全 文 ：第 6 卷
V J
.
6 No
第 2 期
.
2
草 地 学 报
A门队 A G刊臣m [A SIN CA
1卯 8 年
l卯8
首楷地方品种遗传多样性的研究
一R A PD 标记
李拥军
(全国畜牧兽医总站畜禽牧草种质资源保存利用中心 , 北京 1《XX旧4
苏加楷
(中国农业科学院畜牧研究所 , 北京 l(刀刃4 )
摘要 : 利用 凡护D 技术对中国 18 个首楷地方品种和北美 9 个首蓓基本种质来源的代表品种各
取 ro 个单株进行多态性分析 。 结果表明 , 首蓓品种内和品种间均具有明显的多态性 , 如采用混合
样分析则掩盖了品种内的多态性 , 而品种间的多态性则明显降低 。 7 条引物共检测出 52 个位点 ,
其中 50 个位点是多态的 。 品种间的差别是由该 50 个多态位点出现带谱的频率不同而体现的 。 中
国 18 个地方首楷品种总的遗传变异水平与北美 9 个首楷品种很接近 , 品种内平均多态 位点比例和
基因多样性大于后者 , 表明中国首蓓品种的杂合性较高 , 品种内的变异幅度较大 。 基因分化系数
(与)分析结果表明 , 首楷的遗传变异主要存在于 品种内 , 这一特点与多年生首楷的繁育体系(异
交)有关 。 中国首蓓品种的与小于北美 9 个首楷品种 , 表明中国首蓓品种间的基因交流较强 , 遗
传变异相对更多地存在于品种内 。 同时表明首蓓品种的遗传结构不仅与其繁育体系(异交 )有关 ,
并与其地理分布和来源有直接关系 。 凡钾D 标记所揭示的多态位点比例和基因多样性均高于种子
贮藏蛋白标记 , 这与基因表达的不同层次有关 。
关键词 : 首楷 ; 地方品种 ; IU 田D ; 遗传多样性
1 前言
随机扩增多态性 DA N (简称 凡护D )技术是在聚合酶链式反应 (简称 PC R )技术基础上形成
的一种分子标记技术(Wi li ~ 等
,
19 男〕)。 与其他分子标记技术相 比 , R A I〕】〕技术操作相对简
单 、费用较低 、无放射性 、实验设备简单及实验周期短 (卢江 , 19 3 )。 同时 , 凡钾D 标记具有蛋 白
质水平的遗传标记 (如同工酶和种子贮藏蛋 白标记 )所无法 比拟的多态性 。 因此 , 1认 PD 技术
在揭示品种的遗传多样性 、优 良性状的基因标记 、物种识别和品种鉴定 以及在育种研究中具有
巨大的应用潜力 , 并且在农作物 、蔬菜 、果树及其它许多植物品种遗传多样性的研究 中已得到
广泛的应用 (M0 I’e n 等 , 19 5 )。
目前 , 利用 凡护D 技术对首蓓种质资源遗传多样性 的研究报道较少 。 Et ch 等(19 1) 对二
倍体首楷的回交群体进行了 凡护D 分析 , 认为象首蓓这样遗传信息了解 的非常少或某些遗传
信息很难获得的种 , 利用 R A PD 标记可以较快地掌握部分遗传信息 , 这无疑对育种和种质资源
的鉴定具有重要意义 。 K豆n咖 Y u 等(19 3) 利用 l认PD 技术对几个首蓓品种的亲缘关系和品种
的杂合性进行了分析 , 认为 R APD 标记可为杂合群体间亲缘关系的分析和杂交育种中为获得
最大的杂交优势而合理选择亲本提供大量有用的遗传信息 。 由此可见 , R A PD 技术在迅速获
得遗传信息方面具有很高的利用价值 。
106 草 地 学 报 1男8 年
表 1 中国 18 个紫花首落地方品种
毛山le 1 18 司份1介 loc 川 vari 拓es in Chi na
编号 品种
No
·
V 面肉
1 大叶 D 叮e
来源及提供者
S叨r吧 山 1」D 阅明新疆农业大学 , 阂继淳
刀川i田lg A砂i耐tuIB U ni v~ ty , M五1 Ji ch Un
2 北获 Be ij an g 新疆农业大学 , 阂继淳
X inj ia! 1名A护。公灿司 U ni ~ ty
,
Mln Ji ch un
3 河西 Hex i
4 陇中 L 从咖】ong
天水 叭即目Ini
6 陇东 玩娜 10 1 19
甘肃农业大学 , 曹致中
(汕翻 A侈ia目t山al U ni一ty 月汤〕肠山吨甘肃农业大学 , 曹致中
G an , 卜气目i耐tu r司 U ni ~ ty
,
(油〕刀仙山J 堪
甘肃农业大学 , 曹致中
《知剧 A咨i祖.也包 U n i~ ty
,
(知 黝山仪堪
甘肃农业大学 , 曹致中
G山lsu A g i耐.川川 U ni ~ ty
,
(油〕 刀滋山‘碑
7 陕北 份四观块i
8 关中 伽‘以以喝
9 准格尔 Zh 山堪e r
ro 偏关 乃朋g jan
西北农业大学 , 卢得仁
刀 l犯i A幼cul tu司 U n i一ty , 肠 1飞溯西北农业大学 , 卢得仁
X il祀i A孚icul ti甘司 Uni ~ ity
, 切 L绝心 1
内蒙古农牧学院 , 吴永敷
In er M
创叱护li a h均titu te of A名6司恤 & 击山回
H u sl灿句 , Wu Y叫咖
山西省畜牧兽医研究所 , 陆廷壁
L
ls li饥te of 人旧 in司 H u幽洲场 & V et e n ll田甲 of
5 11皿茄 Pro vin e e , 助 Th 吵i
山西省畜牧兽医研究所 , 陆廷壁
In
s
ti tu t
e
of As 五m al H u 动阴」刁 & V et e n ll别ry of
sh ~
Pn 〕。ce , 肠 下 叫护i
河北省张家 口地区草原畜牧所 ,孟庆臣
I
n s titu
e of G浏词an d & A叉山1司 H u由an dry in
2 11田1颤ak 、 ‘A刀引1 of H成 i p如w in , , M e飞场哪卜即
中国农业科学院畜牧所饲料室 , 张文淑
Ins ti tu te of A
刀in过 阮i二ce , C凡钱 , 劝田唱 W e比山u
河北省张家 口地区草原畜牧所 ,孟庆臣
玩ti ut e of CraS I田ld & 儿曲过 H u g灿切 in
Zh an 自iak ou ~ of H e悦1 Pro vill ce
,
M哪 场且娜h即中国农业大学 , 高振生
从户司tu司 Uni v~ ty of Cllli la , (;即 Zh e n sh 曰堪内蒙古农牧学院 , 吴永敷
In er M
o n 即lia L拍 titUe of A孚ictil 恤 & An in 过
H u 目到ldry , W U Y仪唱加
黑龙江省畜牧所 , 王殿魁
11‘ titu e of A刀im al Sc i即ce of H el伽绷i印吧 Pro 训的c e ,
W al lg 场阴k u i
南京农业大学 , 王槐三
Nanj 叱 A颤 c川ti 『司 U ni ~ ity , W 班喝 物~
原产地
侃咖天山以南塔里木盆地 和焉香盆地绿洲地区
0 臼is in 毛州m b 明in 田记 Yanj i b”in in 绷th J
Ti an sh an p
. , .” t月in 。
北疆准噶尔盆地及天 山北慈农区
劝切甲巴 b 明in 俪面堪 ~ in no汕 试 叭朋出即
~
In taj 血
甘肃永昌县北庄
压汕u哪 in y面那ha 咫 C~ 钾 of 叹知 1 , 刀 P门vi n ce
甘肃定西县宁远乡
N i喝七an V il哪 , D 让娜i Q 川n ty J (知1 , . P旧v访ce
甘肃天水市石拂乡
S肠五月 V il】卿 ,叭朋角u i G 既m ty J G 叨即 Pm 训的ce
甘肃镇原县方山乡
F娜乒助 V il 呼 , 劝即押朋 山训勺 菌 G 山 1即
P如雨n ce
陕西省陕北地区
S肠坦司”1 a re a of s田茄 Pro 训的ce
陕西省关中地区
伽哪改呷 ~ J Sha 曰面 P m 访的沈
内蒙古准格尔旗
乃以嗯忱r G~ ty 试 Izin er M“叱笋lia
山西省偏关地区
R 田lg J田l
~
of 日laJ 茄 Pro训的ce
n 晋南 Jli m an 山西省晋南地区
Ju ”1 旧. 1 a n男 of sh 田lx i Pro 训的ce
12 蔚县 Y毯xjan 河北蔚县
Yu 《k灿 n ty of H d 湘iP欣扮in 洗
13 保定 B . 记11 19
14 沧州 Q哗油o u
河北保定地 区
助月汕堪 ~ of H d 祀i Pro 钊的e e
河北沧州地区
伪喇明 ~ J H d 祀i P门喇的ce
巧 无棣 W u di
16 敖汉 A d lan
山东无棣县
W u di G既mt y of sh 田dO雌 P m 朽n c e
内蒙古赤峰市敖汉旗
A由an Co 训 ty 成 Chi 抽唱 ci ty J lr川er M恻州a
17 肇东 乙l曰x IO n g 黑龙江省肇东县
乙l刻山唱 c 民m 钾 of H eil优匆皿堪 Pro 朽n 沈
18 淮阴 H u ‘户 江苏淮阴 、盐城及沿海地区
H u ai” , Yanc h哪 田日 公山t ~ of Jial 犯, 1P m 训的ce
第 2 期 李拥军等 : 中国首蓓地方品种遗传多样性的研究一凡护D 标记
本文利用 R A PD 技术从 D NA 分子水平上研究 了我国首楷地方品种 的遗传多样性 , 并与北
美 9 个首楷基本种质来源的代表品种进行比较 , 分析我国首蓓品种的遗传结构和遗传潜力 , 为
科学的保护和充分利用我 国首楷地方品种资源提拱理论依据 。
2 材料与方法
2
.
1 供试材料
第一组供试材料为我国 18 个首楷 (族d交侧护 sat 初 L . )地方品种 (表 1 ) , 其中 17 个(保定首
猎除外 )为我国已经审定登记的品种 。 代表了我国首稽地方品种 的各种类型 (耿华珠 , 1卯5 )。
第二组为北美 9 个首楷基本种质来源的代表品种 (表 2 )。 代表 了北美洲各种首稽种质类
型 (浅口朋 等 , 1卯7 )。 均 由美国西部植物引种站提供 。
表 2 北美 , 个首摘基本种质来源的代表品种
IU 立e 2 vari eti es 花p~
n ong the g 目甸肠 b”ic g erm p l朋m
~
in NOIth A
ll祀ri ca ’
编号
No
.
品种名称 中文名称
.··
V 面ety ~I 柑如L
叭示咫即曰
C抽】ean
Chi ll 资吧 p , ~
拉达克首蓓
学名
曳ie n曲c 11旧u ll e
施血卿〕 3以“. L . 朋p
原产地
Ori gin
杂花首楷 几坛如卿 , 翻月凌旭 L · s p
智利首楷 弃坛五{卿〕 3硬刀”厄 L . 朋p
氏川访an
1司lan
1、吐i sL川
日e n u sh
Afr ie a比l
确ISFA L
秘鲁首蓓 乃‘成阅乎, 义对砚u L . sP .
印第安首楷 月改如孟乡, 义对口厄 L . s p
土耳其斯坦首稽 腕面呼〕别对砚u L . s p
弗雷内西首蓓 月触垃刀邵〕义对邵心 L . 朋p
非洲首楷 3加垃1移, , 记对及u L . sP
威斯康辛黄花首稽 碗面卿 s山陇权 L . s p .乖凌吻
印度北部拉达克地区
1刁山水 a p e a in 朋Ith of ll汕a
德国
Ge
n t 旧。y
南美洲智利
Chi le in 阮u th As 讹ri ca
南美洲秘鲁
Pe ru i
n 阮u th AJI祀ri ca
印度
h记i a
中亚土耳其斯坦地区
T ur 裕 sta n a 卫℃a in 呱d』e As ia
法国北部
No记 1 of F溯 e e
非洲埃及和阿拉伯
E留Pt 田记 A烧Lb in A伍c a
西伯利亚地区
Sibri
a ar e a
2. 2 实验方法
2
.
2
.
1 首稽总 D NA 的提取 通过育苗移栽在田间建植试验小区 。 19 7 年秋季最后一次刘割
后从再生枝条上摘取健康 、幼嫩的叶片置于 一 20 ℃冰箱短期保存 , 用于提取 D NA 。 每品种各取
10 个单株 , 共 270 个样品 。 每个品种 10 个单株 D N A 样品等量混合组成该品种的 D NA 混合样 。
采用 C fA B ( 十六烷基三甲基嗅化钱 )方法提取首楷总 D NA ( Et ch 等 , 19 1 ) 。 每个样品取 1
一 2 片单叶置于 1 . 5d 离心管中 , 加少许石英沙 , 用玻璃棒碾成匀浆 , 加 250 ul 预热到 65 ℃ 的 2
x 门认B 缓冲液 ( 一o mo F
L Tri
s 一 H e l , pH s
.
8 ; l
.
4 mo F L NaC I
;20 rno
l/ L E口rA , p H S . 8 ; 2 % (袱v )
Cl
,
AB ; 0
.
4 % ( v八 )俘一琉基 乙醇 ) , 65 ℃水浴 30 而 n , 加等体积 (25 oul )氯仿 / 异戊醇 ( 24 : 1 ) , 轻轻混
匀后 , 经 12以x〕甲m 离心 5而 n , 取上清液置于新的 1 . 5而 离心管中 , 加 2 倍体积的乙醇 / 乙酸溶液
草 地 学 报 19 8 年
(% % 乙醇 , 0 . 12 n lo l/ L 乙酸钠 , pHS . 2) 沉淀 D NA , 静置 15 而 n 后 , 12仪刃甲m 离心 5而n , 弃上清液 ,
用 7 0 % 的乙醇漂洗沉淀过夜 , 12 以x〕甲 m 离心 5而n , 弃乙醇 , 空气干燥 DNA 沉淀 , 沉淀溶于 lo ul
0
.
l x TE 中 , 待完全溶解后加 0 . sul RN ase A (酶核糖核酸酶 A )(终浓度为 0
.
05
1 11
9/ 而 ) , 37 ℃水
浴 3 0I ni n , 以除去样品中的 RN A 。 用 7 52 一 C 型紫外分光光度计测定 D NA 的纯度和浓度 , 根据
浓度测定值用 0 . 1 x TE 将样 品稀释到 lo n岁d , 置于 一 20 ℃冰箱备用 。
2
.
2
.
2 引物的筛选 从加拿大 San 即n 生物工程有限公司购买一套引物 (20 条 , 编号 Sl 一 5 20 ,
为 O详IDn 公司引物的 B 组 ) , 经过扩增筛选 , 选 出 7 条扩增产物清晰 、稳定的引物 , 序列见表 3 。
表 3 筛选出的 7 条引物的序列
毛止le 3 阮卿e nc e of the se ve n sc 戏川刃 详劝阴花
编号 腼唱朋 编号 q阵m n 编号 序列
No
.
, 川即n N o . q 呷m n No . 跳甲e拙e
PI 5 1 OPB I U I
’
l
,
IC GO陀C
凡 5 OPBS IU CGCC口 1℃
玛 泌 OPB6 1七C l亡1七CCC
1禅 51 0 OPB10 C 氏芜卫义;C凌C
巧 5 1 1 〔”平Bll QrA G ACCCG 】,
P6 5 1 7 0 PB1 7 AG( 芜AA CGA G
P7 518 OPB18 CCACAG( 认GT
在筛选引物 的扩增中 , 增设对照样品 (不加模板 D N A 的样品 ) , 结果表明对照样品均无扩
增产物出现 。
2. 2. 3 扩增 条件 在 0 . 5d 离 心管 中进 行扩增 。 反应体积 为 2 0 ul(1(X) ~ l/ L Tri
s 一
HC I
,
pHS
.
8 ; so
lnmO
F L K CL ; 1
.
s
nuo
F L M邪12 ; 0 . 0 1% 明胶 ; 10 ~ F L dMrP ; 0
.
S
lUnO
F L 引物 ; lu
,伽 ; 20 ng 左右的模板 D N A ) , 覆盖 25 ul 石蜡油 , 利用 Pe rki n Eline r 48 0 (PB毅刃 )DNA 扩增仪进行
扩增 。 扩增温度条件如下 :
94 ℃ 2而n es 一3 6℃ 3 0 5 ’一 ~ 7 2℃ h lin
气 了41 个循环
9 2℃ 20 5 ,一 ~ 72 ℃ 7而 n一 一4℃ 保存
2
.
2
.
4 扩增产物的电泳检测 扩增后每管加 4以上样缓冲液(0 . 25 % 二 甲苯青 歼 , 30 %甘油
水溶液 ) , 用 5 % 的聚丙烯酞胺凝胶进行 电泳分离 , 每次在一张凝胶上做 3 个 品种 。 电泳完毕
后在 0 . 5 u岁而 的嗅化 乙锭 中染色 30 一 45 而 n , 在紫外灯下观察扩增结果 ,并拍照记录结果 。
2. 3 数据统计分析方法
2. 3
.
1 遗传参数计算方法 对 电泳带谱进行统计时 , 把某一位点出现带者记为 1 , 未出现带者
记为 0 , 根根 1 出现的次数计算各条带出现的频率 。 根据各位点带谱出现的频率 , 计算以下遗
传参数 (N e i , 197 5 ) :
多态位点 比例 : P 二 多态位点数/ 总位点数(% )
品种内基 因一致性 : j= 艺Xi Z , X *为第 i位点的频率
品种 内基因多样性 : h = l 一 j
品种 内基因一致性平均值 : J, = 艺j/ n , n 为品种数
第 2 期 李拥军等 : 中国首蓓地方品种遗传多样性的研究一凡护D 标记 1 1 1
(Hs )
、总基因一致性(升)、总基因多样性 (场 )及基因分化系数 (嘶)等遗传参数(表 4 和表 5 )。
裹 4 中国 18 个首摘地方品种的遗传参数
毛山le 4 C七ne ti c lx 川叨此te比 of 18 a] 」五l」五1仪川 ~ eti es in Ch ina ha 州」on 凡锣D 皿吐e .品种 全部位点数 多态位点比例 P( % ) 基因多样性 h
y丝匆 T。回 loc i Po l”o 印拓c 1oc i( % ) Ge ne di ve o ity
大叶 n 叮e 52 50 . 8 0 . 29 85
北班 氏吐i山吧 52 52 . 7 0 . 29 54
河西 H七d 52 71 . 2 0 . 27 50
陇中加娜俪唱 52 73 . 1 0 . 27 6 9
天水 叭朗汕山 52 75 . 0 0 . 28( 只
陇东 肠雌加飞 52 76 . 9 0. , 刃巧
陕北 3 曰幼晚1 52 76 . 9 0 汉万8
关中 。洲曰俪吧 52 75 . 0 0. 263 1
准格尔 压咧尹r 52 78 . 8 0 .酬2
偏关 肠目叱声朋 52 78 . 8 0. 卫刀7
晋南 J如胭1 52 75 . 0 0 . 2导拓
蔚县 叭面朋 52 84 6 0. 3( D 2
保定 肠目如唱 52 76 .9 0. 28 50
抢洲 伪喇划 52 7 3 . 1 0 . 四35
无棣 W通司1 52 82 . 7 0 . 31 12
放汉 人成四1 52 50 . 8 0 . 29 12
攀东 乃圈山飞 52 52 . 7 0 .姗 5
淮阴 托‘殉 52 73 . 1 0 .琳s
平均 腼知. 刀 . 7 Hs = 0. 28 85
升 = 0 .肠又 场 二 0 . 3326 嘶 , 二 0 . 13刀
表 5 美国 , 个首摘品种的遗传参数
毛止le S Ce 理ti c 详川知℃te花 of the g vari eti es in No rth As ne ri ca l~ 」on 凡护D
n坦rk ers
品种 全部位点数
lb tal l佣i
多态位点比例 P( % )
Po】丫比旧印hi e loc i(% )
基因多样性 h
Ge
n e di v e花ity
平均 M~ 升二 0 . 肠29 H T = 0 . 337 1
0
. 人抖2
0
.
2788
0
.
248 5
0
.
284 2
0
.
28 65
0
.
2 946
0
.
28 69
0
.
28 85
0
.
2仪)8
H s 二 0
.
2 7 7 0
嘶 = 0 . 1783
0,‘R只U017518302,‘,乙2勺山
一、一以勺wiSFAL
从表 4 中可以看 出 , 中国 18 个首蓓地方品种中 , 蔚县首稽的多态位点 比例最高 ( 84 . 6 % ) ,
其次为北疆首楷 、无棣首楷和肇东首稽 (均为 82 . 7 % ) , 河西首稽最低 ( 7 1 . 2 % ) ;从基因多样性
草 地 学 报 1卯8 年
来看 , 无棣首楷最高(0 . 3 1 12 ) , 其次为蔚县首稽(0 . 3伪2 ) , 淮阴首蓓最低 (0 . 24 8 8 )。 从表 5 中可
以看出 , 北美的 9 个 品种 中 , Pe I’u vi an 、 T u lk istan 和 R e而sh 首蓓 的多态 位点 比例最 高 (均为
50
.
8 % )
,
Chilean 首楷最低 (7 1 . 2 % );从基因多样性来看 , 肠人istan 首蓓最高 (0 . 2货拓 ) , Chil ~ 首
楷最低 (0 . 248 5 )。
从表 4 和表 5 还可以看出 , 中国 18 个首蓓地方品种总基因多样性 (场 = 0 . 334 6 )仅略低于
北美的 9 个品种 (场 = 0 . 3 3 71 ) ,说明中国首楷地方品种资源与北美 的首稽基本种质资源 的遗
传变异幅度很接近 。 中国 18 个首蓓地方品种的平均多态性位点 比例 (P 二 7 . 7 % )和品种 内的
基因多样性(H S = 0 . 2 8 8 5 )均高于北美的 9 个首楷品种(P = 7 . 1% , H S = 0 . 2 7 70) , 表明我国首楷
品种内的变异幅度较大 , 品种 的杂合性较高。 基因分化系数 (Csr)反映了品种间变异 占总变异
的比例 , 从基因分化系数可以看出 , 多年生首稽品种总的遗传变异主要存在于品种内(两组首
蓓品种分别为 86 . 23 % 和 82 . 17 % )。 多年生首稽为典型的异交植物 , 这一结果证明了生物群
体的遗传结构与其繁育体系有直接 的关系 。 同时还可 以看出 , 与北美 9 个首楷品种 (与 =
0
.
17 83 )相比 , 我国 18 个首楷品种(ha 二 0
.
13 7 7 )总的遗传变异更多地存在于品种内。 这一结
果证明首楷品种 的遗传结构还与品种 的来源及地理分布有直接的关系 。 北美 9 个首蓓品种分
别来自亚 、欧 、非及南美洲 , 具有广泛的地理分布 , 品种间基 因交流的机会较少 ;而中国的首稽
地方品种 的地理分布范围相对较小 , 品种间基因交流的机会较多 , 品种的杂合性较高 , 品种内
的变异幅度较大 , 遗传变异相对更多地存在于品种内。
1 4 R APD 标记与种子贮藏蛋白标记研究结果的比较
首楷种子贮藏蛋白多态性标记和 凡钾D 标记是在不同层次上反映了首楷的遗传变异 。 种
子贮藏蛋白多态性反映了编码这些蛋白质的结构基因的多态性 。 与 凡护D 标记相比 , 种子贮
藏蛋白标记具有一定 的局限性 , 主要表现在两方面 :一是由于转录和翻译氨基酸的三联体密码
具有简并性(珑g ene lac y) , DNA 分子上某个或某几个碱基的替换(突变 )并不一定会引起氨基酸
的变化 , 因此这种 DNA 碱基的变异就无法通过蛋 白质来体现了 (李宝森等 , 19 1 ) ;另一方面 ,
从蛋白质凝胶电泳技术本身来看 , 电泳分离蛋白质的基础是蛋 白质在电场 中有不 同的迁移率 ,
不同的迁移率是由蛋 白质分子的构型 、分子量及所带电荷等因素决定的 , 但氨基酸的替换(突
变 )可以不改变蛋白质的构型 、分子量或净电荷 , 因此其电泳迁移率亦不变 。 这样一些引起氨
基酸变异的基因突变也无法检测出来 。 由此看来 , 利用蛋 白质标记检测遗传变异大小时 , 可能
会低估群体遗传变异的水平(A yal a 等 , 1984 )。 而 R Ap D 标记所揭示的基 因多样性从理论上说
是最能真实反映出首蓓品种实际的基因多样性 。
本研究结果表明 (表 6) , 根据 凡缪D 标记所检测的 中国 18 个首楷地方品种的多态位点比
例 、品种 内基因多样性 和总基 因多样性 均高于种子贮藏蛋 白标记 (李拥军 , 19 8 ), 分别高出
1
. 卯 、2 . 43 和 2 . 51 倍 。 由此可见 , 利用种子贮藏蛋 白标记检测首楷品种遗传多样性时 , 确实会
低估遗传变异的水平 。
4 结论
4
.
1 首稽单株 DNA 样品分析结果表明 , 品种内和品种间均存在明显的多态性 ;而采用 D NA 混
合样品分析则掩盖了品种内的多态性 , 品种间的多态性明显降低 。
4
.
2 7 条引物共检测出 52 个位点 , 其中 50 个位点是多态的 。 品种间的差别是 由这 50 个多态
位点出现带谱的频率不同来体现的。
第 2 期 李拥军等 : 中国首楷地方品种遗传多样性的研究一凡护D 标记 1 1 3
表 6 种子贮藏蛋白标记和 凡钾D 标记的比较
毛山le 6 Co m 详的son of ~ 1
sto咚罗 prot e in n班rk e。 出记 凡锣D 血此 e比
遗传参数
晓讹石c 详盯ur 以e rs
多态位点比例 (P)
巧甲浦佣 试州卿甲拓c loc品种内基因多样性 (Hs )
C七.班 击vers ity 衍而n v面ety总基因多样性 (H T )
T以目 它e n e 山v e . ltV
种子贮藏蛋白 ’
曳曰 咖母罗 p功 te ins . 曰rk e rs
凡钾D 标记
凡钾D 皿此e rs
7
.
7
0 1188 0
.
28 85
0
.
1335 0
.
3夕16
, : 数据引自李拥军(1卯8)
卜 D刊匕 ~ ci喇 加m u Y0 n自un (1卯8)
4. 3 多年生首稽品种的遗传变异主要存在于品种内 , 这一特点与多年生首楷的繁育体系 (异
交 )有直接的关系 。
4. 4 中国 18 个首蓓地方品种总的遗传变异水平与北美 9 个首楷品种很接近 。 品种 内的平均
多态位点比例和遗传多样性大于北美 9 个首蓓品种 ,说明我国首蓓地方品种的杂合性较高 , 品
种内的变异幅度较大 , 遗传变异相对更多地存在于品种 内。 同时表明 , 首楷品种的遗传结构还
与品种的来源及地理分布有直接的关系 。
4. 5 R APD 标记所检测的多态位点比例 、品种内和品种间的基 因多样性均高于种予贮藏蛋 白
标记 , 这一结果与基因表达的不同层次有关 。
参 考 文 献
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2 李宝森 、胡庆宝 , l卯1 . 遗传学 . 天津 : 南开大学出版社 , 29 1 一 3 21
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