全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 9 期 2011 年 9 月 ·1736·
HPLC-MS 法测定扶正平消胶囊中 5 种成分
田文君 1, 2，吕 磊 1，赵 亮 1，张 海 1，柴逸峰 3，张国庆 1*
1. 第二军医大学附属东方肝胆外科医院 药材科，上海 200438
2. 中国人民解放军第一七五医院厦门大学附属东南医院 药剂科，福建 漳州 363000
3. 第二军医大学药学院 药物分析学教研室，上海 200433
摘 要：目的 建立扶正平消胶囊中苦杏仁苷、芍药苷、贝母素甲、黄芪甲苷和吴茱萸次碱 5 种成分的 HPLC-MS 测定方法。
方法 色谱条件：色谱柱为 Agilent Eclipse plus C18 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.1%甲酸水为流动相，梯度洗脱；
质谱条件：采用电喷雾离子源（ESI），正离子检测，SIM 模式。结果 苦杏仁苷、芍药苷、贝母素甲、黄芪甲苷和吴茱萸次
碱的定量限分别为 12.9、32.2、1.00、1.21、0.40 ng/mL，检测限分别为 6.46、6.44、0.25、0.61、0.16 ng/mL；在相应的线性
范围内 r＞0.999 0；峰面积之比的日内精密度（RSD）和日间精密度（RSD）均小于 2%，平均回收率均在 98%～102%。
结论 本方法可同时测定扶正平消胶囊中苦杏仁苷、芍药苷、贝母素甲、黄芪甲苷和吴茱萸次碱的量，快速简便，实用性强。
关键词：扶正平消胶囊；苦杏仁苷；芍药苷；贝母素甲；黄芪甲苷；吴茱萸次碱；HPLC-MS
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)09 - 1736 - 04
Determination of five components in Fuzheng Pingxiao Capsula by HPLC-MS
TIAN Wen-jun1, 2, LV Lei1, ZHAO Liang1, ZHANG Hai1, CHAI Yi-feng3, ZHANG Guo-qing1
1. Department of Pharmacy, Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200438, China
2. Department of Pharmacy, No.175 Hospital of PLA, Southeast Hospital Affiliated to Xiamen University, Zhangzhou 363000, China
3. Department of Pharmaceutical Analysis, School of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China
Abstract: Objective To simultaneously determine the contents of five components (amygdalin, paeoniflorin, peimine, astragaloside
IV and rutaecarpine) in Fuzheng Pingxiao Capsula by LC-MS. Methods Chromatographic separation was achieved with gradient
elution by Agilent Eclipse plus C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm) and an Agilent 1100 Mass Spectrometer system was operated
under the SIM mode with electrospray positive ionization (ESI). The mobile phase is acetonitrile-0.1% methanoic acid. Results The
LOQ of amygdalin, paeoniflorin, peimine, astragaloside IV, and rutaecarpine in Fuzheng Pingxiao Capsula were 12.9, 32.2, 1.00, 1.21,
and 0.40 ng/mL, and the LOD were 6.46, 6.44, 0.25, 0.61, and 0.16 ng/mL, respectively. Within the linear range, r > 0.999 0. Both
intra-day and inter-day precision with RSD was less than 2%. The average recovery rates of the five components were in the range of
98%—102%. Conclusion This method is fast, sensitive, and reproducible. It could be used to determine amygdalin, paeoniflorin,
peimine, astragaloside IV, and rutaecarpine in Fuzheng Pingxiao Capsula under the same chromatogram condition.
Key words: Fuzheng Pingxiao Capsula; amygdalin; paeoniflorin; peimine; astragaloside IV; rutaecarpine; HPLC-MS

扶正平消胶囊为第二军医大学东方肝胆外科医
院院内制剂，由东方肝胆外科医院肝外二科陈汉教
授经多年临床应用验方“清消丸”（曾又名“肿瘤丸”）
改变剂型而得。扶正平消胶囊由黄芪、吴茱萸、桃
仁、浙贝母、白芍等 28 味中药组成，针对中医学所
称肿瘤患者气滞血瘀、热度内蕴、肝气疏泄、气阴
两虚的病机理论，采用行气破血、扶正抗邪的抗癌
中药对症治疗，并结合临床长期研究，筛选精炼组
方而成，具有扶正祛邪、活血散结的功效。东方肝
胆外科医院曾对原方进行过较为深入的基础和临床
研究，证明其能延长肝癌大鼠的生存期[1]。目前仅
有应用比色法对其中的黄芪总皂苷进行定量测定的
方法[2]。随着中药质量标准的进步和发展，有必要
对中药复方制剂中多种成分进行定量测定，以对其

收稿日期：2010-12-30
作者简介：田文君（1981—），男，甘肃陇南人，硕士研究生，研究方向为复杂药物体系分析。Tel: (021)81875581 E-mail: jacky0518@tom.com
*通讯作者 张国庆 Tel: (021)81875571 E-mail: gqzhang@smmu.edu.cn
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质量进行更好地控制。本实验建立了高效液相-质谱
（HPLC-MS）联用法对扶正平消胶囊中的苦杏仁苷、
芍药苷、贝母素甲、黄芪甲苷和吴茱萸次碱同时进
行测定，为其质量控制提供依据。
1 仪器与材料
Agilent 1100 LC/MSD 高效液相色谱仪（安捷伦
公司，美国），四极杆质谱检测器，ChemStation 色
谱工作站；Mettler AE240 型电子分析天平（梅特勒-
托利多公司，瑞士），SB3200—T 超声仪（上海科
导超声仪器公司，中国）。
甲醇、乙腈为色谱纯（购自 Fisher 公司），甲酸
为色谱纯（购自 Sigma 公司），水为纯化水。苦杏
仁苷（批号 110820-200002）、芍药苷（批号 110736-
200933）、贝母素甲（批号 110710-201024）、黄芪
甲苷（批号 110781-200613）、吴茱萸次碱（批号
110801-200304）、人参皂苷 Rg1（批号 110703-
200322）对照品均购自中国药品生物制品检定所，
质量分数均大于 98%。扶正平消胶囊（批号
20091201、20100401、20100801）由东方肝胆外科医
院制剂室提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Agilent Eclipse plus C18柱（250 mm×
4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水
溶液（B），梯度洗脱程序：0～5 min，5%～20% A；
5～10 min，20% A；10～20 min，20%～25% A；20～
30 min，25%～60% A；30～40 min，60% A；体积
流量 1.0 mL/min，柱后分流比为 3∶1，柱温 25 ℃；
进样量 5 μL。
2.2 质谱条件
电喷雾离子源（ESI），正离子检测，选择离子
监测模式：苦杏仁苷 [M＋Na]＋，m/z 480.2；芍药
苷 [M＋Na]＋，m/z 503.2；贝母素甲 [M＋H]＋，m/z
432.4；黄芪甲苷 [M＋Na]＋，m/z 807.6；吴茱萸次
碱 [M＋H]＋，m/z 288.1；内标为人参皂苷 Rg1 [M＋
Na]＋，m/z 823.5。干燥气（N2）体积流量 9.0 L/min，
雾化气压力为 275.8 kPa，干燥气温度 350 ℃，裂解
电压分别为 70 V（苦杏仁苷、黄芪甲苷、人参皂苷
Rg1）、140 V（芍药苷）、120 V（贝母素甲）、130 V
（吴茱萸次碱），毛细管电压为 3.5 kV。
2.3 对照品储备液的制备
精密称取苦杏仁苷对照品 8.08 mg、芍药苷对照
品 8.05 mg、贝母素甲对照品 10.04 mg、黄芪甲苷对
照品 6.05 mg、吴茱萸次碱对照品 8.01 mg，置 10 mL
量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，混匀，分别制
成含苦杏仁苷 808.0 μg/mL、芍药苷 805.0 μg/mL、
贝母素甲 1.004 mg/mL、黄芪甲苷 605.0 μg/mL、吴
茱萸次碱 801.0 μg/mL 的对照品储备液，待用。
2.4 内标溶液的制备
精密称取人参皂苷 Rg1对照品 6.06 mg，置 10
mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，混匀，制
成人参皂苷 Rg1 606.0 μg/mL 的内标溶液，待用。
2.5 供试品溶液的制备
精密称取扶正平消胶囊内容物 6.484 4 g，置圆
底烧瓶中，精密加入甲醇 25 mL，称定质量，水浴
加热回流 1 h，放冷，补足减失的质量，混匀，滤过。
精密吸取 5 mL 续滤液置 10 mL 量瓶中，用甲醇稀
释至刻度，混匀，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，置 4 ℃
冰箱保存，备用。
2.6 阴性对照液的制备
按处方量精密称取除桃仁、白芍、浙贝母、黄
芪、吴茱萸外的 23 种药材，按处方工艺制备阴性对
照样品，并按“2.5”项下条件制备阴性对照液。
2.7 线性关系考察
精密吸取苦杏仁苷对照品溶液 2 mL、芍药苷对
照品溶液 0.1 mL、贝母素甲对照品溶液 0.2 mL、黄
芪甲苷对照品溶液 0.4 mL、吴茱萸次碱对照品溶液
0.2 mL，置 10 mL 量瓶中，甲醇稀释，制成含苦杏
仁苷 161.6 μg/mL、芍药苷 8.05 μg/mL、贝母素甲
20.08 μg/mL、黄芪甲苷 24.2 μg/mL 和吴茱萸次碱
16.02 μg/mL 的混合对照品溶液。以甲醇按 1、2、5、
10、20、50 的比例稀释成不同质量浓度的混合对
照品溶液，在每份混合对照品溶液中精密加入内标
溶液 1 mL，按“2.1”项和“2.2”项下条件进样分
析，以质量浓度为横坐标（X），峰面积值与内标
峰面积值的比值为纵坐标（Y）进行线性回归，结
果见表 1。

表 1 线性关系考察
Table 1 Linear relationship
化合物 回归方程 r 线性范围/
(μg·mL−1)
苦杏仁苷 Y＝0.029 8 X＋0.116 9 0.999 5 3.23～161.60
芍药苷 Y＝0.042 4 X＋0.009 5 0.999 3 0.16～ 8.05
贝母素甲 Y＝0.480 4 X＋0.629 5 0.999 1 0.40～ 20.08
黄芪甲苷 Y＝0.040 6 X＋0.028 0 0.999 0 0.48～ 24.20
吴茱萸次碱 Y＝0.561 5 X＋0.420 4 0.999 0 0.32～ 16.02
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2.8 定量限和检测限
取混合对照品溶液，以甲醇依次稀释成梯度质
量浓度溶液，按“2.1”项和“2.2”项下条件进行分
析，以信噪比 10 倍（S/N＝10）和 3 倍（S/N＝3）
时的质量浓度为定量限和检测限。苦杏仁苷、芍药
苷、贝母素甲、黄芪甲苷和吴茱萸次碱的定量限分
别为 12.9、32.2、1.00、1.21、0.40 ng/mL，检测限
分别为 6.46、6.44、0.25、0.61、0.16 ng/mL。
2.9 精密度试验
取低、中、高 3 种质量浓度（苦杏仁苷 3.232、
32.32、161.6 μg/mL，芍药苷 0.161、1.61、8.05 μg/mL，
贝母素甲 0.401 6、4.016、20.08 μg/mL，黄芪甲苷
0.484、4.840、24.20 μg/mL，吴茱萸次碱 0.320 4、
3.204、16.02 μg/mL）的混合对照品溶液 5 μL，各
连续进样 3 次，以及分别连续进样 3 d，按“2.1”
项和“2.2”项下条件分析，进行日内和日间精密度
考察，其峰面积比的 RSD 见表 2。
2.10 稳定性试验
取扶正平消胶囊同一供试品（批号 20091201）
溶液，精密加入内标溶液 1 mL，分别在 0、3、6、
9、12、18、24、36、48 h，按“2.1”项和“2.2”
项下条件进样分析，计算供试品溶液中 5 种成分对
内标的峰面积比，其峰面积比的 RSD 见表 2。结果
表明，供试品溶液在 48 h 内稳定。
2.11 重现性试验
平行精密称取扶正平消胶囊（批号 20091201）
样品 6 份，制备供试品溶液，精密加入内标溶液
1 mL，按“2.1”项和“2.2”项下条件分析测定 5
种成分，其 5 种成分质量分数的 RSD 见表 2。
2.12 回收率试验
称取约 6.50 g 扶正平消胶囊（批号 20091201）
药粉 3 份，精密称定，分别按低、中、高 3 种水平
（苦杏仁苷 20、40、60 μL，芍药苷 20、40、60 μL，
表 2 扶正平消胶囊中 5 种成分的精密度、稳定性、重现性
考察结果
Table 2 Precision, stability, and reproducibility of five
components in Fuzheng Pingxiao Capsula
精密度 RSD/%
化合物
日内 日间
稳定性
RSD/%
重现性
RSD/%
苦杏仁苷 1.50 1.4 2.0 1.90
芍药苷 1.10 2.0 2.0 1.40
贝母素甲 0.95 1.6 1.5 0.89
黄芪甲苷 1.20 1.7 1.5 0.98
吴茱萸次碱 0.88 1.9 1.2 1.20

贝母素甲 25、50、75 μL，黄芪甲苷 40、80、120 μL，
吴茱萸次碱 45、90、135 μL）精密加入 5 种对照品
储备液，按“2.5”项下操作，每个质量浓度平行操
作 3 份，测定并计算回收率。结果苦杏仁苷、芍药
苷、贝母素甲、黄芪甲苷、吴茱萸次碱的平均回收
率分别为 100.6%、101.0%、100.8%、100.1%、99.71%，
RSD 分别为 1.04%、0.61%、0.95%、1.43%、0.89%。
2.13 样品测定
取 3 个批次扶正平消胶囊各 45 粒，每个批次取
3 份，精密称取内容物，制备供试品溶液，精密加
入内标溶液 1 mL，按“2.1”项和“2.2”项下条件
分析测定，计算质量分数，结果见图 1 及表 3。
3 讨论
3.1 检测对象的选择
选择的 5 种成分分别是本处方中桃仁、白芍、
浙贝母、黄芪、吴茱萸 5 味药材的特有成分，这 5
味药材在处方中各发挥不同作用。黄芪，为主药，
属扶正一族，补气升阳；桃仁，主攻淤血而为肝药，
活血化瘀、破血行气；浙贝母，苦寒泄降、散结解
毒；白芍，养阴柔肝、缓中止痛、敛阴收汗；吴茱
萸，散寒止痛[3]。因此，对这 5 个成分进行定量控
制，对此复杂组方的质量控制，具有重要意义。




1-苦杏仁苷 2-芍药苷 3-贝母素甲 4-人参皂苷 Rg1（内标） 5-黄芪甲苷 6-吴茱萸次碱
1-amygdalin 2-paeoniflorin 3-peimine 4-ginsenoside Rg1 (internal standard) 5-astragaloside IV 6-rutaecarpine
图 1 5 种对照品（A）、扶正平消胶囊样品（B）、阴性对照（C）的 LC-MS 色谱图
Fig. 1 LC-MS chromatograms of five reference substances (A), Fuzheng Pingxiao Capsula sample (B), and negative control (C)
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
6
A B C
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
t / min
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表 3 扶正平消胶囊中 5 种成分的测定 (n＝9)
Table 3 Determination of five components in Fuzheng
Pingxiao Capsula (n = 9)
质量分数/(μg·g−1)
批 次
苦杏仁苷 芍药苷 贝母素甲 黄芪甲苷 吴茱萸次碱
20091201 41.563 4.555 8.218 2.752 5.994
20100401 38.143 4.212 7.089 2.446 5.371
20100801 44.437 3.477 5.030 2.935 2.120

3.2 实验条件的优化
3.2.1 提取条件优化 比较了加热回流和超声提取
两种方法，结果表明加热回流好于超声提取。分别
考察了 70%甲醇溶液、甲醇和 70%乙醇溶液、乙醇
的提取效果，结果甲醇提取效果最好。以甲醇回流
提取 30、60、90 min，结果表明 60、90 min 5 种成
分的提取率基本相同。综合考虑多种因素，采用甲
醇加热回流 60 min 制备供试品溶液，简单、快速、
提取率高。
3.2.2 色谱柱选择 对 Agilent Eclipse plus C18 柱
（250 mm×4.6 mm，5 μm），Agilent Zorbax SB-C18柱
（250 mm×4.6 mm，5 μm）和 Waters Atiantis C18柱
（250 mm×4.6 mm，5 μm）分别进行了考察，发现
Agilent Eclipse plus C18 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）
分离效果最佳。
3.2.3 色谱、质谱条件优化 对液相流动相甲醇-
水和乙腈-水体系进行了比较，选择了乙腈-水体
系，同时发现向水中加入甲酸，使得分离效果及
峰型更佳，比较了加入 0.1%、0.2%、0.5%甲酸的
分离效果，发现加入 0.1%甲酸效果最佳。对于质
谱条件的优化，考察了离子监测模式，本实验中
5 种成分在正离子检测模式下响应较好。文献报
道黄芪甲苷在负离子检测模式下响应较好[4]，而在
本实验条件下，黄芪甲苷在负离子检测模式下无响
应；此外，芍药苷在正、负离子检测模式下均有响
应，但经对比发现在本实验条件下，正离子检测模
式下响应更好。质谱的最佳工作参数是通过流动注
射分析（FIA）方法，对干燥气体积流量、雾化器
压力及裂解电压等条件进行优化后确定的。
3.2.4 内标选择 经预试验表明待测的制剂样品中
不含有人参皂苷 Rg1，且在“2.1”项和“2.2”项所
述的色谱-质谱条件下，该成分与待测的苦杏仁苷、
芍药苷、贝母素甲、黄芪甲苷和吴茱萸次碱能够完
全分离，出峰时间稳定，因此本实验选用人参皂苷
Rg1 作为内标。
扶正平消胶囊在东方肝胆外科医院使用多年，
临床效果较好，但由于其组方复杂，一直以来缺少
质量控制方法。目前对这 5 种成分的定量测定方法
主要有高效液相色谱法[5-9]，薄层扫描法[10-12]，比色
法[2]，高效毛细管电泳法[13-14]。未见有在如此复杂
组方中同时测定若干成分的报道。本方法利用
LC-MS 的选择离子监测模式（SIM），同时测定其
中 5 种成分的量，避免了其他组分的干扰，具有简
单、灵敏、准确、实用的特点，有利于进一步完善
扶正平消胶囊质量控制及其相关研究。
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