全 文 ：3　讨论
3.1　检测波长的确定:取柚皮苷对照品溶液及加流
动相制成的对照品溶液(0.01 mg/mL), 在 200 ～
400 nm 测紫外吸收光谱 ,结果在 213 、227 、283 、326
nm 处有吸收峰 ,最大吸收波长为 213 nm , 227 nm
处次之 ,再次为 283 nm;由于 213 nm 和 227 nm 处
于末端 ,因此选择(283±1)nm 作为测定波长 。
3.2　色谱条件的考察:比较了甲醇-水-冰醋酸
(40∶60∶0.5)、乙腈-水-醋酸(15∶85∶0.5)、乙腈-
0.05 mo l/L 磷酸二氢钾(15∶8)、乙腈-0.3%醋酸
溶液(17∶83)。结果发现本实验采用的流动相在相
对弱酸条件下分离效果理想 ,保留时间适中 ,峰形较
好。在色谱条件的试验选择中 ,发现柱温对保留时
间影响较大 ,柱温在 25 ℃适宜。
3.3　提取溶剂的选择:分别采用 70%乙醇 、甲醇 、
70%甲醇 、50%甲醇作为提取溶剂 , 结果发现用
50%甲醇和 70%甲醇测定的结果最高 ,70%乙醇的
测定值次之 ,甲醇测定值最低;故采用 70%甲醇为
供试品溶液提取溶剂 。由于本品中水溶性杂质较
多 ,用正丁醇对样品进行了处理 ,以降低色谱柱的负
荷;同时考察了正丁醇的提取次数 ,结果表明萃取 3
次即可提取完全。
参考文献:
[ 1] 　中国药典[ S].一部.2005.
[ 2] 　王跃生 ,饶　毅 ,魏惠珍 ,等.HPLC-“内标”多控法测定四逆散
中芍药苷 、柚皮苷 、橙皮苷 、甘草酸和新橙皮苷 [ J].中草药 ,
2008 , 39(9):1316-1319.
HPLC法测定前列舒乐颗粒中淫羊藿苷
郑　林 ,刘　毅 ,卢锦辉＊
(贵阳中医学院 ,贵州 贵阳　550002)
摘　要:目的　建立 HPLC 法测定前列舒乐颗粒中淫羊藿苷 。方法　采用 H PLC 法 , Diamonsil(Water s)C18色谱柱
(150 mm×4.6 mm , 5 μm);乙腈-水(28∶72)为流动相;检测波长 270 nm;体积流量 1.0 mL/ min;柱温 25 ℃。结
果　淫羊藿苷在 104.96 ～ 314.88 μg 线性关系良好 , r=0.999 9 , 平均回收率为 99.85%, RSD为 1.218。结论　本
实验方法准确可行 ,重复性好 , 可用于前列舒乐颗粒中淫羊藿苷的质量控制。
关键词:前列舒乐颗粒;淫羊藿苷;高效液相色谱
中图分类号:R286.02　　　文献标识码:B　　　文章编号:0253-2670(2010)07-1115-02
　　前列舒乐颗粒来源于贵州苗族验方 ,由淫羊藿 、
黄芪 、川牛膝 、车前草等组方而成 ,用于肾脾双虚 ,气
滞血瘀 ,前列腺增生 ,慢性前列腺炎;神疲乏力 ,腰膝
疲软无力 ,小腹坠胀 ,小便不爽 ,点滴不出 ,或尿频 、
尿急 、尿道涩痛 。方中重用淫羊藿补肾壮阳 ,祛风除
湿 ,增精益髓 ,为君药 ,具有补肾益气 、化瘀通淋的功
能。该制剂原质量标准中无测定项 。为了有效控制
产品质量 ,实验选用淫羊藿苷作为检测指标 ,参照淫
羊藿苷的测定方法[ 1 ～ 3] ,采用高效液相色谱法进行
测定 。方法准确可行 ,重现性好 ,可有效地控制制剂
的质量。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪:Waters2487双通道紫外检测
器 ,Waters 515 泵(Waters),威玛龙色谱数据工作
站(南宁市威玛龙色谱科技有限公司)。科导超声仪
器(工作频率 59 kHz ,功率 250 W)。AUY220万分
之一电子天平(上海良平仪器仪表有限公司)。Et-
t lerab204 —S 十万分之一电子天平(梅特勒-托利多
仪器上海有限公司)。
淫羊藿苷对照品(批号 110737-200312)购自中
国药品生物制品检定所 ,前列舒乐颗粒由贵阳东伟
药业有限公司提供(批号 20080302 、20080303 、
20080305 、20080306)。
乙腈(天津市大茂化学试剂厂)、甲醇(上海星可
生化有限公司)为色谱纯 ,乙醇(成都金山化学有限
公司)、甲醇(上海振兴化工一厂)为分析纯 ,娃哈哈
牌纯净水。
2　方法与结果
2.1　色谱条件与系统适用性试验:Diamonsil(Wa-
ters)C18色谱柱(150 mm×4.6 mm ,5 μm);乙腈-水
·1115·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
＊ 收稿日期:2010-01-19　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　作者简介:郑　林(1964—),男 ,贵州人 ,副教授,研究方向为中药资源开发与利用。 E-mail:zhenglin zy@yahoo.com.cn＊贵阳中医学院药学系 09届毕业生
(28∶72)为流动相;检测波长 270 nm ;体积流量
1.0 mL/min;柱温 25 ℃。理论板数按淫羊藿苷峰
计算应不低于 1 500 。
2.2　对照品溶液的制备:精密称取淫羊藿苷对照品
13.12 mg 置 50 mL 量瓶中 ,加甲醇定容 ,精密吸取
1 mL 置 10 mL 量瓶中 ,再加甲醇定容 ,摇匀 ,即得
(含淫羊藿苷 26.24μg/mL)。
2.3　供试品溶液的制备:取本品精密称定前列舒乐
颗粒 1.0 g ,置于 25 mL 量瓶内 ,精密加入 60%乙醇
25 mL ,称定质量 ,超声 1 h ,放冷 ,再称定质量 ,用
60%乙醇补足减失的质量 ,摇匀 ,即得。
2.4　阴性溶液的制备:按制备工艺制备不含淫羊藿
药材的阴性颗粒 ,精密称取 1.0 mg 按供试品溶液
的制备方法制成阴性溶液 。
2.5　线性关系考察:精密吸取淫羊藿苷对照品溶液
4 、6 、8 、10 、12μL ,按上述色谱条件进样 ,测定色谱峰
面积 ,并以峰面积对进样量进行回归 ,得方程 Y =
2×106 X -135 168 , r=0.999 9 。
2.6　专属性试验:分别取淫羊藿苷对照品溶液 、供
试品溶液及缺淫羊藿的阴性对照溶液各 10 μL 注入
液相色谱仪 ,记录色谱。从图 1可知 ,在此色谱条件
下 ,淫羊藿苷峰与其他组分峰分离完全 ,在与淫羊藿
苷峰相同的保留时间处 ,阴性对照无干扰 。
＊-淫羊藿
＊-icarrin
图 1　淫羊藿苷对照品(A)、前列舒乐颗粒(B)和阴性对
照(C)的 HPLC图谱
Fig.1　HPLC Chromatograms of icarrin reference
substance(A), Qianlie Shule Granula(B),
and negative sample(C)
2.7　精密度试验:取供试品溶液(批号 20080302),
精密吸取 10 μL ,连续进样 3次 ,测定淫羊藿苷峰面
积 ,其 RSD为 0.98%。
2.8　重现性试验:取批号20080302样品6份 ,制备
供试品溶液 ,进样测定 ,计算淫羊藿苷的质量分数 ,
结果其 RSD为 1.20%。
2.9　稳定性试验:取同一供试品溶液(批号
20080302),于 0 、2 、4 、6 、12 h 测定 ,结果淫羊藿苷峰
面积的 RSD为 1.45%,表明在 12 h 内供试品溶液
的稳定性良好 。
2.10　回收率试验:采用加样回收法。精密称取样
品(批号 20080305 , 含淫羊藿苷 0.566 8 mg/g)6
份 ,取 0.5 g ,置于 25 mL 量瓶内 ,精密加入 26.24
μg/mL 淫羊藿苷对照品溶液 8 、10 、12 mL ,制备供
试品溶液 ,精密吸取 10 μL ,进样测定淫羊藿苷峰面
积 ,计算回收率 ,结果平均回收率为 99.85%, RSD
为 1.14%。
2.11　样品的测定:精密量取对照品溶液和供试品
溶液各 10 μL ,进样测定 ,外标法计算 ,结果见表 1 。
表 1　前列舒乐颗粒中淫羊藿苷的测定结果(n=2)
Table 1　Determination of icarrin in Qianlie
Shule Granula(n=2)
批号 淫羊藿苷/(mg· g -1) 批号 淫羊藿苷/(mg· g -1)
20080305 0.566 1 20080303 0.562 3
20080302 0.571 6 20080306 0.569 1
3　讨论
3.1　供试品溶液制备方法的选择:分别用甲醇超声
和回流的方法提取样品 ,结果显示超声和回流的结
果是一致的 ,超声提取操作方便 。
3.2　提取溶剂和时间的确定:提取溶剂的以不同体
积分数的甲醇和乙醇分别考察 ,以淫羊藿苷质量分
数作为考察指标 ,发现 60%甲醇和 60%乙醇提取的
效果好。鉴于乙醇价格便宜 ,安全无毒 ,所以选择
60%乙醇提取;选择乙醇超声提取 20 、40 、60 min进
行研究 ,以淫羊藿苷质量分数作为考察指标 ,结果表
明提取时间为 60 min时淫羊藿苷量高。故可以确
定提取溶剂为 60%乙醇 ,提取时间为 60 min 。
3.3　流动相的选定:对乙腈-水不同比例进行比较 ,
发现流动相为乙腈-水(28∶72)时 ,分离度较好 。
3.4　检测波长的选择:淫羊藿苷对照品溶液在 200 ～
300 nm 处有 2个吸收峰 。经过文献检索 273 nm 为
常用检测波长 ,经过实验验证了 273 nm 为最好选
择 ,故选择检测波长为 273 nm 。
参考文献:
[ 1] 　李　瑛 ,笔　雪.HP LC法测定益肾灵颗粒中淫羊藿苷的含量
[ J].中国药事 , 2007 , 21(11):904-905.
[ 2] 　叶英响 ,石森林 ,高　敏.HPLC法测定抗骨增生软胶囊中淫
羊藿苷[ J].中草药, 2008 , 39(9):1345-1346.
[ 3] 　王　蕊 ,张　锋.HP LC测定前列舒乐胶囊中淫羊藿苷的含量
[ J].时珍国医国药 , 2006 , 8(4):14-16.
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