Five wood rot fungi were used to decay 300 mature trees of white birch (Betula platyphylla) in Liangshui experiment stations. The decaying susceptible and resistant populations in 10 trees each with the highest and lowest weight loss were selected, in which total phenol in wood was tested. The result showed that the birch wood with lower total phenol was easy to be decayed by Fomes fomentarius and Piptoporus betulinus; Irpex lacteus, Pholiota adiposa and Coriolus versicolor were not sensitive to total phenol in white birch wood. After GC-MS test to methanol extractionof white birch wood, 6 organic compounds were found. This paper would provide some useful information in future study difference in the chemical characteristics of the wood between decaying susceptible and resistant populations, and select natural anti-decadent plants.
全 文 :第 !"卷 第 #$期
$ % % &年 #$ 月
林 业 科 学
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3456,
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白桦木材中总酚含量与抗木材腐朽菌的关系"
刘 欣 吕世翔 王秋玉
(东北林业大学生命科学学院 哈尔滨 #"%%!%)
关键词: 白桦;木材腐朽菌;易腐群体;抗腐群体;总酚
中图分类号:’7&$2#"8 文献标识码:- 文章编号:#%%# 9 7!::($%%&)#$ 9 %#!; 9 %8
收稿日期:$%%& 9 %: 9 %!。
基金项目:黑龙江省科技攻关重大项目(<-%;=8%#)资助。
"王秋玉为通讯作者。
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(!"##$%$ "& ’(&$ )*($+*$,,"-./$01. 2"-$1.-3 4+(5$-1(.3 60-7(+ #"%%!%)
8,)%2$3%: J>K4 L00M N0O P?AF> L4N4 ?Q4M O0 M45EI 8%% REO?N4 ON44Q 0P LC>O4 S>N5C(8$.9#0 :#0.3:/3##0)>A .>EAFQC?> 4DT4N>R4AO
QOEO>0AQ6 ,C4 M45EI>AF Q?Q54TO>S14 EAM N4Q>QOEAO T0T?1EO>0AQ >A #% ON44Q 4E5C L>OC OC4 C>FC4QO EAM 10L4QO L4>FCO 10QQ L4N4
Q4145O4M,>A LC>5C O0OE1 TC4A01 >A L00M LEQ O4QO4M6 ,C4 N4Q?1O QC0L4M OCEO OC4 S>N5C L00M L>OC 10L4N O0OE1 TC4A01 LEQ 4EQI O0 S4
M45EI4M SI 2";$1 &";$+.0-(91 EAM <(:.":"-91 7$.9#(+91; =-:$> #0*.$91,"#(".0 0?(:"10 EAM !"-("#91 5$-1(*"#"- L4N4 A0O
Q4AQ>O>K4 O0 O0OE1 TC4A01 >A LC>O4 S>N5C L00M6 -PO4N <(UV’ O4QO O0 R4OCEA01 4DONE5O>0A0P LC>O4 S>N5C L00M,; 0NFEA>5 50RT0?AMQ
L4N4 P0?AM6 ,C>Q TET4N L0?1M TN0K>M4 Q0R4 ?Q4P?1 >AP0NREO>0A >A P?O?N4 QO?MI M>PP4N4A54 >A OC4 5C4R>5E1 5CENE5O4N>QO>5Q 0P OC4
L00M S4OL44A M45EI>AF Q?Q54TO>S14 EAM N4Q>QOEAO T0T?1EO>0AQ,EAM Q4145O AEO?NE1 EAO>UM45EM4AO T1EAOQ 6
9": -’24): LC>O4 S>N5C(8$.9#0 :#0.3:/3##0);L00M N0O P?AF>;Q?Q54TO>S14 T0T?1EO>0AQ;N4Q>QOEAO T0T?1EO>0AQ;O0OE1 TC4A01
腐朽是木材最严重的生物破坏,它能引起木材
结构损坏,造成经济上的巨大损失。白桦( 8$.9#0
:#0.3:/3##0)是极易腐朽的树种(李坚,$%%$)。本文利
用 "种木材腐朽菌对白桦进行生物降解,根据质量
损失率筛选出易腐和抗腐植株,进一步研究易腐和
抗腐白桦总酚含量的差异与木材腐朽抗性的关系。
为今后在林木遗传改良中筛选适宜的天然抗腐朽植
株提供理论基础,同时也为森林培育、木材利用等方
面的研究提供相关信息,减少防腐剂的使用,降低防
腐剂对环境的污染。
从现有的研究结果看,高等植物中抗菌的有效
成分主要为香精油、多酚、黄酮类等。黄梁绮龄等
(#&&!)从香港地区红树植物榄李( ’9;(+(.@$-0
-0*$;"10)中萃取分离到单宁(多酚),证明是抑菌的
主要活性成分,其他黄酮类似物、脂肪也有一些抑菌
能力。赵纯森等(#&&!)通过 ,.(证明厚朴酚及和厚
朴酚是粗提物中抗菌的主要有效成分。
; 材料与方法
#2# 试验材料 $%%"年 :月,在黑龙江省带岭林业
局凉水林场白桦天然成熟林($% 年以上)选择优树
8%%株,在胸高位置用木材生长锥(直径 " RR)钻取
木样,9 $% W保存。
$%%"年 &月,在黑龙江省尚志地区帽儿山林场
采集 " 种 木 材 腐 朽 菌:木 蹄 层 孔 菌( 2";$1
&";$+.0-(91)、彩绒革盖菌(!"-("#91 5$-1(*"#"-)、白囊耙
齿菌( =-:$> #0*.$91)、黄伞("#(".0 0?(:"10)和桦剥管
菌(<(:.":"-91 7$.9#(+91)的子实体,组织分离得到纯
菌丝,在木屑培养基(张莆安,#&&$)中! W保存。
#2$ 主要仪器和试剂 紫外分光光度 X/ $%%% 型
(尤尼柯仪器有限公司),气相色谱质谱 <(UV’3
;:&%+U"&78>AQ4NO(-F>14AO 公司)。单宁酸(色谱纯,
’>FRE公司),其他试剂均为国产分析纯以上。
#28 试验方法 #)白桦木材的天然耐腐性测定
"种木材腐朽菌分别腐朽这 8%% 株白桦木材样品,
参照 <=Y, #8&!$2# 9 &$《木材天然耐腐蚀性实验室
试验方法》,略做修改,8 个重复。按每种白腐菌腐
朽每株白桦木材后的结果,将质量损失最大和最小
的各 #%株白桦组成抗腐和易腐白桦群体,共 #% 个
白桦群体,对这些筛选出的白桦进行 $次取样,在上
次取样位置上下 $% 5R以外,再次取生长锥木样,粉
碎成 !% Z #%%目,9 $% W保存。
$)白桦木材总酚含量检测 采用 J01>AU
(>05E1O4?技术,选择单宁酸为标准物质绘制标准曲
线,用于测定白桦木材心材中的总酚类物质含量。
! 总酚的震荡萃取方法 称取 !"# $木样溶于
% &’溶剂((!)丙酮 * +!)水)中,在试管震荡器上
震荡,放在平板摇床上,+!! ,·&-./ #震荡 0! &-.。离
心 0 &-.(1 0!! ,·&-./ #,+! 2)。上清液转移到#! &’
离心管中。用 +"% &’的溶剂洗涤沉淀 + 次。震荡
方法同上,平板摇床上,震荡 % &-.,离心。上清移到
管中,定容至 #! &’。
" 总酚含量测定的操作步骤 3" 分别向 +个
#! &’容量瓶中加入酚类化合物萃取液 #!!#’,加
入 #"4 &’ 蒸馏水,手动震荡混匀;5" 加入 # &’
678-.9:-7;<8=>?试剂,用力震荡,然后立即加入 % &’
+!)碳酸钠溶液,震荡容量瓶,加水将容量瓶定容
#! &’;:" 将容量瓶中的液体转移到 #! &’试管中,
离心(1 0!! ,·&-./ #,+! 2);@" 利用分光光度计在
A(! .&处,进行样品吸光度的检测;B" 试验结果单
位用单宁酸等价物(C3B)来表示:#$C3B·$
/ #。
$ 标准曲线的绘制 用单宁酸作为衡量白桦
心材中总酚类物质含量的标准。标准液采用 #!! &$
单宁酸加蒸馏水定容到# !!! &’。
0)白桦木材甲醇萃取液的气相质谱检测 取
!"# $木粉(健康白桦木材),用甲醇(分析纯)按白桦
木材总酚含量检测中的震荡方法萃取,溶剂总量减
半为 % &’,取 # &’萃取液,室温浓缩约为 #D0体积,
进行气相 /质谱检测。
!色谱条件 毛细管色谱柱 @59#AEF,柱长
0! &,内径 !"+% &&,膜厚 !"+%#&,汽化室+A! 2,载
气氦气,柱流量 # &’·&-./ #,不分流进样,进样量
##’。柱温:1! 2保留 1 &-.,以#! 2·&-.
/ #’/ #至
#G% 2保留 #% &-.,以 % 2·&-./ # ’/ #至+!! 2保留
+ &-.,以 #! 2·&-./ #’/ #至 +%! 2保留 #! &-.。H:9
EF@接口温度 +(! 2。
"质谱条件 电离源 BI,电子能量 A! >J,离子
源温度+0! 2,扫描范围 #% K %!! <&?(原子质量单
位)。
1)数据处理方法 用 FLFF软件对测得数据进
行统计分析。
! 试验结果
+"# 单宁酸标准曲线的绘制 根据总酚含量的检
测方法,取不同浓度的标准品溶液在 A(! .&波长下
检测对照样品吸光度,根据检测结果绘制的标准曲
线见图 #。对数据进行回归分析得到标准曲线的回
归方程为:! M !"!!A A" / !"!!4 +(! 为吸光度," 为
样品中多酚含量),#+ M !"44% 4,在 ! K %!#$·&’
/ #浓
度范围内对照品的量与吸光度有良好的线性关系,
从图 #中可以看出标准曲线近似一条直线,且理论
计算的相关系数为 !"44% 4,与朗伯 / 比尔定律
相符。
图 # 单宁酸含量与吸光度关系的标准曲线
6-$N# F=<.O<,O ;?,P>
+"+ 白桦木材总酚含量测定 检测筛选出的抗腐
易腐白桦木材中总酚含量,对结果进行方差分析,发
现植株间差异极显著,$ M ##G"4!!!!。对每组筛选出
的抗腐和易腐白桦群体间进行总酚含量比较(图
+),并进行 % 检验。
图 + 抗腐和易腐白桦群体间总酚含量
6-$N+ C7=<8 TU>.78 Q>=V>>. =U> R?R;>T=-Q8> <.O
,>R-R=<.= T7T?8<=-7.R -. VU-=> Q-,;U V77O
木蹄层孔菌和桦剥管菌筛选出的白桦木样中,
易腐群体的总酚含量要显著性低于抗腐群体,% M
+"00#!,+"1%+!,说明这 +种木材腐朽菌对木材中的
酚类物质敏感。
白囊耙齿菌、黄伞和彩绒革盖菌筛选出的白桦
木材中,易腐群体和抗腐群体的总酚含量无显著性
差异,说明这 0种木材腐朽菌对木材中的酚类物质
不敏感。
+"0 白桦木材甲醇萃取液的 H:9EF检测结果 图
0给出了白桦木样的甲醇提取物的 H:9EF 总离子
流,可以看出,样品中至少有几十种物质,与现有谱
库对照可以确定 G种化学物质的组成,列于表 #。
A1#第 #+期 刘 欣等:白桦木材中总酚含量与抗木材腐朽菌的关系
图 ! 甲醇萃取白桦木材总离子流图
"#$%! &’()* #’+ ,-../+( 01 2/(3)+’* /4(.),(/5 6.’2 73#(/ 0#.,3 7’’5
表 ! 甲醇萃取白桦木材中的物质
"#$% ! &’()’*+,- ./01#20., $3 (.04#+’5 61’( 7480. $8124 7’’,
编号
8’% 名称 9:/**)(#’+
相对分子质量
;/*)(#
2’*/,-*). 2)==
分子式
>’*/,-*). 6’.2-*)
匹配度
>)(,3#+$
相对含量
;/*)(# ,’+(/+(?@
A 8,8 B C B甲基 B十六烷胺 8,8D5#2/(31*DAD3/4)5/,)+)2#+/ CEF GAHI!F8 HE AJKJCC
C !,L,M B三甲氧基苯酚 !,L,MD&.#2/(3’41:3/+’* AHL GFIACNL FL AKJO!
! 十六酸甲酯 >/(31* 3/4)5/,)+)(/ CJO GAJI!LNC FF AKACO
L 十六碳烯酸 !DI/4)5/,)+’#, ),#5 CME GAEI!CNC FE CK!CH
M AA,AL B十八碳二烯酸甲酯 >/(31* AA,ALDN,()5/,)5#/+)(/ CFL GAFI!LNC FF !KFCF
E 亚油酸(",")B F,ACDN,()5/,)5#/+’#, ),#5 CHO GAHI!CNC FH EK!JJ
E种物质分别为 8,8B C B甲基 B十六烷胺、!,L,M
B三甲氧基苯酚、十六酸甲酯、软脂酸、AA,AL B十八碳
二烯酸甲酯和亚油酸,均为已知的天然物质。!,L,M B
三甲氧基苯酚属于酚类物质,具有抗菌活性。
用分光光度法检测白桦木材中的酚类物质含量,
并比较酚类物质含量与白桦木材抗木材腐朽菌的关
系。本文用 PGD>Q法进一步检测到白桦木材中酚类
物质之一———!,L,M B三甲氧基苯酚,充分说明白桦
木材中含有酚类物质,并且酚类物质的含量与白桦木
材抗木蹄层孔菌和桦剥管菌的能力呈正相关。
9 结论与讨论
不同木材腐朽菌对白桦木材中的总酚含量的敏
感性不同,木蹄层孔菌和桦剥管菌对白桦木材中的
总酚含量敏感;白囊耙齿菌、黄伞和彩绒革盖菌对
白桦木材中的总酚含量不敏感。>).((# 等(COOL)对
抗腐和易腐(利用粉孢革菌进行腐朽筛选)欧洲赤松
(#$!%& &’(’)*&+,$&)的心材进行总酚含量的测定,发现
抗腐植株中总酚含量高。9*’-# 等(COOL)证明了欧
洲栎树(-%*,*%&)木材中酚类抽提物与木材对白腐
菌的耐受性之间具有明显的正相关。
!,L,M B三甲氧基苯酚属于酚类物质,具有抗菌活
性。廖永红等(AFFF)用色谱技术从药用植物黑风藤
(.$&&$&+$/01 23’(1!+4%0)中分离纯化到 !,L,M B三甲氧
基苯酚 B A B N B! B R B 葡萄糖苷(!,L,MD
(.#2/(3’41:3/+1*DADND!DRD$*-,’=#5/)。!,L,M B三甲氧基
苯酚的衍生物 !,L,M B三甲氧基苯甲醛和 !,L,M B三甲
氧基苯甲酸甲酯都是抗菌增效药的中间体。衍生物 A,
CB甲氧基苯酚又名愈创木酚,是木材干馏油中的主要
成分。衍生物丁香酸存在于唇形科植物石香薷(53&’1
64$!*!&$&)全 草,豆 科 植 物 白 花 油 麻 藤( 5%6%!1
7$,89338$1!1)藤茎、密花豆(:21+43’37%& &%7*,*6+%&)藤茎
中,有抗菌作用,对细菌、真菌均有效。
参 考 文 献
黄梁绮龄,陈培榕 % AFFL % 香港地区红树植物资源研究(")红树植物
;%0!$+<*,1 ,16*03&1(榄李)抑制植物真菌有效成分的分离与鉴
定 %天然产物研究与开发,E(C):E B AA%
李 坚 % COOC % 木材科学 % 北京:高等教育出版社 %
廖永红,郭 剑,徐丽珍,等 % AFFF % 黑风藤的化学成分 % 药学学报,!:
!C B !L%
张莆安 % AFFC % 食用菌制种指南 % 上海:上海科学技术出版社 %
赵纯森,黄俊斌 % AFFL % 厚朴叶中抑菌活性成分鉴别及其防病效果 %
华中农业大学学报,A!(L):!J! B !JJ%
9*’-# ",91)5# 8% COOL % R-.)0#*#(1 ’6 S-.’:/)+ ’)T(-%*,6%& 2*+,11*1 )+5
-%*,6%& ,37%,))$)#+=( 73#(/ .’( 6-+$#( =3,$3’%& )*,&$63’3,):./*)(#’+=
7#(3 :3/+’* /4(.),(#=% I’*U 9*= ;’3D-+5 V/.T=(’66,EC(L):CHE B
CFO %
>).((# W,9++# > I,X/TT) Q,*+ 1’ % COOL % &3/ ,’+,/+(.)(#’+ ’6 :3/+’*#,= #+
0.’7+D.’( 5/,)1 ./=#=()+( )+5 =-=,/:(#0*/ Q,’(= :#+/ 3/).(7’’5% V’’5
Q,# &/,3+’*,!H:AOF B AAH %
(责任编辑 石红青)
HLA 林 业 科 学 LM卷