全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 12期 2016年 6月

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基于 HPLC-Q-TOF-MS技术的柴胡化学成分分析
郭敏娜 1, 3，刘素香 2，赵艳敏 1, 3，张铁军 2，刘岱琳 3*
1. 天津中医药大学，天津 300193
2. 天津药物研究院，天津 300193
3. 中国人民武装警察部队后勤学院，天津 300309
摘 要：目的 利用 HPLC-Q-TOF-MS 方法研究柴胡中的化学成分。方法 采用 Agilent 1200 HPLC Diamonsil II C18 色谱柱
（250 mm×4.6 mm，5 μm），以 0.05%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量为 1.0 mL/min，柱温 35 ℃，
以 200～600 nm 全扫描方式进行检测，利用正、负离子质谱信息和元素分析，结合对照品对比质谱数据，并与相关文献数据
对照，分析柴胡的主要化学成分。结果 从柴胡中检测出 24 个峰，分析其质谱裂解规律，并参考文献结合对照品对照，共
鉴定了 21 个化合物，包括 3 个酚酸类化合物，4 个黄酮类化合物，14 个三萜皂苷类化合物。其中 4 个化合物：异绿原酸 A
（5）、异绿原酸 B（6）、7,3′-二甲氧基槲皮素（8）、5-羟基-7-乙酰氧基黄酮（24）为首次从柴胡中报道。结论 HPLC-Q-TOF-MS
方法可用于快速分析柴胡中化学成分组成，为建立快速、准确的质量评价方法以及柴胡药材的应用开发提供了参考。
关键词：柴胡；液质联用；柴胡皂苷；黄酮；异绿原酸 A；7,3′-二甲氧基槲皮素
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)12 - 2044 - 09
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.12.005
Analysis on chemical constituents in Bupleuri Radix by HPLC-Q-TOF-MS
GUO Min-na1, 3, LIU Su-xiang2, ZHAO Yan-min1, 3, ZHANG Tie-jun2, LIU Dai-lin3
1. Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
2. Tianjin Pharmaceutical Research Institute, Tianjin 300193, China
3. College of Logistics, University of People’s Armed Police Force, Tianjin 300309, China
Abstract: Objective To investigate the chemical constituents in extract of Bupleuri Radix using HPLC-Q-TOF-MS. Methods The
HPLC separation achieved on Agilent 1200 HPLC Diamonsil II C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) was used with a mobile phase of
0.05% H2O-formic acid (A) and acetonitrile (B), the flow rate was 1.0 mL / min, the column temperature was 35 ℃, and the detection
wavelength was 200−600 nm. Positive and negative ions MS information and element analysis, via comparing MS data with those of
the standard compounds and coupled with the related literature were used to analyze the main chemical constituents of BupleuriRadix.
Results Twenty-one chemical constituents were identified, including three phenolic acid, four flavonoids, and fourteen triterpenoid
saponins, and isochlorogenic acid A (5), isochlorogenic acid B (6), 7,3′-di-O-methylquercetin (8), and 5-hydroxy-7-acetoxyflavone
(24) were separated from Bupleuri Radix for the first time. Conclusion It is used to quickly analyze the chemical constituents from
Bupleuri Radix by establishing a rapid accurate evaluation method using HPLC-Q-TOF-MS, which could provide the references for the
application development.
Key words: Bupleuri Radix; LC-MS technique; Bupleurum saponins; flavonoids; isochlorogenic acid A; 7,3′-di-O-methylquercetin

柴胡 Bupleuri Radix 为我国常用中药材，始载于
《神农本草经》，列为上品，其性味苦凉、微寒，具
有解表和里、疏肝解郁、升举阳气之功效[1]。《中国
药典》2015 年版收录伞形科（Umbelliferae）植物柴
胡（又称北柴胡）Bulpeurum chinese DC. 和狭叶柴胡
（又称南柴胡）Bulpeurum scorzonerifolium Willd. 为正
品柴胡入药。柴胡在我国应用已有 2 000 多年的历
史，为中医治疗少阳证的首选要药。
现代研究明，柴胡主要含有挥发油、皂苷、有
机酸、黄酮及甾醇类[2-6]，其中柴胡皂苷为柴胡的主

收稿日期：2016-02-18
作者简介：郭敏娜（1990—），女，硕士，研究方向为天然产物活性成分研究。Tel: 18234038240 E-mail: 18234032840@163.com
*通信作者 刘岱琳，女，教授，研究方向为天然产物活性成分研究。Tel: 13821660597 E-mail: dailinlch@163.com
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要有效成分[7-8]。孙健等[9]利用 LC-MS 分析了柴胡
中的 22 种皂苷类成分。蔡华等[10]利用 UPLC-MS
的方法建立了柴胡的指纹图谱体系。目前，很多学
者也利用液质联用技术测定柴胡中皂苷的成分，进
行质量控制研究[11-13]。柴胡中除了皂苷类成分，还
有黄酮和酚酸类等多种成分。本实验优化色谱条件，
采用 HPLC-Q-TOF-MS 技术对柴胡 70%甲醇提取物
的化学成分进行鉴别和测定，共检测出 24 个色谱
峰，并根据质谱裂解规律及对照品对照，鉴定了 21
个化合物，包括黄酮类、酚酸类、三萜皂苷类，其
中异绿原酸 A（isochlorogenic acid A，5）、异绿原
酸 B（isochlorogenic acid B，6）、7,3′-二甲氧基槲
皮素（7,3′-di-O-methylquercetin，8）和 5-羟基-7-乙酰
氧基黄酮（5-hydroxy-7-acetoxyflavone，24）为该植物
中首次发现。
1 仪器与试剂
1200 HPLC-TOF/MS（Bruker Daltonics），1200
HPLC（Agilent technology），Milli-Q 超纯水系统（法
国 Millipore 公司）。
甲醇和乙腈（色谱纯，美国 Merck 公司），对
照品绿原酸（批号 110753-201314）、柴胡皂苷 A（批
号 110777-201309 ） 和 柴 胡 皂 苷 D （ 批 号
110778-201208）购自南京泽朗医药科技有限公司，
质量分数均大于 98% ；对照品芦丁（批号
KMST-L020）、柴胡皂苷 B2（批号 KMST-C015）、
异绿原酸 A（批号 KMST-Y051）和异绿原酸 B（批
号 KMST-Y052）购自天津市科曼思特医药科技发展
有限公司，质量分数大于 98%。
柴胡药材购于安国药材市场，由天津药物研究
院张铁军研究员鉴定为北柴胡 Bulpeurum chinese
DC. 的干燥根。
2 实验方法
2.1 对照品溶液配制
精密称取绿原酸、异绿原酸 A、异绿原酸 B、
柴胡皂苷 A、柴胡皂苷 B2、柴胡皂苷 D、芦丁对照
品各 2.00 mg，分别置于 10 mL 量瓶中，加入适量
50%甲醇溶解，并以 50%甲醇定容，得到质量浓度
为 200 μg/mL 对照品贮备液。进样前将对照品贮备
液用 50%甲醇稀释 10倍，经 0.22 μm微孔滤膜滤过，
取续滤液备用。
2.2 供试品溶液配制
取柴胡粉末 1 g，加入 70%甲醇 20 mL 置圆底
烧瓶中，称定质量，回流提取 30 min，放至冷却，
称定质量，再用 70%甲醇补足减失质量，摇匀。滤
过得滤液，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，备用。
2.3 色谱-质谱条件
2.3.1 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil II C18柱（250
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为 0.05%甲酸水溶液
（A）-乙腈（B），梯度洗脱：0～10 min，15% B；
10～15 min，20% B；15～40 min，25% B；40～70
min，35% B；70～90 min，60% B；90 min，80% B；
体积流量为 1.0 mL/min；柱温 35 ℃；200～600 nm
全波长扫描；进样量 5 μL。
2.3.2 质谱条件 流动相采用分流方式，分流比设
为 1∶4。TOF-MS 实验条件：ESI 离子源，正负离
子分别进行全扫描，扫描质量范围 m/z 50～1 200；
干燥气体积流量 6 L/min，干燥气温度 180 ℃，雾
化气压 80 kPa。毛细管电压：正离子模式 4.5 kV、
负离子模式 2.6 kV，碎裂电压 200 V。选择甲酸钠
溶液为内标校正。
3 实验结果
3.1 柴胡中化学成分分析
采用 HPLC-Q-TOF-MS 正负离子模式分析柴
胡药材 70%甲醇提取物的 (+) ESI-MS、(−) ESI-MS
的质谱总离子流图（TIC）如图 1 所示，通过
HPLC-Q-TOF-MS技术检测得到24个离子流峰的保
留时间和质谱数据信息。通过分析每个离子流峰的
质谱裂解规律，并参考相关文献、结合对照品进行
对照，共识别出 21 个化合物。其中包括 3 个酚酸类
成分、4 个黄酮类成分和 14 个三萜皂苷类成分，结
果见表 1。
3.2 化合物的质谱裂解规律分析
3.2.1 酚酸类化合物的分析鉴定 柴胡中的酚酸类
化合物主要为绿原酸类成分。通过分析化合物在正
离子质谱中的 [M＋Na]+、[M＋H]+，在负离子质谱
中相应的 [M－H]−，比对后确定该化合物的相对分
子质量。同时根据获得碎片峰的裂解规律鉴定出化
合物的结构（图 2）。绿原酸类化合物在质谱解析中
表现出了相似的裂解规律，如丢失奎宁酰基（m/z
192），H2O（m/z 18），咖啡酰基（m/z 162），这类
化合物都存在很多相似的裂解碎片峰，如 m/z
355.104 2、163.033 5 等[14]。
5 号峰和 6 号峰通过分析正离子 m/z 539 [M＋
Na]+、m/z 517 [M＋H]+ 和负离子 m/z 515 [M－H]−
确定这 2 个化合物的相对分子质量均为 516，且具
有相类似的裂解规律，说明二者可能为同分异构体
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图 1 柴胡的 HPLC-Q-TOF-MS正离子模式 (A) 和负离子模式 (B) 总离子流图
Fig. 1 Total ion chromatograms of HPLC-Q-TOF-MS by positive mode (A) and negative mode (B) for Bupleuri Radix
表 1 柴胡中黄酮、酚酸、三萜皂苷成分的质谱数据及鉴定结果
Table 1 Flavonoids, phenolic acid, and triterpenoid saponins identified in extracts from roots of B. chinense
峰号 tR/min 碎片离子 (m/z) [M－H]− (m/z) 相对分子质量 化合物
1 9.0 377.095 8 [M＋Na]+, 163.033 7 [M＋H－quinine
acyl]+
353.091 0 354.095 1 绿原酸
2 10.1 487.214 0 [M＋Na]+ 463.218 7 464.007 9 未知
3 17.7 633.160 7 [M＋H]+, 465.087 2 [M＋H－Rhamnose]+,
303 [M＋H－Rhamnose－Glucose]+
609.151 3 610.153 4 芦丁
4 20.4 647.164 9 [M＋H]+, 479 [M＋H－Rhamnose]+,
317.054 2 [M＋H－Rhamnose－Glucose]+
623.161 7 624.169 0 水仙苷
5 23.0 539.124 4 [M＋Na]+, 517.121 3 [M＋H]+, 499.109 9
[M＋H－H2O]+, 355.101 9 [M＋H－caffeic acyl]+
515.123 3 516.126 8 异绿原酸 A
6 24.6 539.124 3 [M＋Na]+, 517.129 5 [M＋H]+, 499.110 7
[M＋H－H2O]+, 355.078 5 [M＋H－caffeic acyl]+
515.125 0 516.126 8 异绿原酸 B
7 43.9 909.494 6 [M＋H]+, 891.479 2 [M＋H－H2O]+, 745.426 6
[M ＋ H － Rhamnose]+, 583.337 1 [M ＋ H －
Rhamnose － Glucose]+, 421.332 9 [M ＋ H －
Rhamnose－Glucose×2]+
907.461 8 908.007 9 未知
8 45.7 353.077 5 [M＋Na]+, 295.213 9 [M＋H－H2O×2]+,
231.195 0 [M＋H－H2O×2－64]+
329.069 8 330.074 0 7,3′-二甲氧基槲皮素
9 46.5 911.512 3 [M＋H]+, 749.460 8 [M＋H－Glucose]+,
587.405 4 [M＋H－Glucose×2]+, 441.355 8
[M＋H－Glucose×2－fucose]+
909.514 2 910.529 0 28-羟基齐墩果-11,13-
二烯-3β-D-吡喃葡
萄糖基-(1→2)-β-D-
吡喃葡萄糖基-(1→
3)-β-D-呋喃糖苷
10 49.1 913.513 6 [M＋H]+, 781.452 0 [M＋H－Xylcose]+,
619.399 9 [M＋H－Xylose－Glucose]+, 473.343 2
[M＋H－Xylose－Glucose－fucose]+
911.506 2 912.508 3 chikusaikoside I

1
1
2
2
3
3
4
4
5
5
6
6
7
7
8
8
9
9
10
10
11
11
12
12
13
13
14
14
15
15
16
16
17
17
18
18
19
19
20
20
21
21
22
22
23
23
24
24
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 t/min
A
B
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续表 1
峰号 tR/min 碎片离子 (m/z) [M－H]− (m/z) 相对分子质量 化合物
11 51.9 781.463 9 [M＋H]+, 763.440 2 [M＋H－H2O]+,
745.431 7 [M＋H－H2O×2]+, 619.401 5 [M＋H－
Glucose]+, 473.346 8 [M＋H－Glucose－fucose]+
779.464 2 780.466 0 柴胡皂苷 A
12 53.8 781.463 8 [M＋H]+, 763.438 2 [M＋H－H2O]+,
745.429 5 [M＋H－H2O×2]+, 619.406 3 [M＋H－
Glucose]+, 473.340 3 [M＋H－Glucose－fucose]+
779.454 0 780.466 0 柴胡皂苷 B2
13 54.9 823.465 3 [M＋H]+, 619.403 0 [M＋H－Glucose－
acetyl]+, 473.344 1 [M＋H－Glucose－fucose]+
821.479 4 822.476 6 2″-乙酰基柴胡皂苷A
14 55.9 823.470 4 [M＋H]+, 619.402 0 [M＋H－Glucose－
acetyl]+, 473.326 2 [M＋H－Glucose－fucose]+
821.474 4 822.476 6 3″-乙酰基柴胡皂苷A
15 56.8 867.457 1 [M＋H]+, 705.270 2 [M＋H－Glucose]+,
473.343 0 [M＋H－Glucose－fucose－malonyl]+
865.464 3 866.466 4 丙二酰基柴胡皂苷 A
16 57.5 811.465 1 [M＋H]+, 649.415 7 [M＋H－Glucose]+,
503.453 6 [M＋H－Glucose－fucose]+
809.472 2 810.007 9 未知
17 59.0 823.470 4 [M＋H]+, 619.403 3 [M＋H－Glucose－
acetyl]+, 473.340 3 [M＋H－Glucose－fucose]+
821.473 7 822.476 6 4″-乙酰基柴胡皂苷A
18 60.7 803.456 3 [M＋Na]+, 765.997 0 [M＋H]+, 603.399 5 [M＋
H－Glucose]+, 457.340 3 [M＋H－Glucose－fucose]+
779.464 6 780.466 0 柴胡皂苷 D
19 64.8 823.470 3 [M＋H]+, 619.401 0 [M＋H－Glucose－
acetyl]+, 473.340 2 [M＋H－Glucose－fucose]+
821.479 6 822.476 6 6″-乙酰基柴胡皂苷A
20 66.1 823.470 3 [M＋H]+, 619.401 9 [M＋H－Glucose－
acetyl]+, 473.344 8 [M＋H－Glucose－fucose]+
821.470 6 822.476 6 2″-乙酰基柴胡皂苷D
21 68.8 867.456 9 [M＋H]+, 705.505 6 [M＋H－Glucose]+,
473.344 9 [M＋H－Glucose－fucose－malonyl]+
865.461 4 866.466 4 丙二酰基柴胡皂苷 D
22 72.7 867.475 6 [M＋H]+, 619.421 5 [M＋H－Glucose－
acetyl×2]+, 473.344 3 [M＋H－Glucose－fucose]+
863.478 2 864.487 1 2″,3″-二 -氧 -乙酰基
柴胡皂苷 A
23 73.0 867.588 0 [M＋H]+, 619.423 4 [M＋H－Glucose－
acetyl×2]+, 473.344 2 [M＋H－Glucose－fucose]+
863.478 2 864.587 1 2″,3″-二 -氧 -乙酰基
柴胡皂苷 B2
24 82.1 297.060 6 [M＋H]+ 295.065 9 296.068 5 5-羟基-7-乙酰基黄酮

结构。如图 3 所示，m/z 517 [M＋H]+离子首先发生
丢失 1 个咖啡酰基碎片（m/z 163）的裂解反应，产
生 m/z 355 离子，这是由于咖啡酰基位于结构的外
侧，易于脱落；在此基础上，结构再次脱落奎宁酸
基团部分片段，丢失 m/z 192 的碎片，剩余 1 个咖
啡酰基的片段碎片，产生 m/z 163 的离子碎片。因
此，结合文献对照确定该类化合物为异绿原酸类化
合物。且在相同的质谱条件下与对照品异绿原酸 A
的裂解规律和出峰时间相一致，该化合物的分子式
为 C29H36O15，相对分子质量理论值为 516.126 8，
实测值为 539.124 4（[M＋Na]+），推测该化合物为
异绿原酸 A。以同样的方式确定了另一个同分异构
体即 6 号峰化合物为异绿原酸 B。
质谱图中 1 号峰通过正离子 m/z 377 [M＋Na]+
和负离子 m/z 353 [M－H]−分析确定该化合物的相
对分子质量为 354。如图 4 所示，1 号峰的裂解碎片
中只观察到丢失 1 个奎宁酸片段（m/z 192）而获得
1 个咖啡酰基碎片峰（m/z 163），结合对照品的裂解
规律对比，确定 1 号峰对应的化合物为绿原酸。
3.2.2 黄酮类化合物的分析鉴定 黄酮类成分是柴
胡中的另一类主要功效成分。本实验利用 HPLC-Q-
TOF-MS 技术从柴胡药材 70%甲醇提取物中共识别
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图 2 柴胡中黄酮类成分及酚酸成分的结构
Fig. 2 Structures of flavonoids and phenolic acid identified in Bupleuri Radix



图 3 异绿原酸 A (峰 5) 的正离子质谱及其可能的裂解途径
Fig. 3 MS fragment pathway of isochlorogenic acid A (Peak 5) under positive mode

图 4 绿原酸 (峰 1) 的质谱裂解和对照品对比
Fig. 4 MS fragment of chlorogenic acid (Peak 1) and comparison with reference substances
109.1
163.0
201.1 257.2 315.0337.1
355.1
377.1
397.1
499.1
539.1
561.1
618.1
100 200 300 400 500 600
m/z
144.076 0
163.033 6
257.238 1 315.001 0
355.090 5
377.072 7
399.054 8
样品
对照品 163.040 4
212.118 1
355.104 2
377.085 8
150 200 250 300 350 400 m/z
OH
O
OH
HO
OH
HO
O OH
O
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了 4 个黄酮类化合物，其中 3 个黄酮醇及其苷类成
分，1 个黄酮苷元类成分。结构见图 2。
3 号峰是槲皮素苷元的特征离子峰，通过正离
子 m/z 611 [M＋H]+和负离子 m/z 609 [M－H]−分析
确定化合物的相对分子质量为 610。裂解过程如图 5
所示，化合物脱去了 1 分子鼠李糖基 m/z 146 产生
的离子碎片峰 m/z 465 [M＋H－146]+和继续脱去 1
分子葡萄糖基而得到的苷元离子峰 m/z 303 [M＋H－
146－162]+。且如图 5 所示 3 号峰在相同的质谱条
件下与对照品芦丁的裂解规律和出峰时间相一致，
因此确定 3 号峰为芦丁。
4 号峰通过分析正离子 m/z 625 [M＋H]+和负离
子 m/z 623 [M－H]−确定化合物的相对分子质量为
624。4 号峰的极性弱于 3 号峰，其相对分子质量比
3 号峰多出 m/z 14，且在 4 号峰的裂解规律中，发
现 2 个碎片峰 479 [M＋H－Rhamnose]+，317 [M＋
H－Rhamnose－Glucose]+，因此推测该化合物是在
峰 3 的基础上，苷元中的 1 个 OH 被甲基化，结合
其裂解过程并比对文献报道[15]，确定为水仙苷。
另外 2 个黄酮类化合物均为苷元。8 号峰通过
正离子 m/z 353 [M＋Na]+和负离子 m/z 329 [M－H]−
分析确定化合物的相对分子质量为 330。该化合物
的分子式为 C29H36O15，相对分子质量理论值为
330.074 0，实测值为 331.076 0（[M＋H]+），根据其
分子离子峰和裂解的碎片信息结合文献报道鉴定峰
8 为 7,3′-二甲氧基槲皮素[16]。24 号峰极性最小，其
通过分析正离子 m/z 297 [M＋H]+和负离子 m/z 295
[M－H]−确定化合物的相对分子质量为 296。该化合
物的裂解过程中有明显的脱去乙酰基的碎片，化合
物的分子式为 C29H36O15，相对分子质量理论值为


OHO
OH
O
OH
OH
O
O OH
ORham
OH
HO
-Rhamnose OHO
OH
O
OH
OH
O
O OH
OH
OH
HO
-Glucose OHO
OH
OH
OH
OH
O
＋H＋H＋H
m/z 611 m/z 465 m/z 303
图 5 芦丁 (峰 3) 可能的裂解过程及其质谱与对照品的比对图谱
Fig. 5 MS fragment pathway of compound 3 and comparison map of its MS with reference substances
296.068 2，实测值为 297.060 6（[M＋H]+），根据其
分子离子峰和裂解碎片信息结合文献报道[17]鉴定
其为 5-羟基-7-乙酰基黄酮。
3.2.3 三萜皂苷类化合物的分析鉴定 柴胡中皂
苷类成分是其主要功效成分，根据液质分析结果和
对照品比对，并参考相关文献，共识别了 14 个皂
苷类成分。结构见图 6。
11 号峰通过正离子 m/z 781 [M＋H]+和负离子
m/z 779 [M－H]−分析确定化合物的相对分子质量
为 780。在 11 号峰的质谱图中可以观察到准分子离
子峰 [M＋H]+ m/z 781 丢失 1 个葡萄糖基（m/z 162）
形成 m/z 619 [M＋H－Glc]+碎片离子；丢失 1 一个
葡萄糖基（m/z 162）和一个海藻糖基（m/z 146）形
成 m/z 473 [M＋H－Glc－Fuc]+碎片离子。在相同的
质谱条件下与对照品柴胡皂苷 A 的裂解规律和出
峰时间相一致，该化合物的分子式为 C29H36O15，相
对分子质量理论值为 780.166 0，实测值为 803.168 0
[M＋Na]+，因此确定 11 号峰为柴胡皂苷 A。其裂
解规律及质谱图见图 7。
12 号峰通过正离子 m/z 803 [M＋Na]+、m/z 781
181.086 1
199.096 4
303.051 7
343.141 2
465.105 6
485.202 3
611.165 5
257.239 6
303.039 5
356.088 9
465.087 4
611.139 4
150 200 250 300 350 400 450 500 550 600
m/z
样品
对照品
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 12期 2016年 6月

·2050·

















图 6 柴胡中三萜皂苷类成分的结构
Fig. 6 Structures of triterpenoid saponins identified in Bupleuri Radix



图 7 柴胡皂苷 A (峰 11) 的质谱图比对和裂解规律推测
Fig. 7 Comparison of MS fragment and speculated fragmentation regularity of saikosaponin A (Peak 11)
[M＋H]+和负离子 m/z 779 [M－H]−分析确定化合物
的相对分子质量为 780。其裂解规律和 11 号峰非常接
近，说明其为 11 号峰的同分异构体。该化合物在相
同的质谱条件下与对照品柴胡皂苷 B2 的裂解规律和
出峰时间相一致，因此确定 12 号峰为柴胡皂苷 B2。
18 号峰通过正离子 m/z 803 [M＋Na]+、m/z 781
[M＋H]+和负离子 m/z 779 [M－H]−分析确定其相对
分子质量也是 780。其与 11 号峰具有相同的裂解过
O
OH
O
CH2OHO
R3OH2C
HO
OR2
O
CH3
HO
O
OH
OH
O
CH2OHO
R3OH2C
HO
OR2
OR1
O
CH3
HO
O
OH
R1 R2 R3
11 H H H
13 H acetyl H
17 acetyl H H
19 H H acetyl
22 acetyl acetyl H
O
OH
O
CH2OHO
HOH2C
HO
OH
O
O
CH3
HO
O
OH
O
HO
OH
OH
10
O
OH
O
CH2OH
O
HOOCH2COCOH2C
HO
OH
OH
O
CH3
HO
O
OH
R1 R2 R3
12 H H H
14 H acetyl H
20 H H acetyl
23 acetyl acetyl H
OR1
15
O
CH2OH
O
HOOCH2COCOH2C
HO
OH
OH
O
CH3
HO
O
OH
21
O
O
CH2OHO
HOH2C
HO
OH
OH
O
CH3
HO
O
OH
18
O
O
HOH2C
HO
OH
O
O
CH3
HO
O
OH
O
HO
OH
OH
CH2OH
HOH2C
9
OH
CH2OH
OH
O
410.203 8
437.330 5 455.338 2
473.346 3 583.380 6 619.401 2
745.430 7 781.446 1
803.433 2
419.333 8
437.346 3
455.356 6
473.366 1 583.402 8
619.425 6 745.458 9 781.478 8
803.459 8
400 450 500 550 600 650 700 750 800
m/z
样品
对照品
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 12期 2016年 6月

·2051·
程，但是峰高比是不同的，说明该化合物是与 11 号
峰对应化合物的同分异构体，该化合物在相同的质
谱条件下与对照品柴胡皂苷 D 的裂解规律和出峰时
间相一致，因此鉴定 18 号峰为柴胡皂苷 D。柴胡皂
苷 A 和 D 的裂解途径及其质谱图如图 7、8 所示。
13、14、17、19 和 20 号峰的质谱数据分析，
正离子模式中 m/z 823 [M＋H]+离子和负离子模式
中 m/z 821 [M－H]−离子分析确定其相对分子质量也
是 822。这 5 个峰信号对应的化合物具有相同的相对
分子质量，相类似的质谱裂解规律，说明它们是同分
异构体的化合物。根据其质谱的裂解过程中都可以首
先观察到丢失 m/z 42 的碎片峰推测这些化合物都是
在峰 11 基础上不同位置进行了乙酰化得到一系列柴
胡皂苷产物，这也是文献报到的一类主要的柴胡皂苷
化合物。结合文献报道[10]的液质分析结果并综合乙酰
化产物的极性，将这 5 个乙酰化柴胡皂苷的结构进行
归属分别为 2″-乙酰基柴胡皂苷 A（13 号峰）、3″-乙
酰基柴胡皂苷 A（14 号峰）、4″-乙酰基柴胡皂苷 A
（17 号峰）、6″-乙酰基柴胡皂苷 A（19 号峰）和 2″-
乙酰基柴胡皂苷 D（20 号峰）。
按照同样的方法 22 号峰和 23 号峰利用分析正
离子模式中 m/z 865 [M＋H]+离子和负离子模式中
m/z 863 [M－H]−离子分析确定其相对分子质量也
是 864。在这 2 个化合物的质谱碎片峰中能够观察
到脱去 2 个 m/z 42 的碎片峰 m/z 619，其他的裂解
规律与乙酰化柴胡皂苷相一致，说明这两个化合物
也是同分异构体，且为二乙酰化柴胡皂苷，结合分
析化合物极性，根据文献对比[18]和丢失乙酰基的数
目，确定 22 号峰和 23 号峰分别为 2″,3″-二氧-乙酰
基柴胡皂苷 A 和 2″,3″-二氧乙酰基柴胡皂苷 B2。
15 号峰和 21 峰利用分析正离子 m/z 867 [M＋
H]+离子和负离子 m/z 865 [M－H]−分析确定其相对
分子质量也是 866。其质谱裂解过程中可以观察到
脱落 malonyl 基团 m/z 86 的碎片，其他的与 11 号峰
和 18 号峰裂解过程非常相近，结合文献报道[19]归属
了 15 号峰和 21 号峰为丙二酰基乙酰基柴胡皂苷 A
和丙二酰基乙酰基柴胡皂苷 D。
4 讨论
本研究利用HPLC-Q-TOF-MS技术分析了柴胡
药材的 70%甲醇提取物中存在的化学成分，根据正
负离子模式下准分子离子峰，再结合各个化合物的
裂解规律，并与对照品在相同质谱条件下进行比
对，从柴胡提取物中共确定了 21 个化合物，鉴定
了 3 个酚酸类成分，4 个黄酮类化合物和 14 个三萜




图 8 柴胡皂苷 D (峰 18) 的质谱图比对和裂解规律推测
Fig. 8 Comparison of MS fragment and speculated fragmentation regularity of saikosaponin D (Peak 18)
410.202 2
437.325 2
455.336 0
473.344 3 619.399 6
763.437 0
803.429 0
407.333 3
437.344 5
455.357 6
473.365 3 601.412 8
619.425 3 763.468 5
803.457 9
400 450 500 550 600 650 700 750 800
m/z
样品
对照品
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 12期 2016年 6月

·2052·
皂苷类成分，其中 4 个化合物（异绿原酸 A、异绿
原酸 B、7,3′-二甲氧基槲皮素、5-羟基-7-乙酰基黄
酮）为首次从该植物中鉴定发现。
本实验通过分析正负离子模式下质谱提供的
准分子离子 [M＋Na]+和 [M－H]−数据，并结合质
谱的高分辨率可得到化合物的可靠相对分子质量；
从而快速分析柴胡提取物中的组分结构，这也是目
前研究、推测中药成分的有效手段。研究结果为柴
胡饮片的质量控制，以及后续阐明柴胡药材的物质
作用基础提供了详实的数据支撑。
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