全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 9 期 2012 年 9 月

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盐酸青藤碱醇质体的制备及其体外经皮渗透研究
姜素芳，胡姣艳，何丽华
湖南师范大学医学院，湖南 长沙 410013
摘 要：目的 制备盐酸青藤碱醇质体并考察醇质体作为盐酸青藤碱经皮给药载体的渗透特性。方法 采用注入法制备盐酸
青藤碱醇质体，并对其形态、粒径及包封率进行分析；采用透皮扩散仪，以小鼠皮肤进行体外透皮试验，比较盐酸青藤碱在
水溶液、脂质体以及醇质体中的透皮行为。结果 制得的盐酸青藤碱醇质体外形圆整，平均粒径为 88.7 nm，包封率为 62.8%，
累积透皮量和透皮速率均明显高于盐酸青藤碱脂质体和水溶液。结论 醇质体能明显促进盐酸青藤碱的经皮渗透，有望成为
盐酸青藤碱透皮给药的新载体。
关键词：盐酸青藤碱；醇质体；经皮渗透；脂质体；注入法
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)09 - 1738 - 04
Sinomenine hydrochloride ethosome preparation and its transdermal penetration
JIANG Su-fang, HU Jiao-yan, HE Li-hua
Medical College, Hunan Normal University, Changsha 410013, China
Abstract: Objective To prepare sinomenine hydrochloride ethosome and evaluate the transdermal penetration of sinomenine
hydrochloride taking ethosome as carrier. Methods Sinomenine hydrochloride ethosome was prepared with injection method and its
appearance, particle size, and entrapment efficiency (EE) were analyzed. In transdermal test of mice, the transdermal behavior and
accumulated permeation amounts of sinomenine hydrochloride in ethosome, liposomes, and water solution were compared by using
Franz diffusion device. Results The shape of the sinomenine hydrochloride ethosome was spherical in an average diameter of 88.7 nm
and the EE was 62.8%. The accumulated permeation amounts and permeation rates were significantly higher than those in liposomes
and water solution. Conclusion The ethosome could greatly improve the transdermal penetration of sinomenine hydrochloride and it
may be a potential carrier for transdermal use.
Key words: sinomenine hydrochloride; ethosome; transdermal penetration; liposomes; injection method

盐酸青藤碱（sinomenine hydrochloride）具有
抗炎、抗心律失常、镇痛、镇静、镇咳等药理作
用，主治类风湿性关节炎等各种风湿性疾病以及
心律失常，临床疗效确切[1]。该药口服制剂的胃肠
道不良反应较大，生物利用度低，注射剂半衰期
短，需频繁给药[2]。因此，透皮给药不失为一种较
为理想的给药方式。醇质体是由磷脂、乙醇、水
组成的新型的具有脂质体双分子层结构的囊泡给
药载体，近年来作为新型透皮给药载体的研究日
益增多。相关研究发现醇质体可促进药物穿透皮
肤并能增加药物在皮肤中的蓄积[3-4]。本实验将盐
酸青藤碱制成醇质体，并通过体外经皮渗透试验，
比较了盐酸青藤碱在醇质体、脂质体和水溶液 3
种不同载体中的体外透皮行为差异，旨在为盐酸
青藤碱的临床给药寻求一种更为合理的新的给药
系统。
1 仪器与材料
探针式超声仪（美国 Branson 公司）；激光散射
粒径分析仪（美国 Brookhaven 公司）；78HW—1 型
恒温磁力搅拌器（江苏省金坛市荣华仪器制造有限
公司）；紫外可见分光光度计（北京莱伯泰科仪器有
限公司）；Agilent 1101 型高效液相色谱仪（美国安
捷伦）；RYJ—6A 型药物透皮扩散试验仪（上海黄
海药检仪器有限公司）。

收稿日期：2012-03-01
基金项目：湖南省科技厅项目（2009SK3115）
作者简介：姜素芳（1972—），女，湖南邵阳人，副教授，硕士，目前主要从事药物新型给药系统的研究。E-mail: sufang_jiang@sina.com
网络出版时间：2012-08-16 网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/12.1108.R.20120816.1042.006.html
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 9 期 2012 年 9 月

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盐酸青藤碱（湖南正清制药有限公司，质量分
数 98.7%），卵磷脂（德国 Lipoid 公司），乙腈为色
谱纯，其他试剂均为分析纯。昆明种小鼠（体质量
18～22 g），由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提
供，许可证号：SCXK（湘）2009—0004。
2 方法与结果
2.1 盐酸青藤碱醇质体的制备
采用注入法制备：称取处方量的盐酸青藤碱和
卵磷脂，用无水乙醇溶解，置于磁力搅拌器上，在
密闭条件下边搅拌边缓慢细流注入磷酸盐缓冲液
（PBS），继续搅拌 30 min，于冰水浴中探头式超声
30 s（超声 3 s、停 2 s），以 0.22 μm 微孔滤膜滤过，
即得盐酸青藤碱醇质体。
2.2 正交试验筛选处方和工艺
根据单因素考察结果，选择对醇质体制备影响
较大的 3 个主要因素：卵磷脂与盐酸青藤碱的质量
比（A）、PBS 的 pH 值（B）、乙醇体积分数（C）
进行正交试验设计，每个因素取 3 个水平，以包封
率为考察指标，按 L9(34) 正交表安排试验。试验设
计及结果见表 1，方差分析见表 2。
由表 1、2 可知，各因素的影响大小依次为 A＞
B＞C，其中因素 A 具有极显著影响（P＜0.01），因
素 B、C 具有显著影响（P＜0.05）；最佳工艺组合
为 A3B2C1，即卵磷脂与盐酸青藤碱的质量比为 10∶
1，PBS 的 pH 值为 6.8，乙醇体积分数为 30%。在
此优化条件下制备 3 批盐酸青藤碱醇质体，测得其
包封率分别为 61.2%、63.3%、63.8%。

表 1 L9(34) 正交试验设计及结果
Table 1 Design and results of L9(34) orthogonal test
试验号 A B C / % D 包封率 / %
1 5∶1 (1) 6.5 (1) 30 (1) (1) 46.0
2 5∶1 (1) 6.8 (2) 35 (2) (2) 49.8
3 5∶1 (1) 7.1 (3) 40 (3) (3) 37.2
4 7.5∶1 (2) 6.5 (1) 40 (3) (2) 37.6
5 7.5∶1 (2) 6.8 (2) 30 (1) (3) 50.7
6 7.5∶1 (2) 7.1 (3) 35 (2) (1) 40.4
7 10∶1 (3) 6.5 (1) 35 (2) (3) 55.6
8 10∶1 (3) 6.8 (2) 40 (3) (1) 61.1
9 10∶1 (3) 7.1 (3) 30 (1) (2) 60.4
K1 133.0 139.2 157.1 147.5
K2 128.7 161.6 145.8 147.8
K3 177.1 138.0 135.9 143.5
R 48.4 23.6 21.2 4.0
表 2 方差分析
Table 2 Analysis of variance
方差来源 离均差平方和 自由度 F 值 显著性
A 478.429 2 124.526 P＜0.01
B 117.796 2 30.660 P＜0.05
D 75.016 2 19.525 P＜0.05
C (误差) 3.842 2
F0.05(2, 2)＝19.00 F0.01(2, 2)＝99.00
2.3 盐酸青藤碱脂质体的制备
采用逆相蒸发法[5-6]制备：称取卵磷脂、胆固醇
于圆底烧瓶中，加氯仿溶解，另取盐酸青藤碱溶于
PBS，再与上述氯仿溶液混合，探头式超声处理 10 s
使形成 W/O 型乳剂，45 ℃减压旋转蒸发除去氯仿，
得半固体胶状物，再以适量 PBS 水合，于冰水浴中
探头式超声 30 s（超声 3 s、停 2 s），以 0.22 μm 微
孔滤膜滤过，即得盐酸青藤碱脂质体。
2.4 包封率和载药量的测定[7]
2.4.1 线性关系考察 精密称取干燥盐酸青藤碱
100.0 mg，置 250 mL 量瓶中，用蒸馏水定容，得
400 μg/mL对照品储备液。分别精密移取储备液1.0、
2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 50 mL 量瓶中，蒸
馏水定容。在紫外分光光度计 272 nm 波长处测定
吸光度（A）值。结果表明，盐酸青藤碱质量浓度
（C）与 A 值在 8.0～80.0 μg/mL 线性关系良好，回
归方程 C＝66.078 9 A＋3.907 3，r＝0.999 8，日内
和日间精密度的 RSD 分别为 1.32%、2.18%（n＝5），
平均回收率为 99.7%，RSD 为 1.56%（n＝5）。
2.4.2 盐酸青藤碱醇质体和脂质体的包封率和载药
量的测定 采用透析法。分别精密吸取 1.0 mL 醇质
体和脂质体混悬液置透析袋中，封口，将透析袋浸
入 20 mL pH 6.8 的 PBS 中，置 25 ℃恒温水浴中
振荡，每 2 h 更换 1 次透析介质，在紫外分光光度
计 272 nm 处测定 A 值，代入回归方程，计算盐酸青
藤碱游离药物累积透出量 W 游。另取相同质量浓度
盐酸青藤碱的 PBS 1.0 mL 于透析袋，同上平行操
作，结果 8 h 已全部透出。按 8 h 透析完全，根据下
列公式计算盐酸青藤碱醇质体和脂质体的包封率和
载药量。
包封率＝(W 总－W 游) / W 总
载药量＝(W 总－W 游) / W 类脂
W 总为投药量，W 游为未包入脂质体的游离药物的量，W 类脂
为处方中固体脂质材料的总质量
测得盐酸青藤碱醇质体和脂质体的平均包封率
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分别为 62.8%、54.2%，载药量分别为 6.28%、4.34%。
2.5 盐酸青藤碱醇质体的外观形态及粒径
将制备得到的盐酸青藤碱醇质体样品稀释适当
倍数，用磷钼酸负染色后，置于电子显微镜下观察
样品的大小及形态。结果显示盐酸青藤碱醇质体形
状规则，近似球形，大小较均匀，见图 1。激光散
射粒径分析仪测得盐酸青藤碱醇质体的粒径大小及
分布见图 2，平均粒径为 88.7 nm。



图 1 盐酸青藤碱醇质体电镜照片
Fig. 1 Electron micrographs of sinomenine
hydrochloride ethosome




图 2 盐酸青藤碱醇质体的粒径分布图
Fig. 2 Particle size distribution of sinomenine
hydrochloride ethosome

2.6 体外透皮试验
2.6.1 色谱条件 色谱柱为 Hypersil GOLD C18柱
（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.01
mol/L NaH2PO4（15∶85），柱温为 30 ℃，体积流
量为 1 mL/min，检测波长为 266 nm，进样量为 20
μL。在此色谱条件下，辅料和试剂对盐酸青藤碱测
定无干扰，盐酸青藤碱的保留时间约为 5.7 min[5]。
2.6.2 线性关系考察 精密称取盐酸青藤碱对照品
10 mg，置 50 mL 量瓶中，用 pH 6.8 的 PBS 溶解并
稀释至刻度，得质量浓度为 200 μg/mL 的对照品储
备液。分别精密吸取储备液 0.25、0.5、1.0、1.5、
2.0、3.0、4.0 mL 于 10 mL 量瓶中，加 PBS 至刻度，
摇匀，得质量浓度为 5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、
60.0、80.0 μg/mL 的系列对照品溶液，分别取 20 μL
进样，以峰面积积分值（Y）为纵坐标，质量浓度
（X）为横坐标，进行线性回归，得回归方程 Y＝16.12
X＋4.38，r＝0.999 5，线性范围 5.0～80.0 μg/mL；
精密度 RSD 为 2.31%（n＝5）；平均回收率为 99.7%，
RSD 为 1.82%（n＝5）。
2.6.3 体外透皮试验[8-9] 取昆明种小鼠，颈椎脱臼
处死，剪毛，剪下小鼠腹部皮肤，小心去除皮肤上
的短毛、皮下组织和筋膜，保证皮肤角质层的完整，
用生理盐水漂洗干净，浸泡，备用。将皮肤外层朝
上平铺固定在扩散池和接收池之间（透皮扩散面积
2.8 cm2，接收池体积 6.5 mL），通过取样管在接收
池内注满接收介质 PBS（pH 6.8），使液面与皮肤内
层接触，排除接收池中的气泡。精密吸取 0.2 mL 盐
酸青藤碱醇质体、脂质体、水溶液（3 种溶液中盐
酸青藤碱质量浓度均为 3.5 mg/mL）涂布于皮肤表
面，自然干燥，在 37 ℃保持恒速搅拌，转速为 600
r/min，于试验开始后的 2、4、6、8、12、16、20、
24 h 定时取样 1 mL，以 0.45 μm 微孔滤膜滤过，并
及时补充相同体积的新鲜接收介质，排除接收室中
的气泡。取续滤液注入高效液相色谱仪中，测定盐
酸青藤碱峰面积，代入回归方程求出相应盐酸青藤
碱质量浓度，计算其累积透过量（Qn）[10-11]。
Qn＝(6.5 Cn＋
1
1
n
i
−
=
∑ Ci×1) / 2.8
2.8 为透皮扩散面积（cm2），6.5 为接收池体积（mL），Cn
为第 n 个取样点测得的盐酸青藤碱质量浓度，Ci 为该取样点
前各取样点测定的盐酸青藤碱质量浓度
以时间 t 为横坐标，Qn 为纵坐标，绘制经皮渗
透曲线（图 3），以盐酸青藤碱 Qn 对 t 进行线性回归，
所得回归方程的斜率即为透皮速率（Js）。盐酸青藤
碱醇质体、脂质体和水溶液的 Js 分别为 2.403、
0.878、0.416 μg/(cm2·h)。结果表明，3 种不同载体
的盐酸青藤碱经皮渗透吸收有显著区别，醇质体的
皮肤 Qn 和 Js均明显高于其脂质体和水溶液。
3 讨论
在盐酸青藤碱醇质体的制备过程中发现，采用
注入法制备醇质体时，将盐酸青藤碱溶于无水乙醇
可显著提高其包封率，同时乙醇体积分数以及卵磷
脂的质量浓度对所形成醇质体的粒径及包封率都有
50.0 500.0
粒径 / nm
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图 3 盐酸青藤碱醇质体、脂质体和水溶液的经皮渗透曲线
(n＝5)
Fig. 3 Transdermal penetration curves of sinomenine
hydrochloride in ethosome, liposome,
and water solution (n＝5)

较大的影响，乙醇体积分数越高，醇质体粒径越小；
卵磷脂质量浓度越大，醇质体粒径越大，包封率越
高。因此综合考虑醇质体的粒径和包封率，最终处
方确定乙醇体积分数为 30%，卵磷脂质量浓度为 35
mg/mL，卵磷脂和盐酸青藤碱的质量比为 10∶1。
皮肤角质层是外源性物质如药物经皮透入体内
的主要屏障。角质层细胞间隙孔径约为 30 nm。脂
质体具有刚性，无法直接穿过比其自身小的角质层
细胞间隙，因此在经皮转运过程中易沉积于皮肤表
层，不易进入皮肤深部[8]。水溶液与皮肤的生物相
容性差，药物呈游离状态，不利于细胞渗透和靶向
分布。而醇质体由于乙醇的加入使得双分子层膜具
有良好的柔韧性和流动性，在经皮传递过程中易于
变形，因而更容易穿过皮肤屏障进入皮肤深部甚至
体循环，促进药物的经皮转运[12]，本实验也再次验
证了这一点。
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醇质体
脂质体
水溶液
0 5 10 15 20 25
t / h
70
60
50
40
30
20
10
0
Q
n /
(μ
g·
cm
−2
)