全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

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黄芩素固体脂质纳米粒冻干粉的制备及体外释药性质的研究
于 桐 1，吴 超 1，季 鹏 1，徐 杰 1，赵 颖 1，郝艳娜 1，赵文明 1*，王铁良 2*
1. 辽宁医学院药学院，辽宁 锦州 121000
2. 辽宁医学院畜牧兽医学院，辽宁 锦州 121000
摘 要：目的 制备黄芩素固体脂质纳米粒并冻干，考察其理化性质及体外释药特性。方法 采用乳化蒸发-低温固化法，
以包封率为考察指标，正交试验优化其处方并考察其粒径、形态、电位、多分散系数（PDI）及体外溶出。以外观、色泽、
再分散性为考察指标筛选最佳冻干保护剂，利用差示扫描量热（DSC）、X 射线衍射（XRD）、傅里叶红外光谱（FT-IR）分
析药物在纳米粒中的存在状态。结果 黄芩素固体脂质纳米粒外观呈球状体，分布均匀，平均粒径为（82.64±6.78）nm，
PDI为 0.242±0.013，Zeta电位为（−25.7±0.5）mV，包封率为（81.3±1.2）%，载药量为（7.16±0.14）%（n＝3），以 5%
甘露醇作冻干保护剂效果较好，药物以无定形状态分散在脂质载体中，体外溶出实验表明黄芩素固体脂质纳米粒与原料药相
比具有明显的缓释作用。结论 乳化蒸发-低温固化法制得的黄芩素固体脂质纳米粒，粒径小，包封率高，稳定性好，工艺
简单。
关键词：黄芩素；乳化蒸发-低温固化；体外释放；固体脂质纳米粒；冻干粉
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)18 - 2720 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.18.009
Preparation and in vitro release of lyophilized powder of baicalein solid lipid
nanoparticles
YU Tong1, WU Chao1, JI Peng1, XU Jie1, ZHAO Ying1, HAO Yan-na1, ZHAO Wen-ming1, WANG Tie-liang2
1. College of Pharmacy, Liaoning Medical University, Jinzhou 121000, China
2. College of Animal Husbandry and Veterinary, Liaoning Medical University, Jinzhou 121000, China
Abstract: Objective To prepare lyophilized powder of baicalein solid lipid nanoparticles (BA-SLNs) and investigate its
physicochemical properties and release characteristics. Methods Ba-loaded SLN was prepared by solvent emulsification-evaporation
method, the formulation was optimized by orthogonal design, with encapsulation efficiency (EE) as reference, the measurement of
particle size, morphology, Zeta potential, the polydispersity index (PDI), and in vitro drug release behavior. The lyophilized powder of
appearance, color, redispersibility as indexes, the differential scanning calorimetry (DSC), X-Ray diffraction (XRD), Fourier transform
infrared spectroscopy (FT-IR) were used to analyze its material phase of the drug in nanoparticles. Results The Ba-SLNs assumed a
spherical shape with an even distribution of diameter and particle size was (82.64 ± 6.78) nm, the PDI was 0.242 ± 0.013, Zeta
potential was (−25.7 ± 0.5) mV, EE was (81.3 ± 1.2)%, and drug loading was (7.16 ± 0.14)% (n = 3). The 5% mannitol was the best
protective agent for lyophilized powder of Ba-SLNs. Through the characterization indicated that the drug to amorphous state dispersed
in a lipid. In vitro dissolution experiments showed Ba-SLNs compared with pure drugs had obviously sustained release. Conclusion
The technique of preparing Ba-SLN by solvent emulsification-evaporation has small particle size, high EE, and good stability, and the
process is simple.
Key words: baicalein; solvent emulsification evaporation method; in vitro release; solid lipid nanoparticles; lyophilized powder

黄芩素（baicalein，Ba）为黄酮类化合物，是
唇形科植物黄芩的主要活性成分，具有抗菌消炎、
抗肿瘤、保肝利胆、抗微生物、抗病毒等多种药理
作用，具有广泛的临床应用前景[1-3]。但是黄芩素具

收稿日期：2015-05-09
基金项目：校长基金-奥鸿博泽基金-医药创新专项（XZJJ20130104-02）
作者简介：于 桐（1987—），男，在读硕士，主要从事药物新剂型的研究。Tel: 18841609266 E-mail: yutongsuccess@163.com
*通信作者 赵文明，男，教授，主要从事药物新剂型的研究。Tel: (0416)4673469 E-mail: zhaowenmng1957@163.com
王铁良，男，副教授。Tel: 13704061657 E-mail: zifengas123@163.com
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有在体内易被氧化且水溶性差、半衰期短等缺点，
导致了生物利用度低，在一定程度上制约了黄芩素
的使用，因此如何提高黄芩素体内生物利用度，对
其临床的进一步应用具有重要的意义[4-5]。固体脂质
纳米粒（solid lipid nanoparticles，SLNs）以天然或
合成的脂质作为骨架材料制成纳米给药系统，以良
好的生理相容性为原则，将药物包裹于脂质中或分
散在纳米粒表面形成的新型纳米给药体系，最大限
度的避免药物与外界环境及水溶液接触，既增加了
药物的稳定性，延长了药物的半衰期，也解决了药
物水溶性差的难题，进而提高亲脂性药物的生物利
用度。同时 SLNs 又具有纳米粒药物的泄露少、毒
性低、操作简单等优点，可广泛应用于大规模生产
的纳米给药系统[6-8]。本实验通过乳化蒸发-低温固
化法制备黄芩素固体脂质纳米粒（Ba-SLNs），且筛
选冻干保护剂冻干并进行质量评价。
1 仪器与材料
UV-9100 型紫外分光光度计，北京普析通用仪
器有限责任公司；AL204电子天平，梅特勒-托利多
仪器有限公司；JEM-1010透射电镜，日本电子株式
会社；TJ270-30A 傅里叶红外光谱，天津市拓普仪
器有限公司；DF-101S 恒温磁力搅拌器，郑州市亚
荣仪器有限公司；KQ-250B型超声波清洁器，昆山
市超声仪器有限公司；Nano-ZS90 激光粒度仪，英
国马尔文仪器有限公司；2500 PC X射线衍射仪，
Rigaku Corporation；DSC-60差式扫描量热仪，日本
岛津公司。
黄芩素，西安瑞迪生物科技有限公司，质量分
数≥98%，批号 20140129；大豆卵磷脂，上海太伟
药业，批号 20141027；泊洛沙姆 188，天津市博迪
化工股份有限公司，批号 20140219；单硬脂酸甘油
酯，天津市博迪化工股份有限公司，批号 20130622；
无水乙醇，分析纯；聚山梨酯 80，天津市永晟精细
化工有限公司，批号 201320604；葡聚糖凝胶 50，
上海蓝季科技发展有限公司，批号 20141220；透析
袋，美国联合碳化公司，批号 20141108，截留相对
分子质量 8 000～14 000；甘露醇，天津市致远化工
试剂有限公司，批号 20141211；乳糖，批号
20140211，蔗糖，批号 20131026，天津市永晟精细
化工有限公司。
2 方法与结果
2.1 Ba-SLNs的制备
采用乳化蒸发-低温固化法制备 Ba-SLNs。取处
方量的黄芩素、单硬脂酸甘油酯、卵磷脂溶于 6 mL
无水乙醇中，于 80 ℃恒温水浴锅加热使其充分溶
解，构成有机相。另取处方量的泊洛沙姆 188和聚
山梨酯 80溶于 18 mL水中构成水相，将有机相在
1 500 r/min 搅拌下缓慢注入水相中，温度维持在
（80±2）℃，搅拌条件下蒸发除去有机溶剂并浓缩
至 10 mL，得到黄色半透明乳液。将所得乳液在
1 500 r/min搅拌下迅速混于 0～2 ℃的 10 mL水中，
冷冻固化 2 h，0.45 μm微孔滤膜滤过得到 Ba-SLNs
溶液。
空白固体脂质纳米粒（BSLNs）制备时，除不
加药物外，其他操作条件同 Ba-SLNs。
2.2 Ba-SLNs的形态、粒径、Zeta电位测定
Ba-SLNs溶液用蒸馏水稀释一定倍数，滴于铜
网上，2%磷钨酸染色，空气中自然晾干，在透射电
镜下观测纳米粒的形态（图 1）。另取 Ba-SLNs溶液，
加蒸馏水稀释 20 倍，激光粒度仪测定粒径及 Zeta
电位（图 2）。本方法制备的纳米粒大小分布比较均
匀，平均粒径（82.64±6.78）nm，PDI 为 0.242±
0.013，Zeta电位平均为（−25.7±0.5）mV。
2.3 包封率和载药量的测定
2.3.1 检测波长的选择 精密称取黄芩素适量，以
无水乙醇溶解并稀释至 5 μg/mL，在 200～400 nm
扫描，黄芩素的最大吸收波长为 276 nm（图 3-A），
而 BSLNs 在此波长处无干扰（图 3-B），因此确定
检测波长 276 nm。
2.3.2 线性关系考察 精密称取黄芩素对照品 10
mg于 10 mL量瓶中，无水乙醇溶解并稀释至 10 mL
作为贮备液，分别精密吸取 20、30、40、50、60、
70、80 μL于 10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻
度制得质量浓度（C）分别为 2、3、4、5、6、7、8
μg/mL的系列对照品溶液，276 nm波长处测定吸光

图 1 Ba-SLNs透射电镜图
Fig. 1 TEM photograph of Ba-SLNs
100 nm
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图 2 Ba-SLNs的粒径分布 (A) 和 Zeta电位 (B)
Fig. 2 Size distribution (A) and Zeta potential distribution
(B) of Ba-SLNs



图 3 黄芩素 (A) 和 BSLNs (B) 的紫外扫描图谱
Fig. 3 UV spectra of Ba (A) and BSLNs (B)

度（A）值，得回归方程 A＝0.100 8 C＋0.100 6，r＝
0.999 7，表明黄芩素在 2～8 μg/mL线性关系良好。
低、中、高质量浓度（2、5、8 μg/mL）的对照品溶
液日内、日间 RSD 平均值分别为 0.25%和 0.51%
（n＝3）；低、中、高样品回收率分别为 101.16%、
100.07%、99.28%，RSD分别为 1.69%、0.82%、1.05%
（n＝3），均符合分析要求。
2.3.3 色谱柱的制备 选择 Sephadex G-50色谱柱
（20 cm×1.5 cm）分离 Ba-SLNs 和游离 Ba，取
Sephadex G-50适量，置于烧杯中 100 ℃煮 3 h，在
蒸馏水中放置冷却，将其缓慢倒入色谱柱中，适量
蒸馏水冲洗，放置备用[9]。
2.3.4 洗脱曲线的建立 精密移取 Ba-SLNs 溶液
0.5 mL上样，洗脱液为蒸馏水，室温下洗脱，体积
流量控制在 1 mL/min，收集 1 mL/管，总共 20管，
分别用无水乙醇稀释至 5 mL，涡旋 2 min，在 276 nm
下紫外分光光度仪测定其 A 值。Ba-SLNs 中 3～9
管有黄色乳光的溶液，对应的 A值（图 4）较大，是
含有药物的固体脂质纳米粒，12～15管应为洗脱下
来的游离药物，9～12 管为药物尚未洗脱下来的中
间空白，分离度 Rf＝2.63，说明二者分离较完全。



图 4 Ba-SLNs洗脱曲线
Fig. 4 Elution curve of Ba-SLNs

2.3.5 包封率和载药量的测定 精密吸取 0.5 mL
Ba-SLNs溶液上样，以蒸馏水为洗脱液，收集带乳
光的部分，无水乙醇定容至 10 mL，破乳，再精密
吸取 1 mL，定容至 5 mL；另精密吸取 Ba-SLNs混
悬液 0.5 mL，无水乙醇直接定容至 10 mL，破乳，
精密吸取 1 mL，定容至 5 mL，使用紫外分光光度
仪测定 2种样品，利用外标一点法测定其量。利用
公式计算包封率及载药量。
包封率＝W 包/W 总
载药量＝W 包/W 脂质
W 包为Ba-SLNs通过 Sephadex G-50色谱柱的黄芩素的质量，
W 总为 Ba-SLNs乙醇破乳后黄芩素的总质量，W 脂质为单硬脂
酸甘油酯的质量
2.4 单因素试验考察 Ba-SLNs制备的影响因素
2.4.1 因素设计 设定乳化温度 80 ℃，转速 1 500
r/min，药脂比 1∶10，单硬脂酸甘油酯-卵磷脂 1∶2，
有机相-水相体积比 1∶3，以包封率为考察指标，
考察表面活性剂的用量及比例对纳米粒的影响，结
果发现以单种表面活性剂制备的Ba-SLNs分散性不
好，有絮状物的出现，以聚山梨酯 80 和 F68 的混
合表面活性剂成型性好，稳定性高，聚山梨酯
80-F68 的混合比例为 1∶2，用量在 1.5%时包封率
最高。
在预试验的基础上，以包封率为考察指标，对
制备工艺及处方进行了单因素试验考察：搅拌速度、
乳化温度、有机相-水相体积比、硬脂酸-卵磷脂质
量比、药脂比、纳米乳浓缩为原体积的比例等。
2.4.2 乳化温度的选择 设定乳化温度为 65、70、
75、80、85 ℃，其他条件同“2.4.1”项，以包封率
为考察指标，考察温度对 Ba-SLNs的影响，结果发
现，65 ℃时温度过低，乳化不彻底，Ba-SLNs成型
不好；85 ℃温度过高，分散不均匀且不稳定；80 ℃
所制得纳米粒包封率最高。
0.1 1 10 100 1 000 10 000
粒径/nm
−200 −100 0 100 200
Zeta电位/mV
A
B
0 5 10 15 20
管数
200 300 400 200 300 400
λ/nm
A B
1.0


0.8


0.6


0.4


0.2


0
A
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2.4.3 有机相-水相体积比 设定有机相-水相体积
比为 1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5，其他条件同
“2.4.1”项，以包封率为考察指标，考察有机相-水
相体积比对 Ba-SLNs的影响，结果发现，1∶3比例
纳米溶液放置 1周后依然分散均匀，稳定性好，包
封率最高。
2.4.4 单硬脂酸甘油酯-卵磷脂之比 设定单硬脂
酸甘油酯-卵磷脂之比为 1∶0.25、1∶0.5、1∶1、1∶
2、1∶4，其他条件同“2.4.1”项，以包封率为考察
指标，考察单硬脂酸甘油酯-卵磷脂之比对 Ba-SLNs
的影响，结果发现，1∶2比例的纳米溶液包封率最
高，无絮状物沉淀，体系均匀度最佳。
2.4.5 药脂比 设定药脂比为 1∶5、1∶10、1∶15、
1∶20、1∶25，其他条件同“2.4.1”项，以包封率
为考察指标，考察药脂比对 Ba-SLNs的影响，结果
发现，1∶10比例的纳米溶液包封率最高。
2.4.6 纳米乳浓缩为原体积的比例 设定浓缩比例
分别为 1/2、1/3、1/4，其他条件同“2.4.1”项，以
包封率为考察指标，考察浓缩比例对 Ba-SLNs的影
响，结果发现，浓缩体积过小，体系浑浊不稳定，
纳米粒子聚集导致粒径较大，最终确定浓缩比例为
1/2，包封率最高，体系分散均匀。
2.5 正交试验设计优化 Ba-SLNs制备工艺
在单因素试验的基础上，以包封率、粒径为优
化指标，选择乳化温度（A）、药脂比（B）、混合表
面活性剂的总量（C）及混合表面活性剂的比例（D）
对其影响较大，按 L9(34) 进行正交试验，筛选最佳
处方。应用加权分析法对正交试验结果进行综合分
析[10]，粒径（y1）和包封率（y2）分别按 55%和 45%
的系数积分，综合评分（y）＝55×(1－y1/103.9)＋
45×y2/81.5。试验设计及结果见表 1，方差分析见
表 2。
根据 R值大小 D＞C＞B＞A，说明了混合表面
活性剂的比例、混合表明活性剂总量、药脂比、乳
化温度对于包封率及粒径的影响逐步减小，参考各
因素的结果，综合分析得出最佳处方 A3B2C2D2，即

表 1 L9(34) 正交试验设计与结果
Table 1 Design and results of L9(34) orthogonal test
试验号 A/℃ B C/% D 粒径/nm 包封率/% y
1 70 (1) 1∶5 (1) 1.0 (1) 1∶1 (1) 86.55 51.7 37.73
2 70 (1) 1∶10 (2) 1.5 (2) 1∶2 (2) 62.13 61.5 56.07
3 70 (1) 1∶15 (3) 2.0 (3) 1∶4 (3) 86.58 40.2 31.36
4 75 (2) 1∶5 (1) 1.5 (2) 1∶4 (3) 102.80 80.2 44.86
5 75 (2) 1∶10 (2) 2.0 (3) 1∶1 (1) 65.33 66.1 56.91
6 75 (2) 1∶15 (3) 1.0 (1) 1∶2 (2) 103.90 71.5 39.48
7 80 (3) 1∶5 (1) 2.0 (3) 1∶2 (2) 77.88 80.5 58.22
8 80 (3) 1∶10 (2) 1.0 (1) 1∶4 (3) 107.40 68.2 35.80
9 80 (3) 1∶15 (3) 1.5 (2) 1∶1 (1) 89.75 81.5 52.49
K1 125.16 140.81 113.01 147.13
K2 141.25 148.78 153.42 153.77
K3 146.51 123.33 146.49 112.02
R 21.35 25.45 40.41 41.75

表 2 方差分析
Table 2 Analysis of variance
方差来源 离均差平方和 自由度 F值 显著性
B 112.97 2 9.05
C 311.32 2 24.95 P＜0.05
D 335.54 2 28.48 P＜0.05
A (误差) 12.48 2
F0.05(2, 2) = 19.00 F0.01(2, 2) = 99.00
温度 80 ℃，药脂比 1∶10，混合表面活性剂总量为
1.5%，聚山梨酯 80-F68 1∶2。
2.6 验证试验
以最优处方制备 3批 Ba-SLNs，分别测定粒径、
Zeta电位、包封率及载药量。结果平均粒径分别为
86.58、86.55、74.81 nm，Zeta 电位分别为−25.3、
−26.2、−25.6 mV，包封率分别为 81.3%、82.5%、
80.1%，载药量分别为 7.31%、7.04%、7.13%，表
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明本方法制备的 Ba-SLNs重复性较好。
2.7 体外释药实验
按照《中国药典》2010年版第三法采用透析袋
法测定释放度。采用透析袋法测定 Ba-SLNs在 PBS
pH 7.4＋0.2%聚山梨酯 80中的释放行为，释放体积
为 100 mL，取 Ba-SLNs溶液 4 mL（相当于黄芩素
质量 2 mg）及等质量分数黄芩素溶液置于透析袋
内，转速为 100 r/min，温度为（37.0±0.5）℃，在
预定时间 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、
8.0、12.0、24.0、36.0 h取样 2 mL，同时补充等体
积同温的释放介质。利用外标一点法，通过紫外分
光光度仪测定药物累积释放度（图 5）。



图 5 黄芩素溶液与 Ba-SLNs体外药物释放曲线 (n = 3)
Fig. 5 In vitro release profie of Ba and Ba-SLNs (n = 3)
本实验为模拟此类制剂在生物体内释放条件，
选择 pH 7.4的磷酸盐缓冲液作为释放介质，但黄芩
素难溶于水，无法满足体外释放要求的漏槽条件，
所以本实验在释放介质中加入了表面活性剂，促进
其在介质中的溶解度满足漏槽条件，并且不含有机
溶剂，更符合生物条件。黄芩素溶液在 6 h的累积
释放度达到了 98.74%，而 Ba-SLNs溶液在 6 h的累
积释放度是 48.26%，从结果中分析得出，分散在纳
米粒表面的药物分子释放较快，主要来自吸附在纳
米粒表面和游离的药物分子，同时纳米粒巨大的比
表面积及与表面结合的表面活性剂也有利于药物的
释放，所以释放前期的药物产生了突释现象[11-13]。
释放后期随着脂质骨架的逐步溶解使药物不断的释
放，在 36 h达到了 82.62%。由此可见，SLNs可以
延长药物的释放，达到缓释效果，分别以零级释放、
一级释放、Higuchi方程、Ritger-Peppas方程对 Ba-
SLNs 体外释药曲线进行拟合，体外释药规律符合
Higuchi方程：Q＝15.137 1 t1/2＋5.187（r2＝0.982）。
2.8 Ba-SLNs冻干粉的制备及评价[14]
分别加入 3%、5%、8%的乳糖、甘露醇、蔗糖
与制备好的 Ba-SLNs混匀，取 3 mL置于西林瓶中，
−80 ℃超低温冰箱预冻 24 h后，冷冻干燥 24 h，得
到浅黄色疏松冻干粉，以外观、色泽、再分散性为
考察指标，评分标准见表 3、4。实验结果表明以 5%
甘露醇为冻干保护剂效果最好，得到的冻干粉外形
饱满，色泽均匀，再分散性好。
表 3 指标评分标准
Table 3 Score standard of indexes
评分 外观 色泽 再分散性
0～2 皱缩多孔 分层，上下色差明显 ＞90 s
3～5 皱缩多孔 分层，上下色差不明显 60～90 s
6～8 皱缩多孔 上下色差不明显 30～60 s
9～10 致密饱满 均匀无色差 ＜30 s

表 4 冻干保护剂的筛选
Table 4 Screening of protective agents
试验号
保护剂的用量/%
外观 色泽 再分散性 综合评价
乳糖 甘露醇 蔗糖
1 3 － － 5 6 8 19
2 5 － － 6 7 7 20
3 8 － － 8 8 6 22
4 － 3 － 9 7 8 24
5 － 5 － 9 9 9 27
6 － 8 － 8 8 7 23
7 － － 3 3 5 7 15
8 － － 5 4 6 8 18
9 － － 8 5 7 8 20

2.9 冻干粉稳定性试验
将制得的冻干粉置于 4、25 ℃下存放，40 d后
取样观察，4 ℃存放下的冻干粉外观仍为淡黄色块
状物，表面光滑平整，未见明显变化，加入注射用
水轻轻振摇后，分散为黄色混悬液，再分散性良好，
测得粒径、Zeta电位、包封率分别为（261.5±17.5）
nm、（−22.5±1.2）mV、（74.2±3.1）%。而 25 ℃
存放的冻干粉，外观出现塌陷，皱缩，加入注射用
水后再分散性差，测得粒径、Zeta电位、包封率分
别为（529.1±30.1）nm、（−12.6±0.8）mV、（47.2±
5.2）%，可能是温度升高，体系的稳定性降低，增
加了胶体粒子碰撞的动能，导致了纳米粒子的聚集，
促使单硬脂酸甘油酯和卵磷脂在高温下分解，导致
药物的渗漏率增加，稳定性降低[11]。
2.10 差式扫描量热分析（DSC）
将黄芩素、BSLNs、药物和 BSLNs冻干粉按同
0 10 20 30 40
t/h
黄芩素溶液
Ba-SLNs
100


80


60


40


20


0
累
积
释
放
度
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中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

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比例研磨后的物理混合、Ba-SLNs冻干粉进行 DSC
分析，氧化铝（Al2O3）为参比物，升温范围：18～
285 ℃，以 10 ℃/min的速率升温扫描，以黄芩素、
BSLNs、处方比例的物理混合物、Ba-SLNs 冻干粉
为样品，分析结果见图 6。黄芩素原料药和物理混
合物在 268 ℃都有吸收峰，但后者吸收峰减小，可
能是在研磨的过程中，降低了药物的结晶度。而冻
干粉的在 268 ℃的吸收峰消失，说明在制备纳米粒
的过程中，药物的晶型发生了改变，即大部分药物
以无定形状态存在固体脂质纳米粒中，而少部分药
物以结晶态吸附在纳米粒表面，也证实了体外释放
初期的突释是由于吸附在纳米粒表面的药物溶解
所致。



图 6 黄芩素、物理混合物、BSLNs 和 Ba-SLNs 的差示扫
描量热分析
Fig. 6 DSC thermograms of Ba, physical mixture, BSLNs,
and Ba-SLNs
2.11 X射线衍射分析（XRD）
通过 XRD 分别测定黄芩素、BSLNs、物理混
合物、Ba-SLNs冻干粉，以 Cu Ka作为辐射源，确
定扫描速度 4°/min，步长 0.02及角度 5°～60°，黄
芩素在 10.07°、11.30°、13.22°、15.36°、16.33°、24.16°
和 26.80°有特征峰衍射（图 7），在物理混合物中的
特征峰降低但依然存在，而 Ba-SLNs冻干粉的药物
特征衍射峰消失，说明在纳米粒形成的过程中，药
物以无定形状态嵌入在含有有序晶格的脂质中，限
制了药物结晶的形成，与 DSC测试结果一致。
2.12 傅里叶红外光谱分析（FT-IR）
通过 FT-IR 光谱仪测定黄芩素、BSLNs、物理
混合、Ba-SLNs冻干粉，以 KBr混匀，扫描波数范
围在 400～4 000 cm−1，分辨率为 2 cm−1，测定如图
8 所示，通过对比黄芩素、物理混合、BSLNs 和
Ba-SLNs冻干粉后红外光谱图，特征吸收峰都在物
混和 Ba-SLNs冻干粉中出现，并未发现新的特征吸
收峰，两者之间仅有微弱的范德华力和氢键的作用，



图 7 黄芩素、物理混合物、BSLNs和 Ba-SLNs的 XRD图
Fig. 7 XRD of Ba, physical mixture, BSLNs, and Ba-SLNs



图 8 黄芩素、物理混合物、BSLNs和 Ba-SLNs的 FT-IR图
Fig. 8 FT-IR spectra of Ba, physical mixture, BSLNs, and
Ba-SLNs

未发生化学反应，故二者之间的吸附属于物理吸附。
3 讨论
SLNs的制备方法有很多，如高压均质法虽制得
的纳米粒较好，但对设备的要求较高，是工业化大
规模生产纳米粒的主要方法；薄膜-超声分散法易于
控制，但制备过程中可能产生微米级粒子，成膜不
均匀，易产生金属污染；溶剂乳化法制备过程中操
作简单，不需要加热，但是制备中一旦使用了有机
溶剂，残留的溶剂不易除去，存在潜在毒性。经初
步筛选确立了乳化蒸发-低温固化法制备 Ba-SLNs，
与其他制备方法相比，具有设备简单易得，成本低
且制备出的 Ba-SLNs粒度分散均匀。本实验以单硬
脂酸甘油酯为载药脂质，卵磷脂、F68 和聚山梨酯
80组成混合表面活性剂。考虑到脂质的熔点为 70～
80 ℃，乙醇的沸点为 78 ℃，乳化温度应有利于乳
化，且有机溶剂易挥发完全，减少了潜在的危害，
同时考察了包封率、粒径、Zeta电位，最终确定乳
化温度为 80 ℃。表面活性剂的使用不但降低了乳
液的表面张力，而且增加了药物在脂质中的溶解度，
单一表面活性剂时，在乳化过程中乳化不彻底，包
40 120 200 280
温度/℃
Ba-SLNs
BSLNs
物理混合物
黄芩素
40 20 30 40 50 60
2θ/(°)
Ba-SLNs
BSLNs
物理混合物
黄芩素
1 000 2 000 3 000 4 000
ν/cm−1
Ba-SLNs
BSLNs
物理混合物
黄芩素
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封率较低且稳定性不高；而混合表面活性剂的使用，
可显著提高包封率，有效降低了粒径，减少纳米粒
的聚集，大大增加了药物的溶解度和稳定性。
SLNs 和游离药物的分离是测定包封率和载药
量的关键，本实验曾考虑采用超速离心法，18 000
r/min离心 1 h后仍未见分层，分析原因可能是 SLNs
粒径比较小、采用的脂质材料相对密度都低于 1。
考虑到透析法耗时，超滤法和葡聚糖凝胶柱法成本
较高，故采取了葡聚糖凝胶色谱柱法。
冷冻固化过程时，降温必须迅速，否则易导致
不能瞬时固化，使纳米粒具有一定的软黏性，在相
互碰撞的过程中易粘连，使粒径增大且易沉降。而
搅拌速度也是影响粒径的重要因素，如果搅拌速度
过低，粒径具有增大的趋势，放置后稳定性较差。
速率过快，在乳化的过程当中，产生泡沫较多且易
外溅，影响了表面活性剂的乳化效果，故本实验采
取 1 500 r/min[15]。
根据双分子层原理，Zeta电位的大小与纳米粒
体系的稳定性密切相关，为了得到稳定的 SLNs，
Zeta 电位一般控制在−20～−45 mV，本实验所制
Ba-SLNs平均 Zeta电位在（−25.7±0.5）mV，纳米
粒带负电荷，相互之间有较强的斥力有利于稳定，
粒径分布均匀，在 4 ℃储存 30 d后未发现明显的聚
集和粘连。采用了冷冻干燥法制备冻干粉，在冻干
过程会降低表面活性剂的保护作用，纳米粒容易破
裂，加入冻干保护剂后，可以阻止与纳米粒的直接
接触，降低药物与脂质的氧化及水解速度，外层的
表面活性剂与冷冻保护剂分子间发生氢键缔合，起
到了“伪水化层”的作用，与水形成了低共融物或
玻璃状物质，抑制了晶型的生长，使冰晶以微晶或
无定形形态存在，降低其对纳米粒的挤压和机械损
伤作用，可防止冻干过程中粒子的聚集且有效地抑
制了药物的泄漏[16]。
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