全 文 ：武汉植物学研究 2003, 21 (6) : 547～ 549
J ou rna l of W uhan B otan ica l Resea rch
水松叶的总黄酮含量研究
斯 缨, 王 日韦 , 龚复俊, 丁时东, 王有为Ξ
(中国科学院武汉植物研究所ö武汉植物园, 武汉　430074)
摘　要: 杉科植物水松 (G lyp tostrobus p ensilis (Staun t. ) Koch. )叶中含有丰富的黄酮类化合物。采用分光光度法, 以
芦丁为标准品, 测定秋季和春季的水松叶中总黄酮的含量。结果显示, 水松叶秋季总黄酮含量比春季总黄酮含量高。
关键词: 水松; 黄酮; 分光光度法
　　中图分类号: R 284. 2　　　　　文献标识码: A 　　　　　文章编号: 10002470X (2003) 0620547203
Study on the Tota l Flavono ids Con ten t in L eaves of
G lyp tos trobus p ens ilis
S I Y ing, W AN G W ei, GON G Fu2Jun, D IN G Sh i2Dong, W AN G You2W eiΞ
(W uhan B otan ica l Gard enöW uhan Institu te of B otany , T he Ch inese A cad emy of S ciences, W uhan 430074, Ch ina)
Abstract: G lyp tostrobus p ensilis is rich of flavono ids com pounds. F lavono ids in leaves w as deter2
m ined by UV spectropho tom etry w ith ru t in as a standard. T he resu lts ind ica ted tha t the con ten t
of to ta l f lavono ids in au tum n is h igher than its in sp ring.
Key words: G lyp tostrobus p ensilis; F lavono ids; UV spectropho tom etry
　　杉科水松属植物水松 (G lyp tostrobus p ensilis
(Staun t. ) Koch. ) , 为我国特有树种, 国家二级保护
植物。主要分布于珠江三角洲和福建中部及闽江下
游海拔 1 000 m 以下地区, 南京、武汉、庐山、上海、
杭州等地均有栽培[ 1 ]。水松叶及其皮在我国民间作
为药用, 水松叶主要用于治疗风湿性关节炎、高血
压、皮炎 (外用)。水松的干白皮外用于杀虫止痒, 治
疗烫伤[ 2 ]。
水松叶中含有丰富的黄酮类化合物。M itsuo
等[ 3 ]从水松中分得一种山奈酚 (Kaem pfero l) 的葡萄
糖甙 Sequoyito l 和 A vicu larin, 用纸层析检测到
D ist ich in 。M itsuo 等[ 4 ]用纸层析检测到水松中有槲
皮素 (Q uercet in )、山奈酚和异鼠李素 ( Iso rrham 2
net in)。Gadek 和Q u inn [ 5 ]曾通过薄层对照和紫外分
析, 在水松中检测到双黄酮Am en toflavone, 4’’’2
m ethyl am en toflavone, 7, 4’2dim ethyl am en tof2 lavone, 4’, 4’’2dim ethyl am en toflavone 和 H inok i2f lavone 的存在。在杉科植物特征化学成分及活性的系统研究中, 我们对水松叶的化学成分进行了研究,分离得到多种黄酮苷[ 6 ] , 分别为槲皮素232O 2Α2L 2阿拉伯吡喃糖苷, 槲皮素232O 2Α2L 2阿拉伯呋喃糖苷,槲皮素232O 2Β2D 2半乳吡喃糖苷, 槲皮素232O 2Β2D 2木糖吡喃苷等。笔者用分光光度法[ 7 ]对秋季和春季的水松叶总黄酮进行了含量测定。1　材料与仪器水松叶分别于 2001 年 11 月、2002 年 6 月采自武汉大学树木园, 由中国科学院武汉植物研究所ö武汉植物园分类室鉴定。芦丁 (R u t in)由中国药品生物制品检定所提供。试剂为分析纯。7520 紫外可见分光光度计 (上海分析仪器厂) ; Sarto riu s BS2110S 电子天平 (德国)。Ξ 收稿日期: 2003202225, 修回日期: 2003207225。作者简介: 斯缨 (1973- ) , 女, 研究实习员, 现从事天然活性成分研究。通讯作者 (E2m ail: w yw @ ro se. w h iob. ac. cn)。
2　方法与结果
2. 1　供试品溶液和对照品溶液的制备
水松叶自然干燥, 粉碎, 过 4 号筛, 得粗粉。精密
称取供试品粗粉 1 g, 用滤纸包裹置索氏提取器中,
加石油醚 (60～ 90℃) 60 mL , 加热回流 4 h, 弃去石
油醚提取液, 挥干滤纸包。加甲醇 50 mL , 索氏提取
4 h, 将甲醇提取液置 50 mL 的容量瓶中, 甲醇定
容, 摇匀, 作为供试品溶液。另取供试品, 用烘干法进
行水分测定。
精密称取经干燥至恒重的芦丁对照品 5 m g 置
于 50 mL 的容量瓶中, 用甲醇溶解并稀释到刻度,
得 011 m gömL 的溶液。
2. 2　最大吸收波长的选择
吸取对照品溶液 2 mL , 5% 的A lC l3 甲醇溶液
1 mL , 置 10 mL 容量瓶中, 加甲醇至刻度, 放置
5 m in。以甲醇及显色剂溶液作空白, 测定其在
425 nm 处有最大吸收。因此选择 425 nm 为测定波
长。
2. 3　标准工作曲线的绘制
吸取对照品溶液 0、 015、 110、 115、 210、
215 mL , 分别加入到 10 mL 的容量瓶中, 再分别加
入 1 mL 5% 的A lC l3 甲醇溶液, 用甲醇稀释到刻度,
然后放置 5 m in, 于 425 nm 处测定吸光度, 绘制标
准曲线横坐标为对照品浓度 (C) , 纵坐标为吸光度
(A ) , 得回归方程: A = 49122C - 0. 010 5, r =
0. 999 8。线性范围在 0. 005～ 0. 025 m gömL 之间。
2. 4　样品含量测定
取供试品溶液 015 mL , 加 1 mL 5% 的A lC l3 甲
醇溶液, 甲醇定容至 10 mL , 在 425 nm 波长处测定
吸光度, 扣除水分, 计算总黄酮的含量, 结果见表 1。
表 1　不同季节水松叶总黄酮的含量
T ab le 1　D eterm ination of to tal flavono ids
con ten t in G lyp tostrobus p ensilis
leaves in differen t seasons
采集时间
Co llect ion
date
称样量
(m g)
W eigh t
吸光度
OD
浓度
(m gömL )
Concen2
t ra t ion
总黄酮含量
(% )
Con ten t
2001年11月 1 000. 0 0. 860 0. 017 7 1. 77
2002年6月 1 009. 4 0. 750 0. 015 5 1. 54
2. 5　加样回收率实验
精密称取 6 份已知含量的供试品粗粉各 1 g, 分
别准确加入芦丁对照品。按 2. 1 项下的制备方法及
2. 3 项下的显色方法操作, 平均回收率为 10014%
(n= 6) , R SD 为 210% (表 2)。
表 2　加样回收率实验
T ab le 2　R esu lt of recovery rate
样品
Samp le
加入量
(m g)
A dded
w eigh t
测得量
(m g)
M easu red
w eigh t
回收率
(% )
R ecovery
rate
平均回收率
(% )
A verage
recovery
rate
R SD
(% )
1 10. 2 10. 25 100. 5
2 4. 5 4. 56 101. 3
3 9. 4 9. 37 99. 7 100. 4 2. 0
4 3. 6 3. 48 96. 8
5 5. 3 5. 43 102. 5
6 12. 6 12. 81 101. 7
2. 6　稳定性实验
取上述供试的对照品溶液及样品溶液, 每隔
20 m in测定一次, 60 m in 内吸光度不变。放置 3、6、
12 h 后, 吸光度基本不变, 说明对照品及样品溶液
均较稳定。
2. 7　精密度实验
取供试样品溶液, 连续测定 5 次, R SD = 0159%
(n= 5) , 表明仪器精密度良好。
2. 8　重现性实验
精密称取相同样品 5 份, 按 2. 1 项下的制备方
法及 2. 3 项下的显色方法平行制备 5 份供试品溶
液, 测定总黄酮含量, 分别为 11799%、11736%、
11753%、11851%、11821% , 平均值为 11792% (n=
5) , R SD = 2165% , 表明重现性良好。
3　小结
(1)水松叶未经石油醚脱脂, 其脂溶性成分对测
定干扰较大。
(2)对水松叶的化学成分研究发现, 水松叶含有
丰富的槲皮苷, 选用芦丁作为对照品是可行的。
(3)实验表明, 秋季水松叶的总黄酮含量稍高于
春季水松叶的总黄酮含量。
(4)通过方法学考察, 认为采用分光光度法测定
总黄酮含量的方法简便, 准确可靠, 对今后的研究和
开发工作有一定的指导意义。
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