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Vol. 34，Issue 1
January，2009
第 34卷第 1期
2009年 1月
玄参配方颗粒的制备工艺和含量测定
钮正睿，王如峰，荆 宇，尚明英，蔡少青*
（北京大学 药学院 生药学研究室，北京 100083）
[摘要] 目的：建立玄参配方颗粒的制备工艺并对其中的有效成分进行含量测定。方法：根据 4因素 3水平正交表安排
试验。用 HPLC测定配方颗粒中哈巴俄苷和肉桂酸的含量。结果：优化的提取工艺如下：玄参饮片加入 8倍量水浸泡 0.5 h，
煎煮 2 h，药渣再加入 6倍量水煎煮 1.5 h。哈巴俄苷和肉桂酸的线性范围分别是 0.077 6～1.552 μg（r=0.999 9）和 0.014 46～
0.433 9 μg（r=0.999 9）。平均回收率分别是 100.4%（RSD 1.98%，n=6）和 98.27%（RSD 1.35%，n=6）。测定了 10批配
方颗粒中上述两种成分的含量。结论：优化的提取工艺科学可靠，含量测定方法对配方颗粒的质量控制是可行的。
[关键词] 玄参；配方颗粒；制备工艺；含量测定；HPLC
5玄参为玄参科植物浙玄参 Scrophularia
ningpoensis Hemsl.（该植物称“浙玄参”以避免与
中药玄参混淆）的干燥根[1]，其主要活性成分为环烯
醚萜类和酚类化合物，如哈巴俄苷、哈巴苷、安格
洛苷 C等[2]。玄参作为常用中药见于多种成方制剂，
《中国药典》2005年版收载包含玄参的制剂 33种，
如建民咽喉片、清热解毒口服液等[1]，地方中草药书
籍和药物志中记载玄参对咽喉肿痛具有良好效果，
并可用于治疗小儿鹅口疮、麻疹、无名肿痛等[3-5]。
玄参含有大量糖类，容易发生吸潮、霉变和虫
蛀现象，饮片需要煎煮，不便服用。如将玄参饮片
经过一系列工艺制成配方颗粒则利于储存，且服用
方便。目前关于玄参配方颗粒的制备工艺和质量控
制方法未见报道。作者对其制备工艺进行了研究，
并采用高效液相色谱法测定了配方颗粒中哈巴俄
苷和肉桂酸的含量，方法简便可行，重复性好，可
以作为控制玄参配方颗粒质量的方法。
1 仪器与试药
Agilent 1100高效液相色谱仪（美国 Agilent公
司，G1379A 真空在线脱气机，G1312A 二元泵，
G1313A 自动进样器，G1315B DAD检测器，Agilent
化学工作站）；BP 211D 1/10 万电子天平（德国
Satorious公司）；Analytical Plus 1/1万电子天平（美
[收稿日期] 2008-04-20
[基金项目] 国家“十五”重大科技专项课题(2001BA701A41)
[通信作者]
*
蔡少青，Tel/Fax：(010)82801693，E-mail：sqcai@bjmu.
edu. cn
国 Ohaus公司）；SD-05喷雾干燥机（英国 Lab Plant
Spray Dryer公司）。
乙腈为色谱纯（德国 Merck 公司），水为娃哈
哈纯净水，甲醇、醋酸等试剂均为分析纯，糊精为
药用规格。
分为 2批。实验室研究所用玄参饮片购自安徽
亳州药材市场（编号 5848），中试所用玄参饮片购
自浙江磐安（编号 5847），均经北京大学药学院蔡
少青教授鉴定，其基源为浙玄参 S. ningpoensis的干
燥根。
哈巴俄苷为作者自玄参中分得，并经 UV，IR，
FAB-MS，1H-NMR，13C-NMR鉴定其结构。经 HPLC
测定，面积归一化法计算纯度大于 98％。
肉桂酸为作者自玄参中分得，并经 EI-MS，
1H-NMR，13C-NMR鉴定其结构。经 HPLC测定，
面积归一化法计算纯度大于 98％。
2 方法与结果
2.1 玄参配方颗粒提取工艺（编号 5848）
2.1.1 提取溶剂选择依据 玄参的传统用药方式
通常为水煎煮后服用，且玄参中主要含有环烯醚萜
苷类和酚类成分，这些类别的化合物大多具有良好
的水溶性，因此，本研究采用传统的水煎方法。
2.1.2 试验因素水平设计 哈巴俄苷是《中国药典》
2005年版中规定的含量测定项目，也是玄参的主成
分和药效成分之一，因此以得膏率和哈巴俄苷的含
量为指标，以浸泡时间、加水量、提取时间、提取
次数为考察因素，设计正交试验，选择 L9（34）正
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交表，因素水平表见表 1。
表 1 玄参配方颗粒提取工艺因素水平
水平
A
浸泡时间/h
B
溶剂用量/倍
C
提取时间/h
D
提取次数
1 0 8 6 6 1 0.5 0.5 2
2 0.5 10 8 8 1.5 1 1 3
3 1 12 10 8 2 1.5 1 2（虚拟水平）
2.1.3 色谱分析条件 色谱条件[1] Agilent Zorbax
SB C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相
乙腈 -1％醋酸水溶液梯度洗脱（0～20 min，
20 80∶ ～50 50∶ ），检测波长 278 nm，柱温 25 ℃，
进样 20 μL。
对照品溶液的配制 用 1/10 万电子分析天平
称定哈巴俄苷 19.40 mg，加 30％甲醇 100 mL，得
194 mg·L-1哈巴俄苷对照品溶液，用 30％甲醇稀释
5倍得 38.8 mg·L-1对照品溶液。分别进样 2，5，10，
20，30，40 mL，测定各峰峰面积的积分值。以峰面
积为横坐标，所含哈巴俄苷的量为纵坐标作图，回
归方程为 Y=0.000 39X–0.005 12，r=0.999 9，哈巴
俄苷在 0.077 6～1.552 mg呈良好线性关系。
2.1.4 得膏率考察 按表2分别称定9份玄参饮片
（60 °C干燥24 h），每份5 g，适当粉碎，按正交试
验方法安排实验（表2），微沸回流提取，提取液过
滤并将滤液减压浓缩至一定体积后，分别置于已经
干燥至恒重的蒸发皿中，60 °C蒸发水分，60 °C真
空干燥至恒重得到干浸膏，称定，计算出膏率结果
见表2。
得膏率=（W2/W1）×100%
W2为干浸膏质量（g）；W1为饮片质量（g）。
表2 得膏率试验结果 %
No. 出膏率 No. 出膏率
1 50 6 70
2 62 7 74
3 65 8 63
4 64 9 62
5 67
出膏率的直观分析结果见表 2。各因素对得膏
率的影响程度依次为 A>C>D>B。
2.1.5 干浸膏中哈巴俄苷提取量考察 精密称定
玄参干浸膏约0.3 g，用30％甲醇50 mL溶解，0.45
μm微孔滤膜过滤，弃去初滤液，续滤液作为供试液
进行含量测定，结果见表3，再根据得膏率计算5 g
饮片中哈巴俄苷的提取量，结果见表3。
5 g饮片中哈巴俄苷提取量（mg）=干浸膏中哈巴俄苷
质量分数（mg·g-1）×得膏率×5（g）
表3 哈巴俄苷提取量试验结果
No. 哈巴俄苷
/mg·g-1
5 g饮片中哈巴俄苷
提取量/mg
1 0.393 6 0.984 0
2 0.383 9 1.190 1
3 0.469 2 1.524 9
4 0.488 6 1.563 5
5 0.486 1 1.628 4
6 0.372 2 1.302 7
7 0.357 3 1.322 0
8 0.340 9 1.073 8
9 0.405 8 1.258 0
直观分析结果见表 3，各因素对含量的影响程
度依次为 C>A>B>D。
2.1.6 最佳提取工艺的确定 根据得膏率观察，最
优的工艺应该为 A2B3C3D2，根据哈巴俄苷的提取量
计算，最优的提取工艺应该为 A2B3C3D1。由于因素
B的影响不明显，本着节约成本的原则，取最小值
B1；此外，提取次数增加虽然有利于得膏率的增加，
但是对于哈巴俄苷的提取量影响不明显，这可能是
由于玄参所含的大量糖类成分被多次提取出来所
致，因此，本着节约成本和方便操作的原则，因素
D 选 D1水平。确定最终的提取工艺为 A2B1C3D1，
即玄参饮片，加入 8倍量水，浸泡 0.5 h，微沸煎煮
2 h，过滤后，再加入 6倍量的水，煎煮 1.5 h。
2.1.7 最佳提取工艺的验证 按照确定的最佳工
艺，重复提取验证 3次，测得平均收膏率为 68%，
5 g饮片中哈巴俄苷提取量为 1.639 8 mg。说明优选
工艺稳定，方法可靠。
2.2 玄参配方颗粒的成型
以优选的工艺提取玄参饮片，所得提取液过
滤，滤液减压浓缩至比重为 1.10～1.13（60 °C 热
测），过 80目筛。加入相当于清膏重量 10％的糊精，
在进风口温度 160 °C，出风口温度 85～90 °C下喷
雾干燥得到浸膏粉，按照 m 浸膏粉∶m 糊精=1 1∶ 的比
例混合均匀，用 75%乙醇制成软材，过 14 目筛制
粒，60 °C减压干燥 24 h之后，1号筛和 5号筛双
筛分取即得。
2.3 玄参配方颗粒的含量测定（编号 5847）
按照上述工艺进行中试，制备 10 批玄参配方
颗粒用于含量测定。
2.3.1 含量测定指标的选择 哈巴俄苷是玄参中
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的主要药效成分，此外，肉桂酸在玄参中含量也较
高，根据文献报道，肉桂酸具有抗菌、保肝等作
用[6]，因此对配方颗粒中的哈巴俄苷和肉桂酸进行
了含量测定。
2.3.2 提取溶剂的选择 精密称取玄参配方颗粒 5
份，每份 0.5 g，分别加入 50 mL的水、30％甲醇、
50％甲醇、70％甲醇、甲醇，超声提取 30 min。放
冷后补足失重，滤过，取续滤液以 0.45 µm微孔滤
膜过滤，滤液作为供试品溶液。分别吸取各供试液
20 mL，注入液相色谱仪，测定哈巴俄苷与肉桂酸的
峰面积积分值。结果见表 4。
表4 不同溶剂提取哈巴俄苷与肉桂酸峰面积积分值
溶剂 哈巴俄苷 肉桂酸
H2O 860.1 1 070.4
MeOH-H2O（30∶70） 884.8 1 093
MeOH-H2O（50∶50） 889.6 1 107.8
MeOH-H2O（70∶30） 888.2 1 105.4
MeOH 839.9 1 064.3
由上表可见 50％甲醇对哈巴俄苷和肉桂酸提
取均为最佳，所以采用 50％甲醇作为提取溶剂。
2.3.3 供试液的制备 分别精密称取玄参配方颗
粒（10批）各 0.5 g，置于 100 mL具塞三角瓶中，
加入 50％甲醇 50 mL，精密称定质量，超声提取 30
min，放冷，再称定质量，用 50％甲醇补足减失的
质量，摇匀，用 0.45 µm微孔滤膜滤过，取续滤液，
即得。
2.3.4 方法学考察 标准曲线的制备①哈巴俄苷
的标准曲线制备见 2.1.3 项下。②肉桂酸的标准曲
线制备：用 1/10 万电子分析天平精密称取肉桂酸
18.08 mg，加 50％甲醇 100 mL得 180.8 mg·L-1肉桂
酸对照品溶液，再以 50％甲醇稀释 25倍得到 7.232
mg٠L-1对照品溶液。分别进样 2，5，10，20，40，
60 mL测定各峰面积的积分值。以峰面积为横坐标，
所含的肉桂酸的量为纵坐标作图，回归方程为 Y＝
0.000 12X–0.000 64，r＝0.999 9。肉桂酸在 0.014
46～0.433 9 mg呈良好线性关系。
精密度试验 取同一份供试液重复进样 5次，
测定峰面积积分值，计算精密度，结果哈巴俄苷峰
面积 RSD 0.64% ，肉桂酸峰面积 RSD 0.70%。以
上结果表明仪器精密度良好。
重复性试验：精密称定玄参配方颗粒 5份，各
0.5 g，分别精密加入 50％甲醇 50 mL，称重，超声
提取 30 min，放冷，补足失重，过滤，取续滤液作
为供试液，测定。结果哈巴俄苷峰面积RSD 2.83% ，
肉桂酸峰面积 RSD 2.99%。以上结果表明，本方法
重复性良好。
加样回收率 精密称取 2份玄参配方颗粒，每
份 0.5 g，分别精密加入 50％甲醇 50 mL，称重，超
声提取 30 min，放冷，补足失量，摇匀，滤过，取
续滤液作为供试品溶液，进样 20 mL，测得哈巴俄
苷峰面积平均值与肉桂酸峰面积平均值，代入回归
方程得供试液中哈巴俄苷与肉桂酸含量。
1
3
(g L ) 50 (mL) 100%
(g) 10
-× ´ ´
´
供试液质量浓度
质量分数=
药材质量
精密称取该已知含量的玄参配方颗粒 6份，每
份 0.5 g，分别精密加入相应量的对照品，再分别精
密加入 50 mL的 50％甲醇，称重，超声提取 30 min，
放冷，补足失重，摇匀，滤过，取续滤液作为供试
品溶液，进样 20 mL，测得供试液中哈巴俄苷与肉
桂酸的浓度，并计算回收率，结果见表 5。
(mg) - (mg) 100
(mg)
´
测得量 样品中含量
加样回收率＝ ％
加入量
表 5 哈巴俄苷加样回收率
成分
药材中含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
哈巴俄苷 0.551 8 0.82 1.358 7 98.41
0.552 5 0.82 1.352 5 97.57
0.552 3 0.59 1.142 4 100.01
0.552 5 0.59 1.163 4 102.85
0.552 5 0.30 0.848 6 99.69
0.552 4 0.30 0.854 5 101.70
100.04 1.98
肉桂酸 0.303 4 0.56 0.853 4 98.21
0.303 4 0.56 0.853 4 98.21
0.303 4 0.30 0.593 5 96.67
0.303 9 0.29 0.587 7 97.86
0.303 9 0.15 0.445 9 97.94
0.303 9 0.15 0.449 9 100.71
98.27 1.35
稳定性考察 将供试液分别在 0，2，4，8，16，
24，48 h进样，结果证明至少在 48 h内供试液是稳
定的。
2.3.5 含量测定结果 水分测定方法参考 2005 年
版《中国药典》附录 IX H水分测定法下烘干法测
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定，见表 6。
表 6 玄参颗粒剂质量分数（n=2） %
批号 水分 哈巴俄苷 肉桂酸
0708001 2.471 0.112 0.062 4
0708002 2.476 0.112 0.062 0
0708003 2.494 0.108 0.059 6
0708004 2.458 0.110 0.060 6
0708005 2.449 0.106 0.058 6
0708006 2.504 0.113 0.062 8
0708007 2.497 0.116 0.063 2
0708008 2.518 0.112 0.061 8
0708009 2.530 0.105 0.058 8
0708010 2.467 0.113 0.062 3
3 讨论
本研究首次确立了玄参配方颗粒提取工艺中
的一系列参数，正交试验最终选定的工艺为
A2B1C3D1，在正交表中和这个工艺最接近的是
A2B2C3D1，测得得膏率为 67.34％，哈巴俄苷提取
量为 1.636 7 mg；最佳工艺验证试验中得膏率为
68.48%，哈巴俄苷含量为 1.639 8 mg，说明最佳提
取工艺稳定可靠。
本研究依据《中国药典》现行版一部玄参药材
的含量测定方法，对提取溶剂进行了优化，同时在
《中国药典》2005年版测定哈巴俄苷含量的基础上
补充测定了肉桂酸的含量；该方法简便，重复性好，
能有效控制玄参配方颗粒的质量，从而确保产品在
不具备饮片外形后临床用药的安全有效。
[参考文献]
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[2] 李医明，蒋山好，朱大元. 玄参属植物化学成分与药理活性研究
进展[J]. 中草药，1999，30（4）：307.
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出版社，1962：174.
[6] 国家医药管理局中草药情报中心站. 植物药有效成分手册[M].
北京：人民卫生出版社，1986：230.
Study on preparation and quantity determination of Scrophularia ningpoensis
dispensing granules
NIU Zhengrui，WANG Rufeng，JING Yu，SHANG Mingying，CAI Shaoqing*
（Division of Pharmacognosy，School of Pharmaceutical Sciences，Peking University，Beijing100083，China）
［Abstract］ Objective：To develop the preparation method and to determine the quantity of effective constituents of
Scrophularia ningpoensis dispensing granules. Method: Nine experiments were carried out through L9（34） orthogonal design. The
contents of harpagoside and cinnamic acid were determined by HPLC method. Result: The optimal extraction process was as
follows: the slices were soaked in water in the ratio of 1:8 for 0.5 h，then they were decocted for 2 h. For the second time，6 times
of water was added and sustained for 1.5 h. Harpagoside and cinnamic acid were linear within the ranges of 0.077 6-1.552 μg
（r=0.999 9） and 0.01446-0.4339 μg（r=0.999 9），respectively. The average recoveries were 100.4%（RSD 1.98%，n=6） and
98.27%（RSD1.35%，n=6），respectively. Ten batches of granules were determined. Conclusion: The extraction process is scientific
and the determination method is suitable for quality control of Scrophularia ningpoensis dispensing granules.
［Key words］ Scrophularia ningpoensis; dispensing granules; preparation process; quantity determination; HPLC
[责任编辑 鲍 雷]