全 文 :园 艺 学 报 2005, 32 (1) : 115~117
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2004 - 04 - 22; 修回日期 : 2004 - 09 - 15
基金项目 : 国家重点基础研究发展计划项目 (2003CB114400) ; 国家自然科学基金项目 (30270910) ; 北京市自然科学基金重点
项目 (6021004; 6001002)
葡聚六糖诱导黄瓜体内水杨酸的积累及其与抗霜霉
病关系的初步研究
李宝聚 1 范海延 1, 2 孙艳秋 1, 2 石延霞 1
(1 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 北京 100081; 2 沈阳农业大学园艺学院 , 沈阳 100161)
摘 要 : 通过盆栽试验表明 , 葡聚六糖连续处理黄瓜幼苗 3次后 , 可以诱导黄瓜抗霜霉病 , 防效可达
65140%。通过反相 HPLC法测定不同时间水杨酸含量表明 , 葡聚六糖连续诱导处理黄瓜幼苗 3次后水杨酸
含量在诱导后 1 d出现高峰 , 且水杨酸含量在 8 d内一直比对照略高。葡聚六糖仅处理 1次时 , 诱导叶 (第
1片真叶 ) 水杨酸含量显著提高 , 在诱导后 6 h出现 1个高峰 , 而非诱导叶 (第 2片真叶 ) 在 12 h出现 1
个高峰。
关键词 : 葡聚六糖 ; 黄瓜 ; 霜霉病 ; 诱导抗性 ; 水杨酸
中图分类号 : S 64212 文献标识码 : A 文章编号 : 05132353X (2005) 0120115203
Accum ula tion of Sa licylic Ac id in Cucum ber Trea ted w ith Glucohexaose and
Its Rela tion to System ic Acqu ired Resistance aga in st Cucum ber D owny M il2
dew
L i Baoju1 , Fan Haiyan1, 2 , Sun Yanqiu1, 2 , and Shi Yanxia1
(1 Institu te of V egetables and Flow ers, Ch inese A cadem y of A gricultural Sciences, B eijing 100081, China; 2 Collage of Horticu l2
tu re, Shenyang A gricultural U niversity, Shenyang 110161, China)
Abstract: The potted test indicated that the glucohexaose can induce the disease resistance of cucumber
to cucumber downy m ildew and p rotective effect was 65140% after glucohexaose inducing three times continu2
ously. The content of salicylic acid in different time was assayed through reverse phase HPLC, which demon2
strate that there is a peak in one day after glucohexaose inducing the young cucumber three times continuous2
ly, and SA content is always much higher than control in eight days. W hen glucohexaose treats only one time,
SA content of induced leaf ( the first euphylis) increase remarkably, and there is a peak in six hours, but
non2induced leaf ( the second euphylis) having a peak in twelve hours after induce treatment.
Key words: Glucohexaose; Cucumber; Downy m ildew; Induced resistance; Salicylic acid
1 目的、材料与方法
水杨酸 ( Salicylic acid, SA) 既是诱发系统抗性的信号物质 , 也在植物抗病基因介导的抗性产生
中起至关重要的作用。Malamy等〔1〕认为 SA可以作为游离的信号物质传递 , 内源 SA可作为诱导植物
防卫反应的信号分子。许多研究表明 , 在系统获得抗性基因表达及系统获得抗性产生之前 , 内源 SA
先积累 , 许多诱抗因子诱导植物系统获得抗性需要通过积累 SA的途径。关于葡聚六糖诱导剂对植株
内源 SA含量的影响迄今尚未见报道 , 本研究以黄瓜为材料 , 测定葡聚六糖诱导后黄瓜叶片中内源 SA
的积累情况及分析其在诱导黄瓜抗霜霉病中的作用 , 以期为该新型植物系统获得性诱抗剂在田间应用
提供理论依据。
园 艺 学 报 32卷
黄瓜 (Cucum is sa tiva L. ) 品种为 ‘山东密刺 ’, 种子催芽后播种在装有草炭土 ∶蛭石为 1∶2 (体
积比 ) 的营养钵中 , 放置在温室中培养 , 在黄瓜幼苗 2片真叶期时进行处理。葡聚六糖 (含量 96% ,
由中国科学院生态环境研究中心提供 ) 的浓度为 10μg·mL - 1 , 同时加 Tween 80表面活性剂 , 以清
水加 Tween 80为对照 , 叶面喷雾处理 3次 , 诱导间隔期为 7 d, 于最后 1次诱导的第 2天与对照一起
用浓度为 104 ·mL - 1黄瓜霜霉菌孢子囊悬浮液进行喷雾接种 , 保湿培养 , 接种后第 4天对照充分发病
时进行第 1次病情指数调查 , 2 d后再进行第 2次调查。每处理 60株 , 试验重复 3次。黄瓜霜霉病病
情分级标准参照 GB /T 1798012622000 〔2〕。
水杨酸含量参照徐幼平等〔3〕的方法测定。葡聚六糖连续诱导处理黄瓜 3次后不同时间 (0、1、2、
4、6、8 d) 选取第 1片和第 2片真叶混合测定 ; 葡聚六糖仅处理黄瓜第 1片真叶后不同时间 (0、6、
12、24、48、72 h) 分别测定处理叶 (第 1片真叶 ) 和非处理叶 (第 2片真叶 ) 水杨酸含量变化。
2 结果分析与讨论
211 葡聚六糖诱导黄瓜抗霜霉病的研究
盆栽试验表明 (表 1) , 葡聚六糖能够诱导黄瓜抵抗霜霉病菌的侵染 , 两次调查结果表明 , 当葡
聚六糖浓度为 10μg· mL - 1 , 连续诱导 3次时 , 对霜霉病的防治效果可达 60%以上。本试验中 , 对
照和诱导处理的黄瓜苗在接种后 3 d均显病症 , 对照发病进程快 , 于接种后 9 d病叶即枯烂 , 而诱导
处理的病情进展缓慢 , 由此可知诱导抗性可持续 8 d。
表 1 葡聚六糖对黄瓜抗霜霉病的影响
Table 1 Effect of glucohexaose on induced resistance aga in st Pseudoperonospora cubensis
处理
Treatment
接种后第 4天 Fourth day after inoculation
病情指数 D isease index 防治效果 Protective effect( % )
接种后第 6天 Sixth day after inoculation
病情指数 D isease index 防治效果 Protective effect( % )
10μg· mL - 1 9197 65140 13178 60161
对照 Control 28182 — 34199 —
212 葡聚六糖连续 3次诱导处理后黄瓜叶片水杨
酸含量变化
许多研究表明 , 内源 SA 含量增加是植物系
统获得抗性所必需的。关于葡聚六糖诱导后黄瓜
内源 SA的变化尚未见报道。从图 1可看出 , 用
10μg·mL - 1葡聚六糖连续诱导处理 3次后 , 黄
瓜叶片 SA含量显著增加 , SA 含量在诱导后 1 d
出现高峰 , 达到 31203 μg · g- 1 FM , 增加了
156% , 以后逐渐下降 , 但在 8 d内一直保持比对
照 SA含量略高的水平 , 这与黄瓜诱导抗性的形
成相一致。
图 1 葡聚六糖诱导处理黄瓜叶片水杨酸含量变化
F ig. 1 T im e course of sa licylic ac id con ten t in leaves of
cucum ber after induce trea tm en t w ith glucohexaose
213 葡聚六糖仅诱导处理黄瓜第 1片真叶后水杨酸含量的变化
从图 2可以看出 , 用 10μg·mL - 1葡聚六糖诱导处理黄瓜第 1片真叶后 , SA含量在诱导后 6 h出
现高峰 , 达 5162μg·g- 1 FM , 比对照增加了 23128倍 , 在 12 h下降 , 随后增加 , 到 24 h时出现第 2
个高峰 , 此时 SA含量比对照增加了 12184倍。经第 1片真叶诱导处理后长出的未诱导处理的第 2片
真叶 SA含量也发生积累 , 6 h时 SA含量开始上升 , 12 h达到高峰 , 比对照增加了 6134倍 , 随后下
降。当第 1片真叶经诱导处理后在 12 h SA含量下降时 , 正是未经诱导处理的第 2片真叶 SA达到高
峰之时 , 推测第 2片真叶 SA含量增加一部分是从第 1片真叶运输来的 , 其余部分则是未诱导叶片本
身合成 , 这与李兆亮等〔4〕的报道吻合。
611
1期 李宝聚等 : 葡聚六糖诱导黄瓜体内水杨酸的积累及其与抗霜霉病关系的初步研究
图 2 葡聚六糖诱导处理黄瓜第 1片真叶后水杨酸含量的变化
I0 : 10μg·mL - 1葡聚六糖处理 ; CK0 : 清水处理。
F ig. 2 T im e course of sa licylic ac id con ten t in leaves of cucum ber after induce trea tm en t in the f irst euphylis w ith glucohexaose
I0 : Treatment with 10μg·mL - 1 glucohexaose; CK0 : Treatment with water.
综上可见 , 葡聚六糖诱导处理后 , 黄瓜体内的 SA含量并不是持续上升 , 而是有一个高水平的动
态变化。黄瓜对霜霉病的抗性与 SA含量密切相关 , 葡聚六糖诱导后抗性的形成与 SA的诱导积累在
时序上是一致的 , 随 SA含量的增加 , 抗性逐渐增强 , 表明 SA可能是黄瓜抗霜霉病形成中的信号分
子 , 它可在植株内传导。葡聚六糖诱导后黄瓜叶片内积累 SA , 并且可能转化为结合态贮存下来 , 当
SA积累到一定量 , 在受到病原物侵染时 SA释放出来发挥信号分子作用 , 诱导植物系统获得抗性 ,
从而抵制病原菌的入侵。
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Acta Botanica Sinica, 1997, 39 (11) : 1010~1014 ( in Chinese)
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