全 文 ：HPLC-ELSD法测定芪葛口服液中黄芪甲苷
吴青业1 ,周恩丽2 ,付小环2 ,徐连明2 ,尚
强2 , 赵祎武2 , 王
伟2 ,杨立国2 ,徐海娟2 ,肖
伟2*
( 1
广州中医药大学科技产业园, 广东 广州
510445; 2
江苏康缘药业股份有限公司,江苏 连云港
222001)
摘
要:目的
测定芪葛口服液中主要成分黄芪甲苷。方法
采用 H PLC-ELSD法。色谱柱为 Ag ilent Zo rbax-C18
柱( 150 mm
4
6 mm, 5
m) , 流动相为乙腈- 水( 33
67) , 柱温 30
, 体积流量 1 mL/ min,蒸发光散射检测漂移管
温度 43
,雾化器温度 35
,氮气压力 172 kPa;进样量 5
L。结果
黄芪甲苷在 1
012~ 10
120
g 具有良好的
线性关系,平均加样回收率为 96
89% , RSD 为 1
58%。结论
本方法简便、快捷、重现性好, 适用于芪葛口服液的
质量控制。
关键词:芪葛口服液; 黄芪甲苷; H PLC-ELSD
中图分类号: R286
02


文献标识码: B


文章编号: 0253-2670( 2010) 08-1305-03


芪葛口服液是自主研发的口服液制剂新药, 其
处方由黄芪、葛根、桂枝、威灵仙、白芍、姜黄、川芎和
菊花 8味中药组成, 具有益气活血, 宣痹通络之功
效,用于颈椎病引起的眩晕、头痛、项强、手臂麻木等
症,临床疗效显著。本研究采用 HPLC-ELSD 法测
定方中君药黄芪中有效成分黄芪甲苷[ 1] ,该方法简
便、准确、重现性好, 可以较好的控制药品质量。
1
仪器和材料
Waters 2695
2420 高效液相色谱仪, AE240
型电子分析天平;黄芪甲苷对照品(中国药品生物制
品检定所, 批号 110781-200613) ,芪葛口服液(江苏
康缘药业股份有限公司, 规格为 10 mL/支) ,乙腈为
色谱纯,水为中性水,其他试剂均为分析纯。
2
方法与结果
2
1
色谱柱: A gilent Zorbax-C18柱( 150 mm
4
6
mm, 5
m) , 流动相乙腈-水( 33
67) , 柱温 30
,
体积流量 1 mL/ m in,蒸发光散射检测:漂移管温度
43
,雾化器温度 35
,氮气压力 172 kPa; 进样量
5
L。
2
2
溶液的配制
2
2
1
对照品溶液的制备: 取黄芪甲苷对照品适
量,精密称定,加甲醇制成 1 mg/ mL 溶液,作为对照
品溶液。
2
2
2
阴性对照溶液的制备: 按处方组成, 取除黄
芪外的其余药材和辅料按工艺要求制成缺黄芪的阴
性样品,同供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2
2
3
供试品溶液的制备 [ 2]精密量取装量差异项
下的本品 10 mL,置分液漏斗中, 用水饱和正丁醇振
摇提取 4次( 60、40、40、40 mL) , 合并正丁醇液, 用
氨试液洗涤 3次, 每次 40 mL, 弃去氨液, 回收正丁
醇至干,残渣加水 10 mL 使溶解,放冷, 通过 D101大
孔吸附树脂柱(内径 1
5 cm, 长 12 cm ) , 用 50 mL
水洗脱,弃去水液,再用 40%乙醇 50 mL 洗脱,弃去
40%乙醇洗脱液, 继用 70%乙醇 150 mL 洗脱,收集
洗脱液,蒸干, 用甲醇溶解并移置 2 mL 量瓶中, 加
甲醇至刻度, 摇匀,作为供试品溶液。
2
3
空白试验:精密吸取对照品溶液、供试品溶液和
阴性供试品溶液各 5
L,注入高效液相色谱仪,测定,
见图 1。结果表明,阴性对照对黄芪甲苷峰无干扰。
2
4
标准曲线的制备: 分别精密吸取 1
012 mg/ mL
黄芪甲苷对照品溶液 1
0、2
0、4
0、6
0、8
0、10
0
L
注入高效液相色谱仪,以进样量的对数为横坐标,峰
面积的对数为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为
Y= 1
690 4 X+ 5
780 1, r= 0
999 9, 结果表明黄芪
甲苷在 1
012~ 10
12
g 线性关系良好。
2
5
精密度试验: 精密吸取 1
012 mg/ mL 黄芪甲
苷对照品溶液 4
L,连续进样 6次,记录峰面积,结
果其 RSD为 2
10%。
2
6
稳定性试验:取批号 090601样品,制备供试品溶
液,精密吸取供试品溶液 5
L,注入液相色谱仪,分别
在 0、1、2、4、8、12 h进样测定,记录黄芪甲苷峰面积,结
果供试品溶液在 12 h内基本稳定, RSD为2
04%。
2
7
重现性试验:取批号 090601样品 5份,制备供
试品溶液,精密吸取供试品溶液 5
L, 注入液相色
谱仪,记录峰面积,计算黄芪甲苷的质量浓度,结果
其 RSD为 2
20%。

1305
中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
* 收稿日期: 2010- 02-29





















基金项目:国家科技部重大新药创制项目( 2009ZX09313-032)作者简介:吴青业( 1968
) ,男,江苏连云港人,博士,副主任药师,研究方向为中药工艺与质量标准研究。T el: ( 020) ) 87476679
* 通讯作者
萧
伟
T el: ( 0518) 85521956
* -黄芪甲苷
*-ast ragalos ide

图 1
黄芪甲苷对照品( A)、阴性对照 ( B)和芪葛口
服液( C) HPLC色谱图
Fig
1
HPLC Chromatograms of astragaloside

( A) , negative sample ( B) , and Qige Oral
Solution ( C)
2
8
加样回收率试验: 取批号090601样品5份, 每
份约 5 mL,精密称定, 分别精密加入 1
36 mg/ mL
黄芪甲苷对照品溶液 1 mL, 制备供试品溶液,精密
吸取供试品溶液 5
L, 注入液相色谱仪, 记录峰面
积,计算得平均回收率为 96
89%, RSD为 1
58%。
2
9
样品测定:取 8批芪葛口服液, 制备供试品溶
液,每批均平行制备两份,进样测定, 外标法计算,结
果见表 1。
表 1
芪葛口服液中黄芪甲苷的测定结果
Table 1
Determination of astragaloside
in Qige Solution
批号 黄芪甲苷/ ( mg
支- 1 ) 批 号 黄芪甲苷/ ( mg
支- 1)
090601 1
83 090702 1
83
090602 1
24 090703 1
28
090603 1
16 090801 1
34
090701 1
84 090803 1
28
3
讨论
考察了黄芪甲苷供试品溶液的制备方法中水饱
和正丁醇萃取次数对黄芪甲苷转移率的影响,结果
显示萃取 4次时, 黄芪甲苷已提取完全。
参考文献:
[ 1]
朱虹云,徐文峥,刘帅英
HPLC-ELSD 法测定补血颗粒中黄
芪甲苷[ J]
中草药, 2009, 40( 8) : 1247- 1249

[ 2]
中国药典[ S]
一部
2005

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名
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中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月