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EFFECTS OF PH VALUE AND HORMONES ON CELL GROWTH AND SHIKONIN DERIVATIVE FORMATION IN SUSPENSION CULTURES OF ARNEBIA EUCHROMA CELLS

pH值、激素对新疆紫草悬浮培养细胞生长及紫草宁衍生物合成的影响



全 文 :第比卷 第 期
一 。减年 月
武 汉 植 物 学 研 究
!∀ # ∃ % & ∋ ∀ ( ) # ∗ & % + ∀ , & % −. & ∋ ∃ / 0 / & ∃ . ∗
1 2 34 5 6
7 8 9
% 2 4 6
:   ;
<∗值 、 激素对新疆紫草悬浮培养
细胞生长及紫草宁衍生物合成的影响
方德秋 侯篙生 李新明 叶和春 李国凤
中国科学院武汉植物研究所 武汉 = > ” 5? ;≅ Α 巾国科学院植物研究所 北京 5 。, Β通‘≅
握 共 报道了不同< ∗值 、 激素对新疆紫草悬浮 培养细胞生长及 紫草宁衍生物合成的影
响 。 结果表明 , 新疆紫草细胞其有 自我调节其培养液 < ∗ 值的功能 。 适合于细胞生长及 紫
草宁衍生物形成的Χ∗ 值为 4 Δ 士 Ε 4 ;Ε 。 + & Χ 、 6 , ; 一Φ 、 % & & 或−+ &对细胞生 长无显著的促进
作用 , 民都会抑制紫草宁衍生物的形成。在生长培养基 中添加5 4 2 Γ Η Ι3 −& & 和 Ε 4 ϑΓ Η Ι3 Κ ,
可促进细胞生长 , 而在生产培养基 中附加 Ε 4 3 Γ Η Ι − Κ , 和 Ε 4 ? 一5 4 Ε Γ 月Ι 5 5人& 则有利于紫
草宁衍生物含量及产量的提高。
关扭词 新疆紫草 , 细胞悬浮培养 , < ∗ 值 , 激素 , 细胞生长 , 紫草宁衍生物
紫草是常用中草药 , 药用部位为根 。 其有效成分是紫草宁及其衍生物 。 由于紫草资
源 的迅速减少 , 近年来 , 科学家们试图通过生物工程方法生产紫草宁及其衍生物。 早在
5  ? ;年 , 日本 , 8 = ‘Λ 8 等入就成功地诱导获得了硬紫草 Α ∋ “Μ 2 ϑ尹Β , 。 。Γ Β , 今ΛΜ , 2 , ΜΝ Ο
Π2 。 ≅ 愈伤组织 〔’】, 并研究了影响愈伤组织生长及紫草宁衍生物合成的因子 〔” 。 ( ΘΡ ΝΛ8 则
对细胞悬浮培养的条件进行了研究〔’川 。 国内李国凤等〔‘’诱导获得了临床药效 最佳的新
疆紫草的愈伤组织 。 之后 , 叶和春等〔“, ”则研究了不同理化因子对愈伤组织生 长及紫草
宁衍生物合成的影响 。 但是迄今 , 有关 <∗ 值 、 激素对新疆紫草悬浮培养细胞生长及紫
草宁衍生物合成的影响方面的报道却十分鲜见 。 而细胞悬浮培养则是过渡到工业化生产
的关键培养方式 。 为此 , 本试验系统 地研究了 < ∗ 值 、 不同激素对新疆紫草悬浮培养细
胞生长及紫草宁衍生物合成的影响 , 为培养条件的进一步优化打下基础 。
5 试验材料及方法
5 。 5 试验材杆
新疆紫草 Α & Σ ” Β Τ Ν 8 ““ Υ Μ , 2 ςΩ 8 Α ∃ 2 93Β ≅ !2 Μ Ω ϑ Λ ≅ 愈伤组 织系 由中国科 学院植物
研究所提供 。
5 。 6 培养基
生长培养基为改良的 ∋ ϑΛ ‘Ξ液体培养基 。 即将 ∋0 培养中的 % ∗ 4 % 2 , 改为 ;Δ > Γ Η Ι3
Α % ∗ ‘ ≅ Ψ Ε Ψ , Κ % 2 Ψ 、 . 8 Υ 3Ψ · Ζ∗ Ψ 2 、 7 Η 0 ∀二 ?∗ Ψ Ε 以及 Κ ∗ Ψ < 2 4 的含量分别改为 6 [ > 2 Γ Η ,
5“Γ Η 、 5[ Γ Η 和 ;Φ Ε Γ Η Ι3 。 生产培养基为 7 一  培养基〔‘Ξ 。 灭菌前 , 在培养基中添 加不
本文于 3。。Π年 ? 月5旧 收到 , 5 , 。>年 [ 月> 5日收到修改稿本文所用缩写符号 Ψ + & Χ 4 Δ 一节基氮基嚓吟 4 【& & 4 叫噪乙酸, −+ & 4 噪叫丁酸布 % & & 4 茶乙酸 ∴ Κ , 4 Δ 一棣
基氨基嗦吟鑫 6 , ;一 Φ 4 6 , ; 一二抓苯氧乙酸。
5Δ Ε 武 汉 植 物 学 研 究 第”恐
同的激素及其浓度 , 并用3 Γ 2 3Ι 3 % 4 2 ∗ 或 3Γ 2 3Ι3 ∗ .− 调节 < ∗ 值至所需要 求 。 之后
在 5 6 Ε℃下灭菌 5 分钟 。
! 4 > 培养方 法
将生长旺盛的愈伤组织接入到附加有Ε 4 6 Γ Η Ι 5 −& & ] 。4 二幻 5 Κ , 的生长 培养基中
培养 > 代 Α每代仪天 ≅。之后 , 将细胞分别接种至不同的培养基中。在生长培养基中的接种
最为 ;Η 鲜细胞 Ι 瓶Α6 2 Γ3 三角瓶中盛 ? Ε Γ3 培养基 ≅。而在生产培养基 中的接种量则为鲍
鲜细胞 Ι 瓶 。在6Ε 一6 ℃黑暗条件下进行悬浮培养 , 摇床转速为 5 Ε 一 5 5Ε Σ < Γ , 重复 > 次 。
5 。 ; 细胞生物量及紫草宁衍生物含量的测定
在生长培养基中培养了5Δ 天 , 或在生产培养基中培养了6> 天后 , 收获细胞 。 用 ; Ε 目
筛过 滤 , 收取鲜细胞 , 称 重 , 并用便携式酸度计测定培养液的 Χ∗ 值 。 细胞在ΔΕ ℃下烘
干至恒重 , 碾碎 , 称干重 。 根据叶和春等所述方法〔4 〕测定干细胞中紫草宁衍生物含量 。
6 抽果与讨论
6 4 5 < ∗ 值时新疆紫草愚浮培养细胞生长及紫草宁衍生物合成的影响
6 4 5 。 5 <∗ 值对细胞生长的影响
从图 5 中 可见 , 在 < ∗ 二
勺公月曰⊥ 、⊥ ⊥ 十一月∴ _ Ν一 ’ 一一」Ψ 终二了 刃 旦3 翻 月 ‘⎯∴ 纂夏_ 军牙 ‘_6 常 。⎯ 概 4 三⊥ ⊥ , 卜 4 _⊥ 尝 5
山 」 。 Ψ 。 ∴ 。 。 , 3干?砚下言 荟
Σ Ν再
Χ55
圈 5 < Ω 值对纽跪生长的影晌 Α生 一长培养墓 ≅
/ ςς Β Β Λ ϑ 2 ς < 至5 2 Ω Β Β 33 Η Σ 2 α Λ 3一 ΝΩ , Ω , < Β Ω , Ν2 Ω
Β 二 5Λ Θ Σ 2 ϑ 2 ς & 4 2 Θ Υ Μ Σ 2 优 8 2 Β , 5 ΑΗ Σ 2 α Λ Μ
Ω , Β 一Ν。 二 , 5 。2 Γ Η Ι 5 −& & ] 2 。ϑ Γ Η Ι 5 Κ , ≅
。 2一 Δ 4 6范围内 , 新疆紫草细
胞生长旺盛 , 细胞色红 , 干重
显著高于 此范围外的各处理 ,
其 中以 < ∗ 4 Δ 的处理效 果为
最佳 。 此外 , 从此图中还可看
出 , 不论培养 基起始 < ∗ 如何 ,
经细胞悬浮培养 5Δ 天后 , 培养
液的 Χ∗ 值 都处于 4 [ 一卜Ε 4 ;范
围内Α个别情况除外≅ 。 这表明
新疆紫草细胞具有自我调节其
生活环境的功能 。
月。工 !的∀#誉沙卜、∃%·&、续帜∀侧理玲尿
∋  (  ∋ ) ∗ 值 对紫 草宁衍 生物合成的影 响
表 ( 所示 的是 )∗ 值对紫草宁衍生物合成的影响结果 。 从此表中可见 , 当 ) ∗ 《 +  +
或) ∗ 》 ,  +时 , 对细胞生长不利 , 这与前述结果一致 。 紫草宁衍生物的合成则受)∗ 值的影
响较小 , 当) ∗ − + 。.时 , 各处理间的干细胞中紫草色素含量无明显差异。这与叶和春等〔“, 的
研究结果不同 。 他们报道认为 , 当 )∗ 小于 /  0时 , 新疆紫 草愈伤组织 中的紫草 色素含量
明显下降。这可能是因为固体培养时 , 愈伤组织很难对培养基的 1∗ 值产生太大 的调节作
用 , 因而 )∗ 值的影响比较明显。 而在悬浮培养时 , 细胞可以自我调节培养液的)2 值 。
这从表 ( 中可明显看出 。 不论初始 )∗ 值如何 , 收获时 , 培养液的 ) ∗ 值多 在 /  + 士。 (
之间 , 且这种调节作用在接种后的( 3天内就可完成 , 此时正处于紫草宁衍生物迅速合成
的前期 4 数据未列出 5 。 因此 , 在一定的 )从 值范围内 , 生产培养基钓初始 ) ∗ 值对悬
浮培养细胞中紫草宁衍生物含量的影响不大 。但由于 )∗ 值过高或过低不 利于细胞生长 ,
致使色素产量不高 。 因此 , 我们认为 , 新弧紫草细胞第二步惫浮培养时 , 适宜的 )∗ 值
第 6 期 方德秋等 Ψ < ∗ 值、 激素对新疆紫草悬浮培养细胞生长及紫草宁衍生物合成的影响 5Δ 5
衰 5 <∗位对获琢宁衍生 4 Λ 成的二Α生产培养盆 , 附加2 4 ? Γ Η Ι 5 −& & 和 2 4 3 Γ Η Ι3
, 一 Τ 5 Ε 5 / ςς Β Β Λ ϑ 2 ς Χ∗ 2 Ω ϑ Μ Ν β 2 Ω Ν Ω = Β Σ Ν χ 8 Λ Νχ Β ς2 Σ Γ 8 ΛΝ 2 Ω Ν
Κ , ≅
呜 Θ ϑ ΧΒ Ω ϑ Ν 2 Ω Β Θ 3ΛΘ Σ Β ϑ
2 ς & 4 Β 2 Β Μ Σ 2 Γ 2 Β Β Π 3ϑ Α < Σ 2 = Θ Β ΛΝ 2 Ω Γ 2 = ΝΘ Γ , Ε 4 ? Γ Η Ι 5 −& & ] Ε 4 3 Γ Η Ι 5 Κ , ≅
< ∗ > 。 Ε > 一 ; 。 Ε ; 。 ; ; 。[ 。 Ε 。 6 。 ; 。 Δ 。 [ Δ 。 Ε Δ 一6 Δ4 心 Δ 一 Δ ? 一 Ε ? 一 [ 一 Ε
∀叮。工昨,闪45Ε 。55 。价昨 工%。∋州扣卜4的洲%∀。卜Δ ,4 。工的%8∀。的工心Ε 4的工触∋Ο州峭4目的 工曰。哪 Λ的。叫4的。5的[。∀洲8∀% 4:色素含ΛΑδ Φ ) ≅Χ Ν‘Γ Β Ω Λ
Β 2 Ω Λ 4 Ω Λ
824Λ% 。工月5鱿, 口 翔二∀ 匀 , 娜 Λ、口 , 尸门 口刃4叫 , 4 , , 4 叫Δ 4卜,工的。目工, 。5Λ月。工的卜Ε 4心目 州。,工的。的6。7瞬89。卜:工卜。93 ;卜璐。<=
小翻 心口 、 弓叼, 尸叫
, 矛 , 矛 , 矛 月 ⋯> 9 ;勺  口 ?门卜哪
,的9哪。必 时仍。旧≅ 。心 的, 。的,的仲。的3呼。的哪。曰Α, 入哪 的的9, 。的璐9。的收获时 , 培养液
) ∗Β  Χ Δ Ε Φ
1∗ 份卜二Γ # 一瓜一8 Η Χ
范围应为 /  3一 , 。 3 。
∋  ∋ 不 同激素对新疆萦革愚浮培养细胞生长及萦草宁衍生物合成的影响
∋  ∋  ( 不同激素对细胞生长的影响
试验 比较了不同生长素类与细胞分裂素类的组 合对新强紫草细胞生长的影响 。 结果
见表∋ 。此表结果表明 , ∋ , + 一 Ι 严重抑制细胞生长。 在所有加入 ∋ , + 一Ι的处理中 , 细胞干重
皆显著低于对照 , 而且颜色变 白 , 色素合成 受阻 。 在与 ϑ Κ 的组 合中 , < Λ Λ或 >Μ Λ 对
细胞生长有较小的促进效应 , 而在与 Μ Λ 1的组合中 , 则表现为抑制效应 。 > Λ Λ对细胞生长
有 明 显的促进作用 , 其 中与 ϑ Κ 组合 的促进效 果显著水平 。 高浓度 4 (  3 , ∋  . Φ = Ν% 5
的 ΜΛ 1不利于细胞生长 , 而在。 (或。 ΟΦ = Ν% 水平下 , Μ Λ 1能促进细胞生长 , 但未达显著
水平 。 当 ϑ Κ 浓度达。 Ο Φ = Ν% 以上时 , 细胞干重显著高于对照 。
裹 ∋ 不同橄众对纽  生长的形 
4 生长培养基) ∗ Π /  , 5
Κ ∃ Θ % Η ∋ Ρ Σ Σ Η Η 8 Ο . Σ Τ . Υ Φ . 2 Η Ο . 2 Η Η %% = Υ . ς 8 Τ Δ 2 Ο Ε Ο ) Η 2 “ Δ . 2 Η Ε % 8 Ε Υ Η Ο
. Σ Λ 。 Η Ε Ω Τ Υ . Φ ∃ Η Η %%Ο 4 ‘Υ . ς 8五 Φ Η Χ Δ Ε Φ , 1∗ /  , 5
傲素组合1 Τ Ξ8 . Θ . Υ Φ . 2 Η
.  1 . 一 Δ 8 Δ . 
细胞千重 4 克Ν瓶 5 Ι Υ 了 , Η Δ = Τ 8 4 = Ν Σ %一 Ο卜 5
ϑ Κ 4  7 Ν > 5 Μ Λ ) 4 二 = Ν %5
3 一( 3 。 / ( 一 3 ∋ 。 3 平均
  Η  2
对照亡  2 8 Υ . %
∋ 一 + 一 Ι4 . 。 ∋  ‘Ν % 5
村人Λ 4 3 。 ∋  7 Ν %5
> Λ Λ 4 . 。ΑΦ = Ν > 5
> Μ Λ 4 Ψ。 ∋二 = Ν %5
平均Β Η  2
( 一∋ ( ∋ 一 ∋ (
( 。/ 0 ( 。 +∋
∋  + Ζ
( 。, [
∋ 一[ Ζ ∋  + + ∋ 一∋ 3 ∋ 一 0,
3 · / ( 。 3 ∋ 。 3 平均
 舀二 2
∋ 。 + [ ( 。 , ∋ ( 。 0 [ ∋ 一 ∋ 3
( 。, 3 ( 一 ( , ( 一 ([ ( 一 Ζ 8
∴公+(卜曰
比品‘99介口⋯翻‘,几∴二,二( 。, 7 ( 一 [ Ζ∋ 一Ζ ( ∋ 一 0/( 。 Υ , ( 。 0已
( 。 [/ ∋ 。3 Ζ
∋ 一[ Ζ
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∋ 一 , Ζ
Α 一 Ζ [
( 一 , 3
∋ 一 ∋ ,
∋ 一 (7
( 一 7 Ζ
⋯2‘山,臼
9甘吸目]⊥一勺,二自9⋯,上,自山一知(人勺自月‘确品舀叮‘‘吸⋯(‘品‘2心自

月曰甩‘口2舀丹‘∴勺292∴尸舀 ⋯,二自2‘口‘0/([,(孟,曰9山,心自
) 留 3 一 3 /
5 Δ 6 武 汉 植 物 学 研 究 第56 卷
6 4 6 4 6 不同浓度的 −&人和Κ , 对细抱生长的影响
为确定最适于细胞生长的−& & 浓度 , 我们又作了进一步 的比较试 验 , 结果见表 > 。
当 −& &浓度为 5 4 εΓ Η Ι3 时 , 细胞干重最高。 而其余 Δ 种浓度间的影响差异不大 。 当 Κ ,浓
度达。4 ϑΓ 别 3时 , 再增加浓度 , 对细胞生长的促进效果不明显 。
衰 > 不同浓度φ几&与Κ,姐 4 对细几生长的形 4
Α生长培 养墓 , < ∗ 4 Δ ≅
, 8 Τ 一Β > / ς ςΒ Β Λϑ 2 ς −& & 8 Ω = Κ , 2 Ω Β Β 33 Η Σ 2 货 Λ Μ Ν Ω , Θ ϑ Χ Β Ω ϑ Ν 2 Ω
Β Θ 3Λ Θ Σ Β ϑ 2 ς & 一 Β Θ Υ ΜΣ 2 川 8 2 Β 3Ν Α‘Σ 2 α Λ Μ Γ Β = ΝΘ Γ , < ∗ 4 Δ ≅
激素组合ΧΜ 9 Λ 2 Μ 2 Σ Γ 2 Ω Β 细胞干重 Α克Ι瓶 ≅ Φ 下ΑΗ Ι ς 3
。 Ψ β ≅
Β 2 Γ Χ 2 一 ΝΛ Ν 2 4 −& 人ΑΓ 心Ι 3≅
Ε Ε 一 5 Ε 一 6 Ε 一‘ Ε 一? 5 一Ε 平均7二 Ω
【, Α Γ ‘Ι 3≅
Ε 。
5 一 Ε
5 。
6 。 Ε
平均
7 Β 一 Ω
6 。> Ε
6 。 ; ?
6 一 ; 6
6 。 ; [
6 4 ; 6
6 。 >弓 6 4 Ε 5
6 一> 5
6 。 [
6 Ε ; Ε
6 一> 6
6 。 5 [
6 一 [ Ε
6 一 ; 
6 。 [
6 一 5
6 一Δ ;
6 一 > 6
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6 。 Ε
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∴Ψ∴Ψ
> 4 5 ?
6 一 [ Ε
6 。[ 6
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6 一 5
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6 。 Ε
6 。 ; [
6 一 Δ Ε
6 一 ?
6 一 ;
,曰Ε恤臼一勺4自‘兮曰月弓4⋯4曰4‘血Ω
Χγ Ε 。 5
综上所述 , 我们次为 , 在生长培养基中添加Ε4 ϑΓ Η Ι3 Κ , Ι和 5 4 2Γ Η Ι 5 −& &有利于新疆
紫草细胞生长。
6 4 6 4 > 不同激素对紫草宁衍生物合成 的影响
不同激素对一新疆紫草悬浮培养细胞中紫草宁衍生物合成的影响效果列于表 ; 。 从此
表中可见 , 细胞分裂素类对紫草宁衍生物的合成有抑制作用 , 且这种作用随使用浓度的增
加而加强 。 比较而言 , + & Χ的抑制效果强于 Κ , 。 虽然Κ ,会抑制色素的形成 , 但由于一定
浓度的Κ , 对细胞生长有促进作用 , 所 以在含Ε 4 3Γ Η Ι3 Κ , 的处理中 , 色素产量仍高于不加
Κ , 的处理。 因此 , 我们认为添加。4 3Γ Η Ι3 Κ ,于生产培养基中有利于色素产量的提高。
−& & 浓度 Α奄克Ι 升 ≅
−& & Β 2 “ Β Β Ω Λ Σ 一 Λ Ν2 一 Α 二‘Ι 3 ≅
4 6 不同 −& & 浓度对紫草宁衍生物合成的影响
Α生产培养基 , < ∗ 二 4 ‘, Κ , 二 2 。 3 Γ Η Ι 3≅
( 5 。 6 / ς ς Β Β Λ ϑ 2 ς −& & Β 2 4 2 Β Ω Λ Σ 一Λ Ν2 Θ 一 2 Θ 4 卜Νβ 2 Ω 3 Ω
= Β Σ Νχ 一Λ Νχ Β ς 2 Σ Γ 一 Λ Ν2 Ω ΝΩ ϑ一Χ二 5Ε 4 Β Θ 3Λ Θ Σ Β 一 2 ς & 4
Σ “仁耘Σ 2 Γ 。 。Β 33 4 Α< Σ 2 = Θ Β Λ Ν⋯Β = ΝΘ 4 , Χ∗ 0 , Δ , Ε 。 54 ‘Ι 5 Κ , ≅
% & &和−+& 会明显地抑制
紫草宁衍生物的合成 。 −& & 对
紫草宁衍生物的合成有一定的
促进作用 , 例如 在 。4 ϑΓ Η Ι3
−& & ] 2 。2 “ Η Ι 5 Κ , 的处理中 ,
细胞色素含量最高Α5 ? 。 ;δ ≅ 。
6 4 6 4 ; 不同浓度 −& & 对紫草
宁衍生物合成的影响
结果见图 6 。 当 Κ , 浓度
为 Ε 4 5 , Η Ι 55 时 , 在 Ε 。 5一 5 。 Ε
“ Η Ι 3范围内, 随− &&浓度的增
加 , 细胞中色素含量也逐渐增
加 , 这表明低浓度的−& & 既能
月#工⊥、日∀%)_卜Ε‘%&6、帜璐#∀翻礼暇扣⎯ 一 代子尸一一α 、、一 多‘二—一 #夕 ’
4卜∃次5,_帕.2。,口日叫山%·&侧次十∀喇和热扣
第 6 期 方德秋等 Ψ <∗ 值、 激素对新获紫草悬浮培荞细胞生长及紫草宁衍生物合成的影响 5 Δ >
衰 ; 不网 , 帝对旅, 宁衍生钧合成的二Α生产培养基 , < ∗ 0 4 Δ ≅
, 8 Τ 3Β ; / ςς Β Β Λϑ 2 ς Μ 2 Σ Γ 2 Ω Β Ψ 2 Ω ϑ Μ Νβ 2 Ω ΝΩ = Β Σ Ν χ 8 Λ Ν , Β ς 2 Σ Γ 8 Λ Ν 2 Ω Ν Ω
ϑ Θ “ΧΒ Ω ϑ Ν 2 Ω Β Θ 3ΛΘ Σ Β , 2 ς & 。 Β Θ Β Μ Σ 2 沉8 Β Β 33 , ΑΧ Σ 2 = Θ Β Λ Ν 2 Ω Γ Β =Ν Θ Γ , Χ∗ 4 Δ ≅
Κ , Α二 Η Ι 3≅ Ω & < ΑΓ Η Ι 3≅
3! 。 5 Ε 。 6 Ε 一 4 Ε 6 4 Ε 平均 ∀ , 5 Ε 。
7 , 4 Ο
6 4 Ε 平均
7⋯
色萦含Λ 5Δ 。 ;对照 Χ.
Β Κ 色萦产且 Π通二 Ε
5 Δ 。Ε [ 5 。 > Δ 5 ; 。 5 Δ 5 6 。 Ε Ε 5 Ε 。 Δ [ 5 ; 。 5 > 5 ; 。Ε ; 3 Θ 。6 Ε  。 5Δ ? 一6 5 Ε 。 5Δ
5 [ 6 。Ε 5 Ε 。 5 ; ? 。 6 5 6 ; 。 [ 5 Ε [ 。  5 ; > 。 Δ 5 > ; 。5   一 [ ? 4 Ε [ ? 一 Ε 5 Ε 6 一 6
Χ ,
,一一 ,一 一一 4 叫Ο 4Ο一一‘ 门‘ Ο一一 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 口 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4一Ο 4 4 4 4 4 4 4 4 4护4Ο一门一一η 4一Ο Ο 目ηΟ Ο Ο色素含Λ 一? 一。 3一。 一。 一> 4 ;一 5 > 4 Δ [ 66 。 ? 6 一Π 。> 4 5 > 。 [; 了6 。 66Χ. [ 。 5心。 ; Δ ? 一; ;  一? ;−& &ΑΕ 。 一‘Ι 3≅ 色素产Λ 5[ Ε Ε < 1 5 。 5 > [ 。 ; 5 ;。 一 5 6 ? 。6  ? 。  5 ; Ε 。 5 · 5 6 Δ 一 Ε [ Ε 。 5 [  。 [ ? ; 。 ;  ? 一 Δ
色素含5  。> >Χ . 
。 Δ  一 ; 5 ? 一 6 Δ 。 6 [ [ 。 ; ? 。 Ε ? 一 5 > ? 。Ε [ 5 Ε 一 胜。口
弊人Α Ε 4 4 Ι 5≅ 色萦产 5  [ 4    4 ;  6 。 6
 一 ; 5
5 Ε > 。 3 Δ 。 6 ? Ε 。 > [ [ 。 6 ? [ 。 ? ? 4 Δ 了; 。 > ? > 。 ? 。
Χ ι一 叫一η 4 4 η η 4 4 4 4 4 4 4 4色素含Λ 6 > 。。6 5一6 ‘ 一‘二。 5 6 。 6一 5 5 。Δ , 5 Ε 4 6 6 一 ? [ 5 > 。 !2 ? 。  5Χ. [一 ;色紊产 Λ 5 6 。 ; 5 > Δ 。? 5一Ε 。 。 5 5 6 4 Δ 5 5 Ε 4 Ε  。 Ε 5 6 Ε 。Δ 6 5 > 。 3 [ ; 一Δ 一 5 ? 。? >Δ Δ 。 5 ? 5 。 5 4 > 一?&4ϑϕ 4乐Ε,叮Ξ54 Χ ι
平均7 Β二
色萦含Λ 3魂。 6 , 5 4 ? 6 > 4 Ε 5 6 。> ? 5‘4  Ο
Χ.
 。 ? 6 5 6 。> 6 Ξ 3 。 Δ ? [ 。 [ 。 Ε [ 。 6 > , 一Ε 口
色素产 Λ 5 >  。 > 5 ; > 。 > 5 >。。 6 5 6 。  5 Ε ?  > 。Ε 5 6 > 。 5 5 5 > 。5 [ 。 5 ? [ ; 4 > ? Δ 。 [  4 ?
Χ ι
κ < Υ 二 < ΝΗ 4 Β Ω Λ Β 2 Ω Λ Β Ω Λ ΑδΦ α ≅ , < 9 γ < ΝΗ Γ Β 2 Λ 9Ν Β 3= Α 二 Η Ι ς , 8 Ψ β ≅
促进 细胞生长又有利于紫草宁衍生物的 合成。 这与 , ‘石“ Λ‘等〔’Ξ 的研究结果基本一致 。
总之 , 在生产培养基中加入 2 4 3Γ Η Ι3 Κ , 和 Ε 4 ? 一 5 4 2Γ Η Ι3 −& & , 有 利于 细胞 中
紫草色素含量及产量的提高 。
通过 以上研究 , 我们认为适合于新疆紫草悬浮培养细胞生长的 Χ∗ 值为 ‘4 Δ 士 Ε 4 ; ,
激素为 3 4 2 Γ Η Ι 5 −& & 和 2 4 ϑ Γ Η Ι 5 Κ , , 而 2 4 Π Γ Η Ι 5 Κ , 和 Ε 4 ? 一 Π 4 2 Γ Η Ι 5 −& & 以 及
Χ∗ γ 4 Δ 土。。 ; , 则有利于紫草宁衍生物含量及产量的提高。
, 考 文 献
, 一‘一Λ 8 7 , 7 Ν , 。β 一Γ 盆 ∗ , ∗ Ν Σ 2 4 β 4 % Β Λ 一 34 < 盆‘Γ Β , Λ ς 2 Σ 4 8 Λ Ν 2 Ω Ν4 Β Ψ 5 , Θ 一 。 Θ 3 Λ 2 Σ Β 一 。Σ ∋ Ν玄Μ 2 Ο
ϑ户口Σ 执 Θ 杭 亡Σ 9七人Σ 2 Σ五ΝΨ 2 粗 4 Χ Μ9 Λ 2 ΒΜ Β Γ Ν日Λ Σ 9 , 5  ? ; ∴ 5 > Ψ  6 ? 一  > 6
7 Ν , Θ β 8 Γ Ν ∗ 一 【2 Ω 2 ϑ五ΝΓ 8 7 , , 一 Τ 一Λ‘ 7 一 / ς ς Β 2 Λ 一 2 ς Θ Ω Λ Σ ΝΛ 一2 Ω 一 − ς一。Λ 2 Σ 4 2 Ω 4 Μ Νβ 2 Ω ΝΩ = Β Σ Ν , 8 Λ 一, Β
ς 2 Σ 4 Ψ Λ 一Ε 4 Ψ 二 乙应Λ人2 ϑΧ‘Σ用“仍 ΒΣ 9Σ为Σ 2 Σ ΜΝ留。犯 。8 Σ 3Θ ϑ Β Θ 3 Λ Θ Σ Β 2 4 < 五了Λ 2 2 Μ Β 4 Ν ϑ Λ Σ 9 , 5  ? ? ∴ 5Δ Ψ 5 5 [ >
一 5 5 4 Δ
( , ΡΝΛ 4 9 , ∗ 一 Σ 一 ι , 2 Η ΝΩ 2 , Β Λ 8 3 4 < Σ 2 = Θ 2 Λ Ν 2 Ω 2 ς 4 Μ Νβ 2 二Ν Ω = Β Σ Ν , 一 Λ ‘, Β 4 Τ 9 2 Β 3 3 ϑ Θ 2 Χ Β一 5Ε Ο
4 Θ 3Λ Θ Σ Β ‘ 2 ς ∋ 止‘几2 ϑΧΒ Σ优 Θ 优 。Σ 9‘ΜΣ 2 Σ Μ3 Ψ 2 ” 4 5 4 Β ς ς Β Β Λ , 2 ς 川 Λ Σ 2 ‘。 Θ 4 2 Θ Σ Β Β 一 2 Ω Λ Μ Β < Σ 2 ‘Θ Β Λ Ν2 4
2 ς 一Μ Νβ 2 Ω Ν匕 = Β Σ 谊χ 一Λ Ν甲 Β ϑ 4 Χ 38 Ω Λ . Β 33 Λ ΒΧ 2 Σ Λ , 5  [ 5 ∴ 5 Ψ 一 Δ〔
犷Θ ΡΝΛ 8 9 , ∗ 一 , 一 ι , ϑ Θ Η 8 , Υ Β Λ 一 −。 < Σ 2 = Θ 2 Λ Ν2 Ω 2 ς 4 β Νβ 2 Ω ΝΩ = 4 Σ Νχ 8 Λ Νχ Β ϑ Τ 9 Β Β 33 Β Θ ϑ< Β Ω ϑ Ν2 Ο
Υ Θ 34 Θ Σ Β 4 2 ς ∋ ΝΨ入2 ϑΧΒ Σ Γ “衍 Β Σ 9£人Σ 2 Σ为Ν忿。” 4 5 5 4 & Ω Β α Γ Β = ΝΘ Γ ς 2 Σ Λ Μ Β ΧΣ 2 = Θ Β Λ Ν2 2 2 ς , 舀Νβ 2 Ω Ν 4
= , Σ苏, 4 Λ Ν, Β , , < 卜 , Λ Υ Β 33 ∃ Β < 2 Σ Λ 4 5  [ 5 ∴ 5 Ψ Δ 5一Δ >
5 Δ ; 武 汉 植 物 学 研 究 第56 卷
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李国凤 , 伍正蓉 , 叶和春等 4 离休培养的新砚紫草蔡醉色素的诱导形成 。 植物学通报 , 5  [ [∴ Ψ [月州 [Δ
叶和春 , 尹作鸿 , 李国凤等 4 不同理化因子对新口萦草愈伤组织生长及紫草宁衍生物合成的影响。 植物学
报 , 5   5 ∴ > >Α5 6 ≅ Ψ  6 ?一 > 5叶 和春 , 李国凤 , 益教望等 4 新祖紫草细均大 Λ 培养生产萦草宁衍 生物的研究 4 植物学集刊 , 第六集 4
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