全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 3 期 2016 年 2 月

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基于一测多评法对延胡索中生物碱类成分的质量控制研究
陈 俊 1，许 浚 1, 2, 3，张静雅 1，冯松浩 1，张铁军 2, 3*
1. 天津中医药大学，天津 300193
2. 天津药物研究院有限公司，天津 300193
3. 中药现代制剂与质量控制技术国家地方联合工程实验室（天津），天津 300193
摘 要：目的 建立同时测定延胡索中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡
索甲素 7 种生物碱类成分的 HPLC 方法，在此基础上，建立一测多评法的方法学考察方式，验证该方法在延胡索质量控制
中应用的可行性和技术适用性。方法 以延胡索所含的 7 种成分为指标成分，采用 2 种校正方法分别建立各成分与延胡索乙
素的相对校正因子（fk/s），计算各成分的量，实现一测多评；同时采用外标法测定延胡索中该 7 种成分的量，并比较 2 种一
测多评法所得计算值与实测值的差异，以验证一测多评法的准确性和可行性。结果 建立了延胡索中 7 种生物碱类成分一测
多评法方法学的考察模式；不同的色谱柱和仪器一测多评法的计算值与外标法实测值之间没有显著性差异。结论 同时测定
延胡索中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡索甲素 7 种生物碱的一测多评
法可靠，结果准确，可用于延胡索药材的质量控制。
关键词：一测多评；延胡索；原阿片碱；黄连碱；去氢延胡索甲素；黄藤素； D-四氢药根碱；延胡索乙素；延胡索甲素
中图分类号：R286.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)03 - 0493 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.03.024
Quality control for alkaloids of Corydalis Rhizoma based on quantitative analysis
on multi-components with single marker
CHEN Jun1, XU Jun1, 2, 3, ZHANG Jing-ya1, FENG Song-hao1, ZHANG Tie-jun2, 3
1. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
2. Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Co., Ltd., Tianjin 300193, China
3. National & Local United Engineering Laboratory of Modern Preparation and Quality Control Technology of Traditional Chinese
Medicine (Tianjin), Tianjin 300193, China
Abstract: Objective To establish an HPLC method for simultaneous assay of seven main active constituents (protopine, coptisine,
palmatine, dehydrocorydaline, D-tetrahydro jatrorrhizine, tetrahydropalmatine, and corydaline) in Corydalis Rhizoma, and on this
basis, establishing a methodology of quantitative analysis on multi-components by single marker (QAMS) to validate the feasibility of
method and technical adaptability of quality control applications for Corydalis Rhizoma. Methods Taking seven components in
Corydalis Rhizoma as indicators, two correction methods were used to establish the relative correction factor (fk/s) between each
component and tetrahydropalmatine. Then the correction factor was used to calculate the amount of each component in Corydalis
Rhizoma and finally to achieve this method. In the meantime, the external standard method was used to measure the above seven
components to compare the difference between the calculated and measured value of the two fk/s, and to validate the correctness and
adaptability of QAMS. Results The methodology of QAMS which was used to evaluate the seven kinds of alkaloids in Corydalis
Rhizoma was established; There was no significant difference between the data calculated by QAMS in different columns and
instruments and the values measured by the external standard method. Conclusion The QAMS method for measuring the components
of protopine, coptisine, palmatine, dehydrocorydaline, D-tetrahydro jatrorrhizine, tetrahydropalmatine, and corydaline in Corydalis
Rhizoma is reliable and accurate, it could be used to control the quality of crude drugs and herbal pieces of Corydalis Rhizoma.
Key words: quantitative analysis of multi-components by single-marker; Corydalis Rhizoma; protopine; coptisine; palmatine; dehydrocorydaline;
D-tetrahydro jatrorrhizine; tetrahydropalmatine; corydaline

收稿日期：2015-09-28
作者简介：陈 俊（1990—），男，天津中医药大学中药制药工程学专业硕士研究生。Tel: (022)23006843 E-mail: chenjunjun57@126.com
*通信作者 张铁军 Tel: (022)23006848 E-mail: tiezhang4@sina.com
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延 胡 索 为 罂 粟 科 植 物 延 胡 索 Corydalis
yanhusuo W. T. Wang 的干燥块茎。延胡索别称元胡、
玄胡、玄胡索等，最早记载于《神农本草经》，列为
中品，味辛、苦，性温，归肝、脾经，具有活血、
行气、止痛等功效，用于治疗胸胁、腕腹疼痛、经
闭痛经、产后瘀阻、跌扑肿痛等[1]。药理研究表明，
延胡索中所含的生物碱类物质为主要的镇痛成分，
延胡索生物碱包括的叔胺碱、季胺碱是其主要活性
成分[2-3]。目前，延胡索药材、饮片及含有延胡索的
成方制剂主要以单指标成分（延胡索乙素）来控制
质量，《中国药典》2015 年版对延胡索药材的质量
控制主要从性状、显微鉴别、薄层色谱鉴别以及延
胡索乙素的量进行了规定。本实验采用 HPLC 法同
时测定了延胡索中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去
氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡
索甲素的量，并利用以上 7 种生物碱内在的函数和
比例关系，采用一测多评法[4-5]，通过验证试验，以
延胡索乙素为内标成分，得出原阿片碱、黄连碱、
黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索
甲素与延胡索乙素之间的相对校正因子，计算出这
7 种生物碱的量，为更确切评价延胡索以及含延胡
索中成药的质量提供了新的分析模式。
1 仪器与材料
Agilent 1260 高效液相色谱仪（美国 Agilent 公
司）；Agilent 1100 高效液相色谱仪（美国 Agilent
公司）；Lab Alliance 高效液相色谱仪（美国兰博公
司）；Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色
谱柱（美国 Dikma 公司）；Welch C18（250 mm×4.6
mm，5 μm）色谱柱（美国 Welch 公司）；Ameritech
C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱（美国
Ameritech Scientific 公司）；COSMOSIL 5 C18-MS-II
（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱（日本 Nacalai
Tesque 公司）；AB204-N 电子天平（十万分之一，
德国 METELER 公司）；BT25S 电子天平（万分之
一，德国 Sartorius 公司）；超声波清洗仪（宁波新
芝生物科技公司）。
对照品延胡索甲素（批号 MUST-1302010）、
D-四氢药根碱（批号 MUST-13090916）、原阿片
碱（批号 MUST-13030101）、黄连碱（批号 MUST-
13111602）均购自成都曼思特生物科技有限公司；
对照品黄藤素（批号 J140303）、延胡索乙素（批号
J140303）均购自上海将来试剂有限公司；去氢延胡
索甲素（批号 131220）购自上海融禾医药科技有限
公司，以上对照品质量分数均大于 98%。乙腈（色
谱纯，天津市康科德科技有限公司）；三乙胺（分析
纯，天津光复精密化工研究所）；冰乙酸（分析纯，
天津市康科德科技有限公司）；纯净水（杭州娃哈哈
集团有限公司）。
14 批延胡索药材收集于天津、河北、四川、河南、
陕西、甘肃，其产地为浙江或陕西，经天津药物研究
院中药现代研究部张铁军研究员鉴定为罂粟科植物
延胡索 Corydalis yanhusuo W. T. Wang 的干燥块茎，符
合《中国药典》2015 年版一部的有关规定。
2 方法与结果
2.1 HPLC 定量方法
2.1.1 色谱条件 色谱柱：Diamonsil C18 柱（250
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.2%冰醋酸
溶液（三乙胺调 pH 6.0），梯度洗脱：0～10 min，
20%～22%乙腈；10～30 min，22%～30%乙腈；30～
60 min，30%～80%乙腈；60～65 min，80%～100%
乙腈；柱温 35 ℃，进样量 10 μL，波长 280 nm；
体积流量 1 mL/min。上述色谱条件下，各组分分离
度良好，色谱图见图 1。


1-原阿片碱 2-黄连碱 3-黄藤素 4-去氢延胡索甲素 5-D-四
氢药根碱 6-延胡索乙素 7-延胡索甲素
1-protopine 2-coptisine 3-palmatine 4-dehydrocorydaline
5-D-tetrahydrojatrorrhizine 6-dl-tetrahydropalmatine 7-d-corydaline
图 1 混合对照品 (A) 和供试品 (B) HPLC 图
Fig. 1 HPLC of mixed standard (A) and sample (B)
2.1.2 对照品溶液的制备 分别精密称取原阿片
碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢
药根碱、延胡索乙素及延胡索甲素对照品适量，
置同一 25 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，
即得混合对照品溶液（原阿片碱 19.72 μg/mL、黄
连碱 20.08 μg/mL、黄藤素 19.72 μg/mL、去氢延
胡索甲素 99.60 μg/mL、D-四氢药根碱 38.72
μg/mL、延胡索乙素 49.80 μg/mL 及延胡索甲素
55.60 μg/mL）。
0 10 20 30 40 50 60
t/min
1
2 3
4
5 6 7
1 2 3
4
5 6 7
A



B
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2.1.3 供试品溶液的制备 取延胡索药材粗粉（过
50 目筛）约 1 g，精密称定，置于 100 mL 圆底烧瓶
中，精密加入浓氨-70%甲醇（1∶20）溶液 50 mL，
称定重量，冷浸 1 h 后回流提取 60 min，冷却后补
质量，摇匀滤过。精密量取续滤液 25 mL，蒸干，
残渣用甲醇溶解，转移至 5 mL 量瓶中，稀释至刻
度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.1.4 线性关系考察 分别精密吸取混合对照品溶
液，制成 6 个不同质量浓度的对照品溶液，按“2.1.1”
项下的色谱条件进行测定。记录相应的色谱峰峰面
积，以峰面积积分值为纵坐标（Y），对照品质量为
横坐标（X），进行线性回归。结果见表 1。
表 1 7 种成分的线性关系考察结果
Table 1 Linear relationships results for seven constituents
指标成分 回归方程 r 线性范围/μg
原阿片碱 Y＝1 622.6 X＋3.045 1 0.999 9 0.039 44～0.394 4
黄连碱 Y＝3 508.4 X＋10.518 0.999 9 0.040 16～0.401 6
黄藤素 Y＝4 799.4 X＋5.838 0 0.999 9 0.039 44～0.394 4
去氢延胡索甲素 Y＝3 634.6 X＋21.54 1 0.999 9 0.199 20～1.992 0
D-四氢药根碱 Y＝1 549.8 X＋2.348 2 0.999 9 0.077 44～0.774 4
延胡索乙素 Y＝942.79 X＋3.542 2 0.999 9 0.099 60～0.996 0
延胡索甲素 Y＝1 187.6 X＋6.643 2 0.999 9 0.111 20～1.112 0

2.1.5 精密度试验 取同一混合对照品溶液，连续
进样 6 次，记录各色谱峰峰面积，计算得原阿片碱、
黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、
延胡索乙素和延胡索甲素峰面积的 RSD 分别为
1.01%、0.73%、1.27%、1.29%、1.33%、0.88%，表
明仪器精密度良好。
2.1.6 稳定性试验 称取延胡索（批号 141001，过
60 目筛）粉末约 1 g，精密称定，制备供试品溶液，
分别于制备后 0、3、6、9、12、24 h 进样，记录色
谱峰，计算得原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延
胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡索甲
素峰面积的 RSD 分别为 1.85%、1.85%、1.16%、
1.17%、1.38%、1.14%、1.18%，表明供试品溶液在
24 h 内稳定。
2.1.7 重复性试验 称取延胡索（批号 141001，过
60 目筛）粉末约 1 g，共 6 份，精密称定，分别制
备供试品溶液，进样测定，计算得原阿片碱、黄连
碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延
胡索乙素和延胡索甲素质量分数的 RSD 分别为
1.98%、2.82%、2.63%、1.14%、1.83%、0.96%、0.72%。
2.1.8 加样回收率试验 称取适量延胡索（批号
141001，过 60 目筛）粉末约 0.5 g，共 6 份，精密
称定，分别加入含原阿片碱 19.72 μg/mL、黄连碱
20.08 μg/mL、黄藤素 19.72 μg/mL、去氢延胡索甲
素 99.60 μg/mL、D-四氢药根碱 38.72 μg/mL、延胡
索乙素49.80 μg/mL及延胡索甲素55.60 μg/mL的混
合对照品溶液 2.0、2.5、3.0 mL，制备供试品溶液，
测定，计算得原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延
胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素和延胡索甲
素平均加样回收率分别为 98.25%、99.06%、97.40%、
99.63%、99.58%、98.19%、99.35%，RSD 分别为
2.51%、2.47%、2.47%、2.49%、1.86%、2.27%、2.69%。
结果表明，本法具有良好的回收率。
2.1.9 耐用性试验 分别考察流动相各梯度点比例
变化±3%、水相 pH 值变化±0.1、柱温变化±5 ℃、
检测波长变化±5 nm、体积流量变化±20%，以及
采用 4 根不同色谱柱（Diamonsil C18柱、Welch C18
柱、Ameritech C18 柱、COSMOSIL 5 C18-MS-II 柱）
进行测定时，仪器色谱行为的变化。检测同一批延
胡索中 7 种成分的量及其 RSD，并考察其分离度、
拖尾因子、理论塔板数，各条件下所测各成分质量
分数量的 RSD 均在 2.5%以内，分离效果理想。因
此，延胡索中的 7 种成分定测定条件较宽，具有较
好的耐用性。
2.2 相对校正因子（fk/s）的计算
2.2.1 多点校正法 参照文献方法[6-7]，以多个质量
浓度点计算所得的 fk/s 取平均值作为定量用 fk/s。fk/s
计算公式：fk/s＝(Cs×Ak)/(Ck×As)；待测成分质量浓
度计算公式：Ck′＝(Cs×Ak′)/(fk/s×As)。两式中 Cs 为
参照物质质量浓度，As为参照物质色谱峰峰面积，
Ck 为其他对照组分质量浓度，Ak 为其他对照组分色
谱峰峰面积，Ak′为待测组分色谱峰峰面积。应用多
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点校正法进行计算，得到其他成分相对于延胡索乙
素的 fk/s。结果见表 2。
2.2.2 斜率校正法 在“2.1.4”项下所得标准曲线
中，X＝(Y－b)/a＝Y/a－b/a，b 值通常由误差引起，
当 a/b 值大于 100，b/a 值可忽略不计，此时可以 X＝
Y/a 直接计算。通过 X 与 Y 的斜率之比计算 fk/s（fk/s＝
ak/as）。Ck′＝Ak′/(as×fk/s)，as 为参照物斜率，ak 为其
他对照组分斜率。应用斜率校正法进行计算，得到
其他成分相对于延胡索乙素的 fk/s。结果原阿片碱、
黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、
延胡索甲素对于延胡索乙素的 fk/s 分别为 1.721、
3.721、5.091、3.855、1.644、1.260。
2.3 fk/s 的重现性考察
本实验考察了不同实验室的 3 套色谱系统
（Agilent 1260、Agilent 1100、Lab Alliance）及不
同的色谱柱（Diamonsil C18、Welch C18、Ameritech
C18、COSMOSIL 5 C18-MS-II）对 fk/s 的影响。结
果见表 3。
表 2 以延胡索乙素为参照的 fk/s (多点校正法)
Table 2 fk/s with pureonebio as reference (multi-point correction method)
相对于延胡索乙素的 fk/s 进样体积/μL 原阿片碱 黄连碱 黄藤素 去氢延胡索甲素 D-四氢药根碱 延胡索甲素
1.0 1.745 3.742 5.085 3.836 1.615 1.263
2.0 1.748 3.739 5.085 3.856 1.612 1.263
3.0 1.746 3.759 5.084 3.848 1.624 1.263
4.0 1.743 3.756 5.081 3.848 1.612 1.263
5.0 1.743 3.766 5.087 3.858 1.628 1.263
6.0 1.743 3.766 5.088 3.861 1.624 1.261
平均值 1.745 3.755 5.085 3.851 1.619 1.263
RSD/% 0.120 0.310 0.050 0.240 0.430 0.060
表 3 不同仪器和不同色谱柱下的 fk/s
Table 3 fk/s on different instructments and columns
fk/s 仪器 色谱柱
原阿片碱 黄连碱 黄藤素 去氢延胡索甲素 D-四氢药根碱 延胡索甲素
Agilent 1260 Diamonsil C18 1.745 3.755 5.085 3.851 1.619 1.263
Welch C18 1.729 3.718 5.079 3.831 1.621 1.252
Ameritech C18 1.783 3.780 5.091 3.878 1.593 1.258
COSMOSIL 5 C18-MS-II 1.740 3.627 5.052 3.891 1.620 1.272
Agilent 1100 Diamonsil C18 1.635 3.567 5.048 4.032 1.493 1.261
Lab Alliance Diamonsil C18 1.795 3.673 4.795 3.654 1.601 1.246
平均值 1.739 3.687 5.025 3.856 1.591 1.259
RSD/% 2.970 1.990 2.070 2.880 2.840 0.650

2.4 待测组分色谱峰的定位
利用相对保留时间进行定位，即以各待测组分色
谱峰与延胡索乙素色谱峰的相对保留时间来确定。以
延胡索乙素为基准峰，计算不同仪器和不同色谱柱下
原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、D-四
氢药根碱、延胡索甲素峰相对保留时间。结果见表 4。
2.5 一测多评法与外标法测定结果的比较
分别精密吸取对照品溶液和延胡索供试品溶液
各 10 μL，进样测定，记录原阿片碱、黄连碱、黄
藤素、去氢延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙
素及延胡索甲素的峰面积，分别用外标法和 2 种一
测多评法计算 7 种成分的量，结果见表 5。
将外标法和 2 种一测多评法定量结果分别经
Pearson 相关性分析，以确认一测多评法的准确性。
结果外标法和 2 种一测多评法之间的相关系数均大
于 0.999 9，说明外标法和 2 种一测多评法得到的结
果相似性极高。同时经方差分析，其 P 值远大于
0.05，说明外标法和 2 种一测多评法计算结果并无
显著性差异。综上，一测多评法应用于延胡索的多
指标成分质量评价中可行。
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表 4 不同仪器和不同色谱柱下的各色谱峰相对保留时间
Table 4 Relative retention time on different instructments and columns
相对保留时间仪器 色谱柱 原阿片碱 黄连碱 黄藤素 去氢延胡索甲 D-四氢药根碱 延胡索甲素
Agilent 1260 Diamonsil C18 0.417 8 0.521 7 0.673 6 0.744 1 0.853 7 1.155 5
Welch C18 0.321 3 0.376 5 0.517 8 0.604 4 0.838 0 1.163 9
Ameritech C18 0.326 2 0.378 8 0.519 1 0.600 5 0.848 6 1.157 4
COSMOSIL 5 C18-MS-II 0.289 9 0.350 9 0.480 9 0.566 4 0.818 2 1.175 2
Agilent 1100 Diamonsil C18 0.380 1 0.450 9 0.594 0 0.670 7 0.863 3 1.145 8
Lab Alliance Diamonsil C18 0.378 0 0.462 3 0.617 5 0.700 6 0.852 8 1.150 3
平均值 0.352 2 0.423 5 0.567 2 0.647 8 0.845 8 1.158 0
RSD/% 12.30 14.09 11.78 9.63 1.71 0.82
表 5 延胡索药材中 7 种成分不同方法定量测定结果 (n = 3)
Table 5 Determination of seven constituents in Corydalis Rhizoma by different methods (n = 3)
质量分数/(mg·g−1)产地 批号 方法 原阿片碱 黄连碱 黄藤素 去氢延胡索甲素 D-四氢药根碱 延胡索乙素 延胡索甲素
浙江 141001 外标法 0.299 0.377 0.304 1.554 0.272 0.628 0.437
一测多评多点校正 0.290 0.373 0.302 1.544 0.261 0.628 0.432
一测多评斜率校正 0.294 0.377 0.301 1.542 0.257 0.628 0.433
141002 外标法 0.302 0.374 0.328 1.551 0.269 0.693 0.562
一测多评多点校正 0.293 0.370 0.326 1.541 0.258 0.693 0.555
一测多评斜率校正 0.298 0.374 0.325 1.539 0.254 0.693 0.556
141003 外标法 0.237 0.443 0.345 1.901 0.189 0.562 0.756
一测多评多点校正 0.231 0.439 0.342 1.889 0.181 0.562 0.747
一测多评斜率校正 0.234 0.443 0.341 1.887 0.179 0.562 0.749
141004 外标法 0.283 0.263 0.175 1.156 0.339 0.786 0.825
一测多评多点校正 0.275 0.261 0.173 1.148 0.326 0.786 0.815
一测多评斜率校正 0.279 0.263 0.173 1.147 0.321 0.786 0.817
141005 外标法 0.265 0.239 0.169 1.233 0.344 0.745 0.704
一测多评多点校正 0.257 0.237 0.168 1.225 0.331 0.745 0.695
一测多评斜率校正 0.261 0.239 0.168 1.223 0.325 0.745 0.697
141006 外标法 0.271 0.297 0.174 1.169 0.355 0.810 0.935
一测多评多点校正 0.263 0.295 0.172 1.162 0.341 0.810 0.923
一测多评斜率校正 0.267 0.297 0.172 1.160 0.336 0.810 0.925
141007 外标法 0.166 0.342 0.146 0.947 0.356 0.729 0.833
一测多评多点校正 0.161 0.339 0.145 0.941 0.342 0.729 0.822
一测多评斜率校正 0.163 0.342 0.145 0.940 0.337 0.729 0.824
陕西 141008 外标法 0.242 0.321 0.172 1.073 0.300 0.726 0.915
一测多评多点校正 0.235 0.318 0.170 1.066 0.289 0.726 0.904
一测多评斜率校正 0.238 0.321 0.170 1.065 0.284 0.726 0.906
141009 外标法 0.267 0.194 0.191 1.169 0.313 0.689 0.589
一测多评多点校正 0.259 0.192 0.189 1.161 0.300 0.689 0.582
一测多评斜率校正 0.263 0.194 0.189 1.160 0.296 0.689 0.583
141010 外标法 0.270 0.256 0.172 1.096 0.355 0.854 1.007
一测多评多点校正 0.263 0.254 0.171 1.089 0.342 0.854 0.995
一测多评斜率校正 0.266 0.256 0.170 1.088 0.336 0.854 0.997
141011 外标法 0.191 0.117 0.092 0.626 0.214 0.573 0.601
一测多评多点校正 0.185 0.116 0.092 0.622 0.206 0.573 0.593
一测多评斜率校正 0.188 0.117 0.092 0.621 0.202 0.573 0.595
141012 外标法 0.267 0.269 0.186 1.123 0.337 0.813 0.867
一测多评多点校正 0.260 0.267 0.185 1.116 0.324 0.813 0.857
一测多评斜率校正 0.263 0.269 0.185 1.115 0.319 0.813 0.859
141013 外标法 0.255 0.236 0.145 0.944 0.341 0.760 0.828
一测多评多点校正 0.248 0.234 0.144 0.938 0.327 0.760 0.818
一测多评斜率校正 0.252 0.236 0.144 0.937 0.322 0.760 0.820
141014 外标法 0.271 0.325 0.136 0.990 0.365 0.843 0.966
一测多评多点校正 0.263 0.322 0.135 0.983 0.350 0.843 0.954
一测多评斜率校正 0.267 0.325 0.135 0.982 0.345 0.843 0.956
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 3 期 2016 年 2 月

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3 讨论
延胡索为常用中药，其主要有效成分为生物碱
类，《中国药典》2015 年版中仅对延胡索乙素进行
了规定，而延胡索中的其他生物碱也具有重要的药
理作用，仅控制延胡索乙素的量无法真实评价药材
的内在质量，本实验采用一测多评法仅使用一种对
照品同时测定 7 种主要成分的量，能更全面而真实
地评价延胡索药材的内在质量。
考察提取溶剂时发现，在提取液中加入少量氨
水可增加生物碱的溶出，这是由于大多数生物碱在
植物中是以盐的形式存在，用氨水浸润后可使其游
离，而溶于有机试剂中，因此在提取生物碱时加入
少量氨水可提高提取效率。
本研究考察了不同液相色谱系统以及不同品牌
的色谱柱对延胡索药材中 7 种生物碱之间相对校正
因子的影响，结果表明，得到的各组分校正因子
RSD 均＜3%。从表 5 中对延胡索药材 7 种成分不
同方法定量测定结果可见，2 种一测多评法与外标
法所计算的结果并无显著性差异。定量因子计算所
用 fk/s 为斜率校正法所得，故其计算结果与斜率校正
法一致。由于相同浓度参照物于不同仪器其峰面积
有一定差异，特别是不同仪器峰面积计算方式不一
致，从而导致定量因子出现一定差异，故定量因子
每台仪器需单独建立。
在待测组分色谱峰的定位中，应用相同仪器不
同品牌色谱柱，原阿片碱、黄连碱、黄藤素和去氢
延胡索甲素色谱峰的相对保留时间差别较大；应用
不同品牌仪器相同色谱柱，各待测组分色谱峰的相
对保留时间差别较小。其中， COSMOSIL 5
C18-MS-II 柱对原阿片碱、黄连碱、黄藤素和去氢延
胡索甲素色谱峰的相对保留时间差别最大，但各色
谱峰的出峰顺序和峰数没有变化，分离度良好。
本实验建立了采用HPLC法和一测多评法同时测
定延胡索药材中原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢延
胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素及延胡索甲素
7 个成分含量的方法，方法简便、准确，重复性好。
对 14 批延胡索药材 7 个指标成分进行了测定，结果
表明，批次样品间原阿片碱、黄连碱、黄藤素、去氢
延胡索甲素、D-四氢药根碱、延胡索乙素及延胡索甲
素的量差异不大。本实验仅采用常见的延胡索乙素即
可实现对延胡索药材中的 7 个成分的定量，一测多评
法可以在延胡索药材对照品紧缺的情况下实现定量
测定的要求，其测定方法具有一定的推广应用价值。
参考文献
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[2] 林武霖, 王如伟, 孙柳燕. 延胡索质量控制的研究进展
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