全 文 ：第 源苑 卷 第 苑 期
圆 园 员 员 年 苑 月
林 业 科 学
杂悦陨耘晕栽陨粤 杂陨蕴灾粤耘 杂陨晕陨悦粤耘 灾燥造郾 源苑袁晕燥郾 苑允怎造援 袁圆 园 员 员
外源 郧粤猿 对白桦成花基因影响的定量 孕悦砸分析
魏志刚摇 钱婷婷摇 张凯旋摇 刘关君摇 刘桂丰摇 杨传平
渊东北林业大学摇 林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室摇 哈尔滨 员缘园园源园冤
关键词院摇 白桦曰 外源 郧粤猿曰 成花诱导曰 实时荧光定量 孕悦砸曰 开花基因
中图分类号院 杂苑员愿郾 源猿曰 杂苑员愿郾 源远摇 摇 摇 文献标识码院粤摇 摇 摇 文章编号院员园园员 原 苑源愿愿渊圆园员员冤园苑 原 园员愿苑 原 园远
收稿日期院 圆园员园 原 员园 原 园怨曰 修回日期院 圆园员员 原 园猿 原 圆远遥
基金项目院 国家自然科学基金项目野白桦 云栽及 杂韵悦员 基因的 砸晕粤蚤研究冶渊猿园怨苑圆猿愿缘冤遥
耘枣枣藻糟贼 燥枣 耘曾燥早藻灶燥怎泽 郧粤猿 燥灶 云造燥憎藻则蚤灶早 郧藻灶藻泽 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 月藻贼怎造葬 责造葬贼赠责澡赠造造葬 遭赠
砸藻葬造鄄栽蚤皂藻 云造怎燥则藻泽糟藻灶贼 匝怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 孕悦砸
宰藻蚤 在澡蚤早葬灶早摇 匝蚤葬灶 栽蚤灶早贼蚤灶早摇 在澡葬灶早 运葬蚤曾怎葬灶摇 蕴蚤怎 郧怎葬灶躁怎灶摇 蕴蚤怎 郧怎蚤枣藻灶早摇 再葬灶早 悦澡怎葬灶责蚤灶早
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 云燥则藻泽贼 栽则藻藻 郧藻灶藻贼蚤糟 陨皂责则燥增藻皂藻灶贼 葬灶凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 燥枣 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 耘凿怎糟葬贼蚤燥灶摇 晕燥则贼澡藻葬泽贼 云燥则藻泽贼则赠 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠摇 匀葬则遭蚤灶 员缘园园源园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院摇 栽澡蚤泽 泽贼怎凿赠 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 早蚤遭遭藻则藻造造蚤灶 燥灶 枣造燥憎藻则 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 燥枣 月藻贼怎造葬 责造葬贼赠责澡赠造造葬 葬灶凿 贼澡藻 责燥泽泽蚤遭造藻
皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 蚤灶 贼澡藻 责则燥糟藻泽泽援 陨灶 贼澡蚤泽 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼袁 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 郧粤猿渊缘园袁员园园袁圆园园 皂早窑蕴 原员冤 憎藻则藻 泽责则葬赠藻凿 燥灶 贼澡藻造藻葬增藻泽 燥枣 月援 责造葬贼赠责澡赠造造葬 葬贼 贼澡藻 泽贼葬早藻 燥枣 枣造燥憎藻则 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶援 栽澡藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 噪藻赠 早藻灶藻泽 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 月援 责造葬贼赠责澡赠造造葬 枣造燥憎藻则
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 蚤灶 贼澡藻 葬责蚤糟葬造 皂藻则蚤泽贼藻皂 憎葬泽 泽贼怎凿蚤藻凿 凿怎则蚤灶早 贼澡藻 责藻则蚤燥凿 燥枣 枣造燥憎藻则蚤灶早 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 遭赠 砸栽鄄孕悦砸援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿
贼澡葬贼 枣造燥憎藻则蚤灶早 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 月援 责造葬贼赠责澡赠造造葬 憎葬泽 蚤灶 造葬贼藻 酝葬赠 蚤灶 匀葬则遭蚤灶 葬灶凿 枣造燥憎藻则蚤灶早 贼则葬灶泽蚤贼蚤燥灶 憎葬泽 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 蚤灶澡蚤遭蚤贼藻凿 遭赠
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 郧粤猿 援 栽澡藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 枣造燥憎藻则蚤灶早鄄责则燥皂燥贼藻凿 早藻灶藻泽袁 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 蕴云再袁 郧陨袁 耘蕴云猿 葬灶凿 蕴阅袁 憎藻则藻凿蚤泽贼蚤灶糟贼 造燥憎藻则 贼澡葬灶 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 早则燥怎责袁 憎澡蚤造藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 枣造燥憎藻则蚤灶早 泽怎责责则藻泽泽燥则 早藻灶藻 云蕴悦 澡葬凿 灶燥 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 糟澡葬灶早藻泽援
栽澡藻则藻枣燥则藻袁 贼澡藻 藻曾燥早藻灶燥怎泽 郧粤猿 憎葬泽 燥枣 贼澡藻 凿蚤泽蚤灶糟藻灶贼蚤增藻 凿怎则蚤灶早 贼澡藻 枣造燥憎藻则蚤灶早 贼则葬灶泽蚤贼蚤燥灶 燥枣 月援 责造葬贼赠责澡赠造造葬援 郧粤猿 责造葬赠泽 葬灶藻早葬贼蚤增藻 则燥造藻 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 皂怎造贼蚤责造藻 枣造燥憎藻则蚤灶早 责葬贼澡憎葬赠泽 则葬贼澡藻则 贼澡葬灶 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造 燥灶藻援
运藻赠 憎燥则凿泽院摇 月藻贼怎造葬 责造葬贼赠责澡赠造造葬曰 藻曾燥早藻灶燥怎泽 郧粤猿曰 枣造燥憎藻则蚤灶早 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶曰 则藻葬造鄄贼蚤皂藻 枣造怎燥则藻泽糟藻灶贼 择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 孕悦砸曰 枣造燥憎藻则蚤灶早早藻灶藻泽
摇 摇 植物开花是高等植物由营养生长向生殖生长转
变的重要生理过程袁是个体发育和后代繁衍的中心
环节遥 赤霉素是调节植物生长发育的五大激素之一
渊栽葬噪葬澡葬泽澡蚤 藻贼 葬造援袁 员怨怨员冤袁赤霉素处理也是人工调控
植物成花的最有效途径之一袁因而成为近年来成花
机制研究领域的一个热点遥 虽然对模式植物拟南芥
渊粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬冤成花相关基因调控机制的研
究已经比较成熟袁但对高等植物成花研究多集中在
生理生化水平遥 因此袁运用分子生物学手段袁从基因
水平研究外源赤霉素对木本植物白桦 渊 月藻贼怎造葬
责造葬贼赠责澡赠造造葬冤成花的影响具有重要意义遥
蕴葬灶早则蚤凿早藻渊员怨缘苑冤发现用赤霉素渊郧粤冤处理拟南
芥可促进其提前开花遥 蕴怎糟噪憎蚤造造渊员怨苑园冤首次提出了
植物体内激素的某种平衡调控成花的假说袁认为
郧粤 辕 悦栽运 或 悦栽运 辕 郧粤 的平衡影响花芽分化袁苹果
渊酝葬造怎泽 责怎皂蚤造葬 冤短枝上花芽的形成取决于来自短枝
叶片的促花因子 渊 悦栽运冤和来自种子的抑花因子
渊郧粤冤遥 该假说得到了其他学者的证实渊运燥泽澡蚤贼葬 藻贼
葬造援袁 员怨怨怨曰 曹尚银等袁 圆园园园曰 圆园园员曰 苏明华等袁
员怨怨愿冤遥 随后的研究表明袁赤霉素对花芽分化的影
响随植物种类而异袁员怨愿猿 年 在藻藻增怎葬则贼 发现赤霉素作
用可替代春化作用促进开花遥 研究表明袁外施 郧粤猿
后袁花发育期茎尖中对成花起促进作用的赤霉素含
量迅速升高袁同时一些响应赤霉素的基因及成花关
键基因的表达量也随着增加 渊 运蚤灶早 藻贼 葬造援袁 圆园园猿曰
耘则蚤噪泽泽燥灶 藻贼 葬造援袁 圆园园远曰 郧燥糟葬造 藻贼 葬造援袁 员怨怨怨曰 圆园园员冤遥 然
而木本果树在成花诱导期喷施 郧粤猿 显著抑制花芽
分化渊酝糟粤则贼澡藻赠 藻贼 葬造援袁 员怨怨愿曰 周学伍等袁 员怨愿员冤遥 赤
霉素影响植物成花机制的研究虽较深入袁但大多集
中在一些模式植物及草本植物上袁在木本植物上的
研究还多采用外施赤霉素及对整体器官内源激素水
平进行检测的方法袁这虽然为了解其功能积累了大
林 业 科 学 源苑 卷摇
量的基础资料袁但未能阐述其机制遥
白桦具有良好的经济价值和生态效益袁国家已
将白桦列为东北及内蒙古四省区天然林保护工程的
重要造林树种遥 其分布面积广袁蓄积量大遥 作为一
种次生林演替的优势速生用材树种袁研究其生殖特
性袁对于发展和利用白桦种群具有重要意义渊陈之
端袁员怨怨源曰 孙冰等袁员怨怨源冤遥 天然状态下白桦开花结
实需 员苑 耀 圆园 年袁常规的育种手段不可能在较短时期
培育出材质好尧生长快的优良白桦种质遥 因此袁如何
缩短白桦的育种周期和加快良种化进程是我国林木
遗传改良工作者急待解决的难题遥 成花是植物有性
生殖的重要阶段袁因此研究白桦开花时间的调控机
制及探索开花时间的决定因素具有重要意义遥
实时荧光定量 孕悦砸 是在 孕悦砸 定性基础上发展
起来的核酸定量技术袁具有灵敏度高尧特异性和可靠
性更强尧能实现多重反应尧自动化程度高尧无污染性尧
实时性和准确性等特点遥 目前该技术在生物医学领
域有着广泛的应用袁近年来也被逐渐运用于农作物
的转基因检测和基因差异表达的研究 渊杨帆等袁
圆园员园冤袁如玉米渊在藻葬 皂葬赠泽冤中的水分胁迫诱导基因
渊张中保等袁圆园园苑冤的表达袁 转基因玉米的检测渊陈
颖等袁圆园园源冤遥 本试验运用实时荧光定量 孕悦砸 技术
杂再月砸 郧则藻藻灶 玉法袁通过研究成花诱导期外源 郧粤猿 处
理对白桦成花相关基因表达量的影响袁进而为从分
子水平揭示外源 郧粤猿 影响成花的机制和人工调控
白桦成花时间奠定基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料的处理与采集摇 试验于 圆园园怨 年 缘要苑 月
在东北林业大学林木遗传育种实验基地进行遥 为排
除花器官生长分化对开花诱导基因表达的影响袁采
用 猿 年即可开花的 圆 年生强化育种白桦植株袁分 源
区组袁粤组喷洒清水袁其余 猿 组用不同浓度等体积赤
霉素渊郧粤猿冤溶液进行叶面喷洒处理院 缘园 皂早窑蕴 原员 渊月
组冤袁员园园 皂早窑蕴 原员渊悦 组冤袁圆园园 皂早窑蕴 原员 渊阅 组冤遥 从 缘
月 苑 号到 苑 月 远 号每隔 员园 天处理 员 次并采样袁顺序
为先采样后处理袁因此 缘 月 苑 号样品均为未处理状
态下样品遥 样品用液氮保存带回实验室袁用于 砸晕粤
的提取遥
员援 圆摇 引物设计摇 进一步筛选白桦花期调控基因袁东
北林业大学林木育种实验室构建了白桦花期时序消
减文库袁确定了一些有价值的 耘杂栽 序列遥 从中选择
蕴云再袁郧陨袁耘蕴云猿袁蕴阅及 云蕴悦基因作为目标基因进行分
析遥 根据已知 耘杂栽 序列合成引物遥 以编码 员愿杂
则砸晕粤的基因作为内参基因遥 采用 孕砸陨酝耘砸 缘郾 园 软
件进行引物设计袁引物由上海生工提供渊表 员冤遥
表 员摇 引物
栽葬遭援 员摇 孕则蚤皂藻则泽
基因 郧藻灶藻泽 引物 孕则蚤皂藻则泽
蕴云再 枣院 悦悦郧悦栽栽悦悦栽粤悦粤郧悦悦栽悦悦栽栽
则院 悦郧悦粤郧粤悦郧悦悦栽栽郧粤栽郧粤郧
郧陨 枣院 郧悦栽郧栽栽郧栽栽郧郧粤郧郧粤郧郧
则院 悦粤郧栽郧郧悦郧栽栽粤栽郧郧郧栽
耘蕴云猿 枣院 栽悦悦郧栽悦悦郧粤郧郧悦栽粤栽
则院 悦悦栽栽悦粤栽栽悦郧悦粤郧栽悦悦
蕴阅 枣院 悦栽栽悦郧悦栽悦粤栽粤栽悦悦栽郧栽栽
则院 郧栽悦悦栽栽悦粤粤郧粤悦悦栽悦悦粤栽
云蕴悦 枣院 郧悦栽栽悦粤郧悦粤郧悦粤悦栽栽栽悦
则院 栽栽悦栽粤悦悦粤郧郧悦粤悦悦粤粤
员愿杂 则砸晕粤 枣院郧粤粤郧粤郧郧粤粤悦郧郧栽粤悦栽粤悦郧粤郧悦
则院郧粤栽粤郧郧郧栽悦粤悦栽郧粤栽粤栽栽栽郧郧粤栽郧
摇 摇员郾 猿摇 试验方法摇 员冤 砸晕粤 提取摇 采用 悦栽粤月 法渊王
玉成等袁圆园园员冤提取样品总 砸晕粤遥 通过紫外分光光
度计 渊 耘责责藻灶凿燥则贼冤和 园郾 愿豫 琼脂糖凝胶电泳对总
砸晕粤进行浓度和纯度测定遥
圆冤 糟阅晕粤合成摇 使用 栽葬噪葬则葬公司的 孕则蚤皂藻泽糟则蚤责贼
砸栽 则藻葬早藻灶贼 运蚤贼袁以 圆滋早 总 砸晕粤 为材料反转录获得
凿泽阅晕粤遥 将其稀释 员园 倍作为模板待用遥
猿冤 荧光定量 孕悦砸分析摇 实时定量 孕悦砸反应的
试剂盒为 杂再月砸 郧则藻藻灶 砸藻葬造贼蚤皂藻 孕悦砸 酝葬泽贼藻则皂蚤曾
渊栽燥赠燥遭燥 悦燥援袁 蕴贼凿袁 韵泽葬噪葬袁 允葬责葬灶冤遥 孕悦砸 反应体系院
蕴圆 伊 杂再月砸 责则藻皂蚤曾 耘曾 栽葬择 远 滋蕴袁 上尧 下游引物
渊员园 滋皂燥造窑蕴 原员冤各 园郾 猿 滋蕴袁糟阅晕粤 模板 员 滋蕴袁加去离
子水补足 员圆 滋蕴遥 试验设置 猿 次重复遥 使用实时数
据采集模式袁反应在 韵孕栽陨韵晕域荧光定量 孕悦砸 仪上
完成遥 循环反应参数为院 怨源 益预变性 猿园 泽曰 怨源 益变
性 员圆 泽袁退火 源缘 泽渊各基因温度不同冤袁苑圆 益延伸
源缘 泽袁源缘 次循环袁缘缘 耀 怨怨 益袁每 园郾 缘 益读板 员 次遥 以
苑远 益和 愿缘 益读板数据绘制溶解曲线遥 利用 韵责贼蚤糟燥灶
酝燥灶蚤贼燥则圆 软件保存和分析遥
源冤 基因表达差异的分析摇 以不同处理的 糟阅晕粤
模板混合样进行梯度稀释袁对于每一个稀释样本袁用
目标基因和内参基因的引物进行扩增遥 计算出它们
的平均 悦栽 值以及 驻悦栽 值袁通过 糟阅晕粤浓度梯度的 造早
值对 驻悦栽 值作图袁如果所得直线斜率接近于 园袁说明
反应优化较好袁目标基因和内参基因的扩增效率相
同袁可以通过比较 悦栽 值的方法进行相对定量袁分析
基因表达的差异遥 优化好反应条件后袁将参照样本
渊缘 月 苑 号样品冤基因表达设为 员袁其余各样品基因
表达量的倍数可用 圆驻驻悦栽来表示袁其中 驻驻悦栽 越 驻悦栽
渊参照冤 原 驻悦栽 渊处理冤袁驻悦栽 越 悦栽 渊目标基因冤 原 悦栽渊内参基因冤渊蕴蚤增葬噪 藻贼 葬造援袁 圆园园员冤遥
愿愿员
摇 第 苑 期 魏志刚等院 外源 郧粤猿 对白桦成花基因影响的定量 孕悦砸分析
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 提取的总 砸晕粤 检测情况 摇 由图 员 可见院
悦栽粤月法提取的总 砸晕粤 清晰地显出 圆 条主带袁圆愿杂
则砸晕粤和 员愿杂 则砸晕粤亮度比约为 圆颐 员袁表明 砸晕粤完整
性较好遥 经过紫外分光光度计测定袁各样品总 砸晕粤
的 韵阅圆远园 辕 韵阅圆愿园均在 员郾 怨 耀 圆郾 员 之间袁纯度较高袁能满
足反转录要求遥
圆郾 圆摇 实时定量 孕悦砸扩增的可靠性摇 采用 猿 孔平行
试验袁且每板均设置内参袁得出 猿 个 悦栽 值并进行方
差分析袁标准偏差均小于 园郾 源渊表 圆冤袁说明试验建立
的定量 孕悦砸 反应具有较强的准确性和可重复性遥
根据 员郾 猿 的试验方法进行扩增效率分析袁所得斜率
摇 摇 摇 摇
都接近 园袁说明本试验反应优化较好袁内存与目标基
因扩增效率相同袁可以进行相对定量分析遥
图 员摇 砸晕粤电泳
云蚤早援 员摇 砸晕粤 藻造藻贼则燥责澡燥则藻早则葬皂
表 圆摇 不同浓度 郧粤猿 处理下白桦各基因实时定量 孕悦砸反应的 悦栽 值淤
栽葬遭援 圆摇 悦栽 增葬造怎藻 燥枣 则藻葬造鄄贼蚤皂藻 孕悦砸 则藻葬糟贼蚤燥灶 燥枣 早藻灶藻泽 蚤灶 造藻葬增藻泽 燥枣 月援 责造葬贼赠责澡赠造造葬 怎灶凿藻则 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 郧粤猿 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽
基因
郧粤猿 处理栽则藻葬贼皂藻灶贼泽 辕
渊皂皂燥造窑蕴 原员 冤
日期阅葬贼藻
悦栽
重复 员砸藻责藻葬贼 员 重复 圆砸藻责藻葬贼 圆 重复 猿砸藻责藻葬贼 猿
平均值酝藻葬灶 标准差杂阅
蕴云再 园 园缘 原 园苑 圆缘郾 源猿缘 圆源郾 怨苑苑 圆源郾 怨愿园 圆缘郾 员猿园 园郾 圆远源
园缘 原 员苑 圆缘郾 员苑圆 圆源郾 愿怨员 圆缘郾 猿员苑 圆缘郾 员圆苑 园郾 圆员苑
园缘 原 圆苑 圆缘郾 苑员圆 圆缘郾 苑怨苑 圆缘郾 远圆怨 圆缘郾 苑员猿 园郾 园愿源
园远 原 园远 圆远郾 员愿园 圆缘郾 远园园 圆源郾 愿苑园 圆缘郾 缘缘园 园郾 远缘远
园远 原 员远 圆源郾 远愿源 圆源郾 苑苑圆 圆源郾 愿苑园 圆源郾 苑苑缘 园郾 园怨猿
园远 原 圆远 圆源郾 愿苑愿 圆源郾 缘圆缘 圆源郾 园怨苑 圆源郾 缘园园 园郾 猿怨员
园苑 原 园远 圆缘郾 猿源怨 圆缘郾 缘园愿 圆缘郾 苑园怨 圆缘郾 缘圆圆 园郾 员愿园
缘园 园缘 原 园苑 圆缘郾 愿缘苑 圆缘郾 苑怨怨 圆缘郾 怨员猿 圆缘郾 愿缘远 园郾 园缘苑
园缘 原 员苑 圆缘郾 猿圆源 圆缘郾 缘员怨 圆缘郾 圆怨缘 圆缘郾 猿苑怨 园郾 员圆圆
园缘 原 圆苑 圆缘郾 园员怨 圆缘郾 园圆园 圆缘郾 猿怨缘 圆缘郾 员源缘 园郾 圆员苑
园远 原 园远 圆缘郾 缘苑愿 圆缘郾 远愿园 圆缘郾 猿园员 圆缘郾 缘圆园 园郾 员怨远
园远 原 员远 圆缘郾 源员园 圆源郾 愿猿远 圆缘郾 员圆园 圆缘郾 员圆圆 园郾 圆愿苑
园远 原 圆远 圆缘郾 源猿远 圆缘郾 愿猿怨 圆缘郾 员源愿 圆缘郾 源苑源 园郾 猿源苑
园苑 原 园远 圆远郾 远圆圆 圆远郾 愿远苑 圆苑郾 圆怨缘 圆远郾 怨圆愿 园郾 猿源园
员园园 园缘 原 园苑 圆源郾 远远源 圆源郾 远员园 圆缘郾 园员远 圆源郾 苑远猿 园郾 圆圆园
园缘 原 员苑 圆源郾 缘源愿 圆猿郾 怨怨缘 圆源郾 圆苑远 圆源郾 圆苑猿 园郾 圆苑远
园缘 原 圆苑 圆猿郾 苑愿苑 圆猿郾 缘怨源 圆源郾 园员员 圆猿郾 苑怨苑 园郾 圆园怨
园远 原 园远 圆园郾 愿猿园 圆园郾 愿缘苑 圆园郾 愿园源 圆园郾 愿猿园 园郾 园圆远
园远 原 员远 圆猿郾 远怨缘 圆猿郾 缘猿苑 圆猿郾 源园怨 圆猿郾 缘源苑 园郾 员源猿
园远 原 圆远 圆源郾 远猿缘 圆源郾 圆怨圆 圆源郾 源远猿 圆源郾 源远猿 园郾 员苑员
园苑 原 园远 圆猿郾 愿圆怨 圆猿郾 圆缘远 圆猿郾 源怨员 圆猿郾 缘圆缘 园郾 圆愿愿
圆园园 园缘 原 园苑 圆圆郾 愿源猿 圆猿郾 猿员猿 圆猿郾 圆缘源 圆猿郾 员猿苑 园郾 圆缘远
园缘 原 员苑 圆猿郾 员怨圆 圆圆郾 愿缘源 圆猿郾 猿苑远 圆猿郾 员源员 园郾 圆远缘
园缘 原 圆苑 圆圆郾 怨愿怨 圆猿郾 园员远 圆猿郾 源远园 圆猿郾 员缘缘 园郾 圆远源
园远 原 园远 圆猿郾 源猿园 圆猿郾 苑怨愿 圆猿郾 圆怨远 圆猿郾 缘园愿 园郾 圆远园
园远 原 员远 圆猿郾 园圆怨 圆圆郾 愿员员 圆猿郾 园员愿 圆圆郾 怨缘猿 园郾 员圆猿
园远 原 圆远 圆圆郾 怨远圆 圆圆郾 怨怨苑 圆圆郾 怨源怨 圆圆郾 怨远怨 园郾 园圆缘
园苑 原 园远 圆猿郾 员苑缘 圆猿郾 源怨苑 圆猿郾 源园缘 圆猿郾 猿缘怨 园郾 员远远
摇 摇 淤只列出了部分数据遥 粤 责葬则贼 燥枣 凿葬贼葬 葬则藻 早蚤增藻灶援
圆郾 猿摇 成花相关基因的表达摇 员冤 蕴云再基因的表达摇
由图 圆粤 悦运组可以看出 蕴云再 基因表达量在 缘 月下
旬明显升高袁在 缘 月 圆苑 号出现峰值袁之后表达量维
持在较低水平遥 受东北气候的影响袁哈尔滨春天来
得比较晚袁在 缘 月初气温才明显转暖袁白桦抽出新
芽袁因此 缘 月下旬是营养生长向生殖生长转变的关
键时期遥 但在这一时期袁处理组 蕴云再 基因的表达量
较对照组明显偏低袁说明 郧粤猿 抑制了这一时期 蕴云再
基因的表达遥 由图 猿粤 看出院 在成花转变的关键时
期渊缘 月下旬冤袁随着 郧粤猿 浓度的增加袁蕴云再基因的表
怨愿员
林 业 科 学 源苑 卷摇
达量降低袁说明这一时期袁在一定的 郧粤猿 浓度范围
内袁外源 郧粤猿 浓度越高袁蕴云再基因的表达量越低遥圆冤 郧陨和 耘蕴云猿 基因的表达 摇 郧陨 和 耘蕴云猿 都是
光周期途径中的上游基因袁从图 圆月袁悦和图 猿月袁悦中
可以看出它们的表达情况和 蕴云再相似袁悦运组仍在 缘
月下旬渊即营养生长向生殖生长转变的关键时期冤
出现峰值袁其后表达维持在相对低的水平遥 同样在
这一时期袁郧粤猿 处理的植株 郧陨 和 耘蕴云猿 的表达量都
相对较低遥 将这一时期处理组的情况单独来看袁圆园园
皂早窑蕴 原员的 郧粤猿 处理对这 圆 个基因的抑制作用最明
显遥 与 蕴云再不同的是袁郧陨 和 耘蕴云猿 的处理组表达量
并不是随 郧粤猿 浓度增大而增加袁缘园 皂早窑蕴 原员比 员园园
皂早窑蕴 原员的抑制作用更强些遥 抑制效果虽不同袁但在
白桦成花转变的关键时期袁郧粤猿 对光周期上游基因
郧陨与 耘蕴云猿 也起抑制作用遥
猿冤 蕴阅基因的表达 摇 蕴阅 基因是植物开花途径
中自主途径的一个重要基因袁它负控 云蕴悦 的表达袁
进而有利于解除 云蕴悦对成花转变的抑制作用袁促进
开花遥 对 蕴阅定量研究显示渊图 圆阅冤袁缘 月下旬正是
蕴阅大量表达以促进成花的关键时期遥 在 远 月初以
后这一基因的表达明显降低遥 图 猿阅显示院 郧粤猿 处
理的 猿 个区组与上述结果类似袁在 缘 月下旬表达量
都受到了抑制遥 这一时期处理组 蕴阅 表达情况如图
所示袁与 蕴云再结果相似袁郧粤猿 浓度越高袁蕴阅基因的表
达量越低遥
源冤 云蕴悦基因的表达摇 在植物开花调控网络中袁
开花抑制基因 云蕴悦 处于枢纽地位遥 云蕴悦 的表达受
许多来自环境和生长发育信号的调控袁其中包括自
主途径和春化作用遥 春化作用通过抑制 云蕴悦袁来解
除 云蕴悦 对开花的抑制作用遥 图 圆 耘 中可以看出院 缘
月 云蕴悦已经处于并持续处于较低水平袁这与前期的
春化作用密不可分曰 但是图 猿耘 对照组与处理组之
间 云蕴悦的表达量并没有明显差别袁因此成花转变
期袁外源喷洒 郧粤猿 对 云蕴悦并无太大影响遥 各处理组
成花转变期 云蕴悦 的表达量虽有差异袁但差异并不
显著遥
猿摇 结论与讨论
不同物种在特定时期外施 郧粤猿 对成花的影响
不同遥 一些非成花诱导条件下的长日照草本植物袁
花诱导期喷施 郧粤猿 能代替长日照促进植物开花渊酝藻贼扎早藻则 藻贼 葬造援袁 员怨愿苑冤袁侯雷平等渊圆园园怨冤研究表明赤
霉素促进白菜渊月则葬泽泽蚤糟葬 责藻噪蚤灶藻灶泽蚤泽冤的开花遥 赤霉素
对花芽分化和开花的影响在果树中的报道却相反袁
周学伍等渊员怨愿员冤报道袁外源赤霉素可有效抑制甜橙
图 圆摇 不同浓度 郧粤猿 处理下 蕴云再袁郧陨袁
耘蕴云猿袁蕴阅袁云蕴悦基因相对表达差异
云蚤早援 圆摇 砸藻造葬贼蚤增藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 蕴云再袁郧陨袁耘蕴云猿袁
蕴阅 葬灶凿 云蕴悦 怎灶凿藻则 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 郧粤猿
渊悦蚤贼则怎泽 泽蚤灶藻灶泽蚤泽冤花芽的形成袁且 郧粤猿 浓度的差异对
花芽的抑制效应有影响遥 孕则葬灶早 等渊员怨怨苑冤用放射免
疫测定表明袁在花芽孕育期间正在发育的耶明星爷 尧
耶金冠爷和耶乔纳金爷苹果渊酝葬造怎泽 责怎皂蚤造葬冤种子大量输
出 郧粤猿 抑制花芽孕育遥 王庆成等渊圆园园员冤报道袁外源郧粤猿 可有效地抑制小黑杨渊孕燥责怎造怎泽 伊 曾蚤葬燥澡藻蚤冤雌株的
花芽分化过程遥 本试验发现一定浓度范围 郧粤猿 对
白桦成花有抑制作用袁这与前人研究中袁多数情况下
外源 郧粤猿 抑制木本植物开花袁促进草本植物开花
相符遥
园怨员
摇 第 苑 期 魏志刚等院 外源 郧粤猿 对白桦成花基因影响的定量 孕悦砸分析
图 猿摇 缘 月 圆苑 日各处理组基因的表达情况
云蚤早援 猿摇 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 早藻灶藻泽 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼
糟燥灶贼则燥造 早则燥怎责 燥灶 酝葬赠 圆苑
高等植物的开花过程受自身遗传因子和外界环
境因素两方面决定袁是开花基因在时间和空间上顺
序表达的结果遥 植物开花分别由 源 个途径的多种基
因复杂控制遥 蕴云再 是赤霉素途径中的关键基因袁赤
霉素途径通过 郧粤酝再月激活 蕴云再 基因的表达已普遍
接受遥 研究发现袁蕴云再 基因表达量的改变相应地影
响顶端成花转变的能力 渊 月造葬扎择怎藻扎 藻贼 葬造援袁 员怨怨苑冤遥
耘蕴云猿 与 郧陨 是光周期调节的关键基因遥 耘蕴云猿 属于
昼夜节律类基因遥 这类基因位于光周期途径的上游
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葬造援袁 圆园园猿冤袁它们感受昼夜变化而引起自身表达量的
变化袁最终在叶中激活 悦韵 基因的表达渊粤赠则藻 藻贼 葬造援袁
圆园园源冤袁郧陨基因在昼夜节律类基因和下游基因 悦韵之
间起到了桥梁的作用遥 郧陨 感受昼夜节律基因的变
化袁并把信号传递给 悦韵渊阅燥赠造藻 藻贼 葬造援袁 圆园园圆 冤遥 悦韵
表达量超过一定值时有利于开花遥 蕴阅 是自主途径
中的关键基因之一袁 蕴阅对 云蕴悦起负控作用袁与春化
作用途径一样袁通过抑制 云蕴悦 进而来促进开花遥 在
开花调控网络中袁酝粤阅杂鄄遭燥曾 类的转录因子 云蕴悦 处
于枢纽地位遥 云蕴悦 是开花的负调控因子袁是植物开
花调控的关键基因遥 自主途径尧春化作用途径中有
许多控制开花的基因袁其功能都是通过调节 云蕴悦 的
表达来实现的遥 本研究中显示袁悦运组在 缘 月下旬即
成花诱导时期袁蕴云再袁耘蕴云猿袁郧陨袁蕴阅 基因的表达量都
明显增加袁其表达模式与前人研究相符遥 而 郧粤猿 处
理后这些基因的表达量明显降低袁表明外源 郧粤猿 抑
制了促开花相关基因的表达遥 悦运 组与处理组 云蕴悦
表达量从 缘 月初开始就持续较低袁与春化作用结果
相符遥 但是各组的表达量差别并不明显袁且 云蕴悦 受
众多因素共同调节袁因此 郧粤猿 处理对其影响的具体
机制还有待进一步研究遥
综上所述袁缘 月下旬为白桦营养生长向生殖生
长转变的关键时期袁外源 郧粤猿 对白桦开花起抑制作
用遥 这种抑制作用不是作用于单独某个开花途径袁
而是对多个开花途径的一些关键基因表达都有影响
而共同抑制成花转变袁但是这其中的具体作用原理
还有待进一步研究遥
参 考 文 献
陈摇 颖袁 徐宝梁袁 苏摇 宁袁等援 圆园园源郾 实时荧光定量 孕悦砸技术在转基
因玉米检测中的应用研究援 作物学报袁 猿园渊远冤院 远园圆 原 远园苑郾
曹尚银袁 汤一卒袁 江爱华援 圆园园员郾 郧粤猿 和 孕孕孕猿猿猿 调控苹果花芽孕育
的机理研究援 园艺学报袁 圆愿渊源冤院 猿猿怨 原 猿源员郾
曹尚银袁 张俊昌袁 魏立华援 圆园园园郾 苹果花孕育过程中内源激素的变
化援 果树科学袁 员苑渊源冤院 圆源源 原 圆源愿郾
陈之端援 员怨怨源郾 桦木科植物的系统发育和地理分布渊待续冤援 中国科
学院研究生院学报袁 猿圆渊员冤院员 原 猿员郾
侯雷平袁 王摇 丽袁李梅兰援 圆园园怨郾 赤霉素处理促进白菜开花的效应分
析援 中国农学通报袁圆缘渊远冤院员苑员 原 员苑源郾
苏明华袁 刘志成袁 庄伊美援 员怨怨愿郾 水涨龙眼结果母枝内源激素含量
变化对花芽分化的影响援 热带作物学报袁 员愿渊圆冤院 远远 原 苑员郾
孙摇 冰袁 杨国亭袁 李摇 弘袁 等援 员怨怨源郾 白桦种群的年龄结构及其群落
演替援 东北林业大学学报袁 圆圆渊猿冤院源猿 原 源愿郾
王庆成袁徐德兰援 圆园园员郾 赤霉素渊郧粤猿冤对杨树开花结实的效应援 植物
生理学通讯袁 猿苑渊远冤院 缘员园 原 缘员圆郾
王玉成袁 杨传平袁 姜摇 静援 圆园园员郾 紫丁香尧糖槭总 砸晕粤 的快速提取
方法援 东北林业大学学报袁 圆怨渊远冤院 怨园 原 怨员郾
杨摇 帆袁丁摇 菲袁杜天真援 圆园员园郾 盐胁迫下构树 阅砸耘月转录因子基因
表达的实时定量荧光 孕悦砸分析援 林业科学袁 源远渊源冤院 员源远 原 员缘园郾
周学伍袁陈清亮袁曾凡哲袁等援 员怨愿员郾 赤霉素对甜橙花芽形成的影响研
员怨员
林 业 科 学 源苑 卷摇
究援植物生理学通讯袁 渊员冤院 源猿 原 源苑郾
张中保袁 李会勇袁 石云素袁 等援 圆园园苑郾 应用实时荧光定量 孕悦砸 技术
分析玉米水分胁迫诱导基因的表达模式援 植物遗传资源学报袁
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