全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 17 期 2013 年 9 月

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• 药剂与工艺 •
RRLC-QTOF/MS 研究不同比例制川乌与瓜蒌配伍前后化学成分变化
许妍妍，程丽丽，李遇伯，王 晖，陈 宁，张艳军*
天津中医药大学中药学院 天津市中药化学与分析重点实验室，天津 300193
摘 要：目的 分析制川乌与瓜蒌配伍前后化学成分变化规律，为阐释制川乌与瓜蒌配伍禁忌提供物质基础。方法 利用
RRLC-QTOF/MS 分析制川乌与瓜蒌配伍提取液，色谱柱为 Agilent Zorbax Eclipse Plus C18柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm），
流动相为 0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱；采用 Mass Hunter Workstation 软件和偏最小二乘判别法进行化合
物鉴别和差异分析；以化合物与内标峰面积之比来表示化学标志物的相对质量分数。结果 采用此方法共检测到制川乌-瓜
蒌合煎液中 65 种化学成分，进一步鉴别了其中 57 种成分，15 种成分在配伍前后有差异，其溶出受制川乌与瓜蒌配伍比例
的变化影响。结论 RRLC-QTOF/MS 方法灵敏、准确，能够较全面反映制川乌与瓜蒌配伍前后化学成分的变化；从体外化
学物质基础角度分析，中药“十八反”之乌头与瓜蒌是否相反尚无定论，还需结合体内实验进一步深入研究。
关键词：RRLC-QTOF/MS；制川乌；瓜蒌；配伍；化学成分
中图分类号：R283.21 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2013)17 - 2372 - 08
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.17.007
Chemical constituent changes of Aconiti Cocta Radix before and after combination
with Trichosanthes Fructus in different ratios by RRLC-QTOF/MS
XU Yan-yan, CHENG Li-li, LI Yu-bo, WANG Hui, CHEN Ning, ZHANG Yan-jun
Tianjin Key Laboratory of Chinese Chemistry and Analysis, College of Chinese Materia Medica, Tianjin University of Traditional
Chinese Medicine, Tianjin 300193, China
Abstract: Objective To analyze the chemical constituent changes of Aconiti Cocta Radix (ACR) before and after combination with
Trichosanthes Fructus (TF) in different ratios and to provide the material bases for the incombination. Methods The rapid resolution
liquid chromatography with quadrupole and time-of-flight mass spectrometry (RRLC-QTOF/MS) was used to analyze the extract
solution from ACR and TF combination. The chromatographic separation was achieved on an Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 column
(100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm) with 0.1% formic acid water solution-0.1% formic acid in acetonitrile solution as mobile phase for
gradient elution. Mass Hunter Workstation and partial least squares-discriminant analysis (PLS-DA) were utilized for the identification
of components and chemical biomarkers. Peak-area ratio of the analyte/internal standard was used to represent the contents of the
variance analysis. The amounts of chemical markers were indicated by the ratio of compound and internal standard peak area.
Results By an overall analysis of RRLC-QTOF/MS, a total of 65 compounds were detected in the extracts from ACR in combination
with TF, including 57 compounds with confirmed structures and 15 compounds with significant differences before and after
combination, and the relative dissolution rates were affected by the changes of the combination ratios. Conclusion The sensitive and
accurate RRLC-QTOF/MS method could fully reflect the chemical constituent changes of ACR before and after combination with TF.
On the basis of in vitro chemical constituent and contents, it is still unclear whether the combination of ACR and TF should be
prohibited, which requires further in vivo investigation.
Key words: RRLC-QTOF/MS; Aconiti Cocta Radix; Trichosanthes Fructus; combination; chemical constituent


收稿日期：2013-03-26
基金项目：国家重点基础研究发展计划（973 计划）资助项目（2011CB505300，2011CB505302）
作者简介：许妍妍（1983—），女，讲师，博士，研究方向为中药分析及代谢动力学。E-mail: candyxyy@gmail.com
*通信作者 张艳军 Tel: (022)23051053 E-mail: zyjsunye@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 17 期 2013 年 9 月

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制川乌（Aconiti Cocta Radix，ACR）为毛茛科
乌头属植物乌头 Aconitum carmichaelii Debx. 的干
燥母根炮制品，为常见中药，其主要功能为祛风除
湿、温经止痛，用于风寒湿痹、关节疼痛及心腹冷
痛等[1]。《中国药典》2010 年版一部记载制川乌与
瓜蒌（Trichosanthes Fructus，TF）为“十八反”配
伍禁忌之一，而配伍禁忌产生的重要原因为配伍前
后药物化学成分的变化。有研究发现生川乌、生附
子与瓜蒌配伍的煎煮液中 3 种毒性双酯型生物碱的
量高于其单煎液[2-5]，制川乌与瓜蒌配伍后 3 种双酯
型生物碱的量降低[5]，但对其配伍前后化学成分变
化的全面分析的研究报道较少[6]。本实验以制川乌-
瓜蒌药对为研究对象，采用 RRLC-QTOF/MS 技术
分析其不同比例配伍前后的化学成分变化规律，以
期从体外化学物质基础角度全面探讨其是否“相反”
的科学内涵。
1 仪器与材料
Agilent 1200 液相系统、6520 四极杆-飞行时间
串联质谱系统（美国 Agilent 公司），BS224S 电子
天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司），KDM 型
可调控温电热套（山东省鄄城县新华电热仪器厂），
5804R 型离心机（德国 Eppendorf 公司）。
制川乌 Aconiti Cocta Radix、瓜蒌 Trichosanthes
Fructus 分别购自四川江油、江苏洪泽，经天津中医
药大学李天祥副教授鉴定，分别为毛茛科乌头属植
物乌头 Aconitum carmichaelii Debx. 的干燥母根炮
制加工品、葫芦科栝楼属植物栝楼 Trichosanthes
kirilowii Maxim. 的干燥成熟种子。乌头碱（批号
110720-200410）、次乌头碱（批号 110798-200805）、
新乌头碱（批号 110799-200505）、苯甲酰乌头原碱
（批号 110797-200405）、苯甲酰次乌头原碱（批号
111796-201002）、苯甲酰新乌头原碱（批号 11795-
200901）均购自中国药品生物制品检定所，氧化苦
参碱由山东省分析测试中心重点实验室提供，经
HPLC 峰面积归一化法测得其质量分数＞98%。乙
腈、甲醇均为色谱纯（韩国 Duksan 公司），甲酸为
色谱纯（美国 Sigma 公司），无水乙醇为分析纯（天
津市广成化学试剂有限公司），娃哈哈纯净水。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲
酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原
碱各 1.0 mg，分别置 1 mL 量瓶中，乙腈溶解并稀
释至刻度，配制成 1 mg/mL 储备液。
精密量取各储备液 100 μL，乙腈逐步稀释成 10
μg/mL 的工作液。精密量取各溶液 100 μL 于 1 mL
量瓶中，乙腈稀释至刻度，即制得 1 μg/mL 的混合
对照品溶液。
2.2 内标溶液的制备
精密称取氧化苦参碱 2.5 mg，置于 50 mL 量瓶
中，乙腈溶解并稀释至刻度，即制得 50 μg/mL 的内
标溶液。
2.3 供试品溶液的制备
2.3.1 配伍组供试液的制备 根据《中国药典》2010
年版推荐剂量制川乌 1.5～3 g/(d·人)，瓜蒌 9～15
g/(d·人) 设定配伍比例，固定制川乌质量，分别精
密称取制川乌粉末（过 3 号筛）1.0 g，置于 100 mL
圆底烧瓶中，加入 10 倍量蒸馏水浸泡 1 h 后，加热
回流提取 1 h，按制川乌-瓜蒌 6 种比例（4∶1、2∶
1、1∶1、1∶3、1∶5、1∶10）分别加入已精密称
取并单独浸泡 1 h 的瓜蒌粉末，合煎 0.5 h 后，4 000
r/min 离心 5 min，上清液转移至量瓶中；药渣加入
8 倍量蒸馏水，再煎煮 1.5 h，4 000 r/min 离心 5 min；
残渣加入 5 mL 蒸馏水混匀，4 000 r/min 离心 5 min，
洗涤 4 次，合并 6 次离心上清液，定容，备用。
2.3.2 单煎供试液的制备 精密称取制川乌粉末
（过 3 号筛）1.0 g，置 100 mL 圆底烧瓶中，加 10
倍量蒸馏水浸泡 1 h，共煎 2 次，第 1 煎 1.5 h，4 000
r/min 离心 5 min，上清液转移至容量瓶中；药渣加
入 8 倍量蒸馏水再煎 1.5 h，4 000 r/min 离心 5 min；
残渣加入 5 mL 蒸馏水混匀，4 000 r/min 离心 5 min，
洗涤 4 次，合并 6 次离心上清液，定容，备用。
精密称取瓜蒌粉末 1.0 g，置于 100 mL 圆底烧
瓶中，加 10 倍量蒸馏水浸泡 1 h，共煎 2 次，第 1
煎 0.5 h，4 000 r/min 离心 5 min，上清液转移至容
量瓶中；药渣加入 8 倍量蒸馏水再煎 1.5 h，4 000
r/min 离心 5 min；残渣加入 5 mL 蒸馏水混匀，4 000
r/min 离心 5 min，洗涤 4 次，合并 6 次离心上清液，
定容，备用。
进样前取适量溶液，10 000 r/min 离心 10 min，
精密量取 500 μL 上清液，加入 20 μL 氧化苦参碱溶
液（50 μg/mL）作为内标，涡旋混匀 1 min，即得
各供试品溶液。
2.4 色谱条件
色谱柱为 Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 柱
（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流动相为 0.1%甲酸
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水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈溶液（B），梯度洗脱：
0～2 min，1% B；2～5 min，1%～6% B；5～15 min，
6%～10% B；15～20 min，10%～20% B；20～31
min，20%～30% B；31～36 min，30%～50% B；
36～38 min，50%～70% B；38～39 min，70%～99%
B；39～41 min，99% B；体积流量 0.3 mL/min；柱
温 40 ℃；进样量 5 μL。
2.5 质谱条件
RRLC-QTOF/MS 系统在电喷雾正离子模式下
采集数据，质量扫描范围为 m/z 100～1 000，毛细
管电压 4 kV，雾化气压力 241.325 kPa，干燥气体积
流量 10 L/min，干燥气温度 350 ℃，Skimmer 65 V，
选取m/z 121.050 873 和m/z 922.009 798的内标离子
作实时质量数校正，测定样品前采用混标调谐液校
准质量轴。
2.6 方法学考察
2.6.1 精密度试验 按照“2.3.1”项下方法制备制
川乌与瓜蒌配伍组（1∶1）供试品溶液，连续进样
6 次，随机选取 20 个色谱峰，经计算，20 个色谱峰
峰面积积分值的 RSD 在 0.7%～1.8%，表明仪器精
密度良好。
2.6.2 重复性试验 按照“2.3.1”项下方法平行制
备 6 份制川乌与瓜蒌配伍组（1∶1）供试品溶液，
依次进样分析，选取“2.6.1”项下 20 个色谱峰，经
计算，各色谱峰峰面积积分值的 RSD 在 2.1%～
4.9%，表明方法精密度良好。
2.6.3 稳定性试验 按照“2.3.1”项下方法制备制
川乌与瓜蒌配伍组（1∶1）供试品溶液，分别在 0、
2、4、6、8、12、24 h 进样分析，选取“2.6.1”项
下 20 个色谱峰，经计算，各色谱峰峰面积积分值的
RSD 在 0.7%～2.0%，表明供试品溶液在 24 h 内稳
定，所以每批样品保证在 24 h 内测定。
2.7 样品测定
在方法学考察合格的基础上，按照“2.3”项下
方法制备制川乌与瓜蒌不同比例配伍供试品溶液
（n＝3），采用内标半定量方法进行测定，数据使用
Mass Hunter Workstation 进行色谱峰提取，基峰强度
色谱图（base peak intensity chromatogram，BPC）
见图 1。
2.8 结果分析
2.8.1 化学成分的鉴别 比较图 1 中瓜蒌单煎液、
制川乌单煎液和不同比例制川乌配伍瓜蒌共煎液可




图 1 不同比例制川乌与瓜蒌配伍药液 BPC 图
Fig. 1 BPC chromatograms for solution of ACR by combination with TF in different ratios

见，在本方法检测条件下未检测到瓜蒌中化学成分，
制川乌与瓜蒌不同配伍比例水提取液与制川乌单煎
液相比没有新化合物产生。在制川乌单煎液和不同
配伍提取液中共检测到 65 个成分，见图 2 和表 1。
化合物 43、46、47、56、60、61 通过与对照品对
比，分别鉴定为苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原
碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱以及
乌头碱，其余 59 种成分经 MS/MS 质谱分析以及文
献报道[7-26]对照，进一步推断了其中 51 种成分，鉴
定结果见表 1。
2.8.2 配伍前后化学成分的变化 将 Mass Hunter
Workstation软件处理后的数据导入SIMCA-P＋12.0
统计软件，进行偏最小二乘判别分析（partial least
squares-discriminant analysis，PLS-DA）[27-28]，数据
分析结果见图 3。由图 3 以及变量重要性投影
（variable importance plot，VIP）分析可知，制川乌
与瓜蒌不同比例配伍后有明显区分，筛选 VIP 值大
于 1 且与制川乌单煎液相比经 t 检验有显著性差异
100





50





0
相
对
丰
度
/
%

1∶10
1∶5
1∶3
1∶1
2∶1
4∶1
1∶0
0∶1
0 5 10 15 20 25 30 35 40
t / min
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图 2 制川乌与瓜蒌配伍药液 BPC 图
Fig. 2 BPC chromatograms for solution of ACR by combination with TF

表 1 制川乌与瓜蒌配伍药液化学成分鉴定结果
Table 1 Chemical constituents identified in solution for ACR by combination with TF
峰号 [M＋H]
+
(m/z)
t / min 分子式 化合物名称 峰号 [M＋H]
+
(m/z)
t / min 分子式 化合物名称
1 305.133 6 1.280 C20H34NO 未知化合物 1 27 436.233 6 15.339 C23H33NO7 pengshenine A
2 180.101 8 1.890 C10H13NO2 去甲猪毛菜碱 28 470.276 6 16.080 C24H39NO8 次乌头原碱
3 488.248 3 2.660 C23H37NO10 beiwutinine 29 454.280 5 16.280 C24H39NO7 附子灵（或其同分
4 268.104 4 3.124 C10H13N5O4 腺苷 异构体）
5 392.243 3 3.365 C22H33NO5 脱氢川附宁 30 438.285 5 17.620 C24H39NO6 尼奥灵
6 178.086 4 4.822 C10H11NO2 未知化合物 2 31 342.171 2 18.230 C20H23NO4 附子亭
7 472.248 7 5.819 C23H37NO9 N-deethylaconine 32 484.290 6 18.880 C25H41NO8 脱氧乌头原碱
8 394.259 6 6.301 C22H35NO5 10-羟基-多根乌头碱 33 454.281 2 19.360 C24H39NO7 附子灵（或其同分
9 440.263 4 6.575 C23H37NO7 9-羟基-森布星 A 异构体）
10 456.259 9 7.967 C23H37NO8 未知化合物 3 34 344.256 6 19.770 C22H33NO2 雪上一枝蒿甲素
11 208.132 9 8.503 C12H17NO2 猪毛菜定碱 35 422.290 7 20.680 C24H39NO5 塔拉地萨敏
12 394.258 8 8.657 C22H35NO5 川附宁 36 438.285 2 21.350 C24H39NO6 10-羟基-塔拉地萨敏
13 502.263 4 8.755 C24H39NO10 10-羟基-新乌头原碱 37 452.298 5 22.400 C25H41NO6 查斯曼宁碱
14 424.267 6 9.360 C23H37NO6 森布星 A 38 576.280 7 12.180 C30H41NO10 脱甲基苯甲酰新乌头
15 378.264 5 10.300 C22H35NO4 未知化合物 4 原碱
16 424.269 9 10.738 C23H37NO6 森布星 B 39 372.217 6 23.369 C22H29NO4 11-乙酰海替生
17 364.247 2 11.110 C21H33NO4 16-β-hydroxycardiopetaline 40 464.298 9 23.660 C26H41NO6 14-乙酰塔拉地萨敏
18 516.280 8 11.330 C25H41NO10 10-羟基-乌头原碱 41 606.294 9 23.930 C31H43NO11 10-羟基-苯甲酰新乌头
19 486.273 1 11.560 C24H39NO9 新乌头原碱 原碱
20 378.265 1 12.170 C22H35NO4 卡乌碱 42 620.307 4 25.390 C32H45NO11 10-羟基-苯甲酰乌头原碱
21 454.280 2 12.490 C24H39NO7 脱甲氧基脱氧乌头原碱 43 590.297 6 26.590 C31H43NO10 苯甲酰新乌头原碱
22 408.274 12.550 C23H37NO5 异塔拉定 44 540.293 8 27.360 C31H41NO7 未知化合物 5
23 358.238 4 13.000 C22H31NO3 宋果灵 45 544.291 4 27.620 C30H41NO8 3-乙酰-10-羟基-新乌头
24 500.285 1 13.760 C25H41NO9 乌头原碱 原碱
25 330.206 7 14.090 C20H27NO3 海替生 46 604.312 6 28.10 C32H45NO10 苯甲酰乌头原碱
26 406.259 1 15.219 C23H35NO5 脱甲基-14-乙酰多根 47 574.302 0 29.210 C31H43NO9 苯甲酰次乌头原碱
乌头碱 48 572.286 7 29.950 C31H41NO9 焦新乌头原碱
0 5 10 15 20 25 30 35 40
t / min
100





50





0
相
对
丰
度
/
%

1
2 3
4 5
6
7 8 9 10 11
12
13
IS
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34 35
36 37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57 5859
6061
62
63
64
65
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 17 期 2013 年 9 月

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续表 1
峰号 [M＋H]+ (m/z) t / min 分子式 化合物名称 峰号 [M＋H]+ (m/z) t / min 分子式 化合物名称
49 648.302 1 30.460 C33H45NO12 10-羟基-新乌头碱 57 662.316 9 33.110 C34H47NO12 10-羟基-乌头碱
50 558.306 2 30.665 C31H44NO8 脱氧苯甲酰次乌头原碱 58 614.295 4 34.061 C33H43NO10 2, 3-脱氢次乌头原碱
51 588.318 5 30.870 C32H45NO9 脱氧苯甲酰乌头原碱 59 570.307 2 34.915 C32H43NO8 焦脱氧乌头碱
52 618.289 2 31.487 C33H47NO10 8-乙氧基-14-苯甲酰新 60 616.310 9 35.140 C33H45NO10 次乌头碱
乌头原碱 61 646.323 5 35.250 C34H47NO11 乌头碱
53 530.309 7 31.790 C30H43NO7 未知化合物 6 62 600.316 8 35.748 C33H45NO9 脱氧次乌头碱
54 586.300 2 32.190 C32H43NO9 焦乌头碱 63 628.311 4 35.901 C34H45NO10 未知化合物 7
55 556.292 3 32.600 C31H41NO8 焦次乌头碱 64 700.277 0 36.360 C39H41NO11 未知化合物 8
56 632.307 8 32.740 C33H45NO11 新乌头碱 65 630.326 7 36.790 C34H47NO10 脱氧乌头碱




图 3 不同比例制川乌与瓜蒌配伍的 PLS-DA 得分图 (R2X＝0.988, R2Y＝0.984, Q2＝0.954)
Fig. 3 PLS-DA score plot of ACR by combination with TF in different ratios (R2X＝0.988, R2Y＝0.984, Q2＝0.954)

的 15 个化合物为化学标志物，结果见表 2。
2.8.3 化学标志物的质量分数变化 以化学标志物
的峰面积与内标物的峰面积之比来表示化学标志物
的相对质量分数，采用相对溶出率来反映制川乌与
瓜蒌配伍前后化学标志物的溶出变化。各化学标志
物通过与制川乌单煎液对比计算相对溶出率[29-31]，
化学标志物的溶出随瓜蒌比例增加的变化趋势见图
4。可见制川乌中毒性最大的双酯型生物碱乌头碱和
新乌头碱随瓜蒌比例的增加，溶出规律基本一致，
即当配伍比例为 2∶1 时，瓜蒌抑制了乌头碱和新乌
头碱溶出；当配伍比例达到 1∶1～1∶5 时，瓜蒌明
显促进了其溶出；随着配伍比例增加到 1∶10，瓜

表 2 制川乌与瓜蒌配伍药液的化学标志物
Table 2 Chemical markers of ACR by combination with TF
序号 [M＋H]+ (m/z) 化合物名称 VIP 序号 [M＋H]+ (m/z) 化合物名称 VIP
1 454.280 5 附子灵（或其同分异构体， 2.854 48 8 632.307 8 新乌头碱 1.274 46
tR＝16.280 min） 9 572.286 7 焦新乌头碱 1.271 31
2 178.086 4 未知化合物 2 1.852 21 10 452.298 5 查斯曼宁碱 1.186 34
3 305.133 6 未知化合物 1 1.548 46 11 180.101 8 去甲猪毛菜碱 1.148 91
4 488.248 3 beiwutinine 1.457 06 12 646.323 5 乌头碱 1.099 13
5 378.265 1 卡乌碱 1.444 86 13 570.307 2 焦脱氧乌头碱 1.097 48
6 472.248 7 N-deethylaconine 1.323 96 14 378.264 5 未知化合物 4 1.075 23
7 544.291 4 3-乙酰-10-羟基-新乌头原碱 1.296 77 15 424.267 6 森布星 A 1.046 16
t[2
]
10
8
6
4
2
0
−2
−4
−6
−8
−10
−18 −15 −12 −9 −6 −3 0 3 6 9 12 15 18
t[1]
1∶0
1∶0.25
1∶0.5
1∶1
1∶3
1∶5
1∶10
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A-双酯型二萜类生物碱 B-单酯型二萜类生物碱衍生物 C-醇胺型二萜类生物碱 D-其他类化合物
A-diester-diterpenoid alkaloids B-derivatives of monoester-diterpenoid alkaloids C-amine-diterpenoid alkaloids D-other compounds

图 4 不同比例制川乌与瓜蒌配伍化学标志物量的变化趋势图 (n＝3)
Fig. 4 Content change trends of chemical markers of ACR by combination with TF in different ratios (n＝3)

蒌明显抑制了其溶出。单酯型生物碱衍生物焦新乌
头碱和焦脱氧乌头碱整体上随配伍比例的增加呈逐
渐减少趋势，说明瓜蒌抑制了焦新乌头碱和焦脱氧
乌头碱的溶出。醇胺型生物碱附子灵（或其同分异
构体）在制川乌与瓜蒌 1∶1 配伍时显著降低，当配
伍比例增加到 1∶5～1∶10 时，瓜蒌促进附子灵（或
其同分异构体）的溶出，在其他配比下溶出率变化
较小。
未知化合物 1（m/z 305.133 6）在制川乌与瓜蒌
4∶1 配伍时，溶出略微降低；随着配伍比例增加到
2∶1 时，瓜蒌促进其溶出，当配伍比例增加到 1∶
1～1∶3 时，其溶出受到明显抑制，而配伍比例再
增加，未知化合物 1 溶出逐渐增加并在制川乌与瓜
蒌配伍达到 1∶10 时相对溶出率最高；其他化学标
志物随瓜蒌配伍比例的增加，均出现了影响溶出的
促进与抑制交替现象。
3 讨论
C19-乌头碱型二萜生物碱既是川乌的特征活性
成分，也是其毒性成分[32]。根据其结构特点，可分
为双酯型、单酯型、脂型和醇胺型二萜生物碱，其
中双酯型生物碱毒性最大，乌头碱、新乌头碱和次
乌头碱的小鼠 LD50 分别为 1.8、1.9、5.8 mg/kg[33-34]。
乌头类生物碱的活性、毒性与其结构有着密切的关
系，取代基位置、数目、种类的不同均可使川乌在
活性、毒性等方面有较大的差异。生川乌中双酯型
生物碱的量高，毒性较大，临床上常用其炮制品，
在川乌炮制过程中[33]，双酯型生物碱 C8、C14 位酯
键可逐渐水解，成为单酯型生物碱和醇胺型生物碱，
毒性明显降低（约为双酯型生物碱毒性的 1/200 和
1/2 000），提示双酯型生物碱的毒性与 C8、C14 位酯
键有关，而 C8 位乙酰氧基或乙氧基、C14 位的芳基
取代与川乌的镇痛活性密切相关[35]。
乌头与瓜蒌为“十八反”反药组合，存在配伍
禁忌，临床上瓜蒌常与乌头类药材配伍用于慢性胃
炎、心绞痛、痹症[36-39]等疾病治疗，疗效显著，因
此对其配伍禁忌的科学性至今仍存争议。配伍禁忌
产生的基础之一为配伍前后化学成分的变化，本实
验利用 RRLC 的快速高分离液相以及半定量 Q-
TOF/MS 质谱分析，从制川乌-瓜蒌配伍药液中检测
到 65 种乌头类生物碱成分，以单酯型生物碱和醇胺
型生物碱为主，双酯型生物碱较少，更全面揭示了
其体外化学内涵。研究结果表明，制川乌与瓜蒌合
煎、久煎提取时，制川乌中包括双酯型生物碱、单
酯型生物碱衍生物等 15 种化学标志物的溶出发生
变化，并随瓜蒌配伍比例的增加呈现溶出促进与抑
制的交替变化，表明在一定的配伍条件下，瓜蒌能
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
相
对
溶
出
率

乌头碱
新乌头碱
1∶0 1∶0.5 1∶3 1∶10
1∶0.25 1∶1 1∶5
制川乌与瓜蒌配伍比例
焦新乌头碱
焦脱氧乌头碱
卡乌碱
森布星 A
查斯曼宁碱
附子灵或其同
分异构体
N-deethylaconine
beiwutinine
3-乙酰-10-羟基-
新乌头原碱
去甲猪毛菜碱
未知化合物 1
未知化合物 4
未知化合物 2
1.6
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
相
对
溶
出
率

1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
相
对
溶
出
率

1.1
1.0
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
相
对
溶
出
率

1∶0 1∶0.5 1∶3 1∶10
1∶0.25 1∶1 1∶5
制川乌与瓜蒌配伍比例
A B
1∶0 1∶0.5 1∶3 1∶10
1∶0.25 1∶1 1∶5
制川乌与瓜蒌配伍比例
1∶0 1∶0.5 1∶3 1∶10
1∶0.25 1∶1 1∶5
制川乌与瓜蒌配伍比例
C D
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够影响制川乌化学成分的溶出。
中药化学成分复杂，作用机制复杂，配伍产生
毒/效除与药物基源、配伍比例、煎煮时间、化学成
分等相关外，更与体内药物代谢、患者病症等多方
面因素有密切联系。有研究报道[2,5,40]制川乌与瓜蒌
合煎后双酯型生物碱的量虽然降低，但制川乌配伍
全瓜蒌高剂量给药对正常大鼠肝脏、肾脏具有不可
逆的损伤，在适当剂量范围内，则具有可逆的消化
系统及肝肾毒性，对心衰病证模型动物具有改善症
候的作用。可见“十八反”配伍禁忌不是绝对的。
制川乌与瓜蒌配伍是否相反、为何反以及如何反等
科学问题，还需结合作用物质基础、体内代谢、药
理作用、辨证论治等多方面进行更全面、系统、科
学的深层次研究与探讨。
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