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黄瓜HANABA TARANU(HAN)基因的克隆与分子功能分析



全 文 :园 艺 学 报 2011,38(增刊):2592 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com

收稿日期:2011–09–16
基金项目:中央高校基本科研业务费专项(2011JS067)
* 通信作者(E-mail:zhxiaolan@cau.edu.cn;Tel:010-62732102)
黄瓜 HANABA TARANU(HAN)基因的克隆与
分子功能分析
丁 莲,张小兰*
(中国农业大学农学与生物技术学院蔬菜系,北京 100193)
高等植物地上部所有器官(包括茎、叶、花和果实)都来源于茎尖分生组织的干细胞库,茎尖
分生组织由此直接影响与调控植株形态与结构建成、生物量、产量等重要生物与农艺性状。HAN 是
调控茎尖分生组织结构和花器官发育的关键基因之一,它编码一个 GATA3 基因家族的转录因子,
该基因家族在拟南芥中有 29 个成员,分为 4 个亚家族。拟南芥 HAN 缺失突变导致植株分生组织变
小,花数减少,花器官融合、畸形,种子数量显著下降等,而 HAN 过量表达则导致植物死亡。克隆
黄瓜 HAN 基因,并解析该基因在黄瓜植株体内生物学的功能,对了解黄瓜茎尖分生组织、花和果实
的分子发育机理十分重要。
根据拟南芥的 HAN 基因序列和黄瓜全基因组序列,利用同源克隆手段,克隆分析黄瓜 HAN 基
因;然后通过半定量 RT-PCR、实时 RT-PCR 和 RNA 原位杂交等分子生物学技术,分析 HAN 的时
空表达特性;最后通过互补实验(把黄瓜 HAN 基因转入拟南芥)、过量表达和 RNAi 诱导缺失等转
基因技术对 HAN 的体内功能进行验证。
本研究中发现黄瓜 HAN 基因通过可变剪切产生两个不同长度的 RNA,并成功克隆。HAN 的时
空表达特性,过量表达和 RNAi 诱导缺失突变正在构建之中。

关键词:黄瓜;HAN;茎尖分生组织;花发育
中图分类号:S 642.2 文献标识码:A 文章编号:0513-353X(2011)S-2592-01