全 文 ：延边大学医学学报　２０１２年６月　第３５卷　第２期
醇、烷烃、酮类、甾类及生物碱等化学成分．从ＳＦＥ
法提取物中鉴定出 ３５ 个化合物，占总成分的
９１．５８％，相对百分含量高于５％的成分有棕榈酸
（１３．７５％）、正十五酸乙酯（８．８５％）、（Ｚ）－９，１７－十八
烯 醛 （１４．３２％）、（Ｚ，Ｚ）－９－十 八 二 烯 酸 乙 酯
（１９．７４％）、己二酸二异丁酯（８．０３％）．用ＳＦＥ＋Ｃ
法鉴定出４３个峰，从ＳＦＥ＋Ｃ法分离得到的４３个
化合物占总成分的９０．１８％，相对百分含量高于５％
的化合物有５，６－二氢吡喃－２－酮（５．４８％）、棕榈酸
（２７．７２％）、油酸（５．２５％）．其中，棕榈酸在总成分提
取物中含量最高，占总量的２５％．对加夹带剂与不
加夹带剂所提取化学成分进行比较发现，其中１０种
相同，加夹带剂比不加夹带剂所提化学成分多７种，
究其原因认为加夹带剂提高了难挥发溶质的溶解
度，提取出了极性较大的成分．认为本实验对桑树桑
黄化学成分进行的研究可为进一步阐明桑黄的化学
成分和活性成分提供研究数据．
［参　考　文　献］
［１］　秦俊哲，刘华．桑黄功效成分研究的新进展［Ｊ］．食用
菌，２００８（５）：１－２．
［２］　莫顺燕，杨永春，石建功．桑黄化学成分研究［Ｊ］．中国
中药杂志，２００３，２８（４）：３３９－３４１．
［３］　Ｊｕｎｇ　ＪＹ，Ｌｅｅ　ＩＫ，Ｓｅｏｋ　ＳＪ，ｅｔ　ａｌ．．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｐｏｌｙ－
ｐｈｅｎｏｌｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｍｙｃｅｌｉａｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｆｕｎｇｉ
Ｉｎｏｎｏｔｕｓ　ｘｅｒａｎｔｉｃｕｓ　ａｎｄ　Ｐｈｅｌｉｎｕｓ　ｌｉｎｔｅｕｓ［Ｊ］．Ｊ　Ａｐｐｌ
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００８，１０４（６）：１８２４－１８３２．
［４］　Ｋｉｍ　ＧＹ，Ｐａｒｋ　ＨＳ，Ｎａｍ　ＢＨ，ｅｔ　ａｌ．．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｃｉｄｉｃ　ｐｒｏｔｅｏｈｅｔｅｒｏｇｌｙｃａｎ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ
ｆｒｕｉｔｉｎｇ　ｂｏｄｙ　ｏｆ　Ｐｈｅｌｉｎｕｅ　ｌｉｎｔｅｕｓ　Ｔｅｎｇ［Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ
Ｔｅｃｈｎｏｌ，２００３，８９（１）：８１－８７．
［５］　贾建波，李相前，杨文，等．桑黄多糖分离纯化及其结构
初步鉴定［Ｊ］．食品科学，２００６，２７（１２）：４４６－４４９．
［６］　丛浦珠．质谱在天然有机化学中的应用［Ｍ］．北京：科
学出版社，１９８７：４３．?
欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍欍
［收稿日期］　２０１２－０４－２５
＊［通信作者］　姜英子（１９６４—），女（朝鲜族），教授，硕士，
研究方向为朝药质量标准化．
高效液相色谱法测定朝药材万年蒿中主要有效组分的含量
郑光浩１，徐影２，耿聪３，姜英子１＊
（１．延边大学药学院，吉林 延吉１３３００２；２．北京星昊医药股份有限公司，北京１００１７６；３．吉林大学药学院，吉林 长春１３００２１）
［摘要］　 ［目的］采用高效液相色谱法测定传统朝药材万年蒿中东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素的含
量．［方法］采用Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８ 色谱柱（２５０．０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ），流动相为甲醇－２５０ｍＬ／Ｌ磷酸（４∶１）
水溶液，流动速度为１．０ｍＬ／ｍｉｎ，柱温为３５℃，检测波长为３６０ｎｍ，线性梯度洗脱．［结果］以峰面积
（Ｙ）对进样量（Ｘ）进行线性回归，东莨菪内酯、槲皮素和木犀草素的回归方程分别为 Ｙ＝８１　２６７　Ｘ
＋２　３９６．７（ｒ＝０．９９９　９），Ｙ＝４１　３５６　Ｘ－５　０３７．３（ｒ＝０．９９９　７），Ｙ＝１３　７０５　Ｘ－７４１．４３（ｒ＝０．９９９　１）；线性
范围分别为０．１０６～０．７４２，０．１０４～０．７２８，０．０２４～０．１６８μｇ；加样回收率（ｎ＝９）分别为１０１．３８％，ＲＳＤ
为１．９４％，１０１．５７％，ＲＳＤ为１．６４％，１００．８９％，ＲＳＤ为１．７２％．［结论］高效液相色谱法的精密度、稳
定性、重复性和加样回收率均较好．所建立的高效液相色谱法具有准确、快速等优点，可用于朝药材万年
蒿中３种有效组分的含量测定．
［关键词］　蒿属；色谱法，高压液相；有效组分
［中图分类号］　Ｒ　２８４．１　　　［文献标志码］　Ａ　　　［文章编号］　１０００－１８２４（２０１２）０２－０１１３－０４
Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｓａｃｒｏｒｕｍ Ｌｅｄｅｂ
ｂｙ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｐｈａｓｅ－ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
·３１１·
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Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｊｕｎ．２０１２　Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．２
ＺＨＥＮＧ　Ｇｕａｎｇ－ｈａｏ１，ＸＵ　Ｙｉｎｇ２，ＧＥＮＧ　Ｃｏｎｇ３，ＪＩＡＮＧ　Ｙｉｎｇ－ｚｉ　１＊
（１．Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｙａｎｊｉ　１３３００２，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｔｉａｎｈａｏ　Ｃｏｍｐａｎｙ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　＆
Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００１７６，Ｃｈｉｎａ；３．Ｊｉｌｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００２１，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ
ｓａｃｒｏｒｕｍ Ｌｅｄｅｂ　ｂｙ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｐｈａｓｅ－ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＲＰ－ＨＰＬＣ）．ＭＥＴＨＯＤＳ
ＲＰ－ＨＰＬＣ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　ｔｈａｔ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　ａ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ－Ｃ１８（２５０．０ｍｍ×４．６
ｍｍ，５μｍ），ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ａ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－０．４％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｎ　ｇｒａｄｉｅｎｔ
ｅｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｒａｔｒｕｅ　ｗａｓ　３５℃，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ
ｗａｓ　３６０ｎｍ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｃａｒｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅｓ　ｏｆ　ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ，ｑｕｅｒｃｅｔｏｌ，ａｎｄ　ｌｕｔｅｏｌｏｌ　ｗｅｒｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｉｎ　ｔｈｅ
ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．１０６－０．７４２，０．１０４－０．７２８ａｎｄ　０．０２４－０．１６８μｇ，ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｖｅ　ｅｑｕａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　Ｙ＝８１
２６７　Ｘ＋２　３９６．７（ｒ＝０．９９９　９），Ｙ＝４１　３５６　Ｘ－５　０３７．３（ｒ＝０．９９９　７），Ｙ＝１３　７０５　Ｘ－７４１．４３（ｒ＝０．９９９　１）
ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅｉｒ　ｉｎｔｅｇｒａｌ　ａｒｅａ　ｔｏ　ｔｈｅｉｒ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ（ｎ＝９）ｗａｓ
１０１．３８％（ＲＳＤ＝１．９４％），１０１．５７％ （ＲＳＤ＝１．６４％）ａｎｄ　１００．８９％ （ＲＳＤ＝１．７２％）．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＴｈｅ
ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ａｃｃｕｒａｔｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｓａｃｒｏｒｕｍ
Ｌｅｄｅｂ．ｃａｎ　ｂｅ　ｒａｐｉｄｌｙ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅｌｙ　ｑｕａｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＲＰ－ＨＰＬＣ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ａｒｔｅｍｉｓｉａ；ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ｈｉｇｈ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ　ｌｉｑｕｉｄ；ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ
　　万年蒿（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｓａｃｒｏｒｕｍ Ｌｅｄｅｂ．）为菊科
蒿属植物，是首批被纳入吉林省地方药品标准的朝
药材，它的药用部位为干燥地上部分，亦可为全草，
性味苦、辛、平．据《朝药志》记载，万年蒿具有利湿
热、退黄之功效，适用于治疗急慢性肝炎、小儿惊风、
阑尾炎及急慢性胃肠炎等［１］，朝鲜族民间亦将万年
蒿膏剂应用于治疗妇女内寒证等．查阅文献，仅见关
于万年蒿的物质基础及药理活性的研究［２－４］报道，尚
未见万年蒿中多种有效成分含量同时测定技术的报
道．本实验利用高效液相色谱技术测定了朝药材万
年蒿中主要有效成分东莨菪内酯、槲皮素及木犀草
素的含量，旨在为建立符合临床疗效特征的质量标
准评价方法提供科学依据．
１　材料
１．１　药材来源　８批万年蒿药材样品分别采集自
吉林省延边朝鲜族自治州８个县市，经延边大学药
学院生药学教研室朴光春副教授鉴定为万年蒿
（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ｓａｃｒｏｒｕｍ Ｌｅｄｅｂ．）的干燥地上部分．
１．２　试剂与仪器　东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素
对照品均购自中国药品生物制品检定所（批号分别
为 １１０７６８－２００５０４，１０００８１－２００９０７，１１１５２０－２００５０４），
甲醇为色谱醇，水为超纯水，其余试剂均为分析纯．
ＬＣ－１０Ａ高效液相色谱仪及ＳＰＤ－１０Ａ紫外检测器均
为日本岛津公司产品；Ｌｃｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站及Ｄｉ－
ａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８ 色谱柱（２５０．０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）为
迪马产品；ＢＳＡ－２２４Ｓ型电子分析天平为德国赛多利
斯有限公司产品；ＡＳ３１２０Ａ型超声波清洗脱气器为
奥特赛思仪器有限公司产品．
２　方法与结果
２．１　对照品溶液的制备　分别精密称取对照品东
莨菪内酯、槲皮素及木犀草素置于１０ｍＬ容量瓶
中，加入甲醇配成对照品混合液（约相当于东莨菪内
酯４２．４ｍｇ／Ｌ、槲皮素２０．８ｍｇ／Ｌ、木犀草素４．８
ｍｇ／Ｌ），经０．４５μｍ微孔滤膜滤过，备用．
２．２　供试品溶液的制备　称取万年蒿粉末（过４０
目筛）约１．０ｇ，精密称定，置于圆底烧瓶中加入甲
醇－２５０ｍＬ／Ｌ盐酸溶液（４∶１）２５ｍＬ，称定质量，加
热回流１ｈ，取出，冷却至室温，用２．１项下混合溶液
补足减失质量，摇匀，过滤，取续滤液，减压蒸干，用
甲醇 定 容 至 ２５ ｍＬ，用 ０．４５μｍ 微 孔 滤 膜 滤
过，即得．
２．３　色谱条件　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８（５μｍ，２５０．０ｍｍ×
４．６ｍｍ）；流动相Ａ为甲醇，Ｂ为４ｍＬ／Ｌ磷酸水溶
液（Ａ＋Ｂ＝１００％）；流动速度为１．０ｍＬ／ｍｉｎ；柱温
·４１１·
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延边大学医学学报　２０１２年６月　第３５卷　第２期
为３５℃；检测波长为３６０ｎｍ；进样量为１０μｇ．二元
线性梯度洗脱，洗脱时间程序为开始时为４１％ Ａ，
１０ｍｉｎ时为５５％ Ａ，３０～３５ｍｉｎ时为６０％ Ａ．色谱
记录时间为３５ｍｉｎ．按照保留时间先后出峰顺序为
东莨菪内酯、槲皮素、木犀草素，色谱图见图１．
Ａ：混合对照品溶液；Ｂ：供试品溶液；Ｃ：阴性对照溶液；１：东莨菪内酯；２：槲皮素；３：木犀草素．
图１　万年蒿药材中东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素的高效液相色谱图
２．４　线性关系考察　精密吸取混合对照品溶液５，
１０，１５，２０，２５，３０，３５μＬ分别进样，以峰面积为纵坐
标（Ｙ），进样量（Ｘ，Ｌ）为横坐标，绘制标准曲线，求
得回归方程分别为：东莨菪内酯Ｙ＝８１　２６７　Ｘ
＋２　３９６．７，ｒ＝０．９９９　９；槲 皮 素 Ｙ ＝４１　３５６　Ｘ
－５　０３７．３，ｒ＝０．９９９　７；木犀草素Ｙ＝１３　７０５　Ｘ－
７４１．４３，ｒ＝０．９９９　１．结果表明，东莨菪内酯、槲皮素
和木犀草素分别为０．１０６～０．７４２，０．１０４～０．７２８，
０．０２４～０．１６８μｇ范围内呈良好的线性关系．
２．５　精密度试验　精密吸取混合对照品溶液，重复
进样６次，进样量为１０μＬ，分别测定３种成分的峰
面积积分比值，计算精密度（ＲＳＤ，ｎ＝６）．结果表
明，东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素的ＲＳＤ 分别为
０．３８％，０．９５％，０．９５％，表明精密度良好．
２．６　重复性试验　精密称取同一批次万年蒿粉末
（过４０目筛）样品５份，按照２．２项下方法制备供试
品溶液，并按照２．３项下色谱条件进样测定．结果
示，样品中东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素平均含量
的ＲＳＤ 分别为０．８５％，０．７２％，０．９１％，表明具有
良好的重复性．
２．７　稳定性试验　取２．２项下供试品溶液，分别于
０，２，４，６，８，１０，１２，２４ｈ分别进样１０μＬ，测定３种成
分的峰面积．结果表明，东莨菪内酯、槲皮素和木犀
草素的峰面积ＲＳＤ（ｎ＝６）分别为０．５５％，１．１８％，
１．８３％，表明供试品溶液在２４ｈ内基本稳定．
２．８　加样回收率试验　精密称取已知含量的样品
（东莨菪内酯１．６２ｍｇ／ｇ、槲皮素１．６２ｍｇ／ｇ和木犀
草素０．２４ｍｇ／ｇ），定量加入东莨菪内酯、槲皮素及
木犀草素标准品，按照２．２项下方法制备供试品溶
液，并按照２．３项下色谱条件测定回收率．结果显
示，东莨菪内酯平均回收率为１０１．８８％，ＲＳＤ 为
１．９４％；槲皮素平均回收率为１０１．５７％，ＲＳＤ 为
１．６４％；木犀草素平均回收率为１００．８９％，ＲＳＤ 为
１．７２％；见表１．
表１　３种有效组分的回收率（ｎ＝９）
组分　　　
样品中
含量／μｇ
加入量
／μｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
东莨菪内酯
３２．８５　 ２０．３５　 １０２．２４
３２．８５　 ２０．３５　 １０１．９８
３２．８５　 ２０．３５　 １０３．９５
３２．８５　 ２５．４４　 ９９．０７
３２．８５　 ２５．４４　 ９９．１５
３２．８５　 ２５．４４　 １００．３４
３２．８５　 ３０．５３　 １０２．５２
３２．８５　 ３０．５３　 １０４．５７
３２．８５　 ３０．５３　 １０３．０８
１０１．８８　 １．９４
槲皮素　　
３２．９５　 １９．９７　 １０２．９３
３２．９５　 １９．９７　 １０２．２１
３２．９５　 １９．９７　 １０３．６３
３２．９５　 ２４．９６　 １０１．５７
３２．９５　 ２４．９６　 １００．０４
３２．９５　 ２４．９６　 ９９．０５
３２．９５　 ２９．９５　 １０３．７１
３２．９５　 ２９．９５　 １００．１９
３２．９５　 ２９．９５　 １００．７７
１０１．５７　 １．６４
木犀草素　
４．８５　 ３．８４　 １００．１９
４．８５　 ３．８４　 ９９．６３
４．８５　 ３．８４　 ９９．６９
４．８５　 ４．８０　 １０４．２３
４．８５　 ４．８０　 １０３．２７
４．８５　 ４．８０　 １００．８３
４．８５　 ５．７６　 １０１．１８
４．８５　 ５．７６　 ９９．３９
４．８５　 ５．７６　 ９９．６５
１００．８９　 １．７２
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Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｊｕｎ．２０１２　Ｖｏｌ．３５　Ｎｏ．２
２．９　样品含量测定　按照２．２项下方法制备供试
品溶液，并按照２．３项下色谱条件进样测定，根
据３个成分的线性回归方程，对万年蒿提取液中东
莨菪内酯、槲皮素及木犀草素的含量进行计算，结果
见表２．
表２　延边地产万年蒿中东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素的
含量（ｎ＝３） ｍｇ／ｇ　
采集地　　 东莨菪内酯 槲皮素 木犀草素
龙井市铜佛寺镇 ０．９００±０．００６　４　 １．７９１±０．０３５　４　 ０．２４７±０．０００　５
图们市苇子沟镇 １．１１６±０．００４　９　 １．７１５±０．０２５　３　 ０．５０５±０．００２　０
汪清县依兰镇 ０．９３７±０．００２　７　 ２．７４７±０．０３８　５　 ０．３５０±０．００３　１
延吉市台岩乡 １．０２０±０．００５　２　 ０．４２７±０．００１　９　 ０．０６８±０．００１　０
敦化市官地镇 ０．４１５±０．００３　３　 ０．５６５±０．００９　９　 ０．１４３±０．００１　９
安图县永庆乡 ０．５０３±０．００１　４　 ０．０５８±０．０００　５　 ０．０６８±０．００１　２
和龙县土山子乡 ０．４８７±０．００７　２　 ０．４４６±０．００４　５　 ０．２４９±０．００３　８
珲春市密江镇 ０．４８２±０．００２　１　 ０．３５０±０．００７　３　 ０．１５３±０．０００　８
３　讨论
　　本实验在测定波长的选择中，紫外扫描东莨菪内
酯、槲皮素及木犀草素在１９０～４００ｎｍ的吸收峰，结
果表明在３６０ｎｍ波长处３个组分的峰形均良好且
干扰最少．在流动相的选择中，选择了不同比例的甲
醇－水、甲醇－酸系统，发现磷酸的加入可以改善３个
峰的峰形，流动相水相中含有４ｍＬ／Ｌ的磷酸可以
使各组分色谱峰的峰形和分离度均达到要求．３个
标准品中东莨菪内酯的极性最大，槲皮素的极性最
小，故甲醇量的增加可使３个峰的保留时间缩短，且
色谱峰有好的分离效果，最终确定使用本实验中的
流动相．观察流动速度对分离结果的影响发现，以流
动速度１．０ｍＬ／ｍｉｎ的影响最为理想．在提取试验
中，为了与临床用药相接近，选用了水提取，但效果
不理想，故根据文献［５－８］中的提取溶剂和水解条
件，采用了甲醇－２５０ｍＬ／Ｌ盐酸溶液（４∶１）混合液
回流提取．重复性及加样回收实验结果表明，甲醇－
２５０ｍＬ／Ｌ盐酸溶液（４∶１）混合液回流提取方法可
行．对提取时间（３０，６０，９０ｍｉｎ）进行了筛选，选用提
取时间为１ｈ．延边地区不同产地的８批万年蒿药材
中东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素的含量存在一些
差异．仅以上述３个有效成分含量高低为评价指标
时，延边地产万年蒿药材质量以图们市苇子沟镇产
地相对为优．本实验所建立的传统朝药材万年蒿中
东莨菪内酯、槲皮素及木犀草素等３种有效成分的
高效液相色谱测定技术，结果准确、重现性好、简便
易行，可作为万年蒿药材的质量评价与控制的有效
方法．
［参　考　文　献］
［１］　延边民族医药研究所．朝药志［Ｍ］．延吉：延边人民出
版社，１９９５：８－９．
［２］　范丽颍，张淑华，李景梅，等．万年蒿的化学成分及药理
活性研究进展［Ｊ］．时珍国医国药，２００７，１８（７）：１７７９－
１７８０．
［３］　王艳芳，王新华．槲皮素药理作用研究进展［Ｊ］．天然产
物研究与开发，２００３，１５（２）：１７１－１７３．
［４］　Ｈｏｒｖａｔｈｏｖａ　Ｋ，Ｃｈａｌｕｐａ　Ｉ，Ｓｅｂｏｖａ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ
ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ａｎｄ　ｌｕｔｉｏｌｉｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｍｉｌａｎｏｍａ
ＨＭＢ－２ｃｅｌｓ［Ｊ］．Ｍｕｔａｔ　Ｒｅｓ，２００５，５６５（２）：１０５－１１２．
［５］　杨岚，王满元．青蒿药材中东莨菪内酯的含量测定［Ｊ］．
中国实验方剂学杂志，２００６，１２（１０）：１０－１１．
［６］　张洁，顾政一．ＨＰＬＣ法同时测定新疆一枝蒿中木犀草
素和一枝蒿酮酸的含量［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，
２００９，１５（４）：１－３．
［７］　陈燕，黄志芳．全缘绿绒蒿药材质量标准研究［Ｊ］．中国
执业药师，２００９，６（２）：３６－３８．
［８］　龙凤荣．ＨＰＬＣ测定热淋清胶囊中槲皮素的含量［Ｊ］．中
成药，２００７，２９（４）：６１３－６１５．?
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