免费文献传递   相关文献

in vivo and In vitro anti-lung cancer activity of Sancaofang components and their compatibility

三草方组分及其配伍体内外抗肺癌作用研究



全 文 :(3) : 23822411
[ 8 ]  李永胜 , 王照华 , 严 丽 , 等1 丹参酮对左心室肥厚的逆转
作用及其机制 [J ]1 中华高血压杂志 , 2007 , 11 ( 15 ) :
90029031
[ 9 ]  谢 辉 , 郑 智 , 龚丽娅1 丹参酮 ⅡA对自发性高血压大鼠
左室肥厚的影响及机制 [J ]1 实用医学杂志 , 2004 , 20 (3) :
25222541
[ 10 ]  李永胜 , 王照华 , 王 进 , 等1 丹参酮 ⅡA 对压力超负荷大
鼠肥厚心肌血管紧张素受体的影响 [J ]1 中国中西医结合杂
志 , 2008 , 28 (7) : 63226361
[ 11 ]  Kunisasa K , Tone E , Fujio Y , et al . Activation of gp130
t ranscuces hypert rophic signals via STA T3 in cardiac myo2
cytes [J ]1 Ci rculation , 1998 , 98 : 34623521
[ 12 ]  Takekoshhi K , Ishii K , Shibuya S , et al . Angiotensin type 2
receptor counterregulates type 1 receptor in catecholamine
synt hesis in cultured porcine adrenal medullary chromaffin
cells [J ]1 H y pertension , 2002 , 39 (1) : 14221481
[ 13 ]  Peter J M1 The J A K2STA T signaling pat hway : input and
output integration [J ]1 J I mmuol , 2007 , 178 : 2623226291
[ 14 ]  Sadoshima J , Xu Y , Slayter H S , et al . Autocrine release of
angiotensin Ⅱmediates st retch2induced hypert rophy of cardi2
ac myocytes i n vit ro [J ]1 Cell , 1993 , 75 (5) : 97729791
三草方组分及其配伍体内外抗肺癌作用研究
贾晓斌1 ,2 ,施  峰1 ,2 ,黄  洋1 ,2 ,陈  彦1 3 ① ,贾东升1 ,王绪颖1
(11 江苏大学 ,江苏 镇江  212013 ; 21 江苏省中医药研究院 中药新型给药系统重点实验室 ,国家中医药管理局
中药口服释药系统重点研究室 ,江苏 南京  210028)
摘  要 :目的  研究三草方 (Sancaofang , SCF) 不同组分及其配伍体内外抗肺癌的作用 ,筛选出有效的抗癌组分并
确定最合适的配伍方案 ,探索 SCF 抗肺癌的物质基础。方法  采用不同体积分数乙醇提取 ,经大孔树脂纯化得黄
酮类 (D) 、萜类 ( E) 及其他类组分 (A + B + C) ;体外实验采用两种人肺癌细胞株 SPC2A21 和 A549 ,以 M TT 法测
定不同组分及其配伍对细胞增殖活性的影响 ;体内实验采用接种 Lewis 肺癌细胞的 C57 BL/ 6J 小黑鼠 ,作为药效
的动物模型 ,以抑瘤率、脾指数、胸腺指数为指标进行药效评价。结果  SCF 黄酮类、萜类组分对两种细胞有较强
的抑制作用 ,组分 EⅠ、D Ⅱ及 EⅡ对 SPC2A21 细胞的 IC50分别为生药量 6135、7171、6175 mg/ mL ,对 A549 细胞的
IC50分别为生药量 8105、6179、6188 mg/ mL ;黄酮类和萜类组分配伍 (D Ⅰ + D Ⅱ + EⅠ + EⅡ) 对 Lewis 小鼠肿瘤生
长具有抑制作用 ,且可提高荷瘤小鼠的胸腺指数。体内外实验结果表明 ,黄酮类、萜类组分配伍后具有明显的协同
抑瘤活性。结论  SCF 黄酮类、萜类组分间的配伍为最佳配伍 ,SCF 有效组分具有良好的抗肺癌应用前景。
关键词 :三草方 ; 有效组分 ; 配伍 ; SPC2A21 ; A549 ; Lewis 肺癌
中图分类号 :R286191    文献标识码 :A    文章编号 :025322670 (2010) 0420592205
In vivo and in vit ro anti2lung cancer activity of Sancaofang components and their compatibility
J IA Xiao2bin1 ,2 , SH I Feng1 ,2 , HUAN G Yang1 ,2 , CH EN Yan1 , J IA Dong2sheng1 , WAN G Xu2ying1
(11Jiangsu University , Zhenjiang 212013 , China ; 2. Key Laboratory of New Drug Delivery Sytem of Chinese Materia Medica ,
Jiangsu Provincial Academy of Traditional Chinese Medicine , Nanjing 210028 , China)
Abstract : Objective  To study t he i n v ivo and i n v i t ro anti2lung cancer activity of Sancaofang ( SCF)
component s and their compatibility , screen t he most effective component s of anti2t umor , ascertain t he best
suitable compatibility p rogram , and research t he anti2t umor material base of SCF. Methods  Alcohol part s
(95 % and 60 %) were prepared and SCF component s were separated by macroporous resin ; SPC2A21 and
A549 cell models were adopted for i n vi t ro experiment and M T T assay was used ; C57 BL/ 6J black mice in2
jected with Lewis cells were adopted for t he i n vi vo experiment ; and t umor inhibition ratio , spleen index ,
and t hymus index were used for t he evaluation. Results  Component s EⅠ , D Ⅱ , and EⅡ had comparative
st rong anti2t umor activity against SPC2A21 and A549 cells and IC50 was relatively low ; The i n vi vo and i n
vi t ro experiment s showed t hat component compatibility of D and E had t he apparent synergism anti2t umor
activity. Conclusion  The most suitable compatibility p rogram is t he compatibility of component D and E ,
t he component s of SCF will have prospect application to anti2t umor .
Key words : Sancaofang ( SCF ) ; effective component s ; compatibility ; SPC2A21 ; A549 ; Lewis
lung cancer
·295· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
①收稿日期 :2009206210                      
基金项目 :江苏省中医药领军人才项目 (2006) ; 江苏省自然科学基金资助项目 (B K2006155)
作者简介 :贾晓斌 (1966 —) ,男 ,江苏人 ,研究员 ,博士生导师 ,研究方向 :中药物质基础研究。
Tel : (025) 85637809  E2mail : jxiaobin2005 @hot mail . com3 通讯作者 陈 彦 Tel/ Fax : (025) 85637809  E2mail : Ychen202 @yahoo. com. cn
  复方三草方 (Sancaofang , SCF) 是江苏省中医药
研究院治疗非小细胞性肺癌的临床验方 ,由夏枯草、
白花蛇舌草、仙鹤草、墨旱莲、山茱萸[1 ] 5 味药材组
成 ,具有滋补肝肾、清热散结、抗癌之功效 ,在临床应
用中该验方被证明不仅可以改善症状 ,提高患者的生
存质量 ,而且可以减少复发 ,延长患者的生存期。前
期关于极性部位研究表明 ,SCF 95 %、60 % 乙醇提取
物具有良好的抑瘤作用。为了进一步从组分层次探
索 SCF 抗肺癌的药效物质基础 ,本研究制备了 SCF
的不同组分 ,以肺癌细胞株 SPC2A21、A549 为细胞模
型 ,以接种 Lewis 肺癌细胞的 C57 BL/ 6J 小黑鼠为动
物模型 ,体外实验结合体内实验筛选出 SCF 最有效
的抗癌组分并明显最佳组分配伍方案 ,为制备疗效更
好的该复方制剂提供理论依据。
1  材料
111  细胞 :A549、Lewis 细胞株购自南京凯基生物
科技发展有限公司 ; SPC2A21 细胞株购自中国科学
院上海细胞生物学研究所细胞库。
112  动物 :C57 BL/ 6J 小黑鼠 ,体质量 18~22 g ,雄
性 ,由中国医学科学院实验动物中心提供。
113  药物、试剂与仪器 :夏枯草等药材均购于安徽
亳州滕王药业有限公司 ,经南京中医药大学药学院
吴德康教授鉴定。SP825、HP20 树脂购于上海摩速
科学器材有限公司 ,胎牛血清、RPMI 1640 培养基、
胰蛋白酶均购于 Gibco 公司 ,顺铂 ( DDP ,批号
0071104) 为南京制药厂有限公司产品 ,四甲基偶氮
唑蓝 (M T T) 为南京生兴生物有限公司产品 ,环磷
酰胺 (南京制药有限公司 ,批号 08071721) 。酶标
仪 ( Thermo 公司) 、倒置显微镜 (Coic 公司) 、CO2
细胞培养箱 ( Thermo 公司) 、真空恒温干燥箱 (上
海精宏实验设备有限公司) 。
2  方法
211  SCF 组分的提取分离及药物制备
21111  SCF 组分的提取分离 :按处方夏枯草、白花
蛇舌草、仙鹤草、墨旱莲、山茱萸 1 ∶2 ∶2 ∶1 ∶112
比例称取各药材 ,依次用 95 %、60 % 乙醇提取 ,得
95 % 乙醇部位 (部位 Ⅰ) 、60 % 乙醇部位 (部位
Ⅱ) 。其中部位 Ⅰ用 SP825 型大孔吸附树脂进行分
离富集 ,部位 Ⅱ用 HP20 型大孔吸附树脂进行分离
富集 ,用不同体积分数乙醇冲洗分别得到黄酮类
(D) 、萜类 ( E) 及其他类 (A + B + C) 组分。部分 Ⅰ
的 50 % 乙醇洗液为黄酮组分 D Ⅰ ;95 % 乙醇洗液为
萜类组分 EⅠ ;过柱液、水洗液和 10 % 乙醇洗液为
其他组分 (A + B + C) Ⅰ。部分 Ⅱ的 50 % 乙醇洗液
为黄酮组分 D Ⅱ ;95 % 乙醇洗液为萜类组分 EⅡ ;过
柱液、水洗液和 10 % 乙醇洗液为其他组分 ( A +
B + C) Ⅱ。通过紫外分光光度法测定组分的质量
分数。
21112  作用于细胞的药物制备 :取减压浓缩至干燥
的组分 D Ⅰ、EⅠ、D Ⅱ、EⅡ、( A + B + C) Ⅰ、( A + B +
C) Ⅱ粉末 ,分别用 PBS 溶液定容至 10 mL 量瓶中 ,
得组分 D Ⅰ、EⅠ、D Ⅱ、EⅡ、( A + B + C) Ⅰ、( A + B +
C) Ⅱ溶液。经 0122μm 微孔滤膜滤过除菌 ,实验时
用 PBS 溶液稀释后备用。
21113  动物给药的药物制备 :组分 (A + B + C) Ⅰ、
(A + B + C) Ⅱ、D Ⅰ、D Ⅱ、EⅠ和 EⅡ粉末均用研钵研碎
后 ,称取一定量的样品 (按类别等生药量 1 ∶1 混
合) ,用蒸馏水配制成生药量为 500、250 mg/ mL 的
组分配伍 D Ⅰ + D Ⅱ、EⅠ + EⅡ、(A + B + C) Ⅰ + (A +
B + C) Ⅱ和 D Ⅰ + D Ⅱ + EⅠ + EⅡ混悬液。
212  SCF 各组分对 SPC2A21、A549 细胞增殖活性
的影响 :取对数生长期细胞使其脱壁 ,用 10 % 胎牛
血清 RPMI 1640 培养液重悬 ,制成单细胞悬液 ,
SPC2A21 细胞以每孔 215 ×104个细胞接种于 96 孔
细胞培养板 ,A549 细胞以每孔 4 ×104 个细胞接种
于 96 孔细胞培养板 ,每孔培养液 100μL 。将培养
板移入细胞培养箱继续培养 24 h ,吸弃孔内原培养
液 ,加入不含胎牛血清的 RPMI 1640 培养液 90
μL ,再加入 SCF 各组分不同质量浓度的 PBS 溶液 ,
经预实验组分 ( A + B + C) Ⅰ、D Ⅰ、EⅠ、( A + B +
C) Ⅱ、D Ⅱ、EⅡ生药质量浓度均设为 1010、510、215、
1、015 mg/ mL 。移入细胞培养箱继续培养 36 h ,每
个药物质量浓度设 6 个平行复孔 ,设上下本底对照
孔 ,另设 DDP (终质量浓度为 25 mg/ L ) 阳性对照
组和 PBS 空白对照组。
SPC2A21 细胞培养 36 h 后每孔加入 5 mg/ mL
M T T 溶液 10μL ,继续培养 4 h 后终止培养 ,小心
吸弃孔内上清液 ,每孔加 DMSO 100μL ,微量振荡
仪振荡 10 min ,使结晶充分溶解 ,用酶标仪测吸光
度 ( A ) 值 ,检测波长为 550 nm ,参比波长为 690
nm。计算细胞生长抑制率[生长抑制率 = (1 - 药物
组平均 A 值/ 空白对照组平均 A 值) ×100 %]。药
物半数抑制浓度 ( IC50 ) 用 SPSS 1010 软件进行计
算。实验重复 6 次。
A549 细胞培养 36 h 后吸弃孔内原培养液 ,加
入不含胎牛血清的 RPMI 1640 培养液 100μL ,然
后每孔再加入 5 mg/ mL M T T 溶液 10μL ,继续培
养 4 h 后终止培养 ,同上方法测定细胞生长抑制率
·395·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
及 IC50值。
213  SCF 各组分配伍后对 SPC2A21、A549 细胞增
殖活性的影响 :根据 212 项实验结果得到组分 (A +
B + C) Ⅰ和 (A + B + C) Ⅱ对 SPC2A21、A549 细胞的
增殖抑制作用均不明显 ,而其他组分均有一定的抑
制作用 ,故采用相同组分和不同组分 1 ∶1 等生药
量进行配伍。经初步预实验 ,确定组分配伍 D Ⅰ +
D Ⅱ和 EⅠ + EⅡ ,其生药质量浓度均设为 1010、510、
215、110、015 mg/ mL ;组分配伍 D Ⅰ + D Ⅱ + EⅠ +
EⅡ ,其生药质量浓度设为 215、110、015、0125、011
mg/ mL 。实验操作同 212 项方法。
214  SCF 各组分及其配伍体内药效实验 :体外培
养一定量的 Lewis 细胞 ,配制细胞悬液 ,左腋下接
种于 C57 BL/ 6J 小黑鼠 ,接种后次日称体质量 ,随
机分为对照组、阳性药环磷酰胺组、D Ⅰ + D Ⅱ组、
EⅠ + EⅡ组、( A + B + C) Ⅰ + ( A + B + C) Ⅱ组和
D Ⅰ + D Ⅱ + EⅠ + EⅡ组 (均设高、低剂量) ,每组 8 只。
按所需剂量给药 ,连续 14 d。对照组 ig 生理盐水 ,
每日 014 mL/ 次 ;阳性对照组 ip 环磷酰胺 (20 mg/
kg) ,每日 012 mL/ 次 ;药物组 (高剂量 :生药 10 g/
kg ,低剂量 :生药 5 g/ kg) ,每日 ig 0. 4 mL/ 次。于
14 d 后称体质量 ,处死小鼠 ,剥取瘤块、脾脏、胸腺。
计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数。样本放于 - 80 ℃
条件下保存。
抑瘤率 = (1 - 药物组瘤质量/ 对照组瘤质量) ×100 %
脾指数 = 脾质量 (mg) / 小鼠体质量 (g)
胸腺指数 = 胸腺质量 (mg) / 小鼠体质量 (g)
215  统计学方法 :实验数据采用 x ±s 表示 ,应用
SPSS 1010 统计软件进行单因素方差分析和 t 检验。
3  结果
311  SCF 各组分分析 :紫外分光光度法测定经大
孔树脂纯化后的组分组成 ,结果组分 D Ⅰ中含黄酮
5711 % ,EⅠ含萜类 9410 % ,D Ⅱ含黄酮 7016 % , EⅡ
含萜类 9217 %。其他组分含有黄酮和萜类成分均
较少 ,主要含有一些蛋白质、糖类和无机盐等成分。
312  SCF 各组分对 SPC2A21、A549 细胞增殖抑制
作用 :图 1、2 显示 ,组分 EⅠ、D Ⅱ及 EⅡ 1010、510
mg/ mL 对 SPC2A21、A549 细胞均有明显的抑制作
用 (细胞生长抑制率均大于 40 %) ,且抑制作用都
有剂量依赖性 ;组分 (A + B + C) Ⅰ、D Ⅰ和 (A + B +
C) Ⅱ在实验质量浓度下对 SPC2A21 和 A549 细胞增
殖抑制作用较弱 (抑制率均低于 20 %) 。
313  SCF 各组分配伍对 SPC2A21、A549 细胞增殖
抑制作用 :图3显示 ,各组分进行1 ∶1等生药量配
图 1  不同质量浓度 SCF 各组分对 SPC2A21 细胞增殖
的影响 ( x ±s , n = 6)
Fig. 1  Effects of different components from SCF
at various concentration on proliferation
of SPC2A21 cells ( x ±s , n = 6)
图 2  不同质量浓度 SCF 各组分对 A549 细胞增殖
的影响 ( x ±s , n = 6)
Fig. 2  Effects of diferent components from SCF
at various concentration on proliferation
of A549 cells ( x ±s , n = 6)
图 3  不同质量浓度 SCF 各组分配伍对 SPC2A21 ( A)
和 A549 ( B) 细胞增殖的影响 ( x ±s , n = 6)
Fig. 3  Effects of different components compatibility from
SCF at various concentration on proliferation of SPC2
A21 ( A) and A549 ( B) cells ( x ±s , n = 6)
伍后 ,在较高质量浓度时对 SPC2A21 和 A549 两种
肺癌细胞均有明显的抑制作用 (细胞生长抑制率均
大于 40 %) ,并且呈剂量依赖关系。
314  SCF 各组分及其配伍 IC50比较 :图 4 显示 ,组
分 EⅠ、D Ⅱ及 EⅡ对 SPC2A21、A549 细胞的 IC50 无
显著差异 ( P > 0105) ,说明组分 EⅠ、D Ⅱ及 EⅡ对细
胞的抑制作用相当 ,而组分 ( A + B + C) Ⅰ、D Ⅰ和
(A + B + C) Ⅱ对这两种细胞的抑制作用较弱 ,在本
实验质量浓度范围内无法求算 IC50 。组分 D 与 E
进行等生药量的配伍后 , IC50 与未配伍前的 IC50 均
显著降低 ( P < 0105) ,说明组分 D 与 E 有一定的协
·495· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
同抑制肿瘤细胞增殖的作用。
12EⅠ 22DⅡ 32EⅡ 42DⅠ+ DⅡ 52EⅠ+ EⅡ 62DⅠ+ DⅡ+ EⅠ+ EⅡ
与组分 DⅠ+ DⅡ+ EⅠ+ EⅡ比较 : 3 P < 0105  3 3 P < 01013 P < 0105  3 3 P < 0101 vs components of DⅠ+ DⅡ+ EⅠ+ EⅡ
图 4  SCF 各组分及其配伍对 SPC2A21 ( A) 和 A549
细胞 ( B) 的 IC50 ( x ±s , n = 6)
Fig. 4  IC50 Values of different components compatibility
from SCF and their compatibility to SPC2A21 ( A)
and A549 cells ( B) ( x ±s , n = 6)
315  SCF 各组分及其配伍对 Lewis 小鼠的体内抑
瘤作用 :表 1 显示 ,与对照组的瘤质量相比较 ,环磷
酰胺和各组分配伍 D Ⅰ + D Ⅱ、EⅠ + EⅡ、D Ⅰ + D Ⅱ +
EⅠ + EⅡ的高剂量组瘤质量均显著降低 ( P <
0105) ,说明药物均有一定的抑瘤作用 ,且抑瘤作用
均有剂量依赖性 ;而 (A + B + C) Ⅰ + (A + B + C) Ⅱ
组与对照组的瘤质量相比较无显著差异 ( P >
0105) ,且高、低剂量组无显著差异 ( P > 0105) ,说明
配伍 (A + B + C) Ⅰ + (A + B + C) Ⅱ没有明显的抑瘤
作用 ,且无剂量依赖性 ;D Ⅰ + D Ⅱ + EⅠ + EⅡ高剂量
组的瘤质量与 EⅠ + EⅡ组的高剂量组虽然无显著差
异 ( P > 0105) ,但其低剂量组的瘤质量比 EⅠ + EⅡ
和 D Ⅰ + D Ⅱ低剂量组均有显著降低 ( P < 0105) ,说
明组分 D 与 E 配伍后抑瘤作用有所增加 ,表明组分
D 与 E 配伍可以达到预期的要求。
表 1  SCF 各组分及其配伍对 Lewis 小鼠的抑瘤作用 ( x ±s , n = 8)
Table 1  Inhibition of components from SCF and their compatibility on tumor growth of Lewis mice ( x ±s , n = 8)
组 别
剂量/
(g ·kg - 1)
体质量/ g
开始 结束
平均瘤质量/
g
抑瘤率/
%
对照 - 20112 ±01 78 21143 ±11 72 31 85 ±01 68 -
环磷酰胺 01020 21111 ±11 21 20185 ±21 54 11 26 ±01 32 3 3 671 30
D Ⅰ+ D Ⅱ 5 21124 ±01 73 21175 ±01 89 21 96 ±01 66 231 09
10 20118 ±01 88 21125 ±11 04 21 60 ±01 18 3 311 89
E Ⅰ+ E Ⅱ 5 20115 ±11 09 22138 ±11 60 21 64 ±01 48 3 311 37
10 20143 ±11 21 22119 ±01 88 11 77 ±01 47 3 511 02
(A + B + C) Ⅰ+ (A + B + C) Ⅱ 5 21132 ±11 05 25183 ±21 99 31 31 ±21 23 141 08
10 20145 ±01 96 25133 ±11 86 31 30 ±11 27 141 17
D Ⅰ+ D Ⅱ+ E Ⅰ+ E Ⅱ 5 20153 ±01 84 22163 ±11 51 21 54 ±01 43 3 341 13
10 21153 ±01 98 22138 ±11 41 11 71 ±01 31 3 551 08
  与对照组比较 : 3 P < 0105  3 3 P < 0101
  3 P < 01 05  3 3 P < 01 01 vs cont rol group
316  SCF 各组分及其配伍对 Lewis 小鼠免疫器官
的影响 :胸腺和脾脏是体内重要的免疫器官 ,对肿瘤
的生长起着重要的调节作用。从图 5 可以看出 ,与
对照组相比较 ,环磷酰胺对小鼠的胸腺有一定的抑
制作用 ,促使胸腺萎缩 ;与对照组相比较 , EⅠ + EⅡ、
(A + B + C) Ⅰ + (A + B + C) Ⅱ高、低剂量组胸腺指数
均无显著差异 ( P > 0105) ,说明这两组药物不能通
过调节胸腺起抑瘤作用 ;与对照组相比较 , D Ⅰ +
D Ⅱ、D Ⅰ + D Ⅱ + EⅠ + EⅡ的高剂量组胸腺指数均显
著增加 ( P < 0105) ,且有剂量依赖性 ,从免疫的角度
来说 ,这两组药物能影响胸腺 ,可以通过调节胸腺起
抑制肿瘤的作用。与对照组的脾指数相比较 ,环磷
酰胺组和 EⅠ + EⅡ高剂量组脾指数明显降低 ( P <
0105) ;而与其他各给药组脾指数无显著差异 ( P >
0105) 。说明环磷酰胺组和 EⅠ + EⅡ高剂量组对脾
脏有一定的抑制作用。
与对照组比较 : 3 P < 01 053 P < 01 05 vs cont rol group
图 5  SCF 各组分配伍对 Lewis 小鼠胸腺指数 ( A)
和脾脏指数 ( B) 的影响
Fig. 5  Effects of different components from SCF
and their compatibility on thymus index ( A)
and spleen index ( B) in Lewis mice
·595·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
4  讨论
  体外细胞实验说明 :SCF 其他组分 (A + B + C)
对两种肺癌细胞均无明显的抑制增殖作用 ;黄酮组
分 (D)与萜类组分 ( E) 对两种肺癌细胞均有明显的
抑制增殖作用 ;黄酮组分与萜类组分的配伍对肺癌
细胞的增殖抑制作用明显增强。黄酮组分与萜类组
分等生药量配伍后 , IC50比未配伍前显著降低 ( P <
0105) ,说明该复方有效组分之间在药理作用上具有
协同作用 ,这从一个方面验证了中药复方的药理作
用是多种组分部位共同作用的假说[2 ] ,也符合笔者
所提出的关于物质基础“三个层次多维结构”组分部
分结构理论中的一维结构 :其各药效组分之间存在
配伍配比关系 ,也是对假说中第三个层次的解析[3 ] 。
体内动物实验结果说明 : SCF 中萜类组分高剂
量组小鼠脾指数明显降低 ,而且胸腺指数变化不明
显 ,说明该组分在抑瘤的同时 ,对机体免疫作用较
弱 ,甚至有一定的抑制作用 ;而黄酮组分对小鼠脾指
数无明显影响 ,而且可以提高小鼠胸腺指数 ,说明该
组分在抑瘤的同时 ,能提高机体特异性免疫力 ,这也
是应用中药复方治疗肿瘤的优势之一 ;黄酮组分与
萜类组分配伍对小鼠脾指数无明显影响 ,胸腺指数
有一定程度的升高 ,且抑瘤率比未配伍前有所提高。
提示黄酮组分与萜类组分配伍后对小鼠移植性肿瘤
有一定的减毒增效作用。从而阐明了由多个组分构
成的整体 (SCF 的物质基础) ,其中黄酮组分与萜类
组分为主要的药效组分 ,且它们之间存在的配伍配
比关系和减毒增效作用 ,这是该复方中药物质基础
中一维结构的研究。
为了节约成本 ,更好地适合工业大生产 ,本课题
组在组分分离纯化的过程中采用乙醇提取、大孔树
脂纯化的方法进行。本研究在“组分结构理论”[ 3 ,4 ]
的指导下进行 ,通过体内、体外实验对 SCF 抗肺癌
有效组分进行了筛选 ,探索了组分之间的配伍关系 ,
进一步探索了 SCF 抗肺癌的物质基础 ,实验结果也
印证了本课题组所提出的“组分结构理论”。本课题
组将在接下来的科研中进行更深入的研究 ,从分子
生物学角度阐明 SCF 组分配伍配比抗肺癌的作用
机制。本研究为制备疗效更好的该复方制剂做准
备 ,并为创作抗肺癌现代复方中药提供科学依据。
参考文献 :
[ 1 ]  张兰桐 , 袁志芳 , 杜英峰 , 等1 山茱萸的研究近况及开发前
景 [J ]1 中草药 , 2004 , 35 (8) : 95229551
[ 2 ]  罗国安 , 王义明1 中药复方的化学研究体系 [J ]1世界科学技
术———中药现代化 , 1999 , 1 (1) : 112151
[ 3 ]  贾晓斌 , 陈 彦 , 李 霞 , 等1 中药复方物质基础研究新思
路和方法 [J ]1 中华中医药杂志 , 2008 , 23 (5) : 42024251
[ 4 ]  贾晓斌 , 封 亮 , 陈 彦 , 等1 夏枯草肺癌化学预防研究思
路与方法 [J ]1 中草药 , 2009 , 40 (2) : 31623171
注射用红花黄色素缓解油酸诱导的大鼠急性肺损伤作用
裴崇强 ,孙春燕 ,金  鸣

(首都医科大学附属北京安贞医院2北京市心肺血管疾病研究所 ,北京  100029)
摘  要 :目的  探讨注射用红花黄色素对油酸致大鼠急性肺损伤的作用及其机制。方法  Wistar 大鼠随机分成对
照组、油酸组 (模型组) 、油酸 + 山莨菪碱 10 mg/ kg 组、油酸 + 红花黄色素 (8、16、32 mg/ kg) 组 ,每组 12 只 ,各组
在 iv 油酸 01 18 g/ kg 前给予药物干预。油酸损伤 4 h 后 ,测定大鼠动脉血血氧分压、左肺含水系数和肺组织髓过
氧化物酶 (MPO) 活性 ;RT2PCR 法检测肺组织肿瘤坏死因子2α( TN F2α) 、白细胞介素21β( IL21β) 、白细胞介素26
( IL26) 、细胞间黏附分子21 ( ICAM21) 、血管细胞黏附分子21 (VCAM21) mRNA 表达水平 ;免疫组织化学法观察肺
组织 N F2κB p65 活化细胞数 ;Western blotting 法检测 p38 MA P K 蛋白磷酸化水平。结果  红花黄色素组大鼠动
脉血血氧分压值均高于模型组 ,肺组织含水系数和 MPO 活性均低于模型组 ;同时各炎症因子 mRNA 表达水平 ,
N F2κB p65 阳性细胞数和 p38 MA P K 蛋白磷酸化水平也均低于模型组。结论  红花黄色素可缓解急性肺损伤所
致肺水肿 ,提高动脉血氧分压 ,减少肺部炎性细胞浸润 ,其作用机制可能与抑制 p38 MAP K 磷酸化及 N F2κB 活化 ,
下调 TN F2α、IL2β等炎症因子的表达有关。
关键词 :红花黄色素 ; 急性肺损伤 ; 炎症因子 ; p38 MA P K; NF2κB
中图分类号 :R28515    文献标识码 :A    文章编号 :025322670 (2010) 0420596206
·695· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
①收稿日期 :2009209229                      
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30572344) ; 北京市自然科学基金资助项目 (797225) ; 北京中医药重点学科项目资助 (京中重
V20) ; 科技部科技人员服务企业行动项目 (2009 GJ A30001)
作者简介 :金 鸣 (1957 —) ,男 ,北京人 ,首都医科大学附属北京安贞医院2北京市心肺血管疾病研究所药理研究室主任 ,医学博士 ,研究员 ,
博士生导师。Tel : (010) 64456308  E2mail : jinzang @public3. bta. net . cn