全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 20 期 2015 年 10 月

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杭麦冬与川麦冬中高异黄酮类成分和抗氧化活性的比较
童菊华 1, 2，庞小存 2，王 威 2，王延杰 1，李先恩 2*，秦民坚 1*
1. 中国药科大学中药学院，江苏 南京 210009
2. 中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所，北京 100193
摘 要：目的 比较川麦冬与杭麦冬中 3 种高异黄酮类活性成分的质量分数差异及麦冬水提物的抗氧化能力的差异。方法 采
用超高效液相色谱与二极管阵列检测器技术，测定 3 种高异黄酮类活性成分。色谱柱为 ACQUITYTM UPLC BEH C18色谱柱（100
mm×2.1 mm，1.7 μm），流动相为乙腈-0.2%甲酸水（55∶45），体积流量 0.2 mL/min，检测波长 296 nm。采用紫外分光光度法测
定麦冬水提物清除 DPPH 自由基的活性。结果 川麦冬中甲基麦冬高异黄酮 A、甲基麦冬黄烷酮 A 与甲基麦冬黄烷酮 B 的平均质
量分数分别为（3.06±0.54）、（40.10±5.63）、（29.51±5.06）μg/g；杭麦冬中 3 种成分平均质量分数分别为（9.22±3.52）、
（106.63±27.56）、（256.97±61.79）μg/g。川麦冬水提物清除自由基的 IC50平均值为 16.59 mg/mL，杭麦冬的 IC50平均值为 14.48
mg/mL，阳性对照 VC 的 IC50值为 7.06 μg/mL。结论 与川麦冬比较，杭麦冬中高异黄酮类成分的量较高，其水提取物对 DPPH
自由基的清除作用也较强，说明杭麦冬具有较强的抗氧化活性，为麦冬的质量评价及其道地性研究提供依据。
关键词：麦冬；超高效液相色谱；高异黄酮；抗氧化；甲基麦冬高异黄酮 A；甲基麦冬黄烷酮 B；甲基麦冬黄烷酮 A
中图分类号：R286.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)20 - 3091 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.20.022
Comparison on homoisoflavones extracted from Ophiopogon japonicus in
Sichuan and Zhejiang and their anti-oxidative activity
TONG Ju-hua1, 2, PANG Xiao-cun2, WANG Wei2, WANG Yan-jie1, LI Xian-en2, QIN Min-jian1
1. College of Traditional Chinese Medicine, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China
2. Key Laboratory of Bioactive Substances and Resources Utilization of Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education, Institute
of Medical Plants and Peking Union Medical College, Beijing 100193, China
Abstract: Objective To compare the contents of three homoisoflavones and their anti-oxidative activity of Ophiopogon japonicus in
Sichuan (OJS) and Zhejiang (OJZ). Methods The determination was performed on ACQUITYTM UPLC BEH C18 column (100 mm ×
2.1 mm, 1.7 μm), the Ultra Performance Liquid Chromatography-Photo-Diode Array (UPLC-PDA) technology was applied, and the
mobile phase consisted of acetonitrile and 0.2% formic acid aqueous solution (55 : 45) with gradient elution program, flow rate was
0.20 mL/min with 2 μL of sample quantity at 296 nm, and the anti-DPPH radical efficiency of water extract from Ophiopogonis Radix
were evaluated by UV-photometer. Results The average values of methylophiopogonone A, methylophiopogonanone A, and
methylophiopogonanone B were (3.06 ± 0.54), (40.10 ± 5.63), and (29.51 ± 5.06) μg/g in OJS, respectively; while those in OJZ were
(9.22 ± 3.52), (106.63 ± 27.56), and (256.97 ± 61.79) μg/g, separately. The IC50 value was 16.59 mg/mL in OJS, while that in OJZ was
14.48 mg/mL. The IC50 value of positive control VC was 7.06 μg/mL. Conclution Compared with OJS, the contents of
homoisoflavones in OJZ are higher, and the anti-radical efficiency of water extract from OJZ is stronger. It provides the basis for the
quality evaluation and geo-authentic research of Ophiopogonis Radix.
Key words: Ophiopogon japonicus (Linn. f.) Ker-Gawl.; UPLC; homoisoflavone; anti-oxidantion; methylophiopogonone A;
methylophiopogonanone B; methylophiopogonanone A

麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬 Ophiopogon
japonicus (Linn. f.) Ker-Gawl. 的干燥块根，具有多
种功效，主要功效为养阴润肺、益胃生津、清心除
烦[1]，其化学成分主要有皂苷、高异黄酮类、多糖、

收稿日期：2015-04-07
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81130069）
作者简介：童菊华，硕士研究生。Tel: 13651375405 E-mail: sweetygirltong@163.com
*通信作者 秦民坚，教授，博士生导师，主要从事药用植物资源与质量、中药资源与新药开发等研究。
Tel: (025)85391290 E-mail: minjianqin@163.com
李先恩，博士，研究员。主要从事药用植物生理学方向研究。Tel: (010)2810019 E-mail: xeli@implad.ac.cn
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氨基酸等[2-4]，其中高异黄酮类为其主要的活性成
分，甲基麦冬高异黄酮 A、甲基麦冬黄烷酮 A、
甲基麦冬黄烷酮 B 的量在麦冬黄酮类成分中较
高。麦冬的主流商品主要产自于浙江和四川，分
别称为杭麦冬和川麦冬[5]。国内外很多相关文献
报道对麦冬高异黄酮类化学成分进行测定[6-8]，而
本研究主要利用 UPLC-PDA 测定杭麦冬和川麦冬
中 3 种高异黄酮类成分的量，比较杭麦冬和川麦
冬 3 种活性成分的量差异；近年来，对麦冬黄酮
类成分的抗氧化研究也有报道[9-10]，同时麦冬水
提物中也含有黄酮、多糖等活性成分，具有抗氧
化、抗衰老等作用[11]，通过比较其抗氧化能力的
差异性，从体外药效学角度评价 2 个产地药材的
质量差异，为麦冬药材的质量控制及道地性研究
提供依据。
1 材料与仪器
1.1 材料
麦冬样品分别采自四川、浙江麦冬种植地，经
中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所李
先恩研究员鉴定为百合科沿阶草属植物麦冬
Ophiopogon japonicus (Linn. f.) Ker-Gawl. 的干燥
块根。麦冬挖出后，取下块根，洗净，烘干。干燥
后粉碎，过 60 目筛，待用，样品的来源见表 1。
表 1 麦冬样品来源
Table 1 Resource of Ophiopogonis Radix
编号 产地 采收年份
OJS-1 四川三台县花园镇宝林村 2013
OJS-2 四川三台县花园镇法源寺村 2013
OJS-3 四川三台县三九雅安 2013
OJS-4 四川三台县老马乡小围村 2013
OJS-5 四川三台县老马乡小围村 2014
OJS-6 四川三台县三九雅安（施用多效唑） 2014
OJS-7 四川三台县三九雅安（无多效唑） 2014
OJZ-1 浙江慈溪逍林农垦场 2013
OJZ-2 浙江慈溪 3 年生绿叶型 2013
OJZ-3 浙江慈溪 3 年生黄叶型 2013
OJZ-4 浙江慈溪 2 年生绿叶型 2013
OJZ-5 浙江慈溪 2 年生黄叶型 2013
OJZ-6 浙江慈溪逍林农垦场 2014
OJZ-7 浙江正大青春宝药业公司 2014
1.2 仪器与试剂
美国 Waters Acquity 超高效液相色谱仪，PDA
检测器；百万分之一天平（Mettled Toledo）；NV752N
紫外可见分光光度计（上海佑科仪器仪表有限公
司），KQ-5200DV 型数控超声波清洗器（昆山市超
声仪器有限公司）。
色谱乙腈（美国 Fisher 公司），实验用水为娃
哈哈纯净水，甲酸（色谱级，美国 Fisher 公司）；
其余试剂均为分析纯（北京化学工业公司）。对照
品：甲基麦冬高异黄酮 A（质量分数≥98%）、甲
基麦冬黄烷酮 A（质量分数≥98%），购自上海永
恒生物科技有限公司；甲基麦冬黄烷酮 B（质量分
数≥98%），购自上海一林生物科技有限公司；1,1-
二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH，质量分数≥98.0%
批号 KD1212YC13，上海源叶生物科技有限公司）；
维生素 C（VC，批号 20131210，上海源叶生物科
技有限公司）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 ACQUITYTM UPLC BEH C18柱（100
mm×2.1 mm，1.7 μm，Waters Corp.，Milford，美国）；
流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液，以 55∶45 等度洗脱
12 min，柱温 30 ℃，体积流量 0.2 mL/min，检测波
长 296 nm，进样量 2 μL。
2.2 对照品溶液的制备
分别取对照品甲基麦冬高异黄酮 A、甲基麦冬
黄烷酮 A、甲基麦冬黄烷酮 B，精密称定，加甲醇
溶解，分别制成含甲基麦冬高异黄酮 A 0.054
mg/mL、甲基麦冬黄烷酮 A 0.97 mg/mL、甲基麦冬
黄烷酮 B 1.33 mg/mL 的混合对照品溶液。
2.3 DPPH 溶液的配制
准确称取 25 mg 的 DPPH 无水乙醇定容至 100
mL 量瓶中，配成 250 μg/mL 的母液，储存于 4 ℃
低温冰箱，从母液中取 20 mL 于 100 mL 量瓶中，
DPPH 质量浓度为 50 μg/mL。
2.4 阳性对照的配制
准确称取 24.5 mg 的 VC，用新煮沸冷却后的蒸
馏水定容至 25 mL，即得到 980 mg/mL 的 VC 母液，
待测时再稀释至所需的质量浓度。
2.5 供试品溶液的制备
精确称取麦冬粉末 1.000 0 g，用 50 mL 甲醇超
声提取 30 min，滤过，减压蒸干，加甲醇溶解，定
容至 5 mL 的量瓶中，即得供试品溶液。
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2.6 标准曲线的绘制
分别精密吸取上述对照品溶液适量，按不同比例
稀释，配制成含甲基麦冬高异黄酮 A 0.5、1.6、2.7、
3.8、4.9、5.9 μg/mL 对照品溶液；含甲基麦冬黄烷酮
A 4.9、9.7、14.6、19.4、24.3、29.1 μg/mL 对照品溶
液；含甲基麦冬黄烷酮 B 5.3、10.6、16.0、21.3、26.6、
31.9 μg/mL 对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，
记录色谱图及峰面积。以各对照品的质量浓度对数为横
坐标，峰面积对数为纵坐标绘制标准曲线，得甲基麦冬
高异黄酮A 的回归方程 Y＝1.075 3 X＋4.060 8，R2＝
0.998 3，在 0.24～7.1 μg/mL 内线性关系良好；甲基
麦冬黄烷酮 A 的回归方程 Y＝0.995 9 X＋4.542 2，
R2＝0.997 7， 在 2.1～43.6 μg/mL 内线性关系良好；甲
基麦冬黄烷酮B 的回归方程 Y＝1.284 6 X＋4.073 2，
R2＝0.999 2，在 2.5～47.8 μg/mL 内线性关系良好。
2.7 方法学考察
2.7.1 精密度试验 精密吸取供试品溶液，按“2.1”
项下色谱条件测定，连续进样 6 次，每次进样量 2
μL。测得甲基麦冬高异黄酮 A、甲基麦冬黄烷酮 A、
甲基麦冬黄烷酮B峰面积的RSD为 1.28%、1.67%、
1.72%，表明仪器精密度良好。
2.7.2 重复性试验 取同一批样品，按“2.5”项制
备方法平行制备 6 份供试品溶液，进样 2 μL，测定
计算各成分的量。甲基麦冬高异黄酮 A、甲基麦冬
黄烷酮 A、甲基麦冬黄烷酮 B 质量分数的 RSD 依
次为 0.13%、1.91%、1.09%，RSD 均小于 2%。
2.7.3 稳定性试验 取同一份供试品溶液在 0、2、4、
8、12、24 h 进样，在“2.1”项下色谱条件测定。测得
甲基麦冬高异黄酮 A、甲基麦冬黄烷酮 A、甲基麦冬
黄烷酮B 峰面积的RSD 依次为 0.16%、1.75%、1.79%。
2.7.4 加样回收率试验 称取 6 份已测定的麦冬药
材，每份约 1 g，精密称定，分别加入 3 种对照品溶
液适量，按“2.5”项方法制备供试品溶液，在“2.1”
项下色谱条件测定，计算回收率，结果甲基麦冬高异
黄酮 A、甲基麦冬黄烷酮 A、甲基麦冬黄烷酮 B 的平
均回收率分别为 100.85%、101.54%、96.59%。
2.8 样品的测定
取不同产地的麦冬样品，按照“2.5”项方法制
备供试品溶液，按“2.1”项的色谱条件，采用外标
法计算，色谱图见图 1，测定结果见表 2。杭麦冬高
异黄酮的量均高于川麦冬，具有显著性差异；同一
产地的麦冬 2014 年的量均比 2013 年的量高，同一
产地不同时间采收的麦冬高异黄酮的量无明显差






A-对照品溶液 B-川麦冬样品 C-杭麦冬样品
1-甲基麦冬高异黄酮 A 2-甲基麦冬黄烷酮 A 3-甲基麦冬黄烷酮 B
A-reference substance B-sample of OJS C-sample of OJZ
1-methylophiopogonone A 2-methylophiopogonanone A
3-methylophiopogonanone B
图 1 麦冬样品的 UPLC 色谱图
Fig. 1 UPLC of O. japonicus samples
异。其中 OJS-6 中高异黄酮量低于 OJS-7，说明施
用膨大剂会影响麦冬有效成分的量。
2.9 DPPH 法测定麦冬水提物清除自由基能力
2.9.1 麦冬水提物的配制 取不同产地的麦冬干
燥块根。粉碎过筛，第 1 次加入 12 倍量水浸泡
30 min，超声提取 40 min，15 000 r/min 离心 10
min，取上清液，第 2 次加入 10 倍量水超声提取
30 min，离心，取上清液，合并 2 次上清液，减
压浓缩至干，加水定容至 10 mL 量瓶中，制得麦
冬水提物供试品溶液的质量浓度为 0.1 g/mL，再
从母液中分别吸取 1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 mL
于 10 mL 量瓶中，制成不同质量浓度的麦冬水提
物溶液。
2.9.2 麦冬水提物清除 DPPH 自由基 IC50 值的测定
取 2 mL 不同质量浓度的麦冬水提物溶液，加入 2
mL DPPH 溶液，涡旋混合后，在室温下避光反应
30 min，517 nm 处测其吸光度（A）值，以 A0 表示
空白对照吸光度，按公式计算各麦冬水提物对
DPPH 自由基的清除率（IR）。采用 SPSS 19.0 软件
计算，根据清除率曲线求得 IC50 值，结果见表 2。
A
B
C
1
2
3
1
2
3
3
2
1
2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0
t/min
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表 2 川麦冬与杭麦冬中 3 种高异黄酮的定量测定结果及麦冬水提物清除 DPPH 自由基的 IC50值
Table 2 Determination of three homoisoflavones and scavenging effects for DPPH (IC50) of water extract from OJS and OJZ
编号 甲基麦冬高异黄酮 A/(μg.g−1) 甲基麦冬黄烷酮 A/(μg·g−1) 甲基麦冬黄烷酮 B/(μg·g−1) IC50/(mg·mL−1)
OJS-1 2.65±0.08 32.38±0.04 29.30±0.10 15.00
OJS-2 3.09±0.35 40.27±6.22 23.83±4.33 16.40
OJS-3 3.98±0.01 43.56±0.37 38.03±0.46 17.50
OJS-4 3.09±0.19 47.22±1.03 32.49±1.11 16.15
OJS-5 2.96±0.17 56.22±1.43 30.16±0.25 13.40
OJS-6 2.29±0.06 35.59±0.40 23.23±0.56 18.28
OJS-7 3.38±0.06 36.18±0.46 29.53±0.32 19.40
OJZ-1 8.79±0.15 78.62±0.04 212.38±2.29 13.05
OJZ-2 9.01±0.77 94.30±3.27 223.43±2.64 13.61
OJZ-3 9.92±0.08 102.48±1.14 262.08±5.41 13.83
OJZ-4 4.87±0.71 97.53±3.51 285.78±3.19 15.92
OJZ-5 9.96±0.47 83.79±1.27 251.74±2.96 13.43
OJZ-6 15.88±0.35 151.06±0.17 375.82±0.67 16.79
OJZ-7 6.11±0.18 138.63±2.31 187.79±1.75 14.70

IR＝1－(A1－A2)/A0
A0为 2 mL DPPH＋2 mL 无水乙醇的吸光度，A1为 2 mL 样
品＋2 mL DPPH 的吸光度，A2为 2 mL 样品＋2 mL 无水乙
醇的吸光度
2.9.3 测定结果
从表 2 中可知川麦冬水提物 IC50 平均值（16.59
μg/mL）高于杭麦冬水提物的 IC50 平均值（14.48
μg/mL），阳性对照 VC 的 IC50 值为 7.06 μg/mL。结
果表明浙江地区表现出较强的抗氧化活性，同一产
地的抗氧化活性也有差异但不显著。
3 讨论
麦冬种质资源丰富，作用范围广，是重要的药
用资源植物。四川和浙江为主要麦冬产区，种植历
史悠久，川麦冬的生长周期短，仅栽培 1 年后便可
收获，而且产量大，杭麦冬的生长周期长，需种植
2 到 3 年收获，在浙江道地药材中列为“浙八味”
之一[12]，由于杭麦冬的生长周期长，如今杭麦冬的
种植逐渐减少，生产量逐渐下降[13]。
本实验从麦冬高异黄酮量的角度比较杭麦冬与
川麦冬的质量差异性，采用 HPLC 法测定麦冬高异
黄酮量的研究已有文献报道[14-15]，而本实验比较了
UPLC-PDA 与普通的液相色谱法，结果显示，超高效
液相色谱法的分离效果好，分析时间短，灵敏度高，
节约溶剂，与液质联用技术相比成本低，适合样品的
定量测定。采用 DPPH 法测定麦冬水提物清除自由基
的作用，麦冬的水提取物以水为溶媒，更为环保，无
害；传统中药主要以水煎液入药，并且水提物中含有
多糖、黄酮等成分，具有一定的抗氧化作用。但本研
究对杭麦冬及川麦冬质量评价的研究存在着局限性，
单从一类成分的量及体外的药效上不足以全面地评
价中药材的产地差异性，应综合药效学，分子遗传性，
显微、性状鉴定等多方面，多角度去评价，为进一步
对麦冬质量评价的研究提供参考依据。
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