全 文 ：酸、迷迭香酸、丹酚酸 B 的平均质量浓度分别为
21907 mg/ mL ( RSD 为 0125 %) 、01162 2 mg/ mL
( RSD 为 0164 %) 、01 450 5 mg/ mL ( RSD 为
0135 %) 、01129 9 mg/ mL (RSD 为 0183 %) 、01285 6
mg/ mL ( RSD 为 0173 %) 、01575 9 mg/ mL ( RSD 为
0152 %) 。
219 　回收率试验 :精密量取 015 mL 批号 08041101
冠心宁注射液 3 份 ,置 5 mL 量瓶中 ,分别加入混合
对照品溶液 116、118、210 mL ,用 20 %甲醇加至刻
度 ,摇匀。在上述色谱条件下 ,分别进样 20μL ,每
个加入量的溶液均连续进样 3 次 ,计算加样回收率 ,
结果丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、阿魏酸、迷迭香
酸、丹酚酸 B 的平均加样回收率分别为 9812 %
(RSD 为 0127 %) 、9814 % ( RSD 为 112 %) 、9912 %
(RSD 为 113 %) 、9819 % ( RSD 为 0196 %) 、9811 %
(RSD 为 0182 %) 、9913 %(RSD 为 0131 %) ( n = 9) 。
2110 　样品的测定 :取冠心宁注射液样品溶液 ,制备
供试品溶液 ,按上述色谱条件进样 ,用外标法计算各
成分的质量浓度 ,结果见表 2。从结果可见 ,不同厂
家、不同批号的原儿茶醛和阿魏酸的质量浓度接近 ,
但其他 4 种成分相差较大 ,说明该注射液的质量标
准有待进一步规范。
表 2 　冠心宁注射液中有效成分的测定结果( n = 5)
Table 2 　Determination of components in Guanxinning Injection ( n = 5)
样品
生产厂
批 号
丹参素
质量浓度/
(mg ·mL - 1 )
RSD/
%
原儿茶酸
质量浓度/
(mg ·mL - 1 )
RSD/
%
原儿茶醛
质量浓度/
(mg ·mL - 1 )
RSD/
%
阿魏酸
质量浓度/
(mg ·mL - 1 )
RSD/
%
迷迭香酸
质量浓度/
(mg ·mL - 1 )
RSD/
%
丹酚酸 B
质量浓度/
(mg ·mL - 1 )
RSD/
%
山西 　 06032212 21 900 01 25 01163 2 11 5 01 449 2 0136 01 124 8 01 58 01 2851 11 00 015741 01 53
石家庄 0801092 61 246 01 09 01201 1 11 3 01 400 5 0149 01 114 8 01 93 01099 4 01 56 016422 01 65
石家庄 08041101 41 677 01 06 01080 4 11 6 01 421 6 0109 01 112 0 01 49 01477 3 01 62 41 019 01 10
3 　讨论
经二极管阵列检测器对 6 种成分进行全波长扫
描 ,丹参素和原儿茶醛的最大吸收波长为 281 nm ,
原儿茶酸最大吸收波长为 260 nm ,阿魏酸在 320
nm 有较强吸收 ,迷迭香酸的最大吸收波长为 330
nm ,丹酚酸 B 的最大吸收波长为 286 nm。本实验
考察了采用不同检测波长时检出的信号强度和检测
灵敏度 ,结果在 286 nm 各组分信号较强 ,且基线稳
定 ,因此采用 286 nm 为检测波长。
　　文献报道[ 3 ] ,丹参素在高体积分数醇溶液中不
稳定 ,极易分解 ,建议用水溶解丹参素和原儿茶醛。
为了能够使样品溶液性质与流动相尽量相近而不影
响出峰效果 ,本实验采用 20 %甲醇溶解对照品。
参考文献 :
[ 1 ] 　郑虎占 1 中药现代化研究与应用 [ M ]1 北京 :学苑出版社 ,
19971
[ 2 ] 　曹　冬 ,黄喜茹 ,刘伟娜 ,等1 反相高效液相色谱法测定冠心宁
注射液中的丹参素和原儿茶醛[J ]1 色谱 ,2006 ,24 (5) :5331
[ 3 ] 　关大卫1 HPLC 法测定注射用丹参粉针中丹参素的含量[J ]1
药物分析杂志 ,1994 ,14 (3) :362371
HPLC2ELSD 法测定银杏滴丸中银杏内酯 A 、B 、C和白果内酯
高 　蓓 3
(天津市第一中心医院 药剂科 ,天津 300192)
摘 　要 :目的 　采用高效液相2蒸发光散射检测 ( HPLC2EL SD)法测定银杏滴丸中银杏内酯 A、B、C 及白果内酯。方
法 　样品以甲醇溶解 ,蒸干后水溶 ,醋酸乙酯提取处理。采用 HPLC2EL SD 法测定 ,ALLtech C18色谱柱 (250 mm ×
415 mm ,5μm) ;流动相 :甲醇2四氢呋喃2水 (35 ∶10 ∶65) ;体积流量 :018 mL/ min ;气速 :2185 L/ min ;漂移管温度 :
105 ℃;柱温 :30 ℃。结果 　银杏内酯 A、B、C 及白果内酯的平均加样回收率分别为 9815 %、10315 %、9917 %、
10116 % ,RSD 分别为 215 %、119 %、218 %、210 %。结论 　建立的滴丸制剂中银杏内酯 A、B、C 及白果内酯的定量
方法可行性好、简便、可靠。
关键词 :银杏滴丸 ;银杏内酯 A、B、C ;白果内酯 ; HPLC2EL SD
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :0253 2670 (2010) 02 0236 03
·632· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 2 期 2010 年 2 月
3 收稿日期 :2009206220　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :高　蓓 (1977 —) ,女 ,河北省故城县人 ,药师 ,毕业于天津中医药大学中药学专业 ,现工作于天津市第一中心医院药学部。
E2mail :gaojiapei @hot mail . com
　　银杏滴丸为我院中药新药 ,其为以银杏叶提取
物为主制成的滴丸制剂 ,具有降低血脂、血黏度、改
善脑供血不足等作用 ,主要用于冠脉循环不全引起
的心绞痛、胸闷、胸痛、气短 ;脑循环不全引起的神
经、精神障碍以及动脉硬化及高血压病所致的冠心
病、心绞痛、心肌梗死、脑梗死、脑血管痉挛的治疗。
银杏萜类内酯是其重要活性成分。关于银杏提取物
中银杏萜类内酯测定的方法有较多报道[1～4 ] 。由于
本制剂中成分复杂 ,互相干扰较多 ,增加了测定的难
度 ,因此本实验建立了一种简便的测定银杏滴丸中
银杏内酯 A、B、C 和白果内酯的方法 ,具有一定的参
考价值。
1 　仪器与试药
日本岛津 L C —10AD H PL C 仪 ;美国 ALLtech
公司 500elsd 蒸发光散射检测器 ; Cromtek Work2
Station 色谱工作站。
甲醇、乙腈为色谱纯 ;其他试剂均为分析纯 ;银
杏内酯 A (批号 08622200004) 、银杏内酯 B (批号
1108632200305 ) 、银 杏 内 酯 C ( 批 号 1108642
200304) 、白果内酯 (批号 1108652200303) 均购于中
国药品生物制品检定所。银杏滴丸由本院自制 ,规
格 25 mg/ 粒。
2 　方法与结果
211 　色谱条件 : Alltech C18 色谱柱 (250 mm ×415
mm ,5μm) ;流动相 :甲醇2四氢呋喃2水 (35 ∶10 ∶
65) ;体积流量 : 018 mL/ min ;气速 : 2185 L/ min ;漂
移管温度 :105 ℃;柱温 :30 ℃。理论塔板数按白果
内酯计不得低于 6 000 ,分离度按白果内酯、银杏内
酯 C 峰计算应大于 115。
212 　对照品溶液的制备 :精密称取银杏内酯 A、B、
C ,白果内酯对照品适量 ,加甲醇溶解并稀释成含银
杏内酯 A 1 mg/ mL 、银杏内酯 B 1 mg/ mL 、银杏内
酯 C1 mg/ mL 、白果内酯 2 mg/ mL 的对照品溶液。
213 　供试品溶液的制备 :取本品 50 粒 ,精密加入甲
醇 50 mL ,超声处理 20 min ,滤过 ,弃去初滤液 ,精密
量取续滤液 25 mL ,回收溶剂 ,残渣加水 10 mL ,水
浴温热使溶散 ,加入 2 滴 2 %盐酸 ,用醋酸乙酯振摇
提取 4 次 (15、10、10、10 mL ) ,合并提取液 ,用 20
mL 5 %醋酸钠溶液洗涤 ,分取醋酸钠溶液 ,用 10
mL 醋酸乙酯洗涤 ,合并醋酸乙酯提取液及洗液 ,用
水洗 2 次 ,每次 20 mL ,分取水洗液 ,用 10 mL 醋酸
乙酯洗涤 ,合并醋酸乙酯层 ,回收溶剂至干 ,残渣加
甲醇溶解 ,并转移至 5 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,
摇匀 ,通过孔径为 0145μm 的滤膜 ,即得。
214 　线性关系考察 :分别精密吸取对照品溶液
215、5、715、10、1215μL 注入液相色谱仪 ,测定峰面
积值。以峰面积自然对数为横坐标 ,进样量的自然
对数为纵坐标 ,进行线性回归 ,回归方程见表 1。
表 1 　线性回归方程
Table 1 　Linear regression equations
对照品 线性方程 相关系数 r线性范围/μg
白果内酯　 Y = 11379 4 X + 41 396 4 01 999 5 5123～261 13
银杏内酯 A Y = 11558 7 X + 41 211 8 01 999 6 2158～121 88
银杏内酯 B Y = 11528 9 X + 41 276 1 01 999 7 2170～131 50
银杏内酯 C Y = 11528 9 X + 41 276 1 01 999 3 2188～141 38
215 　精密度试验 :精密吸取对照品溶液 10μL ,注
入液相色谱仪 ,连续进样 5 次 ,测定峰面积 ,计算 ,结
果银杏内酯 A、B、C 及白果内酯的 RSD 分别为
0141 %、0138 %、0126 %、0131 %。
216 　重现性试验 :取同一批银杏滴丸 5 份 ,制备供
试品溶液 ,分别测定峰面积 ,结果银杏内酯 A、B、C
及白 果 内 酯 的 RSD 分 别 为 1158 %、0196 %、
1102 %、1128 %。
217 　稳定性试验 :取同一份银杏滴丸供试品溶液分
别于制备后的 0、1、2、3、8、16、24 h 进样 ,测定峰面
积 ,结果银杏内酯 A、B、C 及白果内酯的 RSD 分别
为 210 %、111 %、112 %、115 % ,说明供试液在 24 h
内稳定性良好。
218 　加样回收试验 :取 20061105 批银杏滴丸 25
粒 ,共 5 份 ,分别加入对照品溶液 2 mL ,制备供试品
溶液 ,进样测定 ,计算回收率 ,结果银杏内酯 A、B、C
及白果内酯的平均加样回收率分别为 9815 %、
10315 %、9917 %、10116 % , RSD 分别为 215 %、
119 %、218 %、210 %。
219 　样品测定 :取不同批号的银杏滴丸 ,制备供试
品溶液。分别精密吸取对照品溶液 5μL 、10μL ,供
试品溶液 20μL ,注入液相色谱仪 ,测定 ,用两点法
对数方程计算 ,结果见表 1 ,色谱图见图 1。
表 1 　银杏滴丸中有效成分的测定结果
Table 1 　Determination of active components
in Yinxing Dropping Pills
批　号
白果内酯/
(mg ·粒 - 1 )
银杏内酯 A/
(mg ·粒 - 1 )
银杏内酯 B/
(mg ·粒 - 1 )
银杏内酯 C/
(mg ·粒 - 1 )
总内酯/
(mg ·粒 - 1 )
20061105 01192 01139 01075 01 089 01495
20061106 01197 01142 01081 01 091 01495
20061107 01208 01143 01094 01 111 01556
20061108 01214 01158 01080 01 092 01544
20061109 01178 01130 01096 01 120 01524
3 　讨论
关于银杏提取物中银杏萜类内酯测定的方法有
·732·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 2 期 2010 年 2 月
12银杏内酯 C 　22白果内酯　32银杏内酯 A 　42银杏内酯 B
12ginkgolide C 　22bilobalide 　32ginkgolide A 　42ginkgolide B
图 1 　对照品( A)和银杏滴丸( B)的 HPLC图谱
Fig11 　HPLC Chromatograms of reference substances ( A)
and Yinxing Dropping Pills ( B)
较多报道 ,但对于在制剂中 ,特别是滴丸剂中银杏萜
类内酯测定的报道很少 ,这是因为在滴丸制剂中成
分复杂 ,互相干扰较多 ,增加了测定的难度。本实验
建立了一种简便的滴丸剂中银杏萜类内酯的测定方
法 ,具有一定的参考价值。
参考文献 :
[ 1 ] 　单鸣秋 ,张　丽 ,曹雨诞1 HPLC2EL SD 法测定银杏叶提取物
中内酯的含量[J ]1 中草药 ,2004 ,35 (12) :1366213681
[ 2 ] 　刘利群 ,刘天扬 ,金 　涛1 HPLC2EL SD 法测定银杏叶口腔崩
解片中的银杏内酯含量[J ]1 中国药师 ,2006 ,9 (6) :52925301
[3 ] 　颜玉贞 ,谢培山1 HPL C2EL SD 法测定银杏叶中的 4 种萜类内
酯含量[J ]1 药物分析杂志 ,2001 ,21 (3) :17321761
[4 ] 　张亚中 ,周亚球 ,王 娟 ,等 1 HPLC2EL SD 法测定银杏叶软胶
囊中萜类内酯的含量[J ]1 中成药 ,2005 ,27 (1) :222241
丹参产业化提取中近红外在线检测技术的研究
张爱军1 ,戴 　宁2 ,赵国磊1 3
(11 天津天士力现代中药资源有限公司 ,天津 　300410 ; 21 天津天士力集团研究院 ,天津 　300410)
摘　要 :目的 　以丹参提取过程为研究对象 ,利用近红外在线检测技术 ,摸索建立出一种生产级别的中药提取过程
在线控制方法。方法 　将近红外检测仪器连接在提取设备上 ,在线采集提取液的近红外光谱 ,同时采集提取液样
本并检测样本中的丹酚酸 B 质量浓度 ,使用化学计量学方法建立起在线检测模型。结果 　以丹酚酸 B 为检测成分
建立丹参在线检测模型 ,模型的相关系数为 01989 9 ,校正均方差为 01185 ,模型预测均方差为 01303。结论 　应用
近红外在线检测技术 ,建立了丹酚酸 B 检测模型 ,实现了对丹参提取生产过程的在线监控。
关键词 :丹参 ;近红外光谱 ;丹酚酸 B ;在线检测
中图分类号 :R28412 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :0253 2670 (2010) 02 0238 03
　　近红外技术是 20 世纪 80 年代后 ,随着计算机
技术、化学计量学技术及仪器分析技术的发展和应
用 ,逐渐发展起来的一门独立的分析技术 ,在国外近
红外光谱分析技术广泛应用在石油、烟草、农业、药
品和食品等多个领域[1 ] 。中药在我国有着悠久的应
用历史 ,中药中主要的药用有效成分如酚酸类、黄酮
类、生物碱等含有大量的 X2H 基团 ,在近红外谱段
内有较强吸收 ,因此近红外光谱分析适用于对中药
质量的分析研究 ,并在药材的真伪鉴别、产地分类、
制剂包衣厚度测定等方面取得了一定的成果[2 ,3 ] 。
同时利用近红外光谱技术实现对中药提取过程的质
量控制应用方面也多有报道[ 4 ] 。本研究旨在通过使
用近红外光谱技术实现对使用生产型设备进行丹参
提取的生产过程的在线检测 ,监测丹参中的有效成
分的变化情况 ,为生产工艺的优化和生产参数的调
整提供数据支持 ,提高中药生产过程的质控水平 ,最
终实现提取生产过程的规范管理和标准化操作。
1 　仪器与材料
AN TA RIS 傅里叶近红外分析仪 , DCS ( Dis2
t ributed Cont rol System ,集散控制系统) , Result2
Integration 工作流程设计软件 , RESUL T2Opera2
tion 操作软件 ; Agilent 1100 高效液相色谱仪 ;
JJ 2000 型精密电子天平 ;500L 多功能提取设备。
丹参产于陕西商洛 ,经天士力现代中药资源有
限公司质检部鉴定为丹参 S al vi a mi l t iorrhi z a
Bunge 的干燥根茎 ;丹酚酸 B 对照品 (中国药品生物
制品检定所) ;甲醇、乙腈 (色谱纯) ,甲酸 (分析纯) 。
2 　方法与结果
211 　丹参提取液的制备 :称取丹参药材 ,加 6 倍量
水 ,药液沸腾后 ,保持微沸状态 ,开启药液循环管路 ,
提取 2 h ,放液 ,药渣再加入 5 倍量水 ,药液沸腾后 ,
保持微沸状态 ,开启药液循环管路 ,提取 1 h ,放液 ,
·832· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 2 期 2010 年 2 月
3 收稿日期 :2009204202