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Therapeutic effects of ginsenoside Rh2 on multi-drug resistant leukemia cell line K562/VCR

人参皂苷Rh2抗白血病多药耐药细胞K562/VCR作用研究



全 文 :人参皂苷 Rh2抗白血病多药耐药细胞 K562/ VCR作用研究
徐晓军, 石淑文* ,汤永民,沈红强, 钱柏芹
(浙江大学医学院附属儿童医院 血液肿瘤科,浙江省新生儿疾病诊治重点实验室,浙江 杭州  310003)
摘  要:目的  通过观察人参皂苷 Rh2对人白血病多药耐药 ( MDR) 细胞 K562/ VCR 生长、凋亡的作用和逆转耐
药的情况 ,探索该药在抗人白血病 MDR 方面的应用价值。方法  将人参皂苷 Rh2与 K562、K562/ VCR 细胞共培
养 48 h 后采用 MT T 法分析其对细胞生长的抑制率; 将其与 K562/ VCR 细胞于 37  孵育 30 min 后 ,采用 An
nex in V 和 PI 双染法在流式细胞仪上检测细胞凋亡情况;并观察其对 K562/ VCR 细胞摄取柔红霉素 ( DNR) 能力
及细胞表面 P糖蛋白 ( Pgp) 表达的影响;在 DNR 与 K562/ VCR培养体系中加入不同质量浓度人参皂苷 Rh2 , 孵
育 48 h 后观察人参皂苷 Rh2对 K562/ VCR 细胞耐药的逆转情况。结果  人参皂苷 Rh2可明显抑制 K562 和
K562/ VCR 细胞的生长,并呈量效关系, 人参皂苷 Rh2对 K562 和 K562/ VCR 的半数抑制浓度 ( IC50 ) 分别为
44 5、59 4g / mL。K562/ VCR 经人参皂苷 Rh2在 37  作用 30 min 后, 细胞的凋亡明显增加,随人参皂苷 Rh2质
量浓度的增加,凋亡细胞的比例明显增加[人参皂苷 Rh2 300 g / mL , Annex in V + 细胞 ( 51 5 6 9) % ]。K562 细
胞经长春新碱 ( VCR) 诱导耐药后, Pgp 表达率明显提高 (从 4 28% 到 93 80% ) , DNR 摄取率减少, 25 g/ mL
以上质量浓度的人参皂苷 Rh2即可明显提高 K562/ VCR 对 DNR 的摄取,但 Pgp 的表达无明显改变。同时, 它可
明显提高 DNR 对 K562/ VCR 的杀伤率, 50 g / mL 人参皂苷 Rh2可使 K562/ VCR 对 DNR 的敏感性提高到原来
的 6 30 倍。结论  人参皂苷 Rh2能抑制 K562/ VCR 细胞生长,诱导其凋亡, 还可以逆转 K562/ VCR 的耐药, 是一
种具有广阔开发前景的抗白血病药物。
关键词:人参皂苷 Rh2 ; 多药耐药; 白血病; K562/ VCR 细胞
中图分类号: R286 91   文献标识码: A    文章编号: 02532670( 2010) 07113105
Therapeutic effects of ginsenoside Rh2 on multidrug resistant leukemia cell line K562 / VCR
XU Xiaojun, SH I Shuwen, TANG Yongmin, SH EN Hongqiang , Q IAN Baiqin
( Zhejiang Key Laborato ry for Diagno sis and Therapy o f Neonat al Diseases, Div ision o f Hemato lo gyonco lo gy ,
Children!s H ospital of Zhejiang Univer sity, School of Medicine, H ang zhou 310003, China)
Abstract: Objective  To study the therapeutic ef fects and their mechanisms of ginsenoside Rh2 on
mult idrug resistance o f ( MDR) leukem ic cells by observing the effects of ginseno side Rh2 on proliferat ion,
apopto sis, and resistance to Vincrist ine ( VCR) of human erythroleukemia cell line K562/ VCR. Methods
First, g insenoside Rh2 w ith different concentrat ion w as cocultured w ith K562 and K562/ VCR cel ls in 96
w ells cell culture plates. The inhibitory rates and 50% inhibitor y concentration ( IC50 ) w ere determined and
calculated 48 h later by M TT assay. Second, g insenoside Rh2 with dif ferent concentration w as cocultur ed
w ith K562/ VCR cells in w ater bath at 37  for 30 min, then the apopto sis r ates w ere exam ined by Annex
in V/ PI apopto sis kit on f low cy tometr y. Third, g insenoside Rh2 w ith dif ferent concentration w as cocul
tured with K562/ VCR cel ls in w ater bath at 37  for 30 min follow ed by adding Daunorubicin ( DN R)
af ter w ashing w ith PBS. T he intake of DNR and the expr ession of Pgly coprotein ( Pgp) w ere analy zed 30
min later on f low cy tometry. F inally , g insenoside Rh2 w ith dif ferent concentrat ion w as cocultured w ith
K562/ V CR cel ls in 96 w ell cel l culture plates, w hich w ere then tr eated by DNR. T he inhibitory rates and
rever se ef fects w ere evaluated 48 h later by M TT assay . Results  K562 and K562/ VCR cells! gr ow th w ere
obviously inhibited by ginseno side Rh2 in a dosedependent manner. The IC50 values of K562 and K562/
VCR were 44. 5 and 59. 4 g/ mL, respectiv ely . Ginseno side Rh2 could induce apopto sis of K562/ V CR
[ Rh2 300 g/ mL, Annex in V + cell ( 51. 5 6. 9) % ] . T he apopto sis rate of K562/ VCR increased in accord
ance w ith the rise of ginsenoside Rh2 concentration. T he expression of Pgp increased ( 4. 28% to 93. 80%)
and the intake of DNR decreased when K562 w as r esistant to VCR. H ow ever, ginsenoside Rh2 w ith a con
centrat ion of 25 g/ mL o r higher could gr eat ly enhance the intake o f DNR. The inhibito ry ef fects of DNR
∀1131∀中草药  Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
* 收稿日期: 20091112                     基金项目:浙江省中医药科技计划项目 ( 2005C168) ; 浙江省教育厅科研项目 ( 20061263)作者简介:徐晓军( 1981 # ) ,男,浙江龙游人,博士,研究方向为儿童白血病诊断与治疗。
T el: ( 0571) 8706100732460  Email : xu xiaoju n@ zju. edu. cn
* 通讯作者  石淑文  Email : s sw hz@ 126. com
on K562/ VCR could be gr eat ly increased by Rh2 . T he reverse index w as 6. 30 when Rh2 concentrat ion w as
50 g/ mL. Conclusion  Ginsenoside Rh2 could inhibit the grow th, induce the apoptosis, and reverse the
MDR o f K562/ VCR. It could be an excellent ant ileukemic agent.
Key words: ginsenoside Rh2 ; mult idr ug resistance ( MDR) ; leukemia; K562/ VCR cells
  多药耐药 ( MDR) 是肿瘤化疗失败及肿瘤复发
的重要原因。目前, 至少已发现 13 种与 MDR相关
的 ATP 结合盒转运体, M DR P糖蛋白 (简称 P
gp) 是其中最重要的一员[ 1] 。维拉帕米、环孢霉素
等常见的耐药逆转剂, 由于正常血药浓度难以达到
疗效或明显的不良反应而在应用上受到限制。某些
天然黄酮类化合物可逆转肿瘤细胞的 MDR [ 2]。人
参皂苷 Rh2是从红参中提取的天然成分, 研究表明
其可以抑制小鼠黑色素瘤、胶质瘤及人肝癌、乳腺癌
等肿瘤细胞的增殖, 促进其凋亡, 逆转 Pgp 介导的
细胞耐药[ 3~ 5] 。但人参皂苷 Rh2对人白血病细胞的
作用有关资料尚不完善 [ 6, 7]。本实验主要通过观察
人参皂苷 Rh2对人白血病 MDR 细胞 K562/ VCR
生长、凋亡的作用和逆转耐药的情况,探索该药在抗
人白血病 MDR 方面的应用价值。
1  材料
1 1  药物、试剂与仪器: 人参皂苷 Rh2为大连生生
绿谷生物工程公司生产, 质量分数> 98%, 溶于甲
醇,制得 20 mg/ mL 母液备用;柔红霉素 ( DNR) 为
意大利法玛西亚制药公司生产; PE 标记 Pgp 鼠抗
人单克隆抗体购自美国 BD 公司; RPMI 1640 培养
基为美国 Gibco 公司产品;新生牛血清购自杭州四
季青生物工程 材料研究所; M T T 购自美 国
Ameresco 公司; Annexin VFIT C 细胞凋亡检测试
剂盒购自江苏碧云天生物技术研究所; ELx # 800
型酶标仪为美国 BioTEK 产品; 流式细胞仪为美国
BD 公司产品。
1 2  细胞株: K562 细胞购自美国 AT CC 公司,
K562/ V CR 为本实验室自行诱导建株[ 8] 。
2  方法
2 1  对细胞生长的抑制作用: 取对数生长期 K562
和 K562/ VCR 细胞制成细胞悬液,调节浓度至 5 ∃
105 / mL,按每孔 100 L 的体积接种于 96 孔培养
板,培养 12 h 后分别加入一定体积的 40、80、120、
160、200 g/ mL 的人参皂苷 Rh2溶液 100 L (将
20 mg/ mL 的母液溶于 RPM I 1640 培养基中制备
而成) ,各孔总体积均为 200 L,使其质量浓度分别
为 20、40、60、80、100 g/ mL。每一质量浓度均设 6
孔,同时设有对照孔和调零孔。在加药 48 h 后采用
MTT 比色法检测各孔在 570 nm 波长下的吸光度
( A ) 值, 计算人参皂苷 Rh2对 K562 和 K562/ V CR
细胞生长的抑制率: 抑制率= ( 1- 给药孔平均 A
值/对照孔平均 A 值) ∃ 100%。根据不同质量浓度
下的抑制率绘制量效曲线,由此计算出半数抑制浓
度 ( IC50 )。
2 2  促进细胞凋亡实验: 取对数生长期 K562/
VCR 细胞制成细胞悬液,调节细胞浓度至 5 ∃ 105 /
mL,按每管 0 95 mL 加至 1 5 mL 离心管中。各管
分别加入质量浓度 1、2、4、6 mg / mL 的人参皂苷
Rh2溶液 50 L (对照组加入 PBS 50 L) ,使其终
质量浓度分别为 50、100、200、300 g/ mL, 每个质
量浓度组设 4个复孔。37  水浴中孵育 30 m in后
采用 Annexin V 和 PI 双染法在流式细胞仪上检测
细胞凋亡情况。
2 3  对 K562和 K562/ VCR 细胞摄取 DNR 的影
响:取对数生长期 K562 和 K562/ VCR 细胞制成细
胞悬液,调节细胞浓度至 5 ∃ 105 / mL,按每管 0 95
mL 加至 1 5 mL 离心管中。各管分别加入质量浓
度 0 5、1 0、1 5、2 0 mg / mL 的人参皂苷 Rh2溶液
50 L (对照组加入 PBS 50 L) ,使其终质量浓度
分别为 25、50、75、100 g / mL,每个质量浓度组设 4
个复孔。37  水浴中孵育 30 min, 洗涤后加入 1
g/ mL 的 DNR溶液 1 L, 37  水浴中再孵育 30
min,然后通过流式细胞术检测 K562/ VCR 细胞内
DNR 的量和细胞表面 Pgp 表达的变化情况。
2 4  对 K562/ VCR 细胞耐药的逆转实验:取对数
生长期 K562/ VCR细胞制成细胞悬液,调节浓度至
5 ∃ 105 / mL,按每孔 150 L 的体积接种于 96 孔培
养板, 培养 12 h 后处理组分别加入质量浓度为
0 5、1 0、2 0 mg / mL 的人参皂苷 Rh2溶液 50 L
(对照组和 DNR 组分别加入 PBS 50 L) , 各孔总
体积均为 200 L, 使其终质量浓度分别为 12 5、
25、50 g / mL。人参皂苷 Rh2各质量浓度组及
DNR 组加入 0 2 mmol/ L DNR 溶液 1 L, 使 DNR
的终质量浓度为 0 5 g / mL, 对照组不加 DNR。
每一质量浓度均设 6孔,同时设调零孔。在加药 48
h 后采用 MTT 比色法检测各孔在 570 nm 波长下
的 A 值, 计算人参皂苷 Rh2对 K562/ VCR 细胞生
∀1132∀ 中草药  Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
长的抑制率和耐药的逆转倍数。
逆转倍数= 药物处理组抑制率/ DNR 组抑制率
2 5  统计学处理: 数据分析采用单因素方差分
析,组间两两比较采用 LSD 法。采用 Probit 法
计算 IC50 ,所有统计均在 SPSS 12 0 统计软件上
进行。
3  结果
3 1  K562与 K562/ VCR细胞生物学特性的比较:
K 562/ VCR细胞株是本实验室采用反复短期暴露
法,将 K562细胞与不同浓度的长春新碱 ( VCR) 共
培养 90 d 左右制备而成。通过对 K562 细胞与
K562/ VCR 细胞的比较可发现, 两者在形态上并无
明显差别,但 K562/ VCR 细胞的 Pgp 表达明显上
调 (阳性率分别为 4 28%、93 80%) , 1 g/ mL
DNR 分别与 K562 和 K562/ VCR孵育 30 min 后,
通过流式细胞术分析显示耐药细胞的 DNR 的摄取
率低于非耐药细胞[平均荧光强度指数( M FI)分别
为: 280、616] ,见图 1。
A~ DK562 细胞  E~ HK562/ VCR 细胞  A、E 为阴性对照, B、F 为 Pgp 的表达率,
C、G 为 DNR 的摄取情况, D、H 为 Rh2对 DNR 摄取的影响
A # DK562 cell s  E # HK562/ VCR cell s  A and E, n egat ive cont rol; B and F, ex pres sion of Pgp;
C and G, intak e of DNR; D and H , effect s of Rh2 on in take of DNR
图 1  K562 及 K562/ VCR 细胞生物学特性的比较
Fig. 1 Comparison of biological characteristics on K562 and K562/ VCR cells
3 2  对 K562、K562/ VCR 细胞生长的抑制作用:
人参皂苷 Rh2处理 48 h 后, K562 和 K562/ VCR 细
胞的生长受到明显抑制, 在低于 100 g/ mL 的质量
浓度范围内,抑制率随药物质量浓度增加呈升高趋
势 (图 2、3)。药物作用 48 h 后, 人参皂苷 Rh2对
K562 细胞的 IC50为 44 5 g / mL, 对 K562/ VCR
细胞的 IC50为 59 4 g/ mL。从倒置显微镜下观察
细胞形态, 人参皂苷 Rh2作用后,肿瘤细胞除了增殖
受到抑制外,也出现了大量的凋亡细胞, 表现为细胞
胞浆浓缩、体积缩小、核碎裂呈小块、形成明显的凋
亡小体,且凋亡细胞的数量随着作用时间的延长而
增加 (图 3)。
3 3  诱导 K562/ VCR 细胞的凋亡: K562/ VCR 细
胞经人参皂苷 Rh2在 37  作用 30 min 后, 该细胞
的死亡明显增加。如表 1 所示, 根据流式细胞术
结果, 将细胞分为3组 : AnnexinV + 组为凋亡细胞
图 2 不同质量浓度的人参皂苷 Rh2处理 48 h 后
K562 和 K562/ VCR 细胞生长的抑制曲线
( x s, n= 6)
Fig. 2  Inhibitory curves of Rh2 on growth of K562
and K562/ VCR cells treated by ginsenoside
Rh2 at different concentrations for 48 h
(x s, n= 6)
∀1133∀中草药  Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
图 3  不同质量浓度的人参皂苷 Rh2处理 48 h 后 K562/ VCR 细胞的形态
Fig. 3  Morphology of K562/ VCR cells treated by different concentrations of ginsenoside Rh2 for 48 h
表 1  K562/ VCR 细胞经不同质量浓度的人参皂苷 Rh2
处理 30 min 后的凋亡情况 ( x s, n= 4)
Table 1  Apoptosis of K562/ VCR cells treated by ginsenoside
Rh2 at different concentrations for 30 min
(x s, n= 4)
人参皂苷 Rh2/
( g ∀ mL- 1)
Annex in V+ /
%
Annexin V+ PI+ /
%
A nnexin V- PI- /
%
0(对照) 3 2 3 5 13 7 4 0 76 7 3 8
50 6 2 1 3 15 0 3 9 70 6 13 0
100 14 9 5 0* 13 9 5 4 69 5 5 8
200 27 8 8 7* * * 14 5 1 7 60 3 8 6*
300 51 5 6 9* * * 13 7 5 2 45 6 13 5* *
  与对照组比较: * P< 0 05  * * P< 0 01  * * * P< 0 001
  * P< 0 05  * * P < 0 01  * * * P < 0 001 v s cont rol group
(包括早期凋亡和晚期凋亡) , A nnex in V + PI+ 为坏
死细胞, Annex in V - PI- 为活细胞。可以发现, 随
着人参皂苷 Rh2质量浓度的增加,凋亡细胞的比例
明显增加, 活细胞的比例明显下降,但坏死细胞的数
量并无明显改变。通过 Probit 回归分析, 该条件
下,人参皂苷 Rh2杀伤 K562/ VCR 细胞 (包括坏死
和凋亡) 的 IC50值为 273 5 g/ mL。
3 4  对 K562/ VCR 细胞耐药的逆转:通过研究不
同质量浓度人参皂苷 Rh2对 K562 及 K562/ VCR
细胞摄取 DNR 的影响发现, K562 细胞的 DNR 摄
取率无明显改变 (图 1C、D) , 但 K562/ VCR 的
DNR 摄取率明显增加 ( MFI: 280 vs 941) (图 1G、
H)。对人参皂苷 Rh2增强 K562/ VCR 对 DNR 摄
取进行量效关系研究显示, 25 g/ mL 的人参皂苷
Rh2即可明显提高 K562/ VCR对 DNR的摄取,但 50
g/ mL 以上时,随着质量浓度的进一步增加,DNR的
摄取率并无明显增加。而人参皂苷 Rh2对 K562/
VCR 细胞表面 Pgp的表达并无明显影响 (表 2)。
  本实验还同时观察了人参皂苷 Rh2逆转 K562/
VCR 细胞对 DNR 耐药的情况。0 5 g/ mL 的
DNR 与 K562/ V CR 共孵育 48 h 后,对其无明显杀
伤作用 ( M TT 结果 A 值 1 64 0 17 vs 1 42
0 13, P > 0 05) , 但在培养体系中加入不同质量
浓度的人参皂苷 Rh2 , K562/ VCR 对 DNR 的敏感
性明显增强, 50 g/ mL 人参皂苷 Rh2可使 K562/
VCR 对 DNR 的敏感性提高到原来的 6 30 倍
(表 3)。
表 2  K562/ VCR 细胞经不同质量浓度的人参皂苷 Rh2处理后
Pgp表达量及摄取 DNR 能力的变化 (x s, n= 4)
Table 2 K562/ VCR Cells expression of Pgp and intake
of DNR treated by ginsenoside Rh2 at different
concentrations ( x s, n= 4)
人参皂苷 Rh2/
( g ∀ mL- 1)
Pgp
阳性率/ % MFI
DNR
阳性率/ % MFI
0(对照) 89 5 7 3 54 0 9 1 98 3 1 1 74 5 9 9
25 95 5 0 3 79 5 3 8 99 4 0 3 129 7 19 7* *
50 95 8 1 4 82 1 14 3 99 4 0 6 194 2 34 8* * *
75 93 3 4 5 73 9 16 7 99 2 1 2 202 0 21 1* * *
100 93 2 4 0 69 5 10 6 99 5 0 7 213 3 4 1* * *
  与对照组比较: * * P< 0 01  * * * P< 0 001
  * * P < 0 01  * * * P < 0 001 v s cont rol group
表 3 人参皂苷 Rh2对 K562/ VCR细胞耐药的逆转(x s, n= 6)
Table 3  Reverse effects of ginsenoside Rh2 on drug
resistance of K562/ VCR cells ( x s, n= 6)
组  别 A 抑制率/ % 逆转倍数
对照 1 64 0 17 - -
DNR 1 42 0 13 13 3 -
DNR+ 12 5 g∀ mL- 1人参皂苷 Rh2 0 97 0 30 41 15 3 07
DNR+ 25 g∀ mL- 1人参皂苷 Rh2  0 65 0 31 60 14 4 48
DNR+ 50 g∀ mL- 1人参皂苷 Rh2  0 28 0 04 84 10 6 30
  * 经单因素方差分析及组间两两 LSD 检验, 仅对照组与 DNR
组比较无统计学差异,其他各组两两比较均有显著差异 ( P< 0 05)
  * As tested by on e w ay ANOVA am on g all groups and LSD
tes t betw een every tw o groups, every com paris on show s signif icant
dif feren ce ( P < 005) betw een each tw o groups except com pari son of
cont rol group an d DNR group
4  讨论
  人参是我国传统的名贵中药材, 人参皂苷是人
参抗肿瘤作用的主要有效成分。目前发现,人参皂
苷的多种单体,如 Rg3、Rh2、Rh3等都具有抗肿瘤作
∀1134∀ 中草药  Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
用[ 9]。人参皂苷 Rh2是人参中提取的天然活性成
分,具有很高的抗肿瘤活性,而对正常细胞无毒性,
它具有抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、诱导分化、抑
制肿瘤 DNA 合成、提高荷瘤机体的免疫功能、抑制
肿瘤转移和抗肿瘤耐药性增强等多重作用[ 3, 4]。
本研究表明, 人参皂苷 Rh2对 K562 及 K562/
VCR 的生长具有明显的抑制作用,且在一定的质量
浓度范围内表现出较好的量效关系。100 g / mL
人参皂苷 Rh2作用两种细胞 48 h 后, 其抑制率接近
90%。但它对两种细胞的抑制能力却并不相同, 对
K562 及 K562/ VCR 的 IC50分别为 44 5、59 4 g/
mL,表明 K562/ VCR 细胞株对人参皂苷 Rh2的耐
受能力更强,考虑可能 K562/ VCR 的耐药机制对人
参皂苷 Rh2也有一定的作用。
人参皂苷 Rh2具有较强的诱导 K562/ VCR 细
胞凋亡的能力, 较低质量浓度的人参皂苷 Rh2与
K562/ V CR 共培养 48 h 可明显引起细胞生长的抑
制和凋亡,而即使在 37  作用 30 min, 通过流式细
胞术也可检测到凋亡细胞, 但其 IC50明显高于长期
培养实验。本研究同时显示, 随着人参皂苷 Rh2剂
量的增加, 凋亡细胞的比例 (包括早期凋亡和晚期
凋亡) 明显增加,但坏死细胞的数量并无明显改变,
提示人参皂苷 Rh2主要通过细胞凋亡途径引起
K562/ V CR 细胞的死亡。Ham 等 [ 10]通过对 HeLa
细胞、MCF10Aras 细胞和 MCF7 细胞的研究证实
人参皂苷 Rh2主要是通过 Ca2+ 和活性氧 ( reactiv e
oxygen species, ROS) 等信号分子上调 cJNK, 引
起线粒体膜去极化诱发细胞凋亡。Kim 等 [ 11] 则发
现人参皂苷 Rh2能激活 caspase1、3 和上调 Bax, 从
而诱发神经母细胞瘤细胞株的凋亡。
将 K562 细胞诱导成耐药的 K562/ VCR 细胞
后,它对 DNR的摄取明显降低,其细胞表面的 Pgp
的数量显著增加, 提示 Pgp 可能是 K562/ VCR 耐
药的重要机制。若将耐药细胞同时与人参皂苷 Rh2
作用,则细胞对 DNR 的摄取明显提高, 也对 DNR
的杀伤作用更为敏感,证实人参皂苷 Rh2可以逆转
K562/ V CR 的耐药,且低质量浓度的人参皂苷 Rh2
( 12 5~ 50 g/ mL) 就能达到明显的效果, 而剂量
进一步增加后, 该效应提高不明显,但人参皂苷 Rh2
本身可以对 K562/ VCR 细胞产生毒性作用。在
DNR 摄取率提高的同时, 流式细胞术检测 K562/
VCR细胞表面的 Pgp 的数量并没有下降。该结果
与张晖等[ 12]发现的人参皂苷 Rh2能够逆转人乳腺
癌耐药细胞株 MCF7/ ADM 的耐药,但并不影响其
Pgp 和 MDR1 mRNA 表达的结果相似。人参皂
苷 Rh2在不下调 Pgp 数量的状态下可以逆转
K562/ VCR 细胞的耐药, 考虑可能是: % 人参皂苷
Rh2对 Pgp 外排泵的功能影响更为明显。 & 抑制
了非 Pgp 的耐药途径。具体机制还有待于进一步
研究。
本研究提示, 人参皂苷 Rh2对人白血病细胞
K562及其耐药株 K562/ VCR 具有多重作用,不仅
能抑制肿瘤细胞生长, 诱导细胞的凋亡,还可以逆转
耐药细胞的耐药, 是一种具有广阔开发前景的抗白
血病药物。
参考文献:
[ 1]  JabrMilane L S, van Vlerken, Yadav S , et a l . Mul tifunc
ti on al n an ocarriers to overcome tumor drug resistan ce [ J ]
Cancer Tr eat R ev , 2008, 34( 7) : 592602
[ 2]  朱荣鑫, 张赛龙, 金永生 黄酮类化合物抗肿瘤作用研究进
展 [ J ] 现代药物与临床, 2010, 25( 1) : 510
[ 3]  赵  越, 苏  适 人参皂苷 Rh2抗肿瘤作用的研究 [ J] 微
生物学杂志, 2003, 23( 2) : 6163
[ 4]  王占峰, 罗毅男, 洪新雨, 等 人参皂苷 Rh2抗肿瘤作用机
制的研究 [ J] 北华大学学报:自然科学版, 2005, 6( 1) : 50
52
[ 5]  韩  颖, 姜彬慧, 胡筱敏, 等 Fu sarium sacchari 转化三七
叶皂苷的稀有抗肿瘤成分 [ J] 中草药, 2007, 38( 16) : 830
832
[ 6]  侯毅鞠, 袁忠海, 田  晶, 等 人参皂苷单体 Rh2诱导髓性
白血病细胞株凋亡的时效与量效 [ J] 中国组织工程研究与
临床康复, 2008, 12( 12) : 23312334
[ 7]  袁忠海, 侯毅鞠, 扈昕虹, 等  人参皂苷单体 Rh2 对人
K562白血病细胞增殖和凋亡的时效和量效分析 [ J ] 中国临
床康复, 2006, 10( 47) : 3941
[ 8]  石淑文, 郭淑芬  多药耐药细胞系 K562/ HHT 和 K562/
VCR 的建立及耐药性逆转的研究 [ J] 中华儿科杂志, 1998
( 1) : 1518
[ 9]  黎  阳, 张铁军, 刘素香, 等 人参化学成分和药理研究进
展 [ J ] 中草药, 2009, 40( 1) : 164附 2
[ 10]  H am Y M , Lim J H , Na H K, et al . GinsenosideRh2in
duced mitochondrial depolarizat ion and apoptosis are associa
t ed w ith r eact ive oxygen species and Ca2+m ediated cJun
NH 2t erminal kinase 1 act ivat ion in H eLa cell s [ J ] J Phar
macol E xp The r , 2006, 319( 3) : 12761285
[ 11]  Kim Y S, Jin S H Ginsen oside Rh2 induces apoptosis via ac
ti vat ion of caspase1 and3 and upregu lat ion of Bax in human
neuroblastoma [ J] Ar ch P har m Res , 2004, 27 ( 8 ) : 834
839
[ 12]  张  晖, 王华庆, 张会来, 等 人参皂苷 Rh2逆转 P gp 介
导的 MCF7/ ADM 多药耐药性的基础研究 [ J] 肿瘤,
2007, 5: 365369
∀1135∀中草药  Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月