全 文 ：京尼平苷酸对佐剂性关节炎大鼠抗炎作用
及滑膜细胞凋亡机制研究
金鑫，孙静，谢文利，万宗明，晋玉章，朱江
（中国人民武装警察部队医学院 药理学教研室，天津 ３００１６２）
［摘要］　目的：研究京尼平苷酸（ＧＡ）对佐剂性关节炎（ＡＡ）大鼠抗炎作用，探讨ＧＡ对ＡＡ大鼠滑膜细胞增殖影响的可
能凋亡机制。方法：Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为６组，分别为正常组，模型组，２００，１００，５０ｍｇ·ｋｇ－１ＧＡ组和０７５ｍｇ·ｋｇ－１甲氨蝶呤
（ＭＴＸ）组，右后足趾皮内注射弗氏完全佐剂后第１９天给药，治疗４周，测定足肿胀指标和血清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα），白介
素１β（ＩＬ１β）水平。培养ＡＡ大鼠滑膜细胞给予ＧＡ（１，２，４μｍｏｌ·Ｌ－１）和４μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＴＸ处理，ＭＴＴ法检测细胞增殖，Ｈｏ
ｅｃｈｓｔ／ＰＩ双染观察细胞凋亡，流式细胞仪检测凋亡细胞率，ＲＴＰＣＲ法检测Ｂｃｌ２和Ｂａｘ基因 ｍＲＮＡ表达水平。结果：２００，１００
ｍｇ·ｋｇ－１ＧＡ可以明显降低足肿胀度和关节炎指数（Ｐ＜００５或 Ｐ＜００１），肿胀抑制率分别为２５４％，２１３７％，并抑制血清
中ＴＮＦα，ＩＬ１β水平（Ｐ＜００５），ＴＮＦα抑制率为３４６１％，２８％，ＩＬ１β抑制率为２９０５％，２１６５％。ＧＡ（１～４μｍｏｌ·Ｌ－１）处
理ＡＡ大鼠滑膜细胞５ｄ，明显抑制细胞增殖。流式细胞仪检测显示１，２，４μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组凋亡率分别为１５８％，２４３％，
４０７％（Ｐ＜００１）。ＲＴＰＣＲ结果显示，不同浓度 ＧＡ明显抑制 Ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达，而促进 ＢａｘｍＲＮＡ表达（Ｐ＜００５或 Ｐ＜
００１）。结论：京尼平苷酸可抑制ＡＡ大鼠继发性炎症，降低血清ＴＮＦα，ＩＬ１β水平，体外可抑制ＡＡ大鼠滑膜细胞增殖及诱导
细胞凋亡，作用机制与其下调Ｂｃｌ２和上调Ｂａｘ基因ｍＲＮＡ表达有关。
［关键词］　京尼平苷酸；佐剂性关节炎；滑膜细胞；凋亡；Ｂｃｌ２；Ｂａｘ
［收稿日期］　２００９０５１２
［基金项目］　武警医学院重点项目（ＷＫＨ２００９Ｚ０５）；武警医学院青
年基金项目（ＷＹＱ２００７６）
［通信作者］　朱江，Ｔｅｌ：（０２２）６０５７８０３３，Ｅｍａｉｌ：ｔｕｏｆｕ６６＠ｓｉｎａ．
ｃｏｍ
［作者简介］　金鑫，讲师，主要从事抗类风湿药物药理学研究，Ｔｅｌ：
（０２２）６０５７８２５６，Ｅｍａｉｌ：ｊｉｎｘｉｎ１２２７＠１２６ｃｏｍ
　　类风湿性关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）以滑
膜炎为特征，表现为滑膜细胞类肿瘤样增生，可能与
滑膜细胞凋亡不足有关，很多治疗 ＲＡ药物作用机
制与促进滑膜细胞凋亡有关。研究发现中药栀子具
有抗炎镇痛作用，栀子浸膏及其单体京尼平苷抑制
ＡＡ大鼠足肿胀并下调血清中致炎因子 ＩＬ１β和
ＴＮＦα水平，提示该药物可能对 ＲＡ有治疗作
用［１２］。京尼平苷酸为京尼平苷衍生物，本文首次通
过建立大鼠佐剂性关节炎模型进行京尼平苷酸体内
抗炎实验和体外培养致炎大鼠滑膜细胞，观察药物
对滑膜细胞增殖及凋亡的影响，探讨该药物抗炎活
性及机制。
１　材料
１１　动物　健康雄性 Ｗｉｓｔａｒ大鼠，体重１８０～２００
ｇ，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物
合格证号 ＳＣＸＫ（京）２００７０００１。
１２　药物　京尼平苷酸（ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅａｃｉｄ，ＧＡ），含
量（ＨＰＬＣ）≥９８％或９０％（用于大鼠体内实验），成
都锦泰和医药化学技术有限公司产品；甲氨喋呤
（ＭＴＸ）为江苏恒瑞医药股份有限公司产品（批号
０７１０２４１２）。
１３　试剂　卡介苗（批号 ２００８０１２９），购自中国生
物制品研究所；弗氏不完全佐剂，Ⅰ型胶原酶，ＭＴＴ，
ＰＩ，Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２，ＥＢ均为Ｓｉｇｍａ公司产品；ＩＬ１β和
ＴＮＦαＥＬＩＳＡ试剂盒购于武汉博士德公司（批号
ＥＫ０３９３，ＥＫ０５２６）；ＴＲＩｚｏｌ和琼脂糖由 Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公
司生产；ＲＴＰＣＲ试剂盒由大连宝生物有限公司生
产（批号 ＢＫ３４０１）；Ｂｃｌ２，Ｂａｘ引物由上海生工生物
技术有限公司合成。
１４　仪器　日本 ＮｉｋｏｎＴＳ１００型倒置相差显微镜，
美国ＴｈｅｒｍｏＦｏｒｍａ３１１０型 ＣＯ２培养箱，奥地利 ＴＥ
ＣＡＮｓｕｎｒｉｓｅ型酶标仪，美国 ＣｏｕｌｔｅｒＥＰＩＣＳＸＬ型流
式细胞仪，日本ＡＳＴＥＣＰＣ８１８Ｓ型ＰＣＲ仪。
２　方法
２１　大鼠佐剂性关节炎（ａｄｊｕｖａｎｔｉｎｄｕｃｅｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，
·２８０３·
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ＡＡ）模型建立［３］　用弗氏完全佐剂（卡介苗８０℃，
１ｈ灭活，与弗氏不完全佐剂充分乳化，含卡介苗１０
ｇ·Ｌ－１）于大鼠右后足跖皮内注射０１ｍＬ致炎，正
常组注射等量生理盐水。
２２　京尼平苷酸对 ＡＡ大鼠足肿胀的影响　大鼠
４８只随机分为６组，分别为正常组，模型组，高、中、
低给药组和阳性药组。致炎后第１９天给药，高、中、
低给药组每天灌胃给予京尼平苷酸２００，１００，５０ｍｇ
·ｋｇ－１，阳性药组肌注甲氨蝶呤０７５ｍｇ·ｋｇ－１每周
１次，共给药４周，模型和正常组每天给生理盐水。
分别于致炎前，末次给药后１ｈ用自制容积测量仪
测量左后足容积，计算给药后足肿胀度和肿胀抑制
率，并根据文献计算关节炎指数［３］。
肿胀度＝给药后足容积－致炎前足容积
肿胀抑制率 ＝（对照组平均肿胀度 －给药组平均肿胀
度）／对照组平均肿胀度×１００％
２３　京尼平苷酸对 ＡＡ大鼠血清 ＴＮＦα，ＩＬ１β的
影响　给药后各组大鼠股动脉取血，用 ＥＬＩＳＡ试剂
盒测定血清ＴＮＦα，ＩＬ１β水平。
２４　滑膜细胞的分离与培养　将模型组大鼠放血
处死，无菌条件下分离关节囊滑膜层和纤维层，取出
滑膜组织，参照文献方法经改进进行滑膜细胞培
养［４］。将滑膜组织在 ＤＨａｎｋｓ液中漂洗３次，去除
脂肪组织，剪成１ｍｍ３的小块，用０２％的Ⅰ型胶原
酶消化４ｈ，离心去上清后加入０２５％胰酶消化１５
ｍｉｎ，２００目滤网过滤，滤液离心后沉淀用含 １０％
ＦＢＳ的 ＲＰＭＩ１６４０培养基重悬后在 ３７℃，含 ５％
ＣＯ２培养箱中培养，取２～３代细胞用于实验。
２５　京尼平苷酸对大鼠滑膜细胞增殖的影响　将
滑膜细胞制成１×１０５个／Ｌ细胞悬液，接种于９６孔
培养板中，每孔２００μＬ，培养２４ｈ后各组分别加入
不同浓度的ＧＡ（１～４μｍｏｌ·Ｌ－１）和ＭＴＸ４μｍｏｌ·
Ｌ－１，对照组加入含０１％ＤＭＳＯ的等量培养基。连
续５ｄ，每天测定细胞增殖情况，每孔加 ＭＴＴ（５ｇ·
Ｌ－１）２０μＬ，３７℃孵育４ｈ，弃上清，将板晾干，每孔
加入ＤＭＳＯ１５０μＬ，轻度震荡１５ｍｉｎ，用酶标仪测定
４９０ｎｍ处各孔吸收度（Ａ），按公式计算细胞生长抑
制率。
抑制率＝（１－Ａ实验／Ａ对照）×１００％
２６　荧光显微镜观察凋亡细胞　取滑膜细胞，分组
及给药方法同２５，培养４８ｈ后，胰酶进行消化，收
集细胞，离心后去上清，加入２００μＬＰＢＳ于小离心
管中，充分混匀后加入Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２母液和ＰＩ母液
各２μＬ（母液ＰＩ５００ｍｇ·Ｌ－１，母液Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２２
ｍｍｏｌ·Ｌ－１），３７℃染色 １０ｍｉｎ。然后离心除去染
液，制成 ＰＢＳ混悬液滴片，荧光显微镜下用双色滤
光片观察并照相。
２７　流式细胞仪测定细胞凋亡率　收集药物处理
后细胞，离心弃上清，ＰＢＳ洗１次，每管加７０％乙醇
１ｍＬ固定，用吸管将细胞分散成单个，－２０℃过
夜。离心弃固定液，加５０ｍｇ·Ｌ－１ＲＮａｓｅ３７℃，１
ｈ，加５０ｍｇ·Ｌ－１ＰＩ染液，４℃避光１ｈ，４００目的筛
网过滤１次，在流式细胞仪上测定细胞凋亡率。
２８　ＲＴＰＣＲ法测定凋亡相关基因（Ｂｃｌ２，Ｂａｘ）
ｍＲＮＡ表达　将药物处理后滑膜细胞用 Ｔｒｉｚｏｌ提取
总ＲＮＡ，按照ＲＴＰＣＲ试剂盒说明逆转录 ｍＲＮＡ为
ｃＤＮＡ然后进行 ＰＣＲ。引物：βａｃｔｉｎ（ｓｅｎｓｅ：５′
ＴＧＴＴＴＧＡＧＡＣＣＴＴＣＡＡＣＡＣＣＣ３′，ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５′ＡＧ
ＣＡＣＴＧＴＧＴＴＧＧＣＧＴＡＣＡＧ３′，产物长度 ５４０ｂｐ）；
Ｂｃｌ２（ｓｅｎｓｅ：５′ＧＧＴＧＣＣＡＣＣＴＧＴＧＧＴＣＣＡＣＣＴ３′，
ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５′ＣＴＴＣＡＣＴＴＧＴＧＧＣＣＣＡＧＡＴＡＧＧ３′，产
物 长 度 ４５８ ｂｐ）；Ｂａｘ（ｓｅｎｓｅ：５′ＣＧＴＣＣＡＣ
ＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＧＣＧ３′， ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５′ＡＧＣＡＣＴＣ
ＣＣＧＣＣＡＣＡＡＡＧＡＴＧ３′，产物长度为３８２ｂｐ）。ＰＣＲ
反应条件：βａｃｔｉｎ，９４℃ ３０ｓ，５６℃ １ｍｉｎ，７２℃ １
ｍｉｎ，２８个循环；Ｂｃｌ２，９４℃ １ｍｉｎ，５７℃ ３０ｓ，７２℃
１ｍｉｎ，２８个循环；Ｂａｘ，９４℃１ｍｉｎ，５８℃３０ｓ，７２℃
１ｍｉｎ，２８个循环。ＰＣＲ产物用２％琼脂糖凝胶电泳
检测，在凝胶成像系统上扫描，测定目标基因和 β
ａｃｔｉｎ条带灰度值，用两者的比值代表目标基因相对
表达含量。
２９　统计学处理　数据均经齐性检验和正态分布
检验，以 珋ｘ±ｓ表示，多组均数间比较采用单因素方
差分析，数据使用 ＳＰＳＳ１３０软件分析，以 Ｐ＜００５
为差异有显著性。
３　结果
３１　对ＡＡ大鼠继发性炎症的影响　模型组大鼠
左后足肿胀度和关节炎指数明显高于正常组（Ｐ＜
００１），说明模型复制成功。经２００，１００ｍｇ·ｋｇ－１
ＧＡ灌胃给药或者０７５ｍｇ·ｋｇ－１ＭＴＸ肌注治疗４
周后，足肿胀度和关节炎指数明显降低，与模型组相
比有显著性差异（Ｐ＜００５或 Ｐ＜００１），ＭＴＸ和不
同浓度 ＧＡ对 ＡＡ大鼠足肿胀具有不同程度抑制作
用，肿胀抑制率随ＧＡ剂量增大而提高（表１）。
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第３４卷第２３期
２００９年１２月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
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　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００９
表１　京尼平苷酸对ＡＡ大鼠足肿胀的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
肿胀度
／ｍＬ
肿胀抑制率
／％
关节炎
指数
正常 － ００８±００１ － ０
模型 － ０３１±００７１） － ７１３±０８３１）
ＧＡ ２００ ０２３±００６２） ２５４ ５２５±０７１３）
１００ ０２４±００５ ２１３７ ６１３±０８４２）
５０ ０２６±００９ １６１３ ６７５±１０４
ＭＴＸ ０７５ ０１８±００６３） ４１９４ ５１３±０６４３）
　　注：与正常组比较１）Ｐ＜００１；与模型组比较２）Ｐ＜００５，３）Ｐ＜
００１（表２同）。
３２　对 ＡＡ大鼠血清 ＴＮＦα，ＩＬ１β的影响　与正
常组比较，致炎后模型组大鼠血清 ＴＮＦα和 ＩＬ１β
水平明显升高（Ｐ＜００１）；与模型组比较，ＭＴＸ和高
剂量ＧＡ组大鼠ＴＮＦα和ＩＬ１β水平显著降低（Ｐ＜
００５），中剂量 ＧＡ组大鼠 ＴＮＦα水平明显降低
（Ｐ＜００５），ＩＬ１β水平虽有下降，但无显著性差异；
低剂量ＧＡ组作用不明显（表２）。
表２　京尼平苷酸对ＡＡ大鼠血清ＴＮＦα，
ＩＬ１β的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
ＴＮＦα ＩＬ１β
ｎｇ·Ｌ－１ 抑制率／％ ／ｎｇ·Ｌ－１ 抑制率／％
正常 － １５３８±５９９ － ２７９４±１１３４ －
模型 － ４２７±１４１９１） － ６１４７±１４６７１） －
ＧＡ ２００ ２７９２±９９１２） ３４６１ ４３６１±１３６２２） ２９０５
１００ ３０７４±６９３２） ２８ ４８１６±９９１ ２１６５
５０ ３６５３±１６２３ １４４５ ５６７８±１７３９ ７６３
ＭＴＸ ０７５２４６±１０８７２） ４２１２ ４５４７±７５７２） ２６０３
３３　ＡＡ大鼠滑膜细胞增殖情况　不同浓度ＧＡ作
用５ｄ，ＡＡ大鼠滑膜细胞增殖受到不同程度抑制，
且呈现剂量依赖性，４μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ和 ４μｍｏｌ·
Ｌ－１ＭＴＸ对滑膜细胞增殖的抑制作用随时间增加作
用增强，抑制率明显增加（图１）。
图１　ＧＡ对ＡＡ大鼠滑膜细胞作用不同时间
细胞增殖的影响
３４　形态学检测滑膜细胞凋亡　ＧＡ引起细胞明
显形态学上的改变，出现细胞全面皱缩，细胞膜皱缩
外突，随着药物浓度的加大，镜下凋亡细胞比例逐渐
增加，核染色质浓缩，核固缩和碎裂，细胞碎裂，形成
凋亡小体，并且坏死细胞数量增多（图２）。
Ａ空白对照组；Ｂ４μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组
图２　Ｈｏｅｃｈｓｔ／ＰＩ双染ＡＡ大鼠滑膜细胞
形态学改变（×４００）
３５　对滑膜细胞凋亡率的影响　用流式细胞仪检
测经不同浓度的ＧＡ（１０，２０，４０μｍｏｌ·Ｌ－１）作用
后的滑膜细胞“亚 Ｇ１细胞群”的含量，既凋亡细胞
群含量，结果显示凋亡率分别为 １５８％，２４３％，
４０７％，与对照组（凋亡率５６６％）相比差异具有显
著性（Ｐ＜００１），由此可见ＧＡ诱导ＡＡ大鼠滑膜细
胞凋亡呈剂量依赖性增强。
３６　对滑膜细胞凋亡相关基因 Ｂｃｌ２，ＢａｘｍＲＮＡ
表达的影响　ＲＴＰＣＲ实验结果显示：用１～４μｍｏｌ
·Ｌ－１ＧＡ处理滑膜细胞后，凋亡相关基因 Ｂｃｌ２
ｍＲＮＡ表达随ＧＡ浓度的增加而降低，ＢａｘｍＲＮＡ表
达随ＧＡ浓度的增加而升高。４μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＴＸ组
Ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达最弱，ＢａｘｍＲＮＡ表达最强（图３，
４）。与对照组相比，不同浓度 ＧＡ组和４０μｍｏｌ·
Ｌ－１ＭＴＸ组滑膜细胞 Ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达明显降低而
ＢａｘｍＲＮＡ表达明显增加（１，２０μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组
Ｐ＜００５，４０μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ和４０μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＴＸ
组Ｐ＜００１，表３）。
ＡＭａｒｋ；Ｂ对照组；Ｃ１０μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组；
Ｄ２０μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组；Ｅ４０μｍｏｌ·Ｌ－１
ＧＡ组；Ｆ４０μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＴＸ组
图３　ＧＡ对ＡＡ大鼠滑膜细胞Ｂａｘ基因ｍＲＮＡ表达的影响
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　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００９
Ａ～ＥＢｃｌ２ｍＲＮＡ表达；ＦＭａｒｋ；Ｇ～Ｋβａｃｔｉｎ
ｍＲＮＡ表达；Ａ，Ｇ４０μｍｏｌ·Ｌ－１ＭＴＸ组；Ｂ，Ｈ４０
μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组；Ｃ，Ｉ２０μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组；Ｄ，
Ｊ１０μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组；Ｅ，Ｋ对照组。
图４　ＧＡ对ＡＡ大鼠滑膜细胞Ｂｃｌ２基因
ｍＲＮＡ表达的影响
表３　京尼平苷酸对ＡＡ大鼠滑膜细胞Ｂｃｌ２，
ＢａｘｍＲＮＡ表达影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
分组
浓度
／μｍｏｌ·Ｌ－１
Ｂｃｌ２
／βａｃｔｉｎ
Ｂａｘ
／βａｃｔｉｎ
对照 － ０５９４±０１７８ ０２８３±００３６
ＧＡ １ ０４７５±００５２１） ０４２７±００５１１）
２ ０３８２±００６４１） ０４３９±００４８１）
４ ０２１４±００１６２） ０６１３±００５７２）
ＭＴＸ ４ ０１８５±００１３２） ０７３６±００５１２）
　　注：与对照组比较１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１。
４　讨论
栀子有泻火除烦，清热利尿，凉血解毒功效，用
于热病心烦，黄疸尿赤，血淋涩痛，血热吐衄，目赤肿
痛，火毒疮疡，外治扭挫伤痛等。京尼平苷为栀子提
取物，据报道具有抗ＲＡ作用；京尼平苷酸是京尼平
苷衍生物，可由京尼平苷在体内酯解产生，由于两者
化学结构相似，推测具有相似的抗炎作用。
实验结果表明２００，１００ｍｇ·ｋｇ－１ＧＡ于 ＡＡ大
鼠致炎后１９ｄ给药，治疗４周后，可以明显降低足
肿胀度和关节炎指数，说明 ＧＡ可以缓解佐剂诱导
的继发性炎症。进一步测定大鼠血清中 ＴＮＦα，ＩＬ
１β水平，结果显示，ＧＡ显著降低血清中 ＴＮＦα，ＩＬ
１β水平；ＴＮＦα和 ＩＬ１β是 ＲＡ发病机制中居中心
地位的促炎症细胞因子，ＴＮＦα，ＩＬ１β水平的升高
可以导致滑膜炎症，软骨破坏，造成关节损伤，是构
成ＲＡ滑膜病变的病理基础［５］；实验结果说明 ＧＡ
通过减少致炎因子的产生，可以阻止或缓解关节炎
症的发生和发展。
文献报道［６］，引起 ＲＡ关节滑膜组织类肿瘤样
增殖可能由于滑膜细胞凋亡机制障碍，导致滑膜细
胞增殖和凋亡之间的平衡失调而引起的。ＭＴＴ结
果说明 ＧＡ在体外能够抑制 ＡＡ大鼠滑膜细胞类肿
瘤样增殖，抑制 率 呈 剂 量 依 赖 性 增 强。Ｈｏ
ｅｃｈｓｔ３３３４２／ＰＩ双染和流式细胞仪检测结果显示不
同浓度ＧＡ可以诱导滑膜细胞凋亡，染色质凝集边
移，核碎裂，形成凋亡小体；凋亡率明显增加，４０
μｍｏｌ·Ｌ－１ＧＡ组大约是空白对照组的７倍。文献
报道Ｂｃｌ２基因家族蛋白之间的比例影响着细胞对
各种凋亡刺激分子的敏感性，决定 ｃａｓｐａｓｅ活化与
否，从而决定细胞是否进行凋亡［７８］，其中 Ｂｃｌ２为
抑凋亡基因，Ｂａｘ为促凋亡基因。ＲＴＰＣＲ显示 ＧＡ
可以下调Ｂｃｌ２ｍＲＮＡ的表达，同时上调了ＢａｘｍＲ
ＮＡ的表达，说明ＧＡ通过调控凋亡基因表达水平促
进滑膜细胞凋亡。实验结果与多种治疗ＲＡ的药物
通过诱导滑膜细胞凋亡而起到抑制关节免疫炎症的
文献一致［９１１］。
总之，本实验发现 ＧＡ在体内可以抑制 ＡＡ
大鼠继发性炎症，体外可以抑制 ＡＡ大鼠滑膜细
胞增殖，其作用机制与抗滑膜细胞凋亡有关，调
控基因 Ｂｃｌ２，Ｂａｘ表达可能是 ＧＡ抗内风湿性
关节炎的作用靶点之一。京尼平苷在体内可能
通过转化为 ＧＡ产生抗炎活性，于京尼平苷相比，
ＧＡ可能具有更直接的抗炎活性。以上实验结果
为 ＧＡ进一步用于治疗 ＲＡ的实验研究提供了理
论和实验基础。
［参考文献］
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药，２０００，３１（３）：１９８
［２］　朱江，谢文利，晋玉章，等栀子对类风湿性关节炎大鼠血
清ＩＬ１β和ＴＮＦα的影响［Ｊ］中成药，２００５，２７（７）：８０１
［３］　徐叔云，卞如濂，陈修药理实验方法学［Ｍ］３版北京：
人民卫生出版社，２００１：９２０
［４］　王斌，陈敏珠，徐叔云大鼠滑膜细胞的分离与培养［Ｊ］
中国药理学通报，１９９４，１０（１）：７３
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ｉｍｍｕｎ，２００１，３：１８８
［６］　ＦｉｒｅｓｔｅｉｎＧＳ，ＹｅｏＭ，ＺｖａｉｆｌｅｒＮＪＡｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒ
ｔｈｒｉｔｉｓｓｙｎｏｖｉｕｍ［Ｊ］ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ，１９９５，９６（３）：１６３１
［７］　ＰａｒｋＣ，ＭｏｏｎＤＯ，ＣｈｏｉＩＷ，ｅｔａｌＣｕｒｃｕｍｉｎｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏ
ｓｉｓａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｓｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥ（２）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｓｙｎｏｖｉａｌｆｉｂｒｏ
ｂｌａｓｔｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄ，
２００７，２０（３）：３６５
［８］　ＫｉｍＷＵ，ＫａｎｇＳＳ，ＹｏｏＳＡ，ｅｔａｌＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｅｎ
ｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ１６５ｗｉｔｈｎｅｕｒｏｐｉｌｉｎ１ｐｒｏｔｅｃｔｓｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ
ｓｙｎｏｖｉｏｃｙｔｅｓｆｒｏｍａｐｏｐｔｏｔｉｃｄｅａｔｈｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＢｃｌ２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ａｎｄＢａｘｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ［Ｊ］ＪＩｍｍｕｎｏｌ，２００６，１７７（８）：５７２７
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第３４卷第２３期
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Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　２３
　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２００９
［９］　ＨｏｕｐｌＴ，ＹａｈｙａｗｉＭ，ＬüｂｋｅＣ，ｅｔａｌＧｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇ
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ｄｒｕｇｓ［Ｊ］ＪＢｉｏｍｏｌＳｃｒｅｅｎ，２００７，１２（３）：３２８
［１０］　ＫｕｓｕｎｏｋｉＮ，ＹａｍａｚａｋｉＲ，ＫｉｔａｓａｔｏＨ，ｅｔａｌＴｒｉｐｔｏｌｉｄｅ，ａｎａｃ
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ｃｏｌ，２００４，１７（４）：２
［１１］　ＷｅｓｓｅｌｓＪＡ，ＨｕｉｚｉｎｇａＴＷ，ＧｕｃｈｅｌａａｒＨＪＲｅｃｅｎｔｉｎｓｉｇｈｔｓｉｎ
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（３）：２４９
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［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｇｅｎｉｐｏｓｉｄｅａｃｉｄ；ａｄｊｕｖａｎｔｉｎｄｕｃｅｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ；ｓｙｎｏｖｉｏｃｙｔｅ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；Ｂｃｌ２；Ｂａｘ
［责任编辑　古云侠］
·６８０３·
第３４卷第２３期
２００９年１２月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
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