全 文 :园艺学报,2016,43 (7):1267–1274.
Acta Horticulturae Sinica
doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0899;http://www. ahs. ac. cn 1267
收稿日期:2016–02–19;修回日期:2016–07–01
基金项目:广东省自然科学基金项目(2016A030307005);公益性行业(农业)科研专项(201203092)
* 通信作者 Author for correspondence (E-mail:wsbcjy@163.com)
杧果种质资源果实香气多样性分析
马小卫,杨颖娣,武红霞,周毅刚,王松标*
(中国热带农业科学院南亚热带作物研究所,农业部热带果树生物学重点实验室,广东湛江 524091)
摘 要:为探明杧果种质资源的香气特点,以 28 份杧果品种资源成熟果实为试材,采用顶空固相微
萃取技术和气相色谱质谱联用仪测定了果实香气的组成和相对含量。结果表明,不同杧果品种果实香气
组成和含量均存在很大差异,从 28 个品种中分离出 63 种香气成分;根据不同类别香气成分的积累量,
杧果品种资源可以分为萜烯类、酯类和醛类;24 个品种香气成分以单萜烯类和倍半萜烯类为主,3–蒈烯、
萜品油烯和 α–荜澄茄油烯是含量最高的萜烯类成分;‘Lippens’、‘桂香杧’和‘鹦鹉杧’果肉中积累量
最高的香气物质均为酯类,丁酸丁酯、丁酸异戊酯和异戊酸乙酯分别是这 3 个品种主要的香气成分;‘丰
顺无核’果肉中香气成分含量最高的是 6–溴吲哚–3–甲醛,相对含量为 33.64%。
关键词:杧果;种质资源;香气
中图分类号:S 667.7 文献标志码:A 文章编号:0513-353X(2016)07-1267-08
Diversity Analysis of Volatile in Mature Fruits of Mango Germplasm
MA Xiao-wei,YANG Ying-di,WU Hong-xia,ZHOU Yi-gang,and WANG Song-biao*
(South Subtropical Crops Research Institute,Key Laboratory of Tropical Fruit Biology,Ministry of Agriculture,Zhanjiang
Guangdong 524091,China)
Abstract:To assess volatile variety of mango germplasm,composition and relative content of volatile
in 28 mango cultivars were investigated by using solid phase micro-extraction headspace GC–MS
methods. The results showed that there were significant differences among the cultivars in composition
and relatively content of volatile. Totally 63 volatiles belonging to various chemical classes were detected.
Based on the cumulative occurrence of members of these classes,cultivars were grouped as terpene,esters
or aldehydes dominant. Terpene hydrocarbons were the major volatiles of 24 cultivars,the dominant
terpenes being 3-carene,terpinolene and α-cubebene depending on different cultivars. The highest
concentration of esters were found in‘Lippens’,‘Guixiang Mang’and‘Yingwu Mang’,the dominant
esters of the three cultivars being butyl butyrate,2-methylbutyl butyrate and ethyl isovalerate,respectively.
6-Bromoindole-3-carboxaldehyde was the major aldehyde in‘Fengshun Wuhe’,which accounted for
33.64% of the total flavor volatile compounds.
Key words:mango;germplasm;volatile
Ma Xiao-wei,Yang Ying-di,Wu Hong-xia,Zhou Yi-gang,Wang Song-biao.
Diversity analysis of volatile in mature fruits of mango germplasm.
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果实香气主要包括脂肪酸、酯类、醇类、醛类、酮类、萜类、酚类以及一些类胡萝卜素降解物
等(Schwab et al.,2008;Negri et al.,2015)。香味是杧果、苹果、葡萄等果实品质性状的主要组
成,对果实鲜食和加工都有重要影响。中国拥有丰富的杧果种质资源,但长期以来杧果果实品质育
种目标多集中在抗病、果实大小和色泽等方面(黄国弟,2000),由于对资源的香气特征不明确,长
期忽视香味品质性状,致使目前栽培品种的果实香味单一,资源优势未得到充分利用。
为深入分析中国现有杧果品种资源的香气特点,研究了来自中国、美国、澳大利亚、印度等 28
份种质资源的香气组成和含量,以期为品种选择和育种工作提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
28 份杧果种质及其来源见表 1,所有材料均取自中国热带农业科学院南亚热带作物研究所杧果
种质资源圃(广东湛江),各品种砧木及栽培管理模式一致。
根据生产经验和果实花后发育时间,于 2014 年 7 月在各品种的商品成熟期采摘(果实发育成熟,
果核处果肉开始变黄)。每个品种选择长势中等的 3 株树,在每株树冠外围不同方向随机选取 3 个大
小一致、无病害的果实用于果实香气测定(即每个品种 3 次重复)。所有样品的采集均由一个试验者
单独完成,尽量减少采样误差。
果实采摘后带回实验室,统一放置在气调库中,白天温度 24 ℃,晚上 18 ℃,待各品种完熟时
(果实发育充分,有杧果固有的色香味,肉质较硬实)取样分析香气。
表 1 本研究所用 28 个品种及其来源
Table 1 28 cultivars used in the study and its origin
来源
Origin
编号
Code
品种
Cultivar
来源
Origin
编号
Code
品种
Cultivar
中国 China 1 广西 8 号 Guangxi 8 澳大利亚 Australia 16 Spooner
2 广西 4 号 Guangxi 4 17 红杧 6 号 Hongmang 6
3 桂香杧 Guixiang Mang 18 Kensinton
4 热农 2 号 Renong 2 19 Bambaroo
5 兴热 1 号 Xingre 1 20 R2E2
6 东镇红杧 Dongzhen Hongmang 21 KRS
7 实选 7 Shixuan 7 印度 India 22 秋杧 Qiumang
美国 America 8 Zillate 古巴 Cuba 23 古巴 2 号 Cuba 2
9 Valencia Pride 不详 Unkown 24 小鸡杧 Xiaoji Mang
10 Ono 25 香蕉杧 Banana
11 Keitt 26 金穗杧 Jinsui Mang
12 VanDyke 27 鹦鹉杧 Yingwu Mang
13 Kent 28 丰顺无核 Fengshun Wuhe
14 Lippens
15 Irwin
1.2 方法
将同一株树 3 个果实的果肉在匀浆机中打碎混匀,准确称取 8 g 果肉于 20 mL 顶空样品瓶中,
聚四氟乙烯隔垫密封。25 ℃恒温水浴下,使用 100 μm 聚二甲基硅氧烷固相微萃取头顶空吸附 40 min
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园艺学报,2016,43 (7):1267–1274. 1269
后,将萃取头插入气相色谱质谱联用仪(GC–MS)进样口解析 3 min。
利用 Thermo fisher 公司气相色谱质谱仪(GC–MS:Trace Ultra GC–ISQ MS)进行分析。色
谱条件:色谱柱 DB-5 MS,30 m × 0.25 mm lD × 0.25 μm,载气:氦气,柱流速:1 mL · min-1;进
样口温度:250 ℃无分流进样。初始温度 50 ℃保持 l min,然后以 5 ℃ · min-1 升至 140 ℃,再以
10 ℃ · min-1 升至 250 ℃,保持 10 min。质谱条件:接口温度 250 ℃,离子源温度 200 ℃,离子化
方式:EI,电子能量 70 eV,质量范围 35 ~ 335 amu · min-1。
未知化合物谱图经计算机检索同时与 NIST08 谱库相匹配,并结合人工图谱解析及资料分析确
认;按峰面积归一化方法求得各成分相对质量百分含量。
2 结果与分析
从表 2、表 3 和表 4 可以看出,杧果品种资源的香气组成和相对含量均存在明显差异。从 28 个
杧果品种中分离出 63 种香气成分,其中‘Spooner’香气成分最多,为 14 种;‘小鸡杧’、‘Kent’
和‘红杧 6 号’香气成分最少,均为 3 种。根据香气成分的化学组成,可以将 63 种香气成分划分为
9 类,即单萜烯类、倍半萜烯类、非萜烯烃类、酯类、醛类、醇类、酮类、酸类和其他类物质,各
类别依次含有 11、11、6、17、4、4、3、1 和 6 种香气成分。
单萜烯类和倍半萜烯类均属于萜烯类,是大多数杧果品种果实香气的主要成分。在 26 个品种
中分离出单萜烯类物质,其中 23 个品种的香气成分以单萜烯类为主,约占总香气的 23.58%(‘广西
8 号’)~ 86.85%(‘秋杧’),3–蒈烯和萜品油烯是主要的香气物质。虽然在 25 个品种中检测到倍
半萜烯类物质,但仅有‘东镇红杧’香气以倍半萜烯类为主,约占总香气的 44.28%,α–荜澄茄油
烯是其主要成分。
酯类和醛类也是杧果果实香气的重要组成成分。28 个品种中含酯类香气成分的有 8 个品种,其
中‘桂香杧’、‘Lippens’和‘鹦鹉杧’果肉香气物质均以酯类含量最高,分别占其总香气的 48.67%、
85.68%和 62.90%,丁酸异戊酯、丁酸丁酯和异戊酸乙酯分别是 3 个品种的主要香气成分。含醛类香
气成分的有 5 个品种,其中‘丰顺无核’果实香气成分以 6–溴吲哚–3–甲醛含量最高,相对含量
为 33.64%;另外‘Keitt’果实中 2,4–双(三甲基硅氧基)苯甲醛含量也较高,相对含量为 20.97%。
醇类、酮类和酸类物质在杧果果实香气成分中含量均较低。4 个品种含有醇类物质,其中‘鹦鹉杧’
和‘小鸡杧’醇类物质含量较高,其主要成分分别是仲辛醇和叔丁基二甲基硅烷醇,相对含量分别
为 6.74%和 4.55%。在所有品种中,‘Ono’果实中酮类和酸类物质含量最高,相对含量分别为 10.24%
和 11.01%,其主要成分分别是 4–甲氧基–2,5–二甲基–3(2H)–呋喃酮和 3–羟基扁桃酸。在
其他类香气成分中,(1.alpha.,4a.alpha.,8a.alpha.)-1,2,3,4,4a,5,6,8a-octahydro-7-methyl-4-methylene-1-
(1-methylethyl)-naphthalene 在‘东镇红杧’和‘秋杧’中含量较高,相对含量分别为 14.08%和
3.23%。
依据表 4 中各品种各类香气成分相对含量,对 28 份杧果品种资源进行聚类分析,从图 1 可以
看出,所有品种可以分为 4 类(图 1)。第 1 类果实香气以酯类物质含量为主,有 3 个品种;第 2 类
以单萜烯类物质为主,有 19 个品种;第 3 类以醛类物质为主,有 1 个品种;第 4 类以倍半萜烯类物
质为主,有 5 个品种。
Ma Xiao-wei,Yang Ying-di,Wu Hong-xia,Zhou Yi-gang,Wang Song-biao.
Diversity analysis of volatile in mature fruits of mango germplasm.
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表 2 杧果 28 个品种分离出的香气成分
Table 2 Volatiles in fruits of 28 cultivars
化合物
Compounds
编号
Code
化合物
Compounds
编号
Code
单萜烯 3–蒈烯 3-Carene M1 非萜烯烃类 1,3,5,8–十一碳四烯 NT1
Monoterpene 萜品油烯 Terpinolene M2 Non-terpene 1,3,5,8-undecatetraene
α–蒎烯 α-pinene M3 1,5,5–三甲基–6–甲基乙烯基环己烯 NT2
罗勒烯 Ocimene M4 1,5,5-trimethyl-6-methylene-cyclohexene
β–水芹烯 β-phellandrene M5 2–异丙基–5 甲基–9 亚甲基,双环 NT3
松油烯 Terpinene M6 [4.4.0]-1 烯 2-isopropyl-5-methyl-9-
柠檬烯 Cinene M7 methylene-Bicyclo[4.4.0]dec-1-ene
双戊烯 Dipentene M8 1,6–二甲基–8–(1–甲基乙基)–1,5–环癸二 NT4
β–蒎烯 β-pinene M9 烯 1-methyl-5-methylene-8-(1-methylethyl)-
4–蒈烯 4-carene M10 [s-(E,E)]-1,6- cyclodecadiene
1–甲基–4–(1–甲基乙烯基)环己烯 M11 1–甲基–4–(1–甲基乙烯基)苯 NT5
Cyclohexene,4-methylene-1-(1-methylethyl)- 1-methyl-4-(1-methylethenyl)-benzene,
倍半萜烯 [1aR-(1a.alpha.,4.alpha.,4a.beta.,7b.alpha.)]- S1 4–乙烯基–1,5,5–三甲基–环戊烯 NT6
Sesquiterpene 1a,2,3,4,4a,5,6,7b-octahydro-1,1,4,7- 4-ethenyl-1,5,5-trimethyl-cyclopentene
tetramethyl-1H-cycloprop[e]azulene 酯类 顺–3–己烯基丁酯 cis-3-hexenyl butyrate L1
瑟林烯 Selinene S2 Lactones 丁酸己酯 Hexyl butyrate L2
α–荜澄茄油烯 α-cubebene S3 异丁酸辛酯 Octyl isobutyrate L3
香树烯 Alloaromadendrene S4 丁酸丁酯 Butyl butyrate L4
α–布藜烯 α-bulnsene S5 丁酸异戊酯 2-methylbutyl butyrate L5
律草烯 Caryophyllene S6 癸酸乙酯 Ethyl caprate L6
反式石竹烯 β-caryophyllene S7 辛酸乙酯 Ethyl caprylate L7
1,6-cyclodecadiene1-methyl-5-methylene- S8 丙位辛内酯 γ-octanoic lactone L8
8-(1-methylethyl)- 己内酯 Hexanolactone L9
白菖烯 Calarene S9 己烯基丁酯 Hexenyl butyrate L10
(+)-epi-bicyclosesquiphellandrene S10 2–丁烯酸–3–己烯酯 L11
绿叶烯 Patchoulene S11 Crotonic acid 3-hexen-ylester
醛类 2,4–双(三甲基硅氧基)苯甲醛 A1 乙酸异丁酯 Isobutyl acetate L12
Aldehydes 2,4-bis(trimethylsiloxy)-benzaldehyde 异丁酸己酯 Hexyl isobutyrate L13
5–羟甲基糠醛 A2 正戊酸–(Z)–3–己烯酯 L14
2-furancarboxaldehyde,5-(hydroxymethyl)- N-valeric acid cis-3-heren-ylester
苯丙醛 Phenypropyl aldehyde A3 异戊酸乙酯 Ethyl isovalerate L15
6–溴吲哚–3–甲醛 A4 异戊酸丙酯 Propyl isovalerate L16
6-bromoindole-3-carboxaldehyde 3–甲基丁酸戊酯 N-amyl isovalerate L17
醇类 Alcohols 3,6–亚壬基–1–醇 3,6-nonadien-1-ol AO1 其他 Others (1.alpha.,4a.alpha.,8a.alpha.)-1,2,3,4,4a,5,6, O1
二甲基(1,1,2–三甲基丙基)硅烷醇 AO2 8a-octahydro-7-methyl-4-methylene-1-
Silanol,imethyl(1,1,2-trimethylpropyl)- (1-methylethyl)-naphthalene
叔丁基二甲基硅烷醇 AO3 3,6–二(N,N–二甲氨基)–9–甲基咔唑 O2
Tert-butyl dimethyl silanol 3,6-bis(N,N-dimethylamino)-9-methylcarba
仲辛醇 2-octanol AO4 zole
酸类 Acids 3–羟基扁桃酸 3-hydroxymandelic acid AC1 2-chloro-4-(4-methoxyphenyl)-6- O3
酮类 Ketones 2,3–二氢–3,5–二羟基–6–甲基–四 K1 (4-nitrophenyl)pyrimidine
氢–吡喃–4–酮 4H-pyran-4-one, Octamethyl-cyclotetrasiloxane O4
2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl- 1,2,3,5,6,7,8,8a-octahydro-1,4-dimethyl- O5
1–甲基–4–(1–甲基乙烯基)–1,3– K2 7-(1-methylethenyl)-,1S-(1.alpha.,7.alpha.,
环己二酮 1-methyl-4-(1-methylethyl)-1,3- 8a.beta.)]-azulene
cyclohexadiene 4-(1-methylethylidene)bis-phenol O6
4–甲氧基–2,5–二甲基–3(2H)–呋喃酮
4-methoxy-2,5-dimethyl-3(2H)-furanone
K3
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杧果种质资源果实香气多样性分析.
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表 3 不同品种香气组成成分和相对含量
Table 3 Composition and relative content of different cultivars volatiles %
品种代号 Cultivar code 化合物
Compound 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
M1 21.20 57.55 18.34 62.34 3.55 12.96 71.59 47.72 33.91 61.85 56.02
M2 2.38 22.87 52.50 3.23 10.44 47.95 5.21 1.73 4.89 9.09
M3 4.11 2.00 2.17 1.90 3.75 8.62
M4 3.02 1.82 21.55
M5 17.65
M6 1.72
M7 1.88
M8 2.79 1.60 3.14 1.63
M9 28.37
S1 2.54
S2 6.93 7.35 3.00 2.51
S3 1.18 27.67
S4 1.22
S5 1.48
S6 1.76 5.37 4.92 8.46 3.86 3.13 7.20 7.13
S7 3.70 9.86
S8 1.44
S9 1.22
S10 10.64
NT2 8.04
NT3 9.17
NT4 3.18
NT5 1.21 2.11
A1 20.97 9.73
A2 10.72
AO1 3.79
K1 1.88
K2 2.90
K3 10.24
AC1 11.01
L1 1.41
L2 9.52 1.01
L3 3.44
L4 12.76 43.80
L5 16.52 1.32
L6 2.05 5.40
L7 4.38
L8
L9 6.64
L10 35.13
O1 14.08
O2 12.60
O3 4.29
O4 1.77
O5 2.23
品种代号 Cultivar code 化合物
Compound 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
M1 73.76 4.46 71.26 3.16 37.62 4.16 4.52 69.93 4.06 7.49 5.38
M2 5.71 1.75 6.61 60.87 12.12 81.63 24.71 5.83 78.11 70.66 2.68 9.35
M3 84.62 1.22
M4 8.26 1.29
M6 1.72
M8 3.01 2.57 2.06
M10 61.89
M11 74.85
S1 1.06 2.74 1.43
S2 3.73 2.28 1.58
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续表 3
品种代号 Cultivar code 化合物
Compound 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
S3 1.26
S5 1.60 2.73 1.16
S6 3.86 4.35 12.77 8.09 1.39 1.31 3.17
S7 3.12 2.53 5.30
NT1 1.23
NT6 1.03
A3 2.65
A4 33.64
AO2 2.15
AO3 4.55
AO4 6.74
K2 1.65
L1 4.29 4.32 16.55
L8 2.54
L11 1.03
L12 9.91
L13 1.69
L14 1.04
L15 39.21
L16 5.75
L17 17.94
O1 3.23
O6 3.15 1.15
表 4 不同杧果品种各类香气成分相对含量
Table 4 Relative content of various chemical classes in different mango cultivars %
品种
Cultivar
单萜烯
Monoterpene
倍半萜烯
Sesquiterpene
非萜烯烃类
Non-terpene
hydrocarbons
酯类
Lactones
醛类
Aldehydes
醇类
Alcohols
酮类
Ketones
酸类
Acids
其他
Others
1 23.58 6.93 10.72 1.88
2 87.55 5.24
3 21.47 48.67
4 74.73 8.08 1.21
5 67.45 15.23
6 13.98 44.28 20.40 14.08
7 60.91 12.27 16.92
8 79.59 11.46
9 51.23 3.86 2.90 2.23
10 53.67 3.13 8.05 10.24 11.01
11 35.64 7.20 20.97 3.79
12 78.51 9.64 1.01
13 66.74
14 85.68 1.77
15 82.49 3.86
16 68.10 5.42 2.11 10.55 9.73
17 80.43
18 64.03 1.03 2.15
19 49.74 19.23 5.33
20 85.80 4.32 1.65
21 37.50 11.63 1.23 21.82
22 85.91 4.51 3.23
23 77.82 3.84 3.15
24 82.17 4.55
25 79.86 1.60
26 81.45 7.33
27 2.68 62.90 2.65 6.74
28 2.74 33.64 1.15
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杧果种质资源果实香气多样性分析.
园艺学报,2016,43 (7):1267–1274. 1273
图 1 杧果 28 个品种聚类分析图
Fig. 1 Cluster dendrogram of 28 mango cultivars
3 讨论
香气是杧果成熟的重要特征。研究表明,萜烯类物质是杧果主要香气成分(Pino et al.,2005;
Pino & Mesa,2006)。根据主要萜烯类成分不同,Andrade 等(2000)将杧果分为萜品油烯类、3–
蒈烯类和月桂烯类。与前人研究结果相似,本研究中从 27 个杧果品种中检测出萜烯类物质,其中
23 个品种果肉中含量最高的香气物质为萜烯类,3–蒈烯、萜品油烯和 α–荜澄茄油烯是主要成分。
不同品种间萜烯类成分也有很大差异,如‘Valencia Pride’中 3–蒈烯相对含量很高,但检测不到
萜品油烯和 α–荜澄茄油烯;‘Ono’果实香气以罗勒烯和 β–蒎烯为主,不含 3–蒈烯和 α–荜澄茄
油烯。Liu 等(2013)对 4 个杧果品种的研究结果也表明,瑟林烯、佛术烯和香橙烯仅在‘Jin Hwang’
中特有,柠檬烯仅在‘Irwin’中检测到,律草烯仅在‘Keitt’中特有。化学结构不同的香气成分具
有不同的感官效果,如罗勒烯具有温和的草香味,3–蒈烯具有甜香味,而柠檬烯香味柔和、保留时
间长(张春雨 等,2009;Liu et al.,2013)。本研究中‘R2E2’和‘实选 7’具有清香味,‘秋杧’
和‘Spooner’具有浓香味,而‘Zillate’和‘Ono’具有松香味。这些品种间香味的差异可能与其
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Diversity analysis of volatile in mature fruits of mango germplasm.
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含有的萜烯类香气成分不同有关。
醛类物质含量较低,但对杧果果实香气的形成具有重要影响。如 Macleod 和 De-Troconis(1982)
的研究显示,杧果果实中醛类物质相对含量仅为 0.03% ~ 14.36%;Pino 等(2005)发现,多数古巴
杧果品种果实具有清甜的青草气味,与其含有的醛类化合物有关。本研究中仅在 5 个品种中检测到
醛类物质,但不同品种间醛类化合物相对含量差异很大,其中‘丰顺无核’果肉中含量最高的香气
物质为 6–溴吲哚–3–甲醛,是典型的醛香型品种。
醛类化合物很容易被分解成醇类和酯类化合物(Matsui,2006)。醇类化合物在杧果中成分少、
含量低,对果实香气的贡献很小(Engel & Tressl,1983;Quijano et al.,2007)。与以往的研究结果
相似,本研究仅在 4 个品种中检测到 4 种醇类香气成分,相对含量为 2.15% ~ 6.74%。酯类具有典型
的果香味,是杧果果肉中含量第二丰富的化合物,对杧果香气形成的贡献仅次于萜烯类(Andrade et
al.,2000)。Wilson 等(1990)认为酯类物质在果实中即使含量很低也能被检测到,Idstein 和 Schreier
(1985)从杧果‘Alphoson’中检测到 14 种酯类物质,Pandit 等(2009)也在 18 个杧果品种中检
测到 8 种酯类物质。本研究中从 8 个杧果品种中检测到 17 种酯类成分,多数品种中酯类含量很低,
但‘桂香杧’、‘Lippens’和‘鹦鹉杧’果肉中香气物质均以酯类为主,是典型的酯香型品种。
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