全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2639 http: // www. ahs. ac. cn
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收稿日期：2011–07–28
基金项目：广东省科技攻关项目（2008B021500011）；广东省教育部产学研结合项目（2010B090400492）
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SRAP 反应体系的优化及其在白簕品种间亲缘
关系分析中的应用
林春华 1,*，李兆龙 2，乔燕春 1，林伟君 3，刘自珠 1，谭 雪 1
（1 广州市农业科学研究院，广州 510308；2仲恺农业工程学院生命科学学院，广州 510225；3 广东省农业科学院科
技情报研究所，广州 510640）
白簕[Acanthopanax trifoliatus（Linn.）Merr. ]，别名鹅掌簕、禾掌簕，三加皮，三叶五加，为
五加科（Araliaceae）攀援状灌木。白簕为民间常用草药，有舒筋活络、祛风除湿、理气、止咳之
效。目前国内外对白簕的研究重点在其化学成分和活性分析方面，有关种质资源收集、引种、鉴定
和利用等研究鲜有报道。本研究中通过优化 SRAP 反应体系，对白簕材料的遗传多样性及亲缘关系
进行分析，以期为白簕种质资源的保存、优良品种纯化以及杂交育种等工作提供参考依据。
分别从田间生物学性状和分子基因遗传水平两方面入手，对 7 份白簕材料进行了观察和分析。
分别于 2008 年、2009 年、2010 年连续 3 年将材料种植于广州市农业科学研究院恩平白簕基地及科
研示范基地进行表型调查记录。挑选其幼嫩叶片，改良 CTAB 法提取白簕基因组 DNA；采用优化
的 SRAP 反应体系对基因组进行处理，用 99 个 SRAP 引物组合对材料的多态性进行筛选，数据采
用 NTSYS2.1 软件处理，应用非加权类平均法（UPGMA）进行聚类分析，建立聚类图。
经对影响 SRAP-PCR 体系中的 Mg2+、dNTPs 和引物浓度等因子的优化，建立了一套适合白簕
SRAP 检测的 25 μL 反应体系：4 mmol · L-1 Mg2+，3 mmol · L-1 dNTPs，3 µmol · L-1 引物，20 ng 模
板 DNA，1.5 U Taq DNA 聚合酶。从 99 组 SRAP 引物组合中筛选出 17 个多态性较好的组合对 7
份材料进行分析，共扩增到 461 条谱带，其中多态性谱带 155 条，多态性谱带比率为 33.6%，不同
引物的扩增条带为 7 ~ 12 条，平均每个引物组合产生 10 个多态性条带。
根据 SRAP 扩增结果，计算各品种间的遗传相似系数。结果表明：这些材料间的遗传相似系数
的变化范围是 0.7077 ~ 0.9474，其中嫩芽呈红绿色的紫柄品种和嫩芽呈绿色的细叶密刺品种的相似
系数最小（0.7077），亲缘关系最远；嫩芽呈红绿色的大叶大刺和红梗品种之间相似系数最高
（0.9474），亲缘关系最近。
UPGMA 聚类分析结果表明，所检测的 7 个白簕品种分为二大类群，第一类群又分为 2 个亚类。
白梗簕菜、细叶小刺簕菜、紫柄簕菜、大叶大刺簕菜和红梗簕菜，聚成一组，其中白梗簕菜和细叶
小刺簕菜为一个亚类，紫柄簕菜、大叶大刺簕菜和红梗簕菜为第二亚类；青梗簕菜和细叶密刺簕菜
聚成了另一组；这些材料嫩芽颜色从下往上分别为绿色、红绿色和浅绿色，由此可知它们的分类依
据是白簕嫩芽颜色的深浅。
关键词：白簕；SRAP 反应体系；优化；亲缘关系
中图分类号：S 6 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2639-01