全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 2 期 2015 年 1 月

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细辛中马兜铃酸 A 与黄樟醚的炮制减毒方法研究
严建业 1，王元清 2，王 炜 1，王 智 1，彭买姣 1，朱承慧 3，席秀利 4，廖端芳 1*，罗 堃 1*
1. 湖南中医药大学药学院 中药现代化重点实验室，湖南 长沙 410208
2. 中南林业科技大学生命科学与技术学院 生物技术与工程实验室，湖南 长沙 410004
3. 暨南大学药学院，广东 广州 510632
4. 广州中医药大学中药学院，广东 广州 510006
摘 要：目的 研究细辛中马兜铃酸 A 与黄樟醚炮制减毒方法。方法 采用 HPLC 法，对细辛生品及各个炮制品中黄樟醚、
马兜铃酸 A 的量进行检测，以其量变化为评价指标比较不同炮制方法对毒性物质的去除效果。结果 黄樟醚进样量在 169.2～
846.0 μg（r＝0.999 6）有良好线性关系，平均回收率为 99.83%，RSD 为 1.67%；马兜铃酸 A 进样量在 11.6～58.0 ng 有良好
线性关系，平均回收率为 101.43%，RSD 为 1.25%。黄樟醚的炮制去除效果的大小顺序为盐制＞炒焦＞米泔水制＞碱制＞甘
草制＞醋制＞姜制＞酒制＞碱醋制＞蜜制，其中盐制与炒焦对细辛中黄樟醚的去除率达到 55%以上；马兜铃酸 A 的炮制去
除效果的大小顺序为炒焦＞碱醋制＞盐制＞碱制＞醋制＞米泔水制＞甘草制＞酒制＞蜜制＞姜制，其中炒焦对细辛中马兜铃
酸 A 的去除率达到 60%以上。结论 细辛炮制后，黄樟醚和马兜铃酸 A 的量都有不同程度的降低，其中以炒焦炮制最优。
关键词：细辛；炮制；黄樟醚；马兜铃酸 A；高效液相法；炒焦
中图分类号：R283.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)02 - 0216 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.02.012
Research on reducing safrole and aristolochic acid A in Asari Radix et Rhizoma
based on different processing techniques
YAN Jian-ye1, WANG Yuan-qing2, WANG Wei1, WANG Zhi1, PENG Mai-jiao1, ZHU Cheng-hui3, XI Xiu-li4,
LIAO Duan-fang1, LUO Kun1
1. Key Laboratory of Modernization of Chinese Materia Medica, School of Pharmacy, Hunan University of Chinese Medicine,
Changsha 410208, China
2. Laboratory of Biotechnology and Engineering, College of Life Science and Technology, Central South University of Forestry and
Technology, Changsha 410004, China
3. School of Pharmacy, Jinan University, Guangzhou 510632, China
4. School of Chinese Materia Medica, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China
Abstract: Objective To study the effect of processing techniques on reducing the contents of safrole and aristolochic acid A in Asari
Radix et Rhizoma. Methods The contents of safrole and aristolochic acid A between raw herb and processed products were
determined by HPLC, and the differences in the contents of toxic components between raw herb and processed products were used to
evaluate the detoxification efficiency. Results The linear ranges of safrole and aristolochic acid A were 169.2—846.0 μg (r = 0.999 6)
and 11.6—58.0 ng (r = 0.999 6), respectively. And the average recovery rates were 99.83% (RSD = 1.67%) and 101.43% (RSD =
1.25%). The removal rate of safrole in order was as follows: salt system > fried coke > rice water system > alkali > liquorice > vinegar >
ginger > wine > alkali-vinegar > honey and the removal rate of aristolochic acid A was in ordor as: fried coke > alkali-vinegar >


收稿日期：2014-07-04
基金项目：中药有毒物质防控技术湖南省工程实验室项目（201304）；湖南省教育厅科研项目（14C0863）；湖南省中药活性物质筛选工程技术
研究中心项目资助（湘科计字 [2013] 83 号）；湖南省高校“中药新药创制与资源综合持续利用”科技创新团队资助（湘教通 [2010]
212 号）；湖南省“中药学”重点学科资助（湘教通 [2011] 76 号）
作者简介：严建业（1975—），男，博士，副教授，从事中药药剂的教学与科研工作。Tel: (0731)88458231 E-mail: yanjianye201@126.com
*通信作者 廖端芳 Tel: (0731)88458002 E-mail: dfliao66@aliyun.com
罗 堃 Tel: (0731)88458229 E-mail: 23689818@qq.com
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salt system > alkali > vinegar > rice water system > liquorice > wine > honey > ginger. The removal rate of aristolochic acid A in Asari
Radix et Rhizoma by fried coke was over 60%. Conclusion The contents of safrole and aristolochic acid A in Asari Radix et Rhizoma
could be decreased to different extent by processing techniques. Among the processing methods, processing by fried coke is the best
method.
Key words: Asari Radix et Rhizoma; processing techniques; safrole; aristolochic acid A; HPLC; fried coke

细辛 Asari Radix et Rhizoma 为马兜铃科植物北
细 辛 Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var.
mandshuricum (Maxim.) Kitag.、汉城细辛 Asarum
sieboldii Miq. var. seoulense Nakai 或华细辛 Asarum
sieboldii Miq. 的干燥根和根茎[1]，具有祛风散寒、
祛风止痛、通窍、温肺化饮之功效。细辛化学成分
主要含有萜类（挥发油的主要成分）、植物甾醇类、
苯丙基及其苷类（如甲基丁香酚、黄樟醚等）、木脂
素类（如细辛脂素）、生物碱及酰胺类（如马兜铃内
酰胺）、有机酸类及其酯类（如马兜铃酸）等[2]。细
辛除了有显著的临床功效外，同时还有小毒，“细辛
不过钱，过钱命相连”的古训制约着细辛的临床应
用，《中国药典》2010 年版对其用量定为“1～3 g，
散剂 0.5～1 g”。据文献报道[3-5]，细辛中主要的毒
性成分马兜铃酸A与黄樟醚分别具有较强的肾毒性
与致癌作用。可见，采用合适的方法尽可能地去除
细辛中的毒性物质，提高细辛临床应用的安全性是
细辛现代研究的必然趋势与必然要求。
有关细辛减毒的炮制方法研究报道中，主要以
马兜铃酸 A 为评价指标进行炮制减毒，而同时考虑
马兜铃酸 A 与黄樟醚 2 种毒性成分的减毒炮制方法
未见报道。本实验借鉴传统中药炮制经验与文献方
法，对细辛根采用 10 种炮制方法进行炮制，以马兜
铃酸A和黄樟醚的量变化为评价指标评价不同炮制
方法的减毒效果，探究细辛炮制减毒的方法，为细
辛加工炮制和临床应用提供参考。
1 仪器与材料
Agilent1200 型高效液相色谱仪，美国安捷伦公
司；KQ5200DE 型数控超声波清洗器，昆山市超声
仪器有限公司。
细辛购于高桥药材大市场，经湖南中医药大学
药学院中药鉴定教研室龚力民副教授鉴定为马兜铃
科植物北细辛 Asarum heterotropoides Fr. Schmidt
var. mandshuricum (Maxim.) Kitag.；马兜铃酸 A 对
照品，批号 10281-201303，质量分数 98%，购于南
昌贝塔生物科技有限公司；黄樟醚对照品，批号
201403，质量分数 98%，购于四川香料厂；乙腈，
色谱纯，美国 Tedia 公司；水为重蒸水，其他试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 炮制品的制备[6-7]
2.1.1 酒制 取细辛 25 g，加入 10 g 黄酒拌匀，闷
润，待黄酒被吸尽后，干燥，备用。
2.1.2 醋制 取细辛 25 g，加入 20 g 米醋拌匀，闷
润，待米醋被吸尽后，干燥，备用。
2.1.3 蜜制 取细辛 25 g，加入 6 g 炼蜜拌匀，闷
润，待蜜汁被吸尽后，干燥，备用。
2.1.4 碱制 取细辛 25 g，加入 40 倍 0.01 mol/L
的 NaHCO3 溶液浸泡 3 次，每次 24 h，浸泡过的细
辛干燥，备用。
2.1.5 碱醋制 取细辛 25 g，加入 40 倍 0.01 mol/L
的 NaHCO3 溶液浸泡 3 次，每次 24 h，浸泡过的细
辛置烘箱中干燥至干；将 10 g 米醋稀释 2 倍后，用
醋将碱制后的细辛拌匀，闷制，润透，干燥，备用。
2.1.6 盐炙 取细辛 25 g，加入 6 g 粗盐，用适量
清水（能够完全浸泡药材）浸泡，与药物拌匀，闷
润 5 min，置炒锅内用文火炒 5 min，取出，冷却，
干燥，备用。
2.1.7 姜炙 取细辛 25 g，加入生姜汁 5 g，拌匀，
充分闷润，待姜汗完全被吸尽后，再用文火炒干，
取出，冷却，干燥，备用。
2.1.8 甘草制 取细辛 25 g，加入 25 mL 甘草汁拌
匀，闷润，待甘草汁被吸尽后，干燥，备用。
2.1.9 炒焦 取细辛 25 g，置炒锅内用中火或武火
炒，表面焦褐色，内部加深，焦香气，取出，冷却，
备用。
2.1.10 米泔水制 取细辛 25 g，加入 25 mL 米泔
水（第 2 次淘米水）拌匀，闷润，待米泔水被吸尽
后，干燥，备用。
2.2 黄樟醚定量测定
2.2.1 供试品溶液的制备 称取细辛生品及各炮制
品粉末（过 3 号筛）约 0.5 g，置于 50 mL 量瓶中，
加入甲醇超声 30 min，定容，摇匀，0.45 μm 微孔
滤膜滤过，即得供试品溶液。
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取黄樟醚对照品
42.3 mg，分别置 100 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀
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释至刻度，摇匀，再精密量取 2.0 mL 对照品溶液，
置于 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制
成含黄樟醚 84.6 μg/mL 的对照品溶液。
2.2.3 色谱条件 色谱柱为Agligent TC-C18柱（250
mm×4.6 mm，5 μm）；体积流量 1.0 mL/min；柱温
30 ℃；检测波长 285 nm；流动相为乙腈-0.2%醋酸
水溶液，梯度洗脱程序：0～15 min，30%～35%乙
腈；15～25 min，35%～42%乙腈；25～30 min，
42%～45%乙腈；30～40 min，45%～90%乙腈；40～
45 min；90%～30%乙腈。对照品及样品的色谱图见
图 1。




图 1 黄樟醚对照品 (A) 与酒制样品 (B) 的 HPLC 图
Fig. 1 HPLC of safrole reference substances (A) and
wine-processed samples (B)

2.2.4 线性关系考察 精密吸取84.6 μg/mL的黄樟
醚对照品储备溶液 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 置于
1.5 mL 的 EP 管中，加甲醇使成 1.0 mL，摇匀。分
别吸取 10 μL 注入高效液相色谱仪，测定峰面积，
以进样量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进
行线性回归，得回归方程 Y＝1.231 4 X－10.120，
r＝0.999 6，结果表明黄樟醚在 169.2～846.0 μg 有
良好的线性关系。
2.2.5 精密度考察 精密吸取同一供试品溶液（细
辛生品），注入液相色谱仪，重复进样 6 次，按“2.2.3”
项下色谱条件测定，黄樟醚峰面积的RSD为 1.69%，
表明仪器的精密度良好。
2.2.6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液（细
辛生品）10 μL，注入液相色谱仪，分别于 0、1、2、
4、8、16、24 h 检测，记录色谱图，黄樟醚峰面积
的 RSD 为 1.25%，表明供试品溶液于 24 h 内稳定。
2.2.7 重复性试验 精密称取细辛粉末（北细辛生
品）约 0.5 g，共 6 份，按照“2.2.1”制备供试品溶
液，精密吸取供试品溶液 20 μL，分别注入液相色
谱仪，记录色谱图，计算得黄樟醚质量分数的 RSD
为 1.69%，表明该方法重复性好。
2.2.8 加样回收率试验 取已测定黄樟醚量的细辛
粉末（北细辛生品）约 0.25 g，共 6 份，精密称定，
准确加入适量黄樟醚对照品，照定量测定项下操作，
测定其量，计算回收率，结果平均回收率为 99.83%，
RSD 为 1.67%。
2.2.9 生品与炮制品中黄樟醚的测定 按照“2.2.1”
项方法将生品与各炮制品制备成供试品溶液，在
“2.2.3”项色谱条件下进行测定，计算各样品中黄樟
醚的量以及各炮制品中黄樟醚去除率，结果见表 1。
可知，黄樟醚的炮制去除效果的大小顺序为盐制＞
炒焦＞米泔水制＞碱制＞甘草制＞醋制＞姜制＞酒
制＞碱醋制＞蜜制，其中盐制与炒焦对细辛中黄樟
醚的去除率达到 55%以上，可以有效减毒。

表 1 各炮制品中黄樟醚的量及其去除率比较
Table 1 Comparison on contents and removal rates of
safrole among different processed products
炮制方法 黄樟醚/(mg·g−1) 去除率/%
生品 3.72 －
盐制 1.50 59.65
炒焦 1.65 55.73
米泔水制 2.28 38.71
碱制 2.48 33.43
甘草制 2.61 29.84
醋制 2.73 26.74
姜制 3.18 14.41
酒制 3.23 13.13
碱醋制 3.42 8.10
蜜制 3.58 3.76

2.3 马兜铃酸 A 定量测定
2.3.1 供试品溶液的制备 取细辛生品及各种炮制
品粉末（过 3 号筛）约 6 g，精密称定，置于具塞锥
瓶中，加入 150 mL 甲醇（含 2%甲酸）超声 40 min，
减压抽滤，滤液蒸干，回收甲醇，残渣用甲醇溶解，
转移至 10 mL 量瓶中，定容，摇匀，0.45 μm 微孔
滤膜滤过，即得供试品溶液。
2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取马兜铃酸A对
照品 5.8 mg，置于 10 mL 的量瓶中，加入甲醇定容，
摇匀，作为储备液备用。移取 500 μL 对照品储备液，
置于 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制
成质量浓度为 29 μg/mL 的马兜铃酸 A 对照品溶液。
2.3.3 色谱条件 检测波长 316 nm；其余同“2.2.3”
项。对照品及样品的色谱图见图 2。
2.3.4 线性关系考察 分别精密吸取 29 μg/mL 的
马兜铃酸 A 对照品溶液 40、80、120、160、200 μL
置于 1.5 mL 的 EP 管中，加甲醇使成 1.0 mL，摇匀。
黄樟醚
0 10 20 30 40
t/min
A
B
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图 2 马兜铃酸A对照品 (A) 与酒制样品 (B) 的HPLC图
Fig. 2 HPLC of aristolochic acid A reference substance (A)
and wine-processed sample (B)

分别吸取 10 μL 注入高效液相色谱仪，测定峰面积，
以进样量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘
制标准曲线，得回归方程为 Y＝2.382 8 X－3.360，
r＝0.999 6，结果表明马兜铃酸 A 进样量在 11.6～
58 ng 有良好的线性关系。
2.3.5 精密度考察 精密吸取同一供试品溶液（细
辛生品），注入液相色谱仪，重复进样 6 次，按“2.3.3”
项下色谱条件测定，马兜铃酸 A 的峰面积的 RSD
为 1.19%，表明仪器的精密度良好。
2.3.6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液（细
辛生品）10 μL，注入液相色谱仪，分别于 0、1、2、
4、8、16、24 h 检测，记录色谱图，马兜铃酸 A 峰
面积的 RSD 为 1.17%，表明供试品溶液在 24 h 内
稳定。
2.3.7 重复性试验 精密称取约 6.0 g 北细辛生品
粉末共 6 份，制备供试品溶液，精密吸取供试品溶
液 20 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，计
算得马兜铃酸 A 质量分数的 RSD 为 1.29%，表明
该方法重复性好。
2.3.8 加样回收率试验 取已测定马兜铃酸A量的
细辛约 3.0 g，共 6 份，精密称定，准确加入适量对
照品，照定量测定项下操作，测定其量，计算回收
率，结果平均回收率为 101.43%，RSD 为 1.25%。
2.3.9 生品与炮制品中马兜铃酸 A 的测定 按照
“2.3.1”项下方法将生品与各炮制品制备成供试品溶
液，在“2.3.3”项色谱条件下进行测定，计算各样
品中马兜铃酸A的量以及各炮制品中马兜铃酸A去
除率，结果见表 2。可知，马兜铃酸 A 的炮制去除
效果的大小顺序为炒焦＞碱醋制＞盐制＞碱制＞醋
制＞米泔水制＞甘草制＞酒制＞蜜制＞姜制，其中
炒焦对细辛中马兜铃酸 A 的去除率达到 60%以上，
可以有效减毒。
表 2 各炮制品中马兜铃酸 A 的量及其去除率比较
Table 2 Comparison on contents and removal rates of
aristolochic acid A among different processed products
炮制方法 马兜铃酸 A/(μg·g−1) 去除率/%
生品 1.08 －
盐制 0.84 22.59
炒焦 0.39 63.00
米泔水制 0.99 7.56
碱制 0.87 19.23
甘草制 1.01 6.54
醋制 0.95 11.74
姜制 1.04 3.65
酒制 1.02 5.51
碱醋制 0.77 28.60
蜜制 1.03 4.32

3 讨论
文献报道[8]马兜铃酸 A 的 UV 检测波长有 250、
223、390 nm 等。本课题组对细辛生品及炮制品测
定时，发现 250 nm 的吸收峰较大，但同时基线噪
音大、干扰大。而有文献报道[9]马兜铃酸A在 316 nm
处具有稳定、吸收强等特点，本实验选择 316 nm
时，马兜铃酸 A 附近的干扰较少，吸收较好，因而
选择 316 nm 为马兜铃酸 A 检测波长。
马兜铃酸A的分析常用乙腈或甲醇与含少量酸
的水作为流动相，乙腈的分离效果优于甲醇，在实
验中，比较了乙腈-0.2%醋酸水溶液、乙腈-0.5%醋
酸水溶液、乙腈-1%醋酸水溶液的分离效果，其中
乙腈-0.2%醋酸水溶液分离效果较好。因此，选用乙
腈-0.2%醋酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱，并在
本实验的色谱条件下，可将马兜铃酸 A 与黄樟醚很
好地分离。由于马兜铃酸 A 的量很低，与黄樟醚的
样品处理方法不同，因而没有在同一色谱条件下同
时测定，而是采用分别测定的方法。
测定马兜铃酸 A 的样品处理中，溶剂考察了甲
醇与含 2%甲酸的甲醇，甲醇-2%甲酸溶液的提取效
果较好，所含的马兜铃酸 A 的量较高，与文献报道
一致。样品处理方面，由于样品中马兜铃酸 A 的量
非常低，低于限量标准，参照《中国药典》2010 年
版方法测定时马兜铃酸 A 的量达不到定量限，而采
用本实验的样品处理方法处理样品可以较好地测定
马兜铃酸 A 的量，且方法学考察合格。
本实验首次探讨10种炮制方法对细辛中2种毒
性成分影响，发现 10 种炮制方法均能降低细辛中毒
0 10 20 30 40
t/min
马兜铃酸 A A
B
马兜铃
酸 A
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性成分马兜铃酸 A 和黄樟醚的量，其中炒焦的炮制
方法明显优于其他炮制方法。马兜铃酸 A 的量由
1.08 μg/g（生品）降到 0.39 μg/g（炒焦品），去除率
达到 63%；黄樟醚的量由 3.72 mg/g（生品）降到
1.65 mg/g（炒焦品），去除率达到 56%。黄樟醚为
较强的挥发性成分，在炒制过程中容易挥发散失而
达到减毒的目的；而有关马兜铃酸 A 炒焦减毒的机
制有待进一步研究。另外，课题组对马兜铃酸 B 的
减毒效果也做了一定的研究，发现生品中马兜铃酸
B 的量很低，经炒焦炮制后未见到马兜铃酸 B 的色
谱峰，表明炒焦炮制对毒性成分马兜铃酸 B 也有去
除作用。由于炮制品中马兜铃酸 B 痕量而难达到检
测限与定量限，所以未对其进行定量研究。有文献
报道[10]炒焦能较好地保留有效成分甲基丁香酚和
细辛脂素，可见，细辛采用炒焦炮制既可以去除毒
性成分又能较好地保留有效成分，达到很好地减毒
存效的效果。这为《本草纲目拾遗》中“去叶节炒
焦”“北细辛烘干”和《圣济总录》中“去苗叶炒”
的传统理论提供了炮制减毒的现代科学依据。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[2] 杨春澍, 孙建宁, 黄建梅. 细辛属和八角属中药研究与
应用 [M]. 北京: 人民卫生出版社, 2006.
[3] Zeng Y, Yang X, Wang J, et al. Aristolochic acid I
induced autophagy extenuates cell apoptosis via ERK 1/2
pathway in renal tubular epithelial cells [J]. PLoS One,
2012, 7(1): e30312.
[4] Jin M, Kijima A, Suzuki Y, et al. Comprehensive toxicity
study of safrole using a medium-term animal model with
gpt delta rats [J]. Toxicology, 2011, 290(2/3): 312-321.
[5] 王潇晗, 张连学, 郜玉钢, 等. 含马兜铃酸中药减毒的
研究进展 [J]. 中草药, 2013, 44(22): 3241-3244.
[6] 刘雅婧. 细辛中马兜铃酸的炮制脱毒研究 [D]. 长春:
吉林农业大学, 2008.
[7] 张春红, 曹 蕊, 李虔全, 等. 不同炮制方法对关木通
减毒存效作用的比较 [J]. 中国实验方剂学杂志, 2012,
18(10): 149-151.
[8] 袁金斌. 马兜铃酸类物质的液相色谱联用技术及应用
[D]. 长沙: 湖南大学, 2008.
[9] Guo L, Yue H, Cai Z. A novel pre-column fluorescent
derivatization method for the sensitive determination of
aristolochic acids in medicinal herbs by high-performance
liquid chromatography with fluorescence detection [J]. J
Pharm Biomed Anal, 2010, 53(1): 37-42.
[10] 黄 鲛, 易进海, 刘玉红, 等. 炒制对细辛中黄樟醚、
甲基丁香酚和细辛脂素含量的影响 [J]. 中国实验方剂
学杂志, 2013, 19(19): 2709-2711.