全 文 ：武汉植物学研究 2007，25(3)：310—312
JournM of Wuhan Botanical Research
毛尖紫萼藓总 RNA的提取方法研究
沙伟，王艳丽，滕兆岩
(齐齐哈尔大学生命科学与工程学院，黑龙江齐齐哈尔 161006)
摘 要：介绍一种提取苔藓植物毛尖紫萼藓 (Gr／mm／a pilifera P．Beauv)总 RNA的方法。以新鲜的紫萼藓为材料，
采用改良的SDS的方法，以氯化锂为沉淀试剂，成功地提取了该植物的总RNA。并与其他方法作了对比，结果发现
该方法获得的RNA条带清晰、完整性好、纯度高、DNA污染小。可满足反转录及 RT-PCR等实验要求。
关键词：毛尖紫萼藓；SDS；总 RNA；RT-PCR
中图分类号：Q752；Q949．35 文献标识码：A 文章编号：1000-470X(2007)03-0310-03
The M ethod Study of Extracting Total RNA from
Grimmia pilifera P．Beauv
SHA Wei。WANG Yan．Li。 I’ENG Zhao．Yah
(Colege of Sc／ence and En ，l。 而lg， g Un矗 ，Qiq~har，Heilong~iang 161006，China)
Abstract：A method of extracting total RNA from Grimmia pilifera P．Beauv of moss was introducted．The
fresh Grimmia pilifera was used as the main materials．Th e improved SDS method Was implied，and the
reagent of RNA precipitation was LiCI．Th e total RNA were successfully isolated from this plant．At the
sanle time。the method Was compared with other8。it could be find that the total RNA 0f G．pilifera extracted
by the method had clear ban ds，good completeness，high purlt)r an d less DNA contamination．The total
RNA iS suitable for Reverse Transcription．RT．PCR．
Key words：Grimmiapilifera P．Beauv；SDS；Total RNA；RT_PCR
RNA是分子生物学研究的重要对象之一，高质
量的 RNA是 进 行反 转 录、RT—PCR、DDRT-PCR、
Northern杂交分析、cDNA文库构建等的重要前提。
因此，在对苔藓植物进行 mRNA差异显示筛选抗旱
基因的过程中，高质量的总 RNA的提取至关重要。
常用 的提取总 RNA 的方法 有 SDS法⋯、CTAB
法 r、异硫氰酸胍法 、苯酚法H】、氯化锂沉淀法[ 】
等。但由于藓类植物普遍含有萜类、固醇类、酚类等
次生代谢产物而影响 RNA提取。研究显示，萜类化
合物会造成 RNA的化学降解和酶解，而藓类中经常
含有的黄酮醇类物质也是影响 RNA提取的物质，使
提取的 RNA易于降解【6】。因此，藓类总 RNA的提
取更显得困难。
本 研究 以毛尖 紫萼 藓 (Grimmia pilifera P．
Beauv)为材料，采用改 良的 SDS法，以氯化锂为沉
淀试剂，成功地提取了该植物的总 RNA。并与其他
方法对比后发现，该方法获得的 RNA条带清晰，完
整性好，纯度高，DNA污染小，可满足反转录、RT-
PCR等实验要求，为深人开展苔藓植物抗旱基因筛
选任务奠定了基础。
1 材料与方法
1．1 实验材料
毛尖紫萼藓(Grimmia pHifera P．Beauv)是紫萼
藓科(Grimmiaceae)一种旱生性藓类植物。本材料
采于五大连池石面上 ，选取长势较好的进行培养，待
其恢复生长，选取一定量 自然生长的材料 ，保存于
一 8O℃冰箱中待用。
试剂：SDS提取液(O．18 moL／L Tris，0．09 moL／L
LiC1，4．5 mmoL／L EDTA，1．4％ SDS，调 pH至 8．2)，
3 moL／L醋酸钠(用冰乙酸调节 pH至 5．2)，5 moL／L
醋酸钾(pH 5．2)，氯仿 ：异戊醇 (C：I=24：I)，无
水乙醇。
1．2 总 RNA提取方法
1．2．1 改 良的 SDS法
(1)取0．2 g新鲜材料，放人预先在 一80~C冰
收稿日期：20o6—114)1，修回日期：20o6—12-29。
基金项 目：国家自然科学基金资助项目(30470144)；黑龙江省教育厅海外学人科研资助项目(1151h~022)资助。
作者简介：沙伟(1963一)，女，黑龙江省齐齐哈尔人，汉族，博士，教授，从事植物学、植物遗传学、遗传生态学研究。(E．mail：shwl129@263．
net)。
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