全 文 ：在胰腺癌肿瘤细胞增殖过程中发挥极其重要的作
用,而化疗药物通过对 ki267 因子的调节发挥其抗
癌作用。诱导肿瘤细胞凋亡是药物治疗肿瘤的重要
途径之一。利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺
口末端标记 ( TUNEL) 技术,对裸鼠肿瘤组织中的
凋亡细胞进行观察和比较,在本实验中三氧化二砷
处理组与模型组相比, 凋亡细胞明显增多, 提示三氧
化二砷可诱导肿瘤细胞凋亡,从而抑制肿瘤的发生、
发展。李利等[ 9]研究发现三氧化二砷组中 TUNEL
细胞的阳性率较模型组明显增加,通过诱导 HL260
肿瘤细胞凋亡发挥其抗肝癌效应。
本研究主要证实了三氧化二砷的体内抗肿瘤作
用,对其作用机制的研究只处于初步探讨阶段, 也缺
乏同期进行的体外对照研究, 这有待于下一步研究
实现。
综上所述,作为一种新型的抗癌药物, 三氧化二
砷与吉西他滨作用相当,且高剂量的三氧化二砷显
示出更强的抗癌效应, 此种作用主要通过抑制肿瘤
细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡而实现, 至于其具体
的作用机制尚需进一步研究明确。
参考文献:
[ 1] Grimwade D, Jovanovic J V, H ill s R K, et al . Prospect ive
minimal r esidual disease monitoring to p redict relapse of acute
p romyelocyt ic leu kemia and to direct pre2empt ive arsenic t ri2
oxide th erapy [ J ]1 J Cl in Oncol , 2009, 27( 22) : 3650236581
[ 2] Cheng B, Yang X, An L, et al . Arsenic triox ide2 induced ap2
optosis of H ep22 cell line throuth modulat ing in tracellular glu2
t ath ione ( GSH ) level [ J]1 Au ris N asus Lar ynx , 2009, 10
( 24) : 1011210161
[ 3] 钱晓萍, 刘宝瑞, 殷海涛, 等1 氧化砷对 MR2细胞耐药转运
分子作用的研究 [ J ]1 中华肿瘤杂志, 2004, 26 ( 10 ) :
60126051
[ 4] Monzen H , Griffin R J , Williams B W, et al . Study of ars e2
nic t rioxide2in duced vascular shutdown and enhancement with
radiation in solid tumor [ J]1 Rad iat Med , 2004, 22( 4) : 2052
2111
[ 5] Li X, Ding X, Adrian T E1 Arsen ic t rioxide in hibit s prolife2
rat ion and indu ces apoptosis in pan creat ic cancer cel ls [ J]1
Ant icancer Res, 2002, 22( 4) : 2205222131
[ 6] Li X, Ding X, Ad rian T E1 Arsenic t rioxide in duces apopto2
si s in pancr eatic can cer cells via changes in cell cycle, caspase
act ivation, and GADD expr ess ion [ J]1 Pancreas, 2003, 27
( 2) : 17421791
[ 7] Xiao Y F, Liu S X, Wu D D, et al . Inhibiory effect of ars e2
nic tr iox ide on angiogenesis and ex pres sion of vascu lar endo2
thelial growth factor in gast ric can cer [ J]1 Wor ld J Gastr oen2
ter ol , 2006, 12( 36) : 5780257861
[ 8] Mohamad N A, Cricco G P, Sambuco L A1 Aminogu anidin e
impedes human pancreat ic tumor growth and metastas is d e2
velopmen t in n ude mice [ J]1 World J Gast roenter ol , 2009,
15( 9) : 1065210711
[ 9] 李 利, 孟凡义, 扶云碧, 等1 硼替佐米或联合三氧化二砷
治疗 HL260 白血病细胞移植瘤裸鼠的实验研究 [ J]1 南方医
科大学学报, 2007, 27( 10) : 1504215061
制首乌总多糖对骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体
和转录因子 GATA21 mRNA表达的影响
冯雪梅1 ,祝彼得1 , 吕 艳2¹
( 11 成都中医药大学基础医学院, 四川 成都 610075; 21 四川大学华西基础与法医学院, 四川 成都 610041)
摘 要:目的 观察制首乌总多糖 (PPS) 对放、化疗所致骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体 ( EpoR) 及
转录因子 GATA21 mRNA 表达的影响,探讨 PPS 补血作用的分子机制。方法 建立骨髓抑制贫血小鼠模型, 提
取 PPS,经 ip 给药,观察其对骨髓抑制贫血小鼠外周血及脾脏 EpoR 和 GATA21 mRNA 表达的影响。结果 PPS
能促进骨髓抑制贫血小鼠外周血象恢复, 并明显上调脾脏 EpoR 和 GATA21 mRNA 的表达。结论 PPS 能通过
促进 EpoR 和 GATA21 mRNA 的表达,从而促进骨髓抑制贫血小鼠造血功能的恢复。
关键词:制首乌总多糖; 骨髓抑制; 贫血小鼠; 促红细胞生成素受体 ( EpoR) ; GATA21
中图分类号: R2861 1 文献标识码: A 文章编号: 0253- 2670(2010) 01- 0093- 04
造血生长因子通过与造血细胞表面的受体结
合,从而通过多种信号转导途径,影响靶基因在细胞
中的表达,调控造血细胞的存活、增殖、分化与凋亡。
制首乌具有补肝肾、益精血的作用, 既往研究表明,
制首乌总多糖 ( PPS) 能促进骨髓抑制贫血小鼠造
血祖细胞增殖、增加骨髓有核细胞数[ 1]。本实验通
#93#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 1 期 2010年 1月
¹ 收稿日期: 2009203219
基金项目:国家自然基金资助项目 ( 30271661)
作者简介:冯雪梅( 1964 ) ) ,女,四川省成都人,博士,副教授,主要从事中西医结合基础研究。
Tel: ( 028) 88046486 E2mai l: fxmcd@yahoo. com. cn
过观察其对外周血及脾脏促红细胞生成素受体
( EpoR) 及转录因子 GATA21 mRNA 表达的影响,
进一步探讨其补血作用的分子机制。
1 材料与方法
11 1 药品与试剂: Trizol RNA 提取试剂盒 (美国
Gibco公司) ;氯仿、异丙醇、乙醇 (分析纯, 成都光
华化学试剂厂) ; TaqDNA 聚合酶、dNTP、RNA 逆
转录试剂盒 (美国 MBI 公司) ; DNA Marker I (北
京天为时代科技有限公司) ; DEPC、EB (美国 Sig2
ma 公司)。环磷酰胺、氯霉素,上海第十二制药厂产
品。PPS 注射液:制首乌经成都中医药大学中药鉴
定教研室鉴定后, 参照文献方法[ 1]提取总多糖成分,
真空干燥,经成都中医药大学基础化学与中药化学
教研室测定, 其含 PPS 641 4% ,经除菌处理, 用生理
盐水配制成质量浓度为 21 5 mg/ mL 注射液, 用于
体内 ip 给药。引物序列见表 1。
表 1 PCR 引物序列
Table 1 Pr imer sequences for PCR
引物 正向引物 反向引物 片段长度/ bp
EpoR 5c2GCTACACCTTCGCTGTTCGA23c 5c2TGAGAGGGTCCAGGTCAGCTA23c 111
GATA21 5c2CAAGAAGCGAATGATTGTCAGCA 23c 5c2GTTCACCTGATGGAGCTTGAA23c 117
GAPDH 5c2CTGGCATGGCCTTCCG23c 5c2CCCTAGGCCCCTCCTGT23c 455
11 2 实验设计与分组: BALB/ c 纯系小鼠 24只,雄
性,体质量 ( 20 ? 2) g, 8~ 12 周龄 (由四川大学华
西医学实验动物中心提供) , 随机分为 3 组, 每组 8
只,分别是对照组、贫血组和 PPS 组,贫血组与 PPS
组经 60Co 2. 0 Gy 照射后第 4日开始 ip 环磷酰胺
( 40 mg/ kg) 和氯霉素 ( 50 mg/ kg) , 每天 1次, 连续
3 d 造模完成,于造模完成后的第 1 天开始分别 ip
生理盐水 ( 01 4 mL/只) 和 PPS ( 25 mg/ kg) ,每日1
次,连续 6 d, 第 7天取外周血后,全部处死小鼠,取
脾脏 (无菌操作) , - 70 e 冻存。
11 3 小鼠脾脏总 RNA 提取:按试剂盒说明书操作。
11 4 小鼠脾脏 cDNA 制备:制备 1% 的琼脂糖凝
胶,取 1 LL (6@) 样品缓冲液加 5 LL RNA 混匀,
上样, 100 V 电泳 30 min, EB染色, 于紫外透射反
射仪上观察, 可见两条明显的 28 S RNA 和 18 S
RNA 区带,无拖尾现象,表明无 RNA 降解,可用于
cDNA 制备。cDNA 合成按试剂盒说明书操作。
11 5 EpoR、GATA21 mRNA PCR 扩增和凝胶电
泳分析:反应体系组成为 10 @反应缓冲液 3 LL, 25
mmol/ L MgCl2 3 LL, 10 mmol/ L dNTP 0. 9 LL,
EpoR/ GATA21F 引物 ( 50 pmol/ L ) 0. 2 LL,
EpoR/ GATA21R 引物 ( 50 pmol/ L) 0. 2 LL, T aq
DNA polymer ase 0. 3 LL, cDNA 产物 21 3 LL,
DH 2O 15. 1 LL, 总体积 25 LL, 混匀, 离心, 梯度
PCR 仪扩增。反应条件: 94 e 、20 min 后, 90 e 、
20 s, 53 e 、30 s, 60 e 、40 s, 45 个循环, GAPDH 作
内参照。取扩增的 DNA 产物进行 2% 琼脂糖凝胶
电泳, 100 V 30 min;取电泳后琼脂糖凝胶, EB 染
色,在凝胶成像系统分析仪上进行灰度分析, 读取靶
基因与内参照灰度值的比值。
11 6 统计学分析:实验数据用 SPSS 111 5 软件包
进行统计学分析,组间比较采用 t 检验。
2 实验结果
21 1 PPS 对骨髓抑制贫血小鼠外周血的影响:结
果显示 (表 2) , 放、化疗后小鼠外周血白细胞
(WBC)、红细胞 ( RBC)、血红蛋白 ( Hb)、血小板
( PLT ) 均明显低于对照组 (P< 01 01) ,说明骨髓造
血受到明显抑制, PPS 对外周血 RBC、Hb、PLT 有
明显的促进恢复的作用 ( P < 01 05、01 01) ,对 WBC
有升高的趋势, 但无统计学意义。
表 2 PPS对贫血小鼠外周血象的影响 ( x? s, n= 8)
Table 2 Effect of PPS on WBC, RBC, Hb, and PLT
of per ipher al blood cells in anemic mice
( x ? s, n= 8)
组别 WBC/( @109 # L- 1) RBC/( @1012 # L- 1 ) H b/ ( g# L - 1) PLT/ ( @109 # L- 1 )
对照 81 42 ? 1185 11149 ? 0165 1631 7 ? 61 2 89915 ? 10419
贫血 11 92 ? 0182* * 8126 ? 0172* * 1251 9 ? 101 7* * 59514 ? 9514* *
PPS 21 33 ? 0199* * 9124 ? 0189* * v 1471 7 ? 61 6* * 81719 ? 8812 v v
与对照组比较: * * P < 01 01
与贫血组比较: v P< 0105 v v P< 01 01
* * P< 01 01 vs cont rol gr ou p
v P< 01 05 v v P < 01 01 vs anemic gr ou p
21 2 PPS 对骨髓抑制贫血小鼠脾脏 EpoR 和 GA2
TA21 mRNA 表达的影响:结果 (表 3, 图1和 2) 显
示,放、化疗后所致贫血小鼠脾脏 EpoR 和 GATA2
1 mRNA 表达量明显降低 ( P< 01 01) , PPS 能明显
上调贫血小鼠 EpoR 和 GATA21 mRNA 的表达
(P< 01 01)。
3 讨论
近年来,关于中药活性成分中多糖的研究有较
表 3 PPS对贫血小鼠脾脏 EpoR、GATA21 mRNA表达的影响
( x ? s, n= 8)
Table 3 Ef fect of PPS on expression of EpoR and GATA21
mRNA in spleen of anemic mice (x ? s, n= 8)
组别 EpoR/ GAPDH GATA21/ GAPDH
对照 01 673 ? 01 050 01 561 ? 01 044
贫血 01 442 ? 01 067* * 01 404 ? 01 203* *
PPS 01 656 ? 01 072 v v 01 486 ? 01 051 v v
与对照组比较: * * P < 01 01; 与贫血组比较: v v P < 0101
* * P< 01 01 vs cont rol gr ou p; v v P< 01 01 vs anemic group
#94# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 1 期 2010年 1月
多的报道,其在提高机体免疫力、促进造血方面的作
用,越来越受到重视,如人参多糖、当归多糖、地黄多
糖、黄芪多糖、香菇多糖、枸杞多糖等。据5本草纲
目6记录,制首乌能/养血益肝, 固精益肾0。研究发
现,用何首乌提取物 (水煎醇沉粗提物 ) 能增加
CFU2S、BFU2E、CFU2E 和 CFU2GM 集落产率[ 2]。
本实验结果显示, PPS 能显著升高骨髓抑制贫血小
鼠外周血中 RBC、Hb、PLT 的数量。既往研究表
明, PPS 体内 ip 给药能促进骨髓抑制贫血小鼠红
系、巨核系、粒系造血祖细胞的增殖, 并提高骨髓有
核细胞数,说明 PPS 对放、化疗所致骨髓抑制有促
进恢复的作用[ 1]。
促红细胞生成素 ( Epo) 是红系特异性细胞因
子,通过与其受体 EpoR 结合激活 JAK2STAT s 和
Ras 等信号途径,刺激红系造血。缺乏 EpoR 的小
鼠表现严重贫血并在胚胎期的第 131 5天死亡。这
种现象可以被人 Epo R ( hEpoR) 转基因消除[ 3]。
有实验研究证明, EpoR 可以被诱导表达。Yoneku2
ra 等[ 4]用化学诱导剂二甲亚砜预处理小鼠 Epo 反
应性红白血病细胞系, 导致了 Epo 特异性血红蛋白
明显增加。这种放大的 Epo 生物反应伴随着有明
显正协同作用的新的高密度受体 (大约每个细胞
20 000) 的诱导产生。Chern 等[ 5]用二甲亚砜预处
理 Rauscher 小鼠红白血病细胞系, 同样诱导 Epo
特异性血红蛋白的明显增加, 认为二甲亚砜引发
EpoR 受体密度的明显增加, 特点是产生明显的新
受体和表现出受体间的正协同作用。
GATA21 是转录因子 GATA 蛋白家族成员之
一,这些 (A/ T ) GATA ( A/ G) 蛋白家族均含有两
个锌指 ( zinc2finger ) 结构 (N2锌指和 C2锌指) , 它
们能与基因启动子区域的 GATA 序列结合, 从而
激活基因转录。GATA21 基因的突变导致红系造
血异常[ 6]。GATA21 在 HSCs 和多系祖细胞转换
点被激活[ 7]。在定向红系造血过程中, Epo 首先诱
导转录因子 GATA21和 EpoR表达, GATA21随着
红系的分化和成熟而上调[ 8]。GATA21 可激活
EpoR 的转录, GATA21 和 EopR 又共同促进珠蛋
白的表达,最终使红系分化成熟。GATA21 的极限
浓度是决定红细胞成熟的最后阶段的机制之一[ 9]。
GATA21 促进巨核系分化和巨核细胞发育成熟的
机制,主要表现为能够激活巨核系特异性基因的表
达,包括 MPL[ 10]、血小板因子 4 ( platelet factor 4,
PF4) [ 11]、血小板糖蛋白 IIb ( glycoprotein platelet
IIb, GPIIb ) [ 12]、血小板糖蛋白 V ( glycoprotein
platelet V, GPV) [ 13]等。这些巨核系特异性基因的
启动子或增强子中含有 GATA 模序,能与 GATA2
1结合, 从而促进巨核系细胞的分化和成熟。
为了进一步了解 PPS 促进造血的作用机制, 本
实验观察了 PPS 对骨髓抑制贫血小鼠脾脏组织
EpoR 和 GATA21 mRNA 表达的影响。脾脏是小
鼠的终身造血器官,本实验由于经造模以后的贫血
小鼠,其骨髓细胞大量减少,细胞来源受到限制, 因
此选用小鼠的另一造血器官脾脏作为观察对象, 结
果表明, PPS 能明显诱导骨髓抑制贫血小鼠脾脏组
织 EpoR mRNA 的表达上调,从而增强造血细胞对
Epo 的反应性,同时上调转录因子 GATA21 mRNA
的表达,提示其促进造血作用机制与诱导造血组织
EpoR 及 GATA21 mRNA 的表达有关。
参考文献:
[ 1] 冯雪霉, 吕 艳, 祝彼得, 等1 制首乌总多糖对贫血小鼠造
血祖细胞增殖的影响 [ J]1 中草药, 2006, 37 ( 11 ) :
1695216971
[ 2] 周志文, 周金黄, 邢善田1 何首乌提取物对正常小鼠造血功
能的影响 [ J]1 中药药理与临床, 1991, 7( 5) : 192211
[ 3] Yu X, Lin C S, Costan tin i F, et al . T he human eryth ropoie2
t in receptor gene rescues erythropoies is and d evelopmental
defect s in th e erythropoietin receptor null mouse [ J ]1 Blood,
2001, 98( 2) : 47524771
[ 4] Yonekura S, Ch ern Y, Donahue K A, et al . Eryth ropoiet in
r eceptors induced by dimethyl sulfoxide exhibit posit ive co2
operativity associated with an amplified biologic response [ J]1
P roc N at l Acad Sci USA, 1991, 88( 6) : 2535225391
[ 5] Chern Y, Yonekura S, Sytk owski A J1 Poten tiat ion of th e
erythropoiet in response b y dimethyl sulfox ide priming of
erythroleukemia cells : evidence for interact ion of two signa2
lin g pathways [ J ]1 Blood, 1990, 76( 11) : 2204222091
[ 6] Freson K, Mat thijs G, Thys C, et a l . Different su bst itut ions
at residue D218 of the X2l inked t ran script ion factor GATA1
#95#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 1 期 2010年 1月
lead to al tered clin ical s everity of macrothrombocytopenia an d
an emia an d are associated with variab le skewed X inact ivation
[ J]1 H um Mol Genet , 2002, 11( 2) : 14721521
[ 7] Ashihara E, Vannucchi A M, Migliaccio G, et al . Growth
factor receptor exp ress ion during in vi tr o differen tiat ion of
partially purified populat ions contain ing murine stem cells
[ J]1 J Cell Phy siol , 1997, 171( 3) : 34323561
[ 8] Leonard M, Brice M, Engel J D, et al . Dynamics of GATA
tran script ion factor expression du ring eryth roid different iation
[ J]1 Blood , 1993, 82( 4) : 1071210791
[ 9] Dalyot N, Fibach E, Ronch i A, et al . Erythr op oiet in t rig2
gers a b urst of GATA21 in normal human eryth roid cell s dif2
feren tiat ing in ti ssue cul tu re [ J ]1 Nucleic Acids Res, 1993,
21( 17) : 4031240371
[ 10] Scicchitano M S, McFarland D C, T iern ey L A, et al . I n
vit ro expansion of human cord b lood CD36+ erythroid pro2
genitors: temporal ch anges in gene and protein expres sion
[ J ]1 E xp H ematol , 2003, 31( 9) : 76027691
[ 11] Deveaux S, Filipe A, Lemar chandel V, et al . Analysis of th e
th rombopoiet in r eceptor (MPL) promoter implicates GATA
and Ets proteins in the coregulation of megakaryocyte2specific
genes [ J ]1 Blood, 1996, 87( 11) : 4678246851
[ 12] Minami T , Tachibana K, Imanishi T , et al . Both Ets21 and
GATA21 are ess ent ial for posit ive regulation of platelet factor
4 gene expression [ J]1 Eur J Biochem , 1998, 258 ( 2 ) :
87928891
[ 13] Mart in F, Prandini M H, Th evenon D, et al . The t ranscrip2
t ion factor GATA21 r egulates th e promoter act ivity of th e
platelet glycoprotein IIb gene [ J]1 J Biol Chem , 1993, 268
( 29) : 216062216121
荜茇醇提物对胰岛素抵抗综合征大鼠模型的防治作用研究
万春平,包# 照日格图¹,却 翎,宋娜丽, 唐志国
(云南中医学院中药学院,云南 昆明 650200)
摘 要:目的 观察荜茇醇提物 (AEPL) 对实验性胰岛素抵抗综合征 ( IRS) 大鼠模型的防治作用, 探讨其可能的
作用机制。方法 采用高脂、高糖、高盐膳食制备 IRS大鼠模型,喂养 4 周后预防性给予 AEPL, 12 周后测定空腹
血糖 ( FBG)、胰岛素水平 (F INS)、口服葡萄糖耐量、游离脂肪酸 ( FFA) 水平、甘油三酯 ( TG) 和肿瘤坏死因子2A
(T NF2A) 水平,并计算胰岛素敏感指数 ( ISI)。结果 AEPL 明显增加 IRS 模型大鼠胰岛素敏感指数, 改善糖耐
量, 降低 TNF2A水平 ( P< 01 05, 01 01) , 防止 FFA、TG 水平的上升 ( P< 01 05, 01 01)。结论 AEPL 具有改善实验
性 IRS 的作用, 其机制可能与抑制 TNF2A 水平有关。
关键词:荜茇醇提物; 胰岛素抵抗综合征; 糖耐量; 胰岛素敏感指数; 肿瘤坏死因子2A
中图分类号: R2851 5 文献标识码: A 文章编号: 0253- 2670(2010) 01- 0096- 03
胰岛素抵抗综合征 ( insulin resistance syn2
drome, IRS) 是包括高胰岛素血症、糖耐量异常、脂
代谢紊乱和高血压等疾病和症状的总称。荜茇为胡
椒科植物荜茇 P iper long un L. 的干燥近成熟或成
熟果穗,是中蒙医习用药材, 功能温中散寒、行气止
痛。蒙医认为荜茇具有调理体素、分清化浊的功效。
前期研究表明荜茇油非皂化物能显著抑制高脂血症
模型总胆固醇水平[ 1] ;荜茇有效成分荜茇宁能显著
调节血脂代谢紊乱[ 2] ;国外也报道其有效成分显著
提高药物和营养物质的生物利用度[ 3]。本研究采用
高脂、高糖、高盐饲养制备实验性 IRS 大鼠模型,观
察荜茇醇提物 (AEPL) 对实验性 IRS 大鼠模型胰
岛素敏感指数、糖耐量、血脂及 TNF2A水平的影响。
1 实验材料
11 1 动物与饲料: Wistar 大鼠, 60只,雄性,体质量
180~ 200 g,由四川省医学科学院实验动物研究所
提供,合格证号: SCXK(川) 2004 ) 16。标准饲料:
蛋白质 23%, 碳水化合物 53% , 脂肪 5%。高脂饲
料:基础饲料 51%, 猪油 23%, 蔗糖 24%, 食盐
2%, 由昆明医学院动物实验中心加工成颗粒。
11 2 药品与试剂:荜茇醇提取物 ( AEPL ) 采用
70% 乙醇提取 3 次, 回收溶剂浓缩至浸膏, 每克浸
膏相当于原生药 81 75 g, 4 e 保存备用, 临用前以
生理盐水按照设定浓度稀释。罗格列酮, 成都恒瑞
制药有限公司 (批号 070201) ; TG 试剂盒、FFA 试
剂盒、血糖度剂盒购自南京建成生物工程研究所
(批号 0906111、20071114、20070718) ; TNF2A试剂
盒购自北京邦定公司 (批号 20070915) ;胰岛素浓
度由昆明医学院第一附属医院核医学科采用放免法
检测。
11 3 仪器: 756 型紫外2可见光分光光度仪 (上海光
谱仪器厂) ; DNM ) 9062G 型酶标仪 (北京普朗新
#96# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 1 期 2010年 1月
¹ 收稿日期: 2009203225
基金项目:云南省自然科学基金项目 ( 2005C0014R)
作者简介:万春平( 1981 ) ) ,汉族,江西南昌人,硕士研究生,主要研究方向:临床中药学和药理学。
Tel: 13816430570 E2mail: wanchunpin g1012@yahoo. com. cn
* 通讯作者 包 # 照日格图 T el : ( 0871) 5918133 E2mail: rigdan@126. com