全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 19 期 2015 年 10 月

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华重楼植株的快速繁殖研究
刘银花 1, 2，王跃华 2*，唐 旭 1, 2，陈 燕 3，黄 鹏 2，梅 英 2
1. 四川师范大学生命科学学院，四川 成都 610101
2. 成都大学生物产业学院，四川 成都 610106
3. 四川金土地中药材种植集团有限公司，四川 成都 611130
摘 要：目的 以华重楼 Paris polyphylla var. chinensis 根茎为外植体，建立华重楼植物的快速繁殖技术。方法 以 MS 为基本
培养基，通过研究激素 6-BA、2,4-D、NAA、IBA、KT、IAA 和头孢曲松钠、活性炭等对愈伤组织诱导、不定芽分化和不定根
产生的影响，找出组培苗诱导培养的最佳培养基配方。结果 华重楼最佳愈伤组织诱导培养基为 MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 1.5
mg/L＋2,4-D 3.0 mg/L；最佳不定芽分化培养基为 MS＋6-BA 3.0 mg/L＋IAA 0.3 mg/L＋KT 1.0 mg/L＋头孢曲松钠 300 mg/L；
最佳生根培养基为 1/2 MS＋IBA 0.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋活性炭 0.5%。当组培苗长出第 1 片叶且不定根长出 4 条以上时
将组培苗取出，先放在无菌水中栽培 5 d，再移栽至松软土壤中，组培苗生长健壮，成活率为 100%。结论 在获得愈伤
组织的基础上，进一步完成对不定芽的诱导与无根苗生根培养，筛选出了培育华重楼组培苗的最佳条件。
关键词：华重楼；根茎；组培苗；快速繁殖；6-BA；2,4-D；NAA；IBA；KT；IAA；头孢曲松钠；活性炭
中图分类号：R282.21 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)19 - 2925 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.19.018
Rapid propagation of Paris polyphylla var. chinensis
LIU Yin-hua1, 2, WANG Yue-hua2, TANG Xu1, 2, CHEN Yan3, HUANG Peng2, MEI Ying2
1. College of Life Science, Sichuan Normal University, Chengdu 610101, China
2. Department of Biological Engineering, Chengdu University, Chengdu 610106, China
3. Sichuan Jintudi Cultivation of Chinese Herbal Medicines Group Co., Ltd, Sichuan 611130, China
Abstract: Objective The roots of Paris polyphylla var. chinensis were used as explants to establish a rapid propagation technique.
Methods The effects of hormone 6-BA, 2,4-D, NAA, IBA, KT, IAA, ceftriaxone, activated carbon, etc on callus induction,
differentiation of adventitious bud, and formation of adventitious roots were studied to find out the best culture medium formulation by
using MS as basic culture medium. Results The best medium for callus induction of P. polyphylla var. chinensis was MS + 6-BA 1.0
mg/L + NAA 1.5 mg/L + 2,4-D 3.0 mg/L, and the best medium for differentiation of adventitious bud was MS + 6-BA 3.0 mg/L + IAA 0.3
mg/L + KT 1.0 mg/L + ceftriaxone 300 mg/L, while the best medium for formation of adventitious roots was 1/2 MS + IBA 0.5 mg/L +
NAA 0.1 mg/L + activated carbon 0.5%. The tissue cultured seedling was moved to sterile water for 5 d when the first leaf emerged and
four adventitious roots appeared, then the seedling was transplanted into the soft soil. The tissue cultured seedling would grow strongly
with 100% survival rate. Conclusion The adventitious bud is inducted and then the root from bare-root seedling is cultured on the basis
of obtained callus. Finally the best conditions to foster the tissue cultured seedling of P. polyphylla var. chinensis have been screened.
Key words: Paris polyphylla Smith var. chinensis (Franch.) Hara; rhizome; tissue cultured seedling; rapid propagation; 6-BA; 2,4-D;
NAA; IBA; KT; IAA; ceftriaxone; activated carbon

药用植物重楼为百合科植物云南重楼（滇重楼）
Paris polyphylla Smith var. yunnanensis (Franch.)
Hand.-Mazz 和华重楼 Paris polyphylla Smith var.
chinensis (Franch.) Hara 的干燥根茎[1]。甾体皂苷是
重楼的主要活性物质，具有抗肿瘤、消炎、止血、
抗氧化、促进子宫收缩和保护血管内皮细胞等药理
作用，临床上内服用于止血、止痛、抗肿瘤，外用
抗感染、抗炎镇痛等[2-5]。而且是云南白药、宫血宁
胶囊、季德胜蛇药片、抗病毒颗粒等产品的主要原
料[6]。由于重楼具有多种药理作用且药效好，制药
工业对重楼的需求量逐年递增，以致供不应求。巨
大的需求缺口驱动药材价格飞涨，并进一步刺激药

收稿日期：2015-01-18
基金项目：四川省科技支撑计划项目（2014ZC2103）
作者简介：刘银花（1990—），女，四川内江人，硕士在读，研究方向为细胞工程。Tel: 13880132460 E-mail: 763302549@qq.com
*通信作者 王跃华（1963—），女，硕士，教授，硕士生导师，主要从事药用植物生物技术研究。Tel: 13980021790 E-mail: 1961689636@qq.com
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农滥采滥挖，使得道地产区野生重楼资源严重枯竭，
濒临灭绝[6]，所以采用人工栽培重楼已势在必行。
然而重楼植物种子具有自然繁殖率低，种胚发育不
完全，胚乳坚硬和胚轴后熟等明显“双重休眠”的
特性，重楼种子播种后通常需要经历 2 个冬天才能萌
发，其成苗生长时间长，是典型的“二年生种子”[7]。
重楼植物的个体发育过程十分缓慢，由种子萌发到
开花结实，至少需 4～5 年，其中苗期（幼年期）可
以持续 4 年以上[8]。因此，采用种子繁殖花费时间
长且繁殖率低，较难大规模生产以满足人们对重楼
药材的需求。
植物组织培养技术是可实现植株快速繁育的有
效途径；但目前在重楼植物的组织培养研究中，取
得的成功报道却甚少。现研究发现重楼植物的地上
茎、根、叶和花蕾等外植体都不能诱导出愈伤组织，
而采用幼芽诱导的愈伤组织生长缓慢，且不含原植
物中的皂苷[9-12]。王跃华等[13]研究发现，采用重楼
植物的特定部位根茎，可成功地诱导出生长速度较
快的愈伤组织，并且还发现了经过多次继代的愈伤
组织中含有重楼皂苷。本研究采用华重楼根茎为外
植体，在获得愈伤组织的基础上，进一步完成对不
定芽的诱导与无根苗生根培养，采用正交试验方法
筛选出培育华重楼组培苗的最佳条件，并进一步开
展了炼苗和移栽条件研究，获得了华重楼再生植株
的快速繁育方法，最终实现华重楼植物在短时间和
低成本条件下大批量生产。
1 材料
华重楼植物采自四川省都江堰，经四川大学张
浩教授鉴定为百合科植物华重楼 Paris polyphylla
Smith var. chinensis (Franch.) Hara。本实验选取生长
健康、无病虫害的华重楼植物根茎为外植体。
2 方法
2.1 愈伤组织诱导
选取生长健康、无病虫害的华重楼植物的根茎，
先用流水洗净泥土后吸干表面的水分，然后切除根
茎上的不定根，再在超净工作台上切取根茎前端带
芽体部分的第 1 个茎节，先用 0.1%升汞消毒 9 min，
然后用无菌水冲洗 5 次后切除根茎上的芽体，最后
将第 1个茎节切成 1.0 cm3大小后接入以MS为基本
培养基附加不同质量浓度激素配比的愈伤组织诱导
培养基中，采用 3 因素 4 水平（表 1）L16(43) 实验
设计研究 6-BA（A）、NAA（B）、2,4-D（C）3 种
激素对愈伤组织诱导的影响。外植体接入培养基后，
先置于 6 ℃冰箱中低温处理 15 d，再转放在温度为
22 ℃、每天光照 6 h、光照强度为 1 000 lx 的条件下
进行培养，培养 55 d 后统计其愈伤组织诱导率。
2.2 不定芽的诱导
选取质地紧密、无褐变和玻璃化现象产生、
颜色为黄白色的愈伤组织，将其切成 2.0 cm3 大小
后接入以 MS 为基本培养基，并附加不同质量浓
度激素和头孢曲松钠的不定芽诱导培养基中，采
用 4 因素 4 水平 L16(44)试验设计研究 6-BA（D）、
IAA（E）、KT（F）3 种激素和头孢曲松钠（G）
对不定芽分化的影响。愈伤组织接入培养基后，
先在培养温度为 10 ℃、每天光照 2 h、光照强度
为 500 lx 的条件下进行诱导培养 30 d 后，再转放
在培养温度为 20 ℃、每天光照 10 h、光照强度
为 1 200 lx 的条件下进行诱导培养，培养 30 d 后
统计其不定芽诱导率。
2.3 不定根的诱导
当不定芽长至 1.0 cm以上时，将不定芽按 1～
2 个为 1 组连同其基部的愈伤组织一同切下并转
接到以 1/2 MS 为基本培养基附加不同质量浓度
激素和活性炭的生根培养基中，采用 3 因素 4 水
平 L16(43)试验设计研究 IBA（H）、NAA（I）2 种
激素和活性炭（J）对不定根产生的影响。外植体
接入培养基后，在温度为 20 ℃、每天光照 4 h、
光照强度为 800 lx 的条件下进行培养，培养 55 d
后统计其生根率。
2.4 炼苗和移栽
选取生长健壮的组培苗从培养瓶中取出，先放
在无菌水中，在温度为 15 ℃、每天光照 5 h、光照
强度为 500 lx 的条件下栽培一段时间后，再移栽至
松软土壤中，在温度为 18 ℃、相对湿度 80%、每
天光照 6 h、光照强度为 800 lx 的条件下培养，培
养 30 d 后统计组培苗成活率。
所有培养基的 pH 值为 6.0，琼脂 6.5 g/L、蔗糖
30 g/L。
2.5 数据分析
利用正交助手 II 进行正交试验设计和数据分析。
3 结果与分析
3.1 愈伤组织诱导
将准备好的外植体接入按正交试验（表 1）设
计的培养基中，培养55 d后统计其愈伤组织诱导率，
并对实验结果进行极差分析和方差分析，结果见表
2 和 3。
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表 1 愈伤组织诱导因子水平表
Table 1 Factors and levels of callus induction
水平 A/(mg·L−1) B/(mg·L−1) C/(mg·L−1)
1 0.5 0.5 1.0
2 1.0 1.0 1.5
3 1.5 1.5 2.0
4 2.0 2.0 3.0
表 2 愈伤组织诱导 L16(43) 正交试验设计与结果
Table 2 Results of callus induction by L16(43) orthogonal test
编号 A B C 误差 愈伤组织诱导率/%
1 1 1 1 1 34.18
2 1 2 2 2 34.87
3 1 3 3 3 39.21
4 1 4 4 4 36.13
5 2 1 2 3 32.63
6 2 2 1 4 35.43
7 2 3 4 1 41.08
8 2 4 3 2 34.39
9 3 1 3 4 31.10
10 3 2 4 3 38.64
11 3 3 1 2 33.79
12 3 4 2 1 31.88
13 4 1 4 2 33.04
14 4 2 3 1 30.18
15 4 3 2 4 38.31
16 4 4 1 3 29.13
X1 36.097 32.737 33.130 34.330
X2 35.880 34.777 34.422 34.022
X3 33.852 38.097 33.720 34.903
X4 32.665 32.883 37.223 35.240
R 3.432 5.360 4.093 1.218
表 3 愈伤组织诱导结果方差分析
Table 3 Variance analysis of callus induction
因素 偏差平方和 F 值 显著性
A 32.727 9.038
B 74.722 20.636 P＜0.05
C 39.368 10.872 P＜0.05
误差 3.620
F0.05(3, 3)＝9.280 F0.01(3, 3)＝29.500
由表 2 结果可以看出，愈伤组织诱导率最高的是
7 号组合 A2B3C4，即华重楼愈伤组织诱导的最佳培养
基配方为 MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 1.5 mg/L＋
2,4-D 3.0 mg/L，经培养 55 d 后统计愈伤组织的诱导
率最高为 41.08%。
由表 2 极差值（R）大小分析结果表明，影响
愈伤组织诱导率高低因素依次为 B＞C＞A，即培养
基中 NAA 对愈伤组织诱导的影响最大，其次是
2,4-D，影响最小的是 6-BA。
从表 3 的方差数据分析结果可见，本实验设置
的 3 个因素中 B 和 C 2 个因素对实验结果有显著性
影响。其中因素 B 检验值 F＝20.636，F0.05(3, 3)＝
9.280，F0.01(3, 3)＝29.500，F0.05＜F＜F0.01，因而因
素 B 有显著影响（0.01＜P＜0.05）；因素 C 检验值
F＝10.872，F0.05(3, 3)＝9.280，F0.01(3, 3)＝29.500，
检验值 F0.05＜F＜F0.01，说明因素 C 有显著影响
（0.01＜P＜0.05）；因素 B 检验值 F＝20.636 大于因
素 C 检验值 F＝10.872，所以影响愈伤组织诱导率
的最主要因素为培养基中 NAA 的质量浓度，其次
为培养基中 2,4-D 的质量浓度，此结果与极差分析
的结果相吻合。
李群等[14]以展叶时旺盛生长的根茎作外植体，
其愈伤组织的诱导率最高为 16.6%，并且诱导出的
愈伤组织质地较疏松、易纤维化，失去增殖能力。
本研究利用重楼植物的根茎为外植体，采用不同的
培养基配方，并且将外植体接入愈伤组织诱导培养
基之后先置于 6 ℃的冰箱中低温处理，因为低温有
促进根茎外植体细胞打破休眠和完成脱分化进行快
速分裂的能力，可使愈伤组织诱导率最高达到
41.08%，同时还具有防止褐化的作用。
3.2 不定芽的诱导
将选取的愈伤组织（图 1-A），接入按正交试验
设计（表 4）的培养基中，在 2 种条件下先后分别
培养 30 d 后统计其不定芽诱导率，并对实验结果进
行极差分析和方差分析，结果见表 5 和 6。
由表 5 结果可以看出，不定芽诱导率最高的是
10 号组合 D3E2F4G3，即华重楼不定芽诱导的最佳培
养基配方为 MS＋6-BA 3.0 mg/L＋IAA 0.3 mg/L＋
KT 1.0 mg/L＋头孢曲松钠 300 mg/L，经培养 60 d
后统计不定芽的诱导率最高为 49.05%。
由表 5 极差 R 值大小分析结果表明，影响不定
芽诱导率高低因素依次为 D＞G＞E＞F，即培养基
中 6-BA 对不定芽诱导的影响最大，其次是头孢曲
松钠，影响最小的是 KT。
从表 6 的方差数据分析结果可见，本实验设置
的 4 个因素中 D 和 G 2 个因素对实验结果分别有极
显著和显著影响。其中因素 D 检验值 F＝35.846，
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A-根茎诱导产生愈伤组织 B-由愈伤组织诱导产生不定芽 C-不定芽诱导生根形成组培苗 D-移栽成活的华重楼幼苗
A-callus induced by roots B-adventitious buds induced by callus C-adventitious roots induced by adventitious buds to formation tissue culture
seedling D-survival seedling of P. polyphylla var. chinensis by transplanting
图 1 华重楼再生植株诱导及移栽过程
Fig. 1 Inducing and transplanting of plant regeneration of P. polyphylla var. chinensis
表 4 不定芽诱导因子水平表
Table 4 Factors and levels of adventitious buds induction
水平 D/(mg·L−1) E/(mg·L−1) F/(mg·L−1) G/(mg·L−1)
1 1.0 0.1 0.1 0
2 2.0 0.3 0.3 200
3 3.0 0.5 0.5 300
4 4.0 1.0 1.0 500
F0.01＝29.500，检验值 F＞F0.01，因而因素 D 有极显
著影响（P＜0.01）；因素 G 检验值 F＝29.465，F0.05(3,
3)＝9.280、F0.01(3, 3)＝29.500，检验值 F0.05＜F＜
F0.01，说明因素 G 有显著影响（0.01＜P＜0.05）；所
以影响不定芽诱导率的最主要因素为培养基中 6-BA
的质量浓度，其次为培养基中添加的头孢曲松钠的
质量浓度，此结果与极差分析的结果相吻合。
表 5 不定芽诱导 L16(44) 正交试验设计与结果
Table 5 Results of adventitious buds induction by L16(44) orthogonal test
编号 D E F G 误差 不定芽诱导率/%
1 1 1 1 1 1 25.13
2 1 2 2 2 2 31.14
3 1 3 3 3 3 33.32
4 1 4 4 4 4 31.05
5 2 1 2 3 4 37.86
6 2 2 1 4 3 35.18
7 2 3 4 1 2 28.32
8 2 4 3 2 1 35.54
9 3 1 3 4 2 46.32
10 3 2 4 3 1 49.05
11 3 3 1 2 4 47.04
12 3 4 2 1 3 32.56
13 4 1 4 2 3 40.04
14 4 2 3 1 4 29.35
15 4 3 2 4 1 40.33
16 4 4 1 3 2 42.16
Y1 30.160 37.337 37.377 28.840 37.513
Y2 34.225 36.180 35.472 38.440 36.985
Y3 43.742 37.252 36.133 40.597 35.275
Y4 37.970 35.328 37.115 38.220 36.325
R 13.582 2.009 1.905 11.757 2.238
A B C D
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表 6 不定芽诱导结果方差分析
Table 6 Variance analysis on adventitious buds induction
因素 偏差平方和 F 值 显著性
D 399.934 35.846 P＜0.01
E 10.970 0.983
F 9.347 0.838
G 328.739 29.465 P＜0.05
误差 11.160

刘萍等[15]研究报道，在组织培养过程中青霉素
对愈伤组织的诱导、分化及试管苗的生长有很大影
响，适宜质量浓度的青霉素对诱导叶片愈伤组织的
产生有抑制作用，而对愈伤组织的分化有促进作用，
对试管苗的生长也有促进作用，同时也促进根系的
发育。青霉素和头孢曲松钠都是医用抗生素，本研
究在不定芽诱导培养基中特别添加并研究了不同质
量浓度头孢曲松钠对不定芽诱导的影响，结果表明
添加适宜质量浓度的头孢曲松钠有促进华重楼芽分
化的作用，这与刘萍等[15]的研究结果一致，说明适
宜质量浓度的抗生素有激素的作用。
3.3 不定根的诱导
当不定芽长至 1.0 cm 以上时（图 1-B），将不定
芽连同其基部的愈伤组织一同切下并转接到按正交
试验设计（表 7）的生根培养基中，培养 55 d 后统
计其生根率，并对试验结果进行极差分析和方差分
析，结果见表 8、9。
表 7 不定根诱导因子水平表
Table 7 Factors and levels of adventitious roots induction
水平 H/(mg·L−1) I/(mg·L−1) J/%
1 0.1 0.1 0.1
2 0.3 0.2 0.3
3 0.5 0.3 0.5
4 1.0 0.5 1.0
由表 8 结果可以看出，不定根诱导率最高的是 9
号组合 H3I1J3，即华重楼不定根诱导的最佳培养基配
方为 1/2 MS＋IBA 0.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋活性炭
0.5%，经培养 55 d 后统计不定根的诱导率最高为
100%，培育的组培苗见图 1-C。
由表 8 R 值大小分析结果表明，影响不定根诱
导率高低因素依次为 H＞J＞I，即培养基中 IBA 对
不定根诱导的影响最大，其次是活性炭，影响最小
的是 NAA。
从表 9 的方差数据分析结果可见，本实验设置
的 3 个因素中 H 和 J 2 个因素对试验结果有极显著
影响。其中因素 H 检验值 F＝86.719，F0.01(3, 3)＝
表 8 不定根诱导 L16(43) 正交试验设计与结果
Table 8 Results of adventitious roots induction by L16 (43)
orthogonal test
编号 H I J 误差 不定根诱导率/%
1 1 1 1 1 80.69
2 1 2 2 2 89.87
3 1 3 3 3 90.35
4 1 4 4 4 79.63
5 2 1 2 3 85.64
6 2 2 1 4 84.81
7 2 3 4 1 82.63
8 2 4 3 2 86.31
9 3 1 3 4 100.00
10 3 2 4 3 88.97
11 3 3 1 2 90.37
12 3 4 2 1 97.65
13 4 1 4 2 82.64
14 4 2 3 1 92.25
15 4 3 2 4 85.27
16 4 4 1 3 84.35
Z1 85.135 87.242 85.055 88.305
Z2 84.847 88.975 89.607 87.297
Z3 94.248 87.155 92.227 87.328
Z4 86.127 86.985 83.468 87.427
R 9.401 1.990 8.759 1.008

表 9 不定根诱导结果方差分析
Table 9 Variance analysis on adventitious roots induction
因素 偏差平方和 F 值 显著性
H 240.038 86.719 P＜0.01
I 10.377 3.749
J 195.992 70.806 P＜0.01
误差 2.770

29.500，检验值 F＞F0.01，因而因素 H 有极显著影响
（P＜0.01）；因素 J 检验值 F＝70.806，F0.01(3, 3)＝
29.500，检验值 F＞F0.01，说明因素 J 有极显著影响
（P＜0.01）；因素 H 检验值 F＝86.719 大于因素 J 检
验值 F＝70.806，所以影响不定根诱导率的最主要因
素为培养基中 IBA 的质量浓度，其次为培养基中添
加的活性炭的质量分数，此结果与极差分析的结果
相吻合。
杨丽云等[16]采用 1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L＋IAA
0.5 mg/L 的生根培养基，将分化出的芽切下，接种
于培养基上进行根的诱导，在培养过程中芽的基部
逐步褐化伸长成根茎状，培养 60 d 左右，在褐化伸
长前端芽的基部可长出2～3条根，生根率为76.3%。
本研究选择当不定芽长至 1.0 cm 以上时，将不定芽
按1～2个为1组连同其基部的愈伤组织一同切下并
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转接到生根培养基中，由实验结果可以看出采用本
研究所选择的培养基配方，不定根诱导率最低为
79.63%，最高可达 100%。本研究选择了和杨丽云
等[16]研究中不同的培养基配方，并在培养基中特别
添加了活性炭，由以上实验结果分析可以看出，培
养基中添加的活性炭浓度对不定根的诱导有极显著
的影响，可见培养基中加入活性炭可以促进不定根
生长，提高不定根诱导率。
3.4 炼苗和移栽
选取生长健壮的组培苗（图 1-C），先在无菌水中
栽培一段时间（0、3、5、7 d），再移栽至土壤中，培
养 30 d 后统计组培苗成活率，统计结果见表 10。
杨丽云等[16]在移栽时将根长为 2～3 cm 的芽取
出，洗净培养基后移栽于腐殖质土中，置于 18～20
℃温度下，土壤湿度保持 50%～60%，180 d 左右芽
可生长出土展叶，形成完整植株，出土展叶成活率
为 65%。本研究选取长出第一片叶且不定根长出 4
条以上的组培苗进行移栽，并且在移栽至土壤前先
在无菌水中栽培一段时间，由表 10 可以看出先在无
菌水中栽培 5 d 后再移栽至土壤中成活率可高达
100%。
表 10 组培苗的移栽时期和水培时间对组培苗成活率的影响
Table 10 Impact of tissue culture seedling survive rate by
transplanting period and hydroponic time
编号 组培苗的移栽时期
水培时
间/d
成活
率/%
A1 组培苗未长出第 1 片叶且不定根
少于 2 条
5 30.62
A2 组培苗长出第 1 片叶且不定根长
出 4 条以上
0 56.12
A3 组培苗长出第 1 片叶且不定根长
出 4 条以上
3 94.23
A4 组培苗长出第 1 片叶且不定根长
出 4 条以上
5 100.00
A5 组培苗长出第 1 片叶且不定根长
出 4 条以上
7 91.45

由表 10 中 A1 和 A4 可以看出，选取重楼组培苗
移栽的时期非常重要，同样在移栽至土壤前先水培
5 d 的条件下，选还未长出第 1 片叶且不定根数少于
2 条的重楼组培苗，移栽后成活率仅为 30.62%；而
选长出第 1 片叶且不定根长出 4 条以上的重楼组培
苗，成活率可达到 100%。由 A2 可以看出，若组培
苗从培养瓶中取出，不进行水培直接移栽至土壤，
成活率较低，仅为 56.12%；由 A3～A5 可以看出重
楼组培苗在移栽到土壤前，在选定的培养条件下进
行一定时间的水培后，可明显提高组培苗的成活率，
使成活率高达 90%以上；由 A4 可以看出，组培苗
从培养瓶中取出先水培 5 d 后再移栽至土壤中效果
最好，可使成活率高达 100%。即应选择长出第 1
片叶且不定根长出 4 条以上的组培苗进行移栽，并
且在移栽至土壤前应先在无菌水中栽培 5 d，以提高
组培苗的成活率。
4 讨论
张翔宇等[17]利用组织培养来繁殖重楼的难度
很大，只有芽段可成功诱导出植株，而茎尖、根
茎和子房虽可诱导愈伤组织，都存在增殖、分化
以及诱导率低等问题。本研究选择根茎上带芽体
的茎节为外植体诱导愈伤组织，再在愈伤组织的
基础上进一步完成其不定芽的诱导与无根苗生
根，从而获得华重楼组培苗，解决了华重楼以组
织培养技术获得再生植株难的问题，为华重楼优
良品种的培育和组培苗的大量快速繁殖提供了一
条新途径，可实现华重楼植物在短时间和低成本
条件下大批量生产。
在不定根的诱导培育中，还发现选取的不定芽必
须要连同其基部的愈伤组织一同切下后，再转接到生
根培养基中才能最终培育出不定根，这可能是与华重
楼植物的器官结构特点有关；因为华重楼植物的不定
根主要都是从其根茎上长出的，而在华重楼组培苗培
育过程中，其不定芽基部的愈伤组织是可进一步形成
组培苗的根茎；所以，通过本实验研究可以得知，在
华重楼组培苗的生根培养过程中，选取的不定芽需连
同其基部的愈伤组织是非常重要的。
在华重楼组培苗移栽时，采用了先将组培苗用
水培养一段时间后，再移栽至土壤中栽培的新方法，
使组培苗的成活率大大地提高了。分析其原因可能
是因为培育的华重楼组培苗自身结构特点决定了对
水的需求，以及本研究筛选的适宜水培条件的结果。
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中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 19 期 2015 年 10 月

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