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芪苈强心胶囊活性部位中的组成成分研究
刘奕训1 ,余河水1 ,康利平1 ,邹 鹏1 ,贾继明2 , 王宏涛2 , 郑亚杰2 ,田书彦2 ,吴以岭2* ,马百平1*
( 1 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京 100850; 2 河北以岭医药研究院,河北 石家庄 050035)
摘 要: 目的 分离鉴定芪苈强心胶囊活性部位中的成分。方法 采用溶剂提取和大孔吸附树脂柱色谱的方法分
离芪苈强心胶囊的不同部位, 通过活性筛选确定有效部位, 利用 HPLCPDA/ ELSD 进行活性部位的指纹图谱分
析,并通过柱色谱对其中的化学成分进行分离纯化, 根据所得化合物的核磁、质谱数据及与对照品对比鉴定化合物
的结构。结果 W4 和 E4为芪苈强心胶囊的强心、利尿及扩血管等活性部位, 建立了其 H PLCPDA/ ELSD的指
纹图谱,并从中分离鉴定了 11 个化合物,分别为毛蕊异黄酮7OD葡萄糖苷( 1)、人参皂苷 Re( 2)、人参皂苷 Rg 1
( 3)、杠柳苷 G( 4)、人参皂苷 Rf( 5)、人参皂苷 Rb1 ( 6)、人参皂苷 Rc( 7)、人参皂苷 Rb2 ( 8)、丹酚酸 B( 9)、山柰酚3
O芸香糖苷( 10)和丹酚酸 A( 11)。结论 明确了芪苈强心胶囊强心、利尿及扩血管的活性部位, 11 个化合物均为
首次从芪苈强心胶囊中得到的化合物,这些化合物在活性部位中的指认为提供胶囊的质量标准奠定了基础,同时
为阐述芪苈强心胶囊的药效物质打下了基础。
关键词:芪苈强心胶囊; 活性部位;人参皂苷
中图分类号: R284 1 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 07106006
Chemical components of active fractions from Qili Qiangxin Capsula
LIU Yixun1 , YU Heshui1 , KAN G Liping1 , ZOU Peng1 , JIA Jiming2 , WANG Hongtao2
ZHENG Yajie2 , T IAN Shuyan2 , WU Yiling2 , MA Baiping1
( 1 Beijing Institute of Radiation Medicine, Academy of M ilitar y Medical Sciences, Beijing 100850, China;
2 H ebei Y iling M edicine Inst itute, Shijiazhuang 050035, China)
Abstract: Objective T o study the chem ical components of active f ract ions in Qili Qiangx in Capsula
Methods The active f ract ions w ere obtained by means of solvent ex tr act ion, chromatog raphy on absorbent
resin, and act ivity screening T he fingerprints of act iv e fr act ions w ere analy zed by HPLCPDA/ ELSD
The compounds w ere isolated by chromatog raphy on silica gel and ODS r epeatedly and their st ructur es
w ere elucidated on the basis o f chemical methods and spect ral analy ses Results The HPLCPDA/ ELSD
fingerpr ints of act iv e fractions ( W4 and E4) w ith cardiac, diuret ic, and vasodilator effects w ere esta
blished T he eleven compounds w ere obtained from them They w er e identif ied as calycosin7ODg lu
copyrano side ( 1) , g insenosides Re ( 2) , ginseno side Rg 1 ( 3) , per iplocoside G ( 4) , ginsenosides Rf ( 5) ,
ginseno sides Rb1 ( 6) , g insenosides Rc ( 7) , ginsenosides Rb2 ( 8) , salvianolic acid B ( 9) , kaempfer ol3rut i
noside ( 10) , and salvianolic acid A ( 11) Conclusion T he eleven compounds are ident if ied from Qili
Qiangx in Capsula for the first t ime T his study establishes the foundation for improving the quality criteria
and explaining the mechnism of Qili Qiangx in Capsula
Key words: Qili Qiangx in Capsula; active fractions; g insenosides
1060 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
* 收稿日期: 20100120 基金项目:国家科技支撑计划资助项目( 2006BAI08B0409) ;国家重点基础研究发展计划( 973计划)资助项目( 2005CB523301)作者简介:刘奕训( 1984 ) ,女,湖南永州人,从事中药有效成分分离鉴定工作。
* 通讯作者 马百平 T el/ Fax: ( 010) 66930265 Email: m a_bp@ sohu com吴以岭 T el/ Fax: ( 0311) 85901718 Email: jiatcm@ 163 com
中药复方是中医药临床用药的主要形式, 它以
中医基础理论为指导,按照君臣佐使的组方原则, 选
用恰当的药物定量配伍而成。中药复方的成分和药
效不是各药味的简单组合, 其物质基础的研究对理
解中药复方的配伍及作用十分重要。近年来, 中药
复方的临床研究发展迅速, 但其中复杂的成分间相
互作用及确切药理机制尚未完全清楚。所以中药复
方药效物质基础的研究已成为当前的热门课题。芪
苈强心胶囊是由黄芪、人参、葶苈子、香加皮、红花等
11味中药组成的复方中药, 具有益气温阳、活血通
络、利水消肿等功效,用于冠心病、高血压病所致轻、
中度充血性心力衰竭等疾病。药理研究表明芪苈强
心胶囊可使慢性心力衰竭模型动物的心肌收缩力、
心输出量和肾血流量增加, 可使心室壁厚度和心脏
指数降低, 血管紧张素!和醛固酮水平降低, 还具有
延长常压下小鼠的存活时间等作用 [ 1~ 4]。目前对芪
苈强心胶囊的研究主要集中在临床应用方面, 而对
其指标性活性成分研究较少。为了研究其活性成分
并阐述其药效物质基础, 笔者对芪苈强心胶囊进行
了较为系统的化学成分研究。通过强心、利尿及扩
血管的活性追踪分离,得到了其主要活性部位,建立
了有效部位的 HPLCPDA/ ELSD 的指纹图谱, 并
从活性部位分离纯化得到 11个化合物, 通过光谱分
析并与对照品对照, 鉴定其结构分别为毛蕊异黄酮
7OD葡萄糖苷 ( 1)、人参皂苷 Re ( 2)、人参皂苷
Rg1 ( 3)、杠柳苷 G ( 4)、人参皂苷 Rf( 5)、人参皂苷
Rb1 ( 6)、人参皂苷 Rc( 7)、人参皂苷 Rb2 ( 8)、丹酚酸
B( 9)、山柰酚3O芸香糖苷( 10)和丹酚酸 A ( 11)。
11个化合物均为首次从芪苈强心胶囊中分离得到,
为提高胶囊的质量标准和阐述胶囊的药效物质打下
了基础。
1 仪器与材料
质谱用 M icromass AzbSpec高分辨磁质谱仪测
定,核磁共振谱用 VarianUNITY INOVA 600超导核
磁共振谱仪测定。高效液相色谱仪为Waters 2695
Alliance Separat ions Module, Empow er Pro 工作
站( W aters, 美国) , 996 PDA 二极管阵列检测器
( Waters,美国) , A lltech 2000 蒸发光散射检测器
( Alltech,美国) ;色谱柱: Hanbon lichroshper C18柱
( 250 mm ∀ 4 6 mm, 5 m) , Phenomenex C18制备柱
( 250 mm ∀ 10 mm, 8 m)。SP825 大孔吸附树脂
(三菱, 日本) ; 开放 C18柱色谱填料为 ODSA ( 12
nm , 50 m, YMC, 日本) ;薄层色谱硅胶板 GF 254 (青
岛海洋化工厂)。M illipo re synergy 纯水器; Sarto
rius BP211D + 万分之一天平; 真空冰冻干燥机
( ALPHA 12 LD) ; Anke DL6000B型离心机。甲
醇(色谱纯, Fisher, 美国) , 水为超纯水(实验室自
制) ,乙醇、乙酸铵、乙酸等其他试剂(北京化工厂)均
为分析纯。
芪苈强心胶囊来自河北以岭药业, 批号:
0711205。
2 实验方法
2 1 提取与分离:芪苈强心胶囊是由黄芪、人参、葶
苈子等 11味中药组成的复方,其制备工艺为丹参、红
花等水煎提,陈皮等水蒸气蒸馏法提取, 黄芪、人参、
葶苈子、香加皮等乙醇回流提取, 3部分提取物合并
制备胶囊。按照胶囊剂提取工艺,黄芪、人参、香加皮
等用 8倍量70%乙醇回流提取2次,每次 3 h,提取液
经 AB8型大孔吸附树脂柱色谱,分别用水和 10%、
30%、50%、70%、95%乙醇洗脱, 其中 10%、30%、
50%乙醇洗脱部分为活性部位, 记为 E2、E3、E4。
丹参、红花等用 8倍量水提取 2次,每次 2 h,提取液
进行大孔吸附树脂分离, 分别用水和 10%、30%、
50%、70%、95%乙醇洗脱, 其中 30%和 50%乙醇洗
脱部分为活性部位,记为W3和W4。
E4( 20 g)通过硅胶柱色谱,三氯甲烷甲醇水
梯度( 18#3# 0∃ 9#2 #0∃ 65# 35# 10)洗脱, 分份
收集, 每份 100 mL, 共 150份。合并 40~ 48 流份
[三氯甲烷甲醇( 18# 3)洗脱部分] , 再经开放 C18柱
色谱, 甲醇水( 1 # 1)为洗脱剂, 得化合物 2( 51 4
mg)和 3( 12 2 mg) ;合并三氯甲烷甲醇( 9 #2)洗脱
部分的 69~ 85 流份, 再经开放 C18柱色谱, 甲醇水
( 1 #1)为洗脱剂, 得化合物 1( 211 2 mg ) , 合并 105
~ 113流份,再经开放 C18柱色谱,甲醇水( 3 # 2)为
洗脱剂,得化合物 5( 21 6 mg) ;合并三氯甲烷甲醇
水( 65# 35# 10)洗脱部分的 139~ 149流份,经开放
C18柱色谱, 甲醇水 ( 1 # 1)为洗脱剂, 得化合物 4
( 110 8 mg )。甲醇洗脱部分减压浓缩干燥得 3 g,
再经开放 C18柱色谱,甲醇水( 7 #3)为洗脱剂,分份
收集, 每份 100 mL, 共 90 份, 合并 62~ 67 流份,
HPLC 制备 [甲醇水 ( 7 # 3) ]得到化合物 6 ( 24 4
mg) ;合并 74~ 78 流份, HPLC 制备 [甲醇水( 7 #
3) ]得到化合物 7( 10 8 mg) ; 86流份经 HPLC制备
[甲醇水( 7 #3) ]得到化合物 8( 21 4 mg )。
取 W4 ( 2 6 g ) 经 C18 开放柱色谱, 甲醇
0 012 5%三氟乙酸梯度洗脱, 分份收集, 合并 28~
43流份,得到化合物 10( 322 1 mg) ;合并流份 69~
72经过 HPLC[甲醇0 012 5%三氟乙酸( 45 #55) ]
1061中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
制备得到化合物 11( 7 2 mg ) , 合并流份 101~ 107
经过 HPLC[甲醇0 012 5%三氟乙酸( 48 # 2) ]制
备得到化合物 9( 42 3 mg )。
2 2 活性筛选:采用 BL420E+ 生物机能实验信号
采集系统, 监测离体蛙心收缩曲线, 其中 W3、W4、
E3、E4可明显增强离体蛙心收缩力; 采用水负荷
法观察受试物对小鼠尿量的影响,筛选出具有利尿
作用的提取部位 E2、E4; 采用苯肾上腺素刺激大鼠
胸主动脉血管环收缩。达到最大收缩幅度后, 加入
累计浓度的试验药物溶液, 得到有扩血管作用的提
取部位W3、W4、E2、E3。
3 结构鉴定
化合物 1: 淡黄色粉末。正离子 FABMS m/ z :
447[ M + H ]
+
, 2850[ M + H- 162] + , 提示化合物 1
含有 1 个六碳糖, 分子式C22H22O10 ; 13 CNMR( DM
SOd6 , 150 MHz) : 103 4 ( C8) , 116 4( C6) , 123 5
( C3) , 126 9( C5) , 153 5( C2) , 156 9( C9) , 161 4
( C7) , 174 6( C4) , 556( OMe) , 124 4( C1%) , 115 6
( C2%) , 146 0( C3%) , 147 5( C4%) , 111 9( C5%) , 119 7
( C6%) , 99 9( C1&) , 73 1( C2&) , 76 4( C3&) , 696( C
4&) , 772( C5&) , 60 6( C6&)。以上数据经与文献中毛
蕊异黄酮7OD葡萄糖苷[ 7] 对照基本一致,鉴定化
合物 1为毛蕊异黄酮7OD葡萄糖苷。
化合物 2: 白色粉末。正离子 FABMS m/ z :
947 5[ M + H ] + , 767 4 [ M + H - 180] + , 621 4
[ M+ H- 180- 146] + , 441 4[ M + H- 180- 146-
180]
+
,提示化合物 2含有 2个六碳糖, 1个脱氧六
碳糖,分子式为C48H 82O18 ; 13CNMR数据 (表 1) 与
文献中人参皂苷 Re基本一致 [ 8] , 鉴定化合物 2 为
人参皂苷 Re。
化合物 3: 白色粉末。正离子 FABMS m/ z :
801 4[ M + H ] + , 621 5 [ M + H - 180] + , 603 4
[ M+ H - 180 - H 2O ]
+
, 441 4 [ M + H - 180 -
H2O- 162]
+
,提示化合物 3含有 2个六碳糖, 分子
式为C42H 72O14 ; 13CNMR数据(表 1)与文献中人参皂
苷Rg1 基本一致[ 5] ,鉴定化合物 3为人参皂苷 Rg1。
化合物 4: 白色粉末。正离子 FABMS m/ z :
697 1[ M + H ] + , 535 1 [ M + H - 162] + , 373 1
[ M+ H- 162- 162] + ,提示化合物 4含有 2个六碳
糖,分子式为C36H 56O 13 ; 13CNMR( pyridined5 , 150
MHz) : 16 2 ( C18) , 17 3 ( C19 ) , 22 0 ( C11 ) ,
24 4( C7) , 26 1 ( C1) , 26 4 ( C2) , 27 3 ( C16) ,
33 2( C15) , 35 4 ( C4) , 35 5 ( C6) , 39 3 ( C9) ,
39 9( C12) , 41 0( C8) , 41 2( C10) , 50 0( C13) ,
51 3( C17) , 73 7( C5) , 84 7( C14) , 117 7( C22) ,
174 5( C23) , 175 9 ( C20) , 58 6( OM e) , 97 4 ( C
1%) , 36 7( C2%) , 77 9( C3%) , 82 9( C4%) , 69 6 ( C
5%) , 18 7( C6%) , 106 6( C1&) , 76 1( C2&) , 78 4( C
3&) , 71 9( C4&) , 78 5( C5&) , 63 1 ( C6&)。以上数
据与文献中杠柳苷 G[ 6] 基本一致,鉴定化合物 4为
杠柳苷 G。
化合物 5: 白色粉末, 正离子 FABMS m/ z :
801 3 [ M + H ] + , 621 2 [ M + H - 180] + , 603 2
[ M + H - 180 - H2O]
+
, 441 2 [ M + H - 180 -
H 2O- 162] + ,提示化合物 5含有 2个六碳糖,分子
式为C42H 72O 14。13 CNMR数据(表 1)与文献中人参
皂苷 Rf基本一致[ 9] , 鉴定化合物 5为人参皂苷 Rf。
化合物 6:白色粉末。正离子FABMS谱中,可
以看到 m/ z : 1 131 5 [ M + Na ] + , 1 109 5 [ M +
H ] + , 947 4[ M + H- 162] + , 785 3[ M + H - 162-
162]
+
, 749 3[ M + H - 162- 162- H 2O- H 2O] + ,
587 3[ M+ H - H 2O - H 2O - 162- 162- 162] + ,
425 2[ M + H - H 2O- H 2O - 162- 162- 162-
162] + ,提示化合物 6 含有 4 个六碳糖, 分子式为
C54H 92O 23。13 CNMR数据(表 1)与文献中人参皂苷
Rb1 基本一致 [ 10] ,鉴定化合物 6为人参皂苷 Rb1。
化合物 7和 8: 均为白色无定形粉末。在正离
子 FABMS 谱中,可以看到相同的分子离子峰和碎
片峰m/ z : 1 079 5 [ M + H ] + , 1 061 5 [ M + H -
H 2O] + , 917 4 [ M + H - 162] + , 785 5 [ M + H -
162- 132] + , 767 3[ M + H - 162- 132- H2O] + ,
749 3[ M + H - 162- 132- H 2O- H2O] + , 587 3
[ M + H - H 2O - H 2O- H 2O- 162- 132- 162] ,
425 2[ M+ H - H 2O- H 2O - H 2O- 162- 132-
162- 162] + , 提示化合物 7和 8 均含有 3个六碳糖
基和 1 个五碳糖基, 为同分异构体, 分子式为
C53H 90O 22。13 CNMR中, 两者阿拉伯糖的端基碳明显
不同,化合物7为109 9,化合物8为104 6,提示阿拉
伯糖分别为呋喃型和吡喃型,具体数据(表 1)分别与
文献中人参皂苷 Rc和人参皂苷 Rb2 [ 11~ 13]一致,鉴定
化合物 7为人参皂苷Rc, 8为人参皂苷Rb2。
化合物 9: 浅黄色无定形粉末, 三氯化铁试剂反
应呈褐色。与丹酚酸 B 对照品共薄层, Rf 值一致;
HPLC 分析,与丹酚酸 B对照品保留时间相同, 紫
外光谱图一致。化合物 9鉴定为丹酚酸 B。
化合物 10:黄色无定形粉末。正离子 FABMS
m/ z : 595 1 [ M + H ] + , 449 0 [ M + H - 146] + ,
287 0[ M + H - 146- 162] + 。13 CNMR( acetone
d6 , 150 MHz) : 18 1 ( CRha6) , 68 0 ( CGlc6) ,
68 8( CRha5) , 70 7 ( CRha2) , 71 7 ( CGlc4) ,
72 2( CRha3) , 73 8 ( CRha4) , 76 8 ( CGlc2) ,
77 8( CGlc5) , 78 2( CGlc3) , 94 8( C8) , 99 7( C
1062 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
表 1 化合物 2、3、5~ 8 的碳谱数据( pyridine d5 )
Table 1 13CNMR Data of compounds 2, 3, and 5- 8 ( in pyridined5 )
碳位 2 3 5 6[10] 7[ 11] 8[ 12, 13]
1 39 5 39 5 39 4 392 39 2 39 2
2 27 9 27 8 27 8 267 26 6 26 7
3 78 7 78 7 78 7 889 89 0 88 9
4 40 4 39 7 40 2 397 39 7 39 7
5 61 4 60 9 61 5 564 56 4 56 4
6 78 2 74 7 78 1 185 18 5 18 5
7 45 2 45 9 45 1 352 35 1 35 2
8 41 2 41 3 41 2 401 40 0 40 1
9 50 0 49 6 50 2 503 50 2 50 2
10 39 7 40 0 39 7 369 36 9 36 2
11 30 7 30 8 31 1 309 30 8 30 8
12 70 2 70 2 71 0 702 70 2 70 2
13 49 2 49 1 48 3 495 49 5 49 5
14 51 3 51 4 51 7 514 51 4 51 4
15 31 0 31 0 27 0 307 30 7 30 7
16 26 7 26 7 27 0 268 26 8 26 8
17 51 5 51 7 54 8 516 51 6 51 7
18 17 6 17 3 17 4 163 16 3 16 3
19 17 2 17 5 17 6 160 16 0 16 0
20 83 3 83 3 72 9 836 83 5 83 5
21 22 3 22 3 26 9 269 22 4 22 4
22 36 2 36 1 35 8 362 36 2 36 9
23 23 2 23 2 23 0 232 23 1 23 2
24 125 9 126 0 126 4 1260 126 0 125 9
25 130 9 130 9 130 8 1311 131 1 131 1
26 25 8 25 8 25 8 258 25 8 25 8
27 17 8 17 8 17 7 179 17 9 17 9
28 31 8 32 2 31 3 281 28 1 28 1
29 16 4 17 3 16 8 166 16 7 16 6
30 17 6 17 7 16 8 174 17 4 17 4
6OGlc
1% 106 0 101 9 103 9 1051 105 0 105 1
2% 75 5 79 3 79 9 835 83 1 83 6
3% 78 7 78 3 79 8 772 77 8 78 1
4% 71 7 72 3 72 4 716 71 6 71 7
5% 79 4 78 3 77 9 781 77 8 78 3
6% 62 9 62 9 63 4 629 62 6 62 7
2%ORha 2%OGlc 2%OGlc 2%OGlc 2%OGlc
1& 101 9 103 9 1061 105 6 106 1
2& 72 5 79 8 771 76 8 76 8
3& 72 6 78 7 783 78 9 79 3
4& 74 2 71 8 717 71 6 71 9
5& 69 5 76 1 784 78 0 78 4
6& 18 8 63 0 627 62 6 62 9
20OGlc
1 98 3 93 3 981 98 0 98 2
2 75 2 75 2 749 77 9 74 9
3 79 7 79 5 793 78 0 77 9
4 71 9 71 7 718 71 5 72 2
5 79 7 78 4 753 76 3 77 2
6 63 1 63 1 703 68 3 69 2
6 OGlc 6 OAra( f ) 6 OAra( p)
1&& 1054 109 9 104 6
2&& 749 83 3 72 2
3&& 784 78 6 74 2
4&& 716 85 8 68 6
5&& 779 62 6 65 6
6&& 629
1063中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
6) , 102 0 ( CRha1 ) , 105 4 ( CGlc1) , 105 5 ( C
10) , 115 8( C5%) , 116 0( C3%) , 122 4( C1%) , 132 2
( C2%) , 132 2 ( C6%) , 135 6 ( C3) , 158 0 ( C2 ) ,
158 7( C9) , 161 0( C4%) , 162 9( C5) , 165 2( C7)
和 179 1( C4)。以上数据与文献报道的山柰酚3
O芸香糖基本一致[ 14] , 鉴定化合物 10 为山柰酚3
O芸香糖苷。
化合物 11:黄色无定形粉末, 三氯化铁试剂反
应呈褐色。正离子 FABMS m/ z : 495 1 [ M +
H ]
+ 。13 CNMR( acetoned6 , 150 MHz) : 37 5( C
7%) , 73 8 ( C8%) , 113 7 ( C2&) , 114 8 ( C5) , 116 0
( C8) , 116 1 ( C5%) , 116 3 ( C5&) , 117 2 ( C2%) ,
119 8( C6) , 120 3 ( C6&) , 121 7( C8&) , 121 7( C
6%) , 126 0 ( C1) , 127 6( C2) , 129 2 ( C1%) , 130 9
( C1&) , 137 5 ( C7&) , 144 0 ( C3) , 144 8 ( C4%) ,
145 7( C3%) , 145 8( C3&) , 146 1( C4&) , 146 4( C
7) , 147 5( C4) , 166 9( C9)和 171 1( C9%)。以上
数据与文献报道的丹酚酸 A 一致 [ 15] , 鉴定化合物
11为丹酚酸 A。
4 讨论
芪苈强心胶囊是经临床验证的对心力衰竭等疾
病有较好临床效果的复方中药。芪苈强心胶囊中含
有 11味中药,其化学成分十分复杂,为了阐述其药
理作用及其机制,进行其物质基础研究是十分必要
的。按照复方有效部位和单体化合物的研究思路与
方法,通过多指标活性追踪的分离,得到了其活性部
位;并利用 HPLCPDA 和 ELSD 串联进行了其分
析,发现 E4部分基本包含 E2和 E3的成分, W4
基本包含W3的成分。对芪苈强心胶囊的主要活
性部位,我们进行了主要化学成分的分离鉴定,同时
探讨了各化合物的药味来源归属,其中 6个三萜皂
苷来源于人参;杠柳苷 G 来源于香加皮;毛蕊异黄
酮7OD葡萄糖苷来源于黄芪;丹酚酸 B 和丹酚
酸 A 来源于丹参; 山柰酚3O芸香糖苷来源于红
花。已有文献报道,杠柳苷 G具有强心作用 [ 16] , 毛
蕊异黄酮7OD葡萄糖苷具有抗心肌缺血作
用[ 17] ,丹酚酸 A 和丹酚酸 B 具有心肌保护、防治心
肌缺血再灌注损伤和抗动脉粥样硬化的作用 [ 18, 19] ,
且丹酚酸 B亦为双丹口服液中的主要有效成分 [ 20] ,
人参皂苷 Rb1、Rb2、Rc 均具有钙离子阻滞作用, 有
抗心肌缺血再灌注损伤的作用 [ 20~ 23] ,这些化合物具
有各自的作用机制和靶点, 可能通过协同或互补作
用,产生强心、利尿及扩血管的作用,从而治疗冠心
病、高血压病所致轻、中度充血性心力衰竭等疾病。
下一步可在本研究的基础上, 对得到的单体化合物
进行相关活性筛选及机制靶点的研究, 阐释芪苈强
心胶囊的多成分多靶点的整合调节作用。
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小叶忍冬藤的化学成分研究
刘 伟,白素平* , 梁会娟,袁永亮
(新乡医学院药学院, 河南 新乡 453003)
摘 要:目的 研究小叶忍冬 Lonicera micr op hy lla 藤的化学成分。方法 应用硅胶柱色谱及反复重结晶分离小
叶忍冬藤的化学成分,通过现代波谱技术鉴定化合物的化学结构。结果 从小叶忍冬藤中分离鉴定了 11 个化合
物,其中 8 个黄酮类化合物, 3 个甾体类化合物, 分别鉴定为木犀草素( 1)、香叶木素 ( 2)、圣草酚 ( 3)、金圣草黄素
( 4)、芹菜素( 5)、罗汉松双黄酮 A( 6)、柏木双黄酮( 7)、香叶木素7OD葡萄糖苷( 8)、谷甾醇( 9)、( 24S )3, 5!,
6豆甾烷三醇( 10)、( 22E, 24R)麦角甾7, 22二烯3, 5!, 6三醇 ( 11)。结论 所有化合物均为首次从小叶忍冬
中分离得到,其中化合物 6、10、11 为首次从忍冬属中分离得到。
关键词:小叶忍冬; 黄酮;甾体
中图分类号: R284 1 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 07106504
小 叶忍 冬 Lonicer a micr ophy lla Roem et
Schult 为忍冬科忍冬属植物,落叶灌木,主要分布于
我国内蒙古、青海、甘肃、宁夏、新疆等西北地区。其
茎叶民间作忍冬藤药用,功效同金银花,具有清热解
毒、抗菌消炎、通络的作用,中医临床及民间广泛应用
于温病、发热、热毒、血痢、传染性肝炎、痈肿疮毒和筋
骨疼痛等疾病的治疗[ 1]。为从小叶忍冬中寻找新的
生物活性成分,本实验对小叶忍冬藤进行了化学成分
的研究。从其甲醇提取物中分离鉴定了 11个化合
物,分别为木犀草素( 1)、香叶木素( 2)、圣草酚( 3)、金
圣草黄素( 4)、芹菜素( 5)、罗汉松双黄酮 A( 6)、柏木
双黄酮( 7)、香叶木素7OD葡萄糖苷( 8)、谷甾
醇( 9)、(24S)3, 5!, 6豆甾烷三醇( 10)、( 22E, 24R)
麦角甾7, 22二烯3, 5!, 6三醇( 11)。所有化合物
均为首次从小叶忍冬中分离得到,其中化合物 6、10、
11为首次从忍冬属中分离得到。
1 仪器与材料
1
HNMR和13 CNMR谱用 Bruker AM400 核
磁共振波谱仪测定 ( T M S 为内标) ; 熔点用 Ko fler
显微熔点仪测定;色谱用硅胶( 200~ 300 目)和薄层
色谱 GF254硅胶板为青岛海洋化工厂产品。溶剂均
为分析纯,为天津市红岩试剂厂产品。
小叶忍冬 L onicer a microp hy l la Roem et
Schult 藤于 2004年 9月采自甘肃省皋兰山, 由原
兰州医学院张永虹副教授鉴定, 植物标本保存于新
乡医学院药学院植物标本馆。
2 提取与分离
小叶忍冬藤阴干粉碎(约 5 kg ) , 甲醇室温下浸
泡提取 3次,每次 7 d,浓缩至少量后加水稀释并过
滤,滤液经 D101大孔吸附树脂除去色素和糖类,再用
甲醇洗脱,减压浓缩得浸膏 256 g。将所得浸膏经硅
胶柱色谱分离,以氯仿甲醇( 50 # 1~ 1 # 1)梯度洗
脱,得到 R1~ R12共 12个部分, R1 部分经硅胶柱
色谱分离,以石油醚醋酸乙酯梯度洗脱并重结晶得
化合物 8( 55 mg ) ; R2~ R7部分经硅胶柱色谱分离,
以石油醚丙酮梯度洗脱并重结晶得化合物 1( 40
mg)、2( 60 mg )、3( 50 mg )、4( 26 mg )、5( 35 mg)、6
( 18 mg)、9( 80 mg )、10( 12 mg)、11( 10 mg) ; R10~
R11部分经硅胶柱色谱分离,以氯仿甲醇进行梯度
洗脱并重结晶得化合物 7( 20 mg )。
3 结构鉴定
化合物 1: 黄色针晶(甲醇) , mp 324~ 328 ) ,
1065中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 7 期 2010 年 7 月
* 收稿日期: 20091215 基金项目:河南省科技厅攻关项目( 082300450440)作者简介:刘 伟( 1983 ) ,男,河南周口人,在读硕士,主要从事天然药物活性成分及新药研究。 Email: w eiliu830823@ 163 com
* 通讯作者 白素平 T el/ Fax: ( 0373) 3029884 Email: baisu ping@ xxmu edu cn