全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 12 期 2014 年 6 月

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白花蛇舌草及其制剂有效成分定量测定方法的研究进展
李 芳 1，杨培民 2*，曹广尚 2*，高 鹏 1
1. 山东中医药大学药学院，山东 济南 250355
2. 山东中医药大学附属医院，山东 济南 250011
摘 要：白花蛇舌草是临床广泛应用的传统中药，主要用于恶性肿瘤和各种炎性疾病的治疗，并取得了良好的疗效，其研究
越来越受到中医药学者的青睐。通过检索、梳理与分析文献，归纳了近年来有关白花蛇舌草及其制剂中有效成分定量测定的
方法，包括分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、薄层扫描法、离子色谱法等，分析了其各自特点，并提出了今后
研究的方向，为白花蛇舌草药材和制剂质量评价提供科学参考。
关键词：白花蛇舌草；分光光度法；高效液相色谱法；薄层扫描法；离子色谱法
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)12 - 1803 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.12.029
Research progress on determination methods of active constituents
from Oldenlandia diffusa and its preparations
LI Fang1, YANG Pei-min2, CAO Guang-shang2, GAO Peng1
1. College of Pharmacy, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China
2. The Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250011, China
Key words: Oldenlandia diffusa (Wind.) Roxb; spectrophotometry; HPLC method; TLC scanning method; ion chromatography

白 花 蛇 舌 草 为 茜 草 科 植 物 白 花 蛇 舌 草
Oldenlandia diffusa (Wind.) Roxb. 的干燥全草[1]，
具有抗肿瘤[2-3]、抗炎、免疫调节、抗氧化[4]等作
用。国内外学者已从中分离出蒽醌、黄酮、萜、甾
醇、多糖、生物碱，以及某些微量元素、氨基酸、
挥发油等多类成分[5]。近年来白花蛇舌草有关研究
取得了较多成果，临床制剂品种也越来越多，市场
上有白花蛇舌草注射剂、口服液、胶囊剂等剂型。
《中国药典》2010 年版尚未收载白花蛇舌草，在其
他药品标准中，更无白花蛇舌草及有效成分的质控
方法，虽然这方面文献量剧增，但报道却相当分散，
更未见有关白花蛇舌草及其制剂有效成分定量测
定方法的综述报道。为此本文综述了近年相关研究
进展，并对其主要方法进行分类并加以分析，提出
以后的研究方向，以供研究者和新版《中国药典》
提供参考。
1 分光光度法
1.1 紫外分光光度法
该法操作方便、费用少、分析速度较快、应用
广泛，可用于质量控制[6]。辛爱学等[7]利用日本岛
津 UV—210 可见紫外分光光度仪，在 548 nm 波长
处测定了白花蛇舌草中齐墩果酸的量。周昕等[8]采
用香草醛-高氯酸法，用 SHIMADZUUUV 紫外分光
光度仪，在 548 nm 波长处测定白花蛇舌草注射液
中齐墩果酸的量。该法简便、准确、可靠，可用于
白花蛇舌草制剂的质量控制。樊民广等[9]用 UV752
型紫外-可见分光光度计，以苯酚-硫酸法测定白花
蛇舌草中多糖的量。彭燕等[10]采用差示分光光度
法，在 420 nm 波长处测定白花蛇舌草注射液中总
黄酮的量。凌育赵[11]以苯酚-硫酸显色，使用导数光
谱法快速测定多糖的量，具有选择性好、不受样品
颜色干扰、所需样品量少、简便、快速、准确的

收稿日期：2013-12-11
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81274052）；山东省自然科学基金资助项目（ZR2011HL043）；山东省优秀中青年科学家科研奖励基
金资助项目（BS2013YY052）
作者简介：李 芳（1988—），女，硕士在读，研究方向为中药制剂学。Tel: 18340036339 E-mail: fangli997@126.com
*通信作者 杨培民，男，教授，博士生导师，从事中药制剂研究。Tel: (0531)68617607 E-mail: jnypm7777@126.com
曹广尚 Tel: (0531)68617919 E-mail: cgs198041@163.com
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优点。陈悦娇[12]利用四价钛离子能与二安替匹林
甲烷生成黄色络合物的性质，用 Bankmann 640
型紫外-可见分光光度计、722 光栅分光光度计测
定白花蛇舌草中钛量。许军等[13]采用苯酚-硫酸比
色法测定家种白花蛇舌草多糖的量。李贺敏等[14]
用苯酚-浓硫酸法测定不同产地白花蛇舌草中多
糖的量。刘志刚等[15]使用惠普 UV—8453 型可见
紫外分光光度计，在 507 nm 波长处测定白花蛇舌
草总黄酮的量。刘志刚等[16]采用苯酚硫酸法，在
486 nm 波长处测定了江西、广东、广西白花蛇舌
草中多糖的量。
1.2 原子吸收光谱法
卑占宇等 [17]使用 TAS—990 型原子吸收分
光光度计和 WX—4000 温压双控微波消解系统，
用浓硝酸、高氯酸和过氧化氢（体积比 8∶1∶2）
混合液对样品进行消解，建立了测定白花蛇舌草
中微量元素 Fe、Cu、Zn、Mg、Ca、Mn 量的火
焰原子吸收光谱法。曾亮等 [18]使用 TAS—986 型
原子吸收分光光度计，样品用灰化法处理后，应
用火焰原子吸收光谱法测定白花蛇舌草不同部
位的金属元素 Ca、Cd、Co、Mg、Fe、Mn、Zn
和 Pb 的量。张广利[19]采用磷酸二氢铵和硝酸镁
为基体改进剂，样品用微波消解法处理，用原子
吸收分光光度石墨炉法测定白花蛇舌草注射液
中铅的量。
1.3 原子荧光法
韩永春等[20]使用 AFS—230 型双道原子荧光
光度计和 WX—4000 温压双控微波消解系统，用
硝酸＋水（7＋3）mL 的混合液为消解体系测定白
花蛇舌草中砷和汞的量。张瑜等[21]采用一次性微
波消解原子荧光法测定江苏栽培品药材中有害重
金属 As、Cd、Pb、Hg 的量。
2 色谱法
2.1 薄层扫描法（TLCS）
薄层扫描法具有操作简便、进样量少、分离效
果好、专属性强等优点。此法对仪器的精密性要求
不高。毛杏飞等[22]选用硅胶 HPTLC 板，以苯-氯仿-
丙酮（8∶5∶1）为展开剂，进行反射式双波长锯齿
扫描，λS为 535 nm，λR 为 470 nm，测定白花蛇舌
草中 β-谷甾醇的量。卢文彪[23]选用硅胶 G 预制薄层
板，以氯仿-甲醇（9∶1）为展开剂，进行反射式双
波长锯齿扫描 λS为 530 nm，λR为 420 nm，测定白
花蛇舌草中齐墩果酸的量。
2.2 高效液相色谱法（HPLC）
2.2.1 HPLC-UV 法 在已报道的 HPLC 法测定白
花蛇舌草及其制剂的定量测定方法中，最常见的是
使用紫外检测器检测。根据流动相的洗脱方法差异
可分为梯度洗脱和等度洗脱。
（1）梯度洗脱：曾光尧等[24]采用 Kromasil ODS
柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.1%冰醋酸梯
度洗脱，检测波长为 303 nm，柱温 30 ℃，体积流
量 1 mL/min，测定药材中 (E)-6-O-P-香豆酰鸡屎藤
苷甲酯和香豆酸的量。晏利芝等 [25]采用 Inertsil
ODS-3（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-
0.05%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱于检测波长
310 nm 处测定本品有效部位中对香豆酸和反式
6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯的量。邵振中等[26]采用
Alltima C18 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），甲醇-0.5%
冰醋酸为流动相，梯度洗脱，检测波长为 350 nm
处测定药材中咖啡酸、槲皮素和山柰酚的量。
（2）等度洗脱：在等度洗脱法测定白花蛇舌草
及其制剂中有效成分的量方法中，主要有 3 种流动
相系统，一种为流动相含磷酸，一种为流动相含冰
醋酸，此外还有一种流动相不含酸，见表 1～3。
2.2.2 液-质联用（HPLC-MS）法 杨宜华等[48]采
用 Hypersil ODS C18（150 mm×4. 6 mm，5 μm）色
谱柱，质谱采用大气压化学离子化探头，选择性离
子流模式（正离子），二极管阵列检测器，流动相为
甲醇-0.05%冰醋酸（75∶25），体积流量 0.2 mL/min，
柱温 45 ℃，测定白花蛇舌草中齐墩果酸和熊果酸
的量。
2.2.3 HPLC-ELSD 魏世杰等 [49] 采用 Alltech
ODS-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，ELSD-
Alltech 2000 检测器，甲醇-水-冰醋酸（80∶20∶0.1）
为流动相，体积流量 0.8 mL/min，柱温 30 ℃；载
气流量 119 L/min；漂移管温度 72 ℃，选择撞击器
关模式，测定白花蛇舌草药材中熊果酸的量。
2.3 离子色谱法
刘军玲等[50]通过加入三乙醇胺-水（1∶2）混合
溶液 2 mL，以 20 mmol/L KOH 溶液为淋洗液，经
Ion PacAS23 Analytical 离子色谱柱分离，电导检测
器检测，测定白花舌蛇草注射液中亚硫酸盐与硫酸
盐总量。
3 毛细管电泳法
刘春霞等[51]报道了采用毛细管区带电泳，高频
电导，以布洛芬为内标，检测白花蛇舌草中齐墩果
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表 1 流动相含磷酸
Table 1 Mobile phase containing phosphoric acid
药材或制剂 指标成分 色谱柱
柱温 /
℃
波长 /
nm
流动相
体积流量 /
(mL·min−1)
白花蛇舌草配方
颗粒[27]
黄酮类（槲皮素和山柰素） Hypersil ODS C18
（250 mm×4.6 mm，5 μm）
30 360 甲醇-0.2%磷酸
（45∶55）
1.0
白花蛇舌草[28] 黄酮类（槲皮素和山柰素） 伊利特-C18柱（250 mm×
4.6 mm，5 μm）
35 370 乙腈-甲醇-0.2%磷酸
（10∶45∶60）
1.0
白花蛇舌草
注射液[29]
酚酸类（3, 4-二羟基苯甲酸
甲酯）
ODS 柱（200 mm×4.6 mm，
5 μm）
室温 254 甲醇-0.05%的磷酸
（15∶85）
0.8
白花蛇舌草[30] 酚酸类（3, 4-二羟基苯甲酸
甲酯）
ODS 柱（200 mm×4.6 mm，
5 μm）
室温 254 甲醇-0.05%的磷酸
（15∶85）
0.8
白花蛇舌草[31] 三萜类（齐墩果酸与熊果酸）Nucledure C18（150 mm×
4.6 mm，5 μm）
室温 220 乙腈-磷酸盐缓冲液
（45∶55）
1.0
白花蛇舌草[32] 环烯醚萜类（车叶草苷） Kromasil C18（250 mm×
4.6 mm，5 μm）
30 240 乙腈-0.2%磷酸
（5∶95）
0.8
白花蛇舌草[33] 黄酮类（槲皮素和山柰素） Kromasil C18（250 mm×4.6
mm，5 μm）
30 360 甲醇-0.4%磷酸溶液
（60∶40）
1.0
白花蛇舌草[34] 黄酮类（槲皮素） Hypersil BDS C18
（200 mm×4.6 mm，5 μm）
25 370 甲醇-水-磷酸
（50∶50∶0.2）
1.0
白花蛇舌草[35] 黄酮类（槲皮素） ZorbaxSB-C18（250 mm×
4.6 mm，5 μm）
30 370 乙腈-0.2%磷酸
（30∶70）
1.0
表 2 流动相含冰醋酸
Table 2 Mobile phase containing glacial acetic acid
药材或制剂 指标成分 色谱柱 柱温 /℃
波长 /
nm
流动相 体积流量 /
(mL·min−1)
白花蛇舌草注
射液[36]
酚酸类（对香豆酸） ODS C18（250 mm×4.6
mm，5 μm）
25 308 甲醇 -20 mmol/L NH4Ac
（33∶67），pH 3.5
0.8
白花蛇舌草注
射液[37]
环烯醚萜类（去乙酰基车
叶草苷酸和鸡屎藤次苷）
Diamonsil C18（250 mm×
4.6 mm，5 μm）
25 230 甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸
（3∶2∶95）
1.0
白花蛇舌草[38] 三萜类（齐墩果酸与
熊果酸）
HiQsil C18 V（150 mm×
4.6 mm，5 μm）
室温 210 甲醇-四丁基溴化铵-三乙
胺（90∶10∶0.02），冰
醋酸调 pH 6.9
0.3
白花蛇舌草注
射液[39]
酚酸类和环烯醚萜类（对
香豆酸、反式 6-O-对香豆
酰鸡屎藤苷甲酯和车叶
草苷）
Hypersil C8（150 mm×4.6
mm，5 μm）
25 310 乙腈 -水（20∶80），含
0.3%醋酸
1.0
白花蛇舌草[40] 三萜类（齐墩果酸与
熊果酸）
Symmetrye C18（150 mm×
4.6 mm，5 μm）
30 210 甲醇-水-冰醋酸
（85∶15∶0.3）
0.6
白花蛇舌草注
射液[41]
黄酮类（芦丁） Diamonsil C18（150 mm×
4.6 mm，5 μm）
室温 310 甲醇-1%冰醋酸（80∶20） 1.0
白花蛇舌草[42] 环烯醚萜类（去乙酰基车
叶草苷酸和鸡屎藤次苷）
Pinnacleu C18（250 mm×
4.6 mm，5 μm）
25 230 甲醇-乙腈-1 mol/L 冰醋
酸（3 2 95∶ ∶ ）
1.0
白花蛇舌草[43] 三萜类（齐墩果酸与
熊果酸）
Lichrospher C18（250 mm×
4.6 mm，5 μm）
30 210 甲醇-2%冰醋酸水溶液
（88 12∶ ）
1.0
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表 3 流动相不含酸
Table 3 Mobile phase without acid
药材或制剂 指标成分 色谱柱 柱温 / ℃
波长 /
nm
流动相
体积流量 /
(mL·min−1)
白花蛇舌
草[44]
蒽醌类（2-甲基-3-羟基-4-甲氧基
蒽醌和 2-甲基-3-羟基蒽醌）
Diamonsil C18（200 mm×
4.6 mm，5 μm）
室温 267 甲醇-水
（62∶38）
1.0
白花蛇舌
草[45-46]
三萜类（熊果酸） AlltechRP-C18（250 mm×
4.6 mm，5 μm）
30 210 甲醇-水
（90∶10）
1.0
白花蛇舌
草[47]
三萜类（齐墩果酸和乌索酸） Nova-Pak C18（300 mm×
3.9 mm，4 μm）
25 210 甲醇-水
（88∶12）
0.8

酸和熊果酸的量。未涂层弹性融硅石英毛细管柱 55
cm×75 μm ID，有效长度 50 cm；112 mmol/L 三乙
胺-HCl（pH 10.0），0.24 mmol/L β-环糊精为运行缓
冲液；分离电压 12.5 kV；温度 25 ℃；重力进样 10
s（高度 20 cm）。
4 其他方法
周诚等[52]利用氨基酸分析仪测定了白花蛇舌
草中氨基酸的量。测定条件：离子交换柱规格 2.6
mm×150 mm；柱温 53 ℃；泵体积流量：0.225
mL/min；泵压力 90 kg/cm2；洗脱液 I pH l、2、3、
4；分析时间 72 min。
杨香林[53]采用湿法消化、电感耦合等离子体原
子发射光谱法（ICP-OES）测定白花蛇舌草药材及
配方颗粒中镉的量。
5 结语与展望
白花蛇舌草是目前少有的收载标准均无定量测
定的临床常用中药，建立科学合理、方便可行的质控
方法对于控制药材及其制剂质量、保障临床疗效具有
重要的意义。本文全面综述了白花蛇舌草及其制剂的
定量测定方法，包括紫外分光光度法、原子吸收光谱
法、薄层扫描法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等，
这些测定方法各有侧重，各有特点，其中 HPLC 法以
其精确度高、重复性好等优点应用最多，毛细管电泳
等新方法应用较少。测定成分涉及黄酮、蒽醌、萜、
酚酸、多糖、金属元素、氨基酸等，其中以药理活性
研究较多的黄酮、环烯醚萜和三萜类成分为主。研究
者可根据研究方向、指标成分及其所具备的仪器条件
选择相适应的测定方法。
笔者认为，虽然白花蛇舌草及其制剂在成分测
定、药效机制等方面研究越来越多，且已初步证实
黄酮、多糖和环烯醚萜类成分是白花蛇舌草发挥其
药理作用的主要物质基础，相关指标也建立了定量
测定方法，但现行研究尚不系统深入。再者，尽管
目前一些指标成分的测定方法已趋于成熟，但这些
指标成分是否是真正的活性成分或者确定的物质基
础，其药效和作用机制是否真正明确，这都是需要
进一步研究的问题。而仅用一两种指标成分进行质
控还不够全面，构建多种活性成分为指标的测定方
法甚至指纹图谱对白花蛇舌草及其制剂的质量控制
十分必要。
在传统中医药理论与现代药理研究相结合的基
础上，深入开展白花蛇舌草及其制剂基于药效与物
质基础相关联的质量控制方法，明确真实的物质基
础，优选合理可行的指标成分，对于提高药材及制
剂质量、保障临床应用都具有十分重要的意义。
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