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Determination of S Genotypes of Seven Cultivars and Identification of a Novel S RNase Allele in Pyrus pyrifolia

7个砂梨品种S基因型的确定及1个新S RNase基因的分离鉴定*


砂梨是重要的经济树种,表现出典型的配子体自交不亲和性,在生产和育种上需鉴定品种的 S基因型以确定品种间的亲和性。选取7个砂梨品种为试验材料,使用梨SRNase(S基因)通用引物进行基因组PCR扩增,产物通过1.8%的琼脂糖凝胶电泳分析。结果表明:‘楚比香’等4个品种中产生了预期的2条电泳条带,而其他3个品种都只产生1条带产物,通过6%的聚丙烯酰胺电泳对该3个品种的PCR产物进一步分析,结果产物被成功分离。将7个品种中分离到的14个条带分别回收、克隆、测序及序列分析,从中鉴别出10个具有梨S RNase基因序列特征的S基因,其中‘政和大雪梨’中494 bp的基因片段被鉴定为新的S基因,暂命名为S 43 RNase(GenBank接受号EF566873)。RTPCR试验证明S43 RNase仅在花柱中特异表达,符合SRNase的表达特征。通过比对S43 RNase的基因组序列和cDNA序列,确定其内含子大小为294 bp。在推导氨基酸水平上,S43RNase与苹果亚科其他S RNase表现出65%~92%的相似性。

Pyrus pyrifolia is a commercially important fruit tree which exhibits gametophytic selfincompatibility (GSI). It is necessary to identify S genotypes of cultivars for determination of crosscompatible combination prior to performing pear plantation and breeding programs. In this study, seven cultivars of P. pyrifolia were used for S genotype analysis by PCRbased molecular method with primers designed from conserved sequences of known pear S RNases. Amplified products were analyzed by 1.8% agarose gel electrophoresis. In each of the four cultivars `Chubixiang‘, `Huangpishui‘, `Zhenghedaxueli‘ and `Hongtaiyang‘, two expected bands were generated. The amplified products in the other three cultivars did not show length polymorphism, and therefore were further separated by 6% polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). A total of 14 purified fragments from the seven cultivars were cloned and sequenced. Sequence analysis revealed that 10 alleles with typical structural features of pear S RNase were identified, of which one from `Zhenghedaxueli‘, with 494 bp, was determined as a new SRNase allele that was tentatively denominated as S 43 RNase (GenBank accession No.EF566873). RTPCR revealed that the S43RNase was expressed specifically in the styles, which is consistent with the expression pattern of S RNases. Comparison of genomic and cDNA sequences revealed there was an intron of 294 bp in the S43RNase gene. The deduced amino acid sequence shared 65% to 92% similarity with other Maloideae S RNases. This study will be helpful in pear production and breeding programs.


全 文 :第 ww卷 第 ts期
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林 业 科 学
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z个砂梨品种 Σ基因型的确定及
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kt1中南林业科技大学资源与环境学院 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室 长沙 wtsssw ~
u1河南科技学院园林学院 新乡 wxvssv ~ v1 浙江省丽水市科普工作指导站 丽水 vuvsssl
摘 要 } 砂梨是重要的经济树种 o表现出典型的配子体自交不亲和性 o在生产和育种上需鉴定品种的 Σ基因型以
确定品种间的亲和性 ∀选取 z个砂梨品种为试验材料 o使用梨 Σ2• ‘¤¶¨k Σ基因l通用引物进行基因组 °≤• 扩增 o产
物通过 t1{ h的琼脂糖凝胶电泳分析 ∀结果表明 }−楚比香.等 w个品种中产生了预期的 u条电泳条带 o而其他 v个
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关键词 } 砂梨 ~配子体自交不亲和性 ~°≤• ~自交不亲和基因型 ~ Σ2• ‘¤¶¨
中图分类号 }≥zt{1wy ~±|wv1u 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kuss{lts p sswu p sz
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111 Πλαντ µατεριαλσ
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112 Ισολατιον οφ νυχλειχ αχιδσ
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113 Αµ πλιφιχατιον οφ Σ2ΡΝασε αλλελεσφροµ γενοµιχ ∆ΝΑσ
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©²µ§¬¶·¬±ª∏¬¶«¬±ª Σwv ©µ²° Σtv ¥¤¶¨§²± ±∏¦¯ ²¨·¬§¨ ¶¨ ∏´¨±¦¨ ¤¯¬ª±°¨ ±·q
115 Χλονινγ , σεθυενχινγ ανδ σεθυενχε αναλψσισ οφ ΠΧΡ προδυχτσ
׫¨ ³∏µ¬©¬¨§°≤• ³µ²§∏¦·¶º µ¨¨ ׄ2¯¬ª¤·¨§¬±·²³⁄t{2× ∂ ¦¨·²µkפ®¤µ¤o¤³¤±l ¤±§·µ¤±¶©²µ°¨ §¬±·² Εσχηεριχηια
χολι ¶·µ¤¬± ⁄‹xΑq ׫¨ ³²¶¬·¬√¨ ¦¯²±¨ ¶¤µ¨ ¶¦µ¨ ±¨¨ § ¥¼ ·«¨ º«¬·¨Π¥¯∏¨ ¦²¯²±¼o ¤±§¬§¨±·¬©¬¨§ ¥¼ ³¯¤¶°¬§ °≤• º¬·«
Βχα…∞≥×א ≥¨ ∏´¨ ±¦¬±ª°µ¬°¨ µtv2wz kxχ2≤Š≤≤„ŠŠŠ××××≤≤≤„Š×≤„≤Š„≤2vχl ¤±§ Βχα…∞≥×א ≥¨ ∏´¨ ±¦¬±ª°µ¬°¨ µ
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≥¬°¬¯¤µ¬·¬¨¶¥¨·º¨¨± Σ2• ‘¤¶¨ ¤¯¯¨ ¯¨ ¶º¨ µ¨ ¦²°³∏·¨§¥¼ ∂ ¦¨·²µ‘׌¤±§…„≥×° q°µ¨§¬¦·¬²±²©¶¬ª±¤¯ ³¨ ³·¬§¨ ¤±§³µ²¶¬·¨
º¤¶¦²±§∏¦·¨§¥¼ ∏¶¬±ª²±¯¬±¨ ¶²©·º¤µ¨ ∞¬³„≥¼ k«·³}ΠΠ¨¬³¤¶¼q²µªΠl q
2 Ρεσυλτσ
211 Λενγτη πολψµορπηισµ οφ αµ πλιφιχατιον φραγ µεντσιν διφφερεντ χυλτιϖαρσ
ƒ¬ªqt „±¤¯¼¶¬¶²©°≤• ³µ²§∏¦·¶²©¶¨√ ±¨ ³¨ ¤µ
¦∏¯·¬√¤µ¶¥¼ t1{ h ¤ª¤µ²¶¨ ª¨¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶
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©²µ³¨¤µ Σ2• ‘¤¶¨ ª¨ ±¨ o·«¨ ¤°³¯¬©¬¨§ ³µ²§∏¦·¶º µ¨¨ ¤±¤¯¼½¨ § ¥¼
t1{ h ¤ª¤µ²¶¨ ª¨¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶q ƒ¬ªqt ¶«²º¨ § ·«¤··º²
§¬©©¨µ¨±·¯¼¶¬½¨ §¥¤±§¶µ¤±ª¬±ª©µ²° ¤³³µ²¬¬°¤·¨¯¼ vys ¥³·²t sss
¥³ º¨ µ¨ ª¨ ±¨ µ¤·¨§¬± ¤¨¦« ²©·«¨ ©²∏µ¦∏¯·¬√¤µ¶ − ≤«∏¥¬¬¬¤±ª. o
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²±¯¼ ¤¶¬±ª¯¨¥¤±§²©¤µ²∏±§vzs ¥³º¤¶²¥¶¨µ√¨ §¬± ¤¨¦«¦∏¯·¬√¤µq
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¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¨§ ²± y h ±²±2§¨ ±¤·∏µ¨§ ³²¯¼¤¦µ¼¯¤°¬§¨ ª¨¯q
≤²±¶¨ ∏´¨±·¯¼ o·º²©µ¤ª°¨ ±·¶º¨ µ¨ ¶∏¦¦¨¶¶©∏¯¯ ¼ ¶¨³¤µ¤·¨§¬± ¤¨¦«²©·«¨ ·«µ¨¨¦∏¯·¬√¤µ¶kƒ¬ªqul q׫¨ ¶¬¬ ⁄‘„ ©µ¤ª°¨ ±·¶
¬¨·µ¤¦·¨§©µ²° ³²¯¼¤¦µ¼¯¤°¬§¨ ª¨¯ º¨ µ¨ ∏¶¨§¤¶·¨°³¯¤·¨¶©²µ¤¶¨¦²±§°≤• º¬·« °ƒt ¤±§°• t ·²¬±¦µ¨¤¶¨ ⁄‘„ ¼¬¨ §¯q
ƒ¬±¤¯ ¼¯ o¤·²·¤¯ ²©tw ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±©µ¤ª°¨ ±·¶º¨ µ¨ ¶∏¦¦¨¶¶©∏¯¯ ¼ ¦¯²±¨ §¤±§¶¨ ∏´¨±¦¨§q
212 Σ2γενοτψπεσ οφ σεϖεν σανδ πεαρ χυλτιϖαρσ
≤²°³¤µ¬¶²± ²©±∏¦¯¨ ²·¬§¨ ¶¨ ∏´¨±¦¨¶µ¨√¨ ¤¯ §¨·«¤··º²²µ°²µ¨ ·«¤±·º²¶¨ ∏´¨±¦¨¶º¨ µ¨ ©²∏±§·² ¥¨ ¬§¨±·¬¦¤¯ ¤°²±ª
·«¨ tw ¶¨ ∏´¨±¦¨¶º«¬¦« º¨ µ¨ ¦¯¤¶¶¬©¬¨§¬±·² ts §¬©©¨µ¨±··¼³¨¶¤¦¦²µ§¬±ª¯¼ q „¯·«²∏ª«·«¨ µ¨ª¬²± ¥¨·º¨ ±¨ °ƒt ¤±§°• t
§²¨¶±²·¦²√¨ µ¤¦²°³¯ ·¨¨ ª¨ ±¨ o …„≥×± ¤±¤¯¼¶¬¶µ¨√¨ ¤¯ §¨·«¤·¤¯¯ ²©·«¨ ts ¶¨ ∏´¨±¦¨¶§¬¶³¯¤¼¨ §·«¨ ·¼³¬¦¤¯ ¶·µ∏¦·∏µ¤¯
²µª¤±¬½¤·¬²± ²©³¨¤µΣ2• ‘¤¶¨ º¬·«¦²±¶¨µ√¨ §¤±§ ‹∂ µ¨ª¬²±¶o²© º«¬¦«±¬±¨ ¦²µµ¨¶³²±§·² ®±²º± ³¨¤µΣ2• ‘¤¶¨ ¤¯¯¨ ¯¨ ¶
Σt o Σw o Σx o Σ{ o Σtv o Σtx o Σty o Σvx ¤±§ Σwu oµ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ q ׫¨ ²·«¨µ²±¨ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨ º¬·«¤ ∏±¬´∏¨ ¶¬½¨ kw|w ¥³l
¬§¨±·¬©¬¨§¬± −«¨ ±ª«¨ §¤¬∏¨ ¬¯. o«²º √¨¨ µo¶«²º §¨¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¬©©¨µ¨±¦¨¶·² ¤¯¯ ³∏¥¯¬¶«¨§ ³¨¤µ Σ2• ‘¤¶¨¶o·«∏¶¬·º¤¶
ww 林 业 科 学 ww卷
¦²±¶¬§¨µ¨§·² ¥¨ ¤ ±¨ º Σ2• ‘¤¶¨ ¤¯¯¨ ¯¨ ¶«¤µ¬±ª·«¨ «¬ª«¨¶·¶¬°¬¯¤µ¬·¼ k{{ h l º¬·« Πq πψριφολια Σ{2• ‘¤¶¨ ¤··«¨
±∏¦¯ ²¨·¬§¨ ¯¨ √¨ ¯q ׫¬¶±¨ º ¤¯¯¨ ¯¨ º¤¶·¨°³²µ¤µ¬¯¼ ±¤°¨ §¤¶ Σwv2• ‘¤¶¨ kŠ¨ ±…¤±® ¤¦¦¨¶¶¬²± ‘²q∞ƒxyy{zvl ©²¯ ²¯º¬±ª
Σwu2• ‘¤¶¨ ¬± Š¨ ±…¤±®§¤·¤¥¤¶¨ q
…¤¶¨§²± ·«¨ ¶¨ ∏´¨±¦¨ ¤±¤¯¼¶¬¶²© Σ2• ‘¤¶¨ ¤¯¯¨ ¯¨ ¶ ¦¯²±¨ § «¨µ¨ o·«¨ Σ2ª¨ ±²·¼³¨¶²©·«¨ ¶¨√¨ ± ¦∏¯·¬√¤µ¶ º¨ µ¨
∏±¤°¥¬ª∏²∏¶¯¼ §¨·¨µ°¬±¨ §¤¶©²¯ ²¯º¶} − ‹¤±ª´¬±ª. k Σt Σwl o −≤∏¬ª∏¤±. k Σt Σx l o −÷¬½¬¯√. k Σt Σwl o −≤«∏¥¬¬¬¤±ª.
kΣt Σtxl o−‹∏¤±ª³¬¶«∏¬. kΣty Σwul o−«¨ ±ª«¨ §¤¬∏¨ ¬¯. k Σtv Σwvl ¤±§−‹²±ª·¤¬¼¤±ª. k Σ{ Σvxl q
213 Οργαν εξπρεσσιον δετεχτιον ανδ σεθυενχε χηαραχτεριζατιον οφ τηε νεω Σ432ΡΝασε
ײ ¬¨·¨±§·«¨ ¶¨ ∏´¨±¦¨ ²©·«¨ ±¨ º Σwv ¤¯¯¨ ¯¨ o °ƒu º µ¨¨ °¨³¯²¼¨ §©²µ°≤• ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±q ƒ²¯ ²¯º¬±ª¤±¤¯¼¶¬¶¥¼
t1{ h ¤ª¤µ²¶¨ ª¨¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶o·º²¥¤±§¶¬±¦¯∏§¬±ª¤¶·µ²±ª²±¨ ²©¤µ²∏±§yss ¥³¤±§¤ º¨ ¤® ²±¨ ²©¤³³µ²¬¬°¤·¨¯¼
w{s ¥³ º¨ µ¨ ²¥¶¨µ√¨ §kƒ¬ªqvl q„¶¬¶¶«²º±¬± ƒ¬ªqt o Σwv ¬¶ ²¯±ª¨µ·«¤± Σtv o·«∏¶·«¨ yss ¥³2¶¬½¨ §©µ¤ª°¨ ±·¶«²∏¯§
µ¨³µ¨¶¨±··«¨ Σwv ¤±§·«¨ w{s ¥³²±¨ ¤³³¨¤µ¬±ª¤¶¤©¤¬±·¥¤±§¶«²∏¯§¥¨ Σtv q „©·¨µ¦¯²±¬±ª·«¨ ·¤µª¨·©µ¤ª°¨ ±·²©yss
¥³o·«µ¨¨¬±§¨ ³¨ ±§¨±·¦¯²±¨ ¶ º¨ µ¨ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨§q ≥¨ ∏´¨ ±¦¬±ªµ¨¶∏¯·¶«²º¨ §·«¤··«¨ ·«µ¨¨ ¦¯²±¨ ¶ º¨ µ¨ ¬§¨±·¬¦¤¯ o¬±§¨ §¨
¦²µµ¨¶³²±§¬±ª·² Σwv q
ƒ¬ªqu „±¤¯¼¶¬¶²©°≤• ³µ²§∏¦·¶²©·«µ¨¨³¨¤µ¦∏¯·¬√¤µ¶
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 }tss ¥³ ⁄‘„ ¤¯§§¨µk’∏°¤¼o≤«¬±¤l ~ „ }−‹¤±ª´¬±ª. ~
…}−≤∏¬ª∏¤±. ~≤ }−÷¬½¬¯√. q׫¨ °≤• ³µ²§∏¦·¶º µ¨¨
¤°³¯¬©¬¨§º¬·«°ƒt ¤±§°• t1
ƒ¬ªqv Š¨ ±²°¬¦¤±§¦⁄‘„ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨¶¤°³¯¬©¬¦¤·¬²± ²© Σwv2• ‘¤¶¨
 }tss ¥³ ⁄‘„ ¤¯§§¨µk’∏°¤¼o≤«¬±¤l ~ „ } Š¨ ±²°¬¦¶¨ ∏´¨ ±¦¨
¬¨·¨±¶¬²± ²© Σwv2• ‘¤¶¨ º¬·«°ƒu ¤±§°• t ~
…p ⁄} • ×2°≤• ²±·²·¤¯ • ‘„¶©µ²° ¯¨ ¤√¨ ¶k…l o
¤±·«¨µ¶k≤l ¤±§¶·¼¯ ¶¨k⁄l º¬·«°ƒu ¤±§°•u1
ײ ¦¯²±¨ ·«¨ ¦⁄‘„ ¶¨ ∏´¨±¦¨ ²© Σwv ¤±§¬±√¨ ¶·¬ª¤·¨¬·¶²µª¤± ¬¨³µ¨¶¶¬²±¦«¤µ¤¦·¨µo• ×2°≤• º¤¶¦¤µµ¬¨§²∏·©µ²°·«¨
·²·¤¯ • ‘„¶©µ²° ¯¨ ¤√¨ ¶o ¤±·«¨µ¶¤±§¶·¼¯ ¶¨²© −«¨ ±ª«¨ §¤¬∏¨¯¨ . o µ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ q ≤²±¶¨ ∏´¨±·¯¼o ²±¯¼ ²±¨ ³µ²§∏¦·²©
¤³³µ²¬¬°¤·¨¯¼vss ¥³ º¤¶¤°³¯¬©¬¨§©µ²° ¶·¼¯¤µ• ‘„ o ¥∏·±²·©µ²° ¯¨ ¤√¨ ¶¤±§ ¤±·«¨µ¶kƒ¬ªqvl q „©·¨µ·«¨ ¦⁄‘„
©µ¤ª°¨ ±·º¤¶¦¯²±¨ §¤±§¶¨ ∏´¨±¦¨§o·«¨ ¶¨ ∏´¨±¦¨ º¤¶©²∏±§·² º¨¯¯ °¤·¦«·«¨ Σwv2• ‘¤¶¨ q ≤²°³¤µ¬¶²± ²©¦⁄‘„ ¤±§
ª¨±²°¬¦¶¨ ∏´¨±¦¨¶²© Σwv2• ‘¤¶¨ µ¨√¨ ¤¯ §¨·«¤·¬·¦²±·¤¬±¨ §¤±¬±·µ²± ²©u|w ¥³q
׫¨ §¨§∏¦¨§¤°¬±² ¤¦¬§¶¨ ∏´¨±¦¨ ²© Σwv2• ‘¤¶¨ º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨§¤±§·«¨ ± ¤¯¬ª±¨ §²·«¨µ³¨¤µ Σ2• ‘¤¶¨¶¤±§¬·¶
¶¨ ∏´¨±¦¨ º¤¶¦«¤µ¤¦·¨µ¬½¨ §¤¶¶«²º± ¬± ƒ¬ªqw1 Œ± ¦²°³¤µ¬¶²± º¬·« ®±²º± ³¨¤µ Σ2• ‘¤¶¨¶o Σwv2• ‘¤¶¨ §¬¶³¯¤¼¨ §·«¨
·¼³¬¦¤¯ ¶·µ∏¦·∏µ¤¯ ©¨¤·∏µ¨¶²© ³¨¤µ Σ2• ‘¤¶¨¶o¬q¨ q¤¶¬ª±¤¯ ³¨ ³·¬§¨ o·º² ¦²±¶¨µ√¨ §µ¨ª¬²±¶k≤t ¤±§ ≤ul ¤±§²±¨ ‹∂
µ¨ª¬²±q Σwv2• ‘¤¶¨ ¶«²º¨ §²±¨ «¬¶·¬§¬±¨ µ¨¶¬§∏¨ k‹¬¶2ysl ¶¨¶¨±·¬¤¯ ©²µ×uΠΣ·¼³¨ • ‘¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ kŽ¤º¤·¤ ετ αλqot||sl
¤±§³µ¨¶¨±·¨§·«µ¨¨¦¼¶·¨¬±¨ µ¨¶¬§∏¨¶°²¶·¯¼¦²±¶¨µ√¨ §¬± Σ2• ‘¤¶¨¶q׫¨ ³¤µ·¬¤¯ ¤°¬±²¤¦¬§¶¨ ∏´¨±¦¨ ©²µΣwv2• ‘¤¶¨ ¤¯¶²
¶«²º §¨·«µ¨¨³²·¨±·¬¤¯ ‘2ª¯¼¦²¶¬¯¤·¬²±¶¬·¨¶º«²¶¨ ª¯¼¦¤±¶°¬ª«·¥¨ ¬°³²µ·¤±·¬±·«¨ ©²¯§¬±ª¤±§¶·¤¥¬¯¬½¤·¬²± ²©·«¨ ¦²µ¨
¶·µ∏¦·∏µ¨ kŒ¶«¬°¬½∏ ετ αλqot|||l q „¯¬ª±°¨ ±·²©·«¨ §¨§∏¦¨§¤°¬±² ¤¦¬§¶¨ ∏´¨±¦¨ ²©·«¨ Σwv2• ‘¤¶¨ º¬·« ³∏¥¯¬¶«¨§
¤¯²¬§¨¤¨ Σ2• ‘¤¶¨¶¶¨ ∏´¨±¦¨ ¶«²º¨ §·«¨ «¬ª«¨¶·¶¬°¬¯¤µ¬·¼ k|u h l º¬·«¶¤±§³¨¤µΣ{2• ‘¤¶¨ o¤±§·«¨ ²¯º¨ ¶·¶¬°¬¯¤µ¬·¼
kyx h l º¬·«º¬¯§¤³³¯¨k Μαλυστρανσιτοριαl Σ·2• ‘¤¶¨ kŠ¨ ±…¤±®¤¦¦¨¶¶¬²± ‘²q„…svx|u{l q
3 ∆ισχυσσιον
׫¨ ¦²±¶¨±¶∏¶³µ¬°¨ µ¶°ƒt ¤±§°• t «¤√¨ ¥¨ ±¨ ³µ²√¨ §·²¥¨ ¶∏¬·¤¥¯¨©²µΣ2• ‘¤¶¨ ¤¯¯¨ ¯¨ ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±©µ²°¤³¤±¨ ¶¨
³¨¤µ¦∏¯·¬√¤µ¶q׫¨ µ¨¶∏¯·¶³µ¨¶¨±·¨§«¨µ¨¬±·²ª¨·«¨µº¬·«·«¨ ³∏¥¯¬¶«¨§§¤·¤kפ± ετ αλqoussx ~ • ∏¼∏± ετ αλqousszl
¶∏ªª¨¶··«¤··«¨¼ ¦¤± ¤¯¶² ¥¨ °¨³¯²¼¨ §©²µΣ2• ‘¤¶¨ ¤¯¯¨ ¯¨ ¬§¨±·¬©¬¦¤·¬²±©µ²° ≤«¬±¨ ¶¨ ¶¤±§³¨¤µ¤±§¬±·¨µ¶³¨¦¬©¬¦«¼¥µ¬§q
„±§·«¨ ³¤µ·¬¤¯ ©µ¤ª°¨ ±·¶©²µ Σ2• ‘¤¶¨ ¤¯¯¨ ¯¨ ¶ ¤°³¯¬©¬¨§ ©µ²° ª¨±²°¬¦ ⁄‘„¶¦¤± ¥¨ §¬¶·¬±ª∏¬¶«¨§ ¥¼ ¤ª¤µ²¶¨ ª¨¯
xw 第 ts期 张 琳等 }z个砂梨品种 Σ基因型的确定及 t个新 Σ2• ‘¤¶¨ 基因的分离鉴定
ƒ¬ªqw „¯¬ª±°¨ ±·²©·«¨ §¨§∏¦¨§¤°¬±²¤¦¬§¶¨ ∏´¨ ±¦¨¶²©·«¨ ¦¯²±¨ §ts Σ2¤¯¯¨ ¯¨ ¶¤±§¦«¤µ¤¦·¨µ¬½¤·¬²± ²©·«¨ ±¨ º Σwv2• ‘¤¶¨
׫¨ ¤°¬±²¤¦¬§µ¨¶¬§∏¨¶¦²±¶¨µ√¨ §¤°²±ª·«¨ ts Σ2¤¯¯¨ ¯¨ ¶¤µ¨ ¶«¤§¨§q׫¨ ³∏·¤·¬√¨ ¶¬ª±¤¯ ³¨ ³·¬§¨ o¤«¼³¨µ√¤µ¬¤¥¯¨k‹∂l µ¨ª¬²± ¤±§·º²¦²±¶¨µ√¨ §
µ¨ª¬²±¶k≤t ¤±§≤ul ¤µ¨ ∏±§¨µ¯¬±¨ §qƒ²µΣwv2• ‘¤¶¨ o¦²±¶¨µ√ §¨¦¼¶·¨¬±¨ µ¨¶¬§∏¨¶o«¬¶·¬§¬±¨ µ¨¶¬§∏¨¶ ¶¨¶¨±·¬¤¯ ©²µ·«¨ • ‘¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§
³²·¨±·¬¤¯ ‘2ª¯¼¦²¶¼¯¤·¬²± ¶¬·¨¶¤µ¨ °¤µ®¨ §º¬·«¶¼°¥²¯¶ ω o σ ¤±§ π oµ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ q
¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶²µ°„Š∞ ¥¤¶¨§²±·«¨ ¬±·µ²± ¯¨ ±ª·«√¤µ¬¤·¬²±q
⁄∏µ¬±ª·«¨ ³µ¨³¤µ¤·¬²± ²©·«¨ ³µ¨¶¨±·°¤±∏¶¦µ¬³·o·«¨ ·«µ¨¨¦∏¯·¬√¤µ¶−‹¤±ª´¬±ª. o−÷¬½¬¯√. ¤±§−≤∏¬ª∏¤±. º¨ µ¨ Σ2
ª¨ ±²·¼³¨ §º¬·«·«¨ °¨ ·«²§²© ±¨§²±∏¦¯¨ ¤¶¨ §¬ª¨¶·¬²± ²© °≤• ³µ²§∏¦·¶q Š∏ kussyl ª¨ ±²·¼³¨ §·«¨ ·«µ¨¨ ¦∏¯·¬√¤µ¶¤¶
Σv Σz o Σt Σw ¤±§ Σt Σw Σx oµ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ o º«¬¯¨ • ∏¼∏± ετ αλqkusszl ª¨ ±²·¼³¨ §·«¨ ¤¯·¨µ·º² ¦∏¯·¬√¤µ¶¤¶ Σt Σw ¤±§
Σv Σx oµ¨¶³¨¦·¬√¨ ¼¯ q − ‹¤±ª´¬±ª. ¬¶¤ ±¤·∏µ¤¯ «¼¥µ¬§ ²© −≤«¬¯¬. o ¤±§¬·º¤¶¦²±¶¬§¨µ¨§·² ¥¨ ·«¨ ³²¯¯¨ ± ³¤µ¨±·²©
−≠¤´¬±ª. k−≠¤¯¬. −‹¤±ª´¬±ª. l ¤±§−÷¬±«¤±ª. k−≥«¬±¶¨¬®¬. −‹¤±ª´¬±ª. l q׫¨ Σ2ª¨ ±²·¼³¨ ²© −≤«¬¯¬. «¤¶±²·¥¨ ±¨
µ¨³²µ·¨§¼¨·¥∏·o‹ ±¨ª ετ αλqkusszl ¤¶¶¬ª±¨ §−≠¤´¬±ª. ¤¶Σw Σtz ¤±§¬±©¨µµ¨§·«¤·−≠¤´¬±ª. ¶«²∏¯§¬±«¨µ¬··«¨ Σw ©µ²°
−‹¤±ª´¬±ª. q ²µ¨²√¨ µo·«¨ ª¨ ±²·¼³¨ ²© Σt Σv º¤¶¤¶¶¬ª±¨ §·² −÷¬±«¤±ª. ¤¯¶²¥¼ Š∏kussyl q׫¨ Σv ¤¯¯¨ ¯¨ ¶«²∏¯§¥¨
©µ²° −≥«¬±¶¨¬®¬. ¥¨¦¤∏¶¨ −≥«¬±¶¨¬®¬. «¤¶¥¨ ±¨ ª¨ ±²·¼³¨ §¤¶ Σv Σw ¬± ¤³¤± k‹¬µ¤·¶∏®¤ ετ αλqot||{l q׫¨ ²·«¨µ²±¨
¤¯¯¨ ¯¨ Σt o ²¥√¬²∏¶¯¼o ¶«²∏¯§ ¥¨ ª¬√¨ ± ¥¼ − ‹¤±ª´¬±ª. q ƒµ²° ·«¨ ¤±¤¯¼¶¬¶ ¤¥²√¨ o ·«¨µ¨©²µ¨ o ²∏µ¤¶¶¬ª±°¨ ±·²©
−‹¤±ª´¬±ª. ¤¶ Σt Σw ¶¨ °¨¶·² ¥¨ ¦²µµ¨¦·q׫¨ Σ2ª¨ ±²·¼³¨ ²©−÷¬½¬¯√. ¬§¨±·¬©¬¨§«¨µ¨ ¬¶·«¨ ¶¤°¨ º¬·«·«¤·µ¨³²µ·¨§¥¼
Š∏kussyl ¤±§ • ∏¼∏± ετ αλqkusszl ¥∏·o¤¶∏µ³µ¬¶¨ ¦²°¨ ¶©µ²°·«¨ ³¨ §¬ªµ¨¨¤±¤¯¼¶¬¶q׫¨ −÷¬½¬¯√. ¬¶¦²±¶¬§¨µ¨§·²¥¨
·«¨ ¦µ²¶¶−≥«¬±¶¨¬®¬. k−≠¤®∏°². −‹¤±ª´¬±ª. l ¤±§·«¨ Σ2ª¨ ±²·¼³¨ ²©−≠¤®∏°². º¤¶ Σt Σwk≤¤¶·¬¯¯² ετ αλqousstl o
¬°³¯¼¬±ª·«¤·− ≠¤®∏°². ¬¶¦²°³¤·¬¥¯¨ º¬·« − ‹¤±ª´¬±ª. ¤¯·«²∏ª«·«¨¼ ¶«¤µ¨§¤± ¬§¨±·¬¦¤¯ Σ2ª¨ ±²·¼³¨ q ׫¬¶©¬±§¬±ª
º²∏¯§¥¨ ∏¶¨©∏¯ ¬± ³¨¤µ¥µ¨ §¨¬±ª ³µ²ªµ¤°q −≤∏¬ª∏¤±. ¬¶·«¨ ³µ²ª¨±¼ ²© −Ž²¶∏¬. k Σw Σx l k≤¤¶·¬¯¯² ετ αλqousstl
k−‹¤±ª´¬±ª. −≥«¬±¶¨¬®¬. l q׫¬¶¦∏¯·¬√¤µº¤¶ Σ2ª¨ ±²·¼³¨ §¤¶ Σt Σw Σx o¤±§¬§¨±·¬©¬¨§¤¶¤§¬³¯²¬§¥∏·±²·¤·µ¬³¯²¬§¥¼
©¯²º ¦¼·²°¨ ·µ¼ ¥¼ Š∏ kussyl q „±¤¯¼¶¬¶²©·«¨ ³¨ §¬ªµ¨¨ ²© − ≤∏¬ª∏¤±. ¶«²º¨ §·«¤·¤¯¯ ²©·«¨ ·«µ¨¨ Σ2ª¨ ±²·¼³¨¶²©
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k责任编辑 徐 红l
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