全 文 ：第 1 卷 第 6 期
1 9 8 8 年1 2 月
林 业 科学研究
F O R E S T R E S E A R C H
V o l
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1 ,
D e c
. ,
N o
。
6
1 9 8 8
醋酶在根结线虫分类上应用的研究关
胡 凯 基
(中国林 业科学研究院林业研 究所 )
摘 要
应用聚丙 烯醚胺凝胶 电泳技术 , 对采 自我国14 个省市的 5 种根结 线虫 (Mel oi d -
og 种。 sP p . ) , 共 47 个样本作 了正向极醋 酶 的分析 , 并研究了一些可 能影响 测 定 的
因素 。 结果表明 , 根结线 虫种间的醋 酶语存在明显而稳 定的特异性 , 在种内也是稳
定的。 时接种寄主 、 样本来源 、 生理小种 、 室内培养与田 间自然寄生 、 营养等不 同条
件下的时比分析表明 , 它们均不影响 种的特征性睁语 。 因此将醋 酶作 为根结线 虫分
类 的辅 助手段是有意义的 。 但 线出 的发育阶段不同 , 醋酶语有差异 。 采用产卵期的
雌 成虫进行分析则简便 、 可靠。
关越词 根结 线 虫 ; 分类学, 醋 酶
根结线虫(M o loi do g g , 。 sP p . )是重要的植物寄生线虫 , 其分类的 依据是形态学 , 包括体
内外各部的结构、 量度 、 相对比例等等。 但有些形态特征有时变异较大 , 如分种的一个重要
特征—会阴花纹 。 作者用一个具有典型南方根结线虫 (M . inc og , fta ) 会 阴 花 纹模式的雌虫 , 将其单卵块接种于 R ut g er s 蕃茄上 , 观察繁殖出来的第一 、 三代 , 发现分别有 1 2 . 1 % 、
7
。
6 %的会阴花纹不呈典型 的 南方根结线虫模式。 用一个具不典型南方根结线虫会阴花纹模
式的雌 虫 , 将其单卵块也接种于 R ut g er s 蕃茄上 , 观察第三代 , 其不典型会阴花纹占1 6 . 7 % 。
在各地采集的标本 中 , 同一个种的会阴花纹也有很多变化 。 如陕西周至县桑树上的南方根结
线虫 , J七会阴花纹和典型的南方根结线虫不太相同 , 它的花纹纤细 , 背弓很高 , 花纹很大。
但接种到蕃茄上以后 , 大 部分花纹有所变化 , 呈典型的南方根结线虫会阴花纹 。 由此可见环
境条件、 寄主等因素可能对根结线虫的某些形态特征有影响 。 由于根结线虫形态特征的变异
和某些测量数据的种间重叠 , 人们希望能够找到一些新的途径和方法 , 对现有的分类方法进
行补充。 蛋白 、 酶的电泳分析就是这些尝试中的一种 。
D ic kso n 等( 1 9 7 0 ) 第一次将电泳技术用于根结线虫 。 以后 D a lm a s so 等 (19 7 5 ) 、 Ja n a t i
(一9 8 2 )和 E sbe n sh a d e (1 9 5 5 ) 也做T 类似的工作 [ 3 , ‘,一 ’。] 。 他们认为醋酶和其它一些酶及非
酶蛋白在根结线虫分类上有一定价值 。 但 Ishi ba shi (1 9 7 0 )l ‘l认为寄主种类、 营养条件可影响
本文于 1 9 8 8年 6月 2 8 日收到 。
· 此项工作为国家 自然科学荃金资助项目 , 是作者研究生毕业论文的一部分。 导师箫刚柔先生和杨宝君先 生 审 阅 金
文 , 并提出宝贵t 见 , 特 表谢 水。
6 期 胡凯基 : 醋酶在根结线虫分类上应用的研究
线虫的酶 、 蛋 白的电泳谱 。 作者利用国内材料对根结线虫的非特异性醋酶进行电泳分析 , 并
着重从实际应用方面出发 , 对一些可能影响醋酶谱的因素 , 包括环境条件、 寄主种类、 寄主
营养条件 、 线虫不同发育阶段等进行 了研究 , 以确定醋酶在根结线虫分类上的应用价值。
一 、 材料与方法
(一 ) 线 虫
本试验选用采自我国14 个省(市 )的寄生于 32 种植物上的 5 种根结线虫 , 即南方根结线 虫、
北方根结线虫 (M . h即la )、花生根结线虫 (M . a : 。n a : ia ) 、爪哇根结线虫(M . ia v a n ic a )和象耳
豆根结线虫 (M 。 en te 1 ol ob l’i) , 共47 个样本 (见表 1 )。 线虫种的确定依据 形 态 特征和鉴别寄
主 。 样本 (说明的除外 )均接种于原寄主种、 品种上。 接种寄主盆栽 (培养土为消毒森林土 :沙
二 l : 1) , 于温室中培养。 每株 1 次接种 5 一10 个卵块。 卵块均来自具有种的典型会阴花纹的
雌虫 。
(二 ) 醋醉电泳分析
1
。 不同种根结线虫醋 酶谱的对比分析 选用来自浙江杭州柳树、 山东济南一串红及河南
开封芹菜上的花生根结线 虫; 海南岛尖峰岭青皮象耳豆上的象耳豆根结线虫; 云南景洪蕃茄
上的南方根结线虫 , 山东青岛月季上的北方根结线虫及云南昆明青阳参上的爪哇根结线虫进
行分析。 接种寄主均为 R ut ge rs 蕃茄。
表 1 菌醉电泳分析所用根结线虫样本及其醋醉谱
种 名 采 集 地 寄主植物 寄 主 植 物 学 名 { 生理小种 J 酸 醉 讼
花生根结 线虫
浙江杭州
山东济南
河南开封
柳 树
一 申 红
芹 菜
象耳豆根
结 线 虫 海南尖峰岭 青皮象耳豆
山东青岛
河北保定
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牛月白黄射赤土紫远
北方很结线虫
景田三七
勒葵罗龙
半 枝 莲
大 丽 菊
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6 5 2 林 业 科 学 研 究 1 卷
续表 1
种 名 采 集 地 寄主 植物 寄 主 植 物 学 名 生理小 种 宙 筋 语
广西 南宁
,
,
,
,
鸡 冠 花
夙 仙 花
雍 菜
胡 萝 卜
姜
南方很幼 狡虫
,
广西伙州
广 东
广东番 禺
广东屯昌
云南景洪
云南西双版纳
,
云南恩茅
上 祥
翻南洪江
河甫新郑
河南开封
河南折郑
河南开封
宁X 很川
映西西安
北 京
黑龙江大庆
仙 容 来
芹 菜
黄 瓜
落 茄
茄 子
四季海案
桑 树
四季海棠
若 茄
C e lo sia sP
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椒茄菜子辣若芹茄抹蕃
爪哇很给线虫
广西钦州
福建皿 门
云甫昆明
广西 南宁
芹 莱
冬 珊 瑚
青 阳 参
茄 子
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5
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J-
2
。 醋 酶语种内稳定性分析
(l) 寄主植物对醋酶的影响 选 用 采 自 广西南宁不同寄主 _ _匕的南方根结线虫 8 个样本
(见表 l ) , 接种于各自的原寄主种类上 。 采自青岛月季上的北方根结线虫和云南昆明青阳参
上的爪哇根结线虫分别同时接种于原寄主种和蕃茄上 。 采 自河北保定的北方根结线虫的13 个
样本 (见表 1 ) , 直接用于醋酶分析 , 未接种 。
(2) 不同地理来源及 ,l’;I 司寄主生理小种对醋酶的影刚 选用采 自广东 、 广西 、云南 、河南
及黑龙江的蕃茄 ; 广东、 广西的辣椒 , 广东、 河南的茄子及广西 、 湖南、 河 南的芹菜上的南
方根结线虫共1 5个样本进 行分析。 寄主生理小种有 1 号、 2 号两种。 接种寄主相对应的分别
为 R u tg e r s 蕃茄 、 辣椒、 茄子 、 芹菜。
(3 ) 温室内培养及田间自然情况下同种线虫的醋酶分析 室内培养的线虫为青岛月季上
的北方根结线虫 , 接种寄主为 R ut ge rs 蕃茄。 田间自然情况下的北方 根 结线 虫来源同 (l ) 。
(4) 寄主营养条件对醋酶谱的影响 选用云南西双版纳蕃茄上的南方根结线虫及海南岛
6 期 胡凯基 : 醋酶在根结线虫分类上应用的研究 6 5 3
尖峰岭青皮象耳豆上的象耳豆根结线虫 , 各接种于两盆 R ut ge rs 蕃茄 , 其中一盆中期施肥一
次 , 另一盆只浇水作为对照 。 施肥量为尿素 5 9 /株 。
(5) 室内培养世代对线虫醋酶的影响 选用云南昆明青阳参上的爪哇根结线虫 , 用10 个
卵块接种蕃茄。 2 个月 为一代 , 再从中任选10 个卵块 , 继续接种。 对其第 1 、 3 、 6 代进行
醋酶分析。
(6 ) 不同加样量对醋酶谱的影响 选用云南西双版纳蕃茄上的南方根结线虫 、 昆明青阳
参上的爪哇根结线虫 、济南一串红上的花生根结线虫、青岛月季上的北方根结线虫及海南尖峰
岭青皮象耳豆上的象耳豆根结线虫 , 分别接种于蕃茄上。 每种根结线虫分别 以 1 、 2 、 4 、
8
、
16 个产卵期雌虫的匀浆为一个电泳样品 , 作醋酶电泳分析 。
3
. 不同发育阶段的线虫的醋薛
卵 : 选用云南思茅蕃茄上的南方根结线虫、 广西钦州芹菜上的爪哇根结线虫及青岛月季
上的北方根结线虫分别接种于蕃茄上 , 于雌虫产卵期收集卵块 , 装入含50 m l、 1 . 05 % N a 0 C
溶液的三角瓶中 , 用力振荡 3 m in , 然后顺序通过 20 目及 5 0 目的筛子 , 用 水冲洗5 0 目筛
子上的卵 , 收集并计数 , 每 1 0 0 个卵为一电泳样品 [ 7 ] 。
二龄幼虫 : 将新鲜卵块置于用小塑料盒制成的湿室中 , 于28 ℃下培养48 h 。 镜检计 数 ,
每2 0 0 条幼虫为一电泳样品。
雌虫 : 产卵期的雌虫。
4
. 电泳 12 , ’0 ]
醋酶浸提液的配制 : 2 0 % (w / v )蔗搪(或甘油) , 2 % T r it o n X 一1 0 0 , 定容至 1 0 0 m l。
制样 : 将前述得到的卵用吸管移入微型研磨管 , 加一小滴浸提液 (4 ℃) , 研磨至 匀 浆 ,
再加浸提液 , 使样液约 10 一1 5 川。 再移入毛细离心管 , 置 一 15 ℃ 下 待用。 幼虫制样 同 上。
雌 虫为直接在解剖镜下从新鲜根上挑出完整的虫体 , 其余同上 。
离心 : 电泳前 , 将所制样品于 1 3 0 0 0 9 下离心 15 m in ( 4 ℃ ) , 取其中层清液作为电泳徉
品。
电泳 : 凝胶厚约 1 m m , 分离胶、 浓缩胶浓度分别为7 % 、 3 % 。 电泳初期 o . s h , 电压为
80 v
, 随后调至 2 0 0一 30 v 。 电泳于 4 ℃下进行 , 电泳毕于 37 ℃下染色约 l h , 染色后的凝胶保
存于7 %的 乙酸溶液中。 染色液的配制 : 先后将 E D T A 30 m g , 坚牢兰 R R 60 m g 溶于 10 。
m l
、
p H 了. 2的磷酸缓冲液中 , 再将40 m g a- 醋酸蔡醋溶于 2 m l丙酮中 , 逐滴加入到缓冲液
中 , 并同时搅拌 , 然后将染液过滤 , 除去不溶物 即可 。 染液在用前 0 . s h 时配制。
由于凝胶电泳迁移率变化的问题 , 因此在每次电泳时都加入采自青岛月季上的北方根结
线虫的样品 , 作为内部对照。
在所有的电泳分析中 , 每个样本至少连续分析两个世代 , 每个世代至少重复电泳 3 次。
除不同发育阶段及加样量变化的分析外 , 均采用产卵期的雌虫 , 每两个雌虫为一电泳样品。
二 、 结 果
(一 ) 不同种根结线虫的菌蔺借有明显差异
根结线虫的醋酶谱大致可分为 2 个区域 , 校正迁移率 (将作内部对照的北方根结线 虫 的
6 5 4 林 业 科 学 研 究 1 卷
⋯⋯.
;
.曲
⋯:
唯一主要带定为0 . 50 , 其余各带与之相 比即
可 。 以下简称迁移率) 0 . 0 一 0 . 30 , 0 . 30 一
1
。
0
。其中具有种的特征性的酶带 在 后一区
域 。 前一区域无确定酶带。 每种根结线虫各
主要醋酶带的迁移率见表 2 。
从电泳分析的结果可 以看出 , 不同种根
结线虫各自有特异而稳定的醋 酶 型 (图 1 、
图版 I 一 1 ) 。 酶谱的特异性表 现 在酶 带 的
数目、 迁移率及染色程度各有不同 。 其中花
生根结线虫有 3 种类型的醋酶借。
(二 ) 同种根结线虫的困醉谱是雄定的
1
. 对来自同一地区而接种寄主不 同 的
A , A , E : H 一 1i J ,
.凡
,J
4
1‘J
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赞协报圈那
图 1 示 5 种很结线虫的劝醉瀚
A :
、
A :
、
A 3 为花生根结线虫 , E : 为象耳 豆根结线虫 ,
H l为北方根结线虫 , 卜 为南方根结线虫。 J J 为爪哇
根结线虫
. 为主要山醉带。 姗 : 为次带
南方根结线虫样本的分析表明 , 这些不同的样本无一例外地具有迁移率 o 。 47 的特征性酶带 ,
并不因寄主植物不同而产生差异 。 尤其是对寄主植物亲缘关系相差极大的北方根结线虫13 个
样本的分析 , 更表明了这一点 (见图版 工一 6 )o
衰 2 不同种根结幼虫各主典. 醉带校正迁移率
花生根结线虫
0
。
5 0
0
.
54
0
.
5 7
象耳豆根结线虫 北方根结线虫 南方根结线虫 } 爪哇根结 线虫
::
2
. 结果表明 , 同种根结线虫寄生于不同地区的相同寄主上时 , 其酣酶谱不变。 同种根结
线虫的不 同生理小种的醋酶谱一致 (图版 工一 4 ) 。
3
. 室内培养及来自田间自然条件下的北方根结线虫均具有迁移率。. 50 的酶带 , 未受培养
条件的影响 。
4
. 南方根结线虫及象耳豆根结线虫分别寄生于营养条件不同的寄主时 , 醋酶谱不 受 影
响 (图版 I 一 2 ) 。
5
. 同种根结线虫不同培养世代的醋酶谱无差异 。
6
. 醋酶谱同加样量有关 , 随加样量成倍增加 , 一些在加样量少时检测不出的带开 始 出
现 。 象耳豆根结线虫在加样量达到 8 、 16 个雌虫时 , 多出两条迁移率 0 . 58 、 。. 60 的浅色带。
共同的变化趋势是 , 随加样量增加 , 各酶带染色加深 、 区域增大 , 并有逐步融合之势。 但在
1 一16 个雌虫的范围内 , 仍基本保持种的特征性酶谱 (图版 工一 5 、 8 、 9 )。
(三 ) 不同发, 阶段线虫的目醉漪不同
南方根结线虫的卵样中未见有主要醋酶带 , 幼虫则有一条同雌成 虫相似的带 , 但酶带的
染色程度及范围均低于雌成 虫 , 同时也没有雌成虫具有的一些浅色带 (图版 I 一 3 )。 爪哇 根
结线 虫、 北方根结线虫的变化趋势同南方根结线虫相类似 。 共同的特点是卵样中未检出主要
醋酶带 , 幼虫具有同雌成虫类似的酶谱 , 也具有种间特异性。
上述各项试验外的样本的结果见表 l 和图版 I 一 7 ,
6 期 胡凯基 : 醋酶在根结线虫分类上应用的研究 6 5 5
三 、 讨 论
通过对根结线虫 5 个种47 个样本的醋酶电泳分析 , 证明不同种根结线虫的非特异性醋酶
谱是不同的 , 同时 , 同一种根结线虫的醋酶谱是稳定的 , 未受寄主、 环境条件、 培养世代、
寄主营养条件等因素的影响。 另外 , 根结线 虫的醋酶谱和以形态特征为依据的分类系统是一
致的。 因此非特异性醋酶电泳分析是种较好的分类方法 , 尤其是对一些主要形态特征变异较
大的群体。 如河南禹县揪树上的花生根结线虫 , 其会阴花纹变异很大 , 有两条类似侧线的结
构 , 极易误为爪哇根结线虫 ; 电泳分析表明 , 其醋酶谱属于花生根结线虫 , 对其它特征的深
入研究 , 也确认其为花生根结线虫 。 由于有关线虫生化分类的研究还不多 , 因而目前只能作
为形态学分类的辅助方法 , 但从其分析客观 、 迅速和其它一些形态学方法所没有的优点 以及
生化分类的理论上看 , 是很有发展前途的。
在电泳分析中常常存在酶带迁移率变化的问题 。 在本研究中 , 各酶带的实际迁移率略大
于已有的报道 , 但若以内部对照—北方根结线虫的唯一主带定为。. 50 , 则各带的校正迁移率同已有的报道完全一致 I’, ‘“1。 因此 , 采用校正迁移率更为可靠 。 由于各带的校 正 迁移 率
是恒定的 , 如南方根结线虫的主要酶带的校正迁移率为。. 47 , 北方根结线虫为。. 5。, 那么 ,
进行醋酶 电泳分析时 , 只要用任一已知种作内部对照 , 即可由其校正迁移率推算 出 未知 种
(样本 )的校正迁移率 , 从而提高不同电泳间 、 不同研究者间电泳结果的可比性。
线虫的发育阶段不同 , 醋酶谱不同 , 相对地讲 , 雌成虫的醋酶谱明显 、 稳定 , 并且制祥
简便 , 因此 , 今后的研究宜采用雌成虫作电泳分析。
从对不同加样量的对比分析中可以看出 , 1 一16 个雌虫的电泳样品均可表现出种的特征
性醋酶谱 , 因此 , 用许多单个雌虫的样品进行电泳 , 根据醋酶谱就可将混合侵染样本中的不
同种纯化分离 , 这对于在混合侵染情况下由于形态变异而使形态学分类变得困难时显得尤为
有用 。 作为常规分析 , 1 一 4 个雌虫为一电泳样品较为简便 、 准确。
参 考 文 献
〔i 〕 E ise n b a e k , J . D . e t a l . , lo al , (杨宝君译 , 1 9 5 6 ) , 四 种最常见根结 线虫分类指南 , 云 南人民 出版社 , i一4。。
〔2 〕袁晓华等 , 19 83 , 植物生理生化实验 , 高 等教育 出版社 , 2 3 一2 4 5 。
[ 3 〕 D ie k s o n , D . W . e t a l. , i , 7 0 , C o m P a r a t iv e d is e 一 e le e tr o p h o re ti e p r o te in a n a ly s e s o f s e le e te d
M
e lo id o卯” 曰 , D ‘tg le n e h“ s , H e te r o d er a , a n d 月夕he le o e h o s s p p . , Jo u r n a l o f N e m a to lo g y , 2 (4 ) :
2 8 6一2 9 3 .
[ ‘〕 D i e k s o n , D . W . e t a l. , 1 0 7 1 , D e h y d r o g e n a se s , a e id a n d a lk a lin e p h o sPh a t a s e s a n d e s t . r a s e s
fo r e h e m o t a x o n o m y o f s e le e te d M
e lo id o 卯”e , D ‘t , Ie , e h“ s , H e te r o je r。, a n d 月 p he le o e hu s sp p . ,
Jo u r n a l o f N e m a to lo g y
,
3 (i ) . 1一 16 .
〔s 〕 Ish ib a s h i, 付 . , i, 7 0 , V a r ia t i o n s o f t h e e le e tr o p ho r e t ie p r o t e ln p a tt e r n s o f H e te r o d e r泣d a e
(N e m a to d e a : T y le n e h id a ) d e P e n d 王n g o n th e d e v e lo Pm e n t a l st a g e s o f t he n e m a to d e a n d o n
g r o w i n g e o n d it io n s o f t he h o s t P la n t s
,
A PP I
.
E n t
.
2 0 0 1
. ,
s (i )
: 2 5一3 2 .
[ a 〕 H u s se r , R . 5 . e t a l. , 1 9 7 2 , D i se 一 e le e tr o Pho r e t i e stu d ie , o f so lu b le Pr o te i n s a n d e n z y m e s o f
M
e lo id o 卯目 e eo c o 夕。sta a n d M . a r e n a r ‘a , Jo u r n a l o f N e m a t o lo g y , 一(3 ) . 1 5 3一 1 5 0 .
〔7 〕H u s se r , R . s , e t 拜1. , 1 97 3 , A e o m p a r五so n o f m e th o d s o f e o lle e t in g in o e u la o f M e lo ‘J o g , ”毋
6 5 6 林 业 科 学 研 究 l卷
s p p
. ,
in e lu d in g a n e w te e h n iq u e
,
P la n t D is e a s e R e P o r te r
,
5 7 (12 )
:
1 0 2 5一1 0 2 8 .
〔s〕 D a lm a s s o , A . e t a l . , 1 9 78 , M o le e u la r P o ly m o r Ph is m a n d Ph y lo g e n e t ie r e la t io n , h ip i n , o m e
M
e lo i d o 夕, 。尸 s p p . : A p p lie a tio n t o t he t a x o n o m y o f M e lo ‘d o g 夕n e , Jo u r n a l o f N e m a to lo g y ,
10 (4 ): 3 2 3一 33 2 .
[ , 〕 J a n a t i, A . e t a l. , 19 8 2 , N o u v e lle s d o n n e e , s u r l’u t ilis a t io n d e s is o e s te r a s e , P o u r l’id e n t if卜
e a t泣o n d e s 对 e lo ‘d o 夕, 。e , R e v u e d e N e m a t o lo g y , 5 (1 ) : 1 4 7一 15‘.
[ 1 0 ] E s b e n s h a d e
,
P
.
R
.
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. ,
2 98 5
,
U se o f e n : vm e p h e n o ty p e s fo r id e n t ifie a t io n o f M
e lo id o 夕, 。 e
s Pe e ie s
,
Jo u rn a l o f N e m a to lo g y
,
1 7 (i )
:
6一2 0 .
ST U D Y ON T H E APPLICAT 10 N OF E ST E R ASE PH E NOT YPE S
IN T HE T AX ONOMY OF M E L O ID O G y N E SPP
.
H u K a iji
(T he R e se a r e人 I o s t‘fo te o f F o r e s t即 C A F )
A b st r扭Ct
T he a u th o r u se d Po lya e ryla m id e g e l ele e tro Ph o r es is m e th o d to e o m Pa r e
th e e s te ra s e is o z ym e s o f 4 7 is o la te s o f 5 M e lo id o g 今n e s Pp . o r ig in a te d fr o m 1 4
Pro v in e e s (e itie s ) in Chin a
.
S o m e fa e to r s w hiC h m ay be a ffe e t e n z ym e ph e n o tyPes
w e r e a lso s tu d ie d
.
T h e re s u lt sho w e d th a t the est e ra s e Ph e n o type s o f e g g
一
la yin g
fe m a le w e r e e v id e n t
, sta b le a n d sPe e ie s s Pe e ifie
.
It w a s s ta b le in tr o sPe e ie s
to o
.
C o m Pa ris o n o f s tu d ie s o n in o e u la te d Pla n ts
, o r ig in o f is o la te s
, p llys io lo gi ca l
ra e e s , e u lt u re in g r ee n ho u s e a n d fro m Pla n ts in ffec t ed n a tu ra lly
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Ph e n o ty Pe s
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Sin e e the p h e n o ty p e s w e r e n o t the sa m e in d iffe r e n t d e v elo pm e n ta l s ta g e s
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记e n tifie a tio n 15 s im Ple a n d re lia b le .
K e y w o rd s
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