全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 12 期 2011 年 12 月

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不同产地苦瓜中苦瓜皂苷的闪式提取及 HPLC 测定
王晓婧 1，孙 伟 2，曾 珂 1，区海燕 2，赵余庆 1*
1. 沈阳药科大学，辽宁 沈阳 110016
2. 无限极（中国）有限公司，广东 广州 510665
摘 要：目的 采用闪式提取和固相萃取相结合的方法来快速测定不同产地苦瓜中 momordicoside L、kuguaglycoside C、
goyaglycoside-d 的量。方法 样品经过闪式提取和固相萃取处理后，采用 HPLC 法进行测定。色谱条件为 Kromasil C18色谱
柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（57∶43），体积流量 1.0 mL/min，检测波长 203 nm。结果 Momordicoside L
线性范围为 0.048～0.48 μg，加样回收率为 96.93%，RSD 为 1.95%；kuguaglycoside C 线性范围为 0.024～0.36 μg，加样回收
率为 97.80%，RSD 为 1.19%；goyaglycoside-d 线性范围为 0.006～0.192 μg，加样回收率为 93.62%，RSD 为 1.28%。广东、
广西、福建 3 个产地 3 种成分的量差异较大。结论 福建产苦瓜中 momordicoside L 量最高，广东产苦瓜中 kuguaglycoside C
和 goyaglycoside-d 的量均较高。此方法可作为苦瓜药材质量评价的依据。
关键词：苦瓜；momordicoside L；kuguaglycoside C；goyaglycoside-d；闪式提取
中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)12 - 2471 - 03
Smashing tissue extraction and HPLC determination of saponins
from Momordica charantia
WANG Xiao-jing1, SUN Wei2, ZENG Ke1, OU Hai-yan2, ZHAO Yu-qing1
1. Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China
2. Infinitus (China) Co., Ltd, Guangzhou 510665, China
Key words: Momordica charantia L.; momordicoside L; kuguaglycoside C; goyaglycoside-d; smashing tissue extraction

苦瓜 Momordica charantia L.为葫芦科苦瓜属植
物，始载于《滇南本草》，具清热解暑、明目解毒的
功效，可用于治疗热病烦渴、中暑、痢疾、赤眼疼
痛、痈肿丹毒恶疮等症[1-2]。研究表明，从苦瓜果实
和种子中分离得到的苦瓜皂苷成分具有降血糖、抗肿
瘤、抑菌、抗衰老、抗病毒等作用[3-10]。苦瓜皂苷是苦
瓜的有效成分之一。目前，对苦瓜皂苷的测定主要采
用分光光度法、薄层扫描法和 HPLC 法等。其中苦瓜
总皂苷测定主要采用比色法[11-14]，该方法方便快捷，
但此体系并不是皂苷的特征显色体系，还存在其他生
物碱类、甾体类、黄酮类、糖等的干扰，造成测量值
偏高。由于苦瓜皂苷的紫外吸收强度弱，且苦瓜中很
多皂苷分离纯化困难且量极低等，使得苦瓜中单体皂
苷测定缺少标准样品，因此应用 HPLC 法测定苦瓜中
单体皂苷的报道较少。
本课题组曾应用薄层扫描法测定苦瓜中活性成分
苦瓜皂苷的量[15]，并采用固相萃取法与 HPLC 法结
合测定 momordicoside L 的量[16]。药理活性研究表
明[6]，momordicoside L 等具有较明显的降血糖活
性，因此研究并建立苦瓜中活性成分的测定及质量
控制方法具有重要的应用价值。本实验首次采用闪
式提取法快速提取苦瓜中活性成分，并应用 HPLC
法同步测定 momordicoside L、kuguaglycoside C 及
goyaglycoside-d 3 个苦瓜皂苷类成分，为苦瓜皂苷
的分析检测方法的建立及质量评价奠定基础。
1 仪器与材料
1.1 仪器
德国诺尔高效液相色谱仪（德国诺尔），德国
诺尔 EuroChromfor Windows 色谱工作站，固相萃
取柱，闪式提取器 JHBE250S（河南金鼐科技发
展有限公司），塞多利斯 BS/BT 型电子分析天平
（上海台之衡电子衡器有限公司）。

收稿日期：2011-03-12
基金项目：辽宁省天然药物现代分离与工业化制备工程技术研究中心资助项目（2008402021）
*通讯作者 赵余庆 Tel: (024)23986521 E-mail: zyq4885@126.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 12 期 2011 年 12 月

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1.2 材料
Momordicoside L、kuguaglycosides C 和 goyagly-
coside-d 对照品为实验室自制（质量分数＞99%），流
动相乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，苦瓜样品
分别购于广东、广西、福建药材市场，由沈阳药科大
学孙启时教授鉴定为苦瓜 Momordica charantia L.。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Kromasil C18（150 mm×4.6 mm，5
μm）；流动相为乙腈-水（57∶43）；体积流量 1.0
mL/min；检测波长 203 nm；柱温 25 ℃。
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取 momordicoside L、kuguaglycoside
C、goyaglycoside-d 对照品 2.4、2.4、0.6 mg 加甲醇
溶解后，定容至 10 mL 量瓶中；再分别吸取配制好的
溶液 1 mL，定容至 10 mL，制成 momordicoside L 和
kuguaglycoside C 质量浓度均为 24.0 μg/mL 、
goyaglycoside-d质量浓度为6.0 μg/mL的对照品溶液，
摇匀，备用。
2.3 供试品溶液的制备[17-19]
不同产地干燥苦瓜样品各 2 g，分别用 10、10、
8 倍量甲醇闪式提取 3 次，每次 2 min，功率 150 W，
滤过后合并上清液，减压蒸干，取残渣加水 3 mL 溶解
后加入固相萃取小柱中，分别用 10 mL 水、甲醇-水
（50∶50）混合溶液、10 mL 甲醇洗脱，洗脱液浓缩定
容至 1 mL，经微孔滤膜后用于 HPLC 分析。
2.4 线性关系考察
分别吸取 momordicoside L（2、4、6、10、15、
20 μL），kuguaglycoside C（1、3、5、8、10、15 μL）、
goyaglycoside-d（1、2、5、10、16、32 μL）对照品
溶液注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面
积，以峰面积（Y）为纵坐标，以对照品的进样量（X）
为横坐标，分别绘制标准曲线，得出momordicoside L、
kuguaglycoside C、goyaglycoside-d 回归方程分别为
Y＝700 017 X－578.9，r＝0.999 9；Y＝175 896 X＋
877.4，r＝0.999 8；Y＝512 572 X＋1 013.2，r＝0.999 8。
momordicoside L、kuguaglycoside C、goyaglycoside-d
分别在 0.048～0.48、0.024～0.36、0.006～0.192 μg，
进样量与峰面积之间线性关系良好。
2.5 方法学考察
2.5.1 检测波长的选择 在 200～400 nm 波长范围
内，对对照品和供试品溶液进行扫描，根据各峰的紫
外光谱曲线和各峰的最大吸收波长，综合比较确定
203 nm 为最佳检测波长。
2.5.2 精密度试验 分别精密吸取 momordicoside
L、kuguaglycoside C、goyaglycoside-d 对照品溶液
各 20 μL，进样 6 次，测定峰面积，RSD 分别为
0.90%、1.56%、1.21%。
2.5.3 稳定性试验 取供试品溶液 20 μL，在 0、
3、6、9、12 h 进样 5 次，测定 momordicoside L、
kuguaglycoside C、goyaglycoside-d 的峰面积，其
RSD 分别为 0.48%、1.70%、0.75%。
2.5.4 重现性试验 取广东苦瓜样品 2 g，按上述
“2.3”项方法，平行制备 5 份供试品溶液，取 20 μL
测 定 momordicoside L 、 kuguaglycoside C 、
goyaglycoside-d 的峰面积值，计算其质量分数的
RSD 分别为 1.55%、1.49%、1.87%。表明本实验
方法重现性良好。
2.5.5 加样回收率试验 称定已测定的苦瓜样品
（产地广东）6 份，精密加入一定量的 3 种对照品，
按样品测定方法处理，取 20 μL 注入液相色谱仪，
测 定 momordicoside L 、 kuguaglycoside C 、
goyaglycoside-d 的峰面积，并计算回收率。结果
平均回收率分别为 96.93%、97.80%、93.62%。
RSD 分别为 1.95%、1.19%、1.28%。
2.6 样品测定
取 3 个产地苦瓜样品，制备供试品溶液，进
样 20 μL，均重复进样 3 次，记录峰面积，由回
归方程计算，结果见表 1 及图 1。
3 讨论
不同产地苦瓜中 3 种成分量差异较大，其中福
建产苦瓜中 momordicoside L 量最高，广东产苦瓜
中 kuguaglycoside C 和 goyaglycoside-d 量均较高。
苦瓜总皂苷的提取工艺主要为传统的超声、
微波和回流法。闪式提取法是应用了一种用于植
表 1 不同产地苦瓜中 momordicoside L、kuguaglycoside C
和 goyaglycoside-d 的测定结果
Table 1 Determination of momordicoside L, kuguaglycoside
C, and goyaglycoside-d in M. charantia
from different habitats
质量分数/(μg·g−1)
产地
momordicoside L kuguaglycoside C goyaglycoside-d
广东 5.15 3.05 2.95
福建 11.25 1.25 0.85
广西 4.83 1.80 0.45
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 12 期 2011 年 12 月

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1-momordicoside L 2-kuguaglycoside C 3-goyaglycoside-d
图 1 混合对照品（A）、广东（B）、福建（C）、广西（D）产地苦瓜样品的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC chromatograms of mixed reference substances (A), samples from Guangdong (B), Fujian (C), and Guangxi (D)
物软、硬材料快速提取的新型提取器。其原理是依靠
高速机械剪切力和超动分子渗滤技术，在室温及溶剂
存在下数秒钟内把植物的根、茎、叶、花、果实等物
料破碎至细微颗粒，并使有效成分迅速达到组织内外
平衡，通过过滤达到提取之目的。该仪器能最大限度
保护植物有效成分，不会受热破坏，溶剂用量小、提
取时间短、效率高、节约能源。
采用先进、快速的闪式提取样品后，用固相萃
取和 HPLC 结合法测定多个苦瓜皂苷的量并进行不
同产地的质量评价研究工作未见报道。本研究首次
以 momordicoside L、kuguaglycoside C、goyagly-
coside-d 作为 HLPC 同步检测的一组指标，3 个成分
均为葫芦烷素型四环三萜，是葫芦科苦瓜属植物中较
有代表性的一类化合物，这为苦瓜活性成分的分析检
测和药材的质量评价提供新的依据和方法。
参考文献
[1] 江苏新医学院. 中药大辞典 [M]. 上海: 上海科学与技
术出版社, 1986.
[2] Hisashi M, Seikou N, Toshiyuki M, et al. Structures of new
cucurbitane-type triterpenes and glycostdes, karavilagens D
and E, and karavilosides VL, VII, VIII, IX, X and XI, from
the fruit of Momordica charantia [J]. Heterocycles, 2007,
71(2): 331-341.
[3] 潘 辉, 赵余庆. 苦瓜中皂 (甾) 苷类化学成分的研究
[J]. 亚太传统医药, 2006, 1: 65-72.
[4] 佀丽红, 赵余庆. 苦瓜中降血糖活性成分的提取分离与
鉴定 [J]. 中药材, 2004, 27(11): 827-828.
[5] 柴瑞华, 肖春莹, 关 健, 等. 苦瓜总皂苷降血糖作用的
研究 [J]. 中草药, 2008, 39(5): 746-751.
[6] Liva H, Michi T, Shigeru T, et al. Momordica charantia
constituents and antidiabetic screening of the isolated major
compounds [J]. Chem Pharm Bull, 2006, 54(7):
1017-1021.
[7] 张 瑜, 崔炯谟, 朴虎日, 等. 苦瓜中新化合物的化
学研究 [J]. 中草药, 2009, 40(4): 509-512.
[8] 夏 柯, 颜 钫, 叶 杨, 等. 苦瓜籽总甙体外抗
HSV2 I 和 RSV 活性研究 [J]. 四川大学学报: 自然
科学版, 2007, 44(1): 160-162.
[9] 柴瑞华, 肖春莹, 赵余庆. 苦瓜总皂苷降血糖作用的
研究 [J]. 中草药, 2007, 38(2): 248-250.
[10] 李雁群, 王文生, 王 策. 罗汉果中皂苷的分离与鉴
定 [J]. 食品科学, 1993(5): 66-69.
[11] 熊术道, 尹丽慧, 李景荣, 等. 苦瓜蛋白抗肿瘤作用
及其分子机制 [J]. 中草药, 2008, 39(3): 408-411.
[12] OLeszek W A. Chromatographic determination of plant
saponins [J]. J Chromatogr A, 2002(967): 147-162.
[13] 顾小红, 赵海雯, 汤 坚, 等. 癞葡萄总皂苷测定方
法的研究 [J]. 食品科学, 2005, 26(8): 313-315.
[14] 程莉君, 石雪萍. 苦瓜中总皂苷的比色法测定 [J].
食品与机械, 2008, 24(2): 123-127.
[15] 关 健, 童然询，赵余庆. 薄层扫描法测定不同产地
苦瓜中降血糖有效成分苦瓜苷的含量 [J]. 中国现代
中药, 2006, 8(3): 19-21.
[16] 张 瑜, 赵余庆. HPLC 测定不同产地苦瓜中降糖活
性成分 momordicoside L 含量 [J]. 中国中药杂志,
2010, 35(5): 620-621.
[17] 周 湛, 刘延泽, 赵余庆. 三七芦头和根须总皂苷的
闪式提取及纯化工艺研究 [J]. 中国现代中药, 2009,
11(3): 34-36.
[18] 汪中博, 赵余庆. 积雪草总皂苷闪式提取 (STE) 工
艺研究 [J]. 中国现代中药, 2009, 11(2): 36-38.
[19] 王 水, 唐 琳. 固相萃取和高效液相色谱相结合快
速测定苦瓜甙 A 的含量 [J]. 色谱 , 2001, 19(2):
128-131.

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