全 文 ：第 6 卷
】 9 9
第 5 期
3 年 1 o jJ
林 业 科 学研 究
FO R E ST R E S E A R C H
V o l
.
6
,
N o
.
5
O e t
. ,
1 9 9 3
棕搁藤组培技术研究 *
张 方 秋
摘要 经对单叶省膝、 黄麟和白井组织培养系列试验证明 : 半成熟种胚是棕桐 藤 组 !织 培 养
最佳外植体 , 在 R M , 一、和 R M卜 : 培养基中 , 相继各培养的 d , 即形成完整的试管苗 , 外 植 体在
总盐浓度为 6 8 9 9 m g/ L 的培养基中, 置于 69 0 1x 光照度下每天照射 16 五诱导愈伤组织 效果最好 ,
R M
。是丛芽诱导和继代培养最理想培养基 。 一个外殖体经一年的培养增殖 , 其理论 繁 殖 系 数 为
2
.
8 x 10
‘
/ a
。组培诱导分化的丛生苗切片显微观侧结果显示 : 母芽节间距离极度缩短 , 当 节部分
生细胞发生分裂 、 密度加大时 , 即形成多个腋芽原基 , 继后发育成丛生无根苗 。 2 年 生苗木茎尖
经 组 培 诱 导 后 , 分生细胞直径变小 , 密度增大, 核体积异常扩大 , 呈 明显的幼态特征 , 即具有
组 培 复 幼 现象。
关扭询 棕桐膝、 组培、 诱导、 萦殖
棕桐藤经济价值高 , 社会需求量大 , 但资源十分短缺 , 常规的种子育苗因发芽率低 、 发
芽时间长 , 种植后 2 ~ 3 a 生长缓慢、 萌某率低而严重阻碍扩大栽培 。 60 ~ 70 年代试用切干
扦插、 分根埋条 、 禁芽分植等无性繁殖 , 未能获得理想效果 [ ’] 。 80 年代以来 , 国内外研究者
探寻应用生物技术 , 通过组织培养 , 实现优良藤种的迅速繁育 。 R ao 〔Z J首先成功 地培养马兰
省藤 (C a la m u s 二a o a , M iq . )的丛生无根苗 , 庄承纪 [ 3 〕也实现 T 云 南 省 藤 (C . 万u n n a n e n : 15
Pe i & C h e n )和倒卵果省藤 (C . o b 0 0 0 id e u s Pe i & Ch e n )的植株再生 。 其它一些藤种的组
培研究也取得不同程度的进展 , 但均未获得丛生无根苗[’ 一。 ] 。 我 们自19 8 8年起 , 开展了以我
国优良商品藤种黄藤〔D a e m o n o : o p s 二a r g a r it a 。 (H a n e e ) B e e e . 〕、 白 藤 (C . t e t, a d a c t万lu s
H a n c e )
、 单叶省藤 (C · s im p l滋c ifo liu s W e i)的组织培养研究 , 获得显著进 展 , 成 功地培养
出丛生试管苗木 , 并大田移植成功 , 现报告如下。
1
。
1
试验材料和方法
材 料
试验藤种 : 黄藤、 白藤和单叶省藤。
外植体 : 半成熟种胚 , 成熟种胚 , 种子萌发的幼芽 , 5 年生植株的莫芽 , 2 年生苗木的
茎尖 、 叶原基 、 根尖和甘蓝状嫩叶。
1 9 92一 1 1一0 3收稿 。
张方秋 助理研究员 (中国林业科学研究院热 带林业研究所 广州 5 1 05 2 0 )。
* 本研究为林业部 “七五 ”重点研究课题 和加 拿大国际发展研究中心 (ID R C )与中国林科 院热林所合作的 “棕搁藤研
究 ( R at ta n Chi n a )" 的研究 内容之 一 。 研究过程中得 到了邝炳朝 、 许想灿先生的悉 心 指 导 , 陈美红 、 陈燕 、 孙冰等
同志参与部分工作, 特此致谢。
5 期 张方秋 : 棕桐藤组培技术研究
1
.
2 方 法
1
.
2
.
1 培养基 参阅有关棕搁藤组培文献 , 按各试验项目需要 , 在 M S 培养基配方的 基础
上 , 调节营养元素、 维生素、 氨基酸及激素种类和 含量 , 以筛选适合诱导愈伤组织及芽增殖
和生根的培养基 。
1
.
2
.
2 组培观浏 定量观察按组培常规方法进行 , 定性指标依据以下分级标准定级 :
无根苗生长等级 : 1 一优 , 2 一良 , 3 一中 , 4 一差 , 5 一死亡 。
愈伤组织结构 : 1 一紧密 , 2 一较紧密 , 3 一较疏松 , 4 一疏松 。
愈伤组织颜色 : 1 一嫩绿色 , 2 一浅绿色 , 3 一乳 白色 , 4 一黄白色 , 5 一黄褐色 。
根颈粗细 目测等级 : 1 一粗 , 2 一较粗 , 3 一较细 , 4 一细。
1
.
2
.
3 显徽观浏 观测材料用 4 %甲醛固定 , 酒精脱水后 , 浸蜡包埋切 片 , 再行 PA S一甲
苯胺蓝染色 , 之后用加拿大树胶封片 。 在 BH we Z型 o ly ln p us 显微镜下观测和拍片 。
1
.
2
.
4 资料整理和统计分析 棕桐藤具有相近的生物学特性 , 通过组培的各组试 验 , 观 测
到藤种之间差异微小 , 但又充分考虑到棕桐藤是一个大的植物族群 , 包括藤种多 , 参试的 3
个藤种各有其特殊的生物学特性 。 因此 , 本研究在资料整理时 , 各组试验的各项观测资料 ,
首先按藤种归纳整理 , 再综合分析评价。
裹 1 外植体的消毒试验效果
2 结果与分析
2. 1 外植休筛选
对黄藤 、 白藤和单叶省藤的半成熟种胚 、
成熟种胚 、 种子萌发的幼芽、 茎尖、 根尖 、
叶原基 、 巢芽、 甘蓝状嫩叶等 8 种外植体的
培养试验 , 结果表明 : 以上 8 种外植体均可
用于棕桐藤组织培养, 但以半成熟种胚为最
佳 , 其消毒成功率达 10 。% (表 1 ) , 体现外
植体再生能力的愈伤组织、 单芽和丛生苗诱
导率分别为 83 . 3 % 、 10 0 % 和 85 % (表 2 ) ,
分生组织细胞密度达 1 6 . 6 个 /m r n s(表 3 ) ,
或蒙芽、 叶原基和甘蓝状嫩叶或根尖 。
外 植 体
消毒成
功 率
(% )
消毒致
死 率
(% )
消毒后
污染率
(% )
消毒难
易趋势
易⋯寺难476836n587R90内才口上ZC自,人几舀, .比J心一001匕⋯n0挂一a,目内JO‘工,人.1“nJ半成熟种胚 1 0成熟种胚 94 . 6萌 集 芽 83 . 6茎 尖 81 . 5种子萌发的幼芽 右6 . 1根 尖 昭 . 5
叶 原 基 5 5 . 4
甘蓝状幼叶 3 . 9
注 : 消毒采用75 % 酒精 + 0 . 1 % H g CI : 的最佳 方
法。
其他的依次为成熟种胚、 种子萌发的幼芽 、 茎尖
2
。
2 愈伤组织诱导
从外植体诱导出愈伤组织 , 再进一步诱导胚状体 , 以产生丛生苗是组织培养提高繁殖系
数的有效途径 。 用黄藤 、 白藤和单叶省藤的半成熟种胚和茎尖为外植体 , 在改 良M S 培养基
上所进行的愈伤组织诱导试验表明 , 盐浓度和光因子是影响棕桐藤愈伤组织形成期 、 数量和
质地的两个重要因素 (表 4 ) : 6 8 9 m g /L 的总盐浓度是诱导愈伤组织形成的最适浓 度 , 其
形成期最短 , 平均仅6 . s d ; 以6 90 lx , 16 h /d 最有利 , 产生的愈伤组织质地和数 量均优于
其它处理 。
2
·
3 芽诱导和增殖
直接从外植体培养诱导出单芽或丛芽是植物组培的另一条途径 。 以 3 藤种的半成熟 种
4 8 8 林
裹 2
业 科 学 研 究
外植休的再生能力观寮
6 卷
外 植 体 种 类
根尖萌策芽 叶 原墓茎尖种的熟胚成种
观察分析指标 子 萌发
幼 芽
诱导目的
30l3017
,
:
60260韶605加50
4
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样 品 数
产 生愈伤组织样 品数
愈 伤组织平均直径 (m m )
诱 导 率 ( % )
样 品 教
产 生单芽样数
诱 导 率 ( % )
样 品 教
产生 2 个以上芽样数
芽梢平均数
诱 导 率 ( % )
再 生能力趋势 强 一———‘ 弱衰 3 外位体分生组级皿徽理案构 造 特 征 染 色 表 现 ¹外植 体种类 细胞总 数 细胞密度 细 胞直径( 个 ) (个 / m m , ) ( 协m ) 细胞质着色程度〔紫色 (淀粉 、 无定形抢 )〕 细胞核着色程度(蓝色 )积a)体1m李m总‘ 十+十6.135O”内石皿砰了.⋯月,5n06半成 熟种胚成熟 种胚种子萌发幼芽茎 尖根 尖 2 9 45 8 12 3 02 4 11 3 4 4 8 9 15 4 7 21 8 2 91 4 7 07 2 4 ::⋯: 十 十 十 十十十 + 十十 十 十7 . 0 5 十 +J怪,二亡曰⋯,.右已目
¹ + 表示着色 程度 。
裹 4 培养若盐浓度和培养的光照处理对徐们蕊愈伤组织诱导的影晌
观察项 目¹
始现天 数
直 径 ( m m )
结构等级均位
颜色 等级均位
盐总浓度 ( m g / L ) F 光 照 度 ( lx ) F
2 36 9 4 6 34 6 8 9 9 9 26 8 值 1 . 8 6 9 0 1 030 2 0 70 值
16
.
7 14
.
4 6
.
8 10
.
5 7
.
9 5二 9 . 0 6 . 8 1 1 . 4 13 . 7 4 . 2 3.
3
.
0 4
.
2 0
.
5 4
.
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.
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.
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.
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.
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.
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.
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5 2
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.
2 2
.
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.
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.
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.
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2
.
9 2
.
8 2
.
8 2
.
7 3
.
0 2
.
8 2
.
7 3
.
8
注 : ¹ 盐浓度试验光照度取6 90 lx , 光 照试验是在 6 8 9 9 m g /L的盐浓度下进行 , 据培养30 d 的观测值分析。
º F 。. 。。 ( 3 , 5 。) = 3 . 16 , F o . 。 : ( : , 、。 ) = 5 . 0 1 。
胚 、 成熟种胚 、 种子萌发的幼芽 、 茎尖和萦芽 5 种外植体 , 在 MS 培养基的基础上 , 通过调
节维生素、 氨基酸及矿质营养含量 , 配制的 R M卜 2、 R M 。_ , 、 R M ‘、 R M 。和 R M , 系列培养
基 , 进行诱导试验 , 连续观测和资料分析 (表 5 )表明 : ¹ 供试藤种间及外植体间 , 始芽期和
各生长观测值等评价指标均无显著差异 , 而不同培养基间则表现 显著 差 异 。 由此证明 , 以
M S 培养基为基础配方 , 调节培养基配方中的矿质营养元素、 维生素和氨基酸含 量是实现棕
桐 藤组培从外植体直接快速培养获得单芽或丛生苗的关键技术 。 º 在 R M S 一 : 培 养基 中 , 外
植体诱导生成的芽多为单芽 , 且始现期最短 , 仅 7 . 0 d , 而在 R M : 一 : 、 R M 。、 R M 。和 R M 7培
5 期 张方秋 : 棕搁藤组培技术研究 4 89
养基中分别是R M S 一 ; 的3 . 6 、 2 . 2 、 1 . 5和 1 . 6倍的时间 , 由此可见R M。 一 ,培养基是 棕稠藤组培快
速诱导单芽的最佳培养基 。 在 R M 。培养基中 , 虽然外植体快速诱导芽不及 R M 。一 :培养基 , 但
是 , 可诱导生成平均6 . 1枚芽的丛生无根苗 , 显著优于其它系列培养基 , 可见 R M 。 是 棕搁藤组
r培实现由外植体直接诱导丛生苗的最佳培养基 。 » R M 。培养基的一个培养周期约为50 d 加
此连续 7 代 (即一年时间 )繁殖的结果 , 理论上一个芽的年繁殖量可达 6 , (二2 . 8 x l护)个芽 。
表 5 不同培养基的芽梢诱导效应
培养基基本特征 生长起始期 芽 数 苗 高 叶 片 数 生长等级培养基系列
(改 良M S基础上 ) ( d ) (枚 ) ( m m ) (片 ) 均 值
R M :
一 : 调节维生素和氮基故 2 5 . 5 2 . 1 22 2 . 5 1 . 3
R M 。
一 , 词节营养元素和氛基徽 了. 0 1 . 2 始 3 . 5 1 . 2
R M ; 讽节氛基放 15 . 7 3 . 1 3 7 2 . 8 1 . 2
R M 。 调节营养元素和维生素 10 . 4 6 . 1 21 12 . 3 1 . 1
R M : 调节营养元素 、 维生素 、 氛基酸 1 . 2 4 . 6 30 , . 2 1 . 4
F 值 3 . 35. 3 . 2 4. 3 . 54 , , 4 . 28 . *
注 : ¹ 培养 60 天后观侧值, º 3 膝种各10 个半成熟种胚的培 养 结 果 作 分 析 统 计 , » F o . 。5 ( ; , : ; 5》二 2 . 6 7,
F o
. o : (幻 : ‘s ) = 3 . 45 。
2 . 4 生根诱导
当芽诱导培养60 d 后 , 苗高20 ~ 40 m m 时 , 即分别 以单根苗和丛生无根苗转管移入以改
良 M S 培养基配制的 R M : 一 :至R M : 一 。的 6 种系列培养基试管中 , 进行生根诱导试验以培养完
整植株 。 结果表明 (表 6 ) : 上述 6 种培养基 , 除 R M卜 , 无效 外 , R M S 一 ‘、 R M卜 。和 R M S 一 。
均能诱导丛生无根苗在其各自的基部生根 , 但对单根苗无效 , R M : 一 : 和 R M : 一 : 对 单根苗与
丛生无根苗均有很好的效果 , 但 R M : 一 : 诱导生根在始根期和能反映生根质量 之 根径、 根长
和根数的观测指标均显著优于 R M 。一 , 。
表 6 R 阴。系列培养甚诱导生根效应
观 侧 分 析 指 标
培 养 基 无根苗种类 ‘ 。。 。 。 ‘ 二 . 二 , , 二 。 杖怕 , r 少 2 . 、氏 闰 竹大 始 根期 根 数 总 长 单根平均长 根 径
( d ) (条 ) ( m m ) ( m m ) ( 等级均值 )
一U7 04及一二弓n.nUO八“
.12
R M
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R M
s _ :
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单 根 苗
丛 生 苗
单 根 苗
丛 生 苗
单 根 苗
丛 生 苗
单 根 苗
丛 生 苗
单 根 苗
丛 生 苗
单 根 苗
丛 生 苗
单 根 苗
丛 生 苗
5
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5
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9
.
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5
.
8 4
* *
4 2 0二
注 : ¹ 培养 4o d 观 测值 , º F 。 . 。5 ( 。 , 5 ; , = 2 . 5 4 , F o . 。: ‘5 , 。 , ) = 3 . 6 9 。
上 科 学 研 究 6 卷
2
.
5 组培苗田间移植
完整的试管丛生苗 (具有 2 ~ 3 株苗 )生长至苗高 4 ~ 5 c m 、 3 ~ 4 片 叶 , 经 10 d 自然
光照锻炼 , 即可移植于装有基质 (按沙 、 黄心土和火烧土各1 / 3配制 )的育苗杯 , 置 于能保持
80 %湿度和50 %光照的培养棚下细心管护培育。 20 d 后 , 藤苗即可长出新根 , 便可 搬 入 苗
圃 , 作常规管理 , 成活率达90 %以上 。
用外植体经组织培养直接诱导 , 培养达到上述标准的完整丛生试管苗到大田移植约需 4
~ 5 个月 , 这与白藤或黄藤种子育苗从播种经芽苗移植直至藤苗生长至4一 5片叶需经 8 一 12
个月相比, 成苗时间减少 1/ 3 , 且可以直接生产从生苗木 , 提高造林效果 。
2
.
6 组培丛生苗观案
萌策丛生是多数棕桐藤的主要生物学特性【7 ’川 。 以上述藤种半成熟胚和 2 年生茎尖为外
植体的组培丛生苗作试验材料 , 观察芽的形成过程 , 可见当外植体在R M 。培养基中培养45 d ,
首枚芽 (母芽 )始现 , 随后多枚新芽自母芽叶腋四周生成。 显微观察表明 : 母芽具极度缩短的
节间构造 , 节间距离仅 4 2 。协m , 各节部叶腋均生长许多腋芽 , 腋芽于叶腋 周 边 不 同 部 位
形成 。
通过对半成熟种胚 、 成熟种胚 、 种子萌发的幼芽 、 1 年生苗茎尖 、 2 年生苗茎尖及组培
丛生苗茎尖的切片染色显微观察和测定 (表7) 证明 , 3 藤种生长点细胞直径和细胞壁厚度随其
年龄的增大而增大 , 但细胞密度却表现随年龄增大而减小的趋势 ; 年龄较大的外植体 , 经组
培 , 表现出生长点细胞明显变小 , 细胞密度增大之幼态特征 , 细胞核大小及其它与整个细胞
体积之比 , 这两个观测指标 , 似有随年龄增大而逐渐增大 (除半成熟种胚外) , 即年龄越大 ,
生长点细胞核直径越大 , 核占细胞体积增大之趋势 , 这与 S e h a ffn e r [ ‘Z J对 H e d e ra h e li x 的
观察研究相类似 。 就此而论 , 未成熟种胚的细胞年龄最幼 , 它的细胞核及其所占细胞体积比
率也应最小 , 但观测情况恰恰相反 , 细胞直径达2 . 1 1 “m , 细胞核与细胞 体 积 比 最 大 , 达
0
.
08
, 这可能是由于未成熟种胚处于细胞发育初始阶段 , 发育尚未完全的缘故 , 这与植物受
精合子发育阶段 , 细胞具有巨型细胞核的情形相一致 [‘2 ’‘“〕。显微观测发现 , 由 2 年生苗茎尖培
育出的丛 生 苗 芽 尖 , 其生长点细胞的细胞核具有与半成熟胚细胞核相类似的现象 。 其细胞
核占细胞体积比达0 . 05 , 可能的解释是通过组培 , 细胞代谢发生变化 , 活力增强 , 恢复到胚
性细胞的状态 , 从而也有利于诱导产生多个某芽 的丛生苗。
衰 了 分 生 组 织 细 旅 特 征
细胞
率
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材料来砚
细饱密度
(个 / m m , )
细胞直径
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半成热种胚
成熟种胚
种子萌发幼芽
1 年生苗茎尖
2 年生苗茎尖
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.
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.
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.
2
5
.
2 幼小
S 期 张方秋: 棕搁膝组培技禾研究 4今1
3 结语
(1 ) 半成熟种胚是棕桐藤组培实现优良藤种快繁之理想外植体。
(2 ) 培养基总盐浓度为 6 89 9 m g / L 和光照度69 0 lx 最利于黄藤、 白藤和单 叶省藤外植
体的愈伤组织诱导 。
(3 ) 以 M S 为基本培养基 , 配制的棕桐藤组培试 验 的卫M 系 列 培 养 基中 , R M卜 , 是
诱导单芽及其伸长生长的最佳培养基 ; R M 。是诱导丛生苗及其继代增殖 的最 一优 ’培 养基 ,
R M
。一 :是诱导无根苗生根的最好培养基 。
(4 ) 以半成熟种胚 、 成熟种胚 、 茎尖和集芽为组培外植体 , 经 10 0 ~ 1 20 d 的培 养 室 培
育 , 即可获得完整小苗 、 比常规种子播种育苗可缩短约1 / 3时间。 外植体 在限M 。培 养基 诱
导增殖分化 , 每50 d 即可从一个芽上产生 6 个芽 , 继代增殖的理论繁殖系数为 2 . s x l沪/a 。
(5) 组培丛生苗的解剖和显微观察显示 : 母芽节间距离极度短缩 , 藤节部细胞密集 , 当
横向直径显著增大时 , 于叶腋处突现许多腋芽原基 ; 2 年生苗茎尖经组培后 , 分生组织细胞
具有胚性细胞类似的结构 , 这与新近有些学者提出的组培复幼理论相吻合 。
参 考 文 献
1 R a m a 幻u ja I V
,
A z ia h M Y
,
R a o A N
, e t a l
.
Pr o Pa g a t io n o f b a m b o o a n d r a tt a n thr o u g h tiss u e
e u ltu re
.
K u a la L u m p e r : T he ID R C b a m b o o a n d r a tta n 工r e se ar eh n e tw o rk , i。, 0 . 3 5 ~ s通.
2 R a o A N
,
A z ia h M Y
.
Pr o e e e d in g s o f t h e se m in a r o n t is su e e u ltu r e o f fo re st sP e e ie s
.
K u a Ia
L u m P e r : Fo r
e st R e s e a r eh In sititu te M
a la y sia
,
1 98 7
.
4 5 ~ 6 9
.
3 庄承纪 , 周建葵 . 省膝组织培养的植 株再生 . 云南植物研究 . 1 9 9 1 , 1 3(i ) : 97 ~ 1 00.
4 B a r l a R C
,
P a te r a L J
,
M e re a d o M M
.
T is su e e u lt u r e o f r a tta n
.
K u a la Lu m P e r : U n iv e r s it i
Pe rt a n ia n M a l
a y s ia , 19 8 5
.
1吕~ 2 5 .
5 Pa d m a n a bh a n D
,
Iia n 豹v a n R . S tu d ie s o n e m b r y o e u 1tu r e in C o la m “s r o 才。” g L in n . R IC B u l-
le t in
,
1 08 9
,
8(i ): z ~ 1
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6 L ilia n F
,
Pa t e n a C
,
R o m a n C 一 e t a l
,
R a tt a n tis su e e u ltu re in t he Ph iIiPPin s
.
N e w sIe tt e r
,
1 9 9 1
,
(1 2 ): 1 1 ~ 1 1
.
7 W o n g K M
,
M
a 幻 o k a rn N
.
Pr o e e e d in g s o f th e ra tt
a n s e m in a r
.
K u a Ia Lu m P e r : T h e R at t a n
In fo r m 鱿 10 11 Ce n tr e , 1 9 8 5 . 1 6~ 2 1 .
5 N im fa K T
,
E r lin d a H B
.
R at t a n
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Ce bu : In te r n at io n a l: D
e v e lo p m e n t R e se a e h C e n tr e
,
i。日0 . 0 5
~ 1 02
.
9 R ao A N
.
R e e e n t r e se a r e h o n r a tt a n
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一
a n d ra t ta n 二r e se ar eh
n e t w o r k
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s fie ld J
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M in ist r y o f Pr im a r y In d u str ie s m a la y s ia
,
1 9 7 9
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3 一5 .
12 Se h a ffn e r
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,
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.
D iffe re n tia l D N A 飞e pllca t io n in v o le d _ in _ tr a n s it io n fr o m 毛ju v e n 五le t o
a d u lt p ha se in h e d r a h e jix (A r a lia e e a e )
.
P la n t s y ste m a ties e v o lu t io n
,
1 9 7,
,
(S u PPle m e n t 幻 :
10 5 ~ 1 1 0
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1 3 Bo n g a J M
,
D a r z a n D J
.
T iss u e c u ltu r e in fo r e s tr y
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L o n do n
: M a r tin u s N ij
n o ff/D
r W
.
J a n k
P u blis h e r s
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4 92 林 业 科 学 研 乡 6 卷
A S tu d 少 o n R a tta n T iss u e C u iru r e
Z h a n g Fa n g q iu
A b str a e r T h xs Pa Pe r d e a ls w it h t i3 s u e e u ltu re o f th r e e im Po r ta n t e o m
-
m e r e ia l r a t ta n sPe e ie s in C h ln a
.
T h e r e s u lts sh o w th a t th e im m a tu r e e m
-
b r yo
一
15 th e b e s t o n e o f e ig h t k in ds o f e x P la n ts s e le e te d fo r r a tta n r iss u e
e u ltu r e
。
T h e e m b r yo e s e u ltu r e d r e sPc e tiv e ly in m e d ia R M卜 : a n d R M卜 :
fo r 5 0 d a y吕 w e r e in tr o d u e e d in t o e o m P le t e P la n t le t 3 。 C a llu J e o u ld be in t r o -
d u e e d fro m d iffe r e n t e x P la n t s s hin in g 1 6 h o u rs a d a y w ith 6 9 0 lx o n the
m e d iu !n w ith s a lt e o n e e n tr a t io n o f 6 8 9 9 rn g / L
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。
15 th e s uP e r m e d iu m
fo r in tr o d u e in g m u lt iP le sh o o t3
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.
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o b ta in e d fr o m o n e o f t h e s u b e u ltu r e d sh o o ts a y ea r
。
M ie r o s e o P ie a l o b s e r v a tio n
o n th e m u lt iP le sh o o t s s li o w s th a t th e d is ta n e e b e tw e e n th e n o d e s o n a m a in
sh o o t 15 v e r y sh o r t
, o n ly 4 2 0 林m a n d th e m e r is te m a t ie tis s u e o f n o d e s e a n
Pr o d u e e m a n y a x illa r y b u d P r im o r d iu tn w hile it 15 e a r r yin g o u t Pe r ie lin a l
a n d a n tie lin 赵1 d iv is io n . A n d th e a x illa r y b u d Pr im o r d iu m e a n b e in tr o d u e e d
in to rn u lt iP le s h o o ts fu r th e r
.
T h e m e r iste m a tie e e lls o f s ho o ts fr o m tw o
ye a r s o ld s e e d lin g s e a n b e r eju v e n a te d b y t issu e e u ltu r e
, th a t 15 th e e e lls
,
in tr o d u e e d b y t is s u e e u ltu re
, a n d h a v e th e fo llo w in g e li a r o e te r s : sm a lle r
e e ll d ia m e te r
,
hig h e r d e n s it y a n d a n e n la r g e d n u c le a r
.
K ey w o r d s r a tt a n
, t is s u e e u ltu r e
,
in tr o d u et io n
,
Pr o Pa g a tio n
Z ha n g Fa n g q iu
,
A s s is ta n t Pr o fe ss e r (T h e R e se ar e h In s it it u te o f T r o Pic a l Fo re st ry
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G u a n g 艺ho u 5 1 0 5 2 0 )
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