全 文 ：第 2 卷 第 1 期
1 9 8 9 年 2 月
林 业 科学 研 究
FO R E S T R ES E A R C H
V o l
, 2 , N o
。
1
Fe b
. , 1 9 8 9
杨树重要病害生物防治初探 带
向 玉 英
(中国林业科学研究院林业研究所 )
关健词 杨树病害, 生物防 治 , 拮杭作用 , 病原菌, 益菌
自然界各种微生物生活在一起 , 成为复杂的群落。 它们相互促进 、 制约 , 构成生物体的
生态平衡。 在森林病害防治中 , 利用益菌控制病菌的生存和活动 , 达到生物防治的目的。 为了
寻求这一新途径 , 在 1 9 82一1 9 8 4年 , 对 4 种杨树重要病害进行了生物防治探索 , 从筛选和防
病上作了研究。
一 、 材 料 和 . 方 法
(一) 菌种来源
试验菌 (益菌) 采用1 1种菌 , 其中细菌 4 种 (B a c illu s s : 6 tflis , B 。 p o m ilu s , Ps e : d o 滋叭a :
了l, o , ac e n s , p . o p . (M )) ; 木霉菌 4种 (T r‘cho d e r m a lig n o : um , T . s p . (1 1) , T . s p . :(4 2 ) ,
T
。 。扮沁) ; 其它 真 菌 2 种 (A sp e , 9 111“ 5 t e r r 。。s , Cha时o 二细优 g lo bo s 。, ) 和 放 线 菌 1 种
(S tr 印to m 犷es 岁is eu s) 。 由中国科学院菌种保藏委员会及贵州省林科所胡炳福同志供 给。 据
文献报道上述各菌对某些病原菌具有一定的拮抗作用及抑制作用 〔‘, 7 1。
测试菌 (病菌 ) 测定从自然病斑中分离到的 4 种病原菌 : 杨树叶部 黑 斑 病 (对口。￡。。众a
云, u n n ea ) 和炭疽病 (G loe s夕。: i: m t: e m : la e ) , 干部 溃 疡 病 (D o t入iO , ‘lla g r e g a r勿) 和 腐 烂 病
(C参t o SPo r a c h犷yso sp e了勿a )。
(二) 室内拮抗作用刹定
1
. 菌丝 在马铃薯平板培养基上 , 两端分别接益菌和病菌 , 间距 2 一 4 c m , s d 后 检
查抑菌圈的大小。 细菌是在马铃薯 、 牛肉汁混合培养基 ( l , 1 ) 平板上 , 采用T 字形接种 ,
s d 后检查病原菌的抑菌线长短 。 以上方法每种均处理 5 皿 , 重复 3 次 。
2
. 袍子 ¹ 将培养 24 h 的供试斜面细菌 , 每管放入 会m l无菌水 , 制成悬 浮 液 ; º 用
无菌水制成每视野约50 个抱子的病菌悬浮液 ; » 其步骤为各取上述 两 种 液 体 2 滴混 合 均
匀 , 用纸环法 [。J作抱子发芽 , 在25 ℃温箱中保湿培养24 h , 检查病原菌抱子的发芽和被溶解
情况 。
3
. 抗菌物质 将筛选出拮抗作用较好的细菌接入液体牛肉汁培养基中 , 真菌接入 察 氏
液体培养基中 , 在 25 ℃ 下振荡培养 。 细菌培养 3 d , 每天 振荡 8 次 , 每 次 10 m in , 真 菌
s d
, 每天 4次 , 每次2 0 m in 。
本文于 19 88年 2 月22日收到。
·工作中承蒙陈延熙教授和郭秀珍研究员热悄指导 , 张丽华和 田淑敏 同志参加 部分试验 , 特此一并致谢 。
林 业 科 学 研 究 2 卷
将消毒不锈钢圈放在混有病原菌抱子液的固体培养基中 , 每皿放 3 个 , 将益菌滤液放 5
滴在钢圈中 , 在25 ℃温箱中培养s d , 测钢圈周围的抑菌圈大小。
(三 ) 宜外试脸
1
. 植株上益菌的存活 将益菌喷接于室外杨树叶片上 , 每半月采叶进行分离培 养 , 观
察菌落数。
2
. 不同时期喷接益菌 在植株上¹ 喷接益菌3 d 后接入病菌 , º 益 、 病菌混合喷 接, »
喷接病菌3 d 后再接益菌 。 一个月后检查发病情况 。
二 、 试 验 结果
(一 )宜内试脸
1 . 4 种木霉菌对病原菌菌丝的作用 从表 l 看出 , 木霉 菌 (T 。 s p . (42) , T . v介id‘
T
。
s p
.
(11) 比溃疡病菌 、 腐烂病菌生长快约 2一 3倍 , 益菌将病菌筱盖和包围 (图版 卜1a ,
b)
, 有优先占领的作用 。 病菌的形态发生扭曲变形 (图版 I 一 2 )o
2
. 细菌时病菌菌丝和艳子的作用 从表 2 看出 , P . 了l如ra “盯对炭疽病菌和腐烂病菌效
果较好 , 能抑制菌丝生长 约 3 倍 ( 图版 I 一3 a , b ) 。 而 B . p : 二i lu s、 B . su bti lis 和 p · s p ,
.
, ,
. , 二衬。。的抢 . (M )对炭疽病菌 、 腐烂病菌和黑斑病菌的作衰 i ‘种木 . , 对价 . 的作用 、 ‘ ~ , “。。料。 、 , 二 7r, 。 , , 韶。 ,。 。 。 : , 卜(单位 . 。。 ) 用不明显 。
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·小 二 网然卜~一一一下下石石而一万一丁厂厂丁了下一一 衰 2 组 , 对病, 的拮抗作用试 脸 菌 铆翻 , 耸生 长长度( C m )
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炭 疽 病
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黑 斑 病
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( M )
对 照
9Ž80.曰”3一on‘60一n口,曰.二血幼工‘,占比甘
3
. 几种菌液时病原菌艳子发芽的影响 从表3看出几种菌液对 4种病菌抱子发芽有影响 ,
其中B . p“而l盯和 B . :动til is 降低腐烂病和炭疽病抱子发芽很明显 。 细菌接触病菌饱子后 ,
随着时间的增加而抱子数量减少 , 看出成团的抱子有不断溶解的现象。 另外 , 尸 . 叩 . (M ) 对
4 种病菌抱子的溶解作用也较明显。
4
. 不同时间接种益菌的效应 从表 4 看出 , 不同时间接菌其效果不同。 先接益菌 , 后接
1 期 向玉英 : 杨树重要病害生物防治初探
表 3 几种菌液对病耳菌抽子发芽的形晌
霭~ 飞塑逻 , ‘ l 对 照(无菌水 )B . 尹u用‘l“ s B . ‘“btili s P . sp . (M ) 5 . 夕r ‘s e “s
炭 疽 病 7 。 3 . O. 2 0 。 2 . 1 6 。 4 2 4 。 3
腐 烂 病 3 3 。 5 . 5 1 。 5 0 . 6 , 。3 0
黑 斑 病 5 0 。 0 5 0 。 2 2 3 。 2 . 5 0 。 0 6 4 。 0
溃 疡 病 4 8 。 4 5 . 4 . 石0 。 4 7 6 。 6 8 3 。 5
注 : . 有溶解 , O 抱子未发芽
病菌的表现较好 , 益菌先占领阵地 , 使病菌不能生长 , 先接病菌 , 后接益菌 , 病 菌 占了 优
势 , 益菌发挥不了作用 , 将两种菌混合同时接入时 , 益菌不 能控制病菌 , 二者 均生 长。 B.
su bti lis
、
B
。
Pu m ilu s和P . s p . (M ) 对腐烂病菌 、 炭疽病菌在 16 d 内有抑制生长的作用 , 而
对黑斑病菌在第三天后就无抑制作用了 。P . tl uo , ac en : 对 4 种病原菌的有效抑制时间约一周 。
表 4 不同时间接种益菌的效应
炭 疽
腐 烂
了仁厦八 浮 液 ⋯翼勿 翼羚不斋嘿箭了一一丁一一一一二牛二一一二二二一二牛一干一牛黑一} 竺· ‘“o , ,分S } 一 干 一 一{ 分秒洲一 一 千 1 竺.竺病 1 仁’ , p : ‘凹 , 1 竺 } 干 } i’于 一{ 。里“e “s { ” } 十 1 甘’竺 } 名 ’竺一斗一孕男些吧一千一牛-月‘一仁一一一牛一干一李牛一
{ 之· gr {S竺S { 一 + ! 去‘全 一} 登· ‘“o , t.? S } 十 一 1 三’竺。 { 份训翩一 一 十 一{ 乙 _竺 ‘ ” } 十 { 竺_⋯ 甲环军 2 0 0 p p m } 十 ⋯ 十 一 一一 一 一一 ! _ 户‘ u _ _ _ } _注 : 。无病菌菌落生长 , + 有病菌蔺落生长 。
(二) 室外试脸
1
. 益菌在田 间的存活 在病害发生季节 , 将益菌接种在本院丰产 林 苗 圃 的 1 年 生 北
京杨上 , 每半月取样分离 , 观察益菌在野外植株上保存时期 , 其结果见表 5 。 从 中可 见 T.
v il id e
、
B
· S u bt‘115 、 p · 了lu o , a c e : s 、5 . 9 : 15。: s在自然情况下均能生存 , 说明益菌在杨树生长
期中 , 可以在植株上保存 3 一 4 个月 , 但随着环境温湿度及其它因子的影响 , 而有增减。
2
。 不同接种时期的发病情况 以炭疽病为例 , 采用不同接种时期 , 观察其发病情况。 从
表 6 看出 , 在防治炭疽病时 , 先喷益菌后喷病菌的可以控制病害的发生 。 而益菌和病菌同时
喷或先喷病菌后喷益菌的防治效果都较差。 此结果和室内测定一致。
林 业 科 学 研 究 2 卷
衰 S 杨树位株上益 , 存活时期
益 菌 名 称 接 种 效
(株)
接 种 日 期 } 接 种 部 位 分 离 日 期
曲落百 分率¹
(% )
T
. 盯‘r i d e 5 月23目
一一。!!l
6 月11 日
6 月26 日
7 月12日
7 月29 日
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5
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50
.
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. ”‘r记 e 5 月 23 日
7 月12 日
7 月29 日
8 月16 日
9 月 9 日
9 月26 日
100
.
0
37
.
5
46
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2
g r , ‘e “S 6 月 12 日
6 月26 日
7 月 12 日
7 月2 9 日
8 月 16 日
9 月 9 日
50
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0
50
.
0
19 0
。
0
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21
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5
8 月26 日
9 月 9 日
9 月 26 日
10 0
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0
jlu o r a c e ”s 8 月 8 日 10 0 。 O
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8 月26 日
9 月 9 日
9 月 26 日
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¹ 每种口培养 5 皿 , 接自25 个 。
裹 ‘ 不同接种时期炭疽摘的发病 . 况 三 、 结 语
‘ “
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接 ” “ 期
{
, 种株
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发, 株
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j‘“0 r a Ce n “ 】先喷炭疽蔺后 , 益 . } ’0 ⋯“
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对 , 《无。水 , l ⋯‘2 } ‘
1
. 生物防治杨树病害为一新的探 索。
试验 中用了n 种拮抗性益菌 , 测定 了杨树叶
部和干部病害各两种 。结果看出对 4种病菌 ,
益细菌比木霉菌效果好 , 木霉菌比供试的其
它真菌好 , 具体结果是 : 细菌p . jl “。了ac 。“,
B
。 : u吞tilis , B . p 。二 ilu s 和放线菌S 。 g r i so u s
对腐烂病菌 、 炭疽病菌效果 较 好 , 木 霉 菌
T
. s p
.
( 42 ) , T
. v ir id e 和 T 。 s p 。 ( 11 )对
溃疡病菌和腐烂病菌较好。 益细菌的菌液和浸出过滤液对 4 种病菌袍子的发芽有抑制和溶解
作用。
2
. 益菌对病菌的作用表现为夜盖和抑制 , 起机械屏障作用 (图版 I 一 l , 4) , 或溶解 病 菌
抱子和降低抱子的发芽率。 所以从室外试验看出, 益菌在病害发生之前喷施效果较好 , 它们
优先占领寄主 , 抑制和阻碍入侵病菌的发展 , 主要起预防作用 。
3
. 益菌抑制病菌的有效时间约半个月 , 益菌在野外寄主上存活时间为 3 一 4 个 月 , 所
以今后应研究益菌的生态学和生物学特性 , 以便满足益菌生长繁殖的要求 , 能稳定地发挥抑
1 期
制病原菌的作用。
向玉英 : 杨树重要病害生物防治初探 g 7
参 考 文 献
〔1 〕裘维蕃 , 1 9 7 9 。 国际植物病理学的进 展 , 北京农业 大学 , ( 2 ) : 18 一2 3 。
〔2 〕陈延照 , 1 9” , 试谈植物病害的生物防治 , 植病生防 , ( 1 ) : 1 一1 3 。
〔3 口 徐眷城 , 1 9 7 8 , 生物防治棉花病害的现状及展望 , 辽宁棉麻科技 。 ( 1 ) : 1 一 5 。
〔‘〕 Ba k e r , K . , 2 9 73 , B io lo g ie a l e o n t r o l o f p la n t p a t h o g e n s , Ph y t o P a t h o lo g , r , 一(1 1 ) : 2 73一2 9 2 .
〔5 〕 K e r r , :、. , 2 0 7 2 , B io lo g ie a l e o n tr o l o f e r o w n g a ll , J . A p p l . B a e t , 5 (3 5 ) : ‘, 3一97 .
〔6 〕 南京林业大学林病教研组 , 19 7 8 , 真菌抱子萌发纸 环法 , 南林科技 , ( 3 ) : 49一5 0
吸7 〕 胡炳福 , 19 踌 , 两种抗生细菌应用研究 , 林业科技通讯 , ( 6 ) : 26 一28 。
PR ELIMIN AR Y ST UD Y ON T HE B 10 LO G ICAL CO NTR OL
OF PO PLAR D !SE ASES
X ia n g Y u y in g
(T he R e : e a r c 丙 I o s tfto te o f F o r e s t心 C A F )
A b str a et B io lo g ie a l eo nt r o l o f Po p la r d i3 e ase 1
5 a Pr e lim in a r y s tu d y in
Ch in a
。
T h e res u lts o f tr ia ls w e r e a s fo llo w s
: th e e o n tr o l e ffee ts o f P se 忍d o m o n a s
jlu o ; a c e n s
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B a c illus s : btflis
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p 左nz flo s a n d S rr ep ro m 岑c es g , ise u s a郎 ins t C穿t o sp o r a
c hr万so sp e , 扭 a a n d G lo e s刀o r iu m t , em u la e w e r e Pr o m is in g . T h e e o n t ro l effe e ts o f
T , ic 人o d e r 爪a s p 。 (4 2 ) , T . v f: 宕d e a n d T . sp . (1 2 ) a , ins t D o thio : e lla g r e g 盯ia
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. c 人, y s o sp e r 爪a w e re P r o m isin g , to o . T h e c o n tr o l effe e ts o f B 。 su btflis ,
刀 . p u执ilu s , P se ud o m o 左a s s p . (M ) , T . s p . (4 2 ) , T . v ir id e , T . s p . (1 1 ) a如ins t
万召了55 0 ”fn a 乙r u n 刀e a w e r e n o S tr ik e r .
U s in g bene fie ia l b a e ter ia a g a i璐t sPo res o f t h e te ste d Po P la r 那th o罗ns ,
th e a u t h o r fo u n d th e r e w e re lys is a n d fu n g is ta t ie a e t io n
。
U s in g be n efie ia l
fun g i
a如 in st the abo v e m en t io ne d Pa th o g ens th e r e w e re n o fu n g is ta t ie a ct ion -
K e y w or d s Po Pla r d ise a s e s : b io lo g ie a l e o n tr o l: fu n g ist a t ie a e t ion ; Pa tho
-
g en s ; b ene fie ia l fu n g i a n d ba e te r ia
向玉英 : 杨树重要病害生物防治初探 图版 I
缓辈羹
l a
. 木霉菌 (4 2 )包围溃疡病菌 , l b . 木霉菌 (32 )覆 盖和包围腐烂病菌 。
2
. 腐烂病菌菌丝在木霉 (3 2) 作用下扭曲变形 。
3 a
. 细菌 (3 3) 对炭疽病 的抑菌作用多 3 b . 放线菌对腐烂病菌 的抑菌作用 。
4
. 木霉菌对溃疡病 菌产生屏障作用 (箭头指向处 ) 。