脂酶试验 垣
阅鄄甘露醇产酸试验 垣 接触酶试验 垣
酪素水解试验 垣 酪氨酸水解试验 垣
脲酶试验 垣 圆豫耐盐性试验 垣
苯丙氨酸脱氨酶试验 垣 缘豫耐盐性试验 垣
硫化氢产气 原 氨基酸脱羧酶试验 原
丙二酸盐试验 原 甲基红试验 原
灾鄄孕试验 垣 灾鄄孕培养终产物 责匀 约远
摇 摇 注院野 垣 冶表示阳性反应袁野 原 冶为阴性反应遥
册曳和叶常见细菌系统鉴定手册曳袁结合分子鉴定结
果袁缘粤缘鄄猿 菌株鉴定为 月葬糟蚤造造怎泽 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽遥
园园远
第 缘 期 曹晓璐等院兰花炭疽病拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株的初步筛选和鉴定
表 猿摇 拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株与几种标准菌株的相似性比较
序列号 种名 菌种号摇 摇 相似性 辕 豫
耘云源猿猿源园远 解淀粉芽孢杆菌 渊月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽冤 月悦砸悦 员员远园员 怨怨援 苑员
粤允圆苑远猿缘员 枯草芽胞杆菌 渊月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽冤 阅杂酝 员园 怨怨援 苑愿
粤再远园猿远缘愿 月葬糟蚤造造怎泽 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽鄢 悦砸鄄缘园圆 员园园援 园园
悦孕园园园园园圆 地衣形芽孢杆菌渊月葬糟蚤造造怎泽 造蚤糟澡藻灶蚤枣燥则皂蚤泽冤 粤栽悦悦 员源缘愿园 怨苑援 苑愿
阅匝怨怨猿远苑员 月葬糟蚤造造怎泽 葬曾葬则择怎蚤藻灶泽蚤泽鄢 蕴酝郧 圆圆源苑远 怨怨援 缘远
粤月猿远猿苑猿缘 莫海威芽孢杆菌渊月葬糟蚤造造怎泽 皂燥躁葬增藻灶泽蚤泽冤 晕月砸悦 员缘苑员愿 怨怨援 缘远
粤月猿远猿苑猿员 萎缩芽孢杆菌渊月葬糟蚤造造怎泽 葬贼则燥责澡葬藻怎泽冤 晕月砸悦 员缘缘猿怨 怨怨援 愿缘
阅匝怨怨猿远苑猿 月葬糟蚤造造怎泽 皂葬造葬糟蚤贼藻灶泽蚤泽鄢 蕴酝郧 圆圆源苑苑 怨怨援 缘远
粤允愿猿员愿源猿 空气芽孢杆菌渊月葬糟蚤造造怎泽 葬藻则蚤怎泽冤 圆源运 怨苑援 圆缘
粤云猿园圆员员愿 索诺拉沙漠芽孢杆菌 渊月葬糟蚤造造怎泽 泽燥灶燥则藻灶泽蚤泽冤 晕砸砸蕴 月鄄圆猿员缘源 怨苑援 员愿
粤允愿猿员愿源圆 高地芽胞杆菌渊月葬糟蚤造造怎泽 葬造贼蚤贼怎凿蚤灶蚤泽冤 源员运云圆遭 怨远援 愿愿
粤允源怨远愿园苑 木聚糖双芽孢杆菌渊粤皂责澡蚤遭葬糟蚤造造怎泽 曾赠造葬灶怎泽冤 阅杂酝 远远圆远 愿苑援 苑源
摇 摇 注院野鄢冶所标注的菌株为 圆园园缘 年新发现的种袁其中文名字尚未在文献中报道过遥
图 猿摇 拮抗细菌 缘粤缘鄄猿 菌株的 员远杂 则阅晕粤序列系统发育树
猿摇 结论与讨论
本研究从自然界土壤样品中分离筛选到兰花炭
疽病的 缘苑 株拮抗菌袁其中袁有 苑 株拮抗菌活性较高袁
对病原菌的抑菌圈直径均可达 员远 皂皂袁活性最高的
缘粤缘鄄猿 抑菌圈直径超过 圆园 皂皂袁这些具有高效生防活
性的野生菌株为兰花病害的生物防治研究以及活性
物质的获得提供了材料基础遥 对 缘粤缘鄄猿 进行生理生
化试验以及 员远杂 则阅晕粤同源性分析后袁确定该菌株为
月葬糟蚤造造怎泽 增藻造藻扎藻灶泽蚤泽遥
芽孢杆菌作为植物微生态防治的优势种群袁具
有较强的抗菌防病作用袁已成功地用于植物病害的
生物防治咱员源 原 员缘暂 袁而且很多已经作为生物农药广泛应
用咱员远暂 袁如枯草芽孢杆菌渊月援 泽怎遭贼蚤造蚤泽冤尧蜡状芽孢杆菌
渊月援 糟藻则藻怎泽冤尧多粘芽孢杆菌渊月援 责燥造赠皂赠曾葬冤尧巨大芽孢
杆 菌 渊 月援 皂藻早葬贼藻则贼蚤怎皂 冤尧 短 小 芽 孢 杆 菌 渊 月援
责怎皂蚤造怎泽冤等遥
目前袁关于兰花病虫害的生物防治方面的研究
甚少遥 兰花病害的防治主要是传统的新品种培育袁
化学或物理方法防治手段进行病害防治袁生物防治
也多是限于转抗病基因兰花的研究袁这些研究不仅
会造成一部分特殊观赏价值品种丢失袁环境污染袁而
且对人力物力的要求也比较大遥
近一个世纪以来袁随着植物病害生物防治研究
员园远
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
的深入袁人们对兰花病原菌的生物防治措施也开展
了广泛的研究袁但是用于兰花病害生物防治的拮抗
菌筛选目前只有少数报道遥
此外袁活性最高的 缘粤缘鄄猿 筛选自毛乌素沙地特
殊生境的生物结皮土壤样品遥 毛乌素沙漠是我国十
大沙漠渊地冤之一袁降水年际变率大袁多雨年为少雨
年 圆 源 倍袁常发生旱灾和涝灾遥 地处于几个自然
地带的交接地段袁植被和土壤反映出过渡性特点遥
特殊生境的微生物由于生活环境的特殊和极端性大
多数有各种耐性和抗性袁而且由于不同的遗传背景
和代谢途径袁产生的代谢物也会有特殊的生物学结
构和功能遥 因此袁后期对 缘粤缘鄄猿 拮抗菌活性代谢产
物理化性质的研究有重要的意义遥
生防菌主要通过在植物根际定殖尧分泌抗菌物
质和营养竞争而拮抗病原菌咱员苑暂 遥 后期对生防菌发
酵条件的优化研究袁不仅可以实现活性成分的高效
积累袁为今后构建高效生防工程菌株提供优良的基
础材料袁还可以为进一步研究拮抗机制奠定基础以
及提供充足的研究物质遥 对拮抗菌株产孢条件的优
化研究可以提高其对不良环境因素的抗性袁延长生
防制剂保存期袁稳定活性袁为防治病害拮抗细菌进入
工业化生产提供理论依据咱员愿暂 遥
参考文献院
咱员暂 徐明全袁郑摇 平袁刘荣维袁等援 兰花主要病害鉴定及药剂筛选试
验咱允暂援 广东农业科学袁圆园园缘渊缘冤院源远 原 源怨
咱圆暂 陈述富袁黄健君袁古 摇 涛援 兰花病虫害的防治咱 允暂援 广西农业科
学袁员怨怨源渊猿冤院员猿苑
咱猿暂 刘仲健援中国兰花观赏与培育及病虫害防治咱酝暂援 北京院中国林
业出版社袁员怨怨愿院圆缘园 原 圆怨源
咱源暂 朱天辉袁刘富平援坚强芽孢杆菌对 猿 种病原真菌的抗生现象咱 允暂 援
林业科学袁圆园园苑袁源猿渊圆冤院员圆园 原 员圆猿
咱缘暂 悦造葬怎凿蚤灶藻 阅 杂袁砸燥遭藻则贼 宰 月袁耘造燥蚤泽藻 运蚤造造早燥则藻援 云怎灶早葬造 责葬贼澡燥早藻灶泽 燥枣 酝蚤鄄
糟燥灶蚤葬 糟葬造增藻泽糟藻灶泽 渊 酝藻造葬泽贼燥皂葬贼葬糟藻葬藻冤 枣则燥皂 月则葬扎蚤造 憎蚤贼澡 则藻枣藻则藻灶糟藻 贼燥
糟造葬泽泽蚤糟葬造 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟燥灶贼则燥造咱允暂援 酝赠糟燥造燥早蚤葬袁圆园园苑袁怨怨渊员冤院怨怨 原 员员员
咱远暂 悦澡藻灶早 再葬鄄造蚤袁酝糟晕葬造造赠 阅葬增蚤凿 允袁悦葬则燥造蚤灶藻 蕴葬遭遭佴袁藻贼 葬造援 陨灶泽藻则贼蚤燥灶葬造 皂怎鄄
贼葬早藻灶藻泽蚤泽 燥枣 葬 枣怎灶早葬造 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 葬早藻灶贼 造藻凿 贼燥 凿蚤泽糟燥增藻则赠 燥枣 葬 则葬则藻 糟藻造造燥鄄
遭蚤燥泽藻 造蚤责蚤凿 憎蚤贼澡 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠咱 允暂 援 粤责责造蚤藻凿 葬灶凿 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造
酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠袁圆园园猿袁远怨渊缘冤院圆缘怨缘 原 圆远园圆
咱苑暂 唐永红袁曹摇 庸袁卢成瑛袁等援特殊生境微生物及其活性代谢产物
研究进展咱允暂援 微生物学通报袁圆园园远袁猿猿渊源冤院员远猿 原 员远远
咱愿暂 程丽娟袁薛泉宏援微生物学实验技术咱酝暂援 西安院世界图书出版
公司袁圆园园园
咱怨暂 东秀竹袁蔡妙英援常见细菌系统鉴定手册咱酝暂援 北京院科学出版
社袁圆园园员院猿源怨 原 猿愿愿
咱员园暂 布坎南 砸 耘袁 吉本斯 晕 耘援伯杰细菌鉴定手册渊第八版冤 咱酝暂援
北京院科学出版社袁员怨愿源
咱员员暂 粤怎泽怎遭藻造 云 酝袁月则藻灶贼 砸袁运蚤灶早泽贼燥灶 砸 耘袁藻贼 葬造援 分子克隆实验指南
咱酝暂援 金冬雁援北京院科学出版社袁圆园园员院猿远 原 猿怨
咱员圆暂 蕴葬灶藻凿 允援 员远杂 辕 圆猿杂 则砸晕粤 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 蚤灶院杂贼葬糟噪藻遭则葬灶凿贼 耘袁郧燥燥凿枣藻造造燥憎
酝袁 晕怎糟造藻蚤糟 葬糟蚤凿 贼藻糟澡灶蚤择怎藻泽 蚤灶 遭葬糟贼藻则蚤葬 泽赠泽贼藻皂葬贼蚤糟泽 咱酝暂援 悦澡蚤糟澡藻泽鄄
贼藻则 允燥澡灶 宰蚤造藻赠 驭 杂燥灶泽袁员怨怨员院员员缘 原 员源苑
咱员猿暂 杂葬蚤贼燥怎 晕袁晕藻蚤 酝援 栽澡藻 灶藻蚤早澡遭燥怎则鄄躁燥蚤灶蚤灶早 皂藻贼澡燥凿院粤 灶藻憎 皂藻贼澡燥凿 枣燥则
则藻糟燥灶泽贼则怎糟贼蚤灶早 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻泽咱 允暂援 酝燥造 月蚤燥造 耘增燥造袁员怨愿苑袁源院源园远
原 源圆缘
咱员源暂 韵蚤贼葬 杂袁匀燥则蚤贼葬 酝袁再葬灶葬早蚤 杂 韵援 孕怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣 葬 灶藻憎 糟澡蚤鄄
贼蚤灶鄄遭蚤灶早蚤灶早 葬灶贼蚤枣怎灶早葬造 悦月圆员 枣则燥皂 月葬糟蚤造造怎泽 造蚤糟澡藻灶蚤枣燥则皂蚤泽咱允暂 援 月蚤燥泽糟蚤鄄
藻灶糟藻袁月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠驭月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁员怨怨远袁远园渊猿冤院源愿员 原 源愿猿
咱员缘暂 黄剑飞袁李摇 健袁刘摇 淇袁等援一株芽孢杆菌的分离尧鉴定及其抗
菌效果研究咱允暂 援 安徽农业科学袁圆园园愿袁猿远渊远冤院圆猿圆员 原 圆猿圆圆
咱员远暂 运燥则泽贼藻灶 蕴袁阅藻 灾蚤造造蚤藻则泽 耘 耘袁宰蚤造造蚤藻则泽 云 悦袁藻贼 葬造援 云蚤藻造凿 泽责则葬赠泽 燥枣 月葬鄄
糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽 葬灶凿 枣怎灶早蚤糟蚤凿藻泽 枣燥则 糟燥灶贼则燥造 燥枣 责则藻澡葬则增藻泽贼枣则怎蚤贼 凿蚤泽藻葬泽藻泽 燥枣
葬增燥糟葬凿燥蚤灶 蚤灶 泽燥怎贼澡 粤枣枣蚤糟葬咱允暂 援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻袁员怨怨苑袁愿员院源缘缘 原 源缘怨
咱员苑暂 王摇 倩袁李术娜袁朱宝成袁等援 兰花炭疽病拮抗细菌 月葬糟蚤造造怎泽
皂藻早葬贼藻则蚤怎皂 员 原 员圆 菌株的产芽孢条件优化咱 允暂援 河北大学学报院
自然科学版袁圆园园愿袁圆愿渊缘冤院缘圆圆 原 缘圆愿
咱员愿暂 杂藻灶 砸袁杂憎葬皂蚤灶葬贼澡葬灶 栽援 粤责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 则藻泽责燥灶泽藻 泽怎则枣葬糟藻 皂藻贼澡燥凿燥造燥早赠
贼燥 藻增葬造怎葬贼藻 贼澡藻 燥责贼蚤皂怎皂 藻灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽 枣燥则 贼澡藻 藻灶澡葬灶糟藻凿
责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 泽怎则枣葬糟贼蚤灶咱 允暂 援 粤责责造 酝蚤糟则燥遭蚤燥造 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造袁员怨怨苑袁源苑院
猿缘愿 原 猿远猿
圆园远