全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 5 期 2011 年 5 月

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高效液相色谱法测定祁木香药材中异土木香内酯和土木香内酯
侯志飞 1，张勉之 2，李 洪 1，王 刚 1*，张利敏 1
1. 河北化工医药职业技术学院 制药工程系，河北 石家庄 050026
2. 天津市公安医院，天津 300040
摘 要：目的 建立祁木香药材中有效成分异土木香内酯和土木香内酯的测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为
Kromacil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），检测波长为 194 nm，以乙腈-0.05%磷酸水溶液（60∶40）为流动相，体积流量
1.0 mL/min。结果 异土木香内酯和土木香内酯的线性范围分别为 0.475～4.75 μg（r＝0.999 2）和 0.38～3.8 μg（r＝0.999 3）；
平均回收率分别为 98.3%和 98.0%。所收集的 5 个来源的祁木香药材中异土木香内酯和土木香内酯的量无明显差异，且异土
木香内酯的量均高于土木香内酯的量。结论 该法简便、可靠、准确，可用于祁木香药材的质量控制。
关键词：祁木香；异土木香内酯；土木香内酯；高效液相色谱法；土木香
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)05 - 0916 - 03
Determination of isoalantolactone and alantolactone in Inulae Radix by HPLC
HOU Zhi-fei1, ZHANG Mian-zhi2, LI Hong1, WANG Gang1, ZHANG Li-min1
1. Department of Pharmaceutical Engineering, Hebei Chemical and Pharmaceutical Vocation College, Shijiazhuang 050026, China
2. Tianjin Gong’an Hospital, Tianjin 300040, China
Key Words: Inulae Radix; isoalantolactone; alantolactone; HPLC; Inula helenium L.

祁木香为菊科植物的干燥根，《中国药典》中以
土木香 Inula helenium L.收载，由于在河北安国大量
种植，故冠以“祁”字。祁木香是八大祁药之一，
该药辛、苦，温，归肝、脾经，具有健脾和胃、行
气止痛、安胎的作用，用于治疗胸胁、脘腹胀痛、
呕吐泻痢、胸胁挫伤、岔气作痛、胎动不安[1]。2010
年版《中国药典》中土木香仅有性状鉴别、显微鉴
别和薄层鉴别，无定量鉴别。由于土木香中所含挥
发油成分较多[2-3]，近几年多见利用 GC 法对土木香
及其制剂进行测定的报道[4-7]，应用 HPLC 法的报道
较少[8-9]，所研究的药材多为青海、西藏等地所产藏
木香。为更好地控制祁木香药材及其制剂的质量，
并为其制定质量标准提供依据，本实验对祁木香
中土木香内酯和异土木香内酯的测定方法进行了
研究。
1 仪器与试药
美国 SSI PC—2000 高效液相色谱仪（美国
SSI 分析仪器有限公司），JD110—4 型电子天平
批号（沈阳龙腾电子有限公司）。土木香内酯对
照品（批号 110760-200507）、异土木香内酯对照品
（批号 0761200-002）均由中国药品生物制品检定所
提供，甲醇、乙腈（色谱纯，天津市康科德科技有
限公司），其余试剂均为分析纯。祁木香药材由市场
购买和野外采集，经鉴定均为菊科植物土木香 Inula
helenium L.的干燥根。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Kromacil C18（250 mm×4.6 mm，5
μm，天津市兰博实验仪器设备有限公司）；流动相：
乙腈-0.05%磷酸水溶液（60∶40）；体积流量：1.0
mL/min；检测波长 194 nm；柱温: 30 ℃；进样量
20 μL。
2.2 溶液制备
2.2.1 对照品的制备 精密称取干燥至恒定质量的
异土木香内酯和土木香内酯对照品适量，加甲醇配
制得异土木香内酯和土木香内酯的混合对照品储备

收稿日期：2010-12-12
基金项目：河北省科技支撑计划项目（10276431）；河北化工医药职业技术学院院级课题（YZ1010）
作者简介：侯志飞（1982—），女，讲师，从事中药质量标准研究。Tel: 13230128533 E-mail: ffxlt@163.com
*通讯作者 王 刚 Tel: (0311)85110165 E-mail: gwez6997@163.com
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液，其质量浓度分别为 475 μg/mL 和 380 μg/mL。
精密吸取对照品储备液 2 mL，用甲醇定容至 10
mL，摇匀，得异土木香内酯和土木香内酯质量浓度
分别为 95 μg/mL 和 76 μg/mL 混合对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 祁木香药材于 40 ℃干
燥 40 min，粉碎后取约 0.2 g，精密称定，加 85%乙
醇 50 mL，回流提取 1 h，滤过，残渣加 85%乙醇
30 mL，继续回流 1 h，合并滤液，减压浓缩至约
40 mL，定量转移至 50 mL 量瓶中，加乙醇至刻度，
摇匀，滤过，精密量取滤液 25 mL，浓缩至近干，
残渣加甲醇溶解，转移至 25 mL 量瓶中，并用甲醇
稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。
2.3 系统适用性试验
分别吸取对照品溶液、供试品溶液各 20 μL，
注入液相色谱仪，记录色谱图（图 1），可见异土木
香内酯和土木香内酯的保留时间分别为 19.726 和
20.999 min，在此条件下异土木香内酯与土木香内
酯达到基线分离，且与其他组分峰分离良好，异土
木香内酯和土木香内酯的理论板数分别为11 481和
11 434。


1-异土木香内酯 2-土木香内酯
1-isoalantolactone 2-alantolactone
图 1 混合对照品（A）和祁木香样品（B）HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC Chromatograms of mixed reference substances (A) and Inulae Radix (B)
2.4 线性关系考察
精密吸取对照品储备液 5 mL，采用倍比稀释法
制得系列混合对照品溶液，分别进样 20 μL，测定
其峰面积，以进样质量浓度为横坐标，峰面积为纵
坐标，进行线性回归，得异土木香内酯和土木香内
酯的标准曲线方程分别为：异土木香内酯 Y＝82 464
X－106，r＝0.999 2，在 0.475～4.75 μg/mL 线性关系
良好；土木香内酯 Y＝110 438 X－859 049，r＝
0.999 3，在 0.38～3.8 μg/mL 线性关系良好。
2.5 精密度试验
取对照品溶液，按“2.1”项条件测定，连续进
样 6 次，异土木香内酯峰面积的 RSD 为 0.93%，土
木香内酯峰面积的RSD为 0.86%，表明精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别于 0、3、6、10、16 h
进样测定，结果异土木香内酯峰面积的 RSD 为
0.83%，土木香内酯峰面积的 RSD 为 0.91%，表明
供试品溶液在所考察的 16 h 内稳定。
2.7 重复性试验
取同一药材，按“2.2.2”项方法制备 6 份供试
品溶液，依法测定，供试品溶液中异土木香内酯质
量分数的 RSD 为 0.95%，土木香内酯质量分数的
RSD 为 0.88%，表明重复性良好。
2.8 加样回收率试验
精密称取已测定的祁木香药材 6 份，每份 0.1 g
分别加入异土木香内酯和土木香内酯对照品适量，
按“2.2.2” 项方法制备供试品溶液，依法测定。异
土木香内酯的平均回收率为 98.3%，RSD 为 1.30%；
土木香内酯的平均回收率为 98.0%，RSD 为 2.05%。
2.9 样品测定
将不同来源祁木香药材按“2.2.2”项方法制备
供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，计
算得各样品中土木香内酯和异土木香内酯的量，结
果见表 1。
3 讨论
3.1 流动相的选择
实验中对流动相的组成和比例进行了研究，分
别考察了不同比例的甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.05%
磷酸水溶液等流动相系统，结果表明以乙腈-0.05%
磷酸水溶液（60∶40）作为流动相时异土木香内酯
和土木香内酯达到基线分离，峰形较好，且保留时
间适中，分离度较好。

0 5 10 15 20 25 30 0 5 10 15 20 25 30
A B 1 2
1 2
t / min
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表 1 样品测定结果
Table 1 Determination of isoalantolactone and alantolactone
药材来源 异土木香内酯/% 土木香内酯/%
河北安国大营村（采集） 2.50 1.63
河北安国霍庄村（采集） 2.31 1.61
河北安国马古村（采集） 2.26 1.50
河北安国药材市场（购买） 2.32 1.56
河北安国药材市场（购买） 2.28 1.54
3.2 检测波长的确定
分别取异土木香内酯和土木香内酯对照品溶
液，在 190～400 nm 扫描，均在 193～195 nm 有最
大吸收，检测波长定为 194 nm。
3.3 提取方法
通过对不同提取方法（超声、加热回流）、不同
溶剂（甲醇、氯仿、醋酸乙酯、乙醇）、不同提取时
间的考察来选择最佳提取方法。经比较采用 85 %乙
醇进行加热回流的方法能完全提取药材中的异土木
香内酯和土木香内酯，且价廉、无污染，因此确定
85%乙醇回流提取 2 次，每次 1 h 为最佳提取条件。
4 结论
本实验中仅对 5 个不同来源的祁木香药材进行
了测定，结果表明所收集药材中异土木香内酯和土
木香内酯的量较为稳定，无明显差异，且异土木香
内酯的量均高于土木香内酯的量。
本实验建立的祁木香中异土木香内酯和土木香
内酯的定量测定方法简便、快速，可用于祁木香药
材的质量控制，并为其质量标准的制定提供了依据。
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