全 文 ：3 讨论
3 1 检测波长的选择:经二极管阵列检测器分别对
7种成分进行全波长扫描得知,丹参素的特征吸收
波长为226、280 nm ,阿魏酸的特征吸收波长为236、
322 nm,木犀草苷的特征吸收波长为 255、350 nm,
迷迭香酸的特征吸收波长为 230、330 nm, 丹酚酸 B
的特征吸收波长为 255、286 nm,黄芩苷的特征吸收
波长为 278 nm, 隐丹参酮的特征吸收波长为 264
nm ,而丹参素的截止波长为 300 nm, 为兼顾各组分
的检测信号强度和检测灵敏度,本试验选择 250 nm
作为检测波长。
3 2 流动相的选择:湿毒清片是由九味中药组成的
复方制剂,化学成分复杂,且各味中药的活性成分的
极性差异较大。本试验曾分别考察了甲醇水、乙
睛水、甲醇0 1%磷酸、乙睛0 4% 磷酸等溶剂系
统,分离结果均不理想。而采用甲醇1%冰醋酸作
流动相,进行梯度洗脱可将 7个组分完全分离, 且基
线稳定,峰形好,实验结果满意。
3 3 提取条件的考察:为了从湿毒清片中最大限度
地提取出各种有效成分, 实验对比了不同提取方法
(超声、回流和索氏提取)、不同提取溶剂(甲醇、50%
甲醇、75%甲醇、75%乙醇、水)对湿毒清片的提取效
果,结果表明,用 75% 甲醇回流提取的有效成分多、
效率高,回流 3 h 即能提取完全。
参考文献:
[ 1] 李思明,何俊兵,王 辉,等 湿毒清胶囊化学成分与药理作用
研究进展[ J] 现代药物与临床, 2009, 24( 4) : 220224
[ 2] 乐仁昌 湿毒清胶囊中阿魏酸的含量测定[ J] 海峡药学,
2008, 20( 5) : 3032
[ 3] 黄诗远,陈 凤,姚红霞 RPHPLC法测定湿毒清胶囊中丹酚
酸 B和黄芩苷的含量[ J] 中国药师, 2008, 11 ( 6) : 663664
[ 4] 陈慧珍 当归的研究进展[ J ] 海峡药学, 2008, 20 ( 8) : 8384
正交试验优选全蝎盐制工艺的研究
徐连明,邵 杰,付小环, 杨妍妍,杨 璐*
(江苏康缘药业股份有限公司,江苏 连云港 222001)
摘 要:目的 研究不同炮制条件对全蝎乙醇提取物中总氮的影响,为确定合理的加工方法提供依据。方法 以
氯化钠水溶液用量、氯化钠水溶液浓度、煮沸时间为因素, 采用正交试验法对全蝎炮制方法进行考察,以醇浸出物、
总氮为指标对炮制方法进行优选。结果 最佳工艺为加 4 倍量 15% 氯化钠水溶液, 煮沸 5 min。结论 所炮制之
全蝎有效成分破坏少,保证了药材的质量。
关键词:全蝎; 炮制;总氮; 正交试验
中图分类号: R286 02 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 11181102
全蝎为钳蝎科动物东亚钳蝎 Buthus mar tensi i
Kar sch的干燥全体, 性味辛、平, 有毒, 具有息风镇
痉、攻毒散结、通络止痛等功效。全蝎的炮制方法按
中国药典!2010版一部规定为∀ 春末至秋初捕捉,
除去泥沙,置沸水或沸盐水中,煮至全身僵硬,捞出,
置通风处,阴干# [ 1]。此法对用盐比例、氯化钠水溶
液用量及加工时间长短, 都未作具体规定,导致市场
上全蝎质量参差不齐。市场上全蝎的含盐量为
30 14% ~ 38 75%, 含水量为 29 78% ~ 40 16% ,
使得全蝎用量不准确, 有效成分受到损失而影响临
床疗效[ 24]。为提高全蝎品质,本实验采用正交试验
法,以氯化钠水溶液用量、氯化钠水溶液浓度、煮沸
时间为因素,以醇浸出物、总氮为指标对全蝎炮制方
法进行考察,以确定最佳的炮制工艺。
1 材料与仪器
全蝎收购自山东省淄博全蝎养殖场, 经连云港
市药品检验所王统康主任药师鉴定为钳蝎科动物东
亚钳蝎 Buthus martensi i Kar sch。YHG ∃ 50 远红
外快速恒温干燥箱。试剂均为分析纯。
2 方法
2 1 样品制备: 将活全蝎去除泥土沙石等杂质, 投
入清水中浸泡 2 h。使其吐出腹内容物, 然后洗净
为生品,备用。
2 2 正交试验设计:以氯化钠溶液炮制全蝎,影响
%1811%中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月
收稿日期: 20100429 基金项目:国家科技部重大新药创制项目( 2009ZX09313032)作者简介:徐连明( 1966 ∃ ) ,男,硕士,高级工程师,主要研究方向:中药制剂的工艺与质量标准。
T el : ( 0518)85521955 Email: lygxlm2006@ 163. com
提取率的主要因素有氯化钠溶液的浓度、加水倍数、
煮沸时间。以上 3个因素为考察因素, 每个因素设
立 3个水平(表 1) ,采用 L9 ( 34 )正交设计, 考察醇浸
出物和提取物中总氮,权重系数分别为 0 3、0 7, 综
合评价提取工艺的条件。
浸膏得率评分= 浸膏得率/最大浸膏得率 & 0 3 & 100
总氮评分= 总氮/最大总氮& 0 7 & 100
综合评分= 浸膏得率评分+ 总氮评分
2 3 浸膏得率的测定:照醇溶性浸出物测定法项下
的热浸法( 中国药典!2010 年版一部附录 XA )测
定。结果见表 2。
2 4 总氮的测定:取上述加工的全蝎, 60 ∋ 干燥至
恒重,粉碎,过 100目筛。按 中国药典!2010 年版
一部附录 IX L 氮测定法项下第一法测定氮。结果
见表 2。方差分析结果见表 3。
表 1 因素与水平
Table 1 Factors and levels
水平 因 素
A 加水量/倍 B氯化钠浓度/ % C煮沸时间/ min
1 4 5 5
2 6 10 20
3 8 15 40
表 2 正交试验及结果
Table 2 Design and results of orthogonal test
试验号 A B C D 浸膏得率/ %
总氮/
( mg % g- 1 )
综合
评分
1 1 1 1 1 2283 245 8 96 58
2 1 2 2 2 2058 239 1 92 05
3 1 3 3 3 1951 233 2 89 12
4 2 1 2 3 1966 209 6 82 58
5 2 2 3 1 1734 203 8 78 23
6 2 3 1 2 2577 226 7 94 56
7 3 1 3 2 1976 193 5 78 10
8 3 2 1 3 2586 216 0 91 62
9 3 3 2 1 2321 206 2 85 74
K 1 277 75 25726 282 75 260 55
K 2 255 37 26189 260 37 264 71
K 3 252 45 26942 245 45 263 31
R 7 46 405 12 43 1 39
表 3 方差分析
Table 3 Analysis of variance
因素 偏差平方和 自由度 均方 F 值 显著性
A 110 91 2 00 5545 3713 P< 0 05
B 25 11 2 00 1256 841
C 234 97 2 00 11749 7866 P< 0 05
空白误差 2 99 2 00 149
F 0 05 ( 2, 2) = 19 00
可知以浸膏得率及总氮含量综合考察指标,极
差值大小及趋势显示, 各因素主次则为 C> A > B,
方差分析显示氯化钠水溶液用量与煮沸时间对指标
有显著性影响,据此得出最佳工艺为: A 1B3C1 ,即加
4倍量 15%氯化钠水溶液,煮沸 5 min, 为全蝎炮制
工艺的最佳条件。
2 5 工艺验证试验:为考察优选出的炮制工艺条件
的稳定性,按该工艺条件重复 3次,分别测定浸膏得
率和总氮,结果见表 4。3次测定结果同正交试验结
果吻合,说明该工艺可行。
表 4 正交试验验证
Table 4 Test of verification
试验号 浸 膏得率/ % RSD/ %
总 氮
质量分数/ ( mg % g- 1 ) RSD/ %
1 23 44 251 3
2 24 06 1 36 246 1 1 12
3 23 91 246 9
3 讨论
目前全蝎的产地加工比较混乱,没有统一的加
工标准,且普遍含盐量为 30% ~ 40%。全蝎采用盐
制的主要原因是利用盐的高渗作用, 避免腐烂变质,
便于贮存和运输, 但由于含盐量过高,影响了全蝎的
质量和实际生产投料量,使成药临床疗效变差, 有效
成分也被破坏。随着全蝎及其蝎毒素的应用不断拓
宽,已成为治疗多种疑难病的临床药物。全蝎及其
制剂对多种顽固性疼痛都有较好抑制作用。氨基酸
正是其中主要有效成分 [ 59]。经正交实验表明, 全蝎
加 4倍量浓度为 150 mg/ g 的氯化钠水溶液,煮沸 5
m in,所炮制之全蝎其不干枯, 无返盐, 氨基酸类有
效成分破坏少,为药材的产品质量提供了保证。
参考文献:
[ 1] 中国药典[ S] 一部 2010
[ 2] 张永清,李剑芳 不同方法加工全蝎的对比研究[ J] 中国中
医药科技, 2006, 13( 1) : 3437
[ 3] 方和桂 药用全蝎含盐量的测定及其对临床作用的影响 [ J]
浙江中医杂志, 2007, 42( 12) : 723
[ 4] 战克勒,黄学才,孙 健 药用全蝎含水、含盐量的测定[ J]
中国药品标准, 2004, 5( 3) : 2425
[ 5] 邹 龙,郭建生,桂 卉,等 全蝎不同工艺提取物药效学实验
研究[ J] 江西中医学院学报, 2004, 16( 2) : 5758
[ 6] 罗 跃,彭延古,易小明,等 全蝎的化学成分及其作用的研究
进展[ J] 湖南中医药大学学报, 2008, 28( 3) : 7880
[ 7] 李晓武 全蝎在痛症中的运用[ J ] 中医药临床杂志, 2008, 20
( 2) : 196197
[ 8] 姚 芳,杨文华 中药全蝎治疗白血病研究进展[ J] 中国中
医急症, 2008, 17( 5) : 679680
[ 9] 谭银合,郭建生 全蝎的化学成分及其镇痛作用的研究进展
[ J] 湖南中医药导报, 2001, 5( 7) : 210212
%1812% 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月