全 文 ：泽泻的化学成分及其免疫抑制活性筛选
张朝凤，周爱存，张　勉
（１．中国药科大学 现代中药重点实验室 生药学研究室，江苏 南京 ２１００３８）
［摘要］　目的：研究泽泻Ａｌｉｓｍａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ的免疫抑制活性物质。方法：利用色谱技术进行分离和纯化，并通过现代波谱
方法鉴定其结构，采用体外细胞培养法，测定萜类化合物对小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖的活性。结果：从泽泻中分离鉴定了１２
个化合物。分别为倍半萜类ｃｌｏｖａｎｄｉｏｌ（１），ｏｒｉｅｎｔａｌｏｌＥ（２），ａｌｉｓｍｏｘｉｄｅ（３），ａｌｉｓｍｏｌ（４）和三萜类４α，１０αｄｉｈｙｄｒｏｘｙ５βＨｇｕａｊ６
ｅｎ（５），ａｌｉｓｍｏｒｉｅｎｔｏｌｓＡ（６），泽泻醇Ｆ（７），泽泻醇Ａ（８），１３β，１７β环氧泽泻醇Ａ（９），２３乙酰泽泻醇Ｂ（１０），１Ｈｉｎｄｏｌｅ３ｃａｒｂｏｘ
ｙｌｉｃａｃｉｄ（１１）和琥珀酸（１２）。化合物９，１０和２４去乙酰泽泻醇Ａ均具显示了剂量依赖性免疫抑制趋势。结论：化合物１，５，
１１和１２均为首次从该属植物中分离得到，首次对化合物１的ＮＭＲ波谱数据归属问题进行了修正，活性结果显示原萜烷型三
萜类化合物具有一定的免疫抑制活性。
［关键词］　泽泻；三萜；倍半萜；免疫抑制
［收稿日期］　２００８０９２１
［通信作者］　张朝凤，Ｔｅｌ：（０２５）８５３０９６３９，Ｆａｘ：（０２５）８５３０９６３９，
Ｅｍａｉｌ：ｎｊｃｈａｏｆｅｎｇ＠１２６．ｃｏｍ
　　泽泻为泽泻科泽泻属植物 Ａｌｉｓｍａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ
（Ｓａｍ．）Ｊｕｚｅｐ．的干燥块茎。具有利小便，清湿热
的功效，临床多用于治疗糖尿病、小便不利、水
肿、热淋涩痛等证［１］。泽泻的化学成分主要以萜
类为主，包括原萜烷型三萜、愈创木烷型倍半萜以
及部分的二萜及其苷类等成分［２］。文献 ［３４］报
道泽泻多糖成分对免疫系统有调节作用，而有关原
萜烷型三萜类化合物的免疫抑制活性尚未见报道。
本研究试验拟从离体免疫细胞活性测定的角度出
发，在细胞水平上揭示泽泻免疫抑制活性的有效成
分，为开发泽泻的新用途及用于临床抗排斥治疗提
供理论依据。
作者曾报道从泽泻分离出的４个原萜烷型三
萜［５］，本研究进一步从９０％乙醇提取物中分离纯化
得６个愈创木烷型倍半萜类化合物 ｃｌｏｖａｎｄｉｏｌ（１），
ｏｒｉｅｎｔａｌｏｌＥ（２），ａｌｉｓｍｏｘｉｄｅ（３），ａｌｉｓｍｏｌ（４），４α，１０α
ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ５βＨｇｕａｊ６ｅｎ（５），ａｌｉｓｍｏｒｉｅｎｔｏｌｓＡ（６）。和
４个已知原萜烷型三萜泽泻醇Ｆ（ａｌｉｓｏｌＦ，７），泽泻醇
Ａ（ａｌｉｓｏｌＡ，８），１３β，１７β环氧泽泻醇Ａ（１３β，１７βｅｐｏｘ
ｙａｌｉｓｏｌＡ，９），２３乙酰泽泻醇 Ｂ（ａｌｉｓｏｌＢ２３ａｃｅｔａｔｅ，
１０）（图１），以及２个其他类成分１Ｈｉｎｄｏｌｅ３ｃａｒｂｏｘ
ｙｌｉｃａｃｉｄ（１１）和琥珀酸（１２）。化合物１，５，１１和１２
均首次从该属中分得，首次对化合物１的ＮＭＲ波数
据进行了更正。采用ＭＴＴ法测定小鼠脾液Ｔ淋转细
胞的活性，结果显示原萜烷型三萜类物质１３β，１７β
环氧泽泻醇Ａ（９），２３乙酰泽泻醇Ｂ（１０）和 ２４乙酰
泽泻醇Ａ，具有剂量依赖性免疫抑制活性。
图１　化合物１～１０的结构式
１　材料
Ｘ４型数字显示显微熔点测定仪（温度未校
正）；Ａｇｉｌｅｎｔ１１００ＬＣＭＳＤＴｒａｐ质谱仪及 ＨＲＴＯＦ
Ｍｓ质谱仪；ＮｉｃｏｌｅｔＩｍｐａｃｔ４１０型红外光谱仪（ＫＢｒ
压片）；ＢｒｕｋｅｒＡＣＦ３００，５００型核磁共振仪（ＴＭＳ内
标）。薄层色谱和柱色谱用硅胶为青岛海洋化工厂
生产，ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０为Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司生产。所用
试剂均为分析纯。
实验药材购自安徽省亳州市药材市场，经本室
张勉教授鉴定原植物为泽泻科泽泻 Ａ．ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ，凭
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证标本（２００６８）存放于中国药科大学生药研究室。
２　提取与分离
泽泻药材２０ｋｇ粉碎，用８倍量的９０％乙醇热
回流提取３次，每次１ｈ，回收乙醇至无醇味，依次分
别用石油醚（６０～９０℃）、醋酸乙酯萃取。醋酸乙酯
萃取物（４６０ｇ）经硅胶柱色谱，石油醚醋酸乙酯
（５０∶１～１∶２）梯度洗脱，得 Ｆｒ．１～Ｆｒ．１１。各部分经
反复硅胶柱色谱，ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ２０凝胶柱色谱，反相
柱色谱和重结晶等分离纯化方法，得到单体化合物
１２个，从Ｆｒ．１得到化合物４（２０ｍｇ），从 Ｆｒ．２得到
化合物１（８ｍｇ），２（１０ｍｇ），５（１０ｍｇ），１０（３０ｍｇ）。
Ｆｒ．４得到化合物３（１０ｍｇ）和１１（５ｍｇ），Ｆｒ．７得到
化合物６（１０ｍｇ），８（１００ｍｇ），Ｆｒ．８得化合物９（８０
ｍｇ），１２（１００ｍｇ），Ｆｒ．１０得化合物７（７０ｍｇ）。
３　结构鉴定
化合物 １　无色针状结晶（丙酮）。［α］２０Ｄ
－４３°（ｃ０１，甲醇）。遇 １０％硫酸香草醛显粉红
色。ＥＳＩＭＳｍ／ｚ２３７０［Ｍ －Ｈ］＋，２５６２［Ｍ ＋
ＮＨ４］
＋，ＨＲＴＯＦＭＳ提示分子式为 Ｃ１５Ｈ２６Ｏ２（［Ｍ＋
Ｎａ］＋２６１１８３２，Ｃａｌ．２６１１８２５）。１ＨＮＭＲ中显示
３个甲基单峰信号［δ０８７，０９７，１０４（３Ｈ，ｓ，
ｅａｃｈ）］，２个连氧叔碳上的氢信号［δ３３（１Ｈ，ｂｒ
ｓ），３７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５１，５５）］；１３ＣＮＭＲ谱显示
１５个碳信号，结合 ＤＥＰＴ谱，确定为３个伯碳、６个
仲碳、３个叔碳和３个季碳。根据上述碳氢谱以及
ＤＥＰＴ谱信号，推测该化合物可能为倍半萜类化合
物，但考虑到该化合物结构中有６个仲碳，故推测
该化合物并非为泽泻中典型的愈创木烷型倍半
萜，可能是拥有五元环与八元环骈合的结构类型，
根据该化合物不饱和度为３，且结构中未看到有不
饱和碳信号，推测该化合物中有３个环。１Ｈ１ＨＣＯ
ＳＹ谱中可以看到以下相关 δ３３（Ｈ２）与１６１～
１６７（Ｈ３ａ），１９５～２０５（Ｈ３ｂ）相关；１６１～
１６７（Ｈ３ａ），１９５～２０５（Ｈ３ｂ）与 １０６～１１２
（Ｈ４）相关；１２８～１３２（Ｈ７ａ），１３４～１４５（Ｈ
７ｂ）与１３８～１４２（Ｈ８ａ），１０８～１１６（Ｈ８ｂ）相
关；３７９（Ｈ１０）与 １６９～１７４（Ｈ１１ａ），１４７～
１５３（Ｈ１１ｂ）相关，通过对 ＨＳＱＣ和 ＨＭＢＣ谱的综
合分析，对该化合物的碳谱氢谱进行归属。ＮＯＥ
ＳＹ谱中可以看到以下相关信息 δ０８７（Ｈ１５）与
１４３（Ｈ６）相关；０８７（Ｈ１５）与 ３７９（１０Ｈ）相
关；１５４，０９２（Ｈ９）与 ３７９（Ｈ１０）相关；０９７
（Ｈ１３）与３３（Ｈ２）相关，可以推测 Ｈ１５，Ｈ６，Ｈ
９，Ｈ１０处于同侧，Ｈ１３与 Ｈ２处于同侧，未看到
Ｈ９与 Ｈ１３，Ｈ９与 Ｈ２相关，推测 Ｈ９与 Ｈ１３，
Ｈ２处于异侧。故最终确定该化合物为 ｃｌｏｖａｎｄｉｏｌ
［６］，首次对该化合物的碳氢信号的归属进行了
修正。
表１　化合物１的ＮＭＲ数据归属及ＨＭＢＣ的相关（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）
Ｎｏ． １Ｈ １３Ｃ ＨＭＢＣ
１ 　 ３４９ 　
２ ３３ｂｒｓ ７５１ 　
３ １６１～１６７ｍ，１９５～２０５ｍ ２６２ Ｃ１，Ｃ２，Ｃ４，Ｃ５
４ １０６～１１２ｍ ２６４ Ｃ５，Ｃ９
５ 　 ４４６ 　
６ １４２～１４４ｍ ５０８ Ｃ５，Ｃ７
７ １２８～１３２ｍ，１３４～１４５ｍ ２０７ Ｃ８，Ｃ６
８ １３８～１４２ｍ，１０８～１１６ｍ ３３２ Ｃ２，Ｃ７
９ １５４ｄ（１２７），０９２ｄ（１３０） ３５６ Ｃ１，Ｃ４，Ｃ５，Ｃ６，Ｃ８
１０ ３７９ｄｄ（５５，５１） ８１０ Ｃ９，Ｃ４，Ｃ１１
１１ １６９～１７４ｍ，１４７～１５３ｍ ４７９ Ｃ１０，Ｃ５，Ｃ６，Ｃ１２，Ｃ１４，Ｃ１５
１２ 　 ３７３ Ｃ１３，Ｃ１１，Ｃ７
１３ ０９７ｓ ２８３ Ｃ２，Ｃ１，Ｃ９，Ｃ８
１４ １０４ｓ ３１５ Ｃ１２，Ｃ１５，Ｃ１１，Ｃ６
１５ ０８７ｓ ２５５ Ｃ１４，Ｃ１２，Ｃ１１，Ｃ６
　　化合物２　无色针状结晶（石油醚丙酮），ＥＳＩ
ＭＳｍ／ｚ５３１［２Ｍ＋Ｎａ］＋，２７７２［Ｍ＋Ｎａ］＋。１ＨＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：１０２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６９Ｈｚ，Ｈ
１２），１０４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６９Ｈｚ，Ｈ１３），１２０（３Ｈ，ｓ，Ｈ
１５），１３３（３Ｈ，ｓ，Ｈ１４），１５８（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），１７２
（１Ｈ，ｍ，Ｈ１），１９５（１Ｈ，ｍ，Ｈ１１），３７９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
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９３Ｈｚ，Ｈ６）。参考文献［７］，确定该化合物为泽泻
萜醇Ｅ。
化合物 ３　无色方晶（三氯甲烷甲醇），ｍｐ
１４０～１４２℃，１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：０９７（３Ｈ，
ｄ，Ｊ＝６９Ｈｚ，Ｈ１３），０９９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６９Ｈｚ，Ｈ１２），
１２１（３Ｈ，ｓ，Ｈ１５），１２７（３Ｈ，ｓ，Ｈ１４），５５０（１Ｈ，ｄ，Ｈ
６）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：５１０（Ｃ１），２１７（Ｃ
２），４０７（Ｃ３），８０３（Ｃ４），５０６（Ｃ５），１２１５（Ｃ６），
１４９７（Ｃ７），２５２（Ｃ８），４２９（Ｃ９），７５２（Ｃ１０），
３７４（Ｃ１１），２１３（Ｃ１２），２１５（Ｃ１３），２２８（Ｃ１４），
２１６（Ｃ１５）。参考文献［７］，确定该化合物为
ａｌｉｓｍｏｘｉｄｅ。
化合物 ４　无色油状物（石油醚醋酸乙酯），
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：０９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６７Ｈｚ，
Ｈ１２），０９９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６７Ｈｚ，Ｈ１３），４７１，４７６
（１Ｈ，ｅａｃｈ，ｓ，Ｈ１４）１１９（３Ｈ，ｓ，Ｈ１５），５５４（１Ｈ，ｂｒｓ，
Ｈ６）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：５４６（Ｃ１），２４６
（Ｃ２），３９９（Ｃ３），８０３（Ｃ４），４６９（Ｃ５），１２１４（Ｃ
６），１４９１（Ｃ７），２９７（Ｃ８），３６９（Ｃ９），１５３６（Ｃ
１０），３７２（Ｃ１１），２１１（Ｃ１２），２１３（Ｃ１３），２４６（Ｃ
１４），１０６３（Ｃ１５）。参考文献［７］确定该化合物为
ａｌｉｓｍｏｌ。
化合物５　无色针状结晶（石油醚丙酮），ＥＳＩ
ＭＳｍ／ｚ２３７０［Ｍ－Ｈ］－，２１８９［Ｍ－Ｈ２Ｏ－Ｈ］
－。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：０９７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６８Ｈｚ，
Ｈ１２），０９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６８Ｈｚ，Ｈ１３），１１８（３Ｈ，ｓ，Ｈ
１４），１４１（３Ｈ，ｓ，Ｈ１５），２２５（１Ｈ，ｑｑ，Ｈ１１），２３４
（１Ｈ，ｍ，Ｈ８），２５９（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），２６８（１Ｈ，ｍ，Ｈ１），
５１５（１Ｈ，ｄ，Ｈ６）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：５０９
（Ｃ１），２４９（Ｃ２），３６３（Ｃ３），８２５（Ｃ４），５１０（Ｃ
５），１２０６（Ｃ６），１４９２（Ｃ７），３１４（Ｃ８），３８２（Ｃ９），
７４１（Ｃ１０），３８０（Ｃ１１），２１２（Ｃ１２），２１３（Ｃ１３），
２３９（Ｃ１４），２５３（Ｃ１５）。参考文献［８］对照，确定该
化合物为４，１０ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ５Ｈｇｕａｊ６ｅｎ。
化合物６　无色针状结晶（甲醇），ＥＳＩＭＳｍ／ｚ
２７１０［Ｍ－Ｈ］－。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：０９３
（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６７Ｈｚ，Ｈ１２，１３），１１９（３Ｈ，ｓ，Ｈ１４），
１３１（３Ｈ，ｓ，Ｈ１５），２４６（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝９６Ｈｚ，Ｈ５），
２６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９６，９６Ｈｚ，Ｈ５），３８４（１Ｈ，ｓ，Ｈ
６）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：５２９（Ｃ１），２４８（Ｃ
２），４１４（Ｃ３），８５２（Ｃ４），５２２（Ｃ５），７４７（Ｃ６），
７７８（Ｃ７），３１０（Ｃ８），３８０（Ｃ９），７３０（Ｃ１０），３６６
（Ｃ１１），１８１（Ｃ１２），１８１（Ｃ１３），３２５（Ｃ１４），２５４
（Ｃ１５）。综合上述波谱数据，参考文献［９］发现该化
合物与ａｌｉｓｍｏｒｉｅｎｔｏｌｓＡ很相似，但该化合物波谱数据
与文献报道的波谱数据不完全吻合，考虑到所用的溶
剂不同，结合 ＨＭＢＣ，ＨＳＱＣ谱确定该化合物为 ａｌｉｓ
ｍｏｒｉｅｎｔｏｌｓＡ。
化合物７　无色针晶（甲醇），ＥＳＩＭＳｍ／ｚ４８７１
［Ｍ－Ｈ］－。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：０８８，１０５，
１０６，１０７，１２３，１２４，１２９（３Ｈ，ｓ），１１４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝
７０Ｈｚ，Ｈ２１），１７５（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１０７Ｈｚ，Ｈ９），２８６
（１Ｈ，ｍ，Ｈ２０），３０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ，Ｈ２４），３７９
（１Ｈ，ｍ，Ｈ１１），４０３（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１１９Ｈｚ，Ｈ２３），
４４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５１，５１Ｈｚ，Ｈ１６）。１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，
７５ＭＨｚ）δ：３０８（Ｃ１），３３９（Ｃ２），２１９７（Ｃ３），４７０
（Ｃ４），４８２（Ｃ５），１９９（Ｃ６），３３６（Ｃ７），４０５（Ｃ
８），４９７（Ｃ９），３７０（Ｃ１０），７０５（Ｃ１１），３５０（Ｃ
１２），１３６９（Ｃ１３），５５４（Ｃ１４），３９５（Ｃ１５），８０１（Ｃ
１６），１３３２（Ｃ１７），２４４（Ｃ１８），２５５（Ｃ１９），２６６（Ｃ
２０），１８３（Ｃ２１），３３９（Ｃ２２），７２６（Ｃ２３），７７２（Ｃ
２４），７３３（Ｃ２５），２６８（Ｃ２６），２７０（Ｃ２７），２９６（Ｃ
２８），１９９（Ｃ２９），２３７（Ｃ３０）。参考文献［９］鉴定化
合物９为泽泻醇Ｆ。
化合物８　无色粉末（三氯甲烷甲醇），ＥＳＩＭＳ
ｍ／ｚ４８９３［Ｍ－Ｈ］－。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：
０９５，１００，１０１，１０３，１０８，１１６，１２２（３Ｈ，ｅａｃｈ，ｓ），
０９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７０Ｈｚ，Ｈ２１），１６１（１Ｈ，ｍ，Ｈ２２），
１７０（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝１０７Ｈｚ，Ｈ９），２７４（１Ｈ，ｍ，Ｈ１２），
２９５（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ２４），３７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３５，９３Ｈｚ，
Ｈ２３）３８２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝５９，１０７，１０７Ｈｚ，Ｈ１１）。
１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：３０９（Ｃ１），３３７（Ｃ２），
２２０６（Ｃ３），４６９（Ｃ４），４８５（Ｃ５），２０１（Ｃ６），３４３
（Ｃ７），４０４（Ｃ８），４９６（Ｃ９），３６９（Ｃ１０），６９７（Ｃ
１１），３４３（Ｃ１２），１３７６（Ｃ１３），５７０（Ｃ１４），３０４（Ｃ
１５），２９４（Ｃ１６），１３５４（Ｃ１７），２２９（Ｃ１８），２５５（Ｃ
１９），２８２（Ｃ２０），２０１（Ｃ２１），４０１（Ｃ２２），６９４（Ｃ
２３），６９７（Ｃ２４），７４０（Ｃ２５），２７１（Ｃ２６），２６１（Ｃ
２７），２９１（Ｃ２８），２００（Ｃ２９），２４０（Ｃ３０）。参考文
献［１０］确定该化合物为泽泻醇Ａ。
化合物９　无色粉末（丙酮）。１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，
３００ＭＨｚ）δ：１０５，１０６，１０８，１０８，１１２，１２７，１３１
（３Ｈ，ｅａｃｈ，ｓ），１０８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７０Ｈｚ，Ｈ２１），３０９
（１Ｈ，ｂｒｓ，Ｈ２４），４０４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２５，９５Ｈｚ，Ｈ
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第３４卷第８期
２００９年４月
　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　
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　Ａｐｒｉｌ，２００９
２３），４１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０４，３５Ｈｚ，Ｈ１１）。１３ＣＮＭＲ
（ＣＤＣｌ３，７５ＭＨｚ）δ：３１０（Ｃ１），３４９（Ｃ２），２１９５（Ｃ
３），４６９（Ｃ４），４９２（Ｃ５），２０１（Ｃ６），３５５（Ｃ７），
３８９（Ｃ８），４８９（Ｃ９），３７０（Ｃ１０），６８６（Ｃ１１），
３３６（Ｃ１２），７３５（Ｃ１３），５０１（Ｃ１４），３０７（Ｃ１５），
２６５（Ｃ１６），７８３（Ｃ１７），２００（Ｃ１８），２４７（Ｃ１９），
３０９（Ｃ２０），１７６（Ｃ２１），４０５（Ｃ２２），６８６（Ｃ２３），
７７３（Ｃ２４），７３３（Ｃ２５），２６６（Ｃ２６），２６８（Ｃ２７），
２９６（Ｃ２８），１９３（Ｃ２９），２５７（Ｃ３０）。参考文献
［１１］确定该化合物为１３β，１７β环氧泽泻醇Ａ。
化合物１０　无色棱状结晶（醋酸乙酯），ＥＳＩＭＳ
ｍ／ｚ５１３３［Ｍ－Ｈ］－，１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ：
０９７，１０４，１０５，１０６，１１４，１３１，１３３（３Ｈ，ｅａｃｈ
ｓ），０９９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７０Ｈｚ），１７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０７
Ｈｚ，Ｈ９），２０６（３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ），２５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５５，
１３２Ｈｚ，Ｈ１２），２７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８４Ｈｚ，Ｈ２４），３８０
（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝５５，１０６，１１０Ｈｚ，Ｈ１１），４６１（１Ｈ，
ｄｄｄ，Ｊ＝２６，８４，１０６Ｈｚ，Ｈ２３）。参考文献［１２］鉴
定化合物１０为２３乙酰泽泻醇Ｂ。
化合物１１　红褐色针晶（醋酸乙酯），薄层色谱
用 １０％香草醛硫酸显色为橘红色。ＥＳＩＭＳｍ／ｚ
１６０１［Ｍ －Ｈ］－，１１５９［Ｍ －ＣＯＯ］－，１ＨＮＭＲ
（ＤＭＳＯｄ６，３００ＭＨｚ）δ：７１７（２Ｈ，ｍ，Ｈ６，７），７４２
（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝７５Ｈｚ，Ｈ８），７９９（１Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝７５
Ｈｚ，Ｈ５），８０１（１Ｈ，ｓ，Ｈ２），１０９（１Ｈ，ｓ，
ＣＯＯＨ）。１３ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，７５ＭＨｚ）δ：１３２５（Ｃ
２），１０７０（Ｃ３），１２１４（Ｃ４），１２２６（Ｃ５），１１２５
（Ｃ６），１２１２（Ｃ７），１２６４（Ｃ８），１３６９（Ｃ９），
１６６３（ＣＯＯＨ）。参考文献［１３］确定该化合物为
１Ｈｉｎｄｏｌｅ３ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｃｉｄ（１１）。
化合物１２　白色片状结晶（三氯甲烷甲醇），
ｍｐ１８７～１９０℃。ＥＳＩＭＳｍ／ｚ１１６８［Ｍ－Ｈ］－。１Ｈ
ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，３００ＭＨｚ）δ：５００（１Ｈ，ｓ，ＯＨ），２５６
（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）与标准品共薄层，Ｒｆ值与显色行为完
全一致，混合熔点不下降，确定该化合物为琥珀酸。
４　免疫抑制活性筛选
曾报道泽泻的免疫活性物质是酸性多糖 Ａｌｉｓ
ｍａｎＰＩ和 ＳＩ［１４１５］，有关其原萜烷三萜及倍半萜的
免疫调节活性尚未见报道。按照文献［１６］的方法
制备 Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞，首先采用 ＭＴＴ法筛选
上述化合物对正常小鼠脾细胞的毒性，结果表明
２４乙酰泽泻醇Ａ与化合物６，９和１０无明显的细胞
毒性。在此基础上针对无明显细胞毒活性的化合物
进一步进行Ｔ淋巴细胞增殖活性测试，无菌取小鼠
脾脏，９６孔培养板中，每孔加入脾细胞５×１０５个，同
时加入化合物溶液（终浓度分别为 １×１０－６，１×
１０－５，１×１０－４ｇ·ｍＬ－１）以及 ＣｏｎＡ（５ｍｇ·Ｌ－１），
每个样３复孔。培养７２ｈ后，运用 ＭＴＴ法检测，用
酶标仪测定 Ａ值（５６０ｎｍ），结果以刺激指数表示：
刺激指数 ＳＩ＝Ａ样品／Ａ空白。结果表明原萜烷类成分
２４乙酰泽泻醇 Ａ、２３－乙酰泽泻醇 Ｂ（１０）和 １３β，
１７β环氧泽泻醇 Ａ（９）具有剂量依赖性免疫抑制趋
势（表２）。
表２　化合物９，１０和２４泽泻醇Ａ对小鼠
脾脏淋巴细胞的增殖活性（ＳＩ，珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
样品
１×１０－６
ｇ·ｍＬ－１
１×１０－５
ｇ·ｍＬ－１
１×１０－４
ｇ·ｍＬ－１
ＣｏｎＡ 　 　 １２１１±０５２
２４泽泻醇Ａ １１４２±０７４ ７８３±０８５ ０８６±０１１
化合物９ １１８２±０２２ １１３４±０８４ ４８７±０２２
化合物１０ １１７２±０３７ ４８８±０３７ ０７６±００５
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第３４卷第８期
２００９年４月
　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　８
　Ａｐｒｉｌ，２００９
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ＣｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＡｌｉｓｍａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓａｎｄｔｈｅｉｒ
ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎ
ＺＨＡＮＧＣｈａｏｆｅｎｇ，ＺＨＯＵＡｉｃｈｕｎ，ＺＨＡＮＧｍｉａｎ
（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｏｄｅｒｎＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｎａｎｊｉｎｇ２１００３８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｉｔｈｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎｆｒｏｍＡｌｉｓｍａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ．Ｍｅｔｈ
ｏｄ：ＴｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｂｙｋｉｎｄｓｏｆｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｉｔｓｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｅｒｅｅｌｕｃｉｄａｔｅｄｂｙＮＭＲ
ｓｐｅｃｔｒａａｎｄｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．ＩｔｓｉｍｍｕｎｏｃｏｍｐｅｎｔｅｎｃｅｏｆｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｔａｋｅｎｆｒｏｍｓｐｌｅｅｎｏｆｍｏｕｓｅｗｅｒｅｅｘａｍｉｎｅｄｂｙＭＴＴａｓ
ｓａｙ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｗｅｌｖｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓｃｌｏｖａｎｄｉｏｌ（１），ｏｒｉｅｎｔａｌｏｌＥ（２），ａｌｉｓｍｏｘｉｄｅ（３），ａｌｉｓｍｏｌ（４），４α，
１０αｄｉｈｙｄｒｏｘｙ５βＨｇｕａｊ６ｅｎ（５），ａｌｉｓｍｏｒｉｅｎｔｏｌｓＡ（６），ａｌｉｓｏｌＦ（７），ａｌｉｓｏｌＡ（８），１３β，１７βｅｐｏｘｙａｌｉｓｏｌＡ（９），ａｌｉｓｏｌＢ２３ａｃｅ
ｔａｔｅ（１０），１Ｈｉｎｄｏｌｅ３ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｃｉｄ（１１）ａｎｄｃｕｃｃｉｎｉｃａｃｉｄ（１２）．Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ９，１０ａｎｄａｌｉｓｏｌＡ２４ａｃｅｔａｔｅｓｈｏｗｅｄｉｍｍｕｎｏｓｕｐ
ｐｒｅｓｓｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ１，５，１１ａｎｄ１２ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｉｒｓｔｌｙｆｒｏｍｔｈｉｓｇｅｎｕｓ，ａｎｄｔｈｅＮＭＲｓｐｅｃｔｒａｄａｔａｏｆ１ｗｅｒｅ
ｃｏｒｅｃｔｅｄｆｉｒｓｔｌｙ，ｓｏｍｅｐｒｏｔｏｓｔａｎｔｙｐｅｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓｍａｙｂｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｓｎｅｗｄｒｕｇｗｉｔｈｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ａｌｉｓｍａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ；ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅｓ；ｐｒｏｔｏｓｔａｎｔｙｐｅｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅｓ；ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎ
［责任编辑　王亚君］
全国中医痛证论坛征文通知
中华中医药学会主办的“全国中医痛证论坛”将于２００９年８月在广西桂林召开，会议将邀请中西医有关方面的权威专家
学者作专题报告。现将有关征文事宜通知如下：
一、征文内容：（１）针对头面痛、颈肩痛、腰背痛、四肢骨关节痛、软组织痛、妇科痛证、癌症痛等各种疼痛的临床研究；（２）
治疗手段的研究，如微创介入治疗、麻醉镇痛、中药镇痛、针灸推拿镇痛、针刀镇痛、气功镇痛；（３）痛证的基础研究；（４）其他与
痛证有关的研究。
二、征文要求：（１）未正式公开发表过的论文。（２）论文力求主题鲜明、论据充分、资料详实。（３）稿件篇幅在４０００字以
内，关键词３８个，注明作者姓名、职称、单位、具体通讯地址、邮政编码、电子信箱等。（４）论文请寄打印稿并网络发送电子版，
请在信封上注明“痛证论坛征文”，邮件以“作者姓名＋痛证论坛征文”命名。请用ｗｏｒｄ文档以附件的形式发送，收到必复，若
无回复，请与编辑部联系。（５）每篇论文共收审稿费、版面费３８０元，稿件请自留底稿，恕不退稿。投稿时请同时寄出审稿费
及版面费，截止日期：２００９年５月３０日。
三、其他事宜：稿件经审稿录用后将在国家级中文核心期刊《中华中医药杂志》（原《中国医药学报》）２００９年增刊上刊出。
参加大会学术交流者，由中华中医药学会颁发论文证书和国家Ⅰ类继续教育学分。
四、联系方式：北京市朝阳区和平街北口樱花路甲４号《中华中医药杂志》社（收）；邮编：１０００２９；电话：０１０６４２１６６５０；Ｅ
ｍａｉｌ：６４２１６６５０＠１６３ｃｏｍ。
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第３４卷第８期
２００９年４月
　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　
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